CN116807942A - 一种积雪草提取物及愈创木天蓝烃微凝珠及其制备方法 - Google Patents
一种积雪草提取物及愈创木天蓝烃微凝珠及其制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN116807942A CN116807942A CN202310858298.9A CN202310858298A CN116807942A CN 116807942 A CN116807942 A CN 116807942A CN 202310858298 A CN202310858298 A CN 202310858298A CN 116807942 A CN116807942 A CN 116807942A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- guaiacum
- centella asiatica
- asiatica extract
- azulene
- solution
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 235000004440 Guaiacum sanctum Nutrition 0.000 title claims abstract description 69
- 229940059958 centella asiatica extract Drugs 0.000 title claims abstract description 63
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 13
- 239000011324 bead Substances 0.000 title claims description 51
- -1 sky blue hydrocarbon Chemical class 0.000 title claims description 29
- 235000012736 patent blue V Nutrition 0.000 title claims description 28
- 239000004215 Carbon black (E152) Substances 0.000 title claims description 26
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 title claims description 26
- 240000006982 Guaiacum sanctum Species 0.000 title abstract 3
- CUFNKYGDVFVPHO-UHFFFAOYSA-N azulene Chemical compound C1=CC=CC2=CC=CC2=C1 CUFNKYGDVFVPHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 92
- 239000012071 phase Substances 0.000 claims description 71
- 241000190019 Guaiacum Species 0.000 claims description 66
- 239000007908 nanoemulsion Substances 0.000 claims description 51
- 239000003921 oil Substances 0.000 claims description 24
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 claims description 24
- 239000000499 gel Substances 0.000 claims description 22
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 22
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 16
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 claims description 15
- 238000000576 coating method Methods 0.000 claims description 15
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 claims description 12
- YPFDHNVEDLHUCE-UHFFFAOYSA-N 1,3-propanediol Substances OCCCO YPFDHNVEDLHUCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- XXJWXESWEXIICW-UHFFFAOYSA-N diethylene glycol monoethyl ether Chemical compound CCOCCOCCO XXJWXESWEXIICW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 239000004359 castor oil Substances 0.000 claims description 9
- 235000019438 castor oil Nutrition 0.000 claims description 9
- ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N glycerol triricinoleate Natural products CCCCCC[C@@H](O)CC=CCCCCCCCC(=O)OC[C@@H](COC(=O)CCCCCCCC=CC[C@@H](O)CCCCCC)OC(=O)CCCCCCCC=CC[C@H](O)CCCCCC ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N 0.000 claims description 9
- 238000000520 microinjection Methods 0.000 claims description 9
- 229940015975 1,2-hexanediol Drugs 0.000 claims description 8
- FHKSXSQHXQEMOK-UHFFFAOYSA-N hexane-1,2-diol Chemical compound CCCCC(O)CO FHKSXSQHXQEMOK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- WCVRQHFDJLLWFE-UHFFFAOYSA-N pentane-1,2-diol Chemical compound CCCC(O)CO WCVRQHFDJLLWFE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 229910021642 ultra pure water Inorganic materials 0.000 claims description 8
- 239000012498 ultrapure water Substances 0.000 claims description 8
