CN116785237A - 一种复方庆大霉素注射液及其制备方法与应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种复方庆大霉素注射液及其制备方法与应用，复方庆大霉素注射液中包括以下组分：硫酸庆大霉素、氟尼辛葡甲胺、无水亚硫酸钠、N，N‑二甲基甲酰胺、聚乙二醇‑400、注射用水，所述组分的重量体积比为0.05～1.5g：0.001～0.03g：0.01～0.06g：1～6mL：0.1～2.5mL：42～49mL。本发明制备的复方庆大霉素注射液为无色澄清液体，无可见异物，pH值在7.0～7.5之间，符合注射液对pH值的要求，所含热原的限度符合药典规定。能够抑制母猪体内病原微生物，又具有解热、镇痛作用，减轻炎症反应，具有抑菌等优点，安全性高，能更广泛地应用于母猪乳房炎治疗。

Description

一种复方庆大霉素注射液及其制备方法与应用
技术领域
本发明涉及一种复方庆大霉素注射液及其制备方法与应用，属于复方注射制剂技术领域。
背景技术
庆大霉素(gentamicin)是由美国先灵公司Weinstein等于19世纪60年代发现的一种从绛红小单孢菌、棘孢小单孢菌等单孢子菌属中发酵产生的氨基糖甙类抗生素，其注射液是无色或几乎透明液体。庆大霉素抗菌谱广，对多种革兰阳性菌及阴性菌都具有抑菌和杀菌作用，尤其是对大肠杆菌、沙门菌等革兰阴性菌所致的感染效果更好。有人将硫酸庆大霉素制成凝胶剂，用于治疗致病性大肠杆菌引起的犊牦牛腹泻。也有人用硫酸庆大霉素与双黄连口服液联合使用，体外抑菌试验表明，两者联合后抑菌效果加强，呈相加作用。有研究用木犀草素与硫酸庆大霉素合用，结果显示硫酸庆大霉素的抑菌效果有很大提升。
氟尼辛葡甲胺(flunixin meglumine)属烟酸类衍生物，是环氧化酶的抑制剂，通过抑制花生四烯酸反应链中的环氧化酶，减少前列腺素如PGF 2α、PGE 2、PGI 2和血栓烷如TXB2等炎性介质的生成，通过维持正常血压、减轻血管内皮细胞的损伤、维持正常血容积等途径，阻止大肠杆菌内毒素引起呼吸道病患者的支气管内渗出物增多、渗出物中嗜中性粒细胞、白蛋白聚集等多种途径，有效缓解机体发热、炎症和疼痛。
母猪乳房炎主要存在于哺乳母猪，哺乳母猪发病率较高。主要由细菌侵入母猪乳房而引起，俗称“奶痛”。它是一种由病原微生物引起的母猪乳房表现为红、肿、热、硬、并伴有痛感，泌乳减少症状的疾病。目前化药对于母猪乳房炎的预防和治疗大多会使用单种抗菌药，制作工艺较为单一，效果较为缓慢，使用较为复杂。本发明所用的“复方庆大霉素注射液”是一种复方化药注射液。复方庆大霉素注射液中庆大霉素可以很好地抑制动物体内的病原菌，氟尼辛葡甲胺具有降低动物体温，有效控制疼痛和抑制炎症反应等特点。复方庆大霉素注射液治疗乳房炎，使用方便，能快速灭菌，因此，研制开发出这种复方注射液，其发展前景广阔。
发明内容
发明目的：为了解决现有技术所存在的问题，本发明的第一目的是提供一种复方庆大霉素注射液，本发明的第二目的是提供一种该复方庆大霉素注射液的制备方法，本发明的第三目的是提供该复方庆大霉素注射液的在制备治疗母猪乳房炎药物中的应用。
技术方案：本发明所述一种复方庆大霉素注射液，所述复方庆大霉素注射液中包括以下组分：硫酸庆大霉素、氟尼辛葡甲胺、无水亚硫酸钠、N，N-二甲基甲酰胺、聚乙二醇-400、注射用水，所述组分的重量体积比为0.05～1.5g：0.001～0.03g：0.01～0.06g：1～6mL：0.1～2.5mL：42～49mL。
