CN116867792A - 四环氧氮杂䓬化合物及其用途 - Google Patents

四环氧氮杂䓬化合物及其用途 Download PDF

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Abstract

本文提供了可用于治疗癌症的四环氧氮杂

Description

四环氧氮杂䓬化合物及其用途
相关申请的交叉引用
本申请要求于2022年1月27日提交的国际专利申请号PCT/CN2022/074435以及于2021年2月9日提交的国际专利申请号PCT/CN2021/076369的优先权，这两件国际专利申请全文各自出于所有目的以引用方式并入本文。
技术领域
本文提供了可用于治疗包含KRas突变的癌症的四环化合物、此类化合物的组合物以及治疗包含KRas突变的癌症的方法。
背景技术
Ras是一种小GTP结合蛋白，作为中枢生长信号传导通路的核苷酸依赖性开关。作为对细胞外信号的响应，Ras在鸟嘌呤核苷酸交换因子(GEF)，特别是SOS1蛋白的催化下，从GDP结合(RasGDP)状态转变为GTP结合(RasGTP)状态。活性RasGTP通过与效应子(包括Raf、PI3K和Ral鸟嘌呤核苷酸解离刺激物)的直接相互作用介导其多种生长刺激功能。Ras的固有GTP酶活性随后将GTP水解为GDP，从而终止Ras信号传导。Ras GTP酶活性可以通过其与GTP酶活化蛋白(GAP)(包括神经纤维蛋白1肿瘤抑制剂)的相互作用而进一步得到促进。
突变Ras的GTP酶活性降低，这延长其活化状态，从而促进Ras依赖性信号传导以及癌细胞的存活或生长。Ras中的突变影响其与GAP相互作用或将GTP转换回GDP的能力，将导致该蛋白的活化时间延长，并且进而导致告知该细胞继续生长和分裂的信号延长。因为这些信号导致细胞生长和分裂，所以过度活化的RAS信号传导可能最终导致癌症。RAS的三种主要基因亚型(HRas、NRas或KRas)中任一者中的突变均是人肿瘤发生中的常见事件。在三种Ras亚型(K、N和H)中，KRas最常发生突变。
最常见的KRas突变出现在P环的残基G12和G13以及残基Q61。G12D是KRas基因的常发生突变(甘氨酸-12突变为天冬氨酸)。癌症中Ras突变与不良预后相关。小鼠中致癌性Ras失活使得肿瘤缩小。因此，Ras被广泛认为是极为重要的肿瘤靶标。
因此，迫切需要针对G12D突变的KRas所介导的癌症的疗法。
发明内容
本文提供了针对上述问题和本领域的其他问题的解决方案。
在第一方面，本文提供了一种如本文所述的式(I)化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐。
在另一方面，本文提供了一种如本文所述的式(Ia)、(Ib)、(Ic)、(Id)、(Ie)、(Ig)或(Ih)化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐。
在另一方面，本文提供了一种如本文所述的式(IIa)、(IIb)、(IIc)、(IId)、(IIe)、(IIg)或(IIh)化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐。
在另一方面，本文提供了一种如本文所述的式(IIIa)、(IIIb)、(IIIc)、(IIId)、(IIIe)、(IIIg)或(IIIh)化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐。
在另一方面，本文提供了一种如表1中所示的化合物或其药用盐。
在另一方面，本文提供了一种如表2中所示的化合物或其药用盐。
在另一方面，本文提供了一种药物组合物，该药物组合物包含如本文所述的化合物、其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐。
在另一方面，本文提供了一种治疗包含KRas突变的癌症的方法，该方法包括向患有此类癌症的患者施用本文所述的化合物、其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐。
在另一方面，本文提供了一种用于调节KRas突变蛋白活性的方法，该方法包括使该突变蛋白与如本文所述的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐反应。
在另一方面，本文提供了一种用于抑制细胞群增殖的方法，该方法包括使该细胞群与如本文所述的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐接触。
在另一方面，本文提供了一种用于抑制肿瘤转移的方法，该方法包括向有此需要的个体施用治疗有效量的如本文所述的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐、或如本文所述的药物组合物至有此需要的受试者。
在另一方面，本文提供了用于制备经标记的KRas G12D突变蛋白的方法，该方法包括使KRas G12D突变蛋白与经标记的如本文所述的化合物、或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐反应，以产生经标记的KRas G12D突变蛋白。
在另一方面，本文提供了一种用于合成如本文所述的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐的方法。
定义
本文公开了如本文所述的四环氧氮杂化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐及其药物组合物，它们在某些实施例中为突变KRas的抑制剂或调节剂。在某些情况下，此类化合物和组合物为如本文所提供的突变G12D KRas的抑制剂或调节剂。本文所述的化合物和组合物可用于治疗由突变KRas介导的疾病和疾患。
尽管本文的公开内容提供了列举的实施例，但是应理解的是，它们并不旨在将本文所述的化合物和方法限制于那些实施例。相反，本公开旨在涵盖可包括在如由权利要求书限定的本公开的范围内的所有替代、修改和等同形式。
除非另外定义，否则本文中使用的所有技术和科学术语所具有的含义与本领域普通技术人员通常理解的含义相同。本文提及的所有出版物、专利申请、专利和其他参考文献通过引用以其全文合并于本文。除非另有说明，否则本申请中使用的命名法是基于IUPAC系统命名法。
提供以下定义旨在有利于理解本文频繁使用的某些术语，并无限制本公开范围之意。本文引用的所有参考文献通过引用整体并入本文。
术语“卤素(halogen)”和“卤代(halo)”可互换使用，并且是指F、Cl、Br或I。另外，诸如“卤代烷基”的术语意指包括单卤代烷基、多卤代烷基和全卤代烷基。
术语“烷基”是指饱和的直链或支链单价烃基。在一个实例中，所述烷基是一至十八个碳原子(C1-18)。在其他实例中，所述烷基是C1-12、C1-10、C1-8、C1-6、C1-5、C1-4或C1-3。烷基基团的实例包括甲基(Me,–CH3)、乙基(Et,–CH2CH3)、1-丙基(n-Pr，正丙基，–CH2CH2CH3)、2-丙基(i-Pr，异丙基，–CH(CH3)2)、1-丁基(n-Bu，正丁基，–CH2CH2CH2CH3)、2-甲基-1-丙基(i-Bu，异丁基，–CH2CH(CH3)2)、2-丁基(s-Bu，仲丁基，–CH(CH3)CH2CH3)、2-甲基-2-丙基(t-Bu，叔丁基，–C(CH3)3)、1-戊基(正戊基，–CH2CH2CH2CH2CH3)、2-戊基(–CH(CH3)CH2CH2CH3)、3-戊基(–CH(CH2CH3)2)、2-甲基-2-丁基(-C(CH3)2CH2CH3)、3-甲基-2-丁基(–CH(CH3)CH(CH3)2)、3-甲基-1-丁基(–CH2CH2CH(CH3)2)、2-甲基-1-丁基(–CH2CH(CH3)CH2CH3)、1-己基(–CH2CH2CH2CH2CH2CH3)、2-己基(–CH(CH3)CH2CH2CH2CH3)、3-己基(–CH(CH2CH3)(CH2CH2CH3))、2-甲基-2-戊基(–C(CH3)2CH2CH2CH3)、3-甲基-2-戊基(–CH(CH3)CH(CH3)CH2CH3)、4-甲基-2-戊基(–CH(CH3)CH2CH(CH3)2)、3-甲基-3-戊基(–C(CH3)(CH2CH3)2)、2-甲基-3-戊基(–CH(CH2CH3)CH(CH3)2)、2,3-二甲基-2-丁基(–C(CH3)2CH(CH3)2)、3,3-二甲基-2-丁基(–CH(CH3)C(CH3)3、1-庚基和1-辛基。
术语“氧代”是指＝O。
术语“烷氧基”是指–O–烷基。
术语“氰基”或“腈”是指–C≡N或–CN。
术语“卤代烷氧基”是指–O–卤代烷基。
术语“羟”和“羟基”是指-OH。
术语“次烷基”是指具有式＝CR'R”的直链或支链单价烃基，其中R'和R'可以相同或不同。在一个实例中，次烷基为1至6个碳原子(C1-6)。在另一实例中，次烷基为C1-3、C1-2或C1。示例性次烷基包括但不限于次甲基(＝CH2)、次乙基(＝CHCH3)和次丙基(＝CH-CH2-CH3)。
术语“烯基”是指具有至少一个碳-碳双键的直链或支链单价烃基，并且包括具有“顺式”和“反式”取向，或替代性地“E”和“Z”取向的基团。在一个实例中，所述烯基是二至十八个碳原子(C2-18)。在其他实例中，所述烯基是C2-12、C2-10、C2-8、C2-6或C2-3。实例包括但不限于乙烯基(ethenyl/vinyl,–CH＝CH2)、丙-1-烯基(–CH＝CHCH3)、丙-2-烯基(–CH2CH＝CH2)、2-甲基丙-1-烯基、丁-1-烯基、丁-2-烯基、丁-3-烯基、丁间-1,3-二烯基、2-甲基丁间-1,3-二烯、己-1-烯基、己-2-烯基、己-3-烯基、己-4-烯基和己-1,3-二烯基。
术语“炔基”是指具有至少一个碳-碳三键的直链或支链单价烃基。在一个实例中，所述炔基是二至十八个碳原子(C2-18)。在其他实例中，所述炔基是C2-12、C2-10、C2-8、C2-6或C2-3。实例包括但不限于乙炔基(–C≡CH)、丙-1-炔基(–C≡CCH3)、丙-2-炔基(炔丙基，–CH2C≡CH)、丁-1-炔基、丁-2-炔基和丁-3-炔基。
术语“亚烷基”是指具有两个单价基中心的饱和、支化或直链烃基，其通过从母体烷烃的相同或两个不同碳原子上去除两个氢原子而得到。在一个实例中，所述二价亚烷基基团是一至十八个碳原子(C1-18)。在其他实例中，所述二价亚烷基基团是C1-12、C1-10、C1-8、C1-6、C1-5、C1-4或C1-3。示例性亚烷基包括亚甲基(–CH2–)、1,1-乙基(–CH(CH3)–)、1,2-乙基(–CH2CH2–)、1,1-丙基(–CH(CH2CH3)–)、2,2-丙基(–C(CH3)2–)、1,2-丙基(–CH(CH3)CH2–)、1,3-丙基(–CH2CH2CH2–)、1,1-二甲基乙基-1,2-基(–C(CH3)2CH2–)、1,4-丁基(–CH2CH2CH2CH2–)等。
术语“环烷基”是指饱和烃环基。环烷基涵盖单环、双环、三环、螺环和桥环、饱和环体系。在一个实例中，所述环烷基基团为3至12个碳原子(C3-12)。在其他实例中，环烷基为C3-4、C3-5、C3-7、C3-8、C3-10或C5-10。在其他实例中，以单环形式的环烷基基团为C3-4、C3-8、C3-6或C5-6。在另一个实例中，作为双环的环烷基基团是C7-C12。在另一实施中，以螺环体系形式的所述环烷基基团是C5-12。单环环烷基的实例包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基、环壬基、环癸基、环十一烷基和环十二烷基。具有7至12个环原子的双环环烷基的示例性排列包括但不限于[4,4]、[4,5]、[5,5]、[5,6]或[6,6]环体系。示例性桥接双环环烷基包括但不限于双环[2.2.1]庚烷、双环[2.2.2]辛烷和双环[3.2.2]壬烷。螺环烷基的实例包括螺[2.2]戊烷、螺[2.3]己烷、螺[2.4]庚烷、螺[2.5]辛烷和螺[4.5]癸烷。
术语“杂环基团”、“杂环的”、“杂环”、“杂环基”或“杂环基”可互换使用，是指任何单环、双环、三环、螺环或桥环、饱和、部分饱和或不饱和、非芳环体系，其具有3至20个环原子，其中环原子是碳，并且在环或环体系中的至少一个原子是选自氮、硫或氧的杂原子。如果环状体系的任一环原子是杂原子，则该体系是杂环，无论所述环状体系与分子其余部分的连接点如何。在一个实例中，杂环基包括3-10个环原子(“成员”)，并且包括单环、双环、三环、螺环和桥环体系，其中所述环原子是碳，其中所述环或环体系中的至少一个原子是选自氮、硫或氧的杂原子。在其他实例中，杂环基包括4-10个或5-10个环原子。在一实例中，杂环基包括1至4个杂原子。在一实例中，杂环基包括1至3个杂原子。在另一实例中，杂环基包括3元至7元单环，其具有1-2个、1-3个或1-4个选自氮、硫或氧的杂原子。在另一实例中，杂环基包括4元至6元单环，其具有1-2个、1-3个或1-4个选自氮、硫或氧的杂原子。在另一实例中，杂环基包括3元单环。在另一实例中，杂环基包括4元单环。在另一实例中，杂环基包括5-6元单环。在一些实施例中，杂环烷基包括至少一个氮。在一实例中，所述杂环基包括0至3个双键。任何氮或硫杂原子都可任选地被氧化(例如，NO、SO、SO2)，并且任何氮杂原子都可任选地被季铵化(例如，[NR4]+Cl-、[NR4]+OH-)。杂环实例为环氧乙烷基、氮丙啶基、噻喃基、氮杂环丁烷基、氧杂环丁烷基、硫杂环丁烷基、1,2-二硫杂环丁烷基、1,3-二硫杂环丁烷基、吡咯烷基、二氢-1H-吡咯基、二氢呋喃基、四氢呋喃基、二氢噻吩基、四氢噻吩基、咪唑烷基、哌啶基、哌嗪基、异喹啉基、四氢异喹啉基、吗啉基、硫代吗啉基、1,1-二氧代硫代吗啉基、二氢吡喃基、四氢吡喃基、六氢硫代吡喃基、六氢嘧啶基、噁嗪基、噻嗪烷基、噻噁烷基、高哌嗪基、高哌啶基、氧杂环庚烷基、硫杂环庚烷基、氧氮杂基、氧氮杂环庚烷基、二氮杂环庚烷基、1,4-二氮杂环庚烷基、二氮杂/>基、硫氮杂/>基、硫氮杂环庚烷基、四氢硫吡喃基、噁唑烷基、噻唑啉基、异噻唑烷基、1,1-异噻唑烷酮基、1,1-二氧杂异噻唑基、噁唑烷酮基、咪唑啉酮基、4,5,6,7-四氢[2H]吲唑基、四氢苯并咪唑基、4,5,6,7-四氢苯并[d]咪唑基、噻嗪基、噁嗪基、噻二嗪基、噁二嗪基、二噻嗪基、二噁嗪基、噁硫嗪基、噻三嗪基、氧杂三嗪基、二噻二嗪基、咪唑啉基、二氢嘧啶基、四氢嘧啶基、1-吡咯啉基、2-吡咯啉基、3-吡咯啉基、吲哚啉基、噻喃基、2H-吡喃基、4H-吡喃基、二噁烷基、1,3-二氧戊环基、吡唑啉基、吡唑烷基、二噻吩基、二硫杂环戊基、嘧啶酮基、嘧啶二酮基、嘧啶-2,4-二酰基、哌嗪酮基、哌嗪二酰基、吡唑啉基咪唑啉基、3-氮杂双[3.1.0]己烷基、3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷基、6-氮杂双环[3.1.1]庚烷基、3-氮杂双环[3.1.1]庚烷基、3-氮杂双环[4.1.0]庚烷基、氮杂双环[2.2.2]己烷基、2-氮杂双环[3.2.1]辛烷基、8-氮杂双环[3.2.1]辛烷基、2-氮杂双[2.2.2]辛烷基、8-氮杂双环[2.2.2]辛烷基、7-氧杂双环[2.2.1]庚烷、氮杂螺[3.5]壬烷基、氮杂螺[2.5]辛烷基、氮杂螺[4.5]癸烷基、1-氮杂螺[4.5]癸烷-2-基、氮杂螺[5.5]十一烷基、四氢吲哚基、八氢吲哚基、四氢异吲哚基、四氢吲哚基、1,1-二氧六氢硫代吡喃基。
在特定实施例中，杂环基基团或杂芳基基团附接至该杂环基基团或该杂芳基基团的碳原子。通过举例，碳键合的杂环基基团包括以下键合排列：在吡啶环的2、3、4、5或6位，在哒嗪环的3、4、5或6位，在嘧啶环的2、4、5或6位，在吡嗪环的2、3、5或6位，在呋喃、四氢呋喃、噻吩(thiofuran)、噻吩(thiophene)、吡咯或四氢吡咯环的2、3、4或5位，在噁唑、咪唑或噻唑环的2、4或5位，在异噁唑、吡唑或异噻唑环的3、4或5位，在氮丙啶环的2或3位，在氮杂环丁烷环的2、3或4位，在喹啉环的2、3、4、5、6、7或8位，或在异喹啉环的1、3、4、5、6、7或8位。
在某些实施例中，杂环基基团或杂芳基基团为N-连接的。通过举例，氮键合的杂环基或杂芳基基团包括以下键合排列：在氮杂环丙烷、氮杂环丁烷、吡咯、吡咯烷、2-吡咯啉、3-吡咯啉、咪唑、咪唑烷、2-咪唑啉、3-咪唑啉、吡唑、吡唑啉、2-吡唑啉、3-吡唑啉、哌啶、哌嗪、吲哚、吲哚啉、1H-吲唑的1位，在异吲哚或异吲哚啉的2位，在吗啉的4位，以及在咔唑或β-咔啉的9位。
“稠合的”是指本文所述的任何环结构，其与本文所述的化合物中的现有环结构共用一个或多个原子(例如，碳或氮原子)。
术语“酰基”是指由式–C(＝O)-R表示的含羰基的取代基，其中R是取代基，诸如氢、烷基、环烷基、芳基或杂环基，其中烷基、环烷基、芳基和杂环基如本文所定义。酰基基团包括烷酰基(例如，乙酰基)、芳酰基(例如，苯甲酰基)和杂芳酰基(例如，吡啶基)。
术语“卤代烷基”是指其中一个或多个氢已被卤素取代的烷基链。卤代烷基的实例是三氟甲基、二氟甲基和氟甲基。取代的卤代烷基是指具有除卤素之外的部分的卤代烷基。
如本文所用，与化学结构中的键相交的波浪线表示与化学结构中的波浪键相连的原子与分子其余部分或分子片段的其余部分的连接点。
在某些实施例中，一般描述二价基团不具有特定的键合构型。应当理解，除非另有说明，否则一般性描述旨在包括两种键合结构。例如，除非另外指明，否则在基团R1-R2-R3中，如果基团R2被描述为-CH2C(O)-，则应理解为该基团可作为R1-CH2C(O)-R3和R1-C(O)CH2-R3键合。
术语“药用”是指分子实体和组合物当视情况而定施用于动物(诸如，例如，人)时不产生不利的、过敏的或其他不良反应。
本文所述的化合物可以是盐的形式，诸如药用盐。“药用盐”包括酸加成盐和碱加成盐。“药用酸加成盐”是指与无机酸和有机酸形成的那些盐，所述盐保留了游离碱的生物有效性和性质，并且在生物学上或其他方面均不是非预期的，所述无机酸诸如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、碳酸、磷酸等，所述有机酸可以选自脂肪族、脂环族、芳族、芳脂族、杂环、羧酸和磺酸类有机酸，诸如甲酸、乙酸、丙酸、乙醇酸、葡萄糖酸、乳酸、丙酮酸、草酸、苹果酸、马来酸、丙二酸、琥珀酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、天冬氨酸、抗坏血酸、谷氨酸、邻氨基苯甲酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、双氢萘酸、苯乙酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、水杨酸等。
术语“药用碱加成盐”包括衍生自无机碱的那些盐，诸如钠盐、钾盐、锂盐、铵盐、钙盐、镁盐、铁盐、锌盐、铜盐、锰盐、铝盐等。具体的碱加成盐是铵盐、钾盐、钠盐、钙盐和镁盐。衍生自药用有机无毒碱的盐包括伯胺、仲胺和叔胺的盐，取代胺包括天然存在的取代胺、环胺和碱性离子交换树脂，诸如异丙胺、三甲胺、二乙胺、三乙胺、三丙胺、乙醇胺、2-二乙氨基乙醇、氨丁三醇、二环己胺、赖氨酸、精氨酸、组氨酸、咖啡因、普鲁卡因、肼苯胺、胆碱、甜菜碱、乙二胺、葡糖胺、甲基葡糖胺、可可碱、嘌呤、哌嗪、哌啶、N-乙基哌啶、多胺树脂等。具体的有机无毒碱包括异丙胺、二乙胺、乙醇胺、氨丁三醇、二环己胺、胆碱和咖啡因。
在一些实施例中，盐选自盐酸盐、氢溴酸盐、三氟乙酸盐、硫酸盐、磷酸盐、乙酸盐、富马酸盐、马来酸盐、酒石酸盐、乳酸盐、柠檬酸盐、丙酮酸盐、琥珀酸盐、草酸盐、甲磺酸盐、对甲苯磺酸盐、硫酸氢盐、苯磺酸盐、乙磺酸盐、丙二酸盐、昔萘酸盐、抗坏血酸盐、油酸盐、烟酸盐、糖精、己二酸盐、甲酸盐、乙醇酸盐、棕榈酸盐、L-乳酸盐、D-乳酸盐、天冬氨酸盐、苹果酸盐、L-酒石酸盐、D-酒石酸盐、硬脂酸盐、糠酸盐(例如，2-糠酸盐或3-糠酸盐)、萘二磺酸盐(萘-1,5-二磺酸盐或萘-1-(磺酸)-5-磺酸盐)、乙磺酸盐(乙烷-1,2-二磺酸盐或乙烷-1-(磺酸)-2-磺酸盐)、异硫氰酸盐(2-羟基乙基磺酸盐)、2-均三甲苯磺酸盐、2-萘磺酸盐、2,5-二氯苯磺酸盐、D-扁桃酸盐、L-扁桃酸盐、肉桂酸盐、苯甲酸盐、己二酸盐、乙二酸盐、丙二酸盐、甲基苯磺酸盐(2-间苯磺酸盐)、萘磺酸盐(2-萘磺酸盐)、樟脑磺酸盐(樟脑-10-磺酸盐，例如，(1S)-(+)-10-樟脑磺酸盐)、谷氨酸盐、戊二酸盐、马尿酸盐(2-(苯甲酰氨基)乙酸盐)、乳清酸盐、二甲苯酸盐(对二甲苯-2-磺酸盐)和帕莫酸盐(2,2'-二羟基-1,1'-二萘甲烷-3,3'-二羧酸酯)。
“无菌”制剂是无菌的或不含所有活微生物及其孢子。
术语“立体异构体”是指具有相同化学组成，但原子或基团在空间的排列不同的化合物。立体异构体包括非对映体、对映体、阻转异构体、构象异构体等。
术语“手性”是指具有与镜像配偶体不重叠性的特性，而术语“非手性”是指与其镜像配偶体可重叠的分子。
术语“非对映体”是指具有两个或更多个手性中心并且其分子并非彼此镜像的立体异构体。非对映体具有不同的物理性质，例如，熔点、沸点、光谱性质或生物活性。非对映体的混合物可以在高分辨率分析程序(诸如电泳)和色谱法(诸如HPLC)下分离。
术语“对映体”是指化合物的两种立体异构体，它们是彼此不可重叠的镜像。
术语“阻转异构体”是指由围绕单键的受阻旋转产生的两种构象异构体，其中旋转的空间应变势垒可足够高以允许分离各构象异构体。
本文所用的立体化学定义和惯例通常遵循S.P.Parker编,McGraw-HillDictionary of Chemical Terms(1984)McGraw-Hill Book Company,New York；以及Eliel,E.和Wilen,S.,“Stereochemistry of Organic Compounds”,John Wiley&Sons,Inc.,New York,1994。许多有机化合物以旋光活性形式存在，即它们具有旋转平面偏振光平面的能力。在描述光学活性化合物时，前缀D和L或R和S用于表示分子围绕其手性中心的绝对构型。前缀d和l或(+)和(-)用于表示化合物对平面偏振光的旋转的符号，其中(-)或1表示该化合物是左旋的。带有(+)或d前缀的化合物是右旋的。对于既定化学结构，这些立体异构体除了互为镜像外，是完全相同的。特定的立体异构体也可以被称为对映体，并且此类异构体的混合物通常被称为对映体混合物。对映体的50:50混合物称为外消旋混合物或外消旋物，其可能在化学反应或过程中没有立体选择或立体特异性的情况下发生。术语“外消旋混合物”和“外消旋物”是指两种无旋光活性的对映体种类的等摩尔混合物。
术语“互变异构体”或“互变异构形式”是指通过低能垒相互转化的具有不同能量的结构异构体。例如，质子互变异构体(也称为质子异变的互变异构体)包括经由质子迁移的相互转化，诸如酮-烯醇和亚胺-烯胺异构化。价互变异构体包括通过一些键合电子的重组而进行的相互转化。
本文所述的某些化合物可以以非溶剂化物形式以及溶剂化物形式存在，包括水合形式。“溶剂化物”是指一种或多种溶剂分子与本文所述化合物的缔合物或络合物。形成溶剂化物的溶剂的示例包括水、异丙醇、乙醇、甲醇、DMSO、乙酸乙酯、乙酸和乙醇胺。本文所述的某些化合物可以以多种结晶或无定形形态存在。一般而言，本文设想到所有物理形态。术语“水合物”是指其中溶剂分子是水的复合物。
本文所述的化合物及其药用盐还涵盖同位素标记的化合物，这些同位素标记的化合物与本文列举的化合物相同，但事实上，一个或多个原子被原子质量或质量数不同于自然界中通常发现的原子质量或质量数的原子所取代。本文设想到所指定的任何特定原子或元素的所有同位素及其用途。可掺入本文所述的化合物或其药用盐中的示例性同位素包括氢、碳、氮、氧、磷、硫、氟、氯和碘的同位素，诸如2H、3H、11C、13C、14C、13N、15N、15O、17O、18O、32P、33P、35S、18F、36Cl、123I和125I。本文所述的某些同位素标记的化合物或其药用盐(例如，3H和14C标记的那些化合物)可用于化合物和/或底物组织分布测定。氚(3H)和碳-14(14C)同位素因易于制备和具有可检测性而可用。此外，用较重的同位素诸如氘(即，2H)取代可以提供由于代谢稳定性更高(例如，体内半衰期增加或剂量减少要求)而带来的某些治疗优势，因此在某些情况下是优选的。正电子发射同位素(诸如15O、13N、11C和18F)可用于正电子发射断层扫描(PET)研究，以检查底物受体的占有率。本文所述的同位素标记的化合物或其药用盐通常可以按照与以下本文的实例中公开的程序类似的程序，通过用同位素标记的试剂代替非同位素标记的试剂进行制备。
如本文所用，术语“氨基保护基团”是指当对化合物上的其他官能团进行反应时，通常用于封端或保护氨基基团的基团的衍生物。此类保护基的实例包括氨基甲酸酯、酰胺、烷基和芳基基团及亚胺，以及许多N-杂原子衍生物，可将其除去以再生预期胺基。具体的氨基保护基团是Pmb(对甲氧基苄基)、Boc(叔丁基氧基羰基)、Fmoc(9-芴基甲氧基羰基)和Cbz(羰基苄氧基)。这些基团的进一步实例可见于T.W.Greene和P.G.M.Wuts,“ProtectingGroups in Organic Synthesis,第3版,John Wiley&Sons,Inc.,1999。术语“被保护的氨基”是指被以上氨基保护基团中的一种取代的氨基基团。
如本文所用，术语“羧基保护基团”是指分子的其他位置处的后续反应条件中稳定的那些基团，可以在适当的位置将其除去而不破坏分子的其余部分，以获得未保护的羧基基团。羧基保护基团的实例包括酯基基团和杂环基基团。当对化合物上的其他官能团进行反应时，可以采用羧酸基团的酯衍生物进行封端或保护羧酸基团。此类酯基的实例包括取代的芳烷基，包括取代的苄基，诸如4-硝基苄基、4-甲氧基苄基、3,4-二甲氧基苄基、2,4-二甲氧基苄基、2,4,6-三甲氧基苄基、2,4,6-三甲基苄基、五甲基苄基、3,4-亚甲基二氧基苄基、二苯甲基、4,4'-二甲氧基苯甲基、2,2',4,4'-四甲氧基苯甲基，烷基或取代的烷基酯，诸如甲基、乙基、叔丁基烯丙基或叔戊基、三苯基甲基(三苯甲基)、4-甲氧基三苯甲基、4,4'-二甲氧基三苯甲基、4,4',4”-三甲氧基三苯甲基、2-苯基丙-2-基，硫酯，诸如叔丁基硫酯，甲硅烷基酯，诸如三甲基甲硅烷基、叔丁基二甲基甲硅烷基酯、苯甲酰基、2,2,2-三氯乙基、β-(三甲基甲硅烷基)乙基、β-(二(正丁基)甲基甲硅烷基)乙基、对甲苯磺酰基乙基、4-硝基苄基磺酰基乙基、烯丙基、肉桂基、1-(三甲基甲硅烷基甲基)丙-1-烯-3-基等。羧基保护基团的另一实例是杂环基基团，诸如1,3-噁唑啉基。这些基团的进一步实例可见于T.W.Greene和P.G.M.Wuts,“Protecting Groups in Organic Synthesis,第3版,JohnWiley&Sons,Inc.,1999。术语“被保护的羧基”是指被以上羧基保护基团中的一种取代的羧基基团。
本文所述的化合物及其药用盐可含有一个或多个不对称碳原子。因此，化合物可以以非对映体、对映体或其混合物的形式存在。化合物的合成可以采用外消旋体、非对映体或对映体作为起始原料或中间体。具体的非对映体化合物的混合物可以通过色谱法或结晶法分离或富含一种或多种具体的非对映体。相似地，可以使用相同的技术或本领域已知的其他技术分离或以对映体富集对映体混合物。不对称碳或氮原子中的每一者可以为R或S构型，并且本文设想到这些构型中的两者。
在本文所示的结构中，其中未指定任何特定手性原子的立体化学，则设想到并且包括所有立体异构体。当立体化学由表示具体构型的实心楔形或虚线指定时，则该立体异构体即被指定和定义。除非另有说明，否则如果使用实心楔形或虚线，则意指相对立体化学。
“受试者”、“个体”或“患者”为脊椎动物并且在本文中可互换使用。在某些实施例中，所述脊椎动物是哺乳动物。哺乳动物包括但不限于家畜(诸如牛)、运动动物、宠物(诸如豚鼠、猫、犬、兔和马)、灵长类动物、小鼠和大鼠。在某些实施例中，哺乳动物是人。在包括向患者施用化合物的实施例中，所述患者通常是有此需要的患者。
术语“抑制”和“减少”，或这些术语的任何变型，包括任何可测量的降低或完全抑制，以达到预期结果。例如，可以降低约、至多约、或至少约5％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、99％或更多，或其中可衍生的任何范围，与正常相比活性减少。
术语“治疗”是指旨在于临床病理学的进程期间改变所治疗的患者或细胞的自然进程的临床干预。理想的治疗效果包括降低疾病进展速度、减缓或减轻疾病状态以及缓解或改善预后。例如，如果减轻或消除了与本文所述的癌症相关联的一种或多种症状，包括但不限于减少癌细胞增殖(或破坏癌细胞)、减轻由疾病引起的症状、提高罹患疾病的患者的生活质量、减少治疗疾病所需的其他药物的剂量和/或延长患者的生存期，则该患者成功得到“治疗”。
术语疾病的“延迟进展”是指推迟、阻碍、减缓、放缓、稳定和/或延缓本文所述的癌症的进展。这种延迟可具有不同的时间长度，具体取决于癌症病史和/或待治疗的患者。对于本领域技术人员显而易见的是，充分或显著延迟实际上可以涵盖预防，因为患者不会罹患癌症或复发。
“突变KRas介导的疾病”等是指本文所述的疾病(例如本文所述的癌症)，其具有如本文所述的症状或需要治疗，这些症状与本文所述的突变KRas活性完全或部分相关联、作为其结果、功能或以其他方式相关。在一个此类实施例中，突变KRas为KRasG12D。
“有效量”或“治疗有效量”为至少实现本文所述的癌症的可测量的改善或预防所需的最小量。本文的有效量可以根据诸如患者的疾病状态、年龄、性别和体重以及药剂在患者中引起预期应答的能力等因素而变化。有效量也是治疗有益作用超过治疗的任何毒性或有害作用的量。有益或期望的临床结果包括以下结果，诸如：消除或降低风险、减轻严重程度、延缓疾病(包括疾病发展期间出现的疾病的生化、组织学和/或行为症状、其并发症和中间病理表型)发作、减少由疾病引起的一种或多种症状、提高罹患疾病的患者的生活质量、减少治疗疾病所需的其他药物的剂量、增强另一种药物的作用(诸如通过靶向来实现)、延迟疾病进展和/或延长生存期。在一些实施例中，有效量的药物可具有以下作用：减少癌细胞数量；减小肿瘤大小；抑制(即，减慢或停止)癌细胞向周围器官中的浸润；抑制(即，减慢或停止)肿瘤转移；抑制(即，减慢或停止)肿瘤生长；和/或缓解与疾患相关联的症状中的一种或多种。有效量可以一次或多次施用。
“施用期”或“周期”是指包括施用本文所述的一种或多种化合物或其药用盐或另外的治疗剂(即，化疗剂)的时间段以及不包括施用本文所述的药剂或化合物中的一种或多种的任选的时间段。“休息期”是指不施用本文所述的药剂或化合物中的至少一种的时间段。在一个实施例中，休息期是指不施用本文所述的药剂或化合物的时间段。在一些情况下，如本文所提供的休息期可包括在不存在本文所述的化合物或其药用盐的情况下施用另外的药剂，反之亦然。在此类情况下，在休息期施用任何药剂不应干扰或损害本文所述的化合物或其药用盐的施用。
“给药方案”是指本文所述的化合物或其药用盐的施用期，其包括一个或多个周期，其中每个周期可包括在不同时间以不同的量施用本文所述的化合物或其药用盐。
“QD”是指每天一次施用化合物或其药用盐。
“BID”是指每天两次施用化合物或其药用盐。
如本文所用，术语“共同施用”、“组合施用”及其语法等同物涵盖向动物(包括人)施用两种或更多种制剂，使得两种制剂和/或其代谢物均存在于动物体内。共同施用包括以单独的组合物同时施用，以单独的组合物于不同的时间施用(即，依次施用)，或以两种药剂均存在的组合物施用。
“1L疗法”是指施用于未接受过治疗的癌症患者的一线疗法。同样地，2L、3L等是指施用于患者的后续疗法。
术语“包装插页”用于指治疗产品的商业包装中通常包括的说明，其含有涉及此类治疗产品的使用的有关适应症、用法、剂量、施用、禁忌症和/或警告的信息。
术语“拮抗剂”和“抑制剂”可互换使用，并且它们是指具有通过抑制蛋白质(诸如KRas的突变体形式)的活性或表达而抑制靶蛋白的生物学功能的化合物。因此，术语“拮抗剂”和“抑制剂”是在靶蛋白的生物学作用的背景下定义的。尽管本文优选的拮抗剂与靶标特异性相互作用(例如，结合)，但通过与靶蛋白为其成员的信号转导途径的其他成员相互作用而抑制靶蛋白的生物活性的化合物也特别包括在该定义内。被拮抗剂抑制的优选的生物活性与肿瘤的发生、生长或扩散有关。
本文所用的术语“激动剂”是指具有通过抑制靶蛋白的活性或表达而启动或增强靶蛋白的生物学功能的化合物。因此，术语“激动剂”是在靶多肽的生物学作用的背景下定义的。尽管本文优选的激动剂与靶标特异性相互作用(例如，结合)，但通过与靶多肽为其成员的信号转导途径的其他成员相互作用而启动或增强靶多肽的生物活性的化合物也特别包括在该定义内。
术语“癌症”和“癌性”、“赘生物”和“肿瘤”以及相关术语在本文中可互换使用，并且是指或描述哺乳动物中通常以细胞生长不受控制为特征的生理状况。“肿瘤”包含一个或多个癌细胞。癌症的实例包括癌、母细胞瘤、肉瘤、精原细胞瘤、胶质母细胞瘤、黑素瘤、白血病和髓样或淋巴样恶性肿瘤。此类癌症的更具体实例包括鳞状细胞癌(例如，上皮鳞状细胞癌)和肺癌，包括小细胞肺癌、非小细胞肺癌(“NSCLC”)、肺腺癌和肺鳞状癌。其他癌症包括皮肤、角化棘皮瘤、滤泡癌、毛细胞白血病、颊腔、咽(口腔)、嘴唇、舌头、嘴、唾液腺、食道、喉、肝细胞、胃部、胃、胃肠道、小肠、大肠、胰腺、宫颈、卵巢、肝脏、膀胱、肝细胞瘤、乳腺、结肠、直肠、结直肠、泌尿生殖系统、胆道、甲状腺、乳突、肝性、子宫内膜、子宫、唾液腺、肾脏或肾性、前列腺、睾丸、外阴、腹膜、肛门、阴茎、骨骼、多发性骨髓瘤、B细胞淋巴瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、中枢神经系统、大脑、头部和颈部、霍奇金病以及相关的转移。赘生性疾患的其他实例包括骨髓增生性疾患，诸如真性红细胞增多症、原发性血小板增多症、骨髓纤维化(诸如原发性骨髓纤维化)和慢性骨髓性白血病(CML)。
“化疗剂”是可用于治疗既定病症(例如，癌症或炎性病症)的制剂。化疗剂的实例在本领域中是众所周知的。另外，化疗剂包括任何化疗剂的药用的盐、酸或衍生物，以及它们中的两种或更多种的组合。
除非另有说明，否则本文所述的结构还意在包括仅在一个或多个富含同位素的原子存在下不同的化合物。可掺入本文所述的化合物或其药用盐中的示例性同位素包括氢、碳、氮、氧、磷、硫、氟、氯和碘的同位素，分别诸如2H、3H、11C、13C、14C、13N、15N、15O、17O、18O、32P、33P、35S、18F、36Cl、123I和125I。同位素标记的化合物(例如，3H和14C标记的化合物)可用于化合物或底物组织分布测定。氚(即，3H)和碳-14(即，14C)同位素因易于制备和具有可检测性而可用。此外，用较重的同位素诸如氘(即，2H)取代可以提供由于代谢稳定性更高(例如，体内半衰期增加或剂量减少要求)而带来的某些治疗优势。在一些实施例中，在本文所述的化合物或其药用盐中，一个或多个碳原子被富含13C或14C的碳替代。正电子发射同位素(诸如15O、13N、11C和18F)可用于正电子发射断层扫描(PET)研究，以检查底物受体的占有率。同位素标记的化合物通常可以按照与本文的方案或实例中公开的程序类似的程序，通过用同位素标记的试剂代替非同位素标记的试剂进行制备。
具体设想到的是，关于本文提供的一个实施例所讨论的任何限制可以适用于本文提供的任何其他实施例。此外，本文所述的任何化合物及其药用盐或本文所述的组合物可用于本文提供的任何方法中，并且本文提供的任何方法可用于产生或利用本文所述的任何化合物及其药用盐或本文所述的组合物。
在整个本申请中，术语“约”用于表示值包括用于确定该值的装置或方法的误差的标准差。
化合物
本文提供了式(I*)化合物：
或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐，
其中：
X为O或NR6；
n为1、2或3；
m为1、2或3；
p为0、1或2；
q为1或2；
其中n和m一起形成6元、7元或8元环A；
每个R0独立地为氢或甲基；
R1为R7取代或未取代的萘基、R7取代或未取代的异喹啉基、R7取代或未取代的吲唑基、R7取代或未取代的苯并噻唑基、R7A取代或未取代的苯基、或R7A取代或未取代的吡啶基；
每个R7独立地为氢、卤素、-OH、NH2、N(Me)2、未取代的C1-3烷基、未取代的C1-3卤代烷基、或未取代的环丙基；
每个R7A独立地为氢、卤素、NH2、N(Me)2、未取代的C1-3烷基、未取代的C1-3卤代烷基、或未取代的环丙基；
R2为氢、L1-O-L2-R8、R8A取代或未取代的C1-3烷基、或R8B取代或未取代的4元至10元杂环；
其中当R2为氢、R1为R7取代的吲唑基并且n和m为1时，则p不是零并且R6不是H；
L1为键或RL1取代或未取代的C1-3亚烷基；
RL1为卤素或未取代的C1-3烷基；
L2为键或未取代的C1-3亚烷基；
R8为R9取代或未取代的C1-3烷基、R9取代或未取代的包含N、S或O的4元至10元杂环；
每个R9独立地为卤素、氧代、-OCF3、-OCHF2、-OCH2F、未取代的C1-3烷基、未取代的C1-3卤代烷基、未取代的C1-3烷氧基、R10取代或未取代的C1-3次烷基、或R10取代或未取代的C3-4环烷基、或R10取代或未取代的3元或4元杂环；或其中
两个R9一起形成R10取代或未取代的C3-5环烷基、或R10取代或未取代的包含一个或多个氧原子的C3-5杂环；
R10为氢、卤素或未取代的C1-3烷基；
每个R8A独立地为R9A取代或未取代的C1-3烷基、R9A取代或未取代的C1-3烷氧基、R9A取代或未取代的C3-4环烷基、或R9A取代或未取代的4元至6元杂环；
每个R9A独立地为卤素、氧代、未取代的C1-3烷基、未取代的C1-3卤代烷基、未取代的C1-3烷氧基、未取代的C1-3次烷基、R9取代或未取代的C3-4环烷基、或R9取代或未取代的包含N、S或O的4元至10元杂环；
R8B独立地为卤素、氧代、-NH2、未取代的C1-3烷基、未取代的C1-3卤代烷基、未取代的C1-3烷氧基、或未取代的C1-3次烷基；
R3和R4各自独立地为氢、-CN、卤素、未取代的C1-3烷基、或未取代的环丙基；
每个R5独立地为卤素、氧代、未取代的C1-3烷基、或未取代的C1-3卤代烷基；或其中；
两个R5一起形成环A的两个碳原子之间的桥，其中该桥包含1至3个碳以及任选的一个选自O和N的杂原子；或
两个R5一起形成环A的两个碳原子之间的桥，其中该桥包含O或NR11中的一者；
R11为氢、C(O)CH3、或未取代的C1-3烷基；
R6为氢或R6A取代或未取代的C1-6烷基、R6A取代或未取代的C1-6卤代烷基、R6A取代或未取代的C1-6烯基；R6A取代或未取代的C1-6炔基、或R6A取代或未取代的3元至4元杂环；
R6A为卤素、CN、OR6B、SR6C、S(O)2R6C、C(O)R6B、未取代的C1-3烷基；或R6B取代或未取代的3元至4元杂环；并且
R6B和R6C各自独立地为C1-3烷基或C1-3卤代烷基。
在一个实施例中，X、p、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R6A、R6B、R6C、R7、R7A、R8、R8A、R8B、R9、R9A、R10和R11如本文所述，q为1，并且n和m独立地为1或2，其中n和m一起形成6元或7元环A。
在一个实施例中，q为1。
本文提供了式(I)化合物：
或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐，
其中：
X为O或NR6；
n为1、2或3；
m为1、2或3；
p为0、1或2；
其中n和m一起形成6元、7元或8元环A；
每个R0独立地为氢或甲基；
R1为R7取代或未取代的萘基、R7取代或未取代的异喹啉基、R7取代或未取代的吲唑基、R7取代或未取代的苯并噻唑基、R7A取代或未取代的苯基、或R7A取代或未取代的吡啶基；
每个R7独立地为氢、卤素、-OH、NH2、N(Me)2、未取代的C1-3烷基、未取代的C1-3卤代烷基、或未取代的环丙基；
每个R7A独立地为氢、卤素、NH2、N(Me)2、未取代的C1-3烷基、未取代的C1-3卤代烷基、或未取代的环丙基；
R2为氢、L1-O-L2-R8、R8A取代或未取代的C1-3烷基、或R8B取代或未取代的4元至10元杂环；
其中当R2为氢、R1为R7取代的吲唑基并且n和m为1时，则p不是零并且R6不是H；
L1为键或RL1取代或未取代的C1-3亚烷基；
RL1为卤素或未取代的C1-3烷基；
L2为键或未取代的C1-3亚烷基；
R8为R9取代或未取代的C1-3烷基、R9取代或未取代的包含N、S或O的4元至10元杂环；
每个R9独立地为卤素、氧代、-OCF3、-OCHF2、-OCH2F、未取代的C1-3烷基、未取代的C1-3卤代烷基、未取代的C1-3烷氧基、R10取代或未取代的C1-3次烷基、或R10取代或未取代的C3-4环烷基、或R10取代或未取代的3元或4元杂环；或其中
两个R9一起形成R10取代或未取代的C3-5环烷基、或R10取代或未取代的包含一个或多个氧原子的C3-5杂环；
R10为氢、卤素或未取代的C1-3烷基；
每个R8A独立地为R9A取代或未取代的C1-3烷基、R9A取代或未取代的C1-3烷氧基、R9A取代或未取代的C3-4环烷基、或R9A取代或未取代的4元至6元杂环；
每个R9A独立地为卤素、氧代、未取代的C1-3烷基、未取代的C1-3卤代烷基、未取代的C1-3烷氧基、未取代的C1-3次烷基、R9取代或未取代的C3-4环烷基、或R9取代或未取代的包含N、S或O的4元至10元杂环；
R8B独立地为卤素、氧代、-NH2、未取代的C1-3烷基、未取代的C1-3卤代烷基、未取代的C1-3烷氧基、或未取代的C1-3次烷基；
R3和R4各自独立地为氢、-CN、卤素、未取代的C1-3烷基、或未取代的环丙基；
每个R5独立地为卤素、氧代、未取代的C1-3烷基、或未取代的C1-3卤代烷基；或其中；
两个R5一起形成环A的两个碳原子之间的桥，其中该桥包含1至3个碳以及任选的一个选自O和N的杂原子；或
两个R5一起形成环A的两个碳原子之间的桥，其中该桥包含O或NR11中的一者；
R11为氢、C(O)CH3、或未取代的C1-3烷基；
R6为氢或R6A取代或未取代的C1-6烷基、R6A取代或未取代的C1-6卤代烷基、R6A取代或未取代的C1-6烯基；R6A取代或未取代的C1-6炔基、或R6A取代或未取代的3元至4元杂环；
R6A为卤素、CN、OR6B、SR6C、S(O)2R6C、C(O)R6B、未取代的C1-3烷基；或R6B取代或未取代的3元至4元杂环；并且
R6B和R6C各自独立地为C1-3烷基或C1-3卤代烷基。
在一个实施例中，X、p、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R6A、R6B、R6C、R7、R7A、R8、R8A、R8B、R9、R9A、R10和R11如本文所述，并且n和m独立地为1或2，其中n和m一起形成6元或7元环A。
在一个实施例中，每个R0为氢，使得式(I)化合物具有下式：
其中X、m、n、p、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R6A、R6B、R6C、R7、R7A、R8、R8A、R8B、R9、R9A、R10和R11如本文针对式(I)所述。
在一个实施例中，一个R0为氢并且一个R0为甲基，使得式(I)化合物具有下式：
其中X、m、n、p、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R6A、R6B、R6C、R7、R7A、R8、R8A、R8B、R9、R9A、R10和R11如本文针对式(I)所述。
在本文所述的式(V)化合物或其药用盐的一个实施例中，式(V)化合物具有下式：
其中X、m、n、p、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R6A、R6B、R6C、R7、R7A、R8、R8A、R8B、R9、R9A、R10和R11如本文所述。
在一个实施例中，R1为R7取代或未取代的萘基、R7取代或未取代的吲唑基、R7取代或未取代的苯并噻唑基、R7A取代或未取代的苯基、或R7A取代或未取代的吡啶基。在另一个实施例中，R1为R7取代或未取代的萘基、R7取代或未取代的吲唑基、R7A取代或未取代的苯基、或R7A取代或未取代的吡啶基。在另一个实施例中，R1为R7取代或未取代的萘基、R7取代或未取代的吲唑基、或R7取代或未取代的苯并噻唑基。在又一个实施例中，R1为R7取代或未取代的萘基、或R7取代或未取代的吲唑基。在另一个实施例中，R1为R7A取代或未取代的苯基、或R7A取代或未取代的吡啶基。在另一个实施例中，R1为R7取代或未取代的苯基、R7取代或未取代的吲唑基、或R7取代或未取代的吡啶基。
在一个此类实施例中，R1为R7取代或未取代的苯基。在另一个此类实施例中，R1为R7取代或未取代的吲唑基。在另一个此类实施例中，R1为R7取代或未取代的吡啶基。
在一个实施例中，R1具有式(A)：
或其立体异构体，其中X1为CH、N或CF，并且R7A如本文所述。在一个此类实施例中，X1为N或CF。在一个此类实施例中，R7A为氢、卤素、未取代的C1-3烷基、或未取代的C1-3卤代烷基。
在一个此类实施例中，X1为N或CF，并且每个R7A独立地为氢、卤素、未取代的C1-3烷基、或未取代的C1-3卤代烷基。在一个此类实施例中，R7A独立地为氢、Cl、甲基、乙基或CF3，其中不超过一个R7A为氢。在一个实施例中，一个R7A为环丙基。
在一个此类实施例中，具有式(A1)的部分具有下式：
在一个此类实施例中，每个R7A独立地为氢、Cl、甲基或CF3。在另一个此类实施例中，每个R7A独立地为氢、甲基或CF3。
在一个此类实施例中，R1为
在另一个此类实施例中，R1为
在一个实施例中，R1为
在另一个实施例中，具有式(A)的部分具有下式：
其中每个R7A独立地为氢、卤素、未取代的C1-3烷基、或未取代的C1-3卤代烷基。在一个此类实施例中，每个R7A独立地为氢、F、甲基、乙基或CF3。在此类实施例中，不超过一个R7A为氢。在另一个此类实施例中，R7A不为氢。
在一个此类实施例中，R1为
在一个此类实施例中，R1为
其中每个R7独立地为卤素、NH2、N(Me)2、或未取代的C1-3烷基。
在一个实施例中，R1为
在另一实施例中，R1为
在另一实施例中，R1为：
在另一实施例中，R1为：
在一个实施例中，R7独立地为氢、卤素、-OH、NH2、N(Me)2、未取代的C1-3烷基、未取代的C1-3卤代烷基。在另一实施例中，R7独立地为卤素、NH2、或未取代的C1-3烷基、或未取代的C1-3卤代烷基。在本文所述的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐的一个实施例中，R7不为-OH。
在一个实施例中，R1为具有式(B)或(C)的部分，其中R7独立地为氢、卤素、或未取代的C1-3烷基。在一个此类实施例中，R7独立地为氢或未取代的C1-3烷基(例如，甲基)。在另一个此类实施例中，R7独立地为卤素(例如F)或未取代的C1-3烷基(例如，甲基)。
在一个实施例中，R1是式(B)的部分，其中R7独立地为氢、卤素、-OH、NH2、N(Me)2、或未取代的C1-3烷基。在一个实施例中，R1为式(C)的部分，其中R7独立地为氢、卤素、NH2、N(Me)2、或未取代的C1-3烷基。在一个此类实施例中，R7独立地为卤素或NH2。
在一个实施例中，R2为L1-O-L2-R8、R8A取代或未取代的C1-3烷基、或R8B取代或未取代的4元至10元杂环。在一个实施例中，R2为氢或L1-O-L2-R8。在另一实施例中，R2为R8A取代或未取代的C1-3烷基或R8B取代或未取代的4元至10元杂环。在另一实施例中，R2为R8B取代或未取代的4元至6元杂环。在又一个实施例中，R2为L1-O-L2-R8、R8A取代或未取代的C1-3烷基、或R8B取代或未取代的包含一个氮杂原子的4元至6元杂环。
在一个实施例中，R2为氢，其中当R1为R7取代的吲唑基并且n和m为1时，则p不是零并且R6不是氢。
在一个实施例中，式I化合物具有下式：
或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐，其中R1、R3、R4、R5、X和p如本文所述。在一个实施例中，式(Ia1)化合物具有下式：
在另一实施例中，式(I)化合物具有下式：
或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐，其中R1、R3、R4、R5、X和p如本文所述。在一个实施例中，式(Ib1)和式(Ic1)化合物分别具有下式：
在一个实施例中，R2为L1-O-L2-R8。在一个实施例中，L1和L2中的一者为键。在一个实施例中，L1为键。在另一实施例中，L2为键。在一个实施例中，L1为未取代的C1-3亚烷基，并且L2为键。在另一实施例中，L1和L2各自独立地为C1-3亚烷基。
在一个实施例中，其中R2为L1-O-L2-R8，L1为键并且L2为未取代的C1-3亚烷基。在一个此类实施例中，L2为亚甲基。在一个此类实施例中，R8为R9取代的C1-3烷基。在另一个此类实施例中，R8为R9取代或未取代的包含N、S或O的4元至10元杂环。
在一个实施例中，式(I)化合物具有下式：
或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐，其中R1、R3、R4、R5、R8、X、n、m和p如本文所述。在一个实施例中，式(II1)化合物具有下式：
在一个此类实施例中，式(II)化合物具有下式：
或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐，其中R1、R3、R4、R5、R8、X和p如本文所述。
在一个此类实施例中，式(II1)化合物具有下式：
或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐，其中R1、R3、R4、R5、R8、X和p如本文所述。
在一个此类实施例中，式(II1)化合物具有下式：
/>
或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐，其中R1、R3、R4、R5、R8、X和p如本文所述。
在其中R2为L1-O-L2-R8的一个实施例中，R8为R9取代的包含N、S或O的4元至10元杂环。在另一个此类实施例中，R8为包含一个N杂原子的4元至10元杂环。在另一个此类实施例中，R8为包含一个N杂原子的4元、5元、6元或7元单环杂环。在另一个此类实施例中，R8为包含一个N杂原子的5元或6元单环杂环。在另一个此类实施例中，R8为包含一个O杂原子的5元或6元单环杂环。在另一个此类实施例中，R8为包含一个N杂原子的6元、7元、8元或9元稠合双环杂环。在另一个此类实施例中，R8为包含一个N杂原子的7元或8元稠合双环杂环。在另一个此类实施例中，R8为包含一个N杂原子和一个O杂原子的7元或8元稠合双环杂环。在一个实施例中，R8为吡咯烷基或四氢呋喃基。
在此类实施例中，每个R9独立地为卤素、氧代、未取代的C1-3烷基、未取代的C1-3卤代烷基、未取代的C1-3烷氧基、或R10取代或未取代的C1-3次烷基。在另一个此类实施例中，每个R9独立地为卤素、氧代、或R10取代或未取代的C1-3次烷基。在一个实施例中，每个R9独立地为未取代的C1-3烷基、或未取代的C1-3烷氧基。在一个实施例中，每个R9为R10取代或未取代的C3-4环烷基、或R10取代或未取代的3元或4元杂环。在一个实施例中，两个R9一起形成R10取代或未取代的C3-5环烷基。在一个此类实施例中，两个R9一起形成R10取代的环丙基。在一个此类实施例中，两个R9一起形成R10取代的环丙基，其中R10为卤素(例如F或Cl)。在一个实施例中，其中两个R9一起形成R10取代的环丙基，该环丙基附接至R8的单个碳。在一个实施例中，两个R9一起形成R10取代的环丙基，该环丙基附接至R8的两个分离的碳原子。在另一个此类实施例中，两个R9一起形成未取代的包含一个或多个氧原子的C3-5杂环。在一个此类实施例中，杂环为1,3-二氧戊环基。
在一个实施例中，R10为氢或卤素。在一个实施例中，R10为氢。在另一实施例中，R10为卤素。在一个此类实施例中，R10为F。
在一个实施例中，其中R2为L1-O-L2-R8，R8为
或其立体异构体，其中，
R9为卤素、-OCF3、-OCHF2、-OCH2F、R10取代或未取代的C1-3次烷
基，或两个R9一起形成R10取代或未取代的C3-5环烷基；
r为整数0至12；
j为1、2或3；并且
k为1或2。
在一个实施例中，其中R2为L1-O-L2-R8，R8为
或其立体异构体，其中，
R9为卤素、或R10取代或未取代的C1-3次烷基；
r为整数0至12；
j为1、2或3；并且
k为1或2。
在一个此类实施例中，r为0、1、2、3或4。在另一个此类实施例中，r为0、1、2或3。在一个实施例中，R8为
或其立体异构体，其中R9、R10和r如本文所述，并且s为1或2。
在一个此类实施例中，r为0、1、2、3或4。在另一个此类实施例中，r为0、1、2或3。在一个实施例中，R8具有式D1、D2或D3，其中R9、R10和r如本文所述。
在一个此类实施例中，R9独立地为卤素、或R10取代或未取代的C1-3次烷基；每个R10独立地为氢或卤素；并且r为1或2。
在一个实施例中，R8为或其立体异构体，其中r为0。
在另一个实施例中，R8为或其立体异构体，其中r为0，并且每个R10独立地为氢或F。在一个此类实施例中，r为0，并且每个R10为氢。在另一个此类实施例中，r为0并且每个R10为F。在另一个此类实施例中，r为0，其中一个R10为氢并且一个R10为F。在另一个此类实施例中，每个R10独立地为氢或F，r为1或2，并且R9为F。
在另一实施例中，R8为或其立体异构体，其中r为0并且每个R9独立地为氢或卤素。在一个此类实施例中，每个R9为F并且r为0。在一个此类实施例中，每个R9为F并且r为1。
在另一实施例中，其中R2为L1-O-L2-R8，R8为或其立体异构体。在一个此类实施例中，r为1并且R9为卤素、氧代、或未取代的C1次烷基。在一个此类实施例中，两个R9一起形成R10取代或未取代的C3-5环烷基。
在一个实施例中，R8为或其立体异构体，其中R10为卤素并且s为1或2。在一个此类实施例中，R8为/>或其立体异构体。
在另一实施例中，其中R2为L1-O-L2-R8，R8为
或其立体异构体，其中
R9为氢或未取代的C1-3烷基；并且
W为O、SO2或NR12；并且
R12为氢、未取代的C1-3烷基、或未取代的C1-3卤代烷基。
在一个此类实施例中，W为O并且R9为甲基。在另一个此类实施例中，W为NR12，其中R12为未取代的C1-3卤代烷基并且R9为氢。在另一个此类实施例中，W为SO2并且R9为氢。
在本文所述的化合物或其药用盐的一个实施例中，R8为氮杂环丁烷基、氧杂环丁烷基、或硫杂环丁烷二氧化物。
在本文提供的进一步的实施例中，R8为具有下式的部分：
或其立体异构体，其中，
R9独立地为卤素、氧代、或未取代的C1-3烷基；并且
r为1或2。
在一个此类实施例中，R8为具有式(G)的部分，其中R9和r如本文所述。在一个此类实施例中，R9为氧代并且r为1。在另一个此类实施例中，R9为F并且r为1或2。
在另一实施例中，R8为具有下式的部分：
或其立体异构体，其中R9和r如本文所述。
在另一实施例中，R8为具有下式的部分：
/>
或其立体异构体，其中R9和r如本文所述。
在另一实施例中，R8为具有下式的部分：
或其立体异构体，其中R10为卤素并且s为1或2。
在又一个实施例中，R8为R9取代或未取代的C1-3烷基。在一个此类实施例中，R8为具有下式的部分：
或其立体异构体，其中每个R9独立地为未取代的C1-3烷基、或未取代的C1-3烷氧基。
在另一实施例中，R8为具有下式的部分：
在一个实施例中，R8为：
或其立体异构体。
在一个实施例中，R8为：
或其立体异构体。
在一个实施例中，R8为：
或其立体异构体。
在一个实施例中，R8为：
在另一实施例中，R8为：
或其立体异构体。
在另一实施例中，R8为：
在另一实施例中，R8为：
或其立体异构体。
在另一实施例中，R8为：
在又一个实施例中，R8为：
或其立体异构体。
在又一个实施例中，R8为：
或其立体异构体。
在又一个实施例中，R8为：
在又一个实施例中，R8为：
在又一个实施例中，R2为：
或其立体异构体，其中R9、R10、r、j和k如本文所述。在一个实施例中，R9为卤素、或R10取代或未取代的C1-3次烷基。在另一个此类实施例中，R9为卤素、氧代、R10取代或未取代的C1-3次烷基，并且r独立地为0、1或2。
在一个实施例中，R2为：
或其立体异构体。
在另一实施例中，R2为：
或其立体异构体。
在另一实施例中，R2为：
或其立体异构体。
在又一个实施例中，R2为：
或其立体异构体。
在又一个实施例中，R2为：
或其立体异构体。
在又一个实施例中，R2为：
在又一个实施例中，R2为：
在另一实施例中，R2为R8A取代或未取代的C1-3烷基或R8B取代或未取代的4元至10元杂环。在一个实施例中，每个R8A独立地为R9A取代或未取代的C1-3烷基、或R9A取代或未取代的C1-3烷氧基。在一个实施例中，每个R8A独立地R8A独立地为R9A取代或未取代的烷氧基、或R9A取代或未取代的4元至6元杂环。在另一个实施例中，每个R8A独立地为R9A取代或未取代的C3-4环烷基、或R9A取代或未取代的4元至6元杂环。在一个实施例中，R9A为R9取代或未取代的包含N的4元至10元杂环。在另一个实施例中，R9独立地为卤素、未取代的C1-3烷基、或R10取代或未取代的C1-3次烷基。
在一个实施例中，R2为R8A取代或未取代的C1-3烷基，其中R8A为R9A取代或未取代的C1-3烷氧基、R9A取代或未取代的C3-4环烷基、或R9A取代或未取代的4元至6元杂环。
在一个实施例中，R9A独立地为卤素、氧代、未取代的C1-3烷基、未取代的C1-3卤代烷基、未取代的C1-3烷氧基、或未取代的C1-3次烷基。在另一个此类实施例中，R9A独立地为R9A独立地为卤素、氧代、或未取代的C1-3次烷基。在另一个实施例中，R9A为R9取代或未取代的包含N、S或O的4元至10元杂环。
在另一个实施例中，R2为R8A取代或未取代的C1-3烷基，其中R8A为R9A取代或未取代的C1-3烷基。
在一个实施例中，R2为R8A取代或未取代的C1-3烷基，其中R8A为R9A取代或未取代的C1-3烷氧基。在一个此类实施例中，R9A独立地为R9取代或未取代的C3-4环烷基、或R9取代或未取代的包含一个N杂环的4元至10元杂环。在另一个此类实施例中，R9A独立地为R9取代或未取代的包含一个N杂环的5元或6元单环杂环或包含一个N杂环的7元或8元稠合双环杂环。在此类实施例中，R9独立地为卤素、氧代、未取代的C1-3烷基、或R10取代或未取代的C1-3次烷基，其中R10如本文所述。
在另一实施例中，R2为R8A取代或未取代的C1-3烷基，其中R8A为R9A取代或未取代的C3-4环烷基。在一个实施例中，每个R8B独立地为卤素、氧代、未取代的C1-3烷基、未取代的C1-3卤代烷基、未取代的C1-3烷氧基、或未取代的C1-3次烷基。
在一个实施例中，R2为R8B取代或未取代的4元至10元杂环。在一个此类实施例中，R8B为卤素、氧代、或未取代的C1-3次烷基。在一个实施例中，R2为R8B取代或未取代的包含一个N杂原子的4元、5元或7元杂环。
在一个此类实施例中，R2为：
在一个此类实施例中，R2为：
在一个实施例中，R3和R4各自独立地为氢、-CN、卤素、未取代的C1-3烷基、或未取代的环丙基。在一个实施例中，R3和R4各自独立地为氢、卤素或未取代的C1-3烷基。在一个实施例中，R3和R4各自独立地为氢或卤素。在一些实施例中，R3和R4两者均不为氢。在另一实施例中，R3和R4中的一者为氢并且另一者为卤素。在一个实施例中，R3为卤素。在一个此类实施例中，R3为F或Cl。在另一实施例中，R4为氢。在另一实施例中，R4为卤素。在一个此类实施例中，R4为F或Cl。
在一个实施例中，每个R5独立地为卤素、氧代、未取代的C1-3烷基、或未取代的C1-3卤代烷基。在一个实施例中，p为1，并且R5为卤素、氧代或未取代的C1-3烷基。在另一实施例中，R5独立地为氧代、或未取代的C1-3烷基，并且p为1。在一个此类实施例中，n和m一起形成6元或7元环，其中p为1。在另一个此类实施例中，n和m一起形成7元环，其中p为0。在一个实施例中，n和m一起形成6元环。在一个此类实施例中，n和m一起形成6元环，其中p为0或1。在又一个实施例中，n和m一起形成7元环。在一个此类实施例中，n和m一起形成7元环，其中p为0或1。
在一个实施例中，p是0。
在一个实施例中，两个R5一起形成环A的两个碳原子之间的桥，其中该桥包含1至3个碳。在一个实施例中，两个R5一起形成环A的两个碳原子之间的桥，其中该桥包含1或2个碳。在一个实施例中，桥包含1个碳。在另一实施例中，桥包含2个碳。在一个此类实施例中，式(I)化合物具有下式：
或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐，其中R1、R2、R3、R4、R5、X和p如本文所述。在一个此类实施例中，p为0。
在另一个此类实施例中，式(I)化合物具有下式：