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 7
- DNIAPMSPPWPWGF-VKHMYHEASA-N (+)-propylene glycol Chemical compound C[C@H](O)CO DNIAPMSPPWPWGF-VKHMYHEASA-N 0.000 claims description 6
- 229940035437 1,3-propanediol Drugs 0.000 claims description 6
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 claims description 6
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 6
- 239000008272 agar Substances 0.000 claims description 6
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 6
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 claims description 6
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 6
- 229920000166 polytrimethylene carbonate Polymers 0.000 claims description 6
- IXPNQXFRVYWDDI-UHFFFAOYSA-N 1-methyl-2,4-dioxo-1,3-diazinane-5-carboximidamide Chemical compound CN1CC(C(N)=N)C(=O)NC1=O IXPNQXFRVYWDDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 235000010413 sodium alginate Nutrition 0.000 claims description 5
- 239000000661 sodium alginate Substances 0.000 claims description 5
- 229940005550 sodium alginate Drugs 0.000 claims description 5
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 4
- PRAKJMSDJKAYCZ-UHFFFAOYSA-N squalane Chemical compound CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C PRAKJMSDJKAYCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 4
- 244000215068 Acacia senegal Species 0.000 claims description 3
- 229920001661 Chitosan Polymers 0.000 claims description 3
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 claims description 3
- 229920002148 Gellan gum Polymers 0.000 claims description 3
- 229920000084 Gum arabic Polymers 0.000 claims description 3
- 235000010489 acacia gum Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000000205 acacia gum Substances 0.000 claims description 3
- 235000010418 carrageenan Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000000679 carrageenan Substances 0.000 claims description 3
- 229920001525 carrageenan Polymers 0.000 claims description 3
- 229940113118 carrageenan Drugs 0.000 claims description 3
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 claims description 3
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 claims description 3
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 claims description 3
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 claims description 3
- 235000010492 gellan gum Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000000216 gellan gum Substances 0.000 claims description 3
- 230000036541 health Effects 0.000 claims description 3
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 3
- 229920001285 xanthan gum Polymers 0.000 claims description 3
- UHVMMEOXYDMDKI-JKYCWFKZSA-L zinc;1-(5-cyanopyridin-2-yl)-3-[(1s,2s)-2-(6-fluoro-2-hydroxy-3-propanoylphenyl)cyclopropyl]urea;diacetate Chemical compound [Zn+2].CC([O-])=O.CC([O-])=O.CCC(=O)C1=CC=C(F)C([C@H]2[C@H](C2)NC(=O)NC=2N=CC(=CC=2)C#N)=C1O UHVMMEOXYDMDKI-JKYCWFKZSA-L 0.000 claims description 3
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 2
- 229960001777 castor oil Drugs 0.000 claims description 2
- 229940045110 chitosan Drugs 0.000 claims description 2
- 238000001816 cooling Methods 0.000 claims description 2
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 claims description 2