进一步地，所述组分的重量体积比为0.25～1.25g：0.005～0.02g：0.03～0.05g：3～5mL：1.5～2.5mL：42.5～45.5mL。
本发明复方庆大霉素注射液的制备方法，包括以下步骤：
(1)将硫酸庆大霉素加入到注射用水中搅拌至澄清，加入N，N-二甲基甲酰胺搅拌得溶液a；
(2)将氟尼辛葡甲胺加到注射用水中搅拌至澄清，加入无水亚硫酸钠搅拌得溶液b；
(3)将溶液a加入到溶液b中，再加入聚乙二醇-400，用注射用水定容，搅拌至澄清；
(4)加入活性炭，摇匀，静置，过滤，收集滤液；
(5)滤液用乙醇胺调节pH，过滤装瓶，灭菌即得复方庆大霉素注射液。
进一步地，所述硫酸庆大霉素和氟尼辛葡甲胺为复方庆大霉素注射液的主药。
进一步地，步骤(1)中，所述N，N-二甲基甲酰胺为助溶剂，所述聚乙二醇-400为稳定剂，所述无水亚硫酸钠为抗氧剂。
进一步地，步骤(4)中，所述活性炭与硫酸庆大霉素的质量比为0.03～0.04：0.05～1.5。
进一步地，步骤(4)中，所述过滤采用G3玻璃砂芯漏斗、G4玻璃砂芯漏斗分别过滤。
进一步地，步骤(4)中，所述静置的时间为20～30min。
进一步地，骤(5)中，所述过滤采用微孔滤膜过滤器过滤，所述微孔滤膜的孔径为0.22μm的有机系滤膜。
进一步地，步骤(5)中，所述pH为7.0～7.5。
进一步地，步骤(5)中，所述灭菌实在121℃环境下灭菌15～30min。
本发明还包括复方庆大霉素注射液在制备治疗母猪乳房炎药物中的应用。
有益效果：与现有技术相比，本发明具有以下显著优点：
(1)本发明制备方法简单易操作，制得的复方庆大霉素注射液澄清透明，无肉眼可见的混浊或异物。
(2)本发明制得的复方庆大霉素注射液属于新型复方注射制剂，既利用庆大霉素能够抑制母猪体内病原微生物，又利用氟尼辛葡甲胺的解热、镇痛作用减轻炎症反应，具有抑菌等优点，安全性高，是一种极具发展前景的新型复方注射制剂。
(3)复方庆大霉素注射液较之单一庆大霉素注射液和氟尼辛葡甲胺注射液具有显著优点：(1)抑制母猪体内病原微生物。(2)具有解热、镇痛作用并减轻炎症反应，安全性高。
(4)复方庆大霉素注射液较之单一庆大霉素注射液和氟尼辛葡甲胺注射液联用具有显著优点：(1)更有效抑制母猪体内病原微生物。(2)解热、镇痛作用更强，安全性高。
附图说明
图1是实施例2制得的复方庆大霉素注射液形貌图；
图2是实施例1分离得到的细菌纯培养后镜检图；
图3是实施例1分离得到的细菌鉴定结果图。
具体实施方式
下面结合附图对本发明的技术方案作进一步说明。
实施例1细菌的分离培养与鉴别试验
乳汁：采自杨凌区某猪场内发生乳房炎的母猪；无乳链球菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌：本实验室分离自病料。
用一次性注射器抽取0.5mL的待检乳汁倾注到培养平皿的一端，然后匀速晃动平皿并慢慢倾斜使乳汁均匀覆盖在整个平皿上，放入37℃恒温箱培养。将乳样接种到普通琼脂和鲜血琼脂培养基上培养24h后，观察菌落的状态，根据菌落的形态、大小、颜色等进行大致分类，然后在显微镜下观察细菌的形态、革兰染色特点仔细进行分类。将挑选出来的细菌作进一步纯培养，方法同上(注意链球菌需用鲜血琼脂进行培养)。纯培养后镜检(如图2所示)无杂菌者保存于试管斜面培养基内，即可按有关生化鉴定方法进行生化鉴定。
主要的细菌鉴别试验有革兰染色试验、溶血试验和生化鉴定，生化鉴定包括糖发酵试验等。