或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐，其中R1、R2、R3、R4、R5、X和p如本文所述。在一个此类实施例中，p为0。
在另一个此类实施例中，式(I)化合物具有下式：
或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐，其中R1、R2、R3、R4、R5、X和p如本文所述。在一个此类实施例中，p为0。
在此类实施例中，R1如本文所述。在另一个此类实施例中，R1为具有式(A1)、(A2)或(B)的部分。在另一个实施例中，R2为具有式(H)、(J)、(K)、(L)、(M)、(N)、(O)或(P)的部分。在此类实施例中，X为NR6，其中R6为氢、甲基、或具有式(Q)、(R)或(S)的部分。
在另一个此类实施例中，化合物为具有下式的式(II)化合物；
或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐，其中R1、R3、R4、R5、R8、X和p如本文所述。在一个此类实施例中，p为0。
在另一个此类实施例中，化合物为具有下式的式(II1)化合物：
或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐，其中R1、R3、R4、R5、R8、X和p如本文所述。在一个此类实施例中，p为0。
在另一个此类实施例中，化合物为具有下式的式(II1)化合物：
或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐，其中R1、R3、R4、R5、R8、X和p如本文所述。在一个此类实施例中，p为0。
在一个此类实施例中，R1如本文所述。在另一个此类实施例中，R1为具有式(A1)、(A2)、(B)或(C)的部分。在另一个此类实施例中，R8为具有式(D1)、(D2)、(D3)、(D4)、(D5)、(E)、(G)或(G1)的部分。在一个实施例中，R8为具有式(F)的部分。在此类实施例中，X为NR6，其中R6为氢、甲基、或具有式(Q)、(R)或(S)的部分。
在又一个实施例中，两个R5一起形成环A的两个碳原子之间的桥，其中该桥包含O或NR11中的一者。在一个实施例中，桥包含O。在另一个此类实施例中，桥包含NR11，其中R11为氢、C(O)CH3或甲基。
在式(I)化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐的一个实施例中，X为NR6。在一个实施例中，R6为氢。在一个实施例中，R6为R6A取代或未取代的C1-6烷基。在一个实施例中，R6为氢、或R6A取代或未取代的C1-6烷基、R6A取代或未取代的C1-6烯基、或R6A取代或未取代的C1-6炔基。在一个实施例中，R6为氢、或R6A取代或未取代的C1-6烷基、未取代的C1-6烯基；或未取代的C1-6炔基。在另一个实施例中，R6为氢、或R6A取代或未取代的C1-6烷基。在又一个实施例中，R6为氢或未取代的C1-6烷基。
在一个此类实施例中，其中R6为R6A取代或未取代的C1-6烷基，R6A为卤素、CN、OR6B、S(O)2R6C、未取代的C1-3烷基；或R6B取代或未取代的4元杂环。在另一个此类实施例中，其中R6是R6A取代或未取代的C1-6烷基，R6A为卤素、CN、OR6B、未取代的C1-3烷基；或R6B取代或未取代的4元杂环。在另一个此类实施例中，其中R6为R6A取代或未取代的C1-6烷基，R6A为卤素、CN、OH、OMe、OEt、OCF3、SO2Me、未取代的C1-3烷基、或4元杂环。
在另一个此类实施例中，其中R6为R6A取代或未取代的C1-6烷基，R6A为F、Cl、CN、CH3、OH、OCH3、OCF3、SCH3、SO2CH3或其组合。在一个实施例中，其中R6为R6A取代或未取代的C1-6烷基时，R6A为卤素或氧杂环丁烷基。在另一实施例中，R6为未取代的C1-6烷基(例如，甲基)。
在另一实施例中，R6为R6A取代或未取代的3元至4元杂环。在一个此类实施例中，R6为氮杂环丁烷基或氧杂环丁烷基。在一个实施例中，R6为未取代的氧杂环丁烷基。
在另一实施例中，R6为R6A取代或未取代的C1-3卤代烷基。在另一实施例中，R6为R6A取代或未取代的C1-3烯基。在另一实施例中，R6为R6A取代或未取代的C1-3炔基。在一个实施例中，R6为氢。在另一个实施例中，R6为甲基。
在本文所述的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐的一个实施例中，R6为氢、甲基、或具有下式的部分：
在一个此类实施例中，R6A为F、Cl、CN、CH3、OH、OCH3、OCF3、SCH3、SO2CH3。
在另一个实施例中，R6为其中R6A为CH2F、CN、OH、OCH3、OCF3、SCH3、SO2CH3。
在另一个实施例中，R6为其中R6A独立地为F、CH3或OCH3。
在另一个实施例中，R6为其中R6A为氢、CH3或F。
在又一个实施例中，R6为氢、甲基、或具有下式的部分：
在一个实施例中，R6B和R6C各自独立地为C1-3烷基。
在一个实施例中，式(I)化合物具有下式：
或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐，其中R1为具有式(A1)、(A2)或(B)的部分；R8为具有式(D1)、(D2)、(D3)、(E)、(G)或(G1)的部分；并且X为NR6，其中R6为氢、甲基、或具有式(Q)、(R)或(S)的部分。在另一实施例中，p是0。在另一实施例中，p为1，并且R5为氧代或未取代的C1-3烷基。在又一个实施例中，R4为C1-6烷基。在又一个实施例中，m和n各自为1。在又一个实施例中，m为2并且n为1。在又一个实施例中，m为1并且n为2。在又一个实施例中，两个R5一起形成如本文所述的1至2碳桥。
在一个实施例中，式(I)化合物具有下式：
或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐，其中R1为具有式(A1)、(A2)或(B)的部分；R8为具有式(D1)、(D2)、(D3)、(E)、(G)或(G1)的部分；并且X为NR6，其中R6为氢、甲基、或具有式(Q)、(R)或(S)的部分。在另一实施例中，p是0。在另一实施例中，p为1，并且R5为氧代或未取代的C1-3烷基。在又一个实施例中，R4为C1-6烷基。在又一个实施例中，m和n各自为1。在又一个实施例中，m为2并且n为1。在又一个实施例中，m为1并且n为2。在又一个实施例中，两个R5一起形成如本文所述的1至2碳桥。在一个实施例中，式(II1)化合物具有如本文所述的式(II1*)。
在一个实施例中，化合物具有下式：
/>
或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐，其中R1为具有式(A1)、(A2)或(B)的部分；R8为具有式(D1)、(D2)、(D3)、(D4)、(D5)、(E)、(G)或(G1)的部分；并且X为NR6，其中R6为氢、甲基、或具有式(Q)、(R)或(S)的部分。在另一实施例中，p是0。在另一实施例中，p为1，并且R5为氧代或未取代的C1-3烷基。在又一个实施例中，R4为C1-6烷基。在又一个实施例中，两个R5一起形成如本文所述的1至2碳桥。
在一个实施例中，化合物具有下式：
或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐，其中R1为具有式(A1)、(A2)或(B)的部分；R8为具有式(D1)、(D2)、(D3)、(D4)、(D5)、(E)、(G)或(G1)的部分；并且X为NR6，其中R6为氢、甲基、或具有式(Q)、(R)或(S)的部分。在另一实施例中，p是0。在另一实施例中，p为1，并且R5为氧代或未取代的C1-3烷基。在又一个实施例中，R4为C1-6烷基。
在一个实施例中，化合物具有下式：
或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐，其中R1为具有式(A1)、(A2)或(B)的部分；R8为具有式(D1)、(D2)、(D3)、(D4)、(D5)、(E)、(G)或(G1)的部分；并且X为NR6，其中R6为氢、甲基、或具有式(Q)、(R)或(S)的部分。在另一实施例中，p是0。在另一实施例中，p为1，并且R5为氧代或未取代的C1-3烷基。在又一个实施例中，R4为C1-6烷基。
在一个实施例中，化合物具有下式：
或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐，其中R1为具有式(A1)、(A2)或(B)的部分；R8为具有式(D1)、(D2)、(D3)、(D4)、(D5)、(E)、(G)或(G1)的部分；并且X为NR6，其中R6为氢、甲基、或具有式(Q)、(R)或(S)的部分。在另一实施例中，p是0。在另一实施例中，p为1，并且R5为氧代或未取代的C1-3烷基。在又一个实施例中，R4为C1-6烷基。
在一个实施例中，化合物具有下式：
或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐，其中R1为具有式(A1)、(A2)、(B)或(C)的部分；R2为具有式(H)、(J)、(K)、(L)、(M)或(N)的部分，并且X为NR6，其中R6为具有式(Q)、(R)或(S)的部分。在另一实施例中，p是0。在另一实施例中，p为1，并且R5为氧代或未取代的C1-3烷基。在又一个实施例中，R4为C1-6烷基。
在一个实施例中，化合物具有下式：
或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐，其中R1为具有式(A1)、(A2)、(B)或(C)的部分；R2为具有式(H)、(J)、(K)、(L)、(M)或(N)的部分，并且X为NR6，其中R6为具有式(Q)、(R)或(S)的部分。在另一实施例中，p是0。在另一实施例中，p为1，并且R5为氧代或未取代的C1-3烷基。在又一个实施例中，R4为C1-6烷基。
在式(Id)、(Ie)、(Ig)、(Ih)、(Id1)、(Ie1)、(Ig1)、(Ih1)、(Id1*)、(Ie1*)、(Ig1*)和(Ih1*)化合物或其药用盐的一个实施例中，R1为具有(A1)的部分，其中每个R7A独立地为氢、卤素、甲基或CF3，如本文所述。在式(Id)、(Ie)、(Ig)和(Ih)化合物或其药用盐的一个实施例中，R1为具有式(B)的部分，其中每个R7为卤素或甲基，如本文所述。在此类实施例中，R2为具有式(L)、(M)或(N)的部分。在另一个此类实施例中，R2为具有式(H1)、(J)、(K)或(O)的部分。在另一个此类实施例中，R2为具有式(P)的部分。在此类实施例中，X为NR6，其中R6为氢、甲基、或具有式(Q)、(R)或(S)的部分。
在一个实施例中，式(Id)、(Ie)、(Ig)、(Ih)、(Id1)、(Ie1)、(Ig1)、(Ih1)、(Id1*)、(Ie1*)、(Ig1*)和(Ih1*)化合物或其药用盐、或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐，R1为具有式(A1)、(A2)、(B)或(C)的部分；R8为具有式(D)、(D1)、(D2)、(D3)、(E)或(G)的部分；并且X为NR6，其中R6为具有式(Q)、(R)或(S)的部分。在另一实施例中，p是0。在另一实施例中，p为1，并且R5为氧代或未取代的C1-3烷基。在又一个实施例中，R4为C1-6烷基。
在式(Id)、(Ie)、(Ig)、(Ih)、(Id1)、(Ie1)、(Ig1)、(Ih1)、(Id1*)、(Ie1*)、(Ig1*)和(Ih1*)化合物或其药用盐的一个实施例中，R1为具有(A1)的部分，其中每个R7A独立地为氢、卤素、甲基或CF3，如本文所述。在式(IId)、(IIe)、(IIg)和(IIh)化合物或其药用盐的一个实施例中，R1为具有式(B)的部分，其中每个R7为卤素或甲基，如本文所述。在此类实施例中，R8为具有式(D1)、(D2)、(D3)、(D4)、(D5)、(E)、(G)或(G1)的部分。在另一个此类实施例中，R8为具有式(F)的部分。在此类实施例中，X为NR6，其中R6为氢、甲基、或具有式(Q)、(R)或(S)的部分。
在一个实施例中，本文所述的化合物的R8为具有式(D)、(D6)、(G)或(E)的部分，如本文所述。
在一个实施例中，本文所述的化合物的R8为具有式D1、D2或D3的部分，如本文所述。
在另一实施例中，本文所述的化合物的R8为具有式D6的部分，如本文所述。
在一个实施例中，本文所述的化合物的R8为：
本文进一步提供了下式的化合物：
/>
其中R3、R4、R5、R7A、X和P如本文所定义，并且R8为：
或其立体异构体。
在一个实施例中，如本文所述的式(I)化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐对KRas G12D突变蛋白的选择性为对野生型(WT)KRas蛋白的至少5、10、25、50、100、250、500、700、1000、1300、1500、2000或3000倍。
在一个实施例中，式(I)化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐为表1的化合物。
表1：
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在一个实施例中，式(I)化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐为表2的化合物。
表2：
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在一个实施例中，式(I)化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐为表3的化合物。
表3：
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化合物的合成
本公开的如本文所述的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐可通过下文所示和所述的示例性合成反应方案中描述的各种方法进行制备。用于制备这些化合物的起始原料和试剂通常可以从商业供应商(诸如Aldrich Chemical Co.)获得，或者通过本领域技术人员已知的方法，按照参考文献中所述的方法制备，诸如Fieser andFieser’s Reagents for Organic Synthesis；Wiley&Sons:New York,第1-21卷；R.C.LaRock,Comprehensive Organic Transformations,第2版,Wiley-VCH,New York1999；Comprehensive Organic Synthesis,B.Trost和I.Fleming(编),第1-9卷,Pergamon,Oxford,1991；Comprehensive Heterocyclic Chemistry,A.R.Katritzky和C.W.Rees(编)Pergamon,Oxford 1984,第1-9卷；Comprehensive Heterocyclic Chemistry II,A.R.Katritzky和C.W.Rees(编),Pergamon,Oxford 1996,第1-11卷；以及OrganicReactions,Wiley&Sons:New York,1991,第1-40卷。以下合成反应方案仅是对可以合成本文所述的化合物或其药用盐的一些方法的说明，并且参照本文所包含的公开内容，可对这些合成反应方案进行多种修改并且向本领域技术人员提供建议。
可用于合成本文所述的化合物以及必要的试剂和中间体的合成化学转化和保护基团方法(保护和脱保护)包括例如R.Larock,Comprehensive Organic Transformations,VCH Publishers(1989)；T.W.Greene和P.G.M.Wuts,Protective Groups in OrganicSynthesis,第3版,John Wiley and Sons(1999)；以及L.Paquette编,Encyclopedia ofReagents for Organic Synthesis,John Wiley and Sons(1995)及其后续版本中所述的那些。
如本文所述的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐可单独制备或作为包括至少2种，例如，5至1000种化合物或10至100种化合物的化合物文库制备。具有如本文所述的式的如本文所述的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐的文库可通过组合拆分和混合方法或通过使用例如溶液相或固相化学的多种平行合成来制备。因此，根据另一方面，本文提供了包含至少2种如本文所述的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐的化合物文库。
实例提供了用于制备如本文所述的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐的示例性方法。本领域的技术人员应理解，可使用其他合成路线来合成如本文所述的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐。尽管在实例中描述和讨论了特定的起始材料和试剂，但是可替代为其他起始材料和试剂以提供各种衍生物和/或反应条件。此外，鉴于本公开内容，可使用常规化学方法进一步修饰通过所述方法制备的许多示例性化合物。
在制备如本文所述的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐时，可能需要保护中间体的远端官能团(例如，伯胺或仲胺)。此类保护的需求将根据远端官能度的性质以及制备方法的条件而有所不同。合适的氨基保护基团包括乙酰基、三氟乙酰基、叔丁氧羰基(BOC)、苄氧羰基(CBz)和9-芴基亚甲基氧羰基(Fmoc)。可容易地确定对此类保护的需要。有关保护基团及其用途的常规说明，参见T.W.Greene,Protective Groups inOrganic Synthesis,John Wiley&Sons,New York,1991。
在制备如本文所述的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐的方法中，有利的是将反应产物彼此和/或与起始材料分离。通过本领域常见的技术将每个步骤或一系列步骤的期望产物分离和/或纯化至期望的均一度。通常此类分离涉及多相萃取、从溶剂或溶剂混合物结晶、蒸馏、升华、或色谱法。色谱法可涉及任意种方法，包括例如：反相和正相色谱法；尺寸排阻色谱法；离子交换色谱法；高压、中压和低压液相色谱方法和装置；小规模分析性色谱法；模拟移动床(SMB)和制备型薄层或厚层色谱法，以及小规模薄层和快速色谱法技术。
另一类分离方法涉及用试剂处理混合物，选择所述试剂以与期望的产物、未反应的起始材料、反应副产物等结合或以其他方式使期望的产物、未反应的起始材料、反应副产物等为可分离的。此类试剂包括吸附剂或吸收剂，诸如活性炭、分子筛、离子交换介质等。可替代地，所述试剂可以是酸(在碱性材料的情况下)；碱(在酸性材料的情况下)；结合试剂诸如抗体、结合蛋白、选择性螯合剂诸如冠醚；液/液离子萃取试剂(LIX)等。合适的分离方法的选择取决于所涉及材料的性质，诸如蒸馏和升华的沸点和分子量、色谱法中存在还是不存在极性官能团、多相萃取中酸性和碱性介质中材料的稳定性，等等。
可通过方法诸如通过色谱法和/或分级结晶，基于非对映体的物理化学性质差异，将非对映体混合物分离为其单独的非对映体。对映体可通过如下方式分离：通过使对映体混合物与适当的光学活性化合物(例如手性助剂，诸如手性醇或Mosher酰氯)反应，将对映体混合物转化为非对映体混合物，分离非对映体，并将各个的非对映体转化(例如水解)为相应的纯对映体。另外，如本文所述的一些化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐可以是阻转异构体(例如，取代的联芳基)。对映体也可使用手性HPLC柱来分离。
单一的立体异构体，例如基本上不含其立体异构体的对映体，可通过如下方式获得：通过使用诸如形成非对映体的方法，使用光学活性拆分剂来拆分外消旋混合物(Eliel,E.和Wilen,S.“Stereochemistry of Organic Compounds,”John Wiley&Sons,Inc.,NewYork,1994；Lochmuller,C.H.,(1975)J.Chromatogr.,113(3):283-302)。本文所述的手性化合物或其药用盐的外消旋混合物可通过任何合适的方法来分离和离析，所述方法包括：(1)与手性化合物形成离子性非对映体盐，并通过分级结晶或其他方法来分离；(2)与手性衍生试剂形成非对映体化合物，分离所述非对映体，并转化为纯立体异构体；以及(3)在手性条件下对基本上纯的或富集的立体异构体进行直接分离。参见：“DrugStereochemistry,Analytical Methods and Pharmacology,”Irving W.Wainer编,MarcelDekker,Inc.,New York(1993)。
根据方法(1)，非对映体盐可通过如下方式形成：使对映异构纯的手性碱诸如马钱子碱(brucine)、奎宁、麻黄碱、番木鳖碱(strychnine)、α-甲基-β-苯基乙胺(安非他明)等与带有酸性官能团诸如羧酸和磺酸的不对称化合物反应。可通过分级结晶或离子色谱法来诱导非对映体盐分离。对于分离氨基化合物的光学异构体而言，手性羧酸或磺酸诸如樟脑磺酸、酒石酸、扁桃酸或乳酸的加入可引起非对映体盐的形成。
可替代地，通过方法(2)，使待解析的底物与手性化合物的一种对映体反应以形成非对映体对(E.和Wilen,S.“Stereochemistry of Organic Compounds”,John Wiley&Sons,Inc.,1994,p.322)。非对映体化合物可通过如下方式形成：使不对称化合物与对映异构纯的手性衍生试剂诸如薄荷基衍生物反应，之后分离非对映体并水解，以得到纯的或富集的对映体。确定光学纯度的方法涉及制备外消旋混合物的手性酯，诸如薄荷基酯，例如在碱的存在下制备(-)氯甲酸薄荷基酯，或Mosher酯、α-甲氧基-α-(三氟甲基)苯基乙酸酯(Jacob III.J.Org.Chem.(1982)47:4165)，并且分析1H NMR谱以确定两种阻转异构的对映体或非对映体的存在。阻转异构化合物的稳定非对映体可通过正相和反相色谱法，按照用于分离阻转异构的萘基-异喹啉的方法(WO 96/15111)进行分离和离析。通过方法(3)，两种对映体的外消旋混合物可通过使用手性固定相的色谱法进行分离(“Chiral LiquidChromatography”(1989)W.J.Lough编,Chapman and Hall,New York；Okamoto,J.Chromatogr.,(1990)513:375-378)。富集的或纯化的对映体可通过用于辨别带有不对称碳原子的其他手性分子的方法(诸如旋光性或圆二色性)进行辨别。
本文所述的化学反应可容易适用于制备本文所述的其他化合物及其药用盐。例如，通过对本领域的技术人员显而易见的修改，例如，通过适当地保护干扰基团、利用本领域中已知的其他合适的试剂或通过对反应条件进行常规修改，可成功地实现根据本文所述的非示例性化合物及其药用盐的合成。替代性地，本文所公开的或本领域已知的其他反应将被视为适用于制备本文所述的其他化合物及其药用盐。
药物制剂
本文还提供了药物组合物，这些药物组合物包含如本文所述的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐以及一种或多种药用赋形剂。
可根据标准药学实践将如本文所述的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐配制为药物组合物。因此，本文进一步提供了一种药物组合物，该药物组合物包含如本文所述的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐，以及一种或多种药用赋形剂。
典型的制剂通过将如本文所述的化合物或其药用盐与赋形剂混合来制备。合适的载体、稀释剂和赋形剂包括但不限于诸如碳水化合物、蜡、水溶性和/或可溶胀的聚合物、亲水或疏水材料、明胶、油、溶剂、水等材料。所使用的特定赋形剂将取决于施用如本文所述化合物或其药用盐的方式和目的。一般而言，基于施用于哺乳动物的公认安全的溶剂(GRAS)来选择溶剂。通常，安全溶剂是无毒的水性溶剂，例如水和其他可溶于水或与水混溶的无毒溶剂。合适的水性溶剂包括水、乙醇、丙二醇、聚乙二醇(例如PEG 400、PEG 300)等及其混合物。制剂还可包含一种或多种缓冲剂、稳定剂、表面活性剂、润湿剂、润滑剂、乳化剂、悬浮剂、防腐剂、抗氧化剂、不透明剂、助流剂、加工助剂、着色剂、甜味剂、加香剂、调味剂和其他已知的添加剂，以提供美观的药物(即，本文所述的化合物或其药物组合物)展示或有助于药物产品(例如，药物)的制备。
可以使用常规的溶解和混合程序来制备制剂。例如，在上述一种或多种赋形剂的存在下，将原料药(即，如本文所述的化合物或其药用盐、或其稳定形式(例如，与环糊精衍生物或其他已知的络合剂的复合物))溶解在合适的溶剂中。如本文所述的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐通常配制成药用剂型，以提供易于控制的药物剂量，并且使患者能够依从处方方案。
根据用于施用药物的方法，可以多种方式包装用于施用的药物组合物(或制剂)。通常，用于分配的物品包括其中以适当形式沉积有药物制剂的容器。合适的容器包括诸如瓶(塑料和玻璃)、小药囊、安瓿瓶、塑料袋、金属圆筒等的材料。容器还可包括防篡改(tamper-proof)组件，以防止不慎接触包装的内容物。另外，容器上设置有描述容器内容物的标签。标签上还可包括适当的警告。
可将如本文所述的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐的药物制剂制备成用于各种施用途径和施用类型。例如，具有期望纯度的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐可任选地与一种或多种药用赋形剂(Remington'sPharmaceutical Sciences(1980)第16版，Osol,A.编)以冻干制剂、研磨粉末或水溶液的形式混合。可通过在环境温度下以适当的pH值和期望的纯度与生理上可接受的载体(即，在所采用的剂量和浓度下对受体无毒的载体)混合以进行配制。制剂的pH主要取决于化合物的特定用途和浓度，但是可在约3至约8的范围内。例如，在pH 5的乙酸盐缓冲剂中配制可为一个合适的实施例。
药物组合物通常可作为固体组合物、冻干制剂或作为水溶液储存。
本文所述的药物组合物可按符合良好医疗实践的方式，即用量、浓度、时间表、疗程、媒介物和施用途径来配制、给药和施用。在这种情况下需要考虑的因素包括所治疗的特定疾患、所治疗的特定哺乳动物、个体患者的临床病症、疾患的原因、药剂的递送部位、施用方法、施用的时间安排，以及执业医师已知的其他因素。要施用的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐的有效量将受到这些考虑因素的影响，并且是改善或治疗过度增殖性疾患所必需的最小量。
一般来说，肠胃外施用的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐的每剂初始药物有效量将在每天约0.01mg/kg至100mg/kg(即约0.1mg/kg患者体重至20mg/kg患者体重)的范围内，并且所使用的化合物的典型初始范围为0.3mg/kg/天至15mg/kg/天。在另一实施例中，本文所述的药物组合物包含有效量的本文所述的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐，该量为约：1mg-10mg；10mg-25mg；20mg-50mg；50mg-75mg；70mg-100mg；100mg-150mg；100mg-200mg；100mg-500mg；200mg-500mg；250mg-500mg；500mg-1000mg；或750mg-1000mg。
可接受的药用赋形剂在使用的剂量和浓度下对受体无毒，并且包括缓冲剂，诸如磷酸盐、柠檬酸盐和其他有机酸；抗氧化剂，包括抗坏血酸和蛋氨酸；防腐剂(诸如十八烷基二甲基苄基氯化铵；氯化六甲双铵；苯扎氯铵；苄索氯铵；苯酚、丁醇或苄醇；对羟基苯甲酸烷基酯，诸如对羟基苯甲酸甲酯或对羟基苯甲酸丙酯；儿茶酚；间苯二酚；环己醇；3-戊醇；和间甲酚)；低分子量(少于约10个残基)多肽；蛋白质，诸如血清白蛋白、明胶或免疫球蛋白；亲水性聚合物，诸如聚乙烯吡咯烷酮；氨基酸，诸如甘氨酸、谷氨酰胺、天冬酰胺、组氨酸、精氨酸或赖氨酸；单糖、二糖和其他碳水化合物，包括葡萄糖、甘露糖或糊精；螯合剂，诸如EDTA；糖，诸如蔗糖、甘露醇、海藻糖或山梨糖醇；成盐抗衡离子，诸如钠；金属络合物(例如，锌蛋白络合物)；和/或非离子表面活性剂，诸如TWEENTM、PLURONICSTM或聚乙二醇(PEG)。活性药物成分也可包裹于例如通过凝聚技术或通过界面聚合制备的微胶囊(例如，分别为羟甲基纤维素或明胶微胶囊和聚(甲基丙烯酸甲酯)微胶囊)中，被包裹于胶体药物递送系统(例如，脂质体、白蛋白微球、微乳剂、纳米粒子和纳米胶囊)中或粗乳液中。此类技术公开于Remington's Pharmaceutical Sciences第16版，Osol,A.编(1980)中。
可制备如本文所述的化合物或其药用盐的缓释制剂。缓释制剂的合适示例包括含有如本文所述的化合物或其药用盐的固态疏水聚合物的半透性基质，该基质是例如膜或微胶囊等成型制品的形式。缓释基质的示例包括聚酯、水凝胶(例如，聚(2-羟基乙基-甲基丙烯酸酯)或聚(乙烯醇))、聚乳酸(US 3773919)、L-谷氨酸和γ-乙基-L-谷氨酸的共聚物、不可降解的乙烯-乙酸乙烯酯、可降解的乳酸-乙醇酸共聚物，诸如LUPRON DEPOTTM(由乳酸-乙醇酸共聚物和醋酸亮丙瑞林组成的可注射微球)以及聚-D-(-)-3-羟基丁酸。
该制剂包括适合于本文详述的施用途径的制剂。制剂可方便地以单位剂量的形式存在，并且可通过任何方法制备。技术和配方一般载于Remington's PharmaceuticalSciences(Mack Publishing Co.,Easton,PA)中。这样的方法包括使活性成分与构成一种或多种辅助成分的载体缔合的步骤。一般而言，制剂的制备方法是使活性成分与液态载体或细分的固体载体或二者均匀而紧密地结合，然后，如有必要，将产物成型。
如本文所述的适合口服施用的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐的制剂可制备成离散的单位，诸如丸剂、胶囊、扁囊或片剂，每个单位均含有预定量的此类化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐。可以通过在合适的机器中将自由流动形式(例如粉末或颗粒，任选地与粘合剂、润滑剂、惰性稀释剂、防腐剂、表面活性剂或分散剂混合)的活性成分压缩来制备压制的片剂。模制片剂可以通过在合适的机器中模制用惰性液体稀释剂润湿的粉状活性成分的混合物来制备。片剂可以任选地被包衣或刻痕，并且可以任选地被配制以提供活性成分从其中的缓慢或受控释放。可以制备片剂、口含片、锭剂、水性或油性悬浮液、可分散的粉剂或颗粒剂、乳剂、硬胶囊或软胶囊，例如明胶胶囊，糖浆或酏剂用于口服。如本文所述的用于口服的化合物或其药用盐的制剂可根据用于制备药物组合物的任何方法来制备，并且此类组合物可含有一种或多种制剂，包括甜味剂、调味剂、着色剂和防腐剂以提供可口的制剂。包含与适合于制备片剂的无毒药用赋形剂混合的活性成分的片剂是可接受的。这些赋形剂可以是例如惰性稀释剂，例如碳酸钙或碳酸钠、乳糖、磷酸钙或磷酸钠；制粒和崩解剂，例如玉米淀粉或海藻酸；粘合剂，例如淀粉、明胶或阿拉伯胶；润滑剂，例如硬脂酸镁、硬脂酸或滑石粉。片剂可以是不包衣的，也可以通过包括微囊化在内的已知技术进行包衣，以延迟在胃肠道中的崩解和吸收，从而在更长的时间内提供持续的作用。例如，可以使用延时材料，例如单独或与蜡一起使用的单硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯。
为了治疗眼睛或其他外部组织(例如口腔和皮肤)，该制剂优选以局部软膏或霜剂剂的形式施用，其含有例如0.075％w/w至20％w/w含量的活性成分。当配制成软膏时，活性成分可与石蜡或与水混溶的软膏基质一起使用。可替代地，可以将活性成分与水包油霜剂基质一起配制成霜剂。如果需要，乳膏基质的水相可包括多元醇，即具有两个或更多个羟基基团的醇，例如丙二醇、1,3-丁二醇、甘露醇、山梨糖醇、甘油和聚乙二醇(包括PEG 400)及其混合物。局部制剂可以期望地包括增强活性成分通过皮肤或其他受影响区域的吸收或渗透的化合物。此类皮肤渗透促进剂的示例包括二甲基亚砜和相关类似物。本文提供组合物的乳液的油相可由已知成分以已知方式构成。尽管该相可以仅包含乳化剂，但是期望地包含至少一种乳化剂与脂肪或油或与脂肪和油两者的混合物。优选地，将亲水性乳化剂与亲脂性乳化剂一起用作稳定剂。还优选同时包括油和脂肪。具有或不具有稳定剂的乳化剂一起构成所谓的乳化蜡，并且蜡与油和脂肪一起构成所谓的乳化软膏基质，形成霜剂制剂的油性分散相。适用于本文所述制剂的乳化剂和乳液稳定剂包括60、/>80、鲸蜡硬脂醇、苄醇、肉豆蔻醇、单硬脂酸甘油酯和十二烷基硫酸钠。
包含如本文所述的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐的水性悬浮液可含有与适合于制造水性悬浮液的赋形剂混合的活性物质。这样的赋形剂包括悬浮剂，例如羧甲基纤维素钠、交联羧甲基纤维素、聚维酮、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、海藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮、黄芪胶和阿拉伯胶，以及分散剂或湿润剂，例如天然存在的磷脂(例如卵磷脂)、环氧烷与脂肪酸的缩合产物(例如，聚氧乙烯硬脂酸酯)、环氧乙烷与长链脂族醇的缩合产物(例如，十七烷乙烯氧基鲸醇)、环氧乙烷与衍生自脂肪的偏酯和己糖醇酐的缩合产物(例如，聚氧乙烯脱水山梨糖醇单油酸酯)。水性悬浮液还可含有一种或多种防腐剂诸如对羟基苯甲酸乙酯或对羟基苯甲酸正丙酯、一种或多种着色剂、一种或多种调味剂，以及一种或多种甜味剂诸如蔗糖或糖精。
如本文所述的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐的药物组合物可为无菌注射制剂的形式，诸如无菌注射水性或油质悬浮液。该悬浮液可使用上面已经提到的合适的分散剂或湿润剂和悬浮剂来配制。无菌注射制剂还可以是在无毒的肠胃外可接受的稀释剂或溶剂中的无菌注射溶液或混悬液，例如在1,3-丁二醇中的溶液，或制成冻干粉。可以使用的可接受的媒介物和溶剂是水、林格氏溶液和等渗氯化钠溶液。另外，无菌不挥发油常规上可以用作溶剂或悬浮介质。为此，可以使用任何温和的不挥发性油，包括合成的甘油单酯或甘油二酯。另外，脂肪酸如油酸同样可以用于注射剂的制备中。
可与载体材料组合以产生单一剂型的活性成分的量将根据所治疗的宿主和特定的施用方式而变化。例如，用于人口服施用的延时释放制剂可含有约1至1000mg与适当和方便量的载体物质复配的活性物质，该载体物质可占总组合物的约5％至约95％(重量：重量)。可以制备药物组合物以提供易于测量的施用量。例如，用于静脉内输注的水溶液可以每毫升溶液包含约3至500μg的活性成分，以便可以约30mL/hr的速率输注合适的体积。
适于肠胃外施用的制剂包括水性和非水性无菌注射溶液，其可以含有抗氧化剂、缓冲剂、抑菌剂和溶质，从而使制剂与预期接受者的血液等渗，以及水性和非水性无菌悬浮液，其可以包括悬浮剂和增稠剂。
适用于局部施用于眼睛的制剂还包括滴眼剂，其中活性成分溶解或悬浮在合适的载体中，尤其是活性成分的水性溶剂中。活性成分优选以约0.5％w/w至20％w/w，例如约0.5％w/w至10％w/w，例如约1.5％w/w的浓度存在于此类制剂中。
适于在口腔内局部施用的制剂包括在调味基料(通常是蔗糖和阿拉伯胶或黄芪胶)中包含活性成分的锭剂；在惰性基料(例如明胶和甘油，或蔗糖和阿拉伯胶)中包含活性成分的含片；以及在合适的液体载体中包含活性成分的漱口水。
直肠施用的制剂可以用包含例如可可脂或水杨酸酯的合适的基质呈现为栓剂。
适于肺内或鼻腔施用的制剂具有例如在0.1至500微米的范围内的粒径(包括以0.5微米、1微米、30微米、35微米等增量在0.1微米至500微米的范围内的粒径)，可通过鼻腔快速吸入或通过嘴部吸入达到肺泡囊。合适的制剂包括活性成分的水性或油性溶液。适于气雾剂或干粉剂施用的制剂可根据常规方法制备，并且可与其他治疗剂，例如迄今为止如下所述用于治疗或预防疾患的化合物一起递送。
适于阴道施用的制剂可以呈现为阴道栓、棉条、霜剂、凝胶、糊剂、泡沫或喷雾制剂，除活性成分外还含有认为适当的载体。
制剂可以包装在单位剂量或多剂量容器中，例如密封的安瓿瓶和小瓶中，并且可以在冷冻干燥(冻干)条件下储存，仅需要在使用前添加注射用无菌液体载体，例如水。临时注射溶液和悬浮液由前述类型的无菌粉末、颗粒和片剂制备。优选的单位剂量制剂是含有如本文上文所述的每日剂量或单位每日亚剂量的，或其适当分数的活性成分的那些。
在一个实施例中，将化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐配制为前药。如本文所用的术语前药是指可在生物条件下水解、氧化或裂解以提供该化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐的化合物的衍生物。如本文所定义的前药包括包含一个或多个部分的衍生物，所述一个或多个部分调节或改善一种或多种物理、生理或药物特性(诸如但不限于溶解性、渗透性、摄取、生物分布、代谢稳定性、起效或一些其他类药性特性)并且转化为如本文所提供的生物活性物质或更具生物活性的物质。在一个实施例中，本文的前药在释放化合物或其药用盐之前不具有生物活性。
施用方法
本文所述的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐可通过适合于待治疗病症的任何途径施用。合适的途径包括口服、肠胃外(包括皮下、肌内、静脉内(IV)、动脉内、皮内、鞘内和硬膜外)、透皮、直肠、鼻部、局部(包括颊面和舌下)、阴道、腹膜内、肺内和鼻内。在一个实施例中，本文所述的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐口服施用或通过IV施用。对于局部免疫抑制治疗，可通过病变内施用来施用化合物，包括在移植前灌注或以其他方式使移植物与抑制剂接触。应当理解，优选的途径可随着例如接受者的病症而变化。在口服施用化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐的情况下，可将该化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐与药用载体或赋形剂配制成丸剂、胶囊、片剂等。在肠胃外施用化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐的情况下，可将该化合物或其药用盐与药用肠胃外媒介物以单位剂量注射形式配制，如下所详述。
因此，在一个方面，本文提供了一种药物组合物，其包含如本文所述的化合物或其药用盐，以及一种或多种药用赋形剂。在一个实施例中，本文所述的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐作为能够口服或肠胃外施用给受试者的药物组合物施用。本文所述的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐可配制用于局部或肠胃外使用，其中将化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐溶解或以其他方式悬浮在适用于注射剂、混悬剂、糖浆、霜剂、软膏、凝胶、喷雾剂、溶液和乳剂的溶液中。
口服施用可促进患者服用化合物(例如配制成药物组合物)的依从性，从而增加依从性和功效。包含本文所述化合物的口服药物组合物包括但不限于(例如，包衣的、未包衣的和可咀嚼的)片剂和胶囊(例如，硬明胶胶囊、软明胶胶囊、肠溶包衣胶囊和缓释胶囊)。可通过直接压片、通过湿法制粒、或通过干法制粒来制备片剂。可配制包含本文所述化合物的口服药物组合物以延迟或延长释放。
治疗人类患者的剂量范围可以为约10mg至约1000mg的本文所述的化合物。化合物的典型剂量可为约100mg至约300mg。可每天一次(QID)、每天两次(BID)或更频繁地施用某一剂量，具体取决于药代动力学和药效动力学特性，包括具体化合物的吸收、分布、代谢和排泄。如本文所用，施用是指给药频率，而不是例如本文所述的患者在一剂中必须服用的独立单位的数量。因此，在一些实施例中，患者可服用两个或更多个剂量单位(例如两个或更多个丸剂/片剂/胶囊)QD。另外，毒性因素可能影响剂量和施用方案。口服施用时，丸剂、胶囊或片剂可在指定的时间段内每天或以更低的频率摄入。该方案可重复进行多个治疗周期。
治疗方法和用途
本文所述的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐可用作Ras抑制剂。在一个方面，本文所述的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐可用作KRas抑制剂。在另一方面，本文所述的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐可用作NRas抑制剂。在另一方面，本文所述的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐可用作HRas抑制剂。在一个实施例中，本文所述的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐可用作G12DRas抑制剂和G12D KRas抑制剂。
本文提供了使细胞诸如离体细胞与本文所述的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐接触以抑制细胞中的Ras活性(例如，KRas活性)的方法。在另一实施例中，活性为突变G12D KRas活性。
本文进一步提供了治疗包含KRas突变的癌症的方法，该方法包括向患有此类癌症的患者施用有效量的如本文所述的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐、或药物组合物。在一个实施例中，KRas突变为KRasG12D突变。
在一个实施例中，方法进一步包括在施用本文所述的化合物或其药用盐之前测试来自患者的样品(例如，如本文所述)不存在还是存在KRasG12D突变。在一个此类实施例中，在将患者样品确定为KRasG12D突变呈阳性(例如，存在)之后，向该患者施用本文所述的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐或药物组合物。
本文所述的治疗癌症的方法涉及癌症的治疗，该癌症为诸如急性骨髓性白血病、青少年癌症、儿童肾上腺皮质癌、AIDS相关癌症(例如，淋巴瘤和卡波西肉瘤)、肛门癌、阑尾癌、星形细胞瘤、非典型类畸形横纹肌瘤、基底细胞癌、胆管癌、膀胱癌、骨癌、脑干神经胶质瘤、脑肿瘤、乳腺癌、支气管肿瘤、伯基特淋巴瘤、类癌、胚胎肿瘤、生殖细胞瘤、原发性淋巴瘤、宫颈癌、儿童期癌症、脊索瘤、心脏肿瘤、慢性淋巴细胞性白血病(CLL)、慢性骨髓性白血病(CML)、慢性骨髓增生性病症、结肠癌、结直肠癌、颅咽管瘤、皮肤T细胞淋巴瘤、肝外导管原位癌(DCIS)、胚胎肿瘤、CNS癌、子宫内膜癌、室管膜瘤、食道癌、感觉神经母细胞瘤、尤因肉瘤、颅外生殖细胞瘤、生殖腺外生殖细胞肿瘤、眼癌、骨骼纤维组织细胞瘤、胆囊癌、胃癌、胃肠道类癌、胃肠道间质瘤(GIST)、生殖细胞肿瘤、妊娠滋养细胞肿瘤、毛细胞白血病、头颈部癌、心脏癌、肝癌、霍奇金淋巴瘤、下咽癌、眼内黑素瘤、胰岛细胞瘤、胰腺神经内分泌肿瘤、肾癌、喉癌、嘴唇和口腔癌、小叶原位癌(LCIS)、肺癌、淋巴瘤、原发性隐匿转移性鳞状颈癌、中线癌、口癌、多发性内分泌肿瘤、多发性骨髓瘤/浆细胞瘤、蕈样肉芽肿、骨髓增生异常综合征、骨髓增生异常/骨髓增生性肿瘤、多发性骨髓瘤、梅克尔细胞癌、恶性间皮瘤、骨和骨肉瘤的恶性纤维组织细胞瘤、鼻腔和鼻旁窦癌、鼻咽癌、神经母细胞瘤、非霍奇金淋巴瘤、非小细胞肺癌(NSCLC)、口腔癌、口咽癌、卵巢癌、胰腺癌、乳头状瘤病、副神经节瘤、甲状旁腺癌、阴茎癌、咽喉癌、胸膜肺母细胞瘤、原发性中枢神经系统(CNS)淋巴瘤、前列腺癌、直肠癌、移行细胞癌、视网膜母细胞瘤、横纹肌肉瘤、唾液腺癌、皮肤癌、小细胞肺癌、小肠癌、软组织肉瘤、T细胞淋巴瘤、睾丸癌、咽喉癌、胸腺瘤和胸腺癌、甲状腺癌、肾盂和输尿管的移行细胞癌、滋养细胞肿瘤、儿童罕见癌症、尿道癌、子宫肉瘤、阴道癌、外阴癌或病毒诱发的癌症。
在一些实施例中，癌症为血液学癌症、胰腺癌、MYH相关性息肉病、结直肠癌或肺癌。在一个实施例中，癌症为肺癌、结直肠癌、阑尾癌或胰腺癌。在一个实施例中，癌症为胰腺癌、肺癌或结肠癌。肺癌可为腺癌、非小细胞肺癌(NSCLC)或小细胞肺癌(SCLC)。在一个实施例中，癌症为结直肠癌。在另一实施例中，癌症为胰腺癌。在一个实施例中，癌症为肺腺癌。
本文提供的方法还可包括在施用本文所述的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐之前测试来自患者的样品不存在还是存在KRasG12D突变。在一个实施例中，在患者样品显示存在KRasG12D突变之后，向患者施用化合物、其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐、或药物组合物。在一个实施例中，除非患者样品包含KRasG12D突变，否则不施用本文所述的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐。
在一个实施例中，癌症为胰腺癌、肺癌或结直肠癌。在另一实施例中，癌症为组织未定性的(包含KRasG12D突变)。
本文进一步提供了在患有包含KRasG12D突变的肺癌的患者中治疗此类肺癌的方法，该方法包括向该患者施用治疗有效量的本文所述的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐(或包含该化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐的药物组合物)。在一个实施例中，肺癌为非小细胞肺癌(NSCLC)。NSCLC可为例如腺癌、鳞状细胞肺癌或大细胞肺癌。在另一实施例中，肺癌为小细胞肺癌。在又一实施例中，肺癌为腺瘤、类癌瘤或未分化癌。肺癌可为I期或II期肺癌。在一实施例中，肺癌为III期或IV期肺癌。本文所提供的方法包括将化合物作为1L疗法给药。
本文还进一步提供了在患有包含KRasG12D突变的胰腺癌的患者中治疗此类胰腺癌的方法，该方法包括向该患者施用治疗有效量的本文所述的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐。在一个实施例中，患者既往接受过放射治疗和一种或多种化学治疗剂的治疗。在一个实施例中，胰腺癌处于0期、I期或II期。在另一个实施例中，胰腺癌处于III期或IV期。
本文还进一步提供了在患有包含KRasG12D突变的结肠癌的患者中治疗此类结肠癌的方法，该方法包括向该患者施用治疗有效量的本文所述的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐。在一个实施例中，结肠癌处于I期或II期。在另一个实施例中，结肠癌处于III期或IV期。
本文进一步提供了治疗包含KRasG12D突变的组织未定性癌的方法。在此类方法的一实施例中，该方法包括：
(a)确定取自疑似诊断为癌症的患者的样品中不存在还是存在KRasG12D突变；以及
(b)向患者施用有效量的本文所述的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐。
在此类方法的一实施例中，患者被诊断为患有本文所述的癌症。在此类方法的另一实施例中，样品为取自受试者的肿瘤样品。在一个此类实施例中，在施用任何疗法之前采集样品。在另一个此类实施例中，在施用本文所述的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐之前以及在施用另一种化疗剂之后采集样品。在此类方法的另一实施例中，本文所述的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐按如本文所提供的方式(例如，口服或IV)施用。
本文还提供了用作治疗活性物质的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐。在一个此类实施例中，化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐可用于治疗性治疗包含KRasG12D突变的癌症。本文进一步提供了用于治疗性和/或预防性治疗包含KRasG12D突变的癌症的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐。在一个实施例中，化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐用于制备用于治疗包含KRasG12D突变的癌症的药物。本文还进一步提供了如本文所述的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐在制造用于抑制肿瘤转移的药物中的用途。
本文进一步提供了用于抑制肿瘤转移的方法，该方法包括向患有肿瘤的患者施用治疗有效量的本文所述的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐。在一个实施例中，抑制是针对包含KRasG12D突变的肿瘤。在另一实施例中，本文所述的抑制患者的肿瘤转移导致肿瘤大小减小。在另一实施例中，本文所述的抑制患者的肿瘤转移导致肿瘤大小稳定(例如，不再进一步生长)。在另一实施例中，本文所述的抑制患者的肿瘤转移导致癌症和/或其症状的缓解。
本文进一步提供了用于抑制细胞群增殖的方法，该方法包括使该细胞群与本文所述的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐接触。在一个实施例中，细胞群在人类患者中。在另一实施例中，细胞群包含KRasG12D突变。
本文进一步提供了抑制需要治疗的患者中的KRas的方法，这些方法包括向该患者施用治疗有效量的本文所述的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐。在一个实施例中，所抑制的KRas为KRasG12D。在另一实施例中，抑制KRas导致减小的肿瘤大小。在另一实施例中，抑制KRas导致癌症和/或其症状的缓解。
本文进一步提供了用于调节KRas突变蛋白的活性的方法，该方法包括使该突变蛋白与本文所述的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐反应。在一个实施例中，突变蛋白包含KRasG12D突变。在一个实施例中，在与本文所述的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐接触后，KRas的活性降低。在另一实施例中，KRas突变蛋白活性的下调治疗本文所述的患者的本文所述的癌症。在另一实施例中，KRas突变蛋白活性的下调导致减小的肿瘤大小。在另一实施例中，KRas突变蛋白活性的下调导致本文所述的癌症和/或其症状的缓解。
在一些实施例中，本文提供的方法包括通过使细胞与足以抑制所述细胞中KRasG12D活性的量的本文所述的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐接触来抑制所述细胞中的KRasG12D活性。在一些实施例中，本文提供的方法包括通过使组织与足以抑制所述组织中KRasG12D活性的量的本文所述的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐接触来抑制所述组织中的KRasG12D活性。在一些实施例中，本文提供的方法包括通过使本文所述的患者与足以抑制所述患者中KRasG12D活性的量的本文所述的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐接触来抑制所述患者中的KRasG12D活性。
本文进一步提供了用于制备经标记的KRasG12D突变蛋白的方法，该方法包括使KRasG12D突变蛋白与经标记的本文所述的化合物、或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐反应，以产生经标记的KRasG12D突变蛋白。在一个实施例中，标记物为显像剂。在一个实施例中，标记的KRasG12D可用于检测患者样品中不存在还是存在G12D突变KRas，从而检测存在还是不存在由突变KRas介导的癌症。
本文还进一步提供了抑制由Ras介导的细胞信号传导的方法。在一个实施例中，方法包括使细胞与有效量的本文公开的一种或多种化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐接触。抑制Ras介导的信号转导可以通过本领域已知的多种方式进行评估和证明。非限制性实例包括显示(a)Ras的GTP酶活性降低；(b)GTP结合亲和力降低或GDP结合亲和力提高；(c)GTP的K off升高或GDP的K off降低；(d)Ras途径下游的信号转导分子水平降低，诸如pMEK水平降低；和/或(e)Ras复合物与下游信号传导分子(包括但不限于Raf)的结合降低。试剂盒和可商购获得的测定可用于确定上述一种或多种。
还已经在血液恶性肿瘤(例如，影响血液、骨髓和/或淋巴结的癌症)中鉴定出KRas突变，包括G12D突变体。因此，某些实施例涉及向需要治疗血液恶性肿瘤的患者施用如本文所述的所公开的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐(例如，以药物组合物的形式)。此类恶性肿瘤包括但不限于白血病和淋巴瘤。例如，目前公开的化合物可用于治疗疾病，诸如急性淋巴母细胞白血病(ALL)、急性骨髓性白血病(AML)、慢性淋巴细胞性白血病(CLL)、小淋巴细胞淋巴瘤(SLL)、慢性骨髓性白血病(CML)、急性单核细胞白血病(AMoL)和/或其他白血病。在其他实施例中，本文所述的化合物或其药用盐可用于治疗淋巴瘤，诸如霍奇金淋巴瘤或非霍奇金淋巴瘤的所有亚型。
可通过评定编码KRas蛋白的核苷酸序列，通过评定KRas蛋白的氨基酸序列，或通过评定假设的KRas突变蛋白的特征，来确定肿瘤或癌症是否包含KRasG12D突变。野生型人KRas的序列(例如，登录号NP203524)是本领域已知的。
用于检测KRas核苷酸序列中突变的方法是本领域技术人员已知的。这些方法包括但不限于聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)测定、聚合酶链式反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)测定、实时PCR测定、PCR测序、突变体等位基因特异性PCR扩增(MASA)测定、直接测序、引物延伸反应、电泳、寡核苷酸连接测定、杂交测定、TaqMan测定、SNP基因分型测定、高分辨率熔融测定和微阵列分析。在一些实施例中，通过实时PCR评估样品的G12D KRas突变。在实时PCR中，使用对KRas G12D突变具有特异性的荧光探针。当存在突变时，探针结合并检测到荧光。在一些实施例中，使用KRas基因中特定区(例如，外显子2和/或外显子3)的直接测序方法鉴定KRas G12D突变。该技术将鉴定出测序区中所有可能的突变。
用于确定肿瘤或癌症是否包含KRasG12D突变的方法可以使用多种样品。在一些实施例中，所述样品取自患有肿瘤或癌症的受试者。在一些实施例中，所述样品是新鲜的肿瘤/癌症样品。在一些实施例中，所述样品是冷冻的肿瘤/癌症样品。在一些实施例中，所述样品是福尔马林固定的石蜡包埋的样品。在一些实施例中，所述样品被处理成细胞裂解物。在一些实施例中，所述样品被处理成DNA或RNA。
本文进一步提供了本文所述的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐在制造用于治疗癌症的药物中的用途。在一些实施例中，药物被配制用于口服施用。在一些实施例中，药物被配制用于注射(例如，IV施用)。在一些实施例中，癌症包含KRasG12D突变。在一些实施例中，癌症为血液学癌症、胰腺癌、MYH相关性息肉病、结直肠癌或肺癌。在一个实施例中，癌症为肺癌、结直肠癌或胰腺癌。在一个实施例中，癌症为结直肠癌。在另一实施例中，癌症为胰腺癌。在一些实施例中，癌症为肺腺癌。在一些实施例中，提供了本文所述的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐在制造用于抑制肿瘤转移的药物中的用途。
本文进一步提供了本文所述的化合物或其药用盐，其在治疗癌症的方法中使用。在一个实施例中，癌症包含KRasG12D突变。在一个此类实施例中，癌症为血液学癌症、胰腺癌、MYH相关息肉病、结直肠癌或肺癌。在一个此类实施例中，癌症为肺癌、结直肠癌或胰腺癌。在一个此类实施例中，癌症为结直肠癌。在一个此类实施例中，癌症为胰腺癌。在一此类实施例中，癌症为肺腺癌。
组合疗法
本文所述的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐可以单独使用或与其他治疗剂组合用于治疗本文所述的疾病或疾患。药物组合制剂或给药方案的第二化合物优选地具有与本文所述的化合物或其药用盐互补的活性，使得它们不会彼此产生不良影响。组合疗法可以提供“协同作用”并证明是“协同的”，即，当活性成分一起使用时所达到的效果大于单独使用化合物所产生的效果之和。
组合疗法可以同时或按顺序进行施用。当顺序施用时，可以两次或更多次施用组合物。组合施用包括使用单独的制剂或单一药物制剂的共同施用，以及以任何顺序连续施用，其中优选在一定时间段内两种(或全部)活性剂同时发挥其生物学活性。
本文的组合疗法包括施用本文所述的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐，以及使用至少一种其他治疗方法。将选择本文所述的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐和一种或多种其他药物活性药剂的量以及施用的相对时间，以获得预期组合治疗效果。
在该方法的各种实施例中，另外的治疗剂是表皮生长因子受体(EGFR)抑制剂、磷脂酰肌醇激酶(PI3K)抑制剂、胰岛素样生长因子受体(IGF1R)抑制剂、Janus激酶(JAK)抑制剂、Met激酶抑制剂、SRC家族激酶抑制剂、丝裂原活化蛋白激酶(MEK)抑制剂、细胞外信号调节激酶(ERK)抑制剂、拓扑异构酶抑制剂(诸如伊立替康，或诸如依托泊苷，或诸如多柔比星)、紫杉烷类(诸如抗微管剂，包括紫杉醇和多西他赛)、抗代谢剂(诸如5-FU或吉西他滨)或烷化剂(诸如顺铂或环磷酰胺)或紫杉烷类。
在一些实施例中，另外的治疗剂是表皮生长因子受体(EGFR)抑制剂，诸如厄洛替尼或诸如阿法替尼。在一些实施例中，另外的治疗剂为吉非替尼、奥希替尼或达克替尼。在一些实施例中，另外的治疗剂是单克隆抗体，诸如西妥昔单抗(Erbitux)或帕尼单抗(Vectibix)。在一些实施例中，GFR抑制剂是双重或全HER抑制剂。在其他实施例中，另外的治疗剂为磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)抑制剂，诸如GDC-0077、GDC-0941、MLN1117、BYL719(阿培利司，Alpelisib)或BKM120(布帕尼西，Buparlisib)。GDC-0941是指2-(1H-吲唑-4-基)-6-(4-甲磺酰基-哌嗪-1-基甲基)-4-吗啉-4-基-噻吩并[3,2-d]嘧啶或其盐(例如，二甲磺酸盐)。
在另一些实施例中，另外的治疗剂为胰岛素样生长因子受体(IGF1R)抑制剂。例如，在一些实施例中，胰岛素样生长因子受体(IGF1R)抑制剂为NVP-AEW541。在其他实施例中，另外的治疗剂是IGOSI-906(Linsitinib)、BMS-754807，或在其他实施例中，另外的治疗剂是对IGF1R具有特异性的中和性单克隆抗体，诸如AMG-479(加尼妥单抗(ganitumab))、CP-751,871(芬妥木单抗(figitumumab))、IMC-A12(西妥木单抗(cixutumumab))、MK-0646(达洛珠单抗(dalotuzumab))或R-1507(罗妥木单抗(robatumumab))。