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000004205 dimethyl polysiloxane Substances 0.000 claims description 2
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims description 2
- 229940014259 gelatin Drugs 0.000 claims description 2
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims description 2
- 229940057995 liquid paraffin Drugs 0.000 claims description 2
- JXTPJDDICSTXJX-UHFFFAOYSA-N n-Triacontane Natural products CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCC JXTPJDDICSTXJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000004006 olive oil Substances 0.000 claims description 2
- 235000008390 olive oil Nutrition 0.000 claims description 2
- 229920000435 poly(dimethylsiloxane) Polymers 0.000 claims description 2
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 claims description 2
- 229940032094 squalane Drugs 0.000 claims description 2
- 235000010493 xanthan gum Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000000230 xanthan gum Substances 0.000 claims description 2
- 229940082509 xanthan gum Drugs 0.000 claims description 2
- 238000009833 condensation Methods 0.000 claims 1
- 239000008384 inner phase Substances 0.000 claims 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 claims 1
- 229940127557 pharmaceutical product Drugs 0.000 claims 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 abstract description 6
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 abstract description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 3
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 40
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 40
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 38
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 23
- 244000146462 Centella asiatica Species 0.000 description 17
- 235000004032 Centella asiatica Nutrition 0.000 description 17
- 238000005054 agglomeration Methods 0.000 description 12
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 12
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 11
- 239000000047 product Substances 0.000 description 11
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 8
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 7
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 7
- 239000000419 plant extract Substances 0.000 description 7
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 7
- 241000147041 Guaiacum officinale Species 0.000 description 6
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 6
- 229940091561 guaiac Drugs 0.000 description 6
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 6
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 5
- 238000013112 stability test Methods 0.000 description 5
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 4
- 206010070834 Sensitisation Diseases 0.000 description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 4
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 4
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 4
- 230000029663 wound healing Effects 0.000 description 4
- 244000042664 Matricaria chamomilla Species 0.000 description 3
- 238000003917 TEM image Methods 0.000 description 3
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 3
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 3