革兰染色试验主要步骤如下：细菌涂片用革兰染液进行染色后，显微镜下观察，若细菌不被脱色而保留紫红色的为革兰阳性菌(G+)，若被脱色而染上复染剂的粉红色者为革兰阴性菌(G－)。
溶血试验主要步骤如下：将待检菌落接种于血平板，用接种针在已接种过的血平板上扎2～3处，使细菌被接种到琼脂层深处，置37℃培养18～24h后观察，在菌落周围红细胞部分溶解呈不透明的草绿色环为α溶血；菌落周围红细胞完全溶解呈无色透明的溶血环为β溶血；菌落周围红细胞不溶解无溶血环的为γ溶血。
糖发酵试验主要步骤如下：用接种环在琼脂斜面培养物上取少量被检细菌穿刺接种于糖发酵半固体培养基中，37℃恒温培养2～3d后观察各试管颜色变化及德汉氏小管中有无气泡，即培养基无变化仍为紫色(－)；培养基产酸变黄(+)；培养基产酸又产气变黄并有气泡(⊕)。结果如图3所示。
图3是实施例1分离得到的细菌鉴定结果图，其中，A为金黄色葡萄球菌形态图，B和C为大肠杆菌形态图，D为无乳链球菌图。
血平板上出现的菌落呈白色，大而突起、圆形、不透明、表面光滑，有溶血圈，镜检为革兰阳性葡球状，无芽胞，无荚膜，菌体较小。形态学结果完全与标准相一致，判定为金黄色葡萄球菌阳性，结果见图3A。
琼脂平板上出现圆形、隆起、光滑、湿润、灰白色、中等大小的菌落；麦康凯琼脂平板上出现红色菌落，糖发酵试验中能分解葡萄糖和乳糖，产酸产气，即检出乳中存在大肠杆菌。结果见图3B和图3C。
血琼脂平板上有灰白色、表面光滑、边缘整齐、直径0.5～0.75mm的细小菌落。镜检，发现革兰阳性呈链状排列的球菌。即判断为无乳链球菌。结果见图3D。由此可以看出，感染乳房炎母猪的乳汁中存在金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、无乳链球菌。
实施例1制备条件的优化
复方庆大霉素注射液的制备方法包括以下步骤：
(1)将0.05～1.5g的主药硫酸庆大霉素加入到40～42mL的注射用水中搅拌至澄清，然后加入1～10％助溶剂N，N-二甲基甲酰胺(1～6mL)搅拌得溶液a；
(2)将0.001～0.03g的主药氟尼辛葡甲胺加到1～3mL的注射用水中搅拌至澄清，然后加入0.01～0.06g无水亚硫酸钠搅拌得溶液b；
(3)将步骤(1)得到的溶液a和步骤(2)的溶液b合并，再加入1～8％的稳定剂聚乙二醇-400(0.1～2mL)，用注射用水定容至50mL，搅拌至澄清；
(4)接着加入精密称取的0.03g活性炭，摇匀静置20min后，再分别用G3玻璃砂芯漏斗和G4玻璃砂芯漏斗进行过滤，收集滤液；
(5)滤液用乙醇胺调节pH到7.0～7.5，用微孔滤膜过滤器过滤装瓶，121℃环境下灭菌30min。
(1)确定复方庆大霉素注射液的L9(33)正交试验的因素和水平
以庆大霉素和氟尼辛葡甲胺的溶解性和稳定性作为考察指标，并结合2种成分各自的理化性质选取符合注射液要求的助溶剂、稳定剂和抗氧化剂，在N，N-二甲基甲酰胺、N，N-二甲基乙酰胺和甘油甲缩醛等有机溶剂中，确定N，N-二甲基甲酰胺为助溶剂，以2种成分的稳定性为考察指标，筛选确定此复方注射液的稳定剂为聚乙二醇-400，无水亚硫酸钠为抗氧化剂，以此复方注射液制备过程和灭菌前后庆大霉素含量变化为处方筛选标准，通过L9(33)正交实验进行处方的筛选及优化。即以N，N-二甲基甲酰胺、聚乙二醇-400和无水亚硫酸钠的用量为实验因素，各取3个水平，采用L9(33)安排9次试验(见表1)。复方庆大霉素注射液处方的筛选结果见表2。
表1复方庆大霉素注射液的L9(33)正交试验的因素和水平