在一些其他实施例中，另外的治疗剂是Janus激酶(JAK)抑制剂。在一些实施例中，另外的治疗剂是CYT387、GLPG0634、巴瑞替尼(Baricitinib)、来他替尼(Lestaurtinib)、momelotinib、帕克替尼(Pacritinib)、鲁索替尼(Ruxolitinib)或TG101348。
在一些其他实施例中，另外的治疗剂是抗glypican 3抗体。在一些实施例中，抗glypican 3抗体是钴妥珠单抗(codrituzumab)。
在一些其他实施例中，另外的治疗剂是抗体药物缀合物(ADC)。在一些实施例中，ADC是泊洛妥珠单抗(polatuzumab vedoti)、RG7986、RG7882、RG6109或RO7172369。
在一些其他实施例中，另外的治疗剂是MDM2拮抗剂。在一些实施例中，MDM2拮抗剂是idasanutlin。
在一些其他实施例中，另外的治疗剂是抗CD40的激动性抗体。在一些实施例中，抗CD40的激动性抗体是塞鲁单抗(selicrelumab)(RG7876)。
在一些其他实施例中，另外的治疗剂是双特异性抗体。在一些实施例中，双特异性抗体是RG7828(BTCT4465A)、RG7802、RG7386(FAP-DR5)、RG6160、RG6026、ERY974或抗HER2/CD3。
在一些其他实施例中，另外的治疗剂是靶向的免疫细胞因子。在一些实施例中，靶向的免疫细胞因子是RG7813或RG7461。
在一些其他实施例中，另外的治疗剂是靶向集落刺激因子-1受体(CSF-1R)的抗体。在一些实施例中，(CSF-1R)抗体是依米妥珠单抗(emactuzumab)。
在一些其他实施例中，另外的治疗剂是个性化癌症疫苗。在一些实施例中，个性化癌症疫苗是RG6180。
在一些其他实施例中，另外的治疗剂是BET(溴结构域和末端外家族)蛋白(BRD2/3/4/T)的抑制剂。在一些实施例中，BET抑制剂是RG6146。
在一些其他实施例中，另外的治疗剂是被设计为结合TIGIT的抗体。在一些实施例中，抗TIGIT抗体是RG6058(MTIG7192A)。
在一些其他实施例中，另外的治疗剂是选择性雌激素受体降解剂(SERD)。在一些其他实施例中，SERD为RG6047(GDC-0927)或RG6171(GDC-9545,giredestrant)。
在一些其他实施例中，另外的治疗剂是MET激酶抑制剂，诸如克唑替尼(Crizotinib)、替维替尼(tivantinib)、AMG337、卡博替尼(cabozantinib)或foretinib。在其他实施例中，另外的治疗剂是MET中和单克隆抗体，诸如奥那妥珠单抗(onartuzumab)。
在更多的实施例中，另外的治疗剂是SRC家族非受体酪氨酸激酶抑制剂。例如，在一些实施例中，另外的治疗剂为SRC家族非受体酪氨酸激酶亚家族的抑制剂。在该方面，示例性的抑制剂包括达沙替尼(Dasatinib)。在这方面的其他实例包括帕纳替尼(Ponatinib)、塞卡替尼(saracatinib)和博舒替尼(bosutinib)。
在又一些实施例中，另外的治疗剂为丝裂原活化蛋白激酶(MEK)抑制剂。在这些实施例的一些中，丝裂原活化蛋白激酶(MEK)抑制剂是曲美替尼(trametinib)、司美替尼(selumetinib)、(考比替尼)、PD0325901或RO5126766。在其他实施例中，MEK抑制剂是GSK-1120212，也称为曲美替尼。
在又一些实施例中，另外的治疗剂为细胞外信号调节激酶(ERK)抑制剂。在这些实施例的一些中，丝裂原活化蛋白激酶(MEK)抑制剂是SCH722984或GDC-0994。
在其他实施例中，蛋白激酶抑制剂为他塞利昔布(taselisib)、依帕他赛(ipatasertib)、GDC-0575、GDC-5573(HM95573)、RG6114(GDC-0077)、CKI27、阿法替尼、阿昔替尼、阿特珠单抗、贝伐单抗、博舒替尼(Bosutinib)、西妥昔单抗、克唑替尼、达沙替尼、尼洛替尼、福他替尼、吉非替尼、伊马替尼、拉帕替尼、乐伐替尼、依鲁替尼、尼洛替尼、帕尼单抗、帕唑帕尼、哌加他尼钠、兰尼单抗、鲁索替尼、索拉非尼、舒尼替尼、SU6656、曲妥珠单抗、托法替尼、凡德他尼或维莫非尼。在其他更多实施例中，另外的治疗剂是拓扑异构酶抑制剂。在这些实施例的一些中，拓扑异构酶抑制剂是伊立替康。在一些其他实施例中，另外的治疗剂是紫杉烷类。示例性紫杉烷类包括紫杉醇和多西他赛。
除上述另外的治疗剂以外，其他化学治疗剂是本领域目前已知的，并且可以与本文所述的化合物或其药用盐组合使用。在一些实施例中，化疗剂选自由丝分裂抑制剂、烷化剂、抗代谢物、嵌入抗生素、生长因子抑制剂、细胞周期抑制剂、酶、拓扑异构酶抑制剂、生物反应调节剂、抗激素、血管生成抑制剂和抗雄激素组成的组。
非限制性实例是化疗剂、细胞毒性剂和非肽小分子，(甲磺酸伊马替尼)、/>(硼替佐米)，康士得(比卡鲁胺)、/>(吉非替尼)和阿霉素以及一系列化疗剂。化疗剂的非限制性实例包括烷基化剂，诸如噻替派和环磷酰胺(CYTOXANTM)；烷基磺酸盐，诸如白消安、英丙舒凡(improsulfan)和哌泊舒凡(piposulfan)；氮杂环丙烷类，诸如benzodopa、卡波醌(carboquone)、meturedopa和uredopa；乙撑亚胺(ethylenimine)和甲基三聚氰胺(methylamelamine)，包括六甲密胺(altretamine)、曲他胺(triethylenemelamine)、三亚乙基磷酰胺(triethylenephosphoramide)、三亚乙基硫化磷酰胺(triethylenethiophosphaoramide)和三羟甲基三聚氰胺(trimethylol melamine)；氮芥类，诸如苯丁酸氮芥(chlorambucil)、萘氮芥(chlornaphazine)、环磷酰胺(cholophosphamide)、雌莫司汀、异环磷酰胺、双氯乙基甲胺(mechlorethamine)、盐酸氧氮芥(mechlorethamineoxidehydrochloride)、美法仑、新氮芥(novembichin)、苯芥胆甾醇(phenesterine)、泼尼莫司汀(prednimustine)、曲洛磷胺(trofosfamide)、尿嘧啶氮芥(uracil mustard)；亚硝基脲，诸如卡莫司汀(carmustine)、氯脲菌素(chlorozotocin)、福莫司汀(fotemustine)、洛莫司汀(lomustine)、尼莫斯汀(nimustine)和雷莫司汀(ranimnustine)；抗生素，诸如阿克拉霉素(aclacinomysins)、放线菌素(actinomycin)、安曲霉素(authramycin)、重氮丝氨酸(azaserine)、争光霉素(bleomycins)、放线菌素C(cactinomycin)、卡奇霉素(calicheamicin)、卡柔比星(carabicin)、洋红霉素(carminomycin)、嗜癌菌素(carzinophilin)、CasodexTM、色霉素(chromomycins)、放线菌素D(dactinomycin)、道诺霉素(daunorubicin)、地托比星(detorubicin)、6-重氮-5-氧代-L-正亮氨酸、多柔比星(doxorubicin)、表柔比星(epirubicin)、依索比星(esorubicin)、伊达比星(idarubicin)、麻西罗霉素(marcellomycin)、丝裂霉素(mitomycins)、霉酚酸(mycophenolic acid)、诺加霉素(nogalamycin)、橄榄霉素(olivomycins)、培洛霉素(peplomycin)、泊非霉素(potfiromycin)、嘌呤霉素(puromycin)、三铁阿霉素(quelamycin)、罗多比星(rodorubicin)、链黑菌素(streptonigrin)、链脲霉素(streptozocin)、杀结核菌素(tubercidin)、乌苯美司(ubenimex)、净司他丁(zinostatin)、佐柔比星(zorubicin)；抗代谢物，诸如甲氨蝶呤和5-氟尿嘧啶(5-FU)；叶酸类似物，诸如二甲叶酸(denopterin)、甲氨蝶呤、喋罗呤(pteropterin)、三甲曲沙(trimetrexate)；嘌呤类似物，诸如氟达拉滨、6-巯基嘌呤(mercaptopurine)、硫咪嘌呤(thiamiprine)、硫鸟嘌呤(thioguanine)；嘧啶类似物，诸如安西他滨(ancitabine)、阿扎胞苷、6-氮鸟苷(azauridine)、卡莫氟(carmofur)、阿糖胞苷(cytarabine)、二脱氧尿苷(dideoxyuridine)、去氧氟尿苷(doxifluridine)、伊诺他滨(enocitabine)、氟尿苷(floxuridine)；雄激素，诸如卡普睾酮(calusterone)、丙酸甲雄烷酮(dromostanolonepropionate)、环硫雄醇(epitiostanol)、美雄烷(mepitiostane)、睾内酯(testolactone)；抗肾上腺素，诸如氨鲁米特(aminoglutethimide)、米托坦(mitotane)、曲洛司坦(trilostane)；叶酸补充剂，诸如亚叶酸(frolinicacid)；醋葡醛内酯(aceglatone)；醛磷酰胺糖苷(aldophosphamide glycoside)；氨基乙酰丙酸；安吖啶(amsacrine)；bestrabucil；比生群(bisantrene)；伊达曲杀(edatraxate)；地磷酰胺(defofamine)；秋水仙胺(demecolcine)；地吖醌(diaziquone)；elfomithine；依利醋铵(elliptinium acetate)；依托格鲁(etoglucid)；硝酸镓(gallium nitrate)；羟基脲(hydroxyurea)；香菇多糖(lentinan)；氯尼达明(lonidamine)；托胍腙(mitoguazone)；米托蒽醌(mitoxantrone)；mopidamol；根瘤菌剂(nitraerine)；喷司他丁(pentostatin)；蛋氨氮芥(phenamet)；吡柔比星(pirarubicin)；鬼臼酸(podophyllinic acid)；2-乙基肼；丙卡巴肼(procarbazine)；多糖K；雷佐生(razoxane)；西佐喃(sizofiran)；锗螺胺(spirogermanium)；细交链孢菌酮酸(tenuazonic acid)；三亚胺醌(triaziquone)；2,2',2”-三氯三乙胺；乌拉坦(urethan)；长春地辛(vindesine)；达卡巴嗪(dacarbazine)；甘露莫司汀(mannomustine)；二溴甘露醇(mitobronitol)；二溴卫矛醇(mitolactol)；哌泊溴烷(pipobroman)；gacytosine；阿糖胞苷(“Ara-C”)；环磷酰胺；塞替派；紫杉烷，例如，紫杉醇(TAXOLTM,Bristol-Myers Squibb Oncology,Princeton,N.J.)和多西他赛(TAXOTERETM,Rhone-Poulenc Rorer,Antony,France)；视黄酸；埃斯培拉霉素(esperamicins)；卡培他滨；以及任何上述的药用的盐、酸或衍生物。还包括作为合适的化疗细胞调节剂的是抗激素剂，其调节或抑制对肿瘤的激素作用，诸如抗雌激素，包括，例如，他莫西芬(NolvadexTM)、雷洛昔芬、芳香化酶抑制4(5)-咪唑、4-羟基他莫昔芬、曲沃昔芬(trioxifene)、雷洛西芬(keoxifene)、LY 117018、奥那司酮(onapristone)和托瑞米芬(Fareston)；抗雄激素，诸如氟他胺、尼鲁米特(nilutamide)、比卡鲁胺、醋酸亮丙瑞林(leuprolide)和戈舍瑞林；苯丁酸氮芥；吉西他滨；6-硫鸟嘌呤；巯基嘌呤；甲氨蝶呤；铂类似物，诸如顺铂和卡铂；长春碱(vinblastine)；铂；依托泊苷(VP-16)；异环磷酰胺；丝裂霉素C；米托蒽醌；长春新碱(vincristine)；长春瑞滨；诺维本(navelbine)；诺消灵(novantrone)；替尼泊苷(teniposide)；柔红霉素(daunomycin)；氨基蝶呤(aminopterin)；/>伊班膦酸盐；喜树碱-11(CPT-11)；拓扑异构酶抑制剂RFS2000；和二氟甲基鸟氨酸(difluoromethylornithine)(DMFO)。在需要的情况下，如本文所述的化合物或其药用盐或药物组合物可与通常开具的抗癌药组合使用，诸如VenclextaTM、/>ABVD、AVICINE、阿巴伏单抗(Abagovomab)、吖啶甲酰胺(Acridine carboxamide)、阿德木单抗(Adecatumumab)、17-N-烯丙基氨基(Allylamino)-17-去甲氧基格尔德霉素(demethoxygeldanamycin)、Alpharadin、阿伏西地(Alvocidib)、3-氨基吡啶-2-羧醛硫半脲、氨萘非特(Amonafide)、蒽二酮(Anthracenedione)、抗CD22免疫毒素、抗肿瘤药、抗肿瘤草药、阿帕喹酮(Apaziquone)、阿替莫德(Atiprimod)、硫唑嘌呤(Azathioprine)、贝洛替康(Belotecan)、苯达莫司汀(Bendamustine)、BIBW 2992、比立克达(Biricodar)、布洛塔星(Brostallicin)、苔藓抑素(Bryostatin)、丁硫氨酸亚砜亚胺、CBV(化疗)、钙霉素(Calyculin)、细胞周期非特异性抗肿瘤药、二氯乙酸、Discodermolide、依沙芦星(Elsamitrucin)、依诺他滨(Enocitabine)、埃博霉素(Epothilone)、艾立布林(Eribulin)、依维莫司(Everolimus)、依喜替康(Exatecan)、依昔舒林(Exisulind)、弥罗松酚(Ferruginol)、Forodesine、磷雌酚(Fosfestrol)、ICE化疗方案、IT-101、伊美克(Imexon)、咪喹莫特(Imiquimod)、吲哚咔唑(Indolocarbazole)、伊洛福芬(Irofulven)、拉尼基达尔(Laniquidar)、Larotaxel、来那度胺、硫蒽酮(Lucanthone)、勒托替康(Lurtotecan)、马磷酰胺(Mafosfamide)、米托唑胺(Mitozolomide)、萘福昔定(Nafoxidine)、萘达铂(Nedaplatin)、奥拉帕利、沃塔紫杉醇(Ortataxel)、PAC-1、Pawpaw、匹杉琼(Pixantrone)、蛋白酶体抑制剂、蝴蝶霉素(Rebeccamycin)、瑞喹莫德(Resiquimod)、鲁比替康(Rubitecan)、SN-38、盐孢酰胺A、卡培他滨(Sapacitabine)、Stanford V、苦马豆素(Swainsonine)、他拉泊芬(Talaporfin)、他立喹达(Tariquidar)、替加氟-尿嘧啶(Tegafur-uracil)、替莫唑胺(Temodar)、Tesetaxel、四硝酸三铂、三(2-氯乙基)胺、曲沙他滨(Troxacitabine)、乌拉莫司汀(Uramustine)、2,5-己酮可可碱(Vadimezan)、长春氟宁(Vinflunine)、ZD6126或唑喹达(Zosuquidar)。
施用化合物和另外的治疗剂的确切方法对本领域普通技术人员将是显而易见的。在一些示例性实施例中，化合物和另外的治疗剂可以被共同施用。在其他实施例中，化合物和另外的治疗剂单独施用。
在一些实施例中，将化合物和另外的治疗剂与第二药剂同时或单独施用。这种组合施用可以包括以相同剂型同时施用两种药剂，以单独剂型同时施用和单独施用。即，本文所述的化合物和任何其他治疗剂可以以相同剂型一起配制并同时施用。可选地，可以将化合物和本文所述的任何其他治疗剂同时施用，其中两种药剂存在于单独的制剂中。在另一个替代方案中，化合物可以在本文所述的任何另外的治疗剂之后施用，反之亦然。在单独施用方案的一些实施例中，本文所述的化合物和任何其他治疗剂间隔数分钟、间隔数小时或间隔数天施用。
制品
本文还提供了含有可用于治疗本文提供的癌症的材料的制品或“试剂盒”。在一个实施例中，试剂盒包括装有本文所述的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐的容器。试剂盒还可以包括在容器上或与容器相关的标签或包装说明书。合适的容器包括，例如，瓶子、小瓶、注射器、泡罩包装等。容器可以由诸如玻璃或塑料等多种材料形成。该容器可容纳对病症治疗有效的本文所述的化合物或其药用盐、或其制剂，并且可具有无菌进入口(例如，容器可为静脉内溶液袋或带有皮下注射针可刺穿的塞子的小瓶)。组合物中的至少一种活性剂是本文所述的化合物或其药用盐。可选地或另外地，制品还可以包括第二容器，其包含药物稀释剂，诸如抑菌注射用水(BWFI)、磷酸盐缓冲盐水、林格氏注射液或右旋糖溶液。试剂盒可进一步包括从商业和用户角度所需的其他物质，包括其他缓冲剂、稀释剂、过滤器、针头和注射器。
在另一实施例中，试剂盒适合于递送本文所述的化合物或其药用盐的固体口服形式，诸如片剂或胶囊。此类试剂盒可以包括许多单位剂量。此类试剂盒的实例是“泡罩包装”。泡罩包装在包装工业中是众所周知的，并广泛用于包装药物单位剂型。
实施例
下文提供了本文所述的本发明的一些示例性实施例。
实施例1.一种具有式(I)的化合物：
或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐，
其中：
X为O或NR6；
n为1、2或3；
m为1、2或3；
p为0、1或2；
其中n和m一起形成6元、7元或8元环A；
每个R0独立地为氢或甲基；
R1为R7取代或未取代的萘基、R7取代或未取代的异喹啉基、R7取代或未取代的吲唑基、R7取代或未取代的苯并噻唑基、R7A取代或未取代的苯基、或R7A取代或未取代的吡啶基；
每个R7独立地为氢、卤素、-OH、NH2、N(Me)2、未取代的C1-3烷基、未取代的C1-3卤代烷基、或未取代的环丙基；
每个R7A独立地为氢、卤素、NH2、N(Me)2、未取代的C1-3烷基、未取代的C1-3卤代烷基、或未取代的环丙基；
R2为氢、L1-O-L2-R8、R8A取代或未取代的C1-3烷基、或R8B取代或未取代的4元至10元杂环；
其中当R2为氢、R1为R7取代的吲唑基并且n和m为1时，则p不是零并且R6不是H；
L1为键或RL1取代或未取代的C1-3亚烷基；
RL1为卤素或未取代的C1-3烷基；
L2为键或未取代的C1-3亚烷基；
R8为R9取代或未取代的包含N、S或O的4元至10元杂环；
每个R9独立地为卤素、氧代、-OCF3、-OCHF2、-OCH2F、未取代的C1-3烷基、未取代的C1-3卤代烷基、未取代的C1-3烷氧基、R10取代或未取代的C1-3次烷基、或R10取代或未取代的C3-4环烷基、或R10取代或未取代的3元或4元杂环；或其中
两个R9一起形成R10取代或未取代的C3-5环烷基、或R10取代或未取代的包含一个或多个氧原子的C3-5杂环
R10为氢、卤素、或C1-3未取代的烷基；
每个R8A独立地为R9A取代或未取代的C1-3烷基、R9A取代或未取代的C1-3烷氧基、R9A取代或未取代的C3-4环烷基、或R9A取代或未取代的4元至6元杂环；
每个R9A独立地为卤素、氧代、未取代的C1-3烷基、未取代的C1-3卤代烷基、未取代的C1-3烷氧基、未取代的C1-3次烷基、R9取代或未取代的C3-4环烷基、或R9取代或未取代的包含N、S或O的4元至10元杂环；
R8B独立地为卤素、氧代、-NH2、未取代的C1-3烷基、未取代的C1-3卤代烷基、未取代的C1-3烷氧基、或未取代的C1-3次烷基；
R3和R4各自独立地为氢、-CN、卤素、未取代的C1-3烷基、或未取代的环丙基；
每个R5独立地为卤素、氧代、未取代的C1-3烷基、或未取代的C1-3卤代烷基；或其中；
两个R5一起形成环A的两个碳原子之间的桥，其中该桥包含1至3个碳以及任选的一个选自O和N的杂原子；或
两个R5一起形成环A的两个碳原子之间的桥，其中该桥包含O或NR11中的一者；
R11为氢、C(O)CH3、或未取代的C1-3烷基；并且
R6为氢或R6A取代或未取代的C1-6烷基、R6A取代或未取代的C1-6卤代烷基、R6A取代或未取代的C1-6烯基；R6A取代或未取代的C1-6炔基、或R6A取代或未取代的3元至4元杂环；
R6A为卤素、CN、OR6B、SR6C、S(O)2R6C、C(O)R6B、未取代的C1-3烷基；或未取代的C1-3卤代烷基、R6B取代或未取代的3元至4元杂环；
R6B和R6C各自独立地为C1-3烷基或C1-3卤代烷基。
实施例2.根据权利要求1所述的化合物，其中每个R0为氢。
实施例3.根据权利要求1所述的化合物，其中一个R0为氢并且一个R0为甲基。
实施例4.根据权利要求3所述的化合物，其具有结构：
/>
实施例5.根据权利要求1所述的化合物，其中R1为R7取代或未取代的苯基、R7取代或未取代的吲唑基、或R7取代或未取代的吡啶基。
实施例6.根据权利要求1至5中任一项所述的化合物，其中R1为R7取代或未取代的苯基。
实施例7.根据权利要求1至5中任一项所述的化合物，其中R1为R7取代或未取代的吲唑基。
实施例8.根据权利要求1至5中任一项所述的化合物，其中R1为R7取代或未取代的吡啶基。
实施例9.根据权利要求1至8中任一项所述的化合物，其中每个R7独立地为卤素、NH2、未取代的C1-3烷基、或未取代的C1-3卤代烷基。
实施例10.根据权利要求1至5中任一项所述的化合物，其中R1为
其中，
X1为N或CF；并且
R7A为氢、卤素、未取代的C1-3烷基、或未取代的C1-3卤代烷基。
实施例11.根据权利要求1、5、8或10中任一项所述的化合物，其中R1为
实施例12.根据权利要求1、5、8、10或11中任一项所述的化合物，其中R1为
实施例13.根据权利要求1至6或10中任一项所述的化合物，其中R1为
其中R7为氢、卤素、未取代的C1-3烷基或未取代的C1-3卤代烷基。
实施例14.根据权利要求1至6、10或13中任一项所述的化合物，其中R1为
/>
实施例15.根据权利要求1至5中任一项所述的化合物，其中R1为
其中每个R7独立地为卤素、NH2、N(Me)2、或未取代的C1-3烷基。
实施例16.根据权利要求1至15中任一项所述的化合物，其中R2为L1-O-L2-R8、R8A取代或未取代的C1-3烷基、或R8B取代或未取代的4元至6元杂环。
实施例17.根据权利要求1至16中任一项所述的化合物，其中R2为L1-O-L2-R8。
实施例18.根据权利要求1至17中任一项所述的化合物，其中L1为键。
实施例19.根据权利要求16至18中任一项所述的化合物，其中L2为未取代的C1-3亚烷基。
实施例20.根据权利要求16至19中任一项所述的化合物，其中R8为包含一个N杂原子的4元至10元杂环。
实施例21.根据权利要求16至20中任一项所述的化合物，其中R8为
其中，
R9为卤素、或R10取代或未取代的C1-3次烷基
r为整数0至12；
j为1、2或3；并且
k为1或2。
实施例22.根据权利要求21所述的化合物，其中r为0、1、2或3。
实施例23.根据权利要求16至22中任一项所述的化合物，其中R8为
其中，
R9独立地为卤素、或R10取代或未取代的C1-3次烷基；
每个R10独立地为氢或卤素；并且
r为1或2。
实施例24.根据权利要求16至20中任一项所述的化合物，其中R8为
其中，
R9独立地为卤素、氧代、或未取代的C1-3烷基；并且
r为1或2。
实施例25.根据权利要求16至20中任一项所述的化合物，其中R8为
其中
R9为氢或未取代的C1-3烷基；
W为O、SO2或NR12；并且
R12为氢、未取代的C1-3烷基、或未取代的C1-3卤代烷基。
实施例26.根据权利要求16至20或25中任一项所述的化合物，其中R8为氮杂环丁烷基、氧杂环丁烷基、或硫杂环丁烷二氧化物。
实施例27.根据权利要求1至26中任一项所述的化合物，其中R2为
实施例28.根据权利要求27所述的化合物，其中R9为卤素、或R10取代或未取代的C1-3次烷基。
实施例29.根据权利要求1至15中任一项所述的化合物，其中R2为氢。
实施例30.根据权利要求1至16中任一项所述的化合物，其中R2为R8A取代或未取代的C1-3烷基。
实施例31.根据权利要求29所述的化合物，其中R8A独立地为R9A取代或未取代的烷氧基、或R9A取代或未取代的4元至6元杂环。
实施例32.根据权利要求29或权利要求31所述的化合物，其中R9A为R9取代或未取代的包含N的4元至10元杂环。
实施例33.根据权利要求31或32所述的化合物，其中R9A独立地为卤素、未取代的C1-3烷基、或R10取代或未取代的C1-3次烷基。
实施例34.根据权利要求1至33中任一项所述的化合物，其中R3为卤素。
实施例35.根据权利要求1至34中任一项所述的化合物，其中R4为氢。
实施例36.根据权利要求1至34中任一项所述的化合物，其中R4为卤素。
实施例37.根据权利要求1至36中任一项所述的化合物，其中R5独立地为氧代、或未取代的C1-3烷基，并且p为1。
实施例38.根据权利要求1至36中任一项所述的化合物，其中两个R5一起形成环A的两个碳原子之间的桥，其中所述桥包含1至3个碳。
实施例39.根据权利要求38所述的化合物，其中所述桥包含1个碳原子。
实施例40.根据权利要求38所述的化合物，其中所述桥包含2个碳原子。
实施例41.根据权利要求1所述的化合物，其具有下式：
或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐。
实施例42.根据权利要求1所述的化合物，其具有下式：
或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐。
实施例43.根据权利要求1所述的化合物，其具有下式：
实施例44.根据权利要求1所述的化合物，其具有下式：
或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐。
实施例45.根据权利要求1所述的化合物，其具有下式：
或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐。
实施例46.根据权利要求1所述的化合物，其具有下式：
或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐。
实施例47.根据权利要求1所述的化合物，其具有下式：
或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐。
实施例48.根据权利要求1所述的化合物，其具有下式：
或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐。
实施例49.根据权利要求1所述的化合物，其具有下式：
或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐。
实施例50.根据权利要求1或41至49中任一项所述的化合物，其中R8为：
实施例51.根据权利要求1或38至42中任一项所述的化合物，其中R8为：
实施例52.根据权利要求1或41至49中任一项所述的化合物，其中R8为：
实施例53.根据权利要求1至52中任一项所述的化合物，其中X为NR6。
实施例54.根据权利要求53所述的化合物，其中R6为R6A取代或未取代的C1-3烷基。
实施例55.根据权利要求53所述的化合物，其中R6为R6A取代的C1-3烷基。
实施例56.根据权利要求55所述的化合物，其中R6A为卤素、CN、OH、OMe、OEt、OCF3、SO2Me、未取代的C1-3烷基、或4元杂环。
实施例57.根据权利要求53所述的化合物，其中R6为R6A取代或未取代的C1-3卤代烷基。
实施例58.根据权利要求53所述的化合物，其中R6为R6A取代或未取代的C1-3烯基。
实施例59.根据权利要求53所述的化合物，其中R6为R6A取代或未取代的C1-3炔基。
实施例60.根据权利要求53所述的化合物，其中R6为氢。
实施例61.根据权利要求53所述的化合物，其中R6为甲基。
实施例62.一种表1的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐。
实施例63.一种表2的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐。
实施例64.一种表3的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐。
实施例65.一种药物组合物，其包含根据权利要求1至64中任一项所述的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐，以及一种或多种药用赋形剂。
实施例66.一种治疗癌症的方法，所述方法包括施用有效量的根据权利要求1至64中任一项所述的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐、或根据权利要求65所述的药物组合物。
实施例67.根据权利要求66所述的方法，其中所述癌症的特征在于包含KRas突变。
实施例68.根据权利要求67所述的方法，其中所述KRas突变对应于KRasG12D突变。
实施例69.根据权利要求68所述的方法，其进一步包括在施用之前测试来自患者的样品不存在还是存在KRasG12D突变。
实施例70.根据权利要求69所述的方法，其中在患者样品显示存在KRasG12D突变之后，向所述患者施用所述化合物、其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐、或药物组合物。
实施例71.根据权利要求66至70中任一项所述的方法，其中所述癌症为组织未定性的。
实施例72.根据权利要求66至70中任一项所述的方法，其中所述癌症为胰腺癌、肺癌或结直肠癌。
实施例73.根据权利要求72所述的方法，其中所述肺癌为肺腺癌、NSCLC或SCLC。
实施例74.根据权利要求72所述的方法，其中所述癌症为胰腺癌。
实施例75.根据权利要求72所述的方法，其中所述癌症为结直肠癌。
实施例76.根据权利要求66至75中任一项所述的方法，其进一步包括施用至少一种另外的治疗剂。
实施例77.根据权利要求76所述的方法，其中所述另外的治疗剂包括表皮生长因子受体(EGFR)抑制剂、磷脂酰肌醇激酶(PI3K)抑制剂、胰岛素样生长因子受体(IGF1R)抑制剂、Janus激酶(JAK)抑制剂、Met激酶抑制剂、SRC家族激酶抑制剂、丝裂原活化蛋白激酶(MEK)抑制剂、细胞外信号调节激酶(ERK)抑制剂、拓扑异构酶抑制剂、紫杉烷、抗代谢剂、或烷化剂。
实施例78.根据权利要求1至64中任一项所述的化合物、或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐，其用作治疗活性物质。
实施例79.根据权利要求1至64中任一项所述的化合物、或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐用于治疗性治疗包含KRasG12D突变的癌症的用途。
实施例80.根据权利要求1至64中任一项所述的化合物、或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐用于制备药物的用途，所述药物用于治疗性治疗包含KRasG12D突变的癌症。
实施例81.根据权利要求1至64中任一项所述的化合物、或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐在制造用于抑制肿瘤转移的药物中的用途。
实施例82.根据权利要求1至64中任一项所述的化合物、或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐，其用于治疗性和/或预防性治疗包含KRasG12D突变的癌症。
实施例83.一种用于调节KRas突变蛋白的活性的方法，所述方法包括使所述突变蛋白与根据权利要求1至64中任一项所述的化合物、或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐反应。
实施例84.一种用于抑制细胞群的增殖的方法，所述方法包括使所述细胞群与根据权利要求1至64中任一项所述的化合物、或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐接触。
实施例85.根据权利要求84所述的方法，其中以所述细胞群的细胞活力降低来衡量对增殖的抑制。
实施例86.一种用于制备经标记的KRasG12D突变蛋白的方法，所述方法包括使KRasG12D突变蛋白与经标记的根据权利要求1至64中任一项所述的化合物、或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐反应，以产生所述经标记的KRasG12D突变蛋白。
实施例87.一种用于抑制肿瘤转移的方法，所述方法包括向有此需要的个体施用治疗有效量的根据权利要求1至64中任一项所述的化合物、或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐、或根据权利要求65所述的药物组合物至有此需要的受试者。
实施例88.一种用于合成如本文所述的式(I)化合物的方法。
实例
中间体1：(1R,2S,5S)-2-(羟基甲基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸叔丁酯
步骤1：(1R,5S)-8-苄基-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-甲酸叔丁酯
在0℃向3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-甲酸叔丁酯(50.0g,236mmol)和K2CO3(65.1g,472mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(800mL)中的溶液中加入BnBr(60.1g,354mmol)。将反应混合物温热至室温。2h后，加入冰水(1000mL)。将所得混合物用EtOAc萃取(3次)。将合并的有机相用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，并且在真空下浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化，用EtOAc/石油醚(0％至10％)洗脱，以得到标题化合物(69g，产率97％)，其为黄色油状物。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝303。
步骤2：(1R,2S,5S)-8-苄基-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-2,3-二甲酸3-(叔丁基)2-甲酯和(1R,2R,5S)-8-苄基-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-2,3-二甲酸3-(叔丁基)2-甲酯
在氮气下，在-78℃向8-苄基-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-甲酸叔丁酯(23.0g,76.1mmol)和TMEDA(17.7g,153mmol)在乙醚(500mL)中的溶液中逐滴加入s-BuLi(1.3M，在己烷中)(117mL,152mmol)。1.5h后，在-78℃加入氯甲酸甲酯(17.9g,189mmol)在40mL Et2O中的溶液。将反应温热至室温。16h后，将反应用饱和NaHCO3水溶液猝灭，并且用500mL水稀释。将所得混合物用EtOAc萃取(3次)。合并的有机相经Na2SO4干燥并且在真空下浓缩。将粗产物通过硅胶快速色谱法纯化，用EtOAc/石油醚(0％至10％)洗脱，以得到16g产物(顺式异构体的混合物)，其为黄色油状物，其含有约10％的与产物共洗脱的起始材料8-苄基-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-甲酸叔丁酯。将混合物通过手性SFC分离(柱：5μmCellulose-2，5×25cm，5um；流动相A：CO2，流动相B：MeOH(0.1％2MNH3-MeOH)；流速：180mL/min；梯度：18％B；220nm；RT1：5.07；RT2：5.57)，以得到5.9g较快的峰(异构体1)和5.6g较慢的峰(异构体2)，其为黄色油状物。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝361。/>
步骤3：(1R,2S,5S)-8-苄基-2-(羟基甲基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-甲酸叔丁酯
在氮气下，向用冰盐浴冷却的(1R,2S,5S)-8-苄基-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-2,3-二甲酸3-(叔丁基)2-甲酯(20.0g,55.5mmol)在四氢呋喃(300mL)中的溶液中以保持反应温度低于5℃的速率分批加入LiAlH4(4.20g,111mmol)。将所得溶液在0℃搅拌30min。将反应用Na2SO4·10H2O猝灭并且过滤。将有机相在真空下浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化，用EtOAc/石油醚(0％至20％)洗脱，以得到标题化合物(14.3g，产率77.5％)，其为白色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝333。
步骤4：(6S,9R,9aS)-10-苄基六氢-1H,3H-6,9-桥亚氨基噁唑并[3,4-a]氮杂-3-酮
在0℃将NaH(1.35g,33.8mmol)分批加入8-苄基-4-(羟基甲基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-甲酸叔丁酯(5.10g,15.3mmol)在四氢呋喃(100mL)中的溶液中。将所得悬浮液温热至室温。3h后，将反应混合物用饱和NH4Cl水溶液(30mL)猝灭。将所得溶液用EtOAc萃取(3次)。合并的有机层经无水硫酸钠干燥并且在真空下浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化，用EtOAc/石油醚(0％至40％)洗脱，以得到标题化合物(3.5g，产率88％)，其为白色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝259。
步骤5：(6S,9R,9aS)-六氢-1H,3H-6,9-桥亚氨基噁唑并[3,4-a]氮杂-3-酮
在室温向(6S,9R,9aS)-10-苄基六氢-1H,3H-6,9-桥亚氨基噁唑并[3,4-a]氮杂-3-酮(10.0g,38.7mmol)在甲醇(200mL)中的溶液中加入Pd/C(3.0g，10％，干燥)。将所得溶液在氢气下搅拌2h。将悬浮液过滤，并且将滤液浓缩，以得到6g粗产物，其不经进一步纯化即使用。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝169。
步骤6：(6S,9R,9aS)-3-氧代六氢-1H,3H-6,9-桥亚氨基噁唑并[3,4-a]氮杂-10-甲酸叔丁酯/>
在0℃向(6S,9R,9aS)-六氢-1H,3H-6,9-桥亚氨基噁唑并[3,4-a]氮杂-3-酮(6.00g,35.7mmol)和(Boc)2O(12.6g,57.8mmol)在二氯甲烷(100mL)中的溶液中加入DIPEA(10.0g,77.5mmol)。将溶液温热至室温持续2h。将溶液用饱和氯化钠水溶液洗涤。将分离的有机相在真空下浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化，用EtOAc/石油醚(0％至40％)洗脱，以得到标题化合物(7.50g，产率78.4％)，其为白色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝269。
步骤7：(1R,2S,5S)-2-(羟基甲基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸叔丁酯
向(6S,9R,9aS)-3-氧代六氢-1H,3H-6,9-桥亚氨基噁唑并[3,4-a]氮杂-10-甲酸叔丁酯(7.50g,28.0mmol)在乙醇(200mL)中的溶液中加入NaOH(16.8g,420mmol)在水(70mL)中的水溶液。将所得溶液在80℃加热16h。在减压下去除EtOH，并且将所得水溶液用HCl(1M)中和至pH约8。将溶液用EtOAc萃取(3次)。合并的有机层经Na2SO4干燥并且在减压下浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化，用DCM/MeOH(5/1)洗脱，以得到标题化合物(5.0g，产率74％)，其为灰白色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝243。1H NMR(400MHz,DMSO-d6,ppm)δ4.72-4.57(m,1H),4.02-3.90(m,2H),3.25-3.15(m,2H),2.82-2.68(m,2H),2.64-2.53(m,1H),1.85-1.61(m,3H),1.61-1.47(m,1H),1.41(s,9H)。
中间体2：7-溴-2,6-二氯-5,8-二氟喹唑啉-4(3H)-酮
步骤1：3-溴-2,5-二氟苯胺
在室温向1-溴-2,5-二氟-3-硝基苯(40.0g,168mmol)和铁粉(28.4g,506mmol)在水(10mL)中的悬浮液中加入浓盐酸(40mL,36％)。将悬浮液加热至100℃。1h后，使反应体系冷却至室温并且过滤。将滤饼用EtOAc洗涤。将合并的滤液在减压下浓缩，以得到标题化合物(34.3g，粗产物)，其为棕色油状物，不经进一步纯化即使用。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝208。
步骤2：N-(3-溴-2,5-二氟苯基)-2-(羟基亚氨基)乙酰胺
向2,2,2-三氯乙烷-1,1-二醇(40.9g,247mmol)、Na2SO4(187g,1.32mol)和NH2OH·HCl(39.8g,577mmol)在水(680mL)中的溶液中加入3-溴-2,5-二氟苯胺(34.3g,165mmol)在乙醇(100mL)、盐酸(12.5mL,36％)和水(50ml)中的溶液。将所得溶液在60℃加热3h。使反应体系冷却至室温并且过滤。收集固体并且用水(500mL)冲洗，在烘箱中干燥，以得到标题化合物(32.8g，粗产物)，其为浅棕色固体，不经进一步纯化即使用。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝279。
步骤3：6-溴-4,7-二氟吲哚啉-2,3-二酮
将N-(3-溴-2,5-二氟苯基)-2-(羟基亚氨基)乙酰胺(32.8g,118mmol)在H2SO4(160mL,98％)中的溶液在90℃加热1h。将反应混合物冷却至室温并且缓慢加入冰水中。通过过滤收集沉淀物，用水洗涤并且在烘箱中干燥，以得到标题化合物(28.1g，粗产物)，其为棕色固体，不经进一步纯化即使用。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝262。
步骤4：2-氨基-4-溴-3,6-二氟苯甲酸
将6-溴-4,7-二氟吲哚啉-2,3-二酮(28.1g,107mmol)在NaOH(537mL，2M，在水中)和H2O2(53.7mL,30％)中的溶液在室温搅拌16h。将混合物倒入冰水中，并且用浓HCl调节至pH＝2。通过过滤收集固体并且用水冲洗。将粗产物通过反相色谱法纯化(梯度：含0％至60％乙腈的水(0.1％甲酸))，以得到标题化合物(13.4g，产率49.4％)，其为浅棕色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝252。
步骤5：2-氨基-4-溴-5-氯-3,6-二氟苯甲酸
将2-氨基-4-溴-3,6-二氟苯甲酸(10.9g,43.2mmol)和N-氯代琥珀酰亚胺(6.32g,47.5mmol)在DMF(100mL)中的溶液在90℃搅拌1h。将混合物冷却至室温并且倒入水(500mL)中。收集固体并且在烘箱中干燥，以得到标题化合物(12.1g，粗产物)，其为棕色固体，不经进一步纯化即使用。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝286。
步骤6：2-氨基-4-溴-5-氯-3,6-二氟苯甲酰胺
在室温向2-氨基-4-溴-5-氯-3,6-二氟苯甲酸(11.9g,41.6mmol)、NH4Cl(4.42g,83.4mmol)和DIPEA(13.5g,104mmol)在DMF(60mL)中的溶液中加入HATU(17.43g,45.84mmol)。将所得溶液搅拌30min。将混合物倒入水(300mL)中，并且通过过滤收集所得沉淀物。将固体悬浮在EtOAc/石油醚(1:4,100mL)中并且搅拌3h。通过过滤收集固体并且在烘箱中干燥，以得到标题化合物(8.85g，粗产物)，其为棕色固体，不经进一步纯化即使用。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝285。
步骤7：7-溴-2,6-二氯-5,8-二氟喹唑啉-4(3H)-酮
将2-氨基-4-溴-5-氯-3,6-二氟苯甲酰胺(8.85g,31.0mmol)和硫光气(10.7g,93.2mmol)在1,4-二噁烷(175mL)中的溶液在室温搅拌1h。然后将混合物加热至105℃持续1h。将反应在真空下浓缩，并且将残余物悬浮在EtOAc/石油醚(1:4,60mL)中并且搅拌1h。通过过滤收集固体并且干燥，以得到标题化合物(7.08g，粗产物)，其为棕色固体，不经进一步纯化即使用。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝330。
中间体3(5aS,6S,9R)-2-溴-3,13-二氯-1-氟-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯
步骤1：(1S,2S,5R)-2-(((7-溴-2,6-二氯-8-氟-4-羟基喹唑啉-5-基)氧基)甲基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸叔丁酯
在氮气下，向冰冷却的(1S,2S,5R)-2-(羟基甲基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸叔丁酯(2.30g，9.49mmol，中间体1)在四氢呋喃(100mL)中的溶液中加入NaH(3.20g,80.0mmol)。将所得溶液温热至室温。30min后，加入含7-溴-2,6-二氯-5,8-二氟喹唑啉-4-醇(4.40g，13.3mmol，中间体2)的四氢呋喃(50mL)，并且将反应在室温搅拌2h。将反应用饱和NH4Cl水溶液猝灭并且用200mL水稀释。用EtOAc对所得混合物进行萃取。合并的有机层萃取物无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化(梯度：0％至10％MeOH/DCM)，以得到3.6g(产率48％)标题化合物，其为黄色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝551/553。
步骤2：(5aS,6S,9R)-2-溴-3,13-二氯-1-氟-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯
向(1S,2S,5R)-2-(((7-溴-2,6-二氯-8-氟-4-羟基喹唑啉-5-基)氧基)甲基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸叔丁酯(8.00g,14.5mmol)和BOP-Cl(13.5g,53.0mmol)在二氯甲烷(150mL)中的溶液中加入DIPEA(28.0g,217mmol)。将所得溶液在室温搅拌5h。将反应混合物用盐水洗涤并且将有机层在真空下浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化(梯度：0％至30％乙酸乙酯/石油醚)，然后用乙酸乙酯/石油醚＝1:10浆化，以得到3.50g(产率45％)标题化合物，其为浅黄色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝533/535。1H NMR(400MHz,DMSO-d6,ppm)δ4.90–4.80(m,1H),4.76-4.67(m,1H),4.55-4.46(m,1H),4.38–4.22(m,2H),4.16-4.08(m,1H),3.20-3.12(m,1H),1.92–1.65(m,4H),1.45(s,9H)。
中间体4：6-溴-N,N-双(4-甲氧基苄基)-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺
在氮气气氛下，向冰冷却的6-溴-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(14.0g,54.9mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(300mL)中的溶液中加入60％NaH(6.58g,165mmol)。将所得溶液在室温搅拌1h。然后在0℃加入PMB-Cl(21.4g,137mmol)并且在室温搅拌1h。将反应用饱和氯化铵猝灭，用EtOAc(3×500mL)萃取。合并的有机层经无水硫酸钠干燥并且在真空下浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化(梯度：0％至20％乙酸乙酯/石油醚)，以得到标题化合物(23g，产率84.6％)，其为白色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝495/497；1H NMR(400MHz,DMSO-d6,ppm)δ7.19(d,J＝8.3Hz,4H),6.93–6.85(m,4H),6.65(s,1H),4.67(s,4H),3.73(s,6H),2.31(q,J＝3.3Hz,3H)。
中间体5：(5aS,6S,9R)-2-((R)-6-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-3,13-二氯-1-氟-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯和(5aS,6S,9R)-2-((S)-6-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-3,13-二氯-1-氟-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂/>并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯/>
在-78℃，向氮气下的(5aS,6S,9R)-2-溴-3,13-二氯-1-氟-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯(6.50g，12.2mmol，中间体3)在四氢呋喃(25mL)中的冷(-78℃)溶液中逐滴加入i-PrMgCl.LiCl(9.86mL,12.8mmol)。将溶液在-78℃搅拌1h，然后将ZnCl2(6.72mL,13.4mmol)逐滴加入该冷溶液中。将溶液在-78℃搅拌10min，然后将溶液缓慢温热至25℃并且搅拌1h。将所得溶液分为6部分，并且在氮气下分别将各部分转移至以下溶液中(6-溴-N,N-双(4-甲氧基苄基)-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(905mg，1.83mmol，中间体4)和PdCl2(PPh3)2(57.1mg,0.0813mmol)在四氢呋喃(4.6mL)中的溶液)。将反应体系在50℃搅拌过夜，所有6次反应并行运行。将合并的反应混合物用水稀释，用EtOAc萃取(3次)。合并有机层，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化(梯度：0％至30％乙酸乙酯/石油醚)，以得到3.10g标题化合物(产率29％，两种阻转异构体的混合物)，其为黄色固体。重复反应并且总共获得7.1g外消旋化合物。将外消旋混合物通过SFC-HPLC分离(柱：Lux5um Cellulose-2，3×15cm，5μm；流动相A：CO2，流动相B：MeOH(0.1％2M NH3-MeOH)；流速：70mL/min；梯度：在24min内，50％B至50％B；254/220nm；RT1：11.46；RT2：19.55)，以得到2.30g(较慢的峰，所需异构体)和2.40g(较快的峰)，其为黄色固体。并且回收到1.3g阻转异构体的混合物。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝869.3。1H NMR(300MHz,DMSO-d6,ppm)δ7.14(d,J＝8.4Hz,4H),6.86(d,J＝8.7Hz,4H),6.82(s,1H),4.92-4.81(m,1H),4.81–4.63(m,3H),4.62–4.47(m,3H),4.41–4.24(m,2H),4.18–4.05(m,1H),3.72(s,6H),3.12(d,J＝13.2Hz,1H),2.39(s,3H),2.00–1.63(m,4H),1.44(s,9H)。
中间体6：7-溴-2-氯-5,6,8-三氟喹唑啉-4(3H)-酮
步骤1：(E)-N-(3-溴-2,4,5-三氟苯基)-2-(羟基亚氨基)乙酰胺
向Na2SO4(207g,1438mmol)、盐酸羟胺(44.7g,643.2mmol)和水合氯醛(46.2g,279.32mmol)在水(1000mL)中的溶液中加入3-溴-2,4,5-三氟-苯胺(40.0g,177mmol)在盐酸(30mL,37％)、乙醇(80mL)和水(100mL)中的溶液。将所得溶液在60℃搅拌2小时。通过过滤收集沉淀物，用水洗涤，在真空下干燥，以得到标题化合物(43.2g，产率82.2％)，其为浅棕色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M-H]+＝295。
步骤2：6-溴-4,5,7-三氟吲哚啉-2,3-二酮
将(2E)-N-(3-溴-2,4,5-三氟-苯基)-2-羟基亚氨基-乙酰胺(43.2g,145mmol)在三氟甲磺酸(120mL,1356mmol)中的溶液在130℃搅拌3小时。将溶液冷却至室温并且逐滴加入冰水(1.2L)中。通过过滤收集沉淀物，用石油醚/乙酸乙酯(10:1)洗涤，以得到10g标题化合物。将滤液用EtOAc萃取，将有机层用NaHCO3(饱和)和盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并且在真空下浓缩，以得到另外7.8g标题化合物。总共获得17.8g(产率43.7％)标题化合物，其为棕色固体。无质量信号。
步骤3：2-氨基-4-溴-3,5,6-三氟苯甲酸
在搅拌下，向6-溴-4,5,7-三氟-吲哚啉-2,3-二酮(21.0g,75mmol)在氢氧化钠(2M，在水中)(400mL)中的溶液中逐滴加入过氧化氢(30％，在水中)(40mL)。将溶液在室温搅拌16小时。滤出不溶性固体。将滤液用HCl(37％，在水中)酸化至pH＝2。通过过滤收集沉淀物，在真空下干燥，以得到标题化合物(11.8g，产率58.3％)，其为棕色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝290。
步骤4：2-氨基-4-溴-3,5,6-三氟苯甲酰胺
将2-氨基-4-溴-3,5,6-三氟-苯甲酸(11.8g,43.7mmol)、NH4Cl(9.4g,175.7mmol)、DIPEA(16.7g,130mmol)和HATU(19.1g,50.2mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(60mL)中的溶液在室温搅拌2小时。在搅拌下，将所得溶液倒入水中。通过过滤收集沉淀物并且在真空下干燥，以得到标题化合物(6.1g，产率51.9％)，其为棕色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝269。
步骤5：7-溴-2-氯-5,6,8-三氟喹唑啉-4(3H)-酮
将2-氨基-4-溴-3,5,6-三氟-苯甲酰胺(6.1g,22.7mmol)和硫光气(5.4mL,70.5mmol)在1,4-二噁烷(120mL)中的溶液在室温搅拌1小时，并且加热回流1小时。将溶液冷却至室温并且在真空下浓缩。将固体用石油醚/乙酸乙酯(4:1)洗涤，以得到标题化合物(5.9g，产率66.4％)，其为棕色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝313。
中间体7：(5aS,6S,9R)-2-溴-13-氯-1,3-二氟-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯
步骤1：(1R,2S,5S)-2-(((7-溴-2-氯-6,8-二氟-4-羟基喹唑啉-5-基)氧基)甲基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸叔丁酯
在氮气下，向(1S,2S,5R)-2-(羟基甲基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸叔丁酯(695mg，2.87mmol，中间体1)在THF(10mL)中的溶液中加入NaH(382mg,9.57mmol)。将反应在室温搅拌15min。然后在0℃加入7-溴-2-氯-5,6,8-三氟-喹唑啉-4-醇(1.00g，3.19mmol，中间体6)并且在0℃搅拌2小时。然后加入乙酸以猝灭反应。将所得混合物分配在水与DCM之间。将有机层合并，经无水Na2SO4干燥，在真空下浓缩。将残余物通过反相快速色谱法纯化(梯度：含0％至100％ACN的H2O(0.05％NH4HCO3))，以得到910mg(粗产物)标题化合物，其为棕色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝535。
步骤2：(5aS,6S,9R)-2-溴-13-氯-1,3-二氟-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯
将(1S,2S,5R)-2-[(7-溴-2-氯-6,8-二氟-4-羟基-喹唑啉-5-基)氧基甲基]-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸叔丁酯(915mg,1.71mmol)、DIPEA(3.31g,25.6mmol)和BOP-Cl(1.31g,5.12mmol)在DCM(10mL)中的溶液在室温搅拌3h。将所得混合物分配在水与DCM之间。合并的有机层经无水Na2SO4干燥，并且在真空中浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化(梯度：含0％至30％EtOAc的石油醚)，以得到白色固体(560mg，产率63％)。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝517。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ4.89–4.78(m,1H),4.70(dd,J＝13.4,2.8Hz,1H),4.50(dd,J＝13.2,7.3Hz,1H),4.39-4.24(m,2H),4.10(d,J＝7.0Hz,1H),3.16(d,J＝13.3Hz,1H),1.89–1.76(m,4H),1.45(s,9H)。
中间体8：(5aS,6S,9R)-2-溴-3,13-二氯-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯
步骤1：(1S,2S,5R)-2-(((7-溴-2,6-二氯-4-羟基喹唑啉-5-基)氧基)甲基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸叔丁酯