- 230000008859 change Effects 0.000 description 3
- 230000003467 diminishing effect Effects 0.000 description 3
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 3
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 3
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 3
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 3
- 239000011325 microbead Substances 0.000 description 3
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 3
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 3
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 3
- OCKGFTQIICXDQW-ZEQRLZLVSA-N 5-[(1r)-1-hydroxy-2-[4-[(2r)-2-hydroxy-2-(4-methyl-1-oxo-3h-2-benzofuran-5-yl)ethyl]piperazin-1-yl]ethyl]-4-methyl-3h-2-benzofuran-1-one Chemical compound C1=C2C(=O)OCC2=C(C)C([C@@H](O)CN2CCN(CC2)C[C@H](O)C2=CC=C3C(=O)OCC3=C2C)=C1 OCKGFTQIICXDQW-ZEQRLZLVSA-N 0.000 description 2
- 208000019901 Anxiety disease Diseases 0.000 description 2
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 235000004429 Matricaria chamomilla var recutita Nutrition 0.000 description 2
- 208000007101 Muscle Cramp Diseases 0.000 description 2
- 208000005392 Spasm Diseases 0.000 description 2
- 208000007107 Stomach Ulcer Diseases 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 2
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 230000003266 anti-allergic effect Effects 0.000 description 2
- 230000036506 anxiety Effects 0.000 description 2
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001914 calming effect Effects 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 2
- 238000005286 illumination Methods 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 2
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 2
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 231100000241 scar Toxicity 0.000 description 2
- 230000008313 sensitization Effects 0.000 description 2
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 2
- RGZSQWQPBWRIAQ-CABCVRRESA-N (-)-alpha-Bisabolol Chemical compound CC(C)=CCC[C@](C)(O)[C@H]1CCC(C)=CC1 RGZSQWQPBWRIAQ-CABCVRRESA-N 0.000 description 1
- 239000001500 (2R)-6-methyl-2-[(1R)-4-methyl-1-cyclohex-3-enyl]hept-5-en-2-ol Substances 0.000 description 1
- GJCOSYZMQJWQCA-UHFFFAOYSA-N 9H-xanthene Chemical compound C1=CC=C2CC3=CC=CC=C3OC2=C1 GJCOSYZMQJWQCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 241000167550 Centella Species 0.000 description 1
- 235000007866 Chamaemelum nobile Nutrition 0.000 description 1
- 208000032544 Cicatrix Diseases 0.000 description 1
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 1
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 1
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- ZSBXGIUJOOQZMP-UHFFFAOYSA-N Isomatrine Natural products C1CCC2CN3C(=O)CCCC3C3C2N1CCC3 ZSBXGIUJOOQZMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000007232 Matricaria chamomilla Nutrition 0.000 description 1
- ZSBXGIUJOOQZMP-JLNYLFASSA-N Matrine Chemical compound C1CC[C@H]2CN3C(=O)CCC[C@@H]3[C@@H]3[C@H]2N1CCC3 ZSBXGIUJOOQZMP-JLNYLFASSA-N 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 239000011149 active material Substances 0.000 description 1
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 1
- RGZSQWQPBWRIAQ-LSDHHAIUSA-N alpha-Bisabolol Natural products CC(C)=CCC[C@@](C)(O)[C@@H]1CCC(C)=CC1 RGZSQWQPBWRIAQ-LSDHHAIUSA-N 0.000 description 1