表2复方庆大霉素注射液的L9(33)正交试验的结果
注：表中含量表示复方庆大霉素注射液中庆大霉素的含量。
按L9(33)正交表安排试验，由表2试验数据及极差R的大小可以判断出影响复方庆大霉素注射液质量浓度的因素主次顺序为：N，N-二甲基甲酰胺含量(A)>聚乙二醇含量(B)>无水亚硫酸钠含量(C)，其中A因素K3>K2>K1，B因素K3>K2>K1，C因素K3>K2>K1，故可得出最佳处方为：A1B1C1，即N，N-二甲基甲酰胺含量为6％，聚乙二醇含量为3％，无水亚硫酸钠含量为0.06％。最优处方为每50mL注射液中硫酸庆大霉素为1g，氟尼辛葡甲胺为0.01g，助溶剂N，N-二甲基甲酰胺为6％(3mL)，稳定剂聚乙二醇为3％(1.5mL)，抗氧化剂无水亚硫酸钠为0.06％(0.03g)，灭菌用水(注射用水)加至50mL。
实施例2
材料：庆大霉素1g，氟尼辛葡甲胺0.01g，助溶剂N，N-二甲基甲酰胺为6％(3mL)，稳定剂聚乙二醇为3％(1.5mL)，抗氧化剂无水亚硫酸钠为0.06％(0.03g)，灭菌用水(注射用水)加至50mL。
制备方法：将1g的主药硫酸庆大霉素加入到41.5mL的注射用水中搅拌至澄清，然后加入6％(3mL)助溶剂N，N-二甲基甲酰胺搅拌得溶液a；将0.01g的主药氟尼辛葡甲胺加到1.5mL的注射用水中搅拌至澄清，然后加入0.06％(0.03g)的无水亚硫酸钠搅拌得溶液b；将溶液a和溶液b合并，再加入3％(1.5mL)的稳定剂聚乙二醇-400，用注射用水定容至50mL，搅拌至澄清；接着加入精密称取的0.03g活性炭，摇匀静置20min后，再分别用G3玻璃砂芯漏斗、G4玻璃砂芯漏斗进行过滤；滤液用乙醇胺调节pH到7.0～7.5，用微孔滤膜过滤器过滤装瓶，121℃环境下灭菌30min，即可得到复方庆大霉素注射液。
对本实施例制备得到的复方庆大霉素注射液外观目测，结果如图1所示。
图1是实施例2制得的复方庆大霉素注射液形貌图，由图1可知，本实施例制备所得复方庆大霉素注射液为无色澄清液体，均未检出可见异物。
对本实施例制备得到的复方庆大霉素注射液pH值进行检测，注射液的pH值一般需要控制在4.0～9.0的范围内，经测定本实施例制得的复方庆大霉素注射液的pH值都在7.0～7.5之间，符合注射液对pH值的要求。
对本实施例制备得到的复方庆大霉素注射液进行热原检测，采用家兔热原检测法进行热原检测试验。取适用的家兔3只，试验前给家兔停食2～3h以上，每隔60min测定温度1次，共测2次。如果2次体温的差数不超过0.2℃，即以这2次体温的平均值作为该家兔的正常体温。取3批复方庆大霉素注射液，测定家兔的正常体温后15min内将复方庆大霉素注射液注射入家兔的耳静脉，注射速度宜缓慢。然后每隔l h按前法测温1次，共测6次。从6次测温中所得最高值减去正常体温，即为该家兔的体温升高度数。如果在初试3只家兔中，体温升高均在0.6℃以下，并且3只家兔的体温升高总数在1.4℃以下时，认为供试品符合热原检查的规定。如有1只升高0.6℃或0.6℃以上或3只升温均低于0.6℃，但升高的总数达1.4℃或1.4℃以上，应另取5只复试，方法同上。结果如表3所示。
表3
由表3可看出，复方庆大霉素注射液中所含热原的限度符合药典规定。
实施例3
复方庆大霉素注射液和庆大霉素注射液对细菌生长的影响
(1)对照抗菌药液庆大霉素的制备：
分别称取1g硫酸庆大霉素原料药。将硫酸庆大霉素用少量的蒸馏水溶解，用0.22μm的微孔滤膜过滤除菌，无菌分装冷藏(-20℃)备用，临用前解冻即可。