在氮气下，向冰冷却的(1S,2S,5R)-2-(羟基甲基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸叔丁酯(463mg，1.91mmol，中间体1)在四氢呋喃(10mL)中的溶液中加入NaH(191mg，4.78mmol，60％，在矿物油中)。0.5h后，加入7-溴-2,6-二氯-5-氟喹唑啉-4-醇(0.500g,1.61mmol)，并且将反应混合物加热至65℃持续2h。将反应用饱和NH4Cl溶液猝灭并且用DCM萃取。将有机层合并，经无水硫酸钠干燥，并且在真空下浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化(梯度：0％至10％甲醇/DCM)，以得到460mg(产率53％)标题化合物，其为黄色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝533。
步骤2：(5aS,6S,9R)-2-溴-3,13-二氯-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯
在氮气下，将(1S,2S,5R)-2-(((7-溴-2,6-二氯-4-羟基喹唑啉-5-基)氧基)甲基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸叔丁酯(390mg,0.73mmol)、BOP-Cl(546mg,2.14mmol)和DIPEA(1.49g,11.6mmol)在二氯甲烷(20mL)中的溶液在室温搅拌12h。将反应混合物用DCM稀释并且用水洗涤。有机层经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化(梯度：0％至5％甲醇/DCM)，以得到270mg(产率71％)标题化合物，其为白色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝515。1H NMR(400MHz,DMSO-d6,ppm)δ7.75(s,1H),4.82(dd,J＝13.5,2.4Hz,1H),4.74(dd,J＝13.4,2.7Hz,1H),4.57(dd,J＝13.3,7.4Hz,1H),4.39–4.26(m,2H),4.11(dt,J＝7.3,2.3Hz,1H),3.14(d,J＝13.1Hz,1H),1.88–1.67(m,4H),1.45(s,9H)。
中间体9：(5aS,6S,9R)-2-溴-3-氯-13-(((S)-2-亚甲基四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯
向冰冷却的(S)-(2-亚甲基四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲醇(92.5mg，0.600mmol，中间体15)在四氢呋喃(13mL)中的溶液中加入NaH(100mg，2.50mmol，60％，在矿物油中)。将溶液温热至室温持续30分钟，然后重新冷却至0℃。加入(5aS,6S,9R)-2-溴-3,13-二氯-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯(250mg，0.48mmol，中间体8)，并且将反应混合物加热至40℃持续3h。将反应冷却至0℃，用水稀释并且在真空下浓缩。利用预填充的C18柱纯化残余物(溶剂梯度：含0％至100％ACN的水(0.05％NH4HCO3))，以得到230mg(产率75％)标题化合物，其为黄色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝632。
中间体10：2,6-二氯-5,8-二氟-7-(6-氟-1-甲基-1H-吲唑-7-基)喹唑啉-4(3H)-酮
步骤1：2-氨基-4-溴-3,6-二氟苯甲酸甲酯
向冰冷却的2-氨基-4-溴-3,6-二氟-苯甲酸(2.72g，10.8mmol，中间体2的步骤4)在乙酸乙酯(13.5mL)和甲醇(13.5mL)中的溶液中加入TMSCHN2(10.8mL，21.6mmol，2mol/L，在正己烷中)。将反应温热至25℃。10min后，将混合物在真空下浓缩，以得到标题化合物(2.8g，粗产物)，其为黄色固体，不经进一步纯化即使用。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝266。
步骤2：2-氨基-3,6-二氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯甲酸甲酯
在氮气下，将2-氨基-4-溴-3,6-二氟-苯甲酸甲酯(2.87g,10.8mmol)、Pin2B2(4.11g,16.2mmol)、Pd(dppf)Cl2(788mg,1.08mmol)和KOAc(3.17g,32.3mmol)在1,4-二噁烷(72mL)中的溶液在100℃搅拌1h。过滤固体，并且将滤液在减压下浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化(梯度：0％至20％乙酸乙酯/石油醚)，以得到粗产物(含有20％Pin2B2)。将粗物质在10mL石油醚中搅拌10min，并且收集固体。该过程重复3次，以得到2.0g(产率59％)标题化合物，其为白色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝314。
步骤3：2-氨基-3,6-二氟-4-(6-氟-1-甲基-1H-吲唑-7-基)苯甲酸甲酯
在氮气下，将2-氨基-3,6-二氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯甲酸甲酯(1.64g,5.24mmol)、7-溴-6-氟-1-甲基-吲唑(1.44g,6.3mmol)、Pd(PPh3)2Cl2(368mg,0.520mmol)和KF(913mg,15.7mmol)在乙腈(20mL)和水(4mL)中的溶液在80℃搅拌1h。过滤固体，并且将滤液在减压下浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化(梯度：0％至7％MeOH/DCM)，以得到1.25g(产率71％)标题化合物，其为黄色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝336。
步骤4：2-氨基-5-氯-3,6-二氟-4-(6-氟-1-甲基-1H-吲唑-7-基)苯甲酸甲酯
在氮气下，将2-氨基-3,6-二氟-4-(6-氟-1-甲基-吲唑-7-基)苯甲酸甲酯(1.21g,3.60mmol)、NCS(574mg,4.32mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(12mL)中的溶液在80℃搅拌1h。将反应用饱和Na2S2O3溶液猝灭并且用乙酸乙酯(100mL)稀释。将所得溶液依次用水和盐水洗涤。有机层经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化(梯度：0％至15％乙酸乙酯/石油醚)，以得到1.1g(产率83％)标题化合物，其为黄色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝370。
步骤5：2-氨基-5-氯-3,6-二氟-4-(6-氟-1-甲基-1H-吲唑-7-基)苯甲酸
在室温向2-氨基-5-氯-3,6-二氟-4-(6-氟-1-甲基-吲唑-7-基)苯甲酸甲酯(1.10g,3.08mmol)在四氢呋喃(12mL)中的溶液中加入含LiOH(212mg,9.23mmol)的水(4mL)。18h后，将反应混合物用1M HCl水溶液酸化至pH为5至6，并且用乙酸乙酯萃取(3次)。合并的有机层经无水/硫酸钠干燥并且在真空下浓缩，以得到1.0g(粗产物)标题化合物。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝356。粗物质直接使用而不经进一步纯化。
步骤6：2-氨基-5-氯-3,6-二氟-4-(6-氟-1-甲基-1H-吲唑-7-基)苯甲酰胺
将2-氨基-5-氯-3,6-二氟-4-(6-氟-1-甲基-1H-吲唑-7-基)苯甲酰胺(1g，粗产物)、NH4Cl(830mg,15.4mmol)、HATU(1.75g,4.61mmol)和DIPEA(2.78g,21.53mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(15mL)中的溶液在室温搅拌3h。将溶液用EtOAc(100mL)稀释并且用饱和NH4Cl水溶液洗涤。有机层经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化(梯度：0％至4％MeOH/DCM)，以得到950mg(产率87％)标题化合物，其为白色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝355。
步骤7：2,6-二氯-5,8-二氟-7-(6-氟-1-甲基-1H-吲唑-7-基)喹唑啉-4(3H)-酮
将2-氨基-5-氯-3,6-二氟-4-(6-氟-1-甲基-吲唑-7-基)苯甲酰胺(1.01g,2.85mmol)和硫光气(0.65mL,8.55mmol)在1,4-二噁烷(20mL)中的溶液在室温搅拌1h，然后加热回流1h。将反应混合物在真空下浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化(梯度：0％至5％MeOH/DCM)，以得到标题化合物(1.27g，粗产物，纯度76％)，其为棕色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝399。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.22(s,1H),8.04(dd,J＝8.8,5.2Hz,1H),7.30–7.24(m,1H),3.56(s,3H)。
中间体11：(3-亚甲基-1-氮杂双环[3.2.0]庚烷-5-基)甲醇
步骤1：2-(2-(氯甲基)烯丙基)氮杂环丁烷-1,2-二甲酸1-(叔丁基)2-甲酯
在氮气下，在-20℃向氮杂环丁烷-1,2-二甲酸1-叔丁基2-甲酯(0.300g,1.39mmol)在四氢呋喃(7mL)中的溶液中加入LiHMDS(2.8mL，2.8mmol，1M，在THF中)。0.5h后，在-20℃加入3-氯-2-氯甲基-1-丙烯(349mg,2.79mmol)。将所得溶液温热至室温持续1h。将反应用饱和NH4Cl溶液猝灭，用水稀释并且用EtOAc萃取(3次)。合并的有机层经无水硫酸钠干燥并且在真空下浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化，用(EtOAc/石油醚＝0％至30％)洗脱，以得到标题化合物(0.170g，产率40％)，其为黄色油状物。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝304。1H NMR(300MHz，氯仿-d)δ5.42(d,J＝1.3Hz,1H),5.10(d,J＝1.2Hz,1H),4.26–4.02(m,2H),4.01–3.94(m,1H),3.78(d,J＝5.4Hz,3H),3.60(s,1H),3.01(dd,J＝14.9,1.1Hz,1H),2.64(d,J＝14.8Hz,1H),2.42–2.33(m,1H),2.11(d,J＝15.6Hz,1H),1.43(s,9H)。
步骤2：2-(2-(氯甲基)烯丙基)氮杂环丁烷-2-甲酸甲酯
将2-(2-(氯甲基)烯丙基)氮杂环丁烷-1,2-二甲酸1-(叔丁基)2-甲酯(170mg,0.560mmol)在2,2,2-三氟乙酸(0.4mL)和二氯甲烷(1.6mL)中的溶液在室温搅拌0.5h。将所得混合物在真空下浓缩，以得到标题化合物，其为TFA盐(110mg，粗制黄色固体)。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝204。粗产物直接使用而不经进一步纯化。
步骤3：3-亚甲基-1-氮杂双环[3.2.0]庚烷-5-甲酸甲酯
将2-[2-(氯甲基)烯丙基]氮杂环丁烷-2-甲酸甲酯TFA盐(110mg,0.540mmol)和K2CO3(225mg,1.63mmol)在乙腈(4mL)中的混合物在室温搅拌3h。过滤固体，并且将滤液在减压下浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化，用(MeOH/DCM＝0％至10％)洗脱，以得到标题化合物(48mg，3步产率20％)，其为浅黄色油状物。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝168。粗产物直接使用而不经进一步纯化。1H NMR(300MHz，氯仿-d)δ5.22–5.14(m,1H),5.13–5.04(m,1H),3.78(d,J＝2.6Hz,3H),3.62–3.44(m,2H),3.22–3.10(m,1H),3.02–2.84(m,2H),2.84–2.73(m,2H),2.25–2.14(m,1H)。
步骤4：(3-亚甲基-1-氮杂双环[3.2.0]庚烷-5-基)甲醇
向冰冷却的3-亚甲基-1-氮杂双环[3.2.0]庚烷-5-甲酸甲酯(40.1mg,0.240mmol)在四氢呋喃(1mL)中的溶液中加入LiAlH4(0.5mL，0.5mmol，1M，在THF中)。0.5h后，将反应用Na2SO4·10H2O猝灭并且用醚(10mL)稀释。过滤固体，并且将滤液在减压下浓缩，以得到标题化合物(21.1mg，粗产物)，其为无色油状物。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝140。粗产物直接使用而不经进一步纯化。
中间体12：(S)-(1-(2,2-二氟乙基)氮杂环丁烷-2-基)甲醇
向冰冷却的K2CO3(0.500g,3.62mmol)在乙腈(5mL)和(S)-氮杂环丁烷-2-基甲醇盐酸盐(200mg,1.63mmol)中的溶液中加入三氟甲磺酸2,2-二氟乙酯(0.360g,1.68mmol)。将反应混合物温热至室温。24h后，将反应用水(30mL)稀释，并且将所得混合物用EtOAc萃取。合并的有机层经无水硫酸钠干燥并且在真空下浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化(梯度：0％至60％乙酸乙酯/石油醚)，以得到0.090g(产率36％)标题化合物，其为无色油状物。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝152。
中间体13：(2-亚甲基四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲醇
在-40℃向氮气下的2-亚甲基-5-氧代四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-甲酸乙酯(0.20g,0.96mmol)在四氢呋喃(20mL)中的溶液中加入LiAlH4(2.87mL，1M，在THF中)。将所得溶液温热至室温持续3h。将反应混合物用Na2SO4·10H2O萃取。过滤固体，并且用EtOAc冲洗。将滤液在减压下浓缩，以得到粗产物(150mg)。粗产物无需纯化即可使用。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝154.2。
中间体14和15：(R)-(2-亚甲基四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲醇和(S)-(2-亚甲基四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲醇
步骤1：(R)-2-亚甲基-5-氧代四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-甲酸乙酯和(S)-2-亚甲基-5-氧代四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-甲酸乙酯
将2-亚甲基-5-氧代四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-甲酸乙酯(19.9g)通过手性SFC分离(柱：CHIRALPAK IH，50×250mm；流动相A：CO2，流动相B：EtOH；流速：150mL/min；梯度：26％B；220nm；RT1：4.8；RT2：6.43；进样体积：1.8ml；运行次数：122)，以得到(R)-2-亚甲基-5-氧代四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-甲酸乙酯(7.61g,较快的峰)和(S)-2-亚甲基-5-氧代四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-甲酸乙酯(7.29g,较慢的峰)。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝210。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ5.12–5.00(m,2H),4.32-4.28(m,1H),4.21(q,J＝7.1Hz,2H),3.73(d,J＝15.7Hz,1H),3.06(d,J＝15.7Hz,1H),2.85-2.72(m,1H),2.66-2.57(m,1H),2.53–2.41(m,2H),2.19-2.08(m,1H),1.28(t,J＝7.1Hz,3H)。两种异构体的HNMR相同。
步骤2：(S)-(2-亚甲基四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲醇
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向氮气下的冰冷却的(S)-2-亚甲基-5-氧代四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-甲酸乙酯(110mg,0.51mmol)在四氢呋喃(5mL)中的溶液中加入LiAlH4(1.1mL，1M，在THF中)。将混合物在70℃加热0.5h。将混合物冷却至室温并且用Na2SO4·10H2O猝灭并且过滤。将溶剂通过吹氮去除(对于产物具有低沸点)，以得到标题化合物(62.8mg，粗产物)。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝154。粗物质不经进一步纯化即使用。
类似于步骤2中所述的方法，合成对映体(R)-(2-亚甲基四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲醇(中间体14)。
中间体16：(S)-(2,2-二氟四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲醇
步骤1：(S)-2,5-二氧代四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-甲酸乙酯和(R)-2,5-二氧代四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-甲酸乙酯
将2,5-二氧代四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-甲酸乙酯(20.0g,94.6mmol)分离(柱：AD2.12×25cm，5um；流动相A：CO2，流动相B：EtOH:ACN＝1:1；流速：200mL/min；梯度：50％B；220nm；RT1：2.44；RT2：3.58；进样体积：10ml；运行次数：15)，以得到黄色油状(S)-2,5-二氧代四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-甲酸乙酯(8.21g，较快的峰)和黄色油状(R)-2,5-二氧代四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-甲酸乙酯(7.92g，较慢的峰)。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝212。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ4.22(q,J＝7.2Hz,2H),4.14–4.05(m,1H),3.54(d,J＝18.6Hz,1H),3.02–2.91(m,2H),2.87-2.72(m,1H),2.60–2.38(m,2H),2.23-2.11(m,1H),1.28(t,J＝7.1Hz,3H)。
步骤2：(S)-2,2-二氟-5-氧代四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-甲酸乙酯
向氮气下的冰冷却的(S)-2,5-二氧代四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-甲酸乙酯(0.20g,0.95mmol)在二氯甲烷(30mL)中的溶液中加入DAST(378mg,2.35mmol)。将混合物温热至室温。3h后，将反应混合物在真空下浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化(梯度：0％至2％MeOH/DCM)，以得到98.3mg(产率44.4％)标题化合物，其为白色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝234。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ4.28(q,J＝7.1Hz,2H),4.20-4.07(m,1H),3.54–3.39(m,1H),3.08-2.5(m,1H),2.82–2.60(m,2H),2.51–2.12(m,3H),1.32(t,J＝7.1Hz,3H)。
步骤3：(S)-(2,2-二氟四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲醇
向氮气下的冰冷却的(S)-2,2-二氟-5-氧代四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-甲酸乙酯(95.3mg,0.410mmol)在四氢呋喃(10mL)中的溶液中加入LiAlH4(2.0mL，1M，在THF中)。将混合物加热至70℃持续3h。将混合物用Na2SO4·10H2O猝灭并且过滤。将溶剂通过轻轻吹氮去除(低沸点)，以得到70.5mg(粗产物)。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝178。粗产物直接使用而不经进一步纯化。
中间体17：(R)-(2,2-二氟四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲醇
类似于在中间体16中所述的方法，由(R)-2,5-二氧代四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-甲酸乙酯制备标题化合物。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝178。将粗物质用于下一步而不经进一步纯化。
中间体18：(六氢-1H-吡咯并[2,1-c][1,4]噁嗪-6-基)甲醇(反式异构体的混合物)
步骤1：1-苄基吡咯烷-2,5-二甲酸二乙酯(反式异构体的混合物)
在-35℃向顺式-1-苄基吡咯烷-2,5-二甲酸二乙酯(8.60g,28.2mmol)在四氢呋喃(120mL)中的溶液中加入LiHMDS(43.4mL,56.4mmol)。1h后，将反应用饱和NH4Cl水溶液猝灭并且用EtOAc萃取。合并的有机层经盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，并且在真空下浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化(梯度：0％至15％乙酸乙酯/石油醚)，以得到1.27g(产率14％)标题化合物，其为浅黄色油状物。回收顺式异构体(6.3g)。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝306.2。1H NMR(300MHz,DMSO-d6,ppm)δ7.32–7.20(m,5H),4.13–3.87(m,6H),3.75–3.60(m,3H),2.25–2.11(m,2H),1.91–1.75(m,2H),1.25–1.06(m,3H)。
步骤2：(1-苄基吡咯烷-2,5-二基)二甲醇(反式异构体的混合物)
向氮气下的冰冷却的反式-1-苄基吡咯烷-2,5-二甲酸二乙酯(2.30g,7.53mmol)在四氢呋喃(30mL)中的溶液中分几批加入LiAlH4(716mg,18.8mmol)。将反应温热至室温。2h后，将混合物用Na2SO4·10H2O猝灭。过滤固体，并且将滤液在真空下浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化(梯度：0％至10％MeOH/DCM)，以得到1.65g(产率99％)标题化合物，其为黄色油状物。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝222.1。1H NMR(400MHz,DMSO-d6,ppm)δ7.38–7.15(m,5H),4.34(s,2H),3.95–3.82(m,2H),3.46–3.36(m,2H),3.28–3.20(m,2H),3.01–2.90(m,2H),1.90–1.75(m,2H),1.71–1.58(m,2H)。
步骤3：吡咯烷-2,5-二基二甲醇(反式异构体的混合物)
在氢气下(1atm)，将(1-苄基吡咯烷-2,5-二基)二甲醇(0.60g,2.7mmol)和Pd/C(180mg,10％w/w)在甲醇(10mL)中的溶液在室温搅拌2h。过滤催化剂，并且将滤液浓缩，以得到405mg(粗产物)标题化合物，其为浅黄色油状物。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝132.1。粗产物直接使用而不经进一步纯化。
步骤4：1-(2,5-双(羟基甲基)吡咯烷-1-基)-2-溴乙烷-1-酮(反式异构体的混合物)
向冰冷却的吡咯烷-2,5-二基二甲醇(355mg,2.71mmol)和N-甲基吗啉(410mg,4.06mmol)在四氢呋喃(10mL)中的溶液中加入2-溴乙酰溴(539mg,2.67mmol)。1h后，将反应在真空下浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化(梯度：0％至10％MeOH/DCM)，以得到130mg(产率19％)标题化合物，其为黄色油状物。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝252.1。1H NMR(400MHz,DMSO-d6,ppm)δ5.03(s,1H),4.71(s,1H),4.24(d,J＝11.4Hz,1H),4.09–3.99(m,1H),3.92–3.87(m,2H),3.69(s,2H),3.17(s,2H),2.04–1.72(m,4H)。
步骤5：6-(羟基甲基)四氢-1H-吡咯并[2,1-c][1,4]噁嗪-4(3H)-酮(反式异构体的混合物)
向冰冷的NaH(65.0mg，1.63mmol，60％，在矿物油中)在四氢呋喃(5mL)中的悬浮液中加入含1-(2,5-双(羟基甲基)吡咯烷-1-基)-2-溴乙烷-1-酮(130mg,0.517mmol)的1mLTHF。1h后，将所得溶液温热至室温持续3h。将反应用水稀释并且在真空下浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化(梯度：0％至10％MeOH/DCM)，以得到标题化合物，其为油状物(37.0mg，产率42％)。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝172.2。1H NMR(400MHz,DMSO-d6,ppm)δ4.88–4.82(m,1H),4.14–3.97(m,3H),3.84(d,J＝16Hz,1H),3.71–3.61(m,1H),3.59–3.48(m,2H),3.23–3.15(m,1H),2.03–1.87(m,2H),1.82–1.66(m,1H),1.39–1.19(m,1H)。
步骤6：(六氢-1H-吡咯并[2,1-c][1,4]噁嗪-6-基)甲醇(反式异构体的混合物)
向氮气下的冰冷的LiAlH4(27.3mg,0.720mmol)在四氢呋喃(5mL)中的悬浮液中加入含6-(羟基甲基)四氢-1H-吡咯并[2,1-c][1,4]噁嗪-4(3H)-酮(60.0mg,0.350mmol)的0.5mL THF。将所得溶液温热至60℃持续2h。将反应冷却至室温并且用Na2SO4·10H2O猝灭。过滤固体，并且将滤液浓缩，以得到标题化合物，其为浅黄色油状物(60mg，粗产物)。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝158.1。粗产物直接使用而不经进一步纯化。
中间体19：(S)-(2-(二氟亚甲基)四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲醇
步骤1：(S)-2-(二氟亚甲基)-5-氧代四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-甲酸乙酯
在-50℃向氮气下的(S)-2,5-二氧代四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-甲酸乙酯(0.20g，0.95mmol，中间体16，步骤1，较快的峰)和2-((二氟甲基)磺酰基)吡啶(237mg,1.23mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(6mL)中的溶液中缓慢加入含t-BuOK(191mg,1.71mmol)的DMF(2mL)。将反应温热至-40℃°持续1h，并且将反应用饱和氯化铵溶液(2mL)和3M HCl(2mL)猝灭。将混合物在室温搅拌16h。将混合物用水(20mL)稀释并且用EtOAc萃取。合并的有机相经无水硫酸钠干燥并且在真空下浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化(梯度：0％至40％EtOAc/DCM)，以得到标题化合物，其为黄色油状物(28.0mg，产率12％)。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝246.1。
步骤2：(S)-(2-(二氟亚甲基)四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲醇
向氮气下的冰冷却的(S)-2-(二氟亚甲基)-5-氧代四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-甲酸乙酯(28.0mg,0.110mmol)在四氢呋喃(2mL)中的溶液中加入DIBAL-H(1.12mL,1.12mmol)。将反应混合物温热至室温。1h后，将溶液用Na2SO4·10H2O猝灭。过滤固体，并且将滤液在减压下浓缩。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝190.1。粗产物经进一步纯化再使用。
中间体20：(R)-(2-(二氟亚甲基)四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲醇
类似于在中间体19中所述的方法，由(R)-2,5-二氧代四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-甲酸酯(中间体16，步骤1，较慢的峰)和2-((二氟甲基)磺酰基)吡啶制备标题化合物。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝190.1。粗物质直接使用而不经进一步纯化。
中间体21：(S)-(2-(氟亚甲基)四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲醇(Z/E异构体的混合物)
步骤1：(S)-2-(氟亚甲基)-5-氧代四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-甲酸乙酯
在-78℃向氮气下的2-((氟甲基)磺酰基)吡啶(177mg,1.01mmol)在四氢呋喃(10mL)中的溶液中加入KHMDS(1.2mL,1.20mmol)。30min后，在-78℃缓慢加入含(S)-2,5-二氧代四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-甲酸乙酯(0.20mg，0.95mmol，中间体16，步骤1，较快的峰)的THF(5mL)。3h后，将反应体系温热至室温持续1h。将反应依次用饱和氯化铵水溶液(1mL)和3M HCl(2mL)猝灭。将混合物在室温搅拌1h，用水稀释，并且用EtOAc萃取。合并的有机相经无水硫酸钠干燥并且在真空下浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化(梯度：0％至30％乙酸乙酯/石油醚)，以得到标题化合物，其为黄色油状物(65mg，产率30％)。LC-MS:(ES,m/z):[M+1]+＝228.1。1H NMR(400MHz，氯仿-d1,ppm)δ6.75–6.65(m,1H),6.55–6.44(m,1H),4.45–4.32(m,2H),4.27–4.20(m,4H),3.90(d,J＝16Hz,1H),3.73(d,J＝16Hz,1H),3.32(d,J＝16Hz,1H),3.04(d,J＝16Hz,1H),2.89–2.75(m,2H),2.72–2.56(m,2H),2.53–2.35(m,4H),2.25–2.08(m,2H),1.33–1.28(m,6H)。
步骤2：(S,Z)-(2-(氟亚甲基)四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲醇和(S,E)-(2-(氟亚甲基)四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲醇
向冰冷却的(S,Z/E)-2-(氟亚甲基)-5-氧代四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-甲酸乙酯(0.060g,0.26mmol)在四氢呋喃(5mL)中的溶液中加入DIBAL-H(2.64mL,2.64mmol)。将所得溶液温热至室温持续1h。将反应用Na2SO4·10H2O猝灭。过滤固体，并且将滤液在减压下浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化(梯度：0％至20％MeOH/DCM(0.1％Et3N))，以得到标题化合物，其为黄色油状物(26mg，产率57％)。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝172.1。1H NMR(300MHz，氯仿-d1,ppm)δ6.79–6.38(m,2H),3.92–3.70(m,2H),3.61–3.20(m,8H),2.79–2.44(m,5H),2.36–2.26(m,1H),2.14–1.66(m,8H)。(由于它是Z/E异构体的混合物，因此存在双重H)。
按照如上所述的相同程序和纯化方法，以更大的规模由9.7g(S,Z/E)-2-(氟亚甲基)-5-氧代四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-甲酸乙酯获得2.20g(Z异构体，第一级分)和2.70g(E异构体，第二级分)。
Z异构体：LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝172。1H NMR(300MHz，氯仿-d1,ppm)δ6.64–6.29(m,1H),3.79–3.65(m,1H),3.48–3.37(m,1H),3.35–3.23(m,2H),3.14–3.03(m,1H),2.69–2.58(m,1H),2.46–2.35(m,1H),2.30–2.17(m,1H),2.03–1.59(m,4H)。
E异构体：LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝172。1H NMR(300MHz，氯仿-d1,ppm)δ6.76–6.42(m,1H),3.75–3.65(m,1H),3.48–3.34(m,2H),3.33–3.18(m,2H),2.73–2.40(m,3H),2.09–1.65(m,4H)。
中间体22：6-溴-5-氯-N,N-双(4-甲氧基苄基)-4-甲基吡啶-2-胺
步骤1：6-溴-5-氯-4-甲基吡啶-2-胺
将6-溴-4-甲基吡啶-2-胺(500mg,2.67mmol)和NCS(360mg,2.69mmol)在DMF(5mL)中的溶液在60℃搅拌1小时。将所得溶液冷却至室温，用EtOAc稀释并且用水洗涤(3次)。有机层经无水Na2SO4干燥，并且在真空中浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化(梯度：0％至30％乙酸乙酯/石油醚)，以得到370mg(产率62％)标题化合物，其为白色固体。LC-MS(ESI,m/z):[M+H]+＝221。
步骤2：6-溴-5-氯-N,N-双(4-甲氧基苄基)-4-甲基吡啶-2-胺
在氮气下，在0℃向6-溴-5-氯-4-甲基-吡啶-2-胺(370mg,1.67mmol)在DMF(5mL)中的溶液中加入60％NaH(202mg,5.05mmol)。将反应在室温搅拌。30min后，加入1-(氯甲基)-4-甲氧基苯(656mg,4.21mmol)，并且将反应在室温保持1h。将反应用水猝灭，并且将所得溶液用EtOAc萃取(3次)。合并的有机层经无水硫酸钠干燥并且在真空下浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化(梯度：0％至30％乙酸乙酯/石油醚)，以得到550mg(产率71％)标题化合物，其为白色固体。LC-MS(ESI,m/z):[M+H]+＝461。
中间体23和24：(((2R,7aS)-2-氟四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲醇和((2S,7aS)-2-氟四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲醇
步骤1：(7aS)-2-羟基-5-氧代四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-甲酸乙酯
在氮气下，在0℃向(S)-2,5-二氧代四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-甲酸乙酯(1.22g,5.68mmol)在四氢呋喃(100mL)中的溶液中加入NaBH4(70.3mg,1.85mmol)。30min后，将反应混合物在真空下浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化(梯度：0％至6％MeOH/DCM)，以得到标题化合物(0.631g，产率62％)，其为浅黄色油状物。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝214。
步骤2：(2R,7aS)-2-氟-5-氧代四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-甲酸乙酯和(2S,7aS)-2-氟-5-氧代四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-甲酸乙酯
在氮气下，在-15℃向(7aS)-2-羟基-5-氧代四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-甲酸乙酯(809mg,3.80mmol)中的溶液中加入DAST(923mg，5.74mmol，溶于20mL DCM中)。将混合物温热至室温持续3小时。将混合物用EtOH猝灭并且在减压下浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化(梯度：0％至100％EtOAc/石油)，以得到425mg(产率52％)无色油状(2R,7aS)-2-氟-5-氧代四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-甲酸乙酯和219mg(产率26.9％)白色固体状(2S,7aS)-2-氟-5-氧代四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-甲酸乙酯。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝216。
(2R,7aS)-2-氟-5-氧代四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-甲酸乙酯(较快的峰)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ5.32(d,J＝19.2Hz,1H),4.26–4.11(m,3H),3.25–3.12(m,1H),2.85–2.59(m,3H),2.48–2.39(m,1H),2.37–2.07(m,2H),1.30(t,J＝7.1Hz,3H)。
(2S,7aS)-2-氟-5-氧代四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-甲酸乙酯(较慢的峰)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ5.47–5.32(m,1H),4.29–4.24(m,2H),4.08–3.96(m,1H),3.46–3.35(m,1H),2.98–2.78(m,2H),2.53–2.42(m,2H),2.20–2.12(m,1H),1.91–1.76(m,1H),1.31(t,J＝7.1Hz,3H)。
步骤3：((2R,7aS)-2-氟四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲醇
在氮气下，在0℃向(2R,7aS)-2-氟-5-氧代四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-甲酸乙酯(310mg,1.44mmol)在四氢呋喃(7mL)中的溶液中加入LiAlH4(3.1mL，1M，在THF中)。将混合物加热至70℃持续30min。冷却至室温后，将混合物在剧烈搅拌下用Na2SO4·10H2O猝灭。过滤固体，并且将滤液通过轻轻吹N2蒸发，以得到标题化合物(124mg，粗产物)。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝160。粗物质直接使用而不经进一步纯化。
步骤4：((2S,7aS)-2-氟四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲醇
类似于在步骤3中所述的方法，由(2S,7aS)-2-氟-5-氧代四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-甲酸乙酯制备标题化合物。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝160。粗物质直接使用而不经进一步纯化。
中间体25：6-溴-N,N-双(4-甲氧基苄基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺
在氮气下，在0℃向6-溴-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(500mg,2.08mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中的溶液中加入60％NaH(416mg,10.4mmol)。将所得溶液温热至室温。30min后，逐滴加入1-(氯甲基)-4-甲氧基苯(812mg,5.20mmol)，并且将所得溶液在室温搅拌3h。将反应用饱和NH4Cl溶液猝灭，并且将所得混合物用EtOAc萃取(3次)。将合并的有机层用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤，并且浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化(梯度：0％至20％EtOAc/石油醚)，以得到645mg(产率64％)标题化合物，其为白色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝481/483。
中间体26[2]：6-溴-N,N-双(4-甲氧基苄基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺
向2-氨基-4-溴-5-氯-3,6-二氟苯甲酰胺(5.00g，17.5mmol，中间体2，步骤6)在原甲酸三乙酯(100mL)中的溶液中加入AcOH(10mL)。将所得混合物在80℃搅拌1h。在真空下去除溶剂。将残余物用EtOAc/DCM(1/5,150mL)稀释。通过过滤收集固体并且在真空下干燥，以得到标题化合物(4g，粗产物)，其为白色固体，不经进一步纯化即用于接下来的反应。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝295。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.76(s,1H),8.22(s,1H)。
中间体27：6-溴-N,N-双(4-甲氧基苄基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺
步骤1：6-溴-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺
在氮气下，将6-氯-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(1000mg,5.09mmol)和HBr在乙酸(10mL,33％w/w)中的溶液在130℃搅拌48h(钢罐)。将反应冷却至室温并且在真空下浓缩。将残余物用H2O(30mL)稀释，用Na2CO3(水溶液)调节pH＝8至9，并且用EtOAc萃取。合并的有机层经无水硫酸钠干燥并且在真空下浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化(梯度：0％至10％EtOAc/石油醚)，以得到标题化合物(1106mg，产率86.8％)。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝241/243。
步骤2：6-溴-N,N-双(4-甲氧基苄基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺
在氮气下，在0℃向6-溴-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(500mg,2.08mmol)在DMF(5mL)中的溶液中加入NaH(416mg，10.4mmol，60％，悬浮于油中)。将所得溶液温热至室温并且搅拌0.5h。然后在室温逐滴加入1-(氯甲基)-4-甲氧基苯(812mg,5.20mmol)。将所得溶液在室温下搅拌3小时。将反应用饱和NH4Cl溶液猝灭，用EtOAc萃取(3次)。将合并的有机层用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并且在真空下浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化(梯度：0％至20％EtOAc/石油醚)，以得到645mg(产率64％)标题化合物，其为白色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝481/483。
中间体28[5]：7-溴-6-氟-1-甲基-1H-吲唑
在氮气下，将3-溴-2,4-二氟-苯甲醛(500mg,2.26mmol)、1-甲基肼硫酸盐(1.63g,11.3mmol)和K2CO3(3.12g,22.6mmol)在NMP(15mL)中的溶液在微波辐照下在200℃搅拌2h。使反应体系冷却至室温，用水(100mL)稀释，用EtOAc萃取。合并的有机层经无水硫酸钠干燥并且在真空下浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化，用EtOAc/石油醚(0％至10％)洗脱，以得到标题化合物(333.2mg，产率64.3％)，其为白色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝229/231；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.13(s,1H),7.80(dd,J＝8.7,5.0Hz,1H),7.15(t,J＝8.9Hz,1H),4.31(s,3H)。
中间体29：(1R,2S,5S)-2-((S)-1-羟基乙基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸叔丁酯
步骤1：8-苄基-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-甲酸叔丁酯
在氮气下，在0℃向3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-甲酸叔丁酯(5.00g,23.5mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(50mL)中的溶液中加入K2CO3(6.51g,47.1mmol)和(溴甲基)苯(6.01g,35.1mmol)。在室温搅拌1h。将反应混合物倒入冰水中，并且用EtOAc萃取。合并的有机层经无水Na2SO4干燥并且在真空下浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化(梯度：0％至30％EtOAc/石油醚)，以得到7g(产率98.3％)标题化合物，其为白色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝303。
步骤2：(1S,6S,9R,9aS)-10-苄基-1-甲基六氢-1H,3H-6,9-桥亚氨基噁唑并[3,4-a]氮杂-3-酮
在氮气下，在-78℃向8-苄基-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-甲酸叔丁酯(7.0g,23.1mmol)和TMEDA(5.38g,46.3mmol)在乙醚(70mL)中的溶液中逐滴加入s-BuLi(35.6mL，46.3mmol，1.3M，在己烷中)。将所得溶液在-78℃搅拌1.5h。然后在-78℃加入乙醛(2.55g,57.8mmol)。将反应逐渐温热至室温，并且搅拌过夜。将混合物用NH4Cl(水溶液)猝灭并且用EtOAc萃取。合并的有机层经无水Na2SO4干燥并且在真空下浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化(含0％至50％EtOAc的石油醚)，以得到5.1g 4种非对映体的混合物。将混合物通过制备型SFC分离(柱：CHIRALPAK IH，3×25cm，5μm；流动相A：CO2，流动相B：IPA(0.5％2MNH3-MeOH)；流速：70mL/min；梯度：等度35％B；柱温(℃)：35；反压(bar)：100；波长：220nm；RT1(min)：6.31；RT2(min)：8.33；样品溶剂：MeOH-----制备级；进样体积：1.9mL；运行次数：50)，以得到化合物a(1.39g，产率22％)(第一峰)和化合物d(1.47g，产率23.3％)(第三峰)以及化合物b与c的混合物(第二峰)。将化合物b与c的混合物通过制备型SFC再次分离(柱：CHIRALPAK IH，5×25cm，5μm；流动相A：CO2，流动相B：IPA(0.5％2M NH3-MeOH)；流速：200mL/min；梯度：等度50％B；柱温(℃)：35；反压(bar)：100；波长：220nm；RT1(min)：5.73；RT2(min)：8.44；样品溶剂：MeOH-----制备级；进样体积：10mL；运行次数：6)，以得到化合物b(0.500g，产率7.9％)(较快的峰)和化合物c(0.430g，产率6.8％)(较慢的峰)，其为黄色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝273。化合物a为所需异构体。
步骤3：(1S,6S,9R,9aS)-1-甲基六氢-1H,3H-6,9-桥亚氨基噁唑并[3,4-a]氮杂-3-酮
将(1S,6S,9R,9aS)-10-苄基-1-甲基六氢-1H,3H-6,9-桥亚氨基噁唑并[3,4-a]氮杂-3-酮(1.00g,3.67mmol)(前一步骤的化合物a)和Pd/C(500mg,10％)在甲醇(15mL)中的溶液在氢气气氛下于室温搅拌1h。滤出催化剂。将滤液在真空下浓缩，以得到658mg(粗产物)标题化合物，其为黄色油状物，不经进一步纯化即用于下一步。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝183。
步骤4：(1S,6S,9R,9aS)-1-甲基-3-氧代六氢-1H,3H-6,9-桥亚氨基噁唑并[3,4-a]氮杂-10-甲酸叔丁酯
将(1S,6S,9R,9aS)-1-甲基六氢-1H,3H-6,9-桥亚氨基噁唑并[3,4-a]氮杂-3-酮(658mg,3.61mmol)、(Boc)2O(1.18g,5.41mmol)和DIPEA(1.4g,10.8mmol)在二氯甲烷(10mL)中的溶液在室温搅拌30min。将反应体系用水猝灭，用DCM萃取。合并的有机层经无水Na2SO4干燥并且在真空下浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化(梯度：0％至100％EtOAc/石油醚)，以得到标题化合物(920mg，产率90.2％)，其为白色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝283。
步骤5：(1R,2S,5S)-2-((S)-1-羟基乙基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸叔丁酯
将(1S,6S,9R,9aS)-1-甲基-3-氧代六氢-1H,3H-6,9-桥亚氨基噁唑并[3,4-a]氮杂-10-甲酸叔丁酯(900mg,3.19mmol)和NaOH(1.28g,32.0mmol)在乙醇(12mL)和水(4mL)中的溶液在80℃搅拌1h。将反应溶液冷却至室温并且用水稀释，用DCM萃取。合并的有机层经无水Na2SO4干燥并且在真空下浓缩，以得到815mg(粗产物)，其为油状物，不经进一步纯化即用于下一步。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝257。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ4.54(s,1H),3.94(d,J＝5.1Hz,1H),3.82(s,1H),2.73(d,J＝11.3Hz,1H),2.60(d,J＝11.5Hz,1H),2.41(d,J＝8.1Hz,1H),2.15(s,1H),179–1.67(m,3H),1.56(s,1H),1.40(s,9H),1.04(d,J＝6.3Hz,3H)。
中间体30：(2R,5S,5aS,6S,9R)-2-(6-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-3,13-二氯-1-氟-5-甲基-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯
步骤1：(1S,2S,5R)-2-((S)-1-((7-溴-2,6-二氯-8-氟-4-羟基喹唑啉-5-基)氧基)乙基)-3，8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸叔丁酯
在氮气下，在0℃向(1R,2S,5S)-2-((S)-1-羟基乙基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸叔丁酯(6.00g，23.4mmol，中间体29)在四氢呋喃(200mL)中的溶液中加入NaH(5.00g，125mmol，60％，悬浮于油中)。将所得溶液在0℃搅拌30min。然后加入7-溴-2,6-二氯-5,8-二氟-喹唑啉-4-醇(15.4g，46.6mmol，中间体2)。将反应体系在室温搅拌1h。将混合物用饱和NH4Cl猝灭，用EtOAc萃取。合并的有机层经无水Na2SO4干燥并且在真空下浓缩，以得到标题化合物17.7g(粗产物)，其为棕色固体，不经进一步纯化即用于下一步。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝565。
步骤2：(5S,5aS,6S,9R)-2-溴-3,13-二氯-1-氟-5-甲基-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯/>
将(1S,2S,5R)-2-((S)-1-((7-溴-2,6-二氯-8-氟-4-羟基喹唑啉-5-基)氧基)乙基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸叔丁酯(17.7g,31.2mmol)、BOPCl(31.8g,125.5mmol)和DIPEA(60.7g,470mmol)在二氯甲烷(200mL)中的溶液在室温搅拌过夜。滤出固体。在真空下浓缩滤液。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化(梯度：0％至30％EtOAc/石油醚)，以得到7.2g(产率42％)标题化合物，其为黄色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝547。
步骤3：(2R,5S,5aS,6S,9R)-2-(6-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-3,13-二氯-1-氟-5-甲基-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯
在氮气下，在-78℃向(5S,5aS,6S,9R)-2-溴-3,13-二氯-1-氟-5-甲基-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯(510mg,0.930mmol)在四氢呋喃(3.2mL)中的溶液中加入iPrMgCl.LiCl(0.93mL，1.3M，在THF中)。将所得溶液在-78℃搅拌10min。然后在-78℃加入ZnCl2(2M，在2-MeTHF中)(0.93mL,1.86mmol)并且搅拌10min。将混合物温热至室温，并且在该温度搅拌20min。将该混合物加入6-溴-N,N-双[(4-甲氧基苯基)甲基]-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(461mg，0.930mmol，中间体4)和Pd(PPh3)2Cl2(32.8mg,0.0500mmol)在四氢呋喃(5mL)中的溶液中。将所得溶液在50℃搅拌过夜。在真空下浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化(梯度：0％至40％EtOAc/石油醚)，以得到350mg标题化合物(2种阻转异构体的混合物)，其为黄色固体。将混合物通过制备型手性HPLC分离(柱：CHIRAL ART Cellulose-SB，2×25cm，5μm；流动相A：Hex(0.5％2M NH3-MeOH)--HPLC，流动相B：EtOH--HPLC；流速：20mL/min；梯度：在22min内，10％B至10％B；波长：220/254nm；RT1(min)：14.03；RT2(min)：16.79；样品溶剂：EtOH--HPLC；进样体积：0.3mL；运行次数：15)，以得到80mg较快的峰和110mg较慢的峰，其为黄色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝883。