- 230000001430 anti-depressive effect Effects 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 239000000935 antidepressant agent Substances 0.000 description 1
- 229940005513 antidepressants Drugs 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 1
- 239000002131 composite material Substances 0.000 description 1
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 1
- 238000006114 decarboxylation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000006356 dehydrogenation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000032798 delamination Effects 0.000 description 1
- 238000004821 distillation Methods 0.000 description 1
- 238000004043 dyeing Methods 0.000 description 1
- 238000005538 encapsulation Methods 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 229930003935 flavonoid Natural products 0.000 description 1
- 235000017173 flavonoids Nutrition 0.000 description 1
- 201000005917 gastric ulcer Diseases 0.000 description 1
- 241000411851 herbal medicine Species 0.000 description 1
- 239000000017 hydrogel Substances 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 229930014456 matrine Natural products 0.000 description 1
- 230000001777 nootropic effect Effects 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 238000000643 oven drying Methods 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- IYDGMDWEHDFVQI-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid;trioxotungsten Chemical compound O=[W](=O)=O.O=[W](=O)=O.O=[W](=O)=O.O=[W](=O)=O.O=[W](=O)=O.O=[W](=O)=O.O=[W](=O)=O.O=[W](=O)=O.O=[W](=O)=O.O=[W](=O)=O.O=[W](=O)=O.O=[W](=O)=O.OP(O)(O)=O IYDGMDWEHDFVQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 1
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 1
- 230000037387 scars Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 230000036555 skin type Effects 0.000 description 1
- 238000000194 supercritical-fluid extraction Methods 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004627 transmission electron microscopy Methods 0.000 description 1
- 230000002087 whitening effect Effects 0.000 description 1
Landscapes
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
本发明涉及一种积雪草提取物及愈创木天蓝烃微凝珠及其制备方法，旨在提供一种包载生物活性物质的微凝珠，能够稳定包封积雪草提取物及愈创木天蓝烃，能够使活性成分在使用前稳定储存，属于护肤品技术领域。
Description
技术领域
本发明公开了一种护肤品，具体地说，是一种积雪草提取物及愈创木天蓝烃微凝珠护肤品及其制备方法，属于护肤品技术领域。
背景技术
我国的化妆品产业正在蓬勃发展，生物活性天然产物作为特殊化学品具有巨大的经济重要性，可以使用生物活性天然产物作为药物、生物或药理成分、营养制品和用于生产药物的原料。目前，植物提取物产业发展迅速，已逐渐成为一个独立的新兴产业。植物提取技术是以天然植物作为原料，按照提取目标产物的用途，以物理、化学和生物学手段进行分离、纯化，获取植物中的一种或多种目标产物，却不改变目标产物其结构的技术手段。现代植物提取行业已不仅仅局限于使用传统的中药材为原料进行提取，而是以中药提取物作为核心，包含来自于世界各地植物的提取物现代产业，成为医疗、保健和美容等方面的主要物质来源。为了满足市场需求，世界各大化妆品的品牌源源不断的推出了含有植物提取物成分的新产品，而富含植物提取物的化妆品市场份额也在逐年增长，富含植物提取物精华的化妆品具有巨大的经济价值。
积雪草作为一种传统的中草药,具有多种多样的药理活性。我国中医对于积雪草的内服和外用早有临床应用。文献记载，印度等地区发现积雪草提取物具有益智的效果。随着植物天然产物分离、纯化以及分析技术和植物提取物药理作用研究手段的不断提高，积雪草越来越多的药理功效被提出。积雪草的药理功效主要有抗抑郁、促进伤口愈合、治疗瘢痕、抗肿瘤、抗胃溃疡、抗菌、抗氧化等方面。
近年来，随着对积雪草研究的进一步加深，有研究者提出积雪草具有美白以及促进胶原蛋白合成等药理作用，并将其应用于个人护理品中。个人护理品产业作为一个前景广阔的产业，随着人们对“回归自然”的追求，天然植物提取物的应用前景非常光明，颇受投资者的喜爱，将积雪草提取物应用于个人护理领域具有广阔的市场前景。
愈创木天蓝烃，被誉为药草之星的德国洋甘菊，具有消炎杀菌,镇静抗敏。缓解焦虑、加速伤口愈合、减少肌肉痉挛等多重功效。是德国洋甘菊经过蒸馏或超临界萃取在高温高压下，产生脱羧、脱氢反应而生成的医用级抗炎成分，其出油率0.2％～0.4％，是极为珍贵的高纯度天然成分，因富含母菊素、黄酮类化合物、a-红没药醇而具有良好的消炎、抑菌和抗敏功效，适用于所有肤质，具有很高的市场价值和开发前景。