(2)供试菌液的制备
分别将大肠杆菌、金黄色葡萄球菌接种于普通琼脂平板上，无乳链球菌接种于鲜血琼脂平板上，在温箱中37℃培养24h后。然后挑取各培养基上该菌生长比较典型的菌落接种到无菌LB肉汤培养基中：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌接种于普通无菌LB肉汤培养基中(简称肉汤)；无乳链球菌接种于含血清的无菌培养基肉汤中(血清肉汤)。将上述接种过的不同肉汤放置于温箱中37℃培养24h后，用2～6mL生理盐水将菌液的浓度调整到0.5号麦氏比浊管的标准。
(3)最小抑菌浓度的测定：
用试管二倍稀释法分别测定复方庆大霉素注射液和对照抗菌药液庆大霉素注射液对分离菌的最小抑菌浓度(MIC)。取灭菌试管60支，分成6排，每排10支，编号。1～3排：每排第1管中加入无菌肉汤培养基1.875mL，2～8管中各加入无菌肉汤培养基1mL，然后于第1管中加入实施例2制得的稀释后浓度为1.25mg/mL的复方庆大霉素注射液0.125mL，混匀后取出1mL加入第2管，依此类推，直到第8管中取出1mL弃去，第9管为肉汤对照，即阳性对照；第10管为不加菌液的1.25mg/mL的复方庆大霉素注射液对照，即阴性对照。然后1～9管加入供试菌液0.1mL，摇匀，置37℃恒温箱中培养24h。4～6排：每排第1管中加入1.25mg/mL的庆大霉素注射液0.125mL，其余步骤同法操作。结果显示，1～3排：每排1～8管复方庆大霉素注射液的浓度依次为：78.13、39.06、19.53、9.77、4.88、2.44、1.22和0.61μg/mL；4～6排：每排1～8管庆大霉素注射液的浓度依次为78.13、39.06、19.53、9.77、4.88、2.44、1.22和0.61μg/mL。每排除第9和10管外，其余8个试管加入100μL菌液后会稀释每个试管中药物的浓度，故计算可得稀释后的药物浓度分别为：75.10、37.55、18.78、9.39、4.70、2.35、1.18和0.59μg/mL。在37℃温箱中培养生长24h后观察其生长情况。以对照组为参照，肉眼观察未见到细菌生长的试管，即开始出现浑浊试管的上一支试管的药物浓度，为该药对该菌的最小抑菌浓度。大肠杆菌、金黄色葡萄球菌接种于普通肉汤中，无乳链球菌接种于血清肉汤中。
对制备得到的复方庆大霉素注射液进行体外抑菌试验，结果如表4。
表4
由表4可以看出，复方庆大霉素注射液对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、无乳链球菌的MIC分别是1.18、2.35、4.70μg/mL；庆大霉素注射液对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和无乳链球菌的MIC分别是2.35、4.70、9.39μg/mL。结果表明，复方庆大霉素注射液的MIC小于庆大霉素注射液的MIC，即氟尼辛葡甲胺对庆大霉素的抑菌效果无抑制作用。同时结果还表明复方庆大霉素注射液对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、无乳链球菌的抑制作用强于庆大霉素注射液。
结果表明，复方庆大霉素注射液对金黄色葡萄球菌的抑制效果最好，对无乳链球菌的抑菌效果相对弱一些。与现存的单一的庆大霉素注射液相比，该复方庆大霉素注射液对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、无乳链球菌的抑制效果更好，能更广泛地应用于母猪乳房炎。