较快的峰：1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.19–7.08(m,4H),6.90–6.78(m,5H),5.11(d,J＝13.1Hz,1H),4.77(d,J＝15.9Hz,2H),4.59(s,1H),4.48(d,J＝15.8Hz,2H),4.31(s,1H),4.14(s,1H),4.02(d,J＝9.5Hz,1H),3.72(s,6H),3.09(d,J＝13.1Hz,1H),2.40(d,J＝2.1Hz,3H),1.99–1.68(m,4H),1.54(d,J＝6.2Hz,3H),1.46(s,9H)。
较慢的峰：1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.21–7.09(m,4H),6.92–6.80(m,5H),5.13(d,J＝13.2Hz,1H),4.79–4.51(m,5H),4.31(d,J＝5.2Hz,1H),4.12(s,1H),4.05(d,J＝9.6Hz,1H),3.73(s,6H),3.14(d,J＝13.2Hz,1H),2.38(d,J＝2.2Hz,3H),1.99–1.68(m,4H),1.53(d,J＝6.2Hz,3H),1.47(s,9H)。
中间体31：(2R,5S,5aS,6S,9R)-2-(6-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-3,13-二氯-1-氟-5-甲基-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯
在氮气下，在-78℃向(5S,5aS,6S,9R)-2-溴-3,13-二氯-1-氟-5-甲基-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯(1.70g，3.10mmol，中间体30，步骤2)在四氢呋喃(10mL)中的溶液中加入iPrMgCl.LiCl(3.1mL，4.03mmol，1.3M，在THF中)。将所得溶液在-78℃搅拌10min。然后在-78℃加入ZnCl2(3.1mL，6.20mmol，2M，在2-MeTHF中)。将溶液在-78℃搅拌10min并且温热至室温，并且在室温再搅拌20min。在室温将混合物加入6-溴-N,N-双[(4-甲氧基苯基)甲基]-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(1.50g，3.12mmol，中间体27)和Pd(PPh3)2Cl2(109mg,0.160mmol)在四氢呋喃(17mL)中的溶液中。将所得溶液在50℃搅拌过夜，然后在真空下浓缩。将粗物质通过硅胶快速色谱法纯化(梯度：0％至30％EtOAc/石油醚)，以得到1.2g标题化合物(2种阻转异构体的混合物)。将混合物通过制备型SFC分离(柱：Lux5um Cellulose-4，3×25cm，5μm；流动相A：CO2，流动相B：MeOH：ACN＝1:1(0.1％2M NH3-MeOH)；流速：70mL/min；梯度：等度40％B；柱温(℃)：35；反压(bar)：100；波长：220nm；RT1(min)：4.34；RT2(min)：5.16；样品溶剂：MeOH-----制备级；进样体积：1mL；运行次数：75)，以得到537mg较快的峰和460mg较慢的峰，其为黄色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝869。
中间体32：((2S,4R)-4-氟-1-甲基吡咯烷-2-基)甲醇
在氮气下，在0℃向(2S,4R)-1-(叔丁氧基羰基)-4-氟吡咯烷-2-甲酸(60.0g,257mmol)在四氢呋喃(1000mL)中的溶液中加入LiAlH4(19.6g,515mmol)。将反应混合物在室温搅拌1h，然后在60℃搅拌2h。将反应混合物在冰浴上冷却，并且缓慢加入水(20mL)以猝灭反应，然后加入20％NaOH水溶液(20mL)和20mL水。滤出固体并且将滤液在真空下浓缩。将残余物重新溶于DCM中，经无水Na2SO4干燥并且在真空下浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化(梯度：含0％至15％MeOH的DCM(0.1％TEA))，以得到12.4g(产率36％)标题化合物，其为黄色油状物。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝134。1H NMR(300MHz,DMSO-d6,ppm)δ5.25–4.97(m,1H),4.44(dd,J＝6.0,5.0Hz,1H),3.50–3.22(m,3H),2.57-2.50(m,1H),2.46–2.31(m,1H),2.30(s,3H),2.07-1.87(m,1H),1.87-1.60(m,1H)。
中间体33：((3S)-3-氟-1-氮杂双环[3.2.0]庚烷-5-基)甲醇
步骤1：(4R)-2-(2-氯乙基)-4-氟吡咯烷-1,2-二甲酸1-(叔丁基)2-甲酯
在氮气下，在-78℃向(2S,4R)-4-氟吡咯烷-1,2-二甲酸1-(叔丁基)2-甲酯(5.00g,20.2mmol)和HMPA(10.9g,60.9mmol)在四氢呋喃(70mL)中的溶液中加入含LiHMDS的THF(60.7mL,60.7mmol,1M)。将所得溶液在-78℃搅拌1h。然后加入1-溴-2-氯乙烷(8.36mL,100mmol)。将所得溶液在室温搅拌1h。将混合物用NH4Cl(水溶液)猝灭，用EtOAc萃取。合并的有机层经Na2SO4干燥并且在真空下浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化(梯度：0％至100％EtOAc/石油醚)，以得到1.26g(产率20.1％)标题化合物，其为无色油状物。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝310。
步骤2：(4R)-2-(2-氯乙基)-4-氟吡咯烷-2-甲酸甲酯
向(4R)-2-(2-氯乙基)-4-氟吡咯烷-1,2-二甲酸1-(叔丁基)2-甲酯(1.26g,3.87mmol)在二氯甲烷(10mL)中的溶液中加入TFA(5mL)。将所得溶液在室温搅拌30min。将溶剂在真空下蒸发，以得到2g(粗产物)标题化合物，其为黄色油状物，不经进一步纯化即用于下一步。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝210。
步骤3：(3S)-3-氟-1-氮杂双环[3.2.0]庚烷-5-甲酸甲酯
将(4R)-2-(2-氯乙基)-4-氟吡咯烷-2-甲酸甲酯(2.00g,3.82mmol)和K2CO3(1.60g,11.6mmol)在乙腈(30mL)中的溶液在85℃搅拌1h。滤出固体。将滤液在真空下浓缩，以得到2.9g(粗产物)标题化合物，其为黄色油状物，不经进一步纯化即用于下一步。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝174。
步骤4：((3S)-3-氟-1-氮杂双环[3.2.0]庚烷-5-基)甲醇
在氮气下，在0℃向(3S)-3-氟-1-氮杂双环[3.2.0]庚烷-5-甲酸甲酯(2.90g,16.7mmol)在四氢呋喃(20mL)中的溶液中加入含LiAlH4的THF(16.7mL,16.7mmol,1M)。将所得溶液在0℃搅拌30min。将混合物用Na2SO4·10H2O猝灭并且过滤。将溶剂通过吹N2去除(挥发物)，以得到2g(粗产物)，其为黄色油状物，不经进一步纯化即用于下一步。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝146。
中间体34：((3S)-2',2'-二氟-1-氮杂螺[双环[3.2.0]庚烷-3,1'-环丙烷]-5-基)甲醇(两种单一未知异构体)和((3R)-2',2'-二氟-1-氮杂螺[双环[3.2.0]庚烷-3,1'-环丙烷]-5-基)甲醇(两种单一未知异构体)
步骤1：(3S,6S)-1,1-二氟-5-氮杂螺[2.4]庚烷-5,6-二甲酸5-(叔丁基)6-甲酯和(3R,6S)-1,1-二氟-5-氮杂螺[2.4]庚烷-5,6-二甲酸5-(叔丁基)6-甲酯
在氮气下，在室温向(S)-4-亚甲基吡咯烷-1,2-二甲酸1-(叔丁基)2-甲酯(5.00g,20.7mmol)在四氢呋喃(70mL)中的溶液中加入TMSCF3(10.3g,72.5mmol)和NaI(1.55g,10.3mmol)。将所得溶液在60℃搅拌2h。将反应在真空下浓缩。将残余物用水稀释，用DCM萃取。合并的有机层经无水硫酸钠干燥，然后在真空下浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化(梯度：0％至20％EtOAc/石油醚)，以得到4.6g标题化合物的混合物，其为黄色油状物。将混合物通过手性制备型HPLC分离(柱：CHIRALPAK IH，2×25cm，5μm；流动相A：Hex(0.5％2MNH3-MeOH)--HPLC，流动相B：EtOH--HPLC；流速：20mL/min；梯度：在8min内，5％B至5％B；波长：220/254nm；RT1(min)：6.313；RT2(min)：7.224；样品溶剂：EtOH--HPLC；进样体积：0.5mL；运行次数：32)，以得到1.14g(较快的峰)和600mg(较慢的峰)，其为黄色油状物。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝292。
较快的峰：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ4.44_4.31(m,1H),3.67(d,J＝9.2Hz,3H),3.59_3.49(m,1H),3.45_3.36(m,1H),2.61–2.47(m,1H),2.02–1.85(m,1H),1.71–1.49(m,2H),1.37(d,J＝22.9Hz,9H)。
较慢的峰：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ4.42_4.31(m,1H),3.64(d,J＝9.2Hz,3H),3.50–3.36(m,2H),2.61–2.51(m,1H),1.93–1.78(m,1H),1.71–1.41(m,2H),1.37(d,J＝25.2Hz,9H)。
步骤2：(3S)-6-(2-氯乙基)-1,1-二氟-5-氮杂螺[2.4]庚烷-5,6-二甲酸5-(叔丁基)6-甲酯(两种单一未知异构体)和(3R)-6-(2-氯乙基)-1,1-二氟-5-氮杂螺[2.4]庚烷-5,6-二甲酸5-(叔丁基)6-甲酯(两种单一未知异构体)
在氮气下，在室温向(3S,6S)-1,1-二氟-5-氮杂螺[2.4]庚烷-5,6-二甲酸5-(叔丁基)6-甲酯(1.14g,3.91mmol)(来自前一步骤的较快的峰)在四氢呋喃(25mL)中的溶液中加入HMPA(910mg,5.09mmol)。然后在-40℃加入LiHMDS(5.00mL,5.00mmol)。将所得溶液在-40℃搅拌0.5h。然后在-40℃加入1-溴-2-氯乙烷(2.80g,19.5mmol)。将反应温热至室温并且搅拌2小时。将反应用NH4Cl水溶液猝灭，用EtOAc萃取。合并的有机层经无水硫酸钠干燥并且在真空下浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化(梯度：0％至30％EtOAc/石油醚)，以得到420mg(产率30％)黄色油状标题化合物(中间体3a)以及530mg起始材料与另一种异构体(化合物3b)的混合物。将530mg混合物通过C18柱再次纯化(溶剂梯度：含0％至100％ACN的水(10M NH4HCO3))，以得到117mg(产率8％)标题化合物，其为黄色油状物(中间体3b)。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝354。
中间体3a：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ3.91–3.75(m,1H),3.71–3.44(m,6H),2.61_2.52(m,2H),2.44_2.31(m,1H),2.13–2.03(m,1H),1.75–1.52(m,2H),1.37(d,J＝19.6Hz,9H)。
中间体3b：1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ3.81–3.62(m,4H),3.61–3.44(m,3H),2.46_2.17(m,4H),1.81–1.51(m,2H),1.37(d,J＝13.8Hz,9H)。
在氮气下，在室温向(3R,6S)-1,1-二氟-5-氮杂螺[2.4]庚烷-5,6-二甲酸5-(叔丁基)6-甲酯(600mg,2.06mmol)(来自前一步骤的较慢的峰)在四氢呋喃(15mL)中的溶液中加入HMPA(479mg,2.67mmol)。然后将反应体系冷却至-40℃，并且加入LiHMDS(2.67mL,2.67mmol)。将所得溶液在-40℃搅拌0.5h。然后在-40℃加入1-溴-2-氯乙烷(1.48g,10.3mmol)。将反应温热至室温，并且搅拌2小时。将反应用NH4Cl水溶液猝灭，用EtOAc萃取。合并的有机层经无水硫酸钠干燥并且在真空下浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化(梯度：0％至30％EtOAc/石油醚)，以得到200mg(产率27％)黄色油状标题化合物(中间体3c)以及200mg起始材料与另一种异构体(化合物3d)的混合物。将200mg混合物通过C18柱再次纯化(溶剂梯度：含0％至100％ACN的水(10M NH4HCO3))，以得到63mg(产率8％)标题化合物，其为黄色油状物(中间体3d)。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝354。
中间体3c：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ3.91–3.75(m,1H),3.71–3.44(m,6H),2.61_2.52(m,2H),2.44_2.31(m,1H),2.13–2.03(m,1H),1.75–1.52(m,2H),1.37(d,J＝19.6Hz,9H)
中间体3d：1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ3.81–3.62(m,4H),3.61–3.44(m,3H),2.46_2.17(m,4H),1.81–1.51(m,2H),1.37(d,J＝13.8Hz,9H)
步骤3：(3S)-6-(2-氯乙基)-1,1-二氟-5-氮杂螺[2.4]庚烷-6-甲酸甲酯(两种单一未知异构体)和(3R)-6-(2-氯乙基)-1,1-二氟-5-氮杂螺[2.4]庚烷-6-甲酸甲酯(两种单一未知异构体)
将(3S)-6-(2-氯乙基)-1,1-二氟-5-氮杂螺[2.4]庚烷-5,6-二甲酸5-(叔丁基)6-甲酯(260mg,0.736mmol)(化合物3a)和TFA(0.6mL)在二氯甲烷(3mL)中的溶液在室温搅拌1h。将溶剂在真空下浓缩，以得到粗产物，并且该粗产物不经进一步纯化即用于下一步。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝254。
类似于如上所述的方法，由相关的Boc起始材料制备其他3种异构体。
步骤4：(3S)-2',2'-二氟-1-氮杂螺[双环[3.2.0]庚烷-3,1'-环丙烷]-5-甲酸甲酯(两种单一未知阻转异构体)和(3R)-2',2'-二氟-1-氮杂螺[双环[3.2.0]庚烷-3,1'-环丙烷]-5-甲酸甲酯(两种单一未知阻转异构体)
将(3S)-6-(2-氯乙基)-1,1-二氟-5-氮杂螺[2.4]庚烷-6-甲酸甲酯(186mg,0.735mmol)和Et3N(371mg,3.67mmol)在乙腈(10mL)中的溶液在85℃搅拌4小时。将溶剂在真空下浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化(梯度：0％至10％MeOH/DCM)，以得到90mg(产率56％，中间体5a)，其为黄色油状物。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝218。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ3.64(s,3H),3.42–3.33(m,1H),3.27_3.16(m,1H),3.04(d,J＝12.6Hz,1H),2.76–2.67(m,1H),2.65–2.54(m,1H),2.40–2.31(m,1H),2.32–2.21(m,2H),1.85–1.75(m,2H)。
类似于如上所述的方法，由相关的起始材料制备其他3种异构体。
中间体5b：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ3.67(s,3H),3.42–3.33(m,1H),3.09_2.97(m,1H),2.79(d,J＝8.8Hz,1H),2.71–2.58(m,2H),2.33(d,J＝7.6Hz,1H),2.19–2.05(m,2H),1.73–1.65(m,1H),1.62–1.52(m,1H)。
中间体5c：1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ3.64(s,3H),3.42–3.33(m,1H),3.27_3.16(m,1H),3.04(d,J＝12.6Hz,1H),2.76–2.67(m,1H),2.65–2.54(m,1H),2.40–2.31(m,1H),2.32–2.21(m,2H),1.85–1.75(m,2H)。
中间体5d：1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ3.87–3.77(m,3H),3.75–3.65(m,1H),3.30–3.20(m,1H),3.12–3.00(m,1H),2.87–2.76(m,2H),2.49–2.37(m,1H),2.36–2.21(m,2H),1.60–1.39(m,2H)。
步骤5：((3S)-2',2'-二氟-1-氮杂螺[双环[3.2.0]庚烷-3,1'-环丙烷]-5-基)甲醇(两种单一未知阻转异构体)和((3R)-2',2'-二氟-1-氮杂螺[双环[3.2.0]庚烷-3,1'-环丙烷]-5-基)甲醇(两种单一未知阻转异构体)
在氮气下，在0℃向(3S)-2',2'-二氟-1-氮杂螺[双环[3.2.0]庚烷-3,1'-环丙烷]-5-甲酸甲酯(97.0mg,0.450mmol)在四氢呋喃(7mL)中的溶液中加入LiAlH4(0.9mL,0.900mmol)。将所得溶液在室温下搅拌0.5小时。将反应用Na2SO4·10H2O猝灭。过滤后，将滤液在减压下浓缩，以得到产物(100mg，粗产物，中间体6a)，其为黄色油状物。该粗产物不经进一步纯化即用于下一步。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝190。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ3.42–3.33(m,1H),3.31_3.22(m,2H),3.21–3.10(m,2H),3.04–2.91(m,1H),2.61–2.55(m,1H),2.25–2.11(m,2H),2.10–2.01(m,1H),1.91–1.81(m,1H),1.78–1.70(m,2H)。
类似于如上所述的方法，由相关的起始材料制备其他3种异构体。
中间体6b：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ4.75–4.61(m,1H),3.40–3.20(m,5H),2.95_2.81(m,1H),2.80–2.70(m,1H),2.25–2.13(m,1H),2.07–1.95(m,1H),1.92–1.83(m,1H),1.61–1.50(m,1H),1.49–1.40(m,1H)。
中间体6c：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ3.42–3.33(m,1H),3.31_3.22(m,2H),3.21–3.10(m,2H),3.04–2.91(m,1H),2.61–2.55(m,1H),2.25–2.11(m,2H),2.10–2.01(m,1H),1.91–1.81(m,1H),1.78–1.70(m,2H)。
中间体6d：由于量少，未运行HNMR
中间体35：(3,3-二氟-1-氮杂双环[3.2.0]庚烷-5-基)甲醇
步骤1.2-(2-氯乙基)-4,4-二氟吡咯烷-1,2-二甲酸1-(叔丁基)2-甲酯
在氮气下，在-78℃向(2S)-4,4-二氟吡咯烷-1,2-二甲酸1-叔丁基2-甲酯(2.0g,7.54mmol)在四氢呋喃(30mL)中的溶液中加入LiHMDS(10.mL,10mmol)，并且将混合物在-78℃搅拌0.5小时。然后加入1-氯-2-碘乙烷(2.87g,15.1mmol)并且在室温搅拌1小时。将反应用NH4Cl(水溶液)猝灭，用EtOAc萃取。合并的有机层经NaSO4干燥并且在真空下浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化，用EtOAc/石油醚(0％至60％)洗脱，以得到标题化合物900mg(产率36.4％)，其为黄色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝328
步骤2.2-(2-氯乙基)-4,4-二氟吡咯烷-2-甲酸甲酯
在氮气下，在室温向2-(2-氯乙基)-4,4-二氟吡咯烷-1,2-二甲酸1-(叔丁基)2-甲酯(470mg,1.43mmol)在二氯甲烷(5mL)中的溶液中加入TFA(1mL)。将所得溶液在室温搅拌1小时。将溶剂在真空下浓缩，以得到标题化合物300mg(粗产物)，其为黄色油状物，不经进一步纯化即用于下一步。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝228
步骤3.3,3-二氟-1-氮杂双环[3.2.0]庚烷-5-甲酸甲酯
在氮气下，在室温向2-(2-氯乙基)-4,4-二氟-吡咯烷-2-甲酸甲酯(300mg,1.32mmol)在乙腈(5mL)中的溶液中加入Et3N(1mL)，并且将混合物在85℃搅拌12小时。将溶剂在真空下浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化，用DCM/MeOH(0％至6％)洗脱，以得到标题化合物150mg(产率59.5％)，其为黄色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝192
步骤4.(3,3-二氟-1-氮杂双环[3.2.0]庚烷-5-基)甲醇
在氮气下，在0℃向3,3-二氟-1-氮杂双环[3.2.0]庚烷-5-甲酸甲酯(150mg,0.780mmol)在四氢呋喃(3mL)中的溶液中加入LiAlH4(2.4mL，2.4mmol，1M，在THF中)。将溶液在0℃搅拌0.5小时。将溶剂通过吹氮去除，以得到110mg(粗产物)标题化合物，其为黄色油状物，不经进一步纯化即用于接下来的反应。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝164。纯化。
中间体36：((7a'S)-2,2-二氟二氢-1'H,3'H-螺[环丙烷-1,2'-吡咯嗪]-7a'(5'H)-基)甲醇
步骤1：(R)-2-亚甲基-5-氧代四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-甲酸乙酯和(S)-2-亚甲基-5-氧代四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-甲酸乙酯
将2-亚甲基-5-氧代四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-甲酸乙酯(19.9g)通过手性SFC分离(柱：CHIRALPAK IH，50×250mm；流动相A：CO2，流动相B：EtOH；流速：150mL/min；梯度：26％B；220nm；RT1：4.8；RT2：6.43；进样体积：1.8ml；运行次数：122)，以得到(R)-2-亚甲基-5-氧代四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-甲酸乙酯(7.61g,较快的峰)和(S)-2-亚甲基-5-氧代四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-甲酸乙酯(7.29g,较慢的峰)。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝210。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ5.12–5.00(m,2H),4.32-4.28(m,1H),4.21(q,J＝7.1Hz,2H),3.73(d,J＝15.7Hz,1H),3.06(d,J＝15.7Hz,1H),2.85-2.72(m,1H),2.66-2.57(m,1H),2.53–2.41(m,2H),2.19-2.08(m,1H),1.28(t,J＝7.1Hz,3H)。两种异构体的HNMR相同。
步骤2：(7a'S)-2,2-二氟-5'-氧代二氢-1'H,3'H-螺[环丙烷-1,2'-吡咯嗪]-7a'(5'H)-甲酸乙酯
在氮气下，在室温向(S)-2-亚甲基-5-氧代四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-甲酸乙酯(200mg,0.960mmol)和NaI(71.7mg,0.480mmol)在THF(5mL)中的溶液中加入TMSCF3(476mg,3.35mmol)。将所得溶液在65℃搅拌2.5h。将溶液用DCM稀释，用硫代硫酸钠溶液洗涤，并且用Na2SO4干燥。有机层在真空下浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化(梯度：0％至35％乙酸乙酯/石油醚)，以得到较快的峰95.0mg(产率38.3％)和(梯度：35％至90％乙酸乙酯/石油醚)，以得到较慢的峰108mg(产率43.6％)，其为黄色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝260。较快的峰：1H NMR(300MHz,DMSO-d6,ppm)δ4.25-4.19(m,2H),3.80–3.70(m,1H),3.04(d,J＝12.1,3.5Hz,1H),2.62-2.58(m,1H),2.51–2.12(m,5H),1.60(t,J＝9.3Hz,2H),1.24(t,J＝7.1Hz,3H)。较慢的峰：1H NMR(300MHz,DMSO-d6,ppm)δ4.24–4.08(m,2H),3.61(d,J＝11.7,2.7Hz,1H),3.11(d,J＝11.6Hz,1H),2.72–2.54(m,1H),2.44–2.13(m,5H),1.79-1.58(m,2H),1.22(t,J＝7.1Hz,3H)。
步骤2：((7a'S)-2,2-二氟二氢-1'H,3'H-螺[环丙烷-1,2'-吡咯嗪]-7a'(5'H)-基)甲醇
在氮气下，向(7a'S)-2,2-二氟-5'-氧代二氢-1'H,3'H-螺[环丙烷-1,2'-吡咯嗪]-7a'(5'H)-甲酸乙酯(95.0mg，0.370mmol，前一步骤的较快的峰)在THF(2.5mL)中的溶液中加入LiAlH4(1.1mL，1M，在THF中)。将溶液在65℃搅拌1小时。将反应冷却至室温并且用Na2SO4·10H2O猝灭。过滤后，将滤液在减压下浓缩，以得到42.0mg(产率56.4％)标题化合物，其为黄色油状物。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝204。
中间体37：7-(6-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-2,6-二氯-5,8-二氟喹唑啉-4(3H)-酮
步骤1：3-溴-2,5-二氟苯胺
在室温向1-溴-2,5-二氟-3-硝基苯(40.0g,168mmol)和铁粉(28.4g,506mmol)在水(10mL)中的溶液中加入浓盐酸(40mL,36％)。将溶液加热至100℃持续1h。使反应体系冷却至室温。滤出固体并且用EtOAc洗涤。将合并的滤液在减压下浓缩，以得到标题化合物(34.3g，粗产物)，其为棕色油状物，LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝208。将该粗物质用于下一步，而不经进一步纯化。
步骤2：N-(3-溴-2,5-二氟苯基)-2-(羟基亚氨基)乙酰胺
向2,2,2-三氯乙烷-1,1-二醇(40.9g,247mmol)、Na2SO4(187g,1.32mol)和NH2OH·HCl(39.8g,577mmol)在水(680mL)中的溶液中加入3-溴-2,5-二氟苯胺(34.3g,165mmol)在乙醇(100mL)、盐酸(12.5mL,36％)和水(50ml)中的溶液。将所得溶液在60℃加热3h。使反应体系冷却至室温并且过滤。收集固体，用水洗涤(500mL)并且在烘箱中干燥，以得到标题化合物(32.8g，粗产物)，其为浅棕色固体，不经进一步纯化即用于下一步。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝279。
步骤3：6-溴-4,7-二氟吲哚啉-2,3-二酮
将N-(3-溴-2,5-二氟苯基)-2-(羟基亚氨基)乙酰胺(32.8g,118mmol)在H2SO4(160mL,98％)中的溶液在90℃加热1h。将反应混合物冷却至室温并且缓慢加入冰水中。通过过滤收集沉淀物，用水洗涤并且在烘箱中干燥，以得到标题化合物(28.1g，粗产物)，其为棕色固体，不经进一步纯化即用于下一步。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝262。
步骤4：2-氨基-4-溴-3,6-二氟苯甲酸
将6-溴-4,7-二氟吲哚啉-2,3-二酮(28.1g,107mmol)在NaOH(537mL，2M，在水中)和H2O2(53.7mL,30％)中的溶液在室温搅拌16h。将混合物倒入冰水中，并且用浓HCl调节至pH＝2。通过过滤收集固体并且用水洗涤。将粗产物通过反相色谱法纯化(梯度：含0％至60％乙腈的水(0.1％甲酸))，以得到标题化合物(13.4g，产率49.4％)，其为浅棕色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝252。
步骤5：2-氨基-4-溴-3,6-二氟苯甲酸甲酯
在0℃向2-氨基-4-溴-3,6-二氟-苯甲酸(50.0g,198mmol)在二氯甲烷(75mL)和甲醇(75mL)中的溶液中加入TMSCHN2(100mL，2.0mol/L，在己烷中)。将所得溶液在室温搅拌2h。将溶剂在真空下浓缩，以得到52g(粗产物)标题化合物，其为黄色固体。将该粗产物用于下一步，而不经进一步纯化。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝266。
步骤6：2-氨基-3,6-二氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯甲酸甲酯
在氮气下，将2-氨基-4-溴-3,6-二氟-苯甲酸甲酯(25.0g,93.9mmol)、Pin2B2(35.8g,141mmol)、KOAc(27.6g,282mmol)和PdCl2(dppf)(6.88g,9.40mmol)在1,4-二噁烷(300mL)中的溶液在90℃搅拌2h。将溶液冷却至室温，用水稀释并且用乙酸乙酯萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并且在真空下浓缩，以得到35g(粗产物)，其为棕色固体。将该粗产物用于下一步，而不经进一步纯化。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝314。
步骤7：2-氨基-4-(6-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-3,6-二氟苯甲酸甲酯
在氮气下，将2-氨基-3,6-二氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯甲酸甲酯(58.0g,185mmol)、6-溴-N,N-双[(4-甲氧基苯基)甲基]-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(73.4g，148mmol，中间体4)、KF(20.4g,352mmol)和Pd(PPh3)2Cl2(13.0g,18.5mmol)在乙腈(500mL)和水(100mL)中的溶液在70℃搅拌2h。将反应混合物冷却至室温，用水稀释并且用乙酸乙酯萃取。将合并的有机层在真空下浓缩，以得到75g(粗产物)，其为棕色固体。将该粗产物直接用于下一步，而不经进一步纯化。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝602。
步骤8：2-氨基-4-(6-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-5-氯-3,6-二氟苯甲酸甲酯
将2-氨基-4-[6-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-4-甲基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-3,6-二氟-苯甲酸甲酯(15.0g,24.9mmol)和NCS(4.99g,37.4mmol)在1-甲基-2-吡咯烷酮(350mL)中的溶液在25℃搅拌2h。将反应混合物用水稀释，用乙酸乙酯萃取。将合并的有机层用水洗涤，经Na2SO4干燥并且在真空下浓缩，以得到15.8g(粗产物)标题化合物，其为棕色固体。将该粗产物用于下一步，而不经进一步纯化。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝636。
步骤9：2-氨基-4-(6-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-5-氯-3,6-二氟苯甲酸
向2-氨基-4-[6-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-4-甲基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-5-氯-3,6-二氟-苯甲酸甲酯(16.0g,25.2mmol)在四氢呋喃(150mL)、水(50mL)和甲醇(50mL)中的溶液中加入NaOH(15.1g,377mmol)。将溶液在50℃搅拌3h。将反应体系冷却至室温，并且用柠檬酸将pH调节至约4。将反应混合物用水稀释，用乙酸乙酯萃取。合并的有机层经Na2SO4干燥并且在真空下浓缩，以得到15.8g(粗产物)标题化合物，其为棕色固体。将该粗产物用于下一步，而不经进一步纯化。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝622。
步骤10：2-氨基-4-(6-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-5-氯-3,6-二氟苯甲酰胺
将2-氨基-4-[6-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-4-甲基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-5-氯-3,6-二氟-苯甲酸(14.5g,23.3mmol)、NH4Cl(3.74g,69.9mmol)、DIPEA(9.04g,69.9mmol)和HATU(17.7g,46.6mmol)在DMF(150mL)中的溶液在室温搅拌2小时。将反应溶液倒入水中，通过过滤收集固体并且用水洗涤，以得到13.5g(粗产物)标题化合物，其为棕色固体。该粗产物不经进一步纯化即用于下一步。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝621。
步骤11：7-(6-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-2,6-二氯-5,8-二氟喹唑啉-4(3H)-酮
将2-氨基-4-[6-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-4-甲基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-5-氯-3,6-二氟-苯甲酰胺(30.0g,48.3mmol)和硫光气(7.74mL,101mmol)在1,4-二噁烷(250mL)中的溶液在105℃搅拌1小时。将反应体系冷却至室温并且倒入饱和NaHCO3中。所得溶液用乙酸乙酯进行萃取。合并的有机层经Na2SO4干燥并且在真空下浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化(梯度：0％至8％EtOAc/DCM)，以得到11g(产率34.2％)标题化合物，其为黄色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝665。1H NMR(300MHz,DMSO-d6,ppm):δ7.25–7.06(m,4H),6.88(d,J＝8.0Hz,5H),4.88–4.49(m,4H),3.35(s,6H),2.40(d,J＝2.3Hz,3H)。
中间体38：(1R,2S,5R)-2-(羟基甲基)-3,6-二氮杂双环[3.2.2]壬烷-6-甲酸叔丁酯
步骤1：(1S,5R)-3,6-二氮杂双环[3.2.2]壬烷-3,6-二甲酸3-苄基6-(叔丁基)酯
在氮气下，将3,6-二氮杂双环[3.2.2]壬烷-6-甲酸叔丁酯(500mg,2.21mmol)、CbzCl(492mg,2.88mmol)和DIPEA(1.42g,11.1mmol)在二氯甲烷(10mL)中的溶液在室温搅拌1h。将反应混合物用DCM稀释，用水洗涤。有机层经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化(梯度：0％至100％EtOAc/石油醚)，以得到800mg标题化合物，其为无色油状物。将两种对映体通过制备型SFC用以下条件分离：(柱：CHIRALPAK IG，3×25cm，5μm；流动相A：CO2，流动相B：IPA(0.5％2M NH3-MeOH)；流速：70mL/min；梯度：30％B；柱温：35℃；反压：100bar；215nm；RT1：6.86；RT2：7.89；进样体积：1.5ml；运行次数：20)，以得到330mg较快的峰和340mg较慢的峰，其为白色油状物。较快的峰为所需异构体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝361。
步骤2：(1R,5R)-3,6-二氮杂双环[3.2.2]壬烷-3-甲酸苄酯
将(1S,5R)-3,6-二氮杂双环[3.2.2]壬烷-3,6-二甲酸3-苄基6-(叔丁基)酯(10.0g,27.7mmol)在二氯甲烷(60mL)和4M HCl/二噁烷(20mL)中的溶液在室温搅拌2h。将溶剂在真空下浓缩，以得到11.2g(粗产物)标题化合物，其为黄色固体，不经进一步纯化即用于下一步。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝261。
步骤3：(1R,5R)-6-苄基-3,6-二氮杂双环[3.2.2]壬烷-3-甲酸苄酯
/>
将(1R,5R)-3,6-二氮杂双环[3.2.2]壬烷-3-甲酸苄酯(11.4g,43.7mmol)、苄基溴(8.99g,52.5mmol)和DIPEA(11.3g,87.5mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(50mL)中的溶液在80℃搅拌3小时。将反应用EtOAc稀释并且用水洗涤。有机层经无水Na2SO4干燥并且在真空下浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化(梯度：含0％至40％EtOAc的石油醚)，以得到8.30g标题化合物，其为黄色油状物。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝351
步骤4：(1S,5R)-6-苄基-3,6-二氮杂双环[3.2.2]壬烷(2,2,2-三氟乙酸盐)
将(1R,5R)-6-苄基-3,6-二氮杂双环[3.2.2]壬烷-3-甲酸苄酯(8.30g,23.6mmol)在TFA(60mL)中的溶液在70℃搅拌2小时。将溶剂在真空下浓缩，以得到5.80g(粗产物)标题化合物，其为黄色油状物，不经进一步纯化即用于下一步。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝217。
步骤5：(1R,5R)-6-苄基-3,6-二氮杂双环[3.2.2]壬烷-3-甲酸叔丁酯
将(1S,5R)-6-苄基-3,6-二氮杂双环[3.2.2]壬烷(2,2,2-三氟乙酸盐)(5.80g，粗产物)、Boc2O(8.60g,39.4mmol)和DIPEA(10.3g,79.8mmol)在二氯甲烷(120mL)中的溶液在室温搅拌2h。将溶剂在真空下浓缩，并且将所得残余物通过反相色谱法纯化(梯度：含0％至100％乙腈的水(0.05％NH4HCO3))，以得到6.30g标题化合物，其为黄色油状物。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝317。
步骤6：(1R,2S,5R)-6-苄基-3,6-二氮杂双环[3.2.2]壬烷-2,3-二甲酸3-(叔丁基)2-甲酯
在氮气下，在-78℃向(1R,5R)-6-苄基-3,6-二氮杂双环[3.2.2]壬烷-3-甲酸叔丁酯(6.09g,19.2mmol)和TMEDA(2.72g,23.4mmol)在乙醚(46mL)中的溶液中加入s-BuLi(18.8mL，1.3M，在己烷中)。将所得溶液在-78℃搅拌1.5h。然后加入含氯甲酸甲酯(1.77mL,22.8mmol)的乙醚(4.5mL)，并且在室温搅拌2小时。将反应用饱和NaHCO3溶液猝灭。将所得溶液用EtOAc萃取。合并的有机层经无水Na2SO4干燥并且在真空下浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化(梯度：含0％至50％EtOAc的石油醚)，以得到1.50g(所需异构体(异构体a)，柱上较慢的峰，含有痕量b和d)和2.6g(不需要的异构体(异构体c)，柱上较快的峰，纯)，其为黄色油状物。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝375。
步骤7：(1R,2S,5R)-6-苄基-2-(羟基甲基)-3,6-二氮杂双环[3.2.2]壬烷-3-甲酸叔丁酯
在氮气下，在0℃向(1R,2S,5R)-6-苄基-3,6-二氮杂双环[3.2.2]壬烷-2,3-二甲酸3-(叔丁基)2-甲酯(580mg,1.54mmol)中的溶液中加入LiAlH4(3.2mL，1M，在THF中)。将所得溶液在0℃搅拌2h。将反应用Na2SO4·10H2O猝灭。过滤后，在减压条件下浓缩滤液。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化(梯度：含0％至100％EtOAc的石油醚)，以得到520mg标题化合物，其为黄色油状物。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝347。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.37–7.16(m,5H),4.59(d,J＝42.8Hz,1H),4.39–4.19(m,2H),3.74–3.56(m,2H),3.46(dt,J＝28.9,10.3Hz,2H),2.84(s,1H),2.78–2.61(m,3H),2.21(s,1H),1.89(dq,J＝29.0,15.0,13.0Hz,2H),1.46(s,11H)。
步骤8：(6R,9R,9aS)-11-苄基六氢-1H,3H-6,9-(桥亚氨基甲桥)噁唑并[3,4-a]氮杂-3-酮
在氮气下，在0℃向(1R,2S,5R)-6-苄基-2-(羟基甲基)-3,6-二氮杂双环[3.2.2]壬烷-3-甲酸叔丁酯(480mg,1.39mmol)在四氢呋喃(15mL)中的溶液中加入NaH(112mg，2.82mmol，60％，悬浮于油中)。将反应在室温搅拌12h。加入NH4Cl水溶液以猝灭反应。将溶剂在真空下浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化(梯度：含0％至60％EtOAc的石油醚)，以得到360mg标题化合物，其为白色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝273。
步骤9：(6R,9R,9aS)-3-氧代六氢-1H,3H-6,9-(桥亚氨基甲桥)噁唑并[3,4-a]氮杂-11-甲酸叔丁酯
在H2下(3atm)，将(6R,9R,9aS)-11-苄基六氢-1H,3H-6,9-(桥亚氨基甲桥)噁唑并[3,4-a]氮杂-3-酮(330mg,1.20mmol)、10％Pd/C(99.0mg，干燥)和Boc2O(530mg,2.45mmol)在甲醇(70mL)中的溶液在室温搅拌1小时。过滤后，在减压条件下浓缩滤液。将残余物通过快速色谱法纯化(梯度：含0％至100％EtOAc的石油醚)，以得到350mg标题化合物，其为白色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝283。
步骤10：(1R,2S,5R)-2-(羟基甲基)-3,6-二氮杂双环[3.2.2]壬烷-6-甲酸叔丁酯
/>
将(6R,9R,9aS)-3-氧代六氢-1H,3H-6,9-(桥亚氨基甲桥)噁唑并[3,4-a]氮杂-11-甲酸叔丁酯(275mg,0.972mmol)和NaOH(585mg,14.6mmol)在乙醇(9mL)和水(3mL)中的溶液在80℃搅拌12小时。将溶剂在真空下浓缩。将残余物在预填充的C18柱上通过反相快速色谱法纯化(梯度：含0％至100％CH3CN的水(0.05％NH4HCO3))，以得到250mg标题化合物，其为白色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝257。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ4.60(br,1H),3.91-4.08(m,1H),3.40-3.01(m,4H),3.00–2.90(m,1H),2.60-2.45(m,2H),2.00(br,1H),1.95-1.85(m,1H),1.80-1.55(m,3H),1.35(s,9H),1.30-1.20(m,1H)。
中间体39：(S,Z)-(2-(氟亚甲基)四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲醇
步骤1：(S,Z/E)-2-(氟亚甲基)-5-氧代四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-甲酸乙酯
在N2下，在-78℃向2-((氟甲基)磺酰基)吡啶(177mg,1.01mmol)在四氢呋喃(10mL)中的溶液中加入KHMDS(1.2mL,1.20mmol)。将反应体系在-78℃搅拌30min，在-78℃缓慢加入含(S)-2,5-二氧代四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-甲酸乙酯(200mg，0.950mmol，中间体23，步骤1，较快的峰)的THF(5mL)。在-78℃搅拌3小时后，将反应体系温热至室温并且在室温再搅拌1小时。将反应依次用饱和氯化铵水溶液(1mL)和3M HCl(2mL)猝灭。将溶液在室温搅拌1小时。将反应物用水稀释，然后用EtOAc萃取。合并的有机层经无水硫酸钠干燥并且在真空下浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化(梯度：0％至30％乙酸乙酯/石油醚)，以得到65.0mg(产率30％)标题化合物，其为黄色油状物。LC-MS:(ES,m/z):[M+1]+＝228.1。1HNMR(400MHz，氯仿-d1,ppm)δ6.75–6.65(m,1H),6.55–6.44(m,1H),4.45–4.32(m,2H),4.27–4.20(m,4H),3.90(d,J＝16Hz,1H),3.73(d,J＝16Hz,1H),3.32(d,J＝16Hz,1H),3.04(d,J＝16Hz,1H),2.89–2.75(m,2H),2.72–2.56(m,2H),2.53–2.35(m,4H),2.25–2.08(m,2H),1.33–1.28(m,6H)。(由于它是Z/E异构体的混合物，因此存在双重H)
步骤2：(S,Z)-(2-(氟亚甲基)四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲醇和(S,E)-(2-(氟亚甲基)四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲醇
在氮气下，在0℃向(S,Z/E)-2-(氟亚甲基)-5-氧代四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-甲酸乙酯(60.0mg,0.260mmol)在四氢呋喃(5mL)中的溶液中加入DIBAL-H(2.64mL,2.64mmol)。将所得溶液在室温搅拌1小时。将反应用Na2SO4·10H2O猝灭。过滤后，在减压条件下浓缩滤液。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化(梯度：0％至20％MeOH/DCM(0.1％Et3N))，以得到26.0mg(Z/E异构体的混合物，快速柱上的两个峰，但一起收集)(产率57％)标题化合物，其为黄色油状物。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝172.1。1H NMR(300MHz，氯仿-d1,ppm)δ6.79–6.38(m,2H),3.92–3.70(m,2H),3.61–3.20(m,8H),2.79–2.44(m,5H),2.36–2.26(m,1H),2.14–1.66(m,8H)。(由于它是Z/E异构体的混合物，因此存在双重H)。
对于放大批次，按照如上所述的相同程序和纯化方法，由9.7g(S,Z/E)-2-(氟亚甲基)-5-氧代四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-甲酸乙酯获得2.20g(Z，所需异构体)和2.70g(E，不需要的异构体)。两者均为黄色油状物。
Z异构体：LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝172。1H NMR(300MHz，氯仿-d1,ppm)δ6.64–6.29(m,1H),3.79–3.65(m,1H),3.48–3.37(m,1H),3.35–3.23(m,2H),3.14–3.03(m,1H),2.69–2.58(m,1H),2.46–2.35(m,1H),2.30–2.17(m,1H),2.03–1.59(m,4H)。
E异构体：LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝172。1H NMR(300MHz，氯仿-d1,ppm)δ6.76–6.42(m,1H),3.75–3.65(m,1H),3.48–3.34(m,2H),3.33–3.18(m,2H),2.73–2.40(m,3H),2.09–1.65(m,4H)。
实例1：化合物1A和化合物1B：6-((5aS,6S,9R)-3-氯-1-氟-13-(((S)-2-亚甲基四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-2-基)-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(两种单一未知阻转异构体)
步骤1：(5aS,6S,9R)-2-(6-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-3-氯-1-氟-13-(((S)-2-亚甲基四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯(阻转异构体的混合物)/>
向冰冷却的(S)-(2-亚甲基四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲醇(31.0mg，0.202mmol，中间体15)在四氢呋喃(4mL)中的溶液中加入NaH(52.0mg,1.30mmol)。将所得溶液温热至室温。0.5h后，加入(5aS,6S,9R)-2-(6-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-3,13-二氯-1-氟-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯(117mg，0.134mmol，中间体5的外消旋混合物)，并且将所得混合物在40℃加热。2h后，将反应用饱和NH4Cl溶液猝灭并且用EtOAc萃取。合并的有机相经无水硫酸钠干燥并且在真空下浓缩。利用预填充的C18柱纯化残余物(溶剂梯度：含0％至100％ACN的水(0.05％TFA))，以得到白色固体(110mg，产率83％，阻转异构体的混合物)。将混合物通过手性HPLC分离(柱：CHIRALPAK IC，2×25cm，5um；流动相A：Hex(0.5％2M NH3-MeOH)，流动相B：EtOH；流速：20mL/min；梯度：在13min内，20％B至20％B；220/254nm；RT1：9.427；RT2：10.666)，以得到30.0mg较快的峰和35.0mg较慢的峰，其为白色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝986.5。
步骤2：6-((5aS,6S,9R)-3-氯-1-氟-13-(((S)-2-亚甲基四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-2-基)-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(两种单一未知阻转异构体)
将(5aS,6S,9R)-2-(6-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-3-氯-1-氟-13-(((S)-2-亚甲基四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯(步骤1的较快的峰，0.030g，0.030mmol)在2,2,2-三氟乙酸(3mL)中的溶液在50℃搅拌3h。将反应体系用甲苯(2mL)稀释并且在真空下浓缩。将残余物用制备型HPLC纯化(色谱柱：XBridge Prep OBD C18柱，30×150mm，5um；流动相A：水(10mmol/LNH4HCO3)，流动相B：ACN；流速：60mL/min；梯度：在7min内，38％B至68％B；254nm；RT：6.12)，以得到1A，其为白色固体(13.5mg，产率68％)。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝646.3。1H NMR(400MHz,DMSO-d6,ppm)δ6.81(s,2H),6.47(s,1H),4.90(s,2H),4.78–4.71(m,1H),4.59–4.51(m,1H),4.39–4.32(m,1H),4.03(d,J＝10.8Hz,1H),4.00–3.95(m,1H),3.91(d,J＝10.4Hz,1H),3.59–3.50(m,2H),3.49–3.42(m,1H),3.23–3.12(m,1H),3.10–2.94(m,2H),2.62–2.56(m,2H),2.55–2.53(m,1H),2.36(s,3H),2.00–1.91(m,1H),1.91–1.82(m,1H),1.82–1.74(m,2H),1.71–1.61(m,3H),1.60–1.50(m,1H)。
将(5aS,6S,9R)-2-(6-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-3-氯-1-氟-13-(((S)-2-亚甲基四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯(步骤1的较慢的峰，0.039g，0.039mmol)在2,2,2-三氟乙酸(3mL)中的溶液在50℃搅拌3h。将反应混合物用甲苯(2mL)稀释并且在真空下浓缩。将残余物用制备型HPLC纯化(色谱柱：XBridge Prep OBD C18柱，30×150mm，5um；流动相A：水(10mmol/LNH4HCO3)，流动相B：ACN；流速：60mL/min；梯度：在7min内，36％B至66％B；254nm；RT：6.07)，以得到1B，其为白色固体(14.9mg，产率58％)。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝646.3。1H NMR(300MHz,DMSO-d6,ppm)δ6.81(s,2H),6.47(s,1H),4.93–4.80(m,3H),4.63–4.53(m,1H),4.35–4.22(m,1H),4.09–3.88(m,3H),3.62–3.50(m,2H),3.47–3.41(m,1H),3.22–3.12(m,1H),3.09–2.93(m,2H),2.63–2.54(m,2H),2.41–2.30(m,4H),2.02–1.90(m,1H),1.89–1.74(m,2H),1.73–1.61(m,4H),1.60–1.50(m,1H)。
实例2：化合物2：6-((2R,5aS,6S,9R)-3-氯-1-氟-13-(((S,Z)-2-(氟亚甲基)四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-2-基)-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(单一未知阻转异构体)
步骤1：(2R,5aS,6S,9R)-2-(6-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-3-氯-1-氟-13-(((S,Z)-2-(氟亚甲基)四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯(单一未知阻转异构体)