同时愈创木天蓝烃及积雪草微胶囊化的作用越来越受到人们关注。凝珠是提高对温度、光和氧气等环境敏感的生物活性化合物稳定的有效方法，可以有效地保护愈创木天蓝烃及积雪草免受不利的环境条件影响，同时，提供物理稳定性，增强生物可及性，并易于处理和存储，这是一项快速发展的技术，具有高度专业化、低成本的优点，因此加强了愈创木天蓝烃及积雪草在化妆品领域的深入应用，应当大力开发。
通过检索，专利CN113413333A公开的一种纳米凝珠及其制备方法以及所述纳米凝珠制备的精华露与专利CN109106681B公开的一种微凝珠美白精华液及其制备方法，本发明申请专利与上述公开专利显著不同，本发明申请专利首次将愈创木天蓝烃及积雪草等天然活性成分采用半互穿聚合物网络技术然活性成分包裹在凝珠内，两种活性物质作用于不同靶点，协同增效，提升了本发明的维稳修护、消炎、抑菌和抗敏等功效，实现愈创木天蓝烃及积雪草高效包载，直接通过涂抹皮肤递送，达到维稳修护、美白等作用。
发明内容
积雪草提取物及愈创木天蓝烃作为天然植物提取物，具有良好的消炎、抑菌和抗敏功效，将其应用于个人护理领域具有广阔的市场前景。本发明首次将愈创木天蓝烃及积雪草等天然活性成分采用半互穿聚合物网络技术然活性成分包裹在凝珠内，实现愈创木天蓝烃及积雪草高效包载，可使其免受不利的环境条件影响，稳定天然活性成分，具有更高的市场价值和开发前景。
本发明的目的是提供一种积雪草提取物及愈创木天蓝烃微凝珠的制备方法，由外相包裹溶液与含有积雪草提取物及愈创木天蓝烃的内相纳米乳液构成，其质量比例应为1～5：5～1。
一种积雪草提取物及愈创木天蓝烃微凝珠，采取的技术方案一是：外相包裹溶液应为黄原胶、壳聚糖、海藻酸钠、角叉菜胶、明胶、结冷胶和阿拉伯树胶中的一种或几种的复配溶液，与琼脂糖或琼脂组合而成，所述的琼脂糖或琼脂，与其他复配溶液的质量比例应为1～10：1～10。
本发明所采用的技术方案二是：积雪草提取物及愈创木天蓝烃微凝珠内相纳米乳液其原料成分及重量份数为积雪草提取物0.1-5份，愈创木天蓝烃0.1-5份，乙氧基二甘醇0-5份，PEG-40氢化蓖麻油1-10份，1，3-丙二醇0-10份，1，2-己二醇0-10份，1，2-戊二醇0-10份，去离子水补足至100份。
本发明所采用的技术方案三是：一种积雪草提取物及愈创木天蓝烃微凝珠内相纳米乳液的制备方法，包含以下制备步骤：
S1将乙氧基二甘醇，PEG-40氢化蓖麻油，1，3-丙二醇，1，2-己二醇，1，2-戊二醇，加热搅拌制备为油相，再将积雪草提取物及愈创木天蓝烃加入其中搅拌至完全溶解；
S2将步骤S1中的油相缓慢滴加至水相中，搅拌1～2h，即得积雪草提取物及愈创木天蓝烃纳米乳液；
S3将琼脂或琼脂糖溶解在预热超纯水中，降温至45℃，随后，将复配溶液溶解在超纯水中；
S4将一定浓度的积雪草提取物及愈创木天蓝烃内相纳米乳液加入至上述溶液当中，搅拌至充分互溶；
S5将含有积雪草提取物及愈创木天蓝烃内相纳米乳的上述溶液通过单通道微量注射泵注入至冷油当中；
S6将所得微凝珠经由超纯水洗涤3～4次；
S7将洗涤过后的微凝珠在温和搅拌下浸入交联溶液当中，进行充分固化交联；
S8将所得微凝珠经由超纯水洗涤3～4次，即得积雪草提取物及愈创木天蓝烃微凝珠。
本发明的特点还在于：
技术方案三中步骤S1的积雪草提取物及愈创木天蓝烃的质量比为1～3：1～3；
步骤S2中的水相为水或其他活性成分的水溶液；
步骤S3所述的预热温度为70～90℃；
步骤S5冷油应为角鲨烷，橄榄油，聚二甲基硅氧烷，液体石蜡中的一种；
步骤S7所述的交联液应为碳酸钠溶液，碳酸钙溶液，氯化钙溶液，硫酸镁溶液，硫酸钠溶液中的一种。
根据上述技术方案一～三所述的微凝珠，本发明适用于护肤品，食品，保健品和药品中的应用。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
一、本发明通过制备积雪草提取物及愈创木天蓝烃微凝珠，将积雪草提取物及愈创木天蓝烃复配，两者作为天然活性物质，将其共包埋。其中愈创木天蓝烃具有消炎杀菌,镇静抗敏，缓解焦虑、加速伤口愈合、减少肌肉痉挛等多重功效；积雪草的药理功效主要有抗抑郁、促进伤口愈合、治疗瘢痕、抗肿瘤、抗胃溃疡、抗菌、抗氧化。将两者复配，作用于不同靶点，大幅度提升本发明维稳修复，消炎抗敏等功效。
二、本发明首次采用纳米乳将积雪草提取物及愈创木天蓝烃结合，将二者溶解在油相中，稳定包载，改善其溶解度，提高了二者的稳定性及生物利用度差等问题。
三、针对积雪草提取物及愈创木天蓝烃对温度、光和氧气等环境敏感，稳定性较差等问题，本发明首次采用了半互穿聚合物网络技术将活性成分包裹在凝珠内，进一步提升了稳定性，易于涂抹吸收，且微凝珠呈淡蓝色状，提升了外观的美观性，更受消费大众所喜爱。
附图说明
图1为实施例1所制得的内相纳米乳外观图，可见其呈蓝色澄清状，无分层，无沉淀的均一液体。
图2为实施例2所制得的内相纳米乳粒径图。
图3为对比例2所制得的内相纳米乳粒径图。
图4为实施例1所制得的内相纳米乳场发射透射电镜图，可见内相纳米乳液为均一球形。
图5为实施例2所制得的内相纳米乳场发射透射电镜图，可见内相纳米乳液为均一球形。
图6为实施例3所制得的内相纳米乳场发射透射电镜图，可见内相纳米乳液为均一球形。
图7为实施例3、4及对比例1的凝珠粒径图，可见对比例1的粒径大于实施例3、4。
图8为实施例5积雪草提取物及愈创木天蓝烃微凝珠的照片，可见微凝珠呈淡蓝色，无粘连结块。
图9为对比例2的凝珠外观图，可见凝珠颜色及大小不均一，粘连结块。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚明白，下面结合实施例对本发明作进一步的详细说明，本发明的示意性实施方式及其说明，仅用于解释本发明并不作为对本发明的限定。
对比例1配置30mg/mL琼脂糖溶液，将16mg/mL的积雪草提取物及愈创木天蓝烃加入至上述溶液当中，并滴加5mg/mL的吐温80。将上述溶液通过单通道微量注射泵注入至冷油当中，再将过滤后的微凝珠浸入氯化钙溶液当中，固化20分钟即得。
对比例2将8.5份乙氧基二甘醇，20份PEG-40氢化蓖麻油，8份1，3丙二醇，7份1，2己二醇，12份1，2-戊二醇，搅拌均匀后加入积雪草提取物及愈创木天蓝烃，再将水相缓慢滴加至油相当中，搅拌1h制成积雪草提取物及愈创木天蓝烃纳米乳液。再配置25mg/mL海藻酸钠溶液，二者以1：1比例混合均匀，通过单通道微量注射泵注入至氯化钙溶液当中，固化20分钟即得，见附图9。
实施例1将3份乙氧基二甘醇，7.5份PEG-40氢化蓖麻油，3份1，3丙二醇，3.5份1，2-己二醇，3份1，2-戊二醇，搅拌均匀后加入积雪草提取物及愈创木天蓝烃，再将水相缓慢滴加至油相当中，搅拌1h制成积雪草提取物及愈创木天蓝烃纳米乳液(见附图2)。再配制外相包裹溶液，其中琼脂糖10mg/mL，明胶5mg/mL，壳聚糖1mg/mL，将上述纳米乳与外相包裹溶液混合均匀，通过单通道微量注射泵注入至冷油当中，再将过滤后的微凝珠浸入氯化钙溶液当中，固化20分钟即得。
实施例2将5份乙氧基二甘醇，7.5份PEG-40氢化蓖麻油，2份1，3-丙二醇，3.5份1，2-己二醇，3份1，2-戊二醇，搅拌均匀后加入积雪草提取物及愈创木天蓝烃，再将水相缓慢滴加至油相当中，搅拌1h制成积雪草提取物及愈创木天蓝烃纳米乳液。再配制外相包裹溶液，其中琼脂糖5mg/ml，海藻酸钠5mg/mL，将上述纳米乳与外相包裹溶液混合均匀，通过单通道微量注射泵注入至冷油当中，再将过滤后的微凝珠浸入10％氯化钙溶液当中，固化20分钟即得。