(4)最小杀菌浓度的测定
用试管二倍稀释法分别测定复方庆大霉素注射液和对照抗菌药液庆大霉素注射液对分离菌的最小杀菌浓度(MBC)。将(3)复方庆大霉素注射液和对照抗菌药液庆大霉素注射液对分离菌的最小抑菌浓度测定中所有清晰、无细菌生长的试管营养液接种于普通营养平板和THB平板(无乳链球菌接种于THB平板、其余细菌接种于普通营养平板)，培养24h，以菌落数不超过5个的最低药物浓度为该药物的MBC值。结果如表5所示。
表5
由表5可以看出，复方庆大霉素注射液对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、无乳链球菌的MBC分别是2.35、9.39、9.39μg/mL；庆大霉素注射液对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和无乳链球菌的MBC分别是4.70、18.78、18.78μg/mL。结果表明，复方庆大霉素注射液的MBC小于庆大霉素注射液的MBC，即氟尼辛葡甲胺对庆大霉素的抑菌效果无明显抑制作用。同时结果还表明复方庆大霉素注射液对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、无乳链球菌的抑制作用强于庆大霉素注射液。
实施例4复方庆大霉素注射液与联用单一庆大霉素注射液和氟尼辛葡甲胺对细菌生长的影响对比
按照与实施例3相同的操作步骤进行复方庆大霉素注射液和单一庆大霉素注射液与氟尼辛葡甲胺联用对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和无乳链球菌的最小抑菌浓度和最小杀菌浓度的测定，以检测复方庆大霉素注射液与联用单一庆大霉素注射液与氟尼辛葡甲胺对细菌生长的影响。结果如表6和表7所示。
表6
由表6可以看出，复方庆大霉素注射液对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、无乳链球菌的MIC分别是1.18、2.35、4.70μg/mL；联用庆大霉素注射液与氟尼辛葡甲胺注射液对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和无乳链球菌的MIC分别是4.70、4.70、18.78μg/mL。结果表明，复方庆大霉素注射液的MIC小于联用单一庆大霉素注射液与氟尼辛葡甲胺注射液的MIC，即氟尼辛葡甲胺对庆大霉素的抑菌效果无抑制作用。同时结果还表明复方庆大霉素注射液对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、无乳链球菌的抑制作用强于庆大霉素注射液与氟尼辛葡甲胺注射液联用的效果。
表7
由表7可以看出，复方庆大霉素注射液对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、无乳链球菌的MBC分别是2.35、9.39、9.39μg/mL；联用单一庆大霉素注射液与氟尼辛葡甲胺注射液对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和无乳链球菌的MBC分别是9.39、18.78、37.55μg/mL。结果表明，复方庆大霉素注射液的MBC小于联用单一庆大霉素注射液与氟尼辛葡甲胺注射液的MBC，即氟尼辛葡甲胺对庆大霉素的抑菌效果无明显抑制作用。同时结果还表明复方庆大霉素注射液对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、无乳链球菌的抑制作用强于与氟尼辛葡甲胺注射液联用的效果。