向氮气下的冰冷却的(S,Z)-(2-(氟亚甲基)四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲醇(502mg，2.93mmol，中间体21)在四氢呋喃(20mL)中的溶液中加入NaH(470mg,11.7mmol)。将所得溶液温热至室温。0.5h后，加入(2R,5aS,6S,9R)-2-(6-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-3,13-二氯-1-氟-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯(1.70g，1.95mmol，中间体5)，并且将所得混合物温热至40℃持续3h。将反应混合物加入饱和NH4Cl水溶液(100mL)中并且用EtOAc(3×50mL)萃取。合并的有机相经无水硫酸钠干燥并且在真空下浓缩。利用预填充的C18柱纯化残余物(溶剂梯度：含0％至100％ACN的水(0.05％TFA))，以得到标题化合物，其为黄色固体(1.74g，产率88％)。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝1004.5。
步骤2：6-((2R,5aS,6S,9R)-3-氯-1-氟-13-(((S,Z)-2-(氟亚甲基)四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-2-基)-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺
将(2R,5aS,6S,9R)-2-(6-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-3-氯-1-氟-13-(((S,Z)-2-(氟亚甲基)四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯(1.74g,1.73mmol)在2,2,2-三氟乙酸(20mL)中的溶液在50℃搅拌3.5h。将反应混合物用甲苯(10mL)稀释并且在真空下浓缩。将残余物用DMF(6mL)溶解并且逐滴加入0.24M NaHCO3溶液(500mL)中。收集固体，并且将粗产物在C18柱上通过反相快速色谱法纯化(溶剂梯度：含0％至100％MeOH的水(5mmol/L NH4HCO3))，以得到标题化合物，其为白色固体(863mg，产率77％)。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝664.25。1H NMR(400MHz,DMSO-d6,ppm)δ6.99–6.61(m,3H),6.47(s,1H),4.85–4.71(m,1H),4.60–4.51(m,1H),4.46–4.31(m,1H),4.07(d,J＝10.4Hz,1H),4.03–3.91(m,2H),3.74–3.69(m,1H),3.65–3.59(m,1H),3.57–3.48(m,1H),3.30–3.26(m,1H),3.12–2.95(m,2H),2.61–2.52(m,2H),2.41–2.31(m,4H),1.99–1.91(m,1H),1.91–1.74(m,3H),1.73–1.61(m,3H),1.60–1.50(m,1H)。
实例3：化合物3：6-((2R,5aS,6S,9R)-3-氯-1-氟-15-甲基-13-(((S)-2-亚甲基四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-2-基)-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺/>
在室温向6-((2R,5aS,6S,9R)-3-氯-1-氟-13-(((S)-2-亚甲基四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-2-基)-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(0.040g，0.060mmol(化合物1A))在甲醇(3mL)中的溶液中加入HCHO(37％，在水中)(6.6mg,0.080mmol)和NaOAc(5.0mg,0.060mmol)。1h后，加入NaBH3CN(11.7mg,0.190mmol)。将反应混合物在室温保持1小时并且在减压下浓缩。将残余物用制备型HPLC纯化(色谱柱：XBridgePrep OBD C18柱，30×150mm，5um；流动相A：水(10mmol/L NH4HCO3)，流动相B：ACN；流速：60mL/min；梯度：在7min内，35％B至65％B；254nm；RT：6.5)，以得到标题化合物，其为白色固体(9.4mg，产率23％)。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝660。1H NMR(400MHz,DMSO-d6,ppm)δ6.83(s,2H),6.47(s,1H),4.92(s,2H),4.80–4.70(m,1H),4.60–4.49(m,1H),4.41–4.36(m,1H),4.15–3.90(m,3H),3.70–3.55(m,1H),3.30–3.20(m,3H),3.19–3.10(m,1H),3.03(s,1H),2.76–2.58(m,2H),2.45–2.31(m,4H),2.26(s,3H),2.08–1.48(m,8H)。
实例4：化合物4：1-((2R,5aS,6S,9R)-2-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-3-氯-1-氟-13-(((S)-2-亚甲基四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-基)乙烷-1-酮
在室温向6-((2R,5aS,6S,9R)-3-氯-1-氟-13-(((S)-2-亚甲基四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-2-基)-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(0.040g，0.060mmol(化合物1A))和DIPEA(0.040g,0.310mmol)在二氯甲烷(3mL)中的溶液中加入Ac2O(7.6mg,0.070mmol)。1h后，将反应混合物在减压下浓缩。将残余物用制备型HPLC纯化(色谱柱：Atlantis HILIC OBD柱，19×150mm×5um；流动相A：水(10mmol/L NH4HCO3)，流动相B：ACN；流速：60mL/min；梯度：在9min内，32％B至62％B；254/220nm；RT：8.27)，以得到10.0mg(产率23％)标题化合物，其为白色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝688。1H NMR(400MHz,DMSO-d6,ppm)δ6.83(s,2H),6.48(s,1H),5.09–4.77(m,3H),4.74–4.39(m,4H),4.24–3.89(m,3H),3.70–3.55(m,1H),3.29–3.20(m,1H),3.15–2.96(m,2H),2.75–2.58(m,2H),2.48–2.28(m,4H),2.09(s,3H),2.04–1.61(m,8H)。
下表中的每种化合物按照如实例2中所述的类似的试验程序(使用适当取代的试剂)进行制备。
/>
/>
实例13：化合物13A和化合物13B：6-((13aR)-11-氯-9-氟-7-(((S)-2-亚甲基四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-1,2,3,4,13,13a-六氢吡嗪并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂并[5,6,7-de]喹唑啉-10-基)-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(两种单一未知阻转异构体)/>
步骤1：(S)-3-(((7-溴-2,6-二氯-8-氟-4-羟基喹唑啉-5-基)氧基)甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
在氮气下，向冰冷却的(R)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(444mg,2.05mmol)在THF(10mL)中的溶液中加入NaH(274mg，6.85mmol，60％，在矿物油中)。将所得溶液温热至25℃。30min后，加入7-溴-2,6-二氯-5,8-二氟喹唑啉-4-醇(750mg，2.28mmol，中间体2)，并且将反应混合物温热至65℃持续1h。将反应用饱和NH4Cl溶液猝灭并且用乙酸乙酯萃取(3次)。合并的有机层经无水硫酸钠干燥并且在真空下浓缩。利用预填充的C18柱纯化残余物(溶剂梯度：含0％至100％ACN的水(0.05％TFA))，以得到白色固体(320mg，产率26％)。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝525.1
步骤2：(R)-10-溴-7,11-二氯-9-氟-3,4,13,13a-四氢吡嗪并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂并[5,6,7-de]喹唑啉-2(1H)-甲酸叔丁酯/>
将(S)-3-(((7-溴-2,6-二氯-8-氟-4-羟基喹唑啉-5-基)氧基)甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(320mg,0.610mmol)、DIPEA(1.18g,9.14mmol)和BOP-Cl(623mg,2.44mmol)在二氯甲烷(20mL)中的溶液在25℃搅拌3h。将反应分配在DCM与盐水之间。收集的有机层经无水硫酸钠干燥并且在真空下浓缩。通过硅胶快速柱色谱法进行纯化(梯度：0％至30％乙酸乙酯/石油醚)，得到标题化合物，其为白色固体(190mg，产率61％)。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝507.0。
步骤3：(R)-10-溴-11-氯-7,9-二氟-3,4,13,13a-四氢吡嗪并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂并[5,6,7-de]喹唑啉-2(1H)-甲酸叔丁酯
在氮气下，将(R)-10-溴-7,11-二氯-9-氟-3,4,13,13a-四氢吡嗪并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂并[5,6,7-de]喹唑啉-2(1H)-甲酸叔丁酯(270mg,0.533mmol)和CsF(162mg,1.06mmol)在DMSO(5mL)中的混合物在50℃搅拌3h。将混合物冷却至环境温度并且用EtOAc(50mL)稀释。将所得溶液用饱和NaCl水溶液洗涤。收集的有机层经无水硫酸钠干燥并且在真空下浓缩。通过硅胶快速色谱法进行纯化(梯度：0％至30％乙酸乙酯/石油醚)，得到黄色固体(190mg，产率72％)。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝491.1。
步骤4：(R)-(2-(叔丁氧基羰基)-11-氯-7,9-二氟-1,2,3,4,13,13a-六氢吡嗪并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂并[5,6,7-de]喹唑啉-10-基)氯化锌(II)
在-78℃向(R)-10-溴-11-氯-7,9-二氟-3,4,13,13a-四氢吡嗪并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂并[5,6,7-de]喹唑啉-2(1H)-甲酸叔丁酯(140mg,0.280mmol)在无水THF(0.6mL)中的溶液中逐滴加入iPrMgCl.LiCl(0.22mL，0.286mmol，1.3M，在THF中)。将溶液在-78℃保持1h。在-78℃向该溶液中加入ZnCl2(0.15mL，0.30mmol，2M，在2-甲基四氢呋喃中)。10min后，将溶液温热至室温。1h后，将反应混合物用于以下步骤。
步骤5：(13aR)-10-(6-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-11-氯-7,9-二氟-3,4,13,13a-四氢吡嗪并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂并[5,6,7-de]喹唑啉-2(1H)-甲酸叔丁酯(两种单一未知阻转异构体)
将来自前一步骤的锌酸盐溶液转移至脱气后的6-溴-N,N-双(4-甲氧基苄基)-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(117mg,0.240mmol)和PdCl2(PPh3)2(6.70mg,0.010mmol)在无水THF(0.6mL)中的溶液中。将悬浮液在50℃加热。18h后，将反应加入水(30mL)中。将所得溶液用EtOAc萃取(3次)。合并的有机层经无水硫酸钠干燥并且在真空下浓缩。通过硅胶快速色谱法进行纯化(梯度：0％至30％乙酸乙酯/石油醚)，得到白色固体(130mg，两种阻转异构体的混合物)。将混合物通过手性HPLC分离(柱：CHIRALPAK IC，2×25cm，5um；流动相A：Hex(0.5％2M NH3-MeOH)，流动相B：EtOH；流速：20mL/min；梯度：在21min内，20％B至20％B；220/254nm；RT1：13.429；RT2：17.077)，以得到54.0mg较快的峰和66.0mg较慢的峰，其为白色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝827.4。
步骤6：(13aR)-10-(6-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-11-氯-9-氟-7-(((S)-2-亚甲基四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-3,4,13,13a-四氢吡嗪并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂并[5,6,7-de]喹唑啉-2(1H)-甲酸叔丁酯(两种单一未知阻转异构体)
向冰冷却的(S)-(2-亚甲基四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲醇(15.0mg，0.098mmol，中间体15)在四氢呋喃(3mL)中的溶液中加入NaH(15.7mg,0.392mmol)。将所得溶液温热至25℃。30min后，将(13aR)-10-(6-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-11-氯-7,9-二氟-3,4,13,13a-四氢吡嗪并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂并[5,6,7-de]喹唑啉-2(1H)-甲酸叔丁酯(步骤5的较快的峰，54.0mg，0.065mmol)加入反应中。2h后，将反应用饱和NH4Cl溶液(30mL)猝灭并且用EtOAc萃取。合并的有机层经无水硫酸钠干燥并且在真空下浓缩。通过硅胶快速色谱法进行纯化(梯度：0％至10％MeOH/DCM)，得到白色固体(47.0mg，产率75％)。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝960.5。
类似于如上所述的方法，由(13aR)-10-(6-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-11-氯-7,9-二氟-3,4,13,13a-四氢吡嗪并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂并[5,6,7-de]喹唑啉-2(1H)-甲酸叔丁酯(步骤5的较慢的峰)和(S)-(2-亚甲基四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲醇(中间体15)制备另一种阻转异构体(较慢的峰)。
步骤7：6-((13aR)-11-氯-9-氟-7-(((S)-2-亚甲基四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-1,2,3,4,13,13a-六氢吡嗪并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂并[5,6,7-de]喹唑啉-10-基)-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(两种单一未知阻转异构体)
将(13aR)-10-(6-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-11-氯-9-氟-7-(((S)-2-亚甲基四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-3,4,13,13a-四氢吡嗪并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂并[5,6,7-de]喹唑啉-2(1H)-甲酸叔丁酯(步骤6的较快的峰，47.0mg，0.049mmol)在2,2,2-三氟乙酸(3mL)中的溶液在50℃搅拌3h。将反应混合物用甲苯(2mL)稀释并且在真空下浓缩。通过制备型HPLC进行纯化(柱：XBridge Prep OBD C18柱，30×150mm，5um；流动相A：水(10mmol/L NH4HCO3)，流动相B：ACN；流速：60mL/min；梯度：在10min内，26％B至56％B；254nm；RT：9.02)，得到白色固体(11.5mg，产率44％，化合物13A)。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝620.3。1H NMR(400MHz,DMSO-d6,ppm)δ6.81(s,2H),6.47(s,1H),5.02–4.75(m,3H),4.69–4.45(m,1H),4.44–4.31(m,1H),4.11–3.89(m,3H),3.55(d,J＝14.0Hz,1H),3.18(d,J＝13.6Hz,1H),3.10–2.92(m,4H),2.72–2.55(m,4H),2.41–2.31(m,4H),2.09–1.97(m,1H),1.94–1.72(m,2H),1.71–1.61(m,1H)。
类似于如上所述的方法，由(13aR)-10-(6-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-11-氯-9-氟-7-(((S)-2-亚甲基四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-3,4,13,13a-四氢吡嗪并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂并[5,6,7-de]喹唑啉-2(1H)-甲酸叔丁酯(步骤6的较慢的峰)制备另一种阻转异构体化合物13B。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝620.3。1H NMR(400MHz,DMSO-d6,ppm)δ6.82(s,2H),6.48(s,1H),4.89(s,2H),4.82(d,J＝12.8Hz,1H),4.46(d,J＝3.6Hz,2H),3.97(s,2H),3.83(dd,J＝10.4,2.4Hz,1H),3.55(d,J＝14.0Hz,1H),3.19(d,J＝14.0Hz,1H),3.09–2.94(m,4H),2.78(t,J＝11.2Hz,1H),2.71–2.62(m,1H),2.61–2.53(m,2H),2.41–2.30(m,4H),2.09–1.94(m,1H),1.93–1.73(m,2H),1.72–1.61(m,1H)
实例14：化合物14：6-((5aS,6S,9R)-3-氯-13-(((S)-2-亚甲基四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-2-基)-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺
步骤1：(5aS,6S,9R)-3-氯-13-(((S)-2-亚甲基四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯
将(5aS,6S,9R)-2-溴-3-氯-13-(((S)-2-亚甲基四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯(208mg，0.330mmol，中间体9)、B2Pin2(261mg,1.03mmol)、Pd(dppf)Cl2(59.3mg,0.0800mmol)和KOAc(113mg,1.16mmol)在1,4-二噁烷(4mL)中的悬浮液在80℃加热。4h后，将反应混合物在真空下浓缩。将石油醚(10mL)与乙酸乙酯(1mL)的混合物加入残余物中，并且将所得悬浮液在室温搅拌0.5h。过滤固体，并且将滤液在减压下浓缩，以得到粗制标题化合物，其为黄色固体(400mg)。LC-MS:(ESI,m/z)(仅观察到对应的硼酸的质量数)：[M+H]+＝598。
步骤2：(5aS,6S,9R)-2-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-3-氯-13-(((S)-2-亚甲基四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯/>
将(5aS,6S,9R)-3-氯-13-(((S)-2-亚甲基四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯(130mg,0.19mmol)、6-溴-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(24.7mg,0.100mmol)、Pd(PPh3)2Cl2(10.2mg,0.0145mmol)和KF(38.6mg,0.670mmol)在乙腈(4mL)和水(0.4mL)中的搅拌溶液在110℃加热1h。将反应混合物在减压下浓缩，并且将所得残余物分配在水与EtOAc之间。收集的有机层经无水硫酸钠干燥并且在真空下浓缩。通过硅胶快速色谱法进行纯化(梯度：0％至20％甲醇/DCM)，得到标题化合物，其为黄色固体(30mg，产率42％)。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝728。
步骤3：6-((5aS,6S,9R)-3-氯-13-(((S)-2-亚甲基四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-2-基)-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺
将(5aS,6S,9R)-2-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-3-氯-13-(((S)-2-亚甲基四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯(0.030g,0.040mmol)在TFA(2mL)和DCM(6mL)中的溶液在室温搅拌1h。将反应混合物在真空下浓缩。通过制备型HPLC进行纯化(柱：Xselect CSH OBD柱，30×150mm，5um，n；流动相A：水(0.1％FA)，流动相B：ACN；流速：60mL/min；梯度：在7min内，6％B至29％B；RT1：5.93min)，得到标题化合物，其为白色固体(3.0mg)。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝628。1H NMR(300MHz,DMSO-d6,ppm)δ6.98(d,J＝2.0Hz,1H),6.70(s,2H),6.42(s,1H),4.93(s,2H),4.88-4.70(m,1H),4.70-4.50(m,1H),4.50–4.35(m,1H),4.20–3.95(m,3H),3.83–3.71(m,2H),3.63(d,J＝14.2Hz,1H),3.21-3.00(m,3H),2.65-2.55(m,3H),2.41–2.32(m,3H),2.01–1.60(m,8H)。
实例15：化合物15：6-((5aS,6S,9R)-3-氯-13-(((S)-2-亚甲基四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-2-基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺/>
步骤1：(5aS,6S,9R)-2-(6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-3-氯-13-(((S)-2-亚甲基四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯
将粗制(5aS,6S,9R)-3-氯-13-(((S)-2-亚甲基四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯(262mg，实例14，步骤1)、6-溴-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(61.8mg,0.260mmol)、Pd(PPh3)2Cl2(36.2mg,0.0515mmol)和KF(44.9mg,0.770mmol)在乙腈(3mL)和水(0.6mL)中的搅拌溶液在80℃加热1h。将反应混合物在真空下浓缩。通过预填充的C18柱进行纯化(溶剂梯度：含0％至100％ACN的水(0.05％NH4HCO3))，得到标题化合物，其为黄色固体(32mg，产率17％)。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝714。
步骤2：6-((5aS,6S,9R)-3-氯-13-(((S)-2-亚甲基四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-2-基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺
将(5aS,6S,9R)-2-(6-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-3-氯-13-(((S)-2-亚甲基四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯(32.0mg,0.0448mmol)在二氯甲烷(2mL)和2,2,2-三氟乙酸(1mL)中的溶液在室温搅拌30min。将反应在真空下浓缩，并且将粗产物通过制备型HPLC纯化(柱：XBridge Prep OBD C18柱，30×150mm，5um；流动相A：水(10mmol/L NH4HCO3+0.1％NH3·H2O)，流动相B：ACN；流速：60mL/min；梯度：在9min内，24％B至54％B；RT1：8.5min)，得到粗产物(6mg)。将材料通过制备型HPLC再次纯化(XBridgePrep OBD C18柱，19×250mm，5um；流动相A：水(0.05％FA)，流动相B：ACN；梯度：在10min内，22％B至38％B，RT1：7.82min)，以得到标题化合物，其为白色固体(1.2mg，产率4.4％)。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝614。1H NMR(300MHz,DMSO-d6,ppm)δ7.76(dd,J＝8.9,2.8Hz,1H),7.04(d,J＝2.8Hz,1H),6.87(s,2H),6.58(d,J＝8.8Hz,1H),4.93(s,2H),4.79(dd,J＝29.2,12.8Hz,1H),4.61(t,J＝12.0Hz,1H),4.50–4.30(m,1H),4.16–3.90(m,3H),3.80–3.50(m,3H),3.20-3.00(m,3H),2.70-2.55(m,2H),2.40-2.30(m,1H),2.05-1.55(m,9H)。
实例16：化合物16A和化合物16B：(5aS,6S,9R)-3-氯-2-(6-氟-1-甲基-1H-吲唑-7-基)-13-(((S)-2-亚甲基四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉
步骤1：6-氟-1-甲基-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑
将7-溴-6-氟-1-甲基-1H-吲唑(1.70g,7.42mmol)、B2Pin2(9.47g,37.3mmol)、Pd(dppf)Cl2(545mg,0.750mmol)和KOAC(3.34g,34.1mmol)在DMF(30mL)中的搅拌溶液在氮气下于80℃加热12h。将反应混合物用乙酸乙酯稀释并且用水洗涤(3次)。有机层经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。通过硅胶快速色谱法进行纯化(梯度：0％至3％乙酸乙酯/石油醚)，得到标题化合物，其为白色固体(1.40g，产率68.3％)。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝277。
步骤2：(5aS,6S,9R)-3-氯-2-(6-氟-1-甲基-1H-吲唑-7-基)-13-(((S)-2-亚甲基四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯
将(5aS,6S,9R)-2-溴-3-氯-13-(((S)-2-亚甲基四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯(274mg，0.430mmol，中间体9)、6-氟-1-甲基-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲唑(797mg,2.89mmol)、Pd(PPh3)2Cl2(48.5mg,0.0700mmol)和KF(113mg,1.94mmol)在乙腈(15mL)和水(1.5mL)中的搅拌溶液在氮气下于90℃加热1.5h。将反应混合物在减压下浓缩，并且将所得残余物分配在乙酸乙酯与水之间。有机层经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。通过硅胶快速色谱法进行纯化(梯度：0％至5％甲醇/DCM)，得到标题化合物，其为黄色固体(100mg，产率30％)。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝702。
步骤3：(5aS,6S,9R)-3-氯-2-(6-氟-1-甲基-1H-吲唑-7-基)-13-(((S)-2-亚甲基四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉(两种单一未知阻转异构体)
将(5aS,6S,9R)-3-氯-2-(6-氟-1-甲基-1H-吲唑-7-基)-13-(((S)-2-亚甲基四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯(23.0mg,0.0300mmol)在2,2,2-三氟乙酸(1mL)和DCM(3mL)中的溶液在室温搅拌1小时。将反应混合物在真空下浓缩。通过制备型HPLC进行纯化(柱：XBridge Prep OBD C18柱，30×150mm，5um；流动相A：水(10mmol/LNH4HCO3)，流动相B：ACN；流速：60mL/min；梯度：在10min内，30％B至60％B；254nm；RT1：8.83)，得到黄色固体(32mg，两种阻转异构体的混合物)。将阻转异构体通过手性制备型HPLC分离(柱：CHIRALPAK IA，2×25cm，5um；流动相A：Hex:DCM＝3:1(10mmol/L NH3)，流动相B：EtOH；流速：15mL/min；梯度：在23min内，50％B至50％B；RT1：7.084min；RT2：18.379min)，以得到10.1mg(产率11％)化合物16A(较快的峰)和10.0mg(产率11％)化合物16B(较慢的峰)，其为白色固体。
化合物16A：LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝602。1H NMR(300MHz,DMSO-d6,ppm)δ8.15(s,1H),7.90(dd,J＝8.8,5.1Hz,1H),7.31(s,1H),7.16(t,J＝9.2Hz,1H),4.93–4.79(m,3H),4.70–4.60(m,1H),4.47(dd,J＝13.1,7.7Hz,1H),4.10–3.91(m,3H),3.70-3.50(m,6H),3.25–2.96(m,4H),2.62-2.55(m,1H),2.35-2.30(m,1H),2.03–1.50(m,8H)。
化合物16B：LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝602。1H NMR(300MHz,DMSO-d6,ppm)δ8.14(s,1H),7.90(dd,J＝8.8,5.1Hz,1H),7.32(s,1H),7.17(t,J＝9.2Hz,1H),4.86(d,J＝26.4Hz,3H),4.70–4.59(m,1H),4.47(dd,J＝13.1,7.9Hz,1H),4.12-3.90(m,3H),3.64–3.45(m,6H),3.25–2.93(m,4H),2.63-2.55(m,1H),2.40-2.30(m,1H),1.99–1.56(m,8H)。
实例17：化合物17A和化合物17B：(2S,5aS,6S,9R)-3-氯-1-氟-2-(6-氟-1-甲基-1H-吲唑-7-基)-13-(((S)-2-亚甲基四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉/>
步骤1：(1R,2S,5S)-2-(((2,6-二氯-8-氟-7-(6-氟-1-甲基-1H-吲唑-7-基)-4-羟基喹唑啉-5-基)氧基)甲基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸叔丁酯
向冰冷却的(1S,2S,5R)-2-(羟基甲基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸叔丁酯(195mg，0.800mmol，中间体1)在四氢呋喃(5mL)中的溶液中加入NaH(128mg，3.20mmol，60％，在矿物油中)。将所得混合物温热至室温持续30min。在室温加入2,6-二氯-5,8-二氟-7-(6-氟-1-甲基-1H-吲唑-7-基)喹唑啉-4(3H)-酮(320mg，0.80mmol，中间体10)。1h后，将反应用H2O稀释，并且将混合物用EtOAc萃取。合并的有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，并且浓缩。通过硅胶快速色谱法进行纯化(梯度：0％至20％甲醇/DCM)，得到白色固体(363mg，产率72％)。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝621。
步骤2：(5aS,6S,9R)-3,13-二氯-1-氟-2-(6-氟-1-甲基-1H-吲唑-7-基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯
/>
在氮气下，将(1R,2S,5S)-2-(((2,6-二氯-8-氟-7-(6-氟-1-甲基-1H-吲唑-7-基)-4-羟基喹唑啉-5-基)氧基)甲基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸叔丁酯(360mg,0.58mmol)、BOPCl(441mg,1.73mmol)和DIPEA(747mg,5.79mmol)在1,2-二氯乙烷(2mL)中的溶液在室温搅拌2h。将反应混合物用EtOAc稀释并且用H2O洗涤。将收集的有机相用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤，并且在真空下浓缩。通过硅胶快速色谱法进行纯化(梯度：0％至20％甲醇/DCM)，得到标题化合物(180mg，产率51％)，其为黄色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝603。
步骤3：(5aS,6S,9R)-3-氯-1-氟-2-(6-氟-1-甲基-1H-吲唑-7-基)-13-(((S)-2-亚甲基四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯
向氮气下的冰冷却的(S)-(2-亚甲基四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲醇(54.0mg，0.350mmol，中间体15)在四氢呋喃(2mL)中的溶液中加入NaH(36.0mg，0.900mmol，60％，在矿物油中)。将所得溶液温热至室温。30min后，加入(5aS,6S,9R)-3,13-二氯-1-氟-2-(6-氟-1-甲基-1H-吲唑-7-基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯(180mg,0.30mmol)，并且将反应在室温保持1h。将反应用H2O稀释，并且将所得混合物用EtOAc萃取。收集的有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，并且在真空下浓缩。通过硅胶快速色谱法进行纯化(梯度：0％至20％甲醇/DCM)，得到标题化合物，其为黄色固体(130mg，产率62％)。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝720。
步骤4：(2S,5aS,6S,9R)-3-氯-1-氟-2-(6-氟-1-甲基-1H-吲唑-7-基)-13-(((S)-2-亚甲基四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉
将(5aS,6S,9R)-3-氯-1-氟-2-(6-氟-1-甲基-1H-吲唑-7-基)-13-(((S)-2-亚甲基四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯(130mg,0.18mmol)在2,2,2-三氟乙酸(2mL)和DCM(2mL)中的溶液在室温搅拌1h。将溶剂在真空下浓缩。将粗产物通过制备型HPLC纯化(柱：XBridge Prep OBD C18柱，30×150mm，5um；流动相A：水(10mmol/LNH4HCO3)，流动相B：ACN；流速：60mL/min；梯度：在9min内，32％B至62％B；254nm；RT：8.00min)，以得到白色固体(80mg，两种阻转异构体的混合物)。将阻转异构体通过手性制备型HPLC分离(柱：CHIRALPAK IE，2×25cm，5um；流动相A：Hex:DCM＝3:1(10mmol NH3)，流动相B：EtOH；流速：20mL/min；梯度：在18min内，50％B至50％B；RT1：8.956min。RT2：14.907min)，以得到25mg化合物17A(较快的峰)和25mg化合物17B(较慢的峰)，其为白色固体。
化合物17A：LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝620。1H NMR(400MHz,DMSO-d6,ppm)δ8.19(s,1H),7.98(dd,J＝8.8,5.2Hz,1H),7.22(dd,J＝9.7,8.8Hz,1H),5.10-4.80(m,3H),4.69–4.59(m,1H),4.44(dd,J＝13.0,8.1Hz,1H),4.08–3.91(m,3H),3.62–3.43(m,6H),3.19(d,J＝14.0Hz,1H),3.08(d,J＝12.9Hz,1H),3.01-2.92(m,1H),2.82(br,1H),2.65–2.53(m,2H),2.35(d,J＝15.5Hz,1H),2.03–1.92(m,1H),1.92–1.62(m,6H),1.60-1.50(m,1H)
化合物17B：LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝620。1H NMR(400MHz,DMSO-d6,ppm)δ8.18(s,1H),7.98(dd,J＝8.8,5.2Hz,1H),7.23(dd,J＝9.8,8.8Hz,1H),4.95-4.82(m,3H),4.70-4.60(m,1H),4.45(dd,J＝13.0,8.3Hz,1H),4.09(d,J＝8.1Hz,1H),3.98(q,J＝10.4Hz,2H),3.64–3.43(m,6H),3.19(d,J＝14.1Hz,1H),3.07(d,J＝12.8Hz,1H),3.03-2.92(m,1H),2.83(br,1H),2.62-2.53(m,2H),2.35(d,J＝15.5Hz,1H),1.97(dd,J＝11.5,6.3Hz,1H),1.91–1.61(m,6H),1.60-1.45(m,1H)
实例18：化合物18A和化合物18B：(5aS,6S,9R)-2-溴-13-氯-1,3-二氟-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯
步骤1：(5aS,6S,9R)-13-氯-1,3-二氟-2-(6-氟-1-甲基-1H-吲唑-7-基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯
在氮气下，在-78℃向(5aS,6S,9R)-13-氯-1,3-二氟-2-(6-氟-1-甲基-1H-吲唑-7-基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯(180mg，0.35mmol，中间体7)在THF(2mL)中的溶液中加入含1.3M iPrMgCl·LiCl的THF(0.31mL,0.40mmol)。40min后，在-78℃加入含2M ZnCl2的2-甲基四氢呋喃(0.21mL,0.42mmol)。15min后，将反应混合物温热至室温持续15min。加入含7-溴-6-氟-1-甲基-吲唑(64.0mg,0.280mmol)和(SP-4-1)-[1,3-双[2,6-双(1-乙基丙基)苯基]-4,5-二氯-1,3-二氢-2H-咪唑-2-亚基]二氯(2-甲基吡啶)钯(29.0mg,0.0345mmol)的THF(0.8mL)，并且将反应加热至50℃过夜。将反应浓缩，并且将粗产物通过硅胶快速色谱法纯化(梯度：0％至70％EtOAc/石油醚)，以得到粗产物(100mg)，其通过预填充的C18柱进行纯化(溶剂梯度：含0％至100％ACN的水(0.05％NH4HCO3))，以得到标题化合物，其为白色固体(37mg，产率18％)。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝587。
步骤2：(5aS,6S,9R)-13-(((S)-2,2-二氟四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-1,3-二氟-2-(6-氟-1-甲基-1H-吲唑-7-基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯
向(S)-(2,2-二氟四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲醇(12.2mg，0.0689mmol，中间体16)在四氢呋喃(2mL)中的溶液中加入NaH(8.3mg，0.21mmol，60％，在矿物油中)。将反应在室温搅拌15min，然后加入(5aS,6S,9R)-13-氯-1,3-二氟-2-(6-氟-1-甲基-1H-吲唑-7-基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯(27.0mg,0.0459mmol)。将反应混合物加热至40℃持续1h。将反应用AcOH猝灭，用水稀释，并且用DCM萃取。合并的有机层经无水Na2SO4干燥，并且浓缩，以得到粗制标题化合物，其为黄色油状物(30mg)。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝728。粗产物直接使用而不经进一步纯化。/>
步骤3：(5aS,6S,9R)-13-(((S)-2,2-二氟四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-1,3-二氟-2-(6-氟-1-甲基-1H-吲唑-7-基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉
将(5aS,6S,9R)-13-(((S)-2,2-二氟四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-1,3-二氟-2-(6-氟-1-甲基-1H-吲唑-7-基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯(30mg，粗产物)在TFA(1mL)和DCM(1mL)中的溶液在室温搅拌30min。将溶剂在真空下浓缩。通过制备型HPLC进行纯化(柱：XBridge Prep OBD C18柱，19×250mm，5um；流动相A：水(10mmol/L NH4HCO3)，流动相B：MeOH；梯度：在9min内，69％B至72％B，RT1：6.33min；RT2：7.9min)，得到化合物18A(较快的峰，4.8mg，产率11％)和化合物18B(较慢的峰，4.3mg，产率10％)，其为白色固体。
化合物18A：LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝628。1H NMR(300MHz,DMSO-d6,ppm)δ8.20(s,1H),8.01(dd,J＝8.8,5.2Hz,1H),7.25(t,J＝9.3Hz,1H),4.86(dd,J＝13.0,2.4Hz,1H),4.62(dd,J＝13.1,2.6Hz,1H),4.43(dd,J＝13.0,8.0Hz,1H),4.20-4.01(m,3H),3.90-3.70(m,2H),3.63(s,3H),3.30–2.97(m,4H),2.78-2.60(m,1H),2.43–2.26(m,2H),2.09–1.60(m,8H)
化合物18B：LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝628。1H NMR(300MHz,DMSO-d6,ppm)δ8.20(s,1H),8.01(dd,J＝8.8,5.2Hz,1H),7.25(t,J＝9.3Hz,1H),4.86(dd,J＝13.0,2.4Hz,1H),4.62(dd,J＝13.1,2.6Hz,1H),4.43(dd,J＝13.0,8.0Hz,1H),4.20-4.01(m,3H),3.70-3.50(m,6H),3.23–2.98(m,3H),2.80-2.68(m,1H),2.43–2.25(m,2H),2.10-1.50(m,8H)
实例19：化合物19：6-((5aS,6S,9R)-1-氟-13-(((S)-2-亚甲基四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-2-基)-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺/>
步骤1：2-氨基-4-溴-3,6-二氟苯甲酰胺
向冰冷却的2-氨基-4-溴-3,6-二氟苯甲酸(5.00g，19.8mmol，中间体2，步骤4)、DIPEA(15.0g,119mmol)和NH4Cl(3.20g,59.8mmol)在DMF(50mL)中的溶液中分批加入HATU(11.3g,29.7mmol)。将所得溶液温热至室温持续2h。将反应混合物倒入水中并且用EtOAc萃取。将收集的有机相用盐水洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤，并且浓缩。将粗材料悬浮于DCM(30mL)中并且过滤，以得到标题化合物(3.20g，粗产物)，其为白色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝251。
步骤2：7-溴-2-氯-5,8-二氟喹唑啉-4(3H)-酮
向冰冷却的2-氨基-4-溴-3,6-二氟苯甲酰胺(3.20g,12.7mmol)在DMF(40ml)中的溶液中加入硫光气(3.08g,26.7mmol)。将反应混合物加热至105℃持续1h。将反应冷却至室温并且浓缩至体积为约20mL。加入甲基叔丁基醚(20mL)，并且将悬浮液在0℃搅拌20min。通过过滤收集固体，并且干燥，以得到标题化合物，其为黄色固体(1.72g，产率38％)。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝295。
步骤3：(1R,2S,5S)-2-(((7-溴-2-氯-8-氟-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-5-基)氧基)甲基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸叔丁酯
向冰冷却的外消旋-(1S,2S,5R)-2-(羟基甲基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸叔丁酯(517mg，2.14mmol，中间体1)在四氢呋喃(7mL)中的溶液中加入NaH(284mg，7.12mmol，60％，在矿物油中)。将所得溶液温热至室温。30min后，加入7-溴-2-氯-5,8-二氟喹唑啉-4(3H)-酮(698mg,2.36mmol)，并且将反应在室温保持3h。将反应用H2O猝灭并且用EtOAc萃取。合并的有机相经无水Na2SO4干燥，过滤，并且浓缩。利用预填充的C18柱纯化残余物(溶剂梯度：含0％至100％ACN的水(0.05％NH4HCO3))，以得到标题化合物，其为白色固体(232mg，产率19％)。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝517。
步骤4：(5aS,6S,9R)-2-溴-13-氯-1-氟-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯
在氮气下，将(1R,2S,5S)-2-(((7-溴-2-氯-8-氟-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-5-基)氧基)甲基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸叔丁酯(230mg,0.44mmol)、BOPCl(340mg,1.3mmol)和DIPEA(576mg,4.47mmol)在1,2-二氯乙烷(3mL)中的搅拌溶液在60℃加热1h。将反应混合物用DCM稀释并且用水洗涤。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，并且浓缩。通过硅胶快速色谱法进行纯化(梯度：0％至25％EtOAc/石油醚)，得到标题化合物，其为黄色固体(116mg，产率52％)。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝499。
步骤5：(5aS,6S,9R)-2-溴-1-氟-13-(((S)-2-亚甲基四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯
向氮气下的冰冷却的(S)-(2-亚甲基四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲醇(42.8mg，0.280mmol，中间体15)在四氢呋喃(2.5mL)中的溶液中加入NaH(27.9mg，0.700mmol，60％，在矿物油中)。将所得溶液温热至室温。30min后，加入(5aS,6S,9R)-2-溴-13-氯-1-氟-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯(116mg,0.230mmol)，并且将所得混合物在40℃加热1h。将反应用H2O猝灭并且用EtOAc萃取。合并的有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，并且浓缩。通过硅胶快速色谱法进行纯化(梯度：0％至100％EtOAc/石油醚)，得到标题化合物，其为白色固体(110mg，产率76％)。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝616。
步骤6：(5aS,6S,9R)-1-氟-13-(((S)-2-亚甲基四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯
在氮气下，将(5aS,6S,9R)-2-溴-1-氟-13-(((S)-2-亚甲基四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯(110mg,0.18mmol)、B2Pin2(132mg,0.520mmol)、Pd(dppf)Cl2(26.2mg,0.0400mmol)和KOAc(52.6mg,0.54mmol)在1,4-二噁烷(2.5mL)中的搅拌溶液在80℃加热。3h后，将反应混合物浓缩，并且将所得残余物用EtOAc:石油醚(1:10)的溶液悬浮，并且在室温搅拌0.5h。过滤固体，并且将滤液在真空下浓缩，以得到粗制标题化合物，其为黄色固体(125mg)。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝582(硼酸)。
步骤7：(5aS,6S,9R)-2-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-1-氟-13-(((S)-2-亚甲基四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯
在氮气下，将(5aS,6S,9R)-1-氟-13-(((S)-2-亚甲基四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯(124mg)、6-溴-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(33.0mg,0.130mmol)、Pd(PPh3)Cl2(18.2mg,0.0300mmol)和KF(22.6mg,0.390mmol)在乙腈(2mL)和H2O(0.4mL)中的搅拌溶液在80℃加热1h。在真空下去除溶剂，并且将所得残余物通过预填充的C18柱纯化(溶剂梯度：含0％至100％ACN的水(0.05％NH4HCO3))，以得到标题化合物，其为白色固体(18.0mg，产率19％)。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝712。
步骤8：6-((5aS,6S,9R)-1-氟-13-(((S)-2-亚甲基四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-2-基)-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺
将(5aS,6S,9R)-2-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-1-氟-13-(((S)-2-亚甲基四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯(18.0mg,0.0252mmol)在二氯甲烷(1mL)和2,2,2-三氟乙酸(0.5mL)中的溶液在室温搅拌30min。在真空下去除溶剂，并且将粗产物通过制备型HPLC纯化(柱：XBridge Prep OBD C18柱，30×150mm，5um；流动相A：水(10mmol/L NH4HCO3)，流动相B：ACN；流速：60mL/min；梯度：在9min内，26％B至56％B；254nm；RT1：8.5min)，以得到标题化合物，其为白色固体(3.9mg，产率25％)。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝612。1H NMR(300MHz,DMSO-d6,ppm)δ6.79(s,2H),6.61(dd,J＝6.1,2.4Hz,1H),6.45(s,1H),4.95–4.73(m,3H),4.50-4.35(m,1H),4.28-4.20(m,1H),4.04–3.88(m,3H),3.56(d,J＝13.7Hz,2H),3.44(s,1H),3.19(d,J＝14.0Hz,1H),3.10-2.95(m,2H),2.65–2.55(m,2H),2.42–2.29(m,4H),2.03–1.47(m,8H)。
实例20：化合物20A和化合物20B：5-氯-6-((5aS,6S,9R)-3-氯-1-氟-13-(((S)-2-亚甲基四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-2-基)-4-甲基吡啶-2-胺(两种单一阻转异构体)/>
步骤1：(5aS,6S,9R)-2-(6-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-3-氯-4-甲基吡啶-2-基)-3,13-二氯-1-氟-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯
在氮气下，向-78℃的(5aS,6S,9R)-2-溴-3,13-二氯-1-氟-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯(160mg，0.300mmol，中间体3)在THF(1.6mL)中的溶液中加入i-PrMgCl.LiCl在THF中的溶液(1.3M,0.26mL,0.340mmol)。30min后，在-78℃加入ZnCl2在2-甲基四氢呋喃(2.0M,0.2mL,0.400mmol)中溶液。5min后，将反应温热至室温持续15min。在氮气下，将上述反应混合物加入6-溴-5-氯-N,N-双(4-甲氧基苄基)-4-甲基吡啶-2-胺(110mg，0.240mmol，中间体22)和PdCl2(PPh3)2(22.0mg,0.0300mmol)在THF(1mL)中的溶液中。将所得混合物在氮气下于50℃搅拌过夜。在反应浓缩后，将所得残余物通过硅胶快速色谱法纯化(梯度：0％至30％乙酸乙酯/石油醚)，以得到110mg非对映体的混合物，其为白色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝835。将混合物通过手性制备型HPLC分离(柱：CHIRALPAK IE-3，4.6×50mm，3um；流动相：Hex(0.1％DEA):EtOH＝70:30)。得到61mg较快的峰和59mg较慢的峰，其为白色固体。
步骤2A：(5aS,6S,9R)-2-(6-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-3-氯-4-甲基吡啶-2-基)-3-氯-1-氟-13-(((S)-2-亚甲基四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯
在氮气下，在0℃向(S)-(2-亚甲基四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲醇(13.8mg，0.090mmol，中间体15)在THF(2mL)中的溶液中加入60％NaH(12.0mg,0.300mmol)。将所得溶液温热至室温持续30min。然后在室温加入(5aS,6S,9R)-2-(6-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-3-氯-4-甲基吡啶-2-基)-3,13-二氯-1-氟-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯(50.0mg，0.0599mmol，上一步骤的较快的峰)，并且将反应混合物在40℃加热1小时。将反应用饱和NH4Cl溶液猝灭，并且将所得混合物萃取(3次)。合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤，并且浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化(梯度：0％至8％MeOH/DCM)，以得到55.9mg(产率98％)标题化合物，其为白色固体。LC-MS(ESI,m/z):[M+H]+＝952。
步骤2B：(5aS,6S,9R)-2-(6-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-3-氯-4-甲基吡啶-2-基)-3-氯-1-氟-13-(((S)-2-亚甲基四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯/>
在氮气下，在0℃向(S)-(2-亚甲基四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲醇(16.2mg，0.110mmol，中间体15)在THF(2mL)中的溶液中加入NaH(14.2mg,0.360mmol)。将所得溶液温热至温度。30min后，加入(5aS,6S,9R)-2-(6-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-3-氯-4-甲基吡啶-2-基)-3,13-二氯-1-氟-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯(59.0mg，0.0706mmol，上一步骤的较慢的峰)，并且将反应温热至40℃持续1小时。将反应用饱和NH4Cl溶液猝灭并且用EtOAc萃取(3次)。合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤，并且浓缩。通过硅胶快速色谱法进行纯化(梯度：0％至8％MeOH/DCM)，得到标题化合物，其为白色固体(60.5mg，产率90％)。LC-MS(ESI,m/z):[M+H]+＝952。
步骤3A：化合物20A：5-氯-6-((5aS,6S,9R)-3-氯-1-氟-13-(((S)-2-亚甲基四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-2-基)-4-甲基吡啶-2-胺
在氮气下，将(5aS,6S,9R)-2-(6-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-3-氯-4-甲基吡啶-2-基)-3-氯-1-氟-13-(((S)-2-亚甲基四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯(55.9mg,0.0587mmol)在TFA(2mL)中的溶液在50℃搅拌2小时。在真空下浓缩。将残余物用制备型HPLC纯化(色谱柱：XBridge Prep OBD C18柱，30*150mm，5μm；流动相A：水(10mmol/L NH4HCO3)，流动相B：ACN；流速：60mL/min；梯度：在8min内，34％B至43％B；波长：220/254nm；RT(min)：7.35)，以得到13.2mg(产率36％)标题化合物，其为白色固体。LC-MS(ESI,m/z):[M+H]+＝612。1H NMR(300MHz,DMSO-d6,ppm)δ6.50(s,1H),6.21(s,2H),4.95–4.80(m,3H),4.59(dd,J＝13.1,2.7Hz,1H),4.31(dd,J＝13.0,8.2Hz,1H),4.10–3.88(m,3H),3.55(d,J＝13.5Hz,2H),3.45(d,J＝5.8Hz,1H),3.19(d,J＝14.0Hz,1H),3.09–2.97(m,2H),2.65–2.54(m,2H),2.35(d,J＝15.7Hz,1H),2.30–2.25(m,3H),2.02–1.92(m,1H),1.90-1.78(m,2H),1.76-1.57(m,4H),1.56-1.48(m,1H)。
步骤3B：化合物20B：5-氯-6-((5aS,6S,9R)-3-氯-1-氟-13-(((S)-2-亚甲基四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-2-基)-4-甲基吡啶-2-胺
在氮气下，将(5aS,6S,9R)-2-(6-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-3-氯-4-甲基吡啶-2-基)-3-氯-1-氟-13-(((S)-2-亚甲基四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯(60.5mg,0.0636mmol)在TFA(2mL)中的溶液在50℃搅拌2h。将反应在真空下浓缩，并且将所得残余物通过制备型HPLC纯化(柱：XBridge Prep OBD C18柱，30*150mm，5μm；流动相A：水(10mmol/L NH4HCO3)，流动相B：ACN；流速：60mL/min；梯度：在8min内，34％B至45％B；波长：220/254nm；RT(min)：7.88)，以得到标题化合物，其为白色固体(13.5mg，产率34％)。LC-MS(ESI,m/z)[M+H]+＝612。1H NMR(300MHz,DMSO-d6,ppm)δ6.50(s,1H),6.22(s,2H),4.90(s,2H),4.76(dd,J＝12.8,2.4Hz,1H),4.56(dd,J＝13.1,2.9Hz,1H),4.39(dd,J＝13.1,7.3Hz,1H),4.02-3.94(m,2H),3.92(d,J＝10.5Hz,1H),3.55(d,J＝13.4Hz,2H),3.46(d,J＝5.8Hz,1H),3.19(d,J＝14.0Hz,1H),3.11–2.95(m,2H),2.66–2.55(m,2H),2.38(s,1H),2.30–2.20(m,3H),2.02-1.91(m,1H),1.90-1.73(m,3H),1.72–1.60(m,3H),1.60-1.45(m,1H)。
实例21：化合物21：6-((2R,5aS,6S,9R)-3-氯-1-氟-13-(((2R,7aS)-2-氟四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-2-基)-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺
步骤1：(2R,5aS,6S,9R)-2-(6-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-3-氯-1-氟-13-(((2R,7aS)-2-氟四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯/>
在N2下，在0℃向((2R,7aS)-2-氟四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲醇(11.1mg，0.07mmol，中间体23)在THF(1.5mL)中的溶液中加入60％NaH(3.5mg,0.09mmol)。将所得溶液温热至室温。30min后，加入(2R,5aS,6S,9R)-2-(6-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-3,13-二氯-1-氟-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯(50.2mg，0.06mmol，中间体5)，并且将反应温热至40℃持续2h。将反应用饱和NH4Cl溶液猝灭并且在真空下浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化洗脱(梯度：0％至5％MeOH/DCM)，以得到标题化合物，其为白色固体(44.1mg，产率77％)。LC-MS(ESI,m/z):[M+H]+＝992
步骤2：6-((2R,5aS,6S,9R)-3-氯-1-氟-13-(((2R,7aS)-2-氟四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-2-基)-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺
将(2R,5aS,6S,9R)-2-(6-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-3-氯-1-氟-13-(((2R,7aS)-2-氟四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯(44.1mg,0.04mmol)在TFA(3mL)中的溶液在50℃搅拌4h。将反应在真空下浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化(条件：柱：XBridge Prep OBD C18柱，30*150mm，5μm；流动相A：水(10mmol/L NH4HCO3)，流动相B：ACN；流速：60mL/min；梯度：在8min内，35％B至49％B，49％B；波长：220/254nm；RT1(min)：7.65)，以得到白色固体(14.8mg，产率51.1％)。LC-MS(ESI,m/z):[M+H]+＝652。1H-NMR(300MHz,DMSO-d6):δ6.84(s,2H),6.47(s,1H),5.28(d,J＝54.2Hz,1H),4.76(dd,J＝12.9,2.4Hz,1H),4.55(dd,J＝13.2,2.9Hz,1H),4.36(dd,J＝13.1,7.2Hz,1H),4.09(d,J＝10.3Hz,1H),3.94(m,2H),3.57(s,1H),3.46(d,J＝5.8Hz,1H),3.18–2.97(m,4H),2.84(m,1H),2.36(s,3H),2.17–2.12(m,1H),2.08–1.96(m,2H),1.91–1.47(m,7H)
实例22化合物22A和化合物22B：6-((5aS,6S,9R)-3-氯-13-(((R)-2,2-二氟四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-1-氟-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-2-基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(两种单一未知阻转异构体)
步骤1：(5aS,6S,9R)-2-(6-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-3,13-二氯-1-氟-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯
在氮气下，向-78℃的(5aS,6S,9R)-2-溴-3,13-二氯-1-氟-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯(200mg，0.280mmol，中间体3)在四氢呋喃(0.76mL)中的溶液中加入i-PrMgCl.LiCl(1.3M，在THF中，0.3mL，0.390mmol)。1h后，加入含ZnCl2的2-甲基四氢呋喃(2M,0.2mL,0.400mmol)，并且将反应在-78℃保持10min。然后将反应温热至室温。1h后，在氮气下，将反应加入6-溴-N,N-双(4-甲氧基苄基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(162.7mg，0.340mmol，中间体25)和PdCl2(PPh3)2(10.5mg,0.010mmol)在四氢呋喃(0.8mL)中的溶液中。将溶液在50℃搅拌过夜。将反应混合物用水稀释并且用EtOAc萃取(3次)。合并的有机层经无水硫酸钠干燥，过滤，并在真空下浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化(梯度：0％至30％EtOAc/石油醚)，以得到标题化合物，其为黄色固体(40mg，产率16.6％)。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝855。
步骤2：(5aS,6S,9R)-2-(6-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-3-氯-13-(((R)-2,2-二氟四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-1-氟-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯(两种单一未知阻转异构体)。/>
在氮气下，向冰冷却的(R)-(2,2-二氟四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲醇(29.6mg，0.170mmol，中间体17)在四氢呋喃(2mL)中的溶液中加入60％NaH(29.6mg,1.29mmol)。将反应温热至室温。30min后，加入(5aS,6S,9R)-2-(6-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-3,13-二氯-1-氟-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯(110mg,0.130mmol)。3h后，将反应用饱和NH4Cl水溶液猝灭并且用EtOAc萃取(3次)。合并的有机层经无水硫酸钠干燥，过滤，并在真空下浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化(梯度：0％至10％MeOH/DCM)，以得到标题化合物，其为黄色固体(100mg两种阻转异构体的混合物，产率78％)。将混合物通过手性HPLC分离(柱：CHIRAL ART Cellulose-SB，2×25cm，5μm；流动相A：MTBE(0.5％2M NH3-MeOH)--HPLC，流动相B：HEX:IPA＝13:1；流速：20mL/min；梯度：在15min内，70％B至70％B；波长：220/254nm；RT1(min)：12.221；RT2(min)：13.85；样品溶剂：EtOH:DCM＝1:1--HPLC；进样体积：0.7mL；运行次数：12)，以得到50.0mg较快的峰和45.0mg较慢的峰，其为白色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝996。
步骤3：6-((5aS,6S,9R)-3-氯-13-(((R)-2,2-二氟四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-1-氟-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂并[5,6,7-de]喹唑啉-2-基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(两种单一未知阻转异构体)
将(5aS,6S,9R)-2-(6-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-3-氯-13-(((R)-2,2-二氟四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-1-氟-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯(50.0mg，0.050mmol，上一步骤的较快的峰)在TFA(2mL)中的溶液在50℃搅拌3h。将反应混合物在真空下浓缩，并且将所得残余物通过制备型HPLC纯化(柱：XBridge Prep OBD C18柱，30×150mm，5um；流动相A：水(10mmol/L NH4HCO3)，流动相B：ACN；流速：60mL/min；梯度：在8min内，40B至50B，254/220nm；RT：7.32)，以得到6.0mg(产率18％)化合物22B，其为白色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝656.15。1H NMR(400MHz,DMSO-d6,ppm)δ7.80(d,J＝8.8Hz,1H),6.96(s,2H),6.61(d,J＝8.8Hz,1H),4.86(dd,J＝13.2,2.4Hz,1H),4.59(dd,J＝13.2,2.8Hz,1H),4.30(dd,J＝12.8,8.4Hz,1H),4.15-4.01(m,3H),3.61-3.52(m,1H),3.49-3.41(m,1H),3.39–3.35(m,1H),3.17–3.01(m,3H),2.81–2.67(m,2H),2.49–2.33(m,2H),2.09–1.99(m,1H),1.98–1.86(m,1H),1.83–1.73(m,2H),1.72–1.61(m,3H),1.60–1.49(m,1H)。
类似于在化合物22B中所述的方法，化合物22A由(5aS,6S,9R)-2-(6-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-3-氯-13-(((R)-2,2-二氟四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-1-氟-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯(45mg，上一步骤的较慢的峰)制备并且通过制备型HPLC纯化(柱：XBridge Prep OBD C18柱，30×150mm，5um；流动相A：水(10mmol/LNH4HCO3)，流动相B：ACN；流速：60mL/min；梯度：在8min内，45B至55B，254/220nm；RT：6.52)，以得到9.0mg(产率30％)，其为白色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝656.15。1H NMR(400MHz,DMSO-d6,ppm)δ7.80(d,J＝8.8Hz,1H),6.96(s,2H),6.61(d,J＝8.8Hz,1H),4.77(dd,J＝12.8,2.0Hz,1H),4.54(d,J＝2.4Hz,1H),4.47-4.29(m,1H),4.12(d,J＝10.8Hz,1H),4.05-3.97(m,2H),3.63-3.53(m,1H),3.52-3.44(m,1H),3.31-3.27(m,1H),3.17-3.01(m,3H),2.91(s,1H),2.78-2.67(m,1H),2.47-2.31(m,2H),2.09-1.97(m,1H),1.96-1.83(m,1H),1.82-1.72(m,3H),1.71-1.49(m,3H)。
实例23：化合物23 6-((5S,5aS,6S,9R)-3-氯-1-氟-13-(((2R,7aS)-2-氟四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5-甲基-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-2-基)-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺
步骤1：(2R,5S,5aS,6S,9R)-2-(6-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-3-氯-1-氟-13-(((2R,7aS)-2-氟四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5-甲基-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯
在氮气下，在0℃向((2R,7aS)-2-氟四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲醇(16.4mg，0.100mmol，中间体16)在四氢呋喃(2mL)中的溶液中加入NaH(8.20mg,0.200mmol)。将所得溶液在0℃搅拌30min。然后在0℃加入(2R,5S,5aS,6S,9R)-2-(6-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-3,13-二氯-1-氟-5-甲基-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯(70.0mg，0.0800mmol，中间体30的较快的峰)，并且在室温搅拌1h。将反应用水猝灭并且在真空下浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化(含0％至10％MeOH的DCM)，以得到标题化合物62mg(产率77.8％)，其为白色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝1006。
步骤2：6-((2R,5S,5aS,6S,9R)-3-氯-1-氟-13-(((2R,7aS)-2-氟四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5-甲基-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-2-基)-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺
将(5S,5aS,6S,9R)-2-(6-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-3-氯-1-氟-13-(((2R,7aS)-2-氟四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5-甲基-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯(60.0mg,0.0600mmol)在TFA(2mL)中的溶液在50℃搅拌4h。将溶剂在真空下蒸发。利用预填充的C18柱纯化残余物(溶剂梯度：含0％至100％ACN的水(0.05％NH4HCO3))，以得到标题化合物(23.5mg，产率59.2％)，其为白色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝666。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ6.84(s,2H),6.46(s,1H),5.27(d,J＝54Hz,1H),5.15–5.12(m,1H),4.34–4.30(m,1H),4.07(d,J＝10Hz,1H),3.96(t,J＝9Hz,2H),3.55(s,1H),3.38(d,J＝6Hz,1H),3.33–3.06(m,2H),3.02–3.00(m,2H),2.849–2.79(m,1H),2.36(s,3H),2.13–2.11(m,1H),2.04–1.98(m,2H),1.87–1.72(m,4H),1.62–1.58(m,2H),1.53–1.47(m,4H)。
实例24：化合物24：6-((2S,5S,5aS,6S,9R)-3-氯-1-氟-13-(((2R,7aS)-2-氟四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5-甲基-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-2-基)-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺
步骤1：(2S,5S,5aS,6S,9R)-2-(6-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-3-氯-1-氟-13-(((2R,7aS)-2-氟四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5-甲基-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯/>
在氮气下，在0℃向((2R,7aS)-2-氟四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲醇(27.1mg，0.170mmol，中间体16)在四氢呋喃(2mL)中的溶液中加入NaH(13.6mg,0.340mmol)。将所得溶液在0℃搅拌30min。然后在0℃加入(2R,5S,5aS,6S,9R)-2-(6-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-3,13-二氯-1-氟-5-甲基-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯(100mg，0.110mmol，中间体30的较慢的峰)并且在室温搅拌1h。将反应用水猝灭并且在真空下蒸发。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化(含0％至10％MeOH的DCM)，以得到标题化合物(90mg，产率79％)，其为黄色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝1006。
步骤2：6-((2S,5S,5aS,6S,9R)-3-氯-1-氟-13-(((2R,7aS)-2-氟四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5-甲基-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-2-基)-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺
将(5S,5aS,6S,9R)-2-(6-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-3-氯-1-氟-13-(((2R,7aS)-2-氟四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5-甲基-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯(90.0mg,0.0900mmol)在TFA(2mL)中的溶液在50℃搅拌4h。将溶剂在真空下蒸发。利用预填充的C18柱纯化残余物(溶剂梯度：含0％至100％ACN的水(0.05％NH4HCO3))，以得到标题化合物(38.3mg，产率64.3％)，其为白色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝666。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ6.83(s,2H),6.47(s,1H),5.27(d,J＝54.4Hz,1H),5.16–5.13(m,1H),4.32–4.28(m,1H),4.05–3.94(m,3H),3.55(d,J＝4.4Hz,1H),3.39–3.33(m,1H),3.09–3.07(m,2H),3.02–3.00(m,2H),2.85–2.79(m,2H),2.35(s,3H),2.14–2.12(m,1H),2.08–2.00(m,2H),1.92–1.73(m,4H),1.60–1.46(m,6H)。
下表中的每种化合物按照如针对实例23所述的类似的试验程序(使用适当取代的试剂)进行制备。
/>
实例38：化合物38A和38B：6-((2R,5S,5aS,6S,9R)-3-氯-13-((3,3-二氟-1-氮杂双环[3.2.0]庚烷-5-基)甲氧基)-1-氟-5-甲基-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-2-基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(两种未知单一异构体)/>
步骤1：(2R,5S,5aS,6S,9R)-2-(6-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-3-氯-13-((3,3-二氟-1-氮杂双环[3.2.0]庚烷-5-基)甲氧基)-1-氟-5-甲基-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯
在氮气下，在0℃向(3,3-二氟-1-氮杂双环[3.2.0]庚烷-5-基)甲醇(31.5mg，0.190mmol，中间体35)在四氢呋喃(2mL)中的溶液中加入NaH(16.1mg，0.400mmol，60％，悬浮于油中)。将所得溶液在0℃搅拌30min。然后加入(2R,5S,5aS,6S,9R)-2-(6-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-3,13-二氯-1-氟-5-甲基-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯(140mg，0.160mmol，中间体31的较慢的峰)，并且将反应在40℃搅拌2h。将反应用水猝灭并且在真空下浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化(含0％至10％MeOH的DCM)，以得到120mg标题化合物(2种异构体的混合物)，其为黄色固体。将混合物通过制备型手性HPLC分离(柱：CHIRAL ART Cellulose-SB，2×25cm，5μm；流动相A：Hex(0.5％2M NH3-MeOH)--HPLC，流动相B：EtOH--HPLC；流速：20mL/min；梯度：在21min内，15％B至15％B；波长：220/254nm；RT1(min)：14.721；RT2(min)：17.854；样品溶剂：EtOH--HPLC；进样体积：0.5mL；运行次数：8)，以得到较快的峰(58mg，产率36.2％)和较慢的峰(56mg，产率34.9％)，其为黄色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝996。
步骤2：6-((2R,5S,5aS,6S,9R)-3-氯-13-((3,3-二氟-1-氮杂双环[3.2.0]庚烷-5-基)甲氧基)-1-氟-5-甲基-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-2-基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(两种单一未知异构体)
将(2R,5S,5aS,6S,9R)-2-(6-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-3-氯-13-((3,3-二氟-1-氮杂双环[3.2.0]庚烷-5-基)甲氧基)-1-氟-5-甲基-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯(58.0mg，0.0600mmol，步骤1的较快的峰)在TFA(2mL)中的溶液在50℃搅拌3h。将溶剂在真空下蒸发。将残余物通过预填充的C18柱纯化(含0％至100％ACN的水(0.05％NH4HCO3))，以得到化合物38(25mg，产率65.5％)，其为白色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝656。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.80(d,J＝8.9Hz,1H),6.97(s,2H),6.61(d,J＝8.8Hz,1H),5.18–5.14(m,1H),4.41–4.23(m,3H),3.99(d,J＝9.4Hz,1H),3.55–3.51(m,2H),3.40(d,J＝6.2Hz,1H),3.23–3.20(m,1H),3.13(d,J＝4.3Hz,1H),3.09–2.98(m,2H),2.68–2.58(m,1H),2.49–2.26(m,3H),1.95–1.84(m,1H),1.66–1.51(m,2H),1.48(d,J＝6.3Hz,4H)。
将(2R,5S,5aS,6S,9R)-2-(6-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-3-氯-13-((3,3-二氟-1-氮杂双环[3.2.0]庚烷-5-基)甲氧基)-1-氟-5-甲基-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯(56.0mg，0.0600mmol，步骤1的较慢的峰)在TFA(2mL)中的溶液在50℃搅拌3h。将溶剂在真空下蒸发。将残余物通过预填充的C18柱纯化(含0％至100％ACN的水(0.05％NH4HCO3))，以得到化合物38(20.9mg，产率56.7％)，其为白色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝656。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.80(d,J＝9.0Hz,1H),6.97(s,2H),6.61(d,J＝8.8Hz,1H),5.18–5.14(m,1H),4.41–4.30(m,2H),4.27(d,J＝11.0Hz,1H),3.99(d,J＝9.4Hz,1H),3.56–3.52(m,2H),3.40(d,J＝6.1Hz,1H),3.22–3.08(m,1H),3.13(d,J＝4.7Hz,1H),3.10–2.98(m,2H),2.87(s,1H),2.70–2.56(m,1H),2.50–2.25(m,3H),1.93–1.84(m,1H),1.65–1.60(m,2H),1.48(d,J＝6.3Hz,4H)。
下表中的每种化合物按照如实例38中所述的类似的试验程序(使用适当取代的试剂)进行制备。
实例42：化合物42A和42B：6-((5S,5aS,6S,9R)-3-氯-1-氟-5-甲基-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-2-基)-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺/>
步骤1：(1S,2S,5R)-2-((S)-1-((7-溴-6-氯-8-氟-4-羟基喹唑啉-5-基)氧基)乙基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸叔丁酯
在氮气下，在0℃向(1R,2S,5S)-2-((S)-1-羟基乙基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸叔丁酯(500mg，1.95mmol，中间体29)在THF(15mL)中的溶液中加入NaH(586mg，14.7mmol，60％，在矿物油中)。将所得溶液在室温搅拌30分钟。然后在0℃将7-溴-6-氯-5,8-二氟喹唑啉-4(3H)-酮(1.44g，4.86mmol，中间体26)中的溶液中加入反应溶液中。将反应体系在室温搅拌1h。将溶液用NH4Cl水溶液猝灭并且在真空下浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化(梯度：0％至8％MeOH/DCM)，以得到481mg(产率18.6％)标题化合物，其为黄色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝533。
步骤2：(5S,5aS,6S,9R)-2-溴-3-氯-1-氟-5-甲基-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯/>
在氮气下，在0℃向(1S,2S,5R)-2-((S)-1-((7-溴-6-氯-8-氟-4-羟基喹唑啉-5-基)氧基)乙基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸叔丁酯(412mg,0.770mmol)和DIPEA(300mg,2.32mmol)在DCM(5mL)中的溶液中加入BOPCl(987mg,3.87mmol)，并且在室温搅拌1h。将所得溶液在真空下浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化(梯度：0％至50％EtOAc/石油醚)，以得到171mg(产率42.7％)标题化合物，其为黄色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝515。
步骤3：(5S,5aS,6S,9R)-2-(6-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-3-氯-1-氟-5-甲基-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯
在氮气下，在-78℃向(5S,5aS,6S,9R)-2-溴-3-氯-1-氟-5-甲基-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯(149mg,0.290mmol)在无水THF(1mL)中的溶液中缓慢加入i-PrMgCl·LiCl(0.3mL，1.3M，在THF中)。将溶液在-78℃搅拌15分钟。然后在-78℃加入ZnCl2(0.3mL，2M，在2-Me THF中)，并且在-78℃搅拌10分钟。将混合物温热至室温并且搅拌20分钟，将所得溶液加入脱气后的6-溴-N,N-双(4-甲氧基苄基)-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(137mg，0.280mmol，中间体4)和Pd(PPh3)2Cl2(10.3mg,0.0100mmol)在无水THF(1mL)中的浆料中。将浆料在50℃搅拌过夜。将溶剂在真空下浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化(梯度：0％至70％石油醚/EtOAc)，以得到99.2mg(两种阻转异构体的混合物)标题化合物，其为黄色固体。将混合物通过手性HPLC分离(柱：CHIRALPAK ID，2×25cm，5μm；流动相A：Hex(0.5％2MNH3-MeOH)--HPLC，流动相B：IPA--HPLC；流速：20mL/min；梯度：在21min内，20％B至20％B；波长：220/254nm；RT1(min)：14.30；RT2(min)：17.97；样品溶剂：EtOH:DCM＝1:1；进样体积：0.5mL；运行次数：7)，以得到45.1mg(产率18.3％)较快的峰和53.2mg(产率21.5％)较慢的峰，其为浅黄色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝849。
步骤4：6-((5S,5aS,6S,9R)-3-氯-1-氟-5-甲基-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-2-基)-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺
将(5S,5aS,6S,9R)-2-(6-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-3-氯-1-氟-5-甲基-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯(45.1mg,0.0500mmol)在TFA(2mL)中的溶液在50℃搅拌4h。将溶液在真空下浓缩。将残余物用制备型HPLC纯化(色谱柱：XBridgePrep OBD C18柱，30*150mm，5μm；流动相A：水(10mmol/L NH4HCO3)，流动相B：ACN；流速：60mL/min；梯度：在8min内，26％B至50％B，50％B；波长：254/220nm；RT1(min)：8)，以得到9.5mg(产率34.8％)化合物42，其为白色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝509.1。1H NMR(400MHz,DMSO-d6,ppm)δ8.52(s,1H),6.84(s,2H),6.46(s,1H),5.25(m,1H),4.36(m,1H),3.99(d,J＝9.6Hz,1H),3.54–3.48(m,1H),3.41–3.35(m,1H),2.99(d,J＝12.5Hz,1H),2.35(d,J＝2.3Hz,3H),1.90–1.80(m,1H),1.66–1.51(m,2H),1.51–1.38(m,4H)
将(5S,5aS,6S,9R)-2-(6-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-3-氯-1-氟-5-甲基-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯(53.2mg,0.0600mmol)在TFA(2mL)中的溶液在50℃搅拌4h。将溶液在真空下浓缩。将残余物用制备型HPLC纯化(色谱柱：XselectCSH C18 OBD柱，30×150mm，5μm；流动相A：水(0.1％FA)，流动相B：ACN；流速：60mL/min；梯度：在8min内，15％B至41％B，41％B；波长：254/220nm；RT1(min)：7)，以得到11.9mg(产率37.4％)化合物42，其为白色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝509.1。1H NMR(400MHz,DMSO-d6,ppm)δ8.53(s,1H),6.83(s,2H),6.47(s,1H),5.27(m,1H),4.37(m,1H),4.05(d,J＝9.7Hz,1H),3.61(s,1H),3.50–3.44(m,1H),3.04(d,J＝12.8Hz,1H),2.51–2.37(m,3H),1.93(s,1H),1.73–1.53(m,3H),1.52–1.40(m,3H)。
实例43：化合物43A和43B：(5S,5aS,6S,9R)-3-氯-1-氟-2-(6-氟-1-甲基-1H-吲唑-7-基)-13-(((2R,7aS)-2-氟四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5-甲基-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉/>
步骤1：(1S,2S,5R)-2-((1S)-1-((2,6-二氯-8-氟-7-(6-氟-1-甲基-1H-吲唑-7-基)-4-羟基喹唑啉-5-基)氧基)乙基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸叔丁酯
在氮气下，在0℃向(1R,2S,5S)-2-((S)-1-羟基乙基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸叔丁酯(160mg，0.620mmol，中间体29)在THF(5mL)中的溶液中加入NaH(75.0mg，1.88mmol，60％，在矿物油中)。将所得溶液在0℃搅拌30min。然后加入2,6-二氯-5,8-二氟-7-(6-氟-1-甲基-1H-吲唑-7-基)喹唑啉-4(3H)-酮(250mg，0.630mmol，中间体10)，并且室温搅拌4小时。将反应用NH4Cl水溶液猝灭并且将混合物用EtOAc萃取。合并的有机层经无水硫酸钠干燥并且在真空下浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化洗脱(梯度：0％至10％MeOH/DCM)，以得到122mg较快的峰和114mg较慢的峰，其为白色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝635。
步骤2：(5S,5aS,6S,9R)-3,13-二氯-1-氟-2-(6-氟-1-甲基-1H-吲唑-7-基)-5-甲基-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯
将(1S,2S,5R)-2-((1S)-1-((2,6-二氯-8-氟-7-(6-氟-1-甲基-1H-吲唑-7-基)-4-羟基喹唑啉-5-基)氧基)乙基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸酯(104mg,0.170mmol)、BOPCl(210mg,0.830mmol)和DIPEA(64.1mg,0.500mmol)在DCM(5mL)中的溶液在室温搅拌1小时。将溶剂在真空下浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化洗脱(梯度：0％至50％EtOAc/石油醚)，以得到90.3mg(产率88.6％)标题化合物，其为黄色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝617。
类似于如上所述的方法，由3-((S)-9-溴-8-氯-5-(氰基甲基)-5,6-二氢-4H-[1,4]氧氮杂并[5,6,7-de]喹唑啉-4-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(步骤1的较慢的峰)制备另一种异构体(83.3mg)。
步骤3：(5S,5aS,6S,9R)-3-氯-1-氟-2-(6-氟-1-甲基-1H-吲唑-7-基)-13-(((2R,7aS)-2-氟四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5-甲基-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯
在氮气下，在0℃向((2R,7aS)-2-氟四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲醇(27.5mg，0.170mmol，中间体16)在THF(3mL)中的溶液中加入NaH(13.9mg，0.350mmol，60％，悬浮于油中)。将所得溶液在0℃搅拌30min。然后加入(5S,5aS,6S,9R)-3,13-二氯-1-氟-2-(6-氟-1-甲基-1H-吲唑-7-基)-5-甲基-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯(71.1mg,0.120mmol)，并且在室温搅拌4小时。将反应用NH4Cl水溶液猝灭。将所得溶液用EtOAc(30mL)萃取。合并的有机层经无水硫酸钠干燥并且在真空下浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化洗脱(梯度：0％至10％MeOH/DCM)，以得到53mg(产率62.2％)标题化合物，其为黄色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝740。
类似于如上所述的方法，由(5S,5aS,6S,9R)-3,13-二氯-1-氟-2-(6-氟-1-甲基-1H-吲唑-7-基)-5-甲基-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯(步骤2的较慢的峰)制备另一种异构体(62.0mg)。
步骤4：(5S,5aS,6S,9R)-3-氯-1-氟-2-(6-氟-1-甲基-1H-吲唑-7-基)-13-(((2R,7aS)-2-氟四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5-甲基-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉/>
在氮气下，向(5S,5aS,6S,9R)-3-氯-1-氟-2-(6-氟-1-甲基-1H-吲唑-7-基)-13-(((2R,7aS)-2-氟四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5-甲基-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯(53.0mg,0.0700mmol)在DCM(2mL)中的溶液中加入TFA(0.5mL)。将所得溶液在室温搅拌40min。将溶剂在真空下浓缩。将残余物通过C18柱纯化(溶剂梯度：含0％至48％ACN的水(0.05％NH4HCO3))，以得到19.4mg(产率42.3％)化合物43，其为白色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝640。1H NMR(400MHz,DMSO-d6,ppm):δ8.19(s,1H),7.97(dd,J＝8.9,5.2Hz,1H),7.21(t,J＝9.3Hz,1H),5.35-5.19(m,2H),4.46(dd,J＝9.4,6.2Hz,1H),4.09-3.99(m,3H),3.60(s,4H),3.58(d,J＝5.3Hz,1H),3.12–2.98(m,4H),2.83(t,J＝8.1Hz,1H),2.20–2.10(m,3H),1.93–1.84(m,4H),1.52(d,J＝6.2Hz,6H)。
类似于如上所述的方法，由(5S,5aS,6S,9R)-3-氯-1-氟-2-(6-氟-1-甲基-1H-吲唑-7-基)-13-(((2R,7aS)-2-氟四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5-甲基-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯(步骤3的较慢的峰)制备另一种异构体(35.1mg，产率72.5％)化合物43。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝640。1H NMR(400MHz,DMSO-d6,ppm):δ8.17(s,1H),7.97(dd,J＝8.8,5.2Hz,1H),7.23(dd,J＝9.7,8.8Hz,1H),5.35(d,J＝3.9Hz,1H),5.15(dd,J＝12.7,2.7Hz,1H),4.51(dd,J＝9.8,6.2Hz,1H),4.11–3.96(m,3H),3.57(d,J＝5.7Hz,1H),3.46(s,4H),3.12–2.99(m,4H),2.82(dd,J＝8.3,7.8Hz,1H),2.21–2.11(m,1H),2.05(d,J＝3.1Hz,1H),2.00(s,1H),1.93-1.82(dd,J＝11.8,8.0Hz,2H),1.79(dd,J＝13.2,6.0Hz,2H),1.65(dd,J＝11.8,8.0Hz,2H),1.65–1.47(m,4H)。
实例44：化合物44：2-((5S,5aS,6S,9R)-3-氯-1-氟-13-(((2R,7aS)-2-氟四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5-甲基-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-2-基)酚
步骤1：(5S,5aS,6S,9R)-2-溴-3-氯-1-氟-13-(((2R,7aS)-2-氟四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5-甲基-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯/>
在氮气下，在0℃向((2R,7aS)-2-氟四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲醇(80.0mg，0.500mmol，中间体10)在THF(10mL)中的溶液中加入NaH(40.0mg，1.00mmol，60％，在矿物油中)。将所得溶液在室温搅拌0.5h。然后在0℃加入(5S,5aS,6S,9R)-2-溴-3,13-二氯-1-氟-5-甲基-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯(240mg，0.438mmol，中间体8，步骤2)，并且在室温搅拌1h。将反应用NH4Cl(水溶液)猝灭并且在真空下浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化，用EtOAc/石油醚(0％至10％)洗脱，以得到标题化合物240mg(产率81.6％)，其为白色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝670/672
步骤2：(5S,5aS,6S,9R)-3-氯-1-氟-13-(((2R,7aS)-2-氟四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-2-(2-羟基苯基)-5-甲基-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯
在氮气下，将(5S,5aS,6S,9R)-2-溴-3-氯-1-氟-13-(((2R,7aS)-2-氟四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5-甲基-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯(230mg,0.343mmol)、(2-羟基苯基)硼酸(47.4mg,0.343mmol)、Pd(PPh3)4(39.7mg,0.0343mmol)和K2CO3(94.8mg,0.687mmol)在DME(10mL)和水(1mL)中的溶液在90℃搅拌5小时。将反应体系冷却至室温，用水稀释并且用EtOAc萃取。合并的有机层经无水Na2SO4干燥并且在真空下浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化，用EtOAc/石油醚(0％至20％)洗脱，以得到160mg(产率68.2％)标题化合物，其为黄色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝684。
步骤3：2-((5S,5aS,6S,9R)-3-氯-1-氟-13-(((2R,7aS)-2-氟四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5-甲基-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-2-基)酚
向(5S,5aS,6S,9R)-3-氯-1-氟-13-(((2R,7aS)-2-氟四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-2-(2-羟基苯基)-5-甲基-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-6,9-桥亚氨基氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯(100.0mg,0.150mmol)在DCM(3mL)中的溶液中加入TFA(0.6mL)。将溶液在室温搅拌1小时。在真空下浓缩。利用制备型HPLC纯化残余物(色谱条件如下：(柱：XBridge Prep OBD C18柱，30*150mm，5μm；流动相A：水(10mmol/L NH4HCO3)，流动相B：ACN；流速：60mL/min；梯度：在10min内，25％B至48％B，48％B；波长：254/220nm；RT(min)：9.6)，以得到标题化合物27mg(产率31.6％)，其为白色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝584。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.62(d,J＝14.5Hz,1H),7.28(t,J＝8.6Hz,1H),7.10(dd,J＝20.0,7.6Hz,1H),7.02–6.84(m,2H),5.38-5.19(d,J＝57Hz,1H),5.18–5.10(m,1H),4.30-4.25(m,1H),4.05(dd,J＝30,10.5Hz,2H),4.04–3.94(m,1H),3.57(d,J＝5.4Hz,1H),3.41(d,J＝4.8Hz,1H),3.19–2.97(m,4H),2.90-2.75(m,1H),2.25–1.50(m,13H)。
实例45：化合物45A和45B：6-((5aS,6R,9R)-3-氯-1-氟-15-(3-氟丙基)-13-(((2R,7aS)-2-氟四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-9,6-(桥亚氨基甲桥)氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-2-基)-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(两种阻转异构体)
步骤1：(1R,2S,5R)-2-(((7-(6-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-2,6-二氯-8-氟-4-羟基喹唑啉-5-基)氧基)甲基)-3,6-二氮杂双环[3.2.2]壬烷-6-甲酸叔丁酯
在氮气下，在0℃向(1R,2S,5R)-2-(羟基甲基)-3,6-二氮杂双环[3.2.2]壬烷-6-甲酸叔丁酯(120mg，0.470mmol，中间体38)在四氢呋喃(10mL)中的溶液中加入NaH(210mg，5.25mmol，60％，在矿物油中)。将所得溶液在0℃在室温搅拌30min。然后在0℃加入7-(6-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-2,6-二氯-5,8-二氟喹唑啉-4-醇(350mg，0.530mmol，中间体4)并且在40℃搅拌24小时。将反应用NH4Cl水溶液猝灭并且用EtOAc萃取。合并的有机层经无水硫酸钠干燥并且在真空下浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化(梯度：含0％至20％MeOH的DCM)，以得到130mg标题化合物，其为黄色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝901。
步骤2：(5aS,6R,9R)-2-(6-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-3,13-二氯-1-氟-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-9,6-(桥亚氨基甲桥)氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯
将(1R,2S,5R)-2-(((7-(6-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-2,6-二氯-8-氟-4-羟基喹唑啉-5-基)氧基)甲基)-3,6-二氮杂双环[3.2.2]壬烷-6-甲酸叔丁酯(95.0mg,0.105mmol)、BOPCl(107mg,0.421mmol)和DIPEA(204mg,1.58mmol)在DCM(3mL)中的溶液在室温搅拌12小时。将反应体系用水稀释并且用DCM萃取。合并的有机层经无水Na2SO4干燥并且在真空下浓缩。将残余物在预填充的C18柱上通过反相快速色谱法纯化(梯度：含0％至100％CH3CN的水(0.05％NH4HCO3))，以得到50mg阻转异构体混合物，其为白色固体。将阻转异构体通过手性制备型HPLC用以下条件分离：(柱：CHIRALART Cellulose-SB，2×25cm，5μm；流动相A：Hex(0.5％2M NH3-MeOH)，流动相B：IPA；流速：20mL/min；梯度：在49min内，20％B至20％B；波长：220/254nm；RT1(min)：30.793；RT2(min)：41.647)，以得到30mg较快的峰和35mg较慢的峰，其为白色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝883。
步骤3：6-((5aS,6R,9R)-3-氯-1-氟-13-(((2R,7aS)-2-氟四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-9,6-(桥亚氨基甲桥)氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-2-基)-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺/>
将(5aS,6R,9R)-2-(6-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-3,13-二氯-1-氟-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-9,6-(桥亚氨基甲桥)氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯(30.0mg,0.0339mmol)(来自较快的峰)在TFA(1mL)中的溶液在50℃搅拌8小时。将反应混合物在真空下浓缩。将残余物在预填充的C18柱上通过反相快速色谱法纯化(梯度：含0％至100％CH3CN的水(0.05％NH4HCO3))，以得到15.0mg标题化合物(异构体1)，其为白色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝666。
类似于如上所述的方法，由(5aS,6R,9R)-2-(6-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-3,13-二氯-1-氟-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-9,6-(桥亚氨基甲桥)氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯(35.0mg,0.0339mmol)制备另一种异构体(异构体2)20.0mg，其为白色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝666。
步骤4：6-((5aS,6R,9R)-3-氯-1-氟-15-(3-氟丙基)-13-(((2R,7aS)-2-氟四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-9,6-(桥亚氨基甲桥)氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-2-基)-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺
在氮气下，将6-((5aS,6R,9R)-3-氯-1-氟-13-(((2R,7aS)-2-氟四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-9,6-(桥亚氨基甲桥)氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-2-基)-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(15.0mg，0.0225mmol，上一步骤的异构体1)、1-碘-3-氟丙烷(10.0mg,0.0500mmol)和DIPEA(40.0mg,0.310mmol)在乙腈(4mL)中的溶液在40℃搅拌12小时。通过制备型HPLC在以下条件下纯化粗产物：(柱：XBridge Prep C18 OBD柱，30×100mm，5μm；流动相A：水(10mmol/LNH4HCO3)，流动相B：ACN；流速：60mL/min；梯度：在10min内，30％B至60％B，60％B；波长：254/220nm；RT(min)：9.6)，以得到5.8mg(产率35％)化合物45，其为白色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝726。1H NMR(300MHz,DMSO-d6,ppm)δ6.81(s,2H),6.50–6.43(m,1H),5.40-5.15(m,1H),4.89(dd,J＝13.6,5.4Hz,1H),4.60(dt,J＝12.7,5.3Hz,2H),4.51–4.41(m,2H),4.22(s,1H),4.07(d,J＝10.3Hz,1H),3.95(d,J＝10.3Hz,1H),3.26(s,1H),3.18–2.96(m,5H),2.90-2.75(m,1H),2.69(t,J＝6.9Hz,2H),2.60-2.50(m,1H),2.39–2.31(m,4H),2.22–2.09(m,1H),2.09–1.96(m,2H),1.90-1.70(m,6H),1.57–1.43(m,2H),1.41-1.31(m,1H)。
类似于如上所述的方法，由6-((5aS,6R,9R)-3-氯-1-氟-13-(((2R,7aS)-2-氟四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-9,6-(桥亚氨基甲桥)氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-2-基)-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(20.0mg，0.0300mmol，上一步骤的异构体2)制备另一种异构体(化合物45)7.1mg(产率32％)。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝726。1H NMR(400MHz,DMSO-d6,ppm)δ6.82(s,2H),6.47(s,1H),5.40-5.20(m,1H),4.96(dd,J＝13.7,5.3Hz,1H),4.66–4.57(m,2H),4.49(t,J＝6.0Hz,1H),4.42(dd,J＝13.1,1.7Hz,1H),4.22(d,J＝4.0Hz,1H),4.13(d,J＝10.4Hz,1H),3.95(d,J＝10.4Hz,1H),3.35-3.25(m,1H),3.15–3.00(m,5H),2.84(q,J＝8.3Hz,1H),2.71(t,J＝6.9Hz,2H),2.60-2.50(m,1H),2.40–2.33(m,4H),2.21–2.10(m,1H),2.10-1.90(m,2H),1.90-1.70(m,6H),1.61–1.42(m,2H),1.42-1.35(m,1H)。
实例46：化合物46：6-((2R,5aS,6R,9R)-3-氯-1-氟-13-(((2R,7aS)-2-氟四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-15-甲基-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-9,6-(桥亚氨基甲桥)氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-2-基)-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺
在氮气下，将6-((5aS,6R,9R)-3-氯-1-氟-13-(((2R,7aS)-2-氟四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-9,6-(桥亚氨基甲桥)氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-2-基)-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(20.0mg，0.0300mmol，实例45，步骤3，异构体2)、AcOH(2.5mg,0.0300mmol)、HCHO(0.05mL,40％在水)在甲醇(1mL)中的溶液在室温搅拌1h。然后加入NaBH3CN(5.7mg,0.0900mmol)，并且在室温搅拌1小时。将反应体系在真空下浓缩。通过制备型HPLC在以下条件下纯化粗产物：(柱：XBridge Prep C18 OBD柱，30×100mm，5μm；流动相A：水(10mmol/L NH4HCO3)，流动相B：ACN；流速：60mL/min；梯度：在9min内，34％B至60％B，60％B；波长：254/220nm；RT(min)：8.85)，以得到3.0mg标题化合物，其为白色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝680。1H NMR(300MHz,DMSO-d6,ppm)δ6.83(s,2H),6.48(s,1H),5.42-5.15(m,1H),4.93(dd,J＝13.6,5.5Hz,1H),4.61(dd,J＝13.0,4.4Hz,1H),4.42(d,J＝12.6Hz,1H),4.22(s,1H),4.13(d,J＝10.4Hz,1H),3.93(d,J＝10.3Hz,1H),3.15–3.06(m,2H),3.06–2.91(m,3H),2.83(d,J＝6.7Hz,1H),2.44–2.32(m,8H),2.23–2.10(m,1H),2.08-1.92(m,2H),1.88–1.72(m,4H),1.65-1.35(m,4H)。
实例47：化合物47：6-((2R,5aS,6R,9R)-3-氯-1-氟-13-(((2R,7aS)-2-氟四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-15-(氧杂环丁烷-3-基甲基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-9,6-(桥亚氨基甲桥)氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-2-基)-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺
将6-((5aS,6R,9R)-3-氯-1-氟-13-(((2R,7aS)-2-氟四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-9,6-(桥亚氨基甲桥)氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-2-基)-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(60.0mg，0.0900mmol，实例45，步骤3，异构体2)、氧杂环丁烷-3-甲醛(10.1mg,0.120mmol)、AcOH(7.5mg,0.0900mmol)在甲醇(1.5mL)中的溶液在室温搅拌1h。然后加入NaBH3CN(17.1mg,0.270mmol)，并且在室温搅拌1小时。将反应体系在真空下浓缩。通过制备型HPLC在以下条件下纯化粗产物：(柱：XBridge Prep C18 OBD柱，30×100mm，5μm；流动相A：水(10mmol/LNH4HCO3)，流动相B：ACN；流速：60mL/min；梯度：在9min内，36％B至61％B；波长：254/220nm；RT(min)：8.85)，以得到7.4mg，其为白色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝736。1H NMR(300MHz,DMSO-d6,ppm)δ6.84(s,2H),6.48(s,1H),5.40-5.15(m,1H),4.93(dd,J＝13.6,5.3Hz,1H),4.72–4.55(m,3H),4.41(d,J＝12.7Hz,1H),4.30(t,J＝6.0Hz,2H),4.18(s,1H),4.12(d,J＝10.3Hz,1H),3.93(d,J＝10.3Hz,1H),3.28–3.06(m,4H),3.00(s,3H),2.93(d,J＝7.6Hz,2H),2.90-2.78(m,1H),2.56(s,1H),2.39–2.32(m,4H),2.15(d,J＝4.6Hz,1H),2.09-1.90(m,2H),1.88–1.72(m,4H),1.60–1.34(m,3H)。
实例48：化合物48：4-((2R,5aS,6R,9R)-2-(6-氨基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-3-氯-1-氟-13-(((2R,7aS)-2-氟四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-9,6-(桥亚氨基甲桥)氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-基)丁腈
将6-((5aS,6R,9R)-3-氯-1-氟-13-(((2R,7aS)-2-氟四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-9,6-(桥亚氨基甲桥)氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-2-基)-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(70.0mg，0.110mmol，实例45，步骤3，异构体2)、4-溴丁腈(31.0mg,0.210mmol)和DIPEA(67.9mg,0.530mmol)在乙腈(1.5mL)中的溶液在60℃搅拌过夜。通过制备型HPLC在以下条件下纯化粗产物：(柱：XBridge Prep C18 OBD柱，30×100mm，5μm；流动相A：水(10mmol/L NH4HCO3)，流动相B：ACN；流速：60mL/min；梯度：在9min内，40％B至65％B；波长：254/220nm；RT(min)：8.55)，以得到9.0mg标题化合物，其为白色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝733。1H NMR(300MHz,DMSO-d6,ppm)δ6.81(s,2H),6.46(s,1H),5.40-5.13(m,1H),4.92(dd,J＝13.6,5.2Hz,1H),4.61(dd,J＝13.0,4.1Hz,1H),4.40(d,J＝12.7Hz,1H),4.23(s,1H),4.10(d,J＝10.3Hz,1H),3.91(d,J＝10.3Hz,1H),3.33(s,1H),3.13–2.95(m,5H),2.81(q,J＝8.8,8.2Hz,1H),2.67(t,J＝6.4Hz,2H),2.55(t,J＝7.0Hz,3H),2.38–2.30(m,4H),2.17–2.03(m,1H),1.99(d,J＝13.4Hz,2H),1.74(dt,J＝13.9,7.7Hz,6H),1.60–1.30(m,3H)。
实例49：化合物49：6-((2R,5aS,6R,9R)-3-氯-1-氟-13-(((S,Z)-2-(氟亚甲基)四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-9,6-(桥亚氨基甲桥)氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-2-基)-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺
步骤1：(2R,5aS,6R,9R)-2-(6-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-3-氯-1-氟-13-(((S,Z)-2-(氟亚甲基)四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-9,6-(桥亚氨基甲桥)氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯
在氮气下，在0℃向[外消旋-(6Z,8S)-6-(氟亚甲基)-2,3,5,7-四氢-1H-吡咯嗪-8-基]甲醇(42.6mg，0.250mmol，中间体39)在THF(3mL)中的溶液中加入NaH(24.9mg，0.620mmol，60％，在矿物油中)。将所得溶液在室温搅拌30min。然后加入外消旋-(1R,2S,16R)-7-[6-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-4-甲基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6,11-二氯-8-氟-4-氧杂-10,12,14,17-四氮杂五环[14.2.2.15,9.02,14.013,21]二十一碳-5(21),6,8,10,12-五烯-17-甲酸叔丁酯(110mg，0.120mmol，实例45，步骤2，阻转异构体2)。将溶液在25℃搅拌2小时。用EtOAc对所得混合物进行萃取。合并的有机层以无水Na2SO4干燥并在减压下浓缩。将粗产物通过反相色谱法纯化(梯度：含0％至60％乙腈的水(0.1％NH4HCO3))，以得到95mg(产率74.9％)标题化合物，其为黄色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝1018。
步骤2：6-((2R,5aS,6R,9R)-3-氯-1-氟-13-(((S,Z)-2-(氟亚甲基)四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-9,6-(桥亚氨基甲桥)氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-2-基)-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺
将外消旋-(1R,2S,16R)-7-[6-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-4-甲基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]-6-氯-8-氟-11-[[外消旋-(6Z,8S)-6-(氟亚甲基)-2,3,5,7-四氢-1H-吡咯嗪-8-基]甲氧基]-4-氧杂-10,12,14,17-四氮杂五环[14.2.2.15,9.02,14.013,21]二十一碳-5(21),6,8,10,12-五烯-17-甲酸叔丁酯(85.0mg,0.080mmol)在TFA(2mL)中的溶液在50℃搅拌4小时。将溶剂在真空下蒸发。将pH用NaHCO3调节至10，然后用DCM萃取。有机层经Na2SO4干燥并且在真空下浓缩，以得到54mg(粗产物)标题化合物，其为白色粗制固体。将粗产物的一小部分通过制备型HPLC纯化，以得到2mg标题化合物。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝678。1H NMR(300MHz,DMSO-d6,ppm)δ6.87(d,J＝17.0Hz,2H),6.65–6.60(m,1H),6.47(s,1H),4.48(t,J＝5.9Hz,1H),4.41(d,J＝12.7Hz,1H),4.20(s,1H),4.06(d,J＝10.5Hz,1H),3.99(d,J＝10.5Hz,1H),3.78(d,J＝14.6Hz,1H),3.33–3.21(m,2H),3.11–2.80(m,3H),2.75(m,2H),2.54(d,J＝15.0Hz,3H),2.41–2.25(m,5H),2.01–1.98(m,2H),1.82–1.42(m,5H)。
实例50：化合物50：6-((2R,5aS,6R,9R)-3-氯-1-氟-13-(((S,Z)-2-(氟亚甲基)四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-15-(3-氟丙基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-9,6-(桥亚氨基甲桥)氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-2-基)-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺
将4-甲基-6-[外消旋-(1R,2S,16R)-6-氯-8-氟-11-[[外消旋-(6Z,8S)-6-(氟亚甲基)-2,3,5,7-四氢-1H-吡咯嗪-8-基]甲氧基]-4-氧杂-10,12,14,17-四氮杂五环[14.2.2.15,9.02,14.013,21]二十一碳-5(21),6,8,10,12-五烯-7-基]-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(60.0mg，0.090mmol，实例49)、1-氟-3-碘丙烷(33.3mg,0.180mmol)和DIPEA(57.1mg,0.440mmol)在乙腈(2mL)中的溶液在50℃搅拌18小时。将粗产物通过反相色谱法纯化(梯度：含0％至60％乙腈的水(0.1％NH4HCO3))，以得到33.0mg(产率50.5％)标题化合物，其为白色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝738。1H NMR(400MHz,DMSO-d6,ppm)δ6.84(d,J＝17.0Hz,2H),6.68–6.62(m,1H),6.47(s,1H),4.94(m,1H),4.61(m,2H),4.48(t,J＝5.9Hz,1H),4.42(d,J＝12.7Hz,1H),4.22(s,1H),4.08(d,J＝10.5Hz,1H),3.95(d,J＝10.5Hz,1H),3.70(d,J＝14.6Hz,1H),3.31–3.23(m,2H),3.12–2.94(m,3H),2.70(m,2H),2.56(d,J＝15.0Hz,3H),2.42–2.28(m,5H),1.94(m,1H),1.82(m,5H),1.73–1.62(m,1H),1.61–1.48(m,2H),1.42(d,J＝13.6Hz,1H)
实例51：化合物51A和51B：6-((5S,5aS,6R,9R)-3-氯-1-氟-13-(((2R,7aS)-2-氟四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5-甲基-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-9,6-(桥亚氨基甲桥)氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-2-基)-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺
步骤1：(1S,6R,9R,9aS)-11-苄基-1-甲基六氢-1H,3H-6,9-(桥亚氨基甲桥)噁唑并[3,4-a]氮杂-3-酮
在氮气下，在-78℃向(1R,5R)-6-苄基-3,6-二氮杂双环[3.2.2]壬烷-3-甲酸叔丁酯(10.0g,31.6mmol)和TMEDA(7.35g,63.3mmol)在乙醚(150mL)中的溶液中加入s-BuLi(48.5mL，63.1mmol，1.3M，在环己烷中)。将所得溶液在-55℃搅拌1.5h。将反应体系冷却至-78℃并且在温度加入含乙醛(4.4mL,78.5mmol)的乙醚(5mL)。将反应体系自然温热至室温并且搅拌过夜。将混合物用NH4Cl水溶液猝灭，用EtOAc萃取。合并的有机层经无水Na2SO4干燥并且在真空下浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化(梯度：0％至30％EtOAc/石油醚)，以得到标题化合物4.4g(4种异构体的混合物)。将混合物通过制备型SFC分离(柱：CHIRALPAK IG，5×25cm，10μm；流动相A：CO2，流动相B：MEOH(0.1％2M NH3-MEOH)；流速：200mL/min；梯度：等度60％B；柱温(℃)：35；反压(bar)：100；波长：220nm；RT1(min)：5.73；RT2(min)：6.9；样品溶剂：MeOH-----制备级；进样体积：4mL；运行次数：23)，以得到化合物c和d的混合物3.2g(产率35.3％)(手性SFC上的第一峰与第二峰的混合物)以及化合物a490mg(产率5.4％)(第三峰，所需异构体)和化合物b 140mg(产率1.5％)(第四峰)，其为黄色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝287。
步骤2：(1S,6R,9R,9aS)-1-甲基六氢-1H,3H-6,9-(桥亚氨基甲桥)噁唑并[3,4-a]氮杂-3-酮
在氢气下，在室温向(1S,6R,9R,9aS)-11-苄基-1-甲基六氢-1H,3H-6,9-(桥亚氨基甲桥)噁唑并[3,4-a]氮杂-3-酮(490mg,1.71mmol)(来自第一步骤的第三峰)在甲醇(10mL)中的溶液中加入Pd/C(250mg,10％)。将所得溶液在室温下搅拌1小时。滤出催化剂。将滤液在真空下浓缩，以得到标题化合物500mg(粗产物)，其为黄色油状物，不经进一步纯化即用于下一步。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝197。
步骤3：(1S,6R,9R,9aS)-1-甲基-3-氧代六氢-1H,3H-6,9-(桥亚氨基甲桥)噁唑并[3,4-a]氮杂-11-甲酸叔丁酯
将(1S,6R,9R,9aS)-1-甲基六氢-1H,3H-6,9-(桥亚氨基甲桥)噁唑并[3,4-a]氮杂-3-酮(500mg，粗产物)、Boc2O(834mg,3.83mmol)和DIPEA(987mg,7.65mmol)在二氯甲烷(10mL)中的溶液在室温搅拌30min。在真空下浓缩。将残余物通过预填充的C18柱纯化(梯度：含0％至100％ACN的水(0.05％NH4HCO3))，以得到标题化合物332mg(产率44％)，其为白色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝296。
步骤4：(1R,2S,5R)-2-((S)-1-羟基乙基)-3,6-二氮杂双环[3.2.2]壬烷-6-甲酸叔丁酯
向(1S,6R,9R,9aS)-1-甲基-3-氧代六氢-1H,3H-6,9-(桥亚氨基甲桥)噁唑并[3,4-a]氮杂-11-甲酸叔丁酯(332mg,1.12mmol)在乙醇(5mL)和水(1mL)中的溶液中加入NaOH(448mg,11.2mmol)。将所得溶液在80℃搅拌1h。将反应混合物分配在水与DCM之间。合并的有机层经无水Na2SO4干燥并且在真空下浓缩，以得到标题化合物301mg(粗产物)，其为黄色固体，不经进一步纯化即用于下一步。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝271。
步骤5：(1R,2S,5R)-2-((1S)-1-((7-(6-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-2,6-二氯-8-氟-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-5-基)氧基)乙基)-3,6-二氮杂双环[3.2.2]壬烷-6-甲酸叔丁酯
在氮气下，在室温向(1R,2S,5R)-2-((S)-1-羟基乙基)-3,6-二氮杂双环[3.2.2]壬烷-6-甲酸叔丁酯(276mg,1.02mmol)在二甲基亚砜(6mL)中的溶液中加入NaHMDS(2.5mL，5mmol，2M，在THF中)。将反应体系在室温搅拌0.5h，然后加入7-(6-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-2,6-二氯-5,8-二氟喹唑啉-4(3H)-酮(678mg，1.02mmol，中间体2)在二甲基亚砜(6mL)中的溶液。将所得溶液在室温搅拌1h。将混合物用NH4Cl水溶液猝灭并且用EtOAc萃取。合并的有机层经无水Na2SO4干燥并且在真空下浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化(梯度：0％至10％MeOH/DCM)，以得到标题化合物380mg(产率40.7％)，其为黄色油状物。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝915。
步骤6：(5S,5aS,6R,9R)-2-(6-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-3,13-二氯-1-氟-5-甲基-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-9,6-(桥亚氨基甲桥)氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯
将(1R,2S,5R)-2-((1S)-1-((7-(6-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-2,6-二氯-8-氟-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-5-基)氧基)乙基)-3,6-二氮杂双环[3.2.2]壬烷-6-甲酸叔丁酯(360mg,0.390mmol)、BOPCl(400mg,1.58mmol)和DIPEA(762mg,5.91mmol)在二氯甲烷(5mL)中的溶液在室温搅拌过夜。在真空下浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化(梯度：0％至50％EtOAc/石油醚)，以得到标题化合物170mg(产率48.2％)(2种阻转异构体的混合物)，其为黄色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝897。
步骤7：(5S,5aS,6R,9R)-2-(6-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-3-氯-1-氟-13-(((2R,7aS)-2-氟四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5-甲基-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-9,6-(桥亚氨基甲桥)氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯/>
在氮气下，在0℃向((2R,7aS)-2-氟四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲醇(33.9mg，0.210mmol，中间体4)在四氢呋喃(3mL)中的溶液中加入NaH(17.9mg，0.450mmol，60％，在矿物油中)。将所得溶液在0℃搅拌30min。然后在0℃加入(5S,5aS,6R,9R)-2-(6-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-3,13-二氯-1-氟-5-甲基-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-9,6-(桥亚氨基甲桥)氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯(160mg,0.180mmol)。将溶液在40℃搅拌2h。将反应用水猝灭并且在真空下浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化(梯度：0％至10％MeOH/DCM)，以得到标题化合物126mg(产率69.3％)，其为白色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝1020。
步骤8：6-((5S,5aS,6R,9R)-3-氯-1-氟-13-(((2R,7aS)-2-氟四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5-甲基-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-9,6-(桥亚氨基甲桥)氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-2-基)-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺
将(5S,5aS,6R,9R)-2-(6-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-3-氯-1-氟-13-(((2R,7aS)-2-氟四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5-甲基-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-9,6-(桥亚氨基甲桥)氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-15-甲酸叔丁酯(120mg,0.120mmol)在2,2,2-三氟乙酸(2mL)中的溶液在50℃搅拌4h。在真空下浓缩。将残余物通过预填充的C18柱纯化(梯度：含0％至100％MeOH的水(0.05％NH4HCO3))，以得到标题化合物70mg(产率87.5％)(2种阻转异构体的混合物)，其为白色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝680。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ6.84(d,J＝13.1Hz,2H),6.48(s,1H),5.40–5.16(m,2H),4.76–4.58(m,1H),4.18–3.91(m,3H),3.30–3.19(m,2H),3.14–3.05(m,2H),3.03–2.91(m,3H),2.86–2.78(m,1H),2.37–2.35(m,3H),2.25–2.06(m,2H),2.06–1.97(m,2H),1.88–1.67(m,5H),1.60–1.51(m,2H),1.34–1.27(m,4H)。
实例51：化合物51A和51B：6-((5S,5aS,6R,9R)-3-氯-1-氟-13-(((2R,7aS)-2-氟四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5-甲基-15-(氧杂环丁烷-3-基甲基)-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-9,6-(桥亚氨基甲桥)氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-2-基)-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺/>
将6-((5S,5aS,6R,9R)-3-氯-1-氟-13-(((2R,7aS)-2-氟四氢-1H-吡咯嗪-7a(5H)-基)甲氧基)-5-甲基-5a,6,7,8,9,10-六氢-5H-9,6-(桥亚氨基甲桥)氮杂并[2',1':3,4][1,4]氧氮杂/>并[5,6,7-de]喹唑啉-2-基)-4-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(60.0mg,0.0900mmol)、氧杂环丁烷-3-甲醛(11.4mg,0.130mmol)和AcOH(8.00mg,0.130mmol)在甲醇(2mL)中的溶液在室温搅拌1h。然后在室温加入NaBH3CN(8.30mg,0.130mmol)，并且再搅拌1h。在真空下浓缩。将残余物通过预填充的C18柱纯化(梯度：含0％至100％MeOH的水(0.05％NH4HCO3))，以得到30mg标题化合物(2种阻转异构体的混合物)。将混合物通过制备型手性HPLC分离(柱：CHIRAL ART Cellulose-SC，2×25cm，5μm；流动相A：Hex:DCM＝3:1(0.5％2M NH3-MeOH)--HPLC，流动相B：EtOH--HPLC；流速：20mL/min；梯度：在12min内，20％B至20％B；波长：220/254nm；RT1(min)：6.398；RT2(min)：9.95；样品溶剂：EtOH；进样体积：1.5mL；运行次数：2)，以得到5.9mg化合物51(较快的峰)和4.3mg化合物51(较慢的峰)，其为白色固体。LC-MS:(ESI,m/z):[M+H]+＝750。
化合物51：1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ6.85(s,2H),6.46(s,1H),5.27(d,J＝54.4Hz,1H),5.10–5.02(m,1H),4.75–4.57(m,3H),4.28–4.23(m,2H),4.10(d,J＝10.4Hz,1H),4.05–3.84(m,2H),3.41(d,J＝13.6Hz,1H),3.18–2.96(m,5H),2.90(d,J＝7.4Hz,3H),2.82(d,J＝7.4Hz,1H),2.54(d,J＝10.1Hz,1H),2.34(d,J＝2.1Hz,3H),2.20(s,1H),2.17–2.10(m,1H),2.09–1.95(m,2H),1.87–1.71(m,4H),1.62–1.48(m,2H),1.37–1.29(d,J＝6.9Hz,1H),1.26(d,J＝6.5Hz,3H)。
化合物51：1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ6.81(s,2H),6.46(s,1H),5.40–5.12(m,1H),5.06–4.99(m,1H),4.69–4.50(m,3H),4.29–4.23(m,2H),4.11–3.92(m,3H),3.37(d,J＝13.6Hz,1H),3.14–3.05(m,4H),2.99(s,1H),2.94–2.75(m,4H),2.62–2.57(m,1H),2.34(d,J＝2.3Hz,3H),2.23–2.09(m,2H),2.09–1.90(m,2H),1.87–1.58(m,5H),1.56–1.08(m,5H)。
表4：NMR
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生物测定
KRAS生化测定–BODIPY-GDP交换TR-FRET。通过评估KRAS G12D中SOS1介导的核苷酸交换的抑制来评定生化化合物效力。利用时间分辨荧光共振能量转移(TR-FRET)监测SOS1促进的荧光标记的GDP(BOPIDY-GDP)的交换。将溶于DMSO中的化合物作为浓度系列分配到384孔白色测定板中。加入在10μL/孔测定缓冲液(20mM HEPES，pH 7.5，50mM NaCl，10mM MgCl2、0.01％Tween-20和1mM二硫苏糖醇)中制备的生物素标记的重组人KRAS(1.5nM突变G12D或野生型)和0.15nM铽标记的链霉亲和素蛋白(CisBIO)的预先形成的复合物，并且孵育10分钟。通过在测定缓冲液中添加5μL 3nM重组人SOS1和300nM BODIPY-GDP来引发反应。孵育60分钟后，在337nm激发波长以及490nm和520nm发射波长下测量荧光。将TR-FRET比率确定为520nm处的荧光除以490nm处的荧光乘以10,000。基于对照样品将结果归一化为抑制百分比：DMSO(0％抑制)和处于完全抑制(100％抑制)浓度的对照化合物。将归一化的TR-FRET结果相对于化合物浓度作图，并且将数据拟合至4参数Hill方程以确定IC50值。
KRAS 3D细胞增殖测定。通过评估纯合突变KRAS G12D人胰腺细胞系(AsPC-1和SW1990)相比于KRAS野生型人肺腺癌细胞系(PC-9)的3D培养物中对增殖的抑制来评定化合物的细胞效力。将细胞接种到384孔黑色圆底、超低附着测定板中的50μL细胞生长培养基(RPMI-1640，包含10％胎牛血清和2mM L-谷氨酰胺)。在37℃和5％CO2下孵育过夜后，将溶于DMSO中的化合物作为稀释系列加入孔中，总体积为150nL(最终浓度为0.3％DMSO)。将细胞在37℃和5％CO2下孵育7小时。通过加入40μL/孔的3D(Promega)来定量细胞增殖。该试剂与机械破碎相结合，释放出细胞ATP，以促进基于荧光素酶的酶/底物化学发光检测系统的活性。在环境条件下振摇孵育25分钟并且在不振摇的情况下再孵育10分钟后，通过反复向上和向下移液以破坏球体来混合孔中的内容物，然后将板离心以去除气泡。将板在环境条件下再孵育15分钟，并且在读板仪(例如EnVision[PerkinElmer])上读取发光。基于以下对照样品将结果归一化为抑制百分比：DMSO(0％抑制)和1uM星形孢菌素(100％抑制)。将归一化发光结果相对于化合物浓度作图，并且将数据拟合至4参数Hill方程以确定IC50值。
KRAS G12D NanoBRET测定。通过在NanoBRETTM测定(Promega)中监测Raf-RBD/KRASG12D相互作用的抑制来评定细胞靶标接合。该测定使用与荧光素酶融合的Raf-RBD以及与/>融合的强力霉素诱导型KRAS G12D稳定共转染的HCT115结肠癌细胞系。将细胞接种到384孔白色组织培养处理的测定板中的40μL包含强力霉素的培养基(RPMI-1640，包含10％胎牛血清、2mM谷氨酰胺、2ng/mL嘌呤霉素和4ng/mL杀稻瘟菌素)中，在37℃、5％CO2下在20小时至24小时内诱导KRAS G12D-纳米荧光素酶表达。然后去除该培养基并且更换为测定培养基(/>包含4％胎牛血清)和0.1μM HaloTag618配体。在37℃、5％CO2下的后续4h孵育期间，HaloTag618配体与Halotag标记的KRAS G12D结合。然后将溶于DMSO中的化合物作为稀释系列加入孔中，总体积为160nL(最终包含0.4％DMSO)，并且将板在37℃、5％CO2下孵育过夜。在最后一步，将Opti-MEM中的10μL NanoGlo底物加入各个孔中，并且在EnVision读板仪(PerkinElmer)上读取460nm(荧光素酶信号)和610nm(NanoBRET信号)的发射读数。Raf-RBD/KRAS G12D相互作用导致从Raf-RBD附近的荧光素酶反应的产物到KRAS G12D上的HaloTag配体受体的生物发光共振能量转移(BRET)，并且生成NanoBRET信号。化合物与KRAS G12D的结合及其与Raf-RBD相互作用的破坏导致该信号下降。将化合物孔的荧光素酶信号和NanoBRET信号除以DMSO对照孔的平均对应信号。然后通过将对照调整后的NanoBRET信号除以类似调整后的荧光素酶信号来计算NanoBRET比率。基于对照样品将结果归一化为抑制百分比：DMSO(0％抑制)和处于完全抑制(100％抑制)浓度的对照化合物。将归一化的NanoBRET比率结果相对于化合物浓度作图，并且将数据拟合至4参数Hill方程以确定IC50值。
表5：
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本文使用的所有技术和科学术语具有相同的含义。已努力确保所使用的数字(例如，量、温度等)的准确性，但应考虑到一些实验误差和偏差。
在本说明书和权利要求书中，除非上下文另有要求，否则“包括”、“包含”和“含有”这些词是在非排他性意义上使用的。应理解的是，本文所述的实施例包括“由实施例组成”和/或“基本上由实施例组成”。
若提供数值的范围，则应理解的是，介于该范围上限与下限之间的每个中间值(到下限的单位的十分之一，除非上下文另外明确规定)以及所指定范围内的任何其他指定值或中间值，均涵盖在本文之内。这些小范围的上限和下限可独立地包括在该较小范围内，并且也涵盖在本文之内，以所指定范围内任何明确排除的限值为准。在规定范围包括一个或两个限值的情况下，本文还包括排除那些包括的限值中的一个或两个的范围。
对于本领域技术人员而言，在受益于上文的描述和相关附图中所提出的教导的情况下，将想到本文所述的化合物和方法的许多变型例和其他实施例。因此，应当理解的是，本文所述的化合物和方法不限于所公开的具体实施例，并且变型例和其他实施例旨在包括在所附权利要求的范围内。尽管本文采用了特定的术语，但这些术语仅在通用和描述性的意义上使用，而非出于限制的目的。

Claims (88)

1.一种具有式(I)的化合物：
或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐，
其中：
X为O或NR6；
n为1、2或3；
m为1、2或3；
p为0、1或2；
其中n和m一起形成6元、7元或8元环A；
每个R0独立地为氢或甲基；
R1为R7取代或未取代的萘基、R7取代或未取代的异喹啉基、R7取代或未取代的吲唑基、R7取代或未取代的苯并噻唑基、R7A取代或未取代的苯基、或R7A取代或未取代的吡啶基；
每个R7独立地为氢、卤素、-OH、NH2、N(Me)2、未取代的C1-3烷基、未取代的C1-3卤代烷基、或未取代的环丙基；
每个R7A独立地为氢、卤素、NH2、N(Me)2、未取代的C1-3烷基、未取代的C1-3卤代烷基、或未取代的环丙基；
R2为氢、L1-O-L2-R8、R8A取代或未取代的C1-3烷基、或R8B取代或未取代的4元至10元杂环；
其中当R2为氢、R1为R7取代的吲唑基并且n和m为1时，则p不是零并且R6不是H；
L1为键或RL1取代或未取代的C1-3亚烷基；
RL1为卤素或未取代的C1-3烷基；
L2为键或未取代的C1-3亚烷基；
R8为R9取代或未取代的包含N、S或O的4元至10元杂环；
每个R9独立地为卤素、氧代、-OCF3、-OCHF2、-OCH2F、未取代的C1-3烷基、未取代的C1-3卤代烷基、未取代的C1-3烷氧基、R10取代或未取代的C1-3次烷基、或R10取代或未取代的C3-4环烷基、或R10取代或未取代的3元或4元杂环；或其中
两个R9一起形成R10取代或未取代的C3-5环烷基、或R10取代或未取代的包含一个或多个氧原子的C3-5杂环；
R10为氢、卤素、或C1-3未取代的烷基；
每个R8A独立地为R9A取代或未取代的C1-3烷基、R9A取代或未取代的C1-3烷氧基、R9A取代或未取代的C3-4环烷基、或R9A取代或未取代的4元至6元杂环；
每个R9A独立地为卤素、氧代、未取代的C1-3烷基、未取代的C1-3卤代烷基、未取代的C1-3烷氧基、未取代的C1-3次烷基、R9取代或未取代的C3-4环烷基、或R9取代或未取代的包含N、S或O的4元至10元杂环；
R8B独立地为卤素、氧代、-NH2、未取代的C1-3烷基、未取代的C1-3卤代烷基、未取代的C1-3烷氧基、或未取代的C1-3次烷基；
R3和R4各自独立地为氢、-CN、卤素、未取代的C1-3烷基、或未取代的环丙基；
每个R5独立地为卤素、氧代、未取代的C1-3烷基、或未取代的C1-3卤代烷基；或其中；
两个R5一起形成环A的两个碳原子之间的桥，其中所述桥包含1至3个碳以及任选地一个选自O和N的杂原子；或
两个R5一起形成环A的两个碳原子之间的桥，其中所述桥包含O或NR11中的一者；
R11为氢、C(O)CH3、或未取代的C1-3烷基；并且
R6为氢或R6A取代或未取代的C1-6烷基、R6A取代或未取代的C1-6卤代烷基、R6A取代或未取代的C1-6烯基；R6A取代或未取代的C1-6炔基、或R6A取代或未取代的3元至4元杂环；
R6A为卤素、CN、OR6B、SR6C、S(O)2R6C、C(O)R6B、未取代的C1-3烷基；或未取代的C1-3卤代烷基、R6B取代或未取代的3元至4元杂环；
R6B和R6C各自独立地为C1-3烷基或C1-3卤代烷基。
2.根据权利要求1所述的化合物，其中每个R0为氢。
3.根据权利要求1所述的化合物，其中一个R0为氢并且一个R0为甲基。
4.根据权利要求3所述的化合物，其具有结构：
5.根据权利要求1所述的化合物，其中R1为R7取代或未取代的苯基、R7取代或未取代的吲唑基、或R7取代或未取代的吡啶基。
6.根据权利要求1至5中任一项所述的化合物，其中R1为R7取代或未取代的苯基。
7.根据权利要求1至5中任一项所述的化合物，其中R1为R7取代或未取代的吲唑基。
8.根据权利要求1至5中任一项所述的化合物，其中R1为R7取代或未取代的吡啶基。
9.根据权利要求1至8中任一项所述的化合物，其中每个R7独立地为卤素、NH2、未取代的C1-3烷基、或未取代的C1-3卤代烷基。
10.根据权利要求1至5中任一项所述的化合物，其中R1为
其中，
X1为N或CF；并且
R7A为氢、卤素、未取代的C1-3烷基、或未取代的C1-3卤代烷基。
11.根据权利要求1、5、8或10中任一项所述的化合物，其中R1为
12.根据权利要求1、5、8、10或11中任一项所述的化合物，其中R1为
13.根据权利要求1至6或10中任一项所述的化合物，其中R1为
其中R7为氢、卤素、未取代的C1-3烷基或未取代的C1-3卤代烷基。
14.根据权利要求1至6、10或13中任一项所述的化合物，其中R1为
15.根据权利要求1至5中任一项所述的化合物，其中R1为
其中每个R7独立地为卤素、NH2、N(Me)2、或未取代的C1-3烷基。
16.根据权利要求1至15中任一项所述的化合物，其中R2为L1-O-L2-R8、R8A取代或未取代的C1-3烷基、或R8B取代或未取代的4元至6元杂环。
17.根据权利要求1至16中任一项所述的化合物，其中R2为L1-O-L2-R8。
18.根据权利要求1至17中任一项所述的化合物，其中L1为键。
19.根据权利要求16至18中任一项所述的化合物，其中L2为未取代的C1-3亚烷基。
20.根据权利要求16至19中任一项所述的化合物，其中R8为包含一个N杂原子的4元至10元杂环。
21.根据权利要求16至20中任一项所述的化合物，其中R8为
其中，
R9为卤素、或R10取代或未取代的C1-3次烷基；
r为0至12的整数；
j为1、2或3；并且
k为1或2。
22.根据权利要求21所述的化合物，其中r为0、1、2或3。
23.根据权利要求16至22中任一项所述的化合物，其中R8为
其中，
R9独立地为卤素、或R10取代或未取代的C1-3次烷基；
每个R10独立地为氢或卤素；并且
r为1或2。
24.根据权利要求16至20中任一项所述的化合物，其中R8为
其中，
R9独立地为卤素、氧代、或未取代的C1-3烷基；并且
r为1或2。
25.根据权利要求16至20中任一项所述的化合物，其中R8为
其中
R9为氢或未取代的C1-3烷基；
W为O、SO2或NR12；并且
R12为氢、未取代的C1-3烷基、或未取代的C1-3卤代烷基。
26.根据权利要求16至20或25中任一项所述的化合物，其中R8为氮杂环丁烷基、氧杂环丁烷基、或硫杂环丁烷二氧化物。
27.根据权利要求1至26中任一项所述的化合物，其中R2为
28.根据权利要求27所述的化合物，其中R9为卤素、或R10取代或未取代的C1-3次烷基。
29.根据权利要求1至15中任一项所述的化合物，其中R2为氢。
30.根据权利要求1至16中任一项所述的化合物，其中R2为R8A取代或未取代的C1-3烷基。
31.根据权利要求29所述的化合物，其中R8A独立地为R9A取代或未取代的烷氧基、或R9A取代或未取代的4元至6元杂环。
32.根据权利要求29或权利要求31所述的化合物，其中R9A为R9取代或未取代的包含N的4元至10元杂环。
33.根据权利要求31或32所述的化合物，其中R9A独立地为卤素、未取代的C1-3烷基、或R10取代或未取代的C1-3次烷基。
34.根据权利要求1至33中任一项所述的化合物，其中R3为卤素。
35.根据权利要求1至34中任一项所述的化合物，其中R4为氢。
36.根据权利要求1至34中任一项所述的化合物，其中R4为卤素。
37.根据权利要求1至36中任一项所述的化合物，其中R5独立地为氧代、或未取代的C1-3烷基，并且p为1。
38.根据权利要求1至36中任一项所述的化合物，其中两个R5一起形成环A的两个碳原子之间的桥，其中所述桥包含1至3个碳。
39.根据权利要求38所述的化合物，其中所述桥包含1个碳原子。
40.根据权利要求38所述的化合物，其中所述桥包含2个碳原子。
41.根据权利要求1所述的化合物，其具有下式：
或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐。
42.根据权利要求1所述的化合物，其具有下式：
或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐。
43.根据权利要求1所述的化合物，其具有下式：
44.根据权利要求1所述的化合物，其具有下式：
或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐。
45.根据权利要求1所述的化合物，其具有下式：
或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐。
46.根据权利要求1所述的化合物，其具有下式：
或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐。
47.根据权利要求1所述的化合物，其具有下式：
或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐。
48.根据权利要求1所述的化合物，其具有下式：
或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐。
49.根据权利要求1所述的化合物，其具有下式：
或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐。
50.根据权利要求1或41至49中任一项所述的化合物，其中R8为：
51.根据权利要求1或38至42中任一项所述的化合物，其中R8为：
52.根据权利要求1或41至49中任一项所述的化合物，其中R8为：
53.根据权利要求1至52中任一项所述的化合物，其中X为NR6。
54.根据权利要求53所述的化合物，其中R6为R6A取代或未取代的C1-3烷基。
55.根据权利要求53所述的化合物，其中R6为R6A取代的C1-3烷基。
56.根据权利要求55所述的化合物，其中R6A为卤素、CN、OH、OMe、OEt、OCF3、SO2Me、未取代的C1-3烷基、或4元杂环。
57.根据权利要求53所述的化合物，其中R6为R6A取代或未取代的C1-3卤代烷基。
58.根据权利要求53所述的化合物，其中R6为R6A取代或未取代的C1-3烯基。
59.根据权利要求53所述的化合物，其中R6为R6A取代或未取代的C1-3炔基。
60.根据权利要求53所述的化合物，其中R6为氢。
61.根据权利要求53所述的化合物，其中R6为甲基。
62.一种表1的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐。
63.一种表2的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐。
64.一种表3的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐。
65.一种药物组合物，其包含根据权利要求1至64中任一项所述的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐，以及一种或多种药用赋形剂。
66.一种治疗癌症的方法，所述方法包括施用有效量的根据权利要求1至64中任一项所述的化合物或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐、或根据权利要求65所述的药物组合物。
67.根据权利要求66所述的方法，其中所述癌症的特征在于包含KRas突变。
68.根据权利要求67所述的方法，其中所述KRas突变对应于KRasG12D突变。
69.根据权利要求68所述的方法，其进一步包括在施用之前测试来自患者的样品不存在还是存在KRasG12D突变。
70.根据权利要求69所述的方法，其中在患者样品显示存在KRasG12D突变之后，向所述患者施用所述化合物、其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐、或药物组合物。
71.根据权利要求66至70中任一项所述的方法，其中所述癌症为组织未定性的。
72.根据权利要求66至70中任一项所述的方法，其中所述癌症为胰腺癌、肺癌或结直肠癌。
73.根据权利要求72所述的方法，其中所述肺癌为肺腺癌、NSCLC或SCLC。
74.根据权利要求72所述的方法，其中所述癌症为胰腺癌。
75.根据权利要求72所述的方法，其中所述癌症为结直肠癌。
76.根据权利要求66至75中任一项所述的方法，其进一步包括施用至少一种另外的治疗剂。
77.根据权利要求76所述的方法，其中所述另外的治疗剂包括表皮生长因子受体(EGFR)抑制剂、磷脂酰肌醇激酶(PI3K)抑制剂、胰岛素样生长因子受体(IGF1R)抑制剂、Janus激酶(JAK)抑制剂、Met激酶抑制剂、SRC家族激酶抑制剂、丝裂原活化蛋白激酶(MEK)抑制剂、细胞外信号调节激酶(ERK)抑制剂、拓扑异构酶抑制剂、紫杉烷、抗代谢剂、或烷化剂。
78.根据权利要求1至64中任一项所述的化合物、或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐，其用作治疗活性物质。
79.根据权利要求1至64中任一项所述的化合物、或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐用于治疗性治疗包含KRasG12D突变的癌症的用途。
80.根据权利要求1至64中任一项所述的化合物、或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐用于制备药物的用途，所述药物用于治疗性治疗包含KRasG12D突变的癌症。
81.根据权利要求1至64中任一项所述的化合物、或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐在制造用于抑制肿瘤转移的药物中的用途。
82.根据权利要求1至64中任一项所述的化合物、或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐，其用于治疗性和/或预防性治疗包含KRasG12D突变的癌症。
83.一种用于调节KRas突变蛋白的活性的方法，所述方法包括使所述突变蛋白与根据权利要求1至64中任一项所述的化合物、或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐反应。
84.一种用于抑制细胞群的增殖的方法，所述方法包括使所述细胞群与根据权利要求1至64中任一项所述的化合物、或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐接触。
85.根据权利要求84所述的方法，其中以所述细胞群的细胞活力降低来衡量对增殖的抑制。
86.一种用于制备经标记的KRasG12D突变蛋白的方法，所述方法包括使KRasG12D突变蛋白与经标记的根据权利要求1至64中任一项所述的化合物、或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐反应，以产生所述经标记的KRasG12D突变蛋白。
87.一种用于抑制肿瘤转移的方法，所述方法包括向有此需要的个体施用治疗有效量的根据权利要求1至64中任一项所述的化合物、或其立体异构体、阻转异构体、互变异构体或药用盐、或根据权利要求65所述的药物组合物至有此需要的受试者。
88.一种用于合成如本文所述的式(I)化合物的方法。
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