实施例3将4份乙氧基二甘醇，7.5份PEG-40氢化蓖麻油，2份1-3丙二醇，3.5份1-2-己二醇，3份1-2-戊二醇，搅拌均匀后加入积雪草提取物及愈创木天蓝烃，再将水相缓慢滴加至油相当中，搅拌1h制成积雪草提取物及愈创木天蓝烃纳米乳液。再配制外相包裹溶液，其中琼脂糖6mg/mL，角叉菜胶2mg/mL，黄原胶1mg/mL。将上述纳米乳与外相包裹溶液混合均匀，通过单通道微量注射泵注入至冷油当中，再将过滤后的微凝珠浸入氯化钙溶液当中，固化20分钟即得。
实施例4，将4份乙氧基二甘醇，7.5份PEG-40氢化蓖麻油，2份1-3丙二醇，3.5份1-2-己二醇，3份1-2-戊二醇，搅拌均匀后加入积雪草提取物及愈创木天蓝烃，再将水相缓慢滴加至油相当中，搅拌1h制成积雪草提取物及愈创木天蓝烃纳米乳液。再配制外相包裹溶液，其中琼脂糖7mg/mL，阿拉伯树胶3mg/mL，将上述纳米乳与包裹相溶液混合均匀，通过单通道微量注射泵注入至冷油当中。再将过滤后的微凝珠浸入硫酸镁溶液当中，固化20分钟即得。
实施例5将2.5份乙氧基二甘醇，7.5份PEG-40氢化蓖麻油，2份1，3丙二醇，3.5份1，2-己二醇，3份1，2-戊二醇，搅拌均匀后加入积雪草提取物及愈创木天蓝烃，再将水相缓慢滴加至油相当中，搅拌1h制成积雪草提取物及愈创木天蓝烃纳米乳液。再配制外相包裹溶液，其中琼脂糖8mg/mL，结冷胶溶液4mg/mL，海藻酸钠2mg/mL，将上述纳米乳与外相包裹溶液混合均匀，通过单通道微量注射泵注入至冷油当中。再将过滤后的微凝珠在浸入碳酸钙溶液当中，固化20分钟即得，见附图8。
实验例1稳定性测试
实验方法：针对实施例1～3，对比例1中的样品分别进行光照、耐热、常温条件下的稳定性测试。
光照：将实施例1～3，对比例1的测试样品放置于光照处，观察样品第0、1、3、7天的变化，表1为样品在光照条件下的测试结果。
表1样品在光照条件下的稳定性测试结果
| 第0天 | 第1天 | 第3天 | 第7天 | |
| 实施例1 | 稳定 | 稳定 | 稳定 | 稳定 |
| 实施例2 | 稳定 | 稳定 | 稳定 | 稳定 |
| 实施例3 | 稳定 | 稳定 | 稳定 | 稳定 |
| 对比例1 | 稳定 | 粘连结块 | 粘连结块 | 粘连结块 |
从表中可以看出，经过1周时间，实施例1～3在光照条件下状态稳定，没有发生状态变化。对比例1方法制备的凝珠样品结块且颜色不均一，呈粘连结块状态，体系不稳定。耐热：将实施例1～3，对比例1的测试样品放置于50度烘箱处，观察样品第0、1、3、7天的变化，表2为样品在高温条件下的测试结果。
表2样品在高温条件下的稳定性测试结果
| 第0天 | 第1天 | 第3天 | 第7天 | |
| 实施例1 | 稳定 | 稳定 | 稳定 | 稳定 |
| 实施例2 | 稳定 | 稳定 | 稳定 | 稳定 |
| 实施例3 | 稳定 | 稳定 | 稳定 | 稳定 |
| 对比例1 | 粘连结块 | 粘连结块 | 粘连结块 | 粘连结块 |
从表中可以看出，经过1周时间，实施例1～3在高温条件下状态稳定，没有发生状态变化。对比例1方法制备的凝珠样品结块且颜色不均一，呈粘连结块状态，体系不稳定。常温：将实施例1～3，对比例1的测试样品放置于常温处，观察样品第0、1、3、7天的变化，表3为样品在常温条件下的测试结果。
表3样品在常温条件下的稳定性测试结果
| 第0天 | 第1天 | 第3天 | 第7天 | |
| 实施例1 | 稳定 | 稳定 | 稳定 | 稳定 |
| 实施例2 | 稳定 | 稳定 | 稳定 | 稳定 |
| 实施例3 | 稳定 | 稳定 | 稳定 | 稳定 |
| 对比例1 | 稳定 | 稳定 | 粘连结块 | 粘连结块 |
从表中可以看出，经过1周时间，实施例1～3在常温条件下状态稳定，没有发生状态变化。对比例1方法制备的凝珠样品结块且颜色不均一，呈粘连结块状态，体系不稳定。
实验例2溶胀率测试
实验方法：分别称取实施例1与对比例1各100mg采用烘箱干燥方式处理的凝珠，加入至37℃恒温生理盐水中，定时取出样品，采用滤纸包裹凝珠样品，去除表面的水分，称取水凝胶珠的质量，再放回生理盐水中，使用以下公式计算溶胀率，结果如表4所示：
其中wt和w0分别是在时间t处于溶胀状态和处于干燥状态的样品的重量；
表4溶胀率实验结果
| 对比例1(％) | 实施例4(％) | |
| 0.5(h) | 86.6952±4.3943 | 102.4895±6.3241 |
| 1(h) | 188.412±8.3922 | 242.4578±6.3934 |
| 2(h) | 353.6481±5.394 | 420.9742±5.2818 |
| 3(h) | 412.0172±4.2923 | 528.8528±6.2942 |
| 4(h) | 166.0944±5.3981 | 420.9765±2.498 |
| 5(h) | 182.4034±9.2143 | 320.6538±7.2932 |
| 6(h) | 170.8155±5.2217 | 310.9765±4.2945 |
| 7(h) | 165.5389±6.3829 | 309.7899±6.3822 |
| 8(h) | 163.8638±2.4853 | 305.4346±4.2449 |
| 10(h) | 159.8754±1.496 | 300.9536±6.3829 |
通过表4可以看出，实施例1与对比例1相比，实施例1的溶胀性能更好，包埋天然活性物质的效果也越佳。
实验例3微凝珠内相纳米乳粒径测量
将实施例2所制得的内相纳米乳液与对比例2所得的内相纳米乳液稀释10倍，使用马尔文粒径仪测得纳米乳粒径，见附图2、3，结果如表5及表6所示。
表5对比例2内相纳米乳粒径及PDI测量结果(n＝3)
表6实施例2内相纳米乳粒径及PDI测量结果(n＝3)
| 平均值 | 标准偏差 | 相对标准偏差 | 最小值 | 最大值 | |
| 均值 | 14.63 | 0.0692 | 0.473 | 14.59 | 14.71 |
| PDI | 0.03963 | 0.01305 | 32.94 | 0.02725 | 0.05327 |
由表5及表6分析可知，实施例2所得的内相纳米乳相比较于对比例2所得纳米乳粒径及PDI更小，内相纳米乳液也愈加稳定。
实验例4微凝珠内相纳米乳场发射透射电镜观察
实验方法：将实施例1、实施例2、实施例3所制得的内相纳米乳稀释10倍，滴加到铜网表面，用2％磷钨酸溶液负染2min，滤纸吸取多余液体，自然晾干，用场发射透射电镜观察纳米乳的微观形貌，见附图4、5、6。
实验例5微凝珠粒径测量
由实施例3、4及对比例1所制备的凝珠中各选取10个凝珠样品采用软件imageJ进行测量，见附图7。
Claims (10)
1.一种积雪草提取物及愈创木天蓝烃微凝珠，其特征在于所述的微凝珠由外相包裹溶液与含有积雪草提取物及愈创木天蓝烃的内相纳米乳液构成，其质量比例应为1～5：5～1。
2.根据权利要求1所述的一种积雪草提取物及愈创木天蓝烃微凝珠，其特征在于外相包裹溶液应为黄原胶、壳聚糖、海藻酸钠、角叉菜胶、明胶、结冷胶和阿拉伯树胶中的一种或几种的复配溶液，与琼脂糖或琼脂组合而成，所述的琼脂糖或琼脂，与其他复配溶液的质量比例应为1～10：1～10。
3.根据权利要求1所述的一种积雪草提取物及愈创木天蓝烃微凝珠，其特征在于内相纳米乳液其原料成分及重量份数为积雪草提取物0.1-5份，愈创木天蓝烃0.1-5份，乙氧基二甘醇0-5份，乙氧基二甘醇0-5份，1，3-丙二醇0-10份，1，2-己二醇0-10份，1，2-戊二醇0-10份，去离子水补足至100份。
4.根据权利要求1-3所述的一种积雪草提取物及愈创木天蓝烃微凝珠及其制备方法，其特征在于包含以下制备步骤：
S1将乙氧基二甘醇，PEG-40氢化蓖麻油，1，3-丙二醇，1，2-己二醇，1，2-戊二醇，加热搅拌制备为油相，再将积雪草提取物及愈创木天蓝烃加入其中搅拌至完全溶解；