本发明制得的复方庆大霉素注射液为无色澄清液体，均未检出可见异物，pH值检查结果显示，注射液的pH值一般需要控制在4.0～9.0的范围内，经测定所配制的注射液的pH值都在7.0～7.5之间，符合注射液对pH值的要求。复方庆大霉素注射液中所含热原的限度符合药典规定。体外抑菌试验结果表明，复方庆大霉素注射液对金黄色葡萄球菌的抑制效果最好，对无乳链球菌的抑菌效果相对弱一些。与现存的单一庆大霉素注射液、氟尼辛葡甲胺注射液以及两种注射液联用相比，该复方庆大霉素注射液对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、无乳链球菌的抑制效果更好，能更广泛地应用于母猪乳房炎。

Claims (10)

1.一种复方庆大霉素注射液，其特征在于，所述复方庆大霉素注射液中包括以下组分：硫酸庆大霉素、氟尼辛葡甲胺、无水亚硫酸钠、N，N-二甲基甲酰胺、聚乙二醇-400、注射用水，所述组分的重量体积比为0.05～1.5g：0.001～0.03g：0.01～0.06g：1～6mL：0.1～2.5mL：42～49mL。
2.根据权利要求1所述复方庆大霉素注射液，其特征在于，所述组分的重量体积比为0.25～1.25g：0.005～0.02g：0.03～0.05g：3～5mL：1.5～2.5mL：42.5～45.5mL。
3.根据权利要求1或2所述复方庆大霉素注射液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)将硫酸庆大霉素加入到注射用水中搅拌至澄清，加入N，N-二甲基甲酰胺搅拌得溶液a；
(2)将氟尼辛葡甲胺加到注射用水中搅拌至澄清，加入无水亚硫酸钠搅拌得溶液b；
(3)将溶液a加入到溶液b中，再加入聚乙二醇-400，用注射用水定容，搅拌至澄清；
(4)加入活性炭，摇匀，静置，过滤，收集滤液；
(5)滤液用乙醇胺调节pH，过滤装瓶，灭菌即得复方庆大霉素注射液。
4.根据权利要求3所述的复方庆大霉素注射液的制备方法，其特征在于，所述硫酸庆大霉素和氟尼辛葡甲胺为复方庆大霉素注射液的主药，所述N，N-二甲基甲酰胺为助溶剂，所述聚乙二醇-400为稳定剂，所述无水亚硫酸钠为抗氧剂。
5.根据权利要求3所述的复方庆大霉素注射液的制备方法，其特征在于，步骤(4)中，所述活性炭与硫酸庆大霉素的质量比为0.03～0.04：0.05～1.5。
6.根据权利要求3所述的复方庆大霉素注射液的制备方法，其特征在于，步骤(4)中，所述过滤采用G3玻璃砂芯漏斗、G4玻璃砂芯漏斗分别过滤，所述静置的时间为20～30min。
7.根据权利要求3所述的复方庆大霉素注射液的制备方法，其特征在于，步骤(5)中，所述过滤采用微孔滤膜过滤器过滤，所述微孔滤膜的孔径为0.22μm的有机系滤膜。
8.根据权利要求3所述的复方庆大霉素注射液的制备方法，其特征在于，步骤(5)中，所述pH为7.0～7.5。
9.根据权利要求3所述的复方庆大霉素注射液的制备方法，其特征在于，步骤(5)中，所述灭菌实在121℃环境下灭菌15～30min。
10.权利要求1或2所述复方庆大霉素注射液在制备治疗母猪乳房炎药物中的应用。
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