S2将步骤S1中的油相缓慢滴加至水相中，搅拌1～2h，即得积雪草提取物及愈创木天蓝烃纳米乳液；
S3将琼脂或琼脂糖溶解在预热超纯水中，降温至45℃，随后，将复配溶液溶解在超纯水中；
S4将一定浓度的积雪草提取物及愈创木天蓝烃内相纳米乳液加入至上述溶液当中，搅拌至充分互溶；
S5将含有积雪草提取物及愈创木天蓝烃内相纳米乳的上述溶液通过单通道微量注射泵注入至冷油当中；
S6将所得微凝珠经由超纯水洗涤3～4次；
S7将洗涤过后的微凝珠在温和搅拌下浸入交联溶液当中，进行充分固化交联；
S8将所得微凝珠经由超纯水洗涤3～4次，即得积雪草提取物及愈创木天蓝烃微凝珠。
5.根据权利要求4所述的一种积雪草提取物及愈创木天蓝烃微凝珠及其制备方法，其特征在于步骤S1中的积雪草提取物及愈创木天蓝烃的质量比为1～3：1～3。
6.根据权利要求4所述的一种积雪草提取物及愈创木天蓝烃微凝珠及其制备方法，其特征在于步骤S2中的水相为水或其他活性成分的水溶液。
7.根据权利要求4所述的一种积雪草提取物及愈创木天蓝烃微凝珠的制备方法，其特征在于，步骤S3所述的预热温度为70～90℃。
8.根据权利要求4所述的一种积雪草提取物及愈创木天蓝烃微凝珠及其制备方法，其特征在于，步骤S5冷油应为角鲨烷，橄榄油，聚二甲基硅氧烷，液体石蜡中的一种。
9.根据权利要求4所述的一种积雪草提取物及愈创木天蓝烃微凝珠及其制备方法，其特征在于，步骤S7所述的交联液应为碳酸钠溶液，碳酸钙溶液，氯化钙溶液，硫酸镁溶液，硫酸钠溶液中的一种。
10.根据权利要1-4所述的一种积雪草提取物及愈创木天蓝微凝珠，其特征在于护肤品，食品，保健品和药品中的应用。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202310858298.9A CN116807942A (zh) | 2023-07-13 | 2023-07-13 | 一种积雪草提取物及愈创木天蓝烃微凝珠及其制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202310858298.9A CN116807942A (zh) | 2023-07-13 | 2023-07-13 | 一种积雪草提取物及愈创木天蓝烃微凝珠及其制备方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN116807942A true CN116807942A (zh) | 2023-09-29 |
Family
ID=88112628
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202310858298.9A Pending CN116807942A (zh) | 2023-07-13 | 2023-07-13 | 一种积雪草提取物及愈创木天蓝烃微凝珠及其制备方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN116807942A (zh) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN117427018A (zh) * | 2023-12-22 | 2024-01-23 | 广州海龟爸爸生物科技有限公司 | 一种积雪草提取物与透明氧化锌防晒组合物及其应用 |
-
2023
- 2023-07-13 CN CN202310858298.9A patent/CN116807942A/zh active Pending
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN117427018A (zh) * | 2023-12-22 | 2024-01-23 | 广州海龟爸爸生物科技有限公司 | 一种积雪草提取物与透明氧化锌防晒组合物及其应用 |
| CN117427018B (zh) * | 2023-12-22 | 2024-03-12 | 广州海龟爸爸生物科技有限公司 | 一种积雪草提取物与透明氧化锌防晒组合物及其应用 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP2005535566A5 (zh) | ||
| CN102499944B (zh) | 一种纳米银抗菌抗病毒组合液及其制备方法和产物 | |
| CN110812304A (zh) | 一种抗氧化、祛痘修复精华露及其制备方法 | |
| CN106726690B (zh) | 一种水溶性水杨酸微球及其制备方法 | |
| CN116807942A (zh) | 一种积雪草提取物及愈创木天蓝烃微凝珠及其制备方法 | |
| CN104523472B (zh) | 一种竹叶黄酮复合脂质体、制备方法及其应用 | |
| Manne et al. | Pterocarpus marsupium Roxb. heartwood extract synthesized chitosan nanoparticles and its biomedical applications | |
| EP3313448B1 (en) | A highly concentrated seawater mineral extract and uses thereof | |
| KR20190129397A (ko) | 대추를 사용한 두피 케어제의 제조방법 및 조성물. | |
| CN111184870A (zh) | 一种耐胃液消化型虾青素递送体的制备方法 | |
| CN110840753A (zh) | 一种含大麻二酚纳米脂质体的润肤水及制备方法 | |
| KR20100094005A (ko) | 허브추출물 및 영양캡슐을 포함하는 두피 및 모발의 보호 및 세정 조성물 | |
| CN110882198A (zh) | 一种抗菌保湿美白面膜及其制备方法 | |
| CN107753582B (zh) | 一种治疗痤疮的组合物及其外用凝胶剂和制备方法 | |
| CN111773156A (zh) | 一种具有保湿作用的护手霜及其制备方法 | |
| CN1095919A (zh) | 红景天系列化妆品 | |
| CN110876694A (zh) | 一种以蒜氨酸为基底的精华液及其制备方法 | |
| KR100723313B1 (ko) | 황금 및 그 복합생약 엑스의 항산화 가수분해물을 함유하는나노셀 콜로이드 외용겔제의 제조방법 | |
| CN108743441A (zh) | 消炎化瘀婴幼儿山茶润肤油及其制备方法 | |
| CN104666321B (zh) | 一种用于治疗口腔溃疡的贴膜及其制备方法 | |
| CN115154374B (zh) | 一种化妆品用高效杏仁油及其制备方法与应用 | |
| CN113769068B (zh) | 一种丹参酮及蛋白多肽复合纳米粒及其制备方法和应用 | |
| CN115531347B (zh) | 一种基于茶多酚介导的虾青素纳米颗粒及其制备方法 | |
| CN111686179B (zh) | 一种兼具祛痘和祛红血丝功效的中药复方提取物及其应用 | |
| US20210100746A1 (en) | Method and devices for cellular transfer of compounds with augmented reality application |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination |