CN116784436A - 一种用于芦丁鸡饲料的凝结芽孢杆菌组合物及其制备方法 - Google Patents
一种用于芦丁鸡饲料的凝结芽孢杆菌组合物及其制备方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明属于动物饲料技术领域，具体涉及一种用于芦丁鸡饲料的凝结芽孢杆菌组合物及其制备方法。所述用于芦丁鸡饲料的凝结芽孢杆菌组合物，以凝结芽孢杆菌和饲料为内核，在凝结芽孢杆菌外部设置三层包覆材料，最内层为碱溶性酪蛋白层，中间层为脂质物质层，最外层为聚合物胶体层。制备方法包括以下步骤：（1）将凝结芽孢杆菌与饲料混合后制粒和干燥，得到活性益生菌微丸；（2）依次使用碱溶性酪蛋白保护溶液、脂质溶液和聚合物胶体溶液喷雾包裹活性益生菌微丸。可以提高凝结芽孢杆菌在芦丁鸡饲料中的稳定性和存活率，从而提高饲料的营养价值和动物的生产性能。
Description
技术领域
本发明属于动物饲料技术领域，具体涉及一种用于芦丁鸡饲料的凝结芽孢杆菌组合物及其制备方法。
背景技术
芦丁鸡又叫蓝胸鹑，体形比普通鹌鹑小，成年雄鸡体长约为 11~13cm之间，体重约为 30~43g，肉质鲜美、营养丰富，含多种人体必需氨基酸，其中牛磺酸的含量远高于其他禽类，具有极高的营养保健价值，素有“地人参”、“山珍”美称，蛋中富含具有降血压功效的芦丁成分，蛋白质、脂肪含量与鸡蛋相当，核黄素含量是鸡蛋的2.5倍，卵磷脂含量比土鸡蛋高3~4倍，维生素和锌、铁、钙、碘、硒等元素均高于普通鸡蛋，而胆固醇远低于普通鸡蛋、鹌鹑蛋等。然而由于其养殖条件特殊，对饲料的质量和饲养环境的卫生要求比较高，饲料需要特定的营养成分、良好的适口性和抗逆性，也要保证饲料的新鲜度和营养成分的均衡性。
益生菌是利用大量的有益菌在胃肠道形成优势菌群，从多个方面来抑制有害菌增长，如果益生菌的数量较少，便不能够形成优势菌群，无法起到益生的作用，数量过多时，超过占据肠内附着点形成优势菌群所需要的菌量，则可能会产生负面的影响。益生菌作为饲料添加剂替代饲用抗生素时，可以提升动物免疫力，保证动物健康生长，增强动物饲养效率，减少人工饲养成本，同时能够减小动物产品抗生素残留，还可以起到抑制耐药性病原菌的发展。益生菌直接添加于饲料中饲喂动物时，会被胃液、胃酸等消杀掉，减弱其有益作用。现有添加益生菌的芦丁鸡饲料普遍以添加双歧杆菌和乳酸菌为主，这些菌类对于芦丁鸡并没有高效治疗肠道疾病的效果，且益生菌饲料在抵达指定肠道前，大部分已经被胃液胃酸等侵蚀，活性丧失率高，不能在指定肠道发挥效果。
发明内容
本发明的目的是针对上述技术问题，提供一种用于芦丁鸡饲料的凝结芽孢杆菌组合物，使得芽孢杆菌在抵达指定肠道前保证充足活性，提高饲料的营养价值和动物的生产性能。
本发明技术方案中用于芦丁鸡饲料的凝结芽孢杆菌组合物，以凝结芽孢杆菌和饲料为内核，在凝结芽孢杆菌外部设置三层包覆材料，最内层为碱溶性酪蛋白层，中间层为脂质物质层，最外层为聚合物胶体层。
凝结芽孢杆菌具有优良的抗逆性、促进生长和提高营养吸收效率等特点，已广泛应用于养殖业，如发酵饲料、生物饲料添加剂等，通过添加芽孢杆菌，可以提高饲料的营养价值和动物的生产性能。此外，添加有凝结芽孢杆菌的饲料，大分子有机物被分解为小分子有机物，更有利于动物体的吸收利用。在凝结芽孢杆菌外部设置三层包覆材料，可以抵抗胃液胃酸对凝结芽孢杆菌的侵蚀，使其在抵达指定肠道前保证充足活性，同时可以保护凝结芽孢杆菌在饲料加工和储存过程中的活性，避免高温、高湿等环境因素对其产生不良影响，提高凝结芽孢杆菌在饲料中的稳定性和有益效果。
进一步地，1kg饲料加入200~300mg凝结芽孢杆菌。
进一步地，碱溶性酪蛋白层、脂质物质层、聚合物胶体层分别是碱溶性酪蛋白保护溶液、脂质溶液、聚合物胶体溶液固化后形成。
进一步地，碱溶性酪蛋白层、脂质物质层、聚合物胶体层的厚度均为0.2~ 0.5mm。
进一步地，碱溶性酪蛋白保护溶液是将明胶溶解在第一缓冲溶液中得到明胶溶液，碱溶性酪蛋白溶解在第一缓冲溶液中得到碱溶性酪蛋白溶液，然后将明胶溶液缓慢倒入碱溶性酪蛋白溶液中得到明胶-碱溶性酪蛋白溶液，将明胶-碱溶性酪蛋白溶液倒入液体聚丙烯酸树脂中得到。
明胶与碱溶性酪蛋白具有良好的生物相容性，两者可以通过共价交联形成稳定的水凝胶结构，提高碱溶性酪蛋白层的稳定性，减缓其在各种环境条件下的降解速率。
进一步地，第一缓冲溶液包括浓度均为0.05~0.10mol/L的氯化钠、氯化钾、磷酸氢二钠。
进一步地，第一缓冲溶液的pH值为8.5~9.5。
进一步地，明胶溶液的浓度为1.5~3.0g/L。
进一步地，碱溶性酪蛋白溶液中碱溶性酪蛋白的质量百分数为4.0~8.0%。
进一步地，明胶溶液和碱溶性酪蛋白溶液的质量比为3.0~5.0:1.0。
进一步地，明胶-碱溶性酪蛋白溶液与液体聚丙烯酸树脂的质量比为4.0~7.0:1.0。
进一步地，脂质溶液是将生物基聚合物与蛋白酶抑制剂混合后，与动物胆汁混合，再加入包埋介质得到。
进一步地，生物基聚合物为明胶和聚乙烯醇以1:8~10的质量比混合。
进一步地，蛋白酶抑制剂的质量为生物基聚合物质量的8~12%。
进一步地，动物胆汁的质量为生物基聚合物质量的1.5~2.5倍。
进一步地，包埋介质的质量为生物基聚合物质量的0.8~1.2倍。
进一步地，聚合物胶体溶液是将聚合物胶体溶于第二缓冲溶液中，再倒入包埋介质中得到。
进一步地，聚合物胶体为聚乙烯醇、明胶、聚丙烯酸酯中的一种或多种。
进一步地，聚合物胶体与第二缓冲溶液的质量比为1.0:0.8~1.5。
进一步地，包埋介质为琼脂糖凝胶、壳聚糖凝胶、醋酸纤维素酞酸酯中的一种或多种。
进一步地，聚合物胶体和包埋介质的质量比为1.5~2.5:1.0。
进一步地，第二缓冲溶液为浓度为0.1~0.3mol/L的氢氧化钠、盐酸、双氧水中的任一种。
上述用于芦丁鸡饲料的凝结芽孢杆菌组合物中凝结芽孢杆菌的制备方法，包括制备凝结芽孢杆菌培养基、接种凝结芽孢杆菌、发酵。
进一步地，制备凝结芽孢杆菌培养基是按照如下质量浓度的组成成分：淀粉0.1~0.3%、蛋白胨0.4~0.6%、大豆粉0.8~1.2%%、葡萄糖0.06~0.12%、酵母膏0.05~0.10%、MnSO40.01~0.03%，余量为水，混合后加热煮沸，调节pH至7.0~7.2，高压灭菌，冷却分装。
进一步地，加热煮沸的温度为100~120℃，时间为20~30min。
进一步地，高压灭菌的压强为80~120kpa，温度为110~130℃，时间为15~ 30min。
进一步地，发酵时温度为35~38℃，搅拌速度为100~150rpm，时间为48~72h，溶氧量大于8mL/L。
本发明还提供上述用于芦丁鸡饲料的凝结芽孢杆菌组合物的制备方法，包括以下步骤：
（1）将凝结芽孢杆菌与饲料混合后制粒和干燥，得到活性益生菌微丸；
（2）依次使用碱溶性酪蛋白保护溶液、脂质溶液和聚合物胶体溶液喷雾包裹活性益生菌微丸。
进一步地，步骤（1）中干燥温度为80~100℃，时间为6~10h。
进一步地，步骤（2）中碱溶性酪蛋白保护溶液和脂质溶液的质量均为活性益生菌微丸质量的5~70%。
进一步地，步骤（2）中聚合物胶体溶液的质量为活性益生菌微丸质量的1~ 15%。
进一步地，步骤（2）中喷雾包裹时进风温度为30~65℃，物料温度为25~45℃，出风温度为20~45℃。
相比现有技术，本发明的技术方案具有如下有益效果：
（1）本发明采用具有三层包覆结构的凝结芽孢杆菌，添加于芦丁鸡饲料中，可以提高凝结芽孢杆菌在芦丁鸡饲料中的稳定性和存活率，从而提高饲料的营养价值和动物的生产性能；
（2）添加凝结芽孢杆菌的饲料，大分子有机物可以被分解为小分子有机物，更有利于动物体的吸收利用，可以有效提高芦丁鸡免疫力、生产性能和抗病能力，保证其健康生长，提高其饲养效率；
（3）在凝结芽孢杆菌外部设置三层包覆材料，可以保护凝结芽孢杆菌在饲料加工和储存过程中的活性，避免高温、高湿等环境因素对其产生不良影响，提高凝结芽孢杆菌在饲料中的稳定性和有益效果；
（4）最外层聚合物胶体层可以抵制动物体内胃酸的侵蚀，保护内部物质在低pH值环境下不被破坏，同时可以提供电荷稳定性，保护内部分子免受离子强度变化的影响；
（5）最内层碱溶性酪蛋白层中明胶与碱溶性酪蛋白具有良好的生物相容性，可以避免碱溶性酪蛋白发生不可逆的损害，与碱溶性酪蛋白可以通过共价交联形成稳定的水凝胶结构，提高层结构的稳定性，减缓碱溶性酪蛋白在各种环境条件下的降解速率，具有定向缓释控释作用；
（6）本发明可用于芦丁鸡饲料的凝结芽孢杆菌组合物添加于芦丁鸡饲料中，可以饲料的使用量，降低养殖成本，同时减少养殖过程中的药残，提高肉质和食品安全性。
具体实施方式
下面通过具体实施例，对本发明的技术方案作进一步描述说明，应当理解的是，此处所描述的具体实施例仅用于帮助理解本发明，不用于本发明的具体限制。如果无特殊说明，本发明的实施例中所采用的原料均为本领域常用的原料，实施例中所采用的方法，均为本领域的常规方法。
实施例1
本实施例可用于芦丁鸡饲料的凝结芽孢杆菌组合物的制备方法，包括以下步骤：
（1）按照如下质量浓度的组成成分：淀粉0.2%、蛋白胨0.5%、大豆粉1.0%、葡萄糖0.1%、酵母膏0.07%、MnSO4 0.02%，余量为水，混合后在110℃加热煮沸20min，调节pH至7.0，在120℃、100KPa高压灭菌20min，冷却分装得到凝结芽孢杆菌培养基，接种上凝结芽孢杆菌，在36℃发酵60h，发酵时搅拌速度为120rpm，溶氧量为9mL/L，得到发酵过的凝结芽孢杆菌；
（2）1kg饲料中加入250mg发酵过的凝结芽孢杆菌后混合制粒，80℃干燥6h得到活性益生菌微丸；
（3）是将2g明胶溶解在1L第一缓冲溶液中得到明胶溶液，第一缓冲溶液包括浓度为0.05mol/L的氯化钠、浓度为0.05mol/L的氯化钾和浓度为0.10mol/L的磷酸氢二钠，pH为9.0，5.0g碱溶性酪蛋白溶解在100g第一缓冲溶液中得到碱溶性酪蛋白溶液，然后将明胶溶液按照4:1的质量比缓慢倒入碱溶性酪蛋白溶液中得到明胶-碱溶性酪蛋白溶液，将明胶-碱溶性酪蛋白溶液按照5:1的质量比倒入液体聚丙烯酸树脂中得到碱溶性酪蛋白保护溶液；
（4）将明胶与聚乙烯醇按照1:9的质量比混合成生物基聚合物，加入生物基聚合物质量10%的蛋白酶抑制剂，再与生物基聚合物质量2.0倍的动物胆汁混合，加入生物基聚合物质量1.0倍的琼脂糖凝胶得到脂质溶液；
（5）将聚丙烯酸酯按照1.0:1.0的质量比溶于浓度为0.1mol/L的盐酸溶液中，再倒入聚丙烯酸酯质量0.5倍的琼脂糖凝胶中得到聚合物胶体溶液；
（6）依次使用活性益生菌微丸质量50%的碱溶性酪蛋白保护溶液、活性益生菌微丸质量50%的脂质溶液和活性益生菌微丸质量10%的聚合物胶体溶液喷雾包裹活性益生菌微丸，进风温度为45℃，物料温度为40，出风温度为30℃，得到可用于芦丁鸡饲料的凝结芽孢杆菌组合物，碱溶性酪蛋白层、脂质物质层、聚合物胶体层的厚度均为0.3mm。
实施例2
本实施例可用于芦丁鸡饲料的凝结芽孢杆菌组合物的制备方法，包括以下步骤：
（1）按照如下质量浓度的组成成分：淀粉0.2%、蛋白胨0.5%、大豆粉1.0%、葡萄糖0.1%、酵母膏0.07%、MnSO4 0.02%，余量为水，混合后在115℃加热煮沸20min，调节pH至7.2，在125℃、100KPa高压灭菌20min，冷却分装得到凝结芽孢杆菌培养基，接种上凝结芽孢杆菌，在36℃发酵72h，发酵时搅拌速度为130rpm，溶氧量为10mL/L，得到发酵过的凝结芽孢杆菌；
（2）1kg饲料中加入230mg发酵过的凝结芽孢杆菌后混合制粒，80℃干燥8h得到活性益生菌微丸；
（3）是将2g明胶溶解在1L第一缓冲溶液中得到明胶溶液，第一缓冲溶液包括浓度为0.05mol/L的氯化钠、浓度为0.05mol/L的氯化钾和浓度为0.10mol/L的磷酸氢二钠，pH为9.0，5.0g碱溶性酪蛋白溶解在100g第一缓冲溶液中得到碱溶性酪蛋白溶液，然后将明胶溶液按照4:1的质量比缓慢倒入碱溶性酪蛋白溶液中得到明胶-碱溶性酪蛋白溶液，将明胶-碱溶性酪蛋白溶液按照5:1的质量比倒入液体聚丙烯酸树脂中得到碱溶性酪蛋白保护溶液；
（4）将明胶与聚乙烯醇按照1:9的质量比混合成生物基聚合物，加入生物基聚合物质量10%的蛋白酶抑制剂，再与生物基聚合物质量2.0倍的动物胆汁混合，加入生物基聚合物质量1.0倍的琼脂糖凝胶得到脂质溶液；
（5）将聚丙烯酸酯按照1.0:1.0的质量比溶于浓度为0.1mol/L的盐酸溶液中，再倒入聚丙烯酸酯质量0.5倍的琼脂糖凝胶中得到聚合物胶体溶液；
（6）依次使用活性益生菌微丸质量50%的碱溶性酪蛋白保护溶液、活性益生菌微丸质量50%的脂质溶液和活性益生菌微丸质量10%的聚合物胶体溶液喷雾包裹活性益生菌微丸，进风温度为40℃，物料温度为35，出风温度为30℃，得到可用于芦丁鸡饲料的凝结芽孢杆菌组合物，碱溶性酪蛋白层、脂质物质层、聚合物胶体层的厚度均为0.3mm。
实施例3
本实施例与实施例1的区别仅在于步骤（3）是将2.5g明胶溶解在1L第一缓冲溶液中得到明胶溶液，第一缓冲溶液包括浓度为0.06mol/L的氯化钠、浓度为0.06mol/L的氯化钾和浓度为0.10mol/L的磷酸氢二钠，pH为9.0，5.5g碱溶性酪蛋白溶解在100g第一缓冲溶液中得到碱溶性酪蛋白溶液，然后将明胶溶液按照4.5:1.0的质量比缓慢倒入碱溶性酪蛋白溶液中得到明胶-碱溶性酪蛋白溶液，将明胶-碱溶性酪蛋白溶液按照5.5:1.0的质量比倒入液体聚丙烯酸树脂中得到碱溶性酪蛋白保护溶液。
实施例4
本实施例与实施例1的区别仅在于步骤（4）将明胶与聚乙烯醇按照1.0:9.5的质量比混合成生物基聚合物，加入生物基聚合物质量12%的蛋白酶抑制剂，再与生物基聚合物质量2.5倍的动物胆汁混合，加入生物基聚合物质量1.2倍的琼脂糖凝胶得到脂质溶液；
实施例5
本实施例与实施例1的区别仅在于步骤（5）将聚丙烯酸酯按照1.0:1.2的质量比溶于浓度为0.1mol/L的盐酸溶液中，再倒入聚丙烯酸酯质量0.6倍的琼脂糖凝胶中得到聚合物胶体溶液
实施例6
本实施例与实施例1的区别仅在于步骤（6）依次使用活性益生菌微丸质量30%的碱溶性酪蛋白保护溶液、活性益生菌微丸质量35%的脂质溶液和活性益生菌微丸质量8%的聚合物胶体溶液喷雾包裹活性益生菌微丸，进风温度为45℃，物料温度为40，出风温度为30℃，得到可用于芦丁鸡饲料的凝结芽孢杆菌组合物，碱溶性酪蛋白层、脂质物质层、聚合物胶体层的厚度分别为0.3mm、0.4mm、0.2mm。
对比例1
本对比例用于芦丁鸡饲料的凝结芽孢杆菌组合物的制备方法，包括以下步骤：
（1）按照如下质量浓度的组成成分：淀粉0.2%、蛋白胨0.5%、大豆粉1.0%、葡萄糖0.1%、酵母膏0.07%、MnSO4 0.02%，余量为水，混合后在110℃加热煮沸20min，调节pH至7.0，在120℃、100KPa高压灭菌20min，冷却分装得到凝结芽孢杆菌培养基，接种上凝结芽孢杆菌，在36℃发酵60h，发酵时搅拌速度为120rpm，溶氧量为9mL/L，得到发酵过的凝结芽孢杆菌。
（2）1kg饲料中加入250mg发酵过的凝结芽孢杆菌后混合制粒，80℃干燥6h得到活性益生菌微丸。
对比例2
本对比例用于芦丁鸡饲料的凝结芽孢杆菌组合物的制备方法，包括以下步骤：
（1）按照如下质量浓度的组成成分：淀粉0.2%、蛋白胨0.5%、大豆粉1.0%、葡萄糖0.1%、酵母膏0.07%、MnSO4 0.02%，余量为水，混合后在110℃加热煮沸20min，调节pH至7.0，在120℃、100KPa高压灭菌20min，冷却分装得到凝结芽孢杆菌培养基，接种上凝结芽孢杆菌，在36℃发酵60h，发酵时搅拌速度为120rpm，溶氧量为9mL/L，得到发酵过的凝结芽孢杆菌；
（2）1kg饲料中加入250mg发酵过的凝结芽孢杆菌后混合制粒，80℃干燥6h得到活性益生菌微丸；
（3）是将2g明胶溶解在1L第一缓冲溶液中得到明胶溶液，第一缓冲溶液包括浓度为0.05mol/L的氯化钠、浓度为0.05mol/L的氯化钾和浓度为0.10mol/L的磷酸氢二钠，pH为9.0，5.0g碱溶性酪蛋白溶解在100g第一缓冲溶液中得到碱溶性酪蛋白溶液，然后将明胶溶液按照4:1的质量比缓慢倒入碱溶性酪蛋白溶液中得到明胶-碱溶性酪蛋白溶液，将明胶-碱溶性酪蛋白溶液按照5:1的质量比倒入液体聚丙烯酸树脂中得到碱溶性酪蛋白保护溶液；
（4）将明胶与聚乙烯醇按照1:9的质量比混合成生物基聚合物，加入生物基聚合物质量10%的蛋白酶抑制剂，再与生物基聚合物质量2.0倍的动物胆汁混合，加入生物基聚合物质量1.0倍的琼脂糖凝胶得到脂质溶液；
（5）依次使用活性益生菌微丸质量50%的碱溶性酪蛋白保护溶液和活性益生菌微丸质量50%的脂质溶液，进风温度为45℃，物料温度为40，出风温度为30℃，得到可用于芦丁鸡饲料的凝结芽孢杆菌组合物，碱溶性酪蛋白层、脂质物质层的厚度均为0.3mm。
对比例3
本对比例用于芦丁鸡饲料的凝结芽孢杆菌组合物的制备方法，包括以下步骤：
（1）按照如下质量浓度的组成成分：淀粉0.2%、蛋白胨0.5%、大豆粉1.0%、葡萄糖0.1%、酵母膏0.07%、MnSO4 0.02%，余量为水，混合后在110℃加热煮沸20min，调节pH至7.0，在120℃、100KPa高压灭菌20min，冷却分装得到凝结芽孢杆菌培养基，接种上凝结芽孢杆菌，在36℃发酵60h，发酵时搅拌速度为120rpm，溶氧量为9mL/L，得到发酵过的凝结芽孢杆菌；
（2）1kg饲料中加入250mg发酵过的凝结芽孢杆菌后混合制粒，80℃干燥6h得到活性益生菌微丸；
（3）是将2g明胶溶解在1L第一缓冲溶液中得到明胶溶液，第一缓冲溶液包括浓度为0.05mol/L的氯化钠、浓度为0.05mol/L的氯化钾和浓度为0.10mol/L的磷酸氢二钠，pH为9.0，5.0g碱溶性酪蛋白溶解在100g第一缓冲溶液中得到碱溶性酪蛋白溶液，然后将明胶溶液按照4:1的质量比缓慢倒入碱溶性酪蛋白溶液中得到明胶-碱溶性酪蛋白溶液，将明胶-碱溶性酪蛋白溶液按照5:1的质量比倒入液体聚丙烯酸树脂中得到碱溶性酪蛋白保护溶液；
（4）将聚丙烯酸酯按照1.0:1.0的质量比溶于浓度为0.1mol/L的盐酸溶液中，再倒入聚丙烯酸酯质量0.5倍的琼脂糖凝胶中得到聚合物胶体溶液；
（5）依次使用活性益生菌微丸质量50%的碱溶性酪蛋白保护溶液和活性益生菌微丸质量10%的聚合物胶体溶液喷雾包裹活性益生菌微丸，进风温度为45℃，物料温度为40，出风温度为30℃，得到可用于芦丁鸡饲料的凝结芽孢杆菌组合物，碱溶性酪蛋白层、聚合物胶体层的厚度均为0.3mm。
对比例4
本对比例用于芦丁鸡饲料的凝结芽孢杆菌组合物的制备方法，包括以下步骤：
（1）按照如下质量浓度的组成成分：淀粉0.2%、蛋白胨0.5%、大豆粉1.0%、葡萄糖0.1%、酵母膏0.07%、MnSO4 0.02%，余量为水，混合后在110℃加热煮沸20min，调节pH至7.0，在120℃、100KPa高压灭菌20min，冷却分装得到凝结芽孢杆菌培养基，接种上凝结芽孢杆菌，在36℃发酵60h，发酵时搅拌速度为120rpm，溶氧量为9mL/L，得到发酵过的凝结芽孢杆菌；
（2）1kg饲料中加入250mg发酵过的凝结芽孢杆菌后混合制粒，80℃干燥6h得到活性益生菌微丸；
（3）将明胶与聚乙烯醇按照1:9的质量比混合成生物基聚合物，加入生物基聚合物质量10%的蛋白酶抑制剂，再与生物基聚合物质量2.0倍的动物胆汁混合，加入生物基聚合物质量1.0倍的琼脂糖凝胶得到脂质溶液；
（4）将聚丙烯酸酯按照1.0:1.0的质量比溶于浓度为0.1mol/L的盐酸溶液中，再倒入聚丙烯酸酯质量0.5倍的琼脂糖凝胶中得到聚合物胶体溶液；
（5）依次使用活性益生菌微丸质量50%的脂质溶液和活性益生菌微丸质量10%的聚合物胶体溶液喷雾包裹活性益生菌微丸，进风温度为45℃，物料温度为40，出风温度为30℃，得到可用于芦丁鸡饲料的凝结芽孢杆菌组合物，脂质物质层、聚合物胶体层的厚度均为0.3mm。
取相同年龄、生长状态相似的芦丁鸡900只，平均分成九组，用2000g以上实施例及对比例所得凝结芽孢杆菌组合物饲喂，50天后观察其存活率，实验结果如表1所示。
表1 指定位置凝结芽孢杆菌存活数及芦丁鸡存活率数据表
| 到达胃中活菌数 | 到达肠道中活菌数 | 鸡群存活率 | |
| 实施例1 | 97% | 90% | 98% |
| 实施例2 | 96% | 89% | 97% |
| 实施例3 | 97% | 90% | 98% |
| 实施例4 | 98% | 91% | 98% |
| 实施例5 | 96% | 90% | 98% |
| 实施例6 | 97% | 91% | 98% |
| 对比例1 | 43% | 4.5% | 77% |
| 对比例2 | 88% | 74% | 94% |
| 对比例3 | 84% | 64% | 92% |
| 对比例4 | 85% | 70% | 92% |
实施例1-6所得凝结芽孢杆菌组合物，可以提高凝结芽孢杆菌在芦丁鸡体内到达肠部位置的活菌数，和芦丁鸡的存活率，对比例1凝结芽孢杆菌发酵后不包裹，直接与饲料混合饲喂芦丁鸡，到达胃部和肠部的活菌数都大量减少，鸡群存活率下降，对比例2-4在发酵后的凝结芽孢杆菌外部进行两层包覆，所得凝结芽孢杆菌组合物与饲料混合饲喂芦丁鸡，到达胃部和肠部的活菌数也明显减少，鸡群存活率也出现下降。
最后应说明的是，本文中所描述的具体实施例仅仅是对本发明精神作举例说明，而并非对本发明的实施方式的限定。本发明所属技术领域的技术人员可以对所描述的具有实施例做各种各样的修改或补充或采用类似的方式替代，这里无需也无法对所有的实施方式予以全例。而这些属于本发明的实质精神所引申出的显而易见的变化或变动仍属于本发明的保护范围，把它们解释成任何一种附加的限制都是与本发明精神相违背的。
Claims (10)
1.一种可用于芦丁鸡饲料的凝结芽孢杆菌组合物，其特征在于，所述凝结芽孢杆菌组合物以凝结芽孢杆菌和饲料为内核，在凝结芽孢杆菌外部设置三层包覆材料，最内层为碱溶性酪蛋白层，中间层为脂质物质层，最外层为聚合物胶体层。
2.根据权利要求1所述的凝结芽孢杆菌组合物，其特征在于，碱溶性酪蛋白层、脂质物质层、聚合物胶体层分别是碱溶性酪蛋白保护溶液、脂质溶液、聚合物胶体溶液固化后形成。
3.根据权利要求2所述的凝结芽孢杆菌组合物，其特征在于，碱溶性酪蛋白保护溶液是将明胶溶解在第一缓冲溶液中得到明胶溶液，碱溶性酪蛋白溶解在第一缓冲溶液中得到碱溶性酪蛋白溶液，然后将明胶溶液缓慢倒入碱溶性酪蛋白溶液中得到明胶-碱溶性酪蛋白溶液，将明胶-碱溶性酪蛋白溶液倒入液体聚丙烯酸树脂中得到。
4.根据权利要求3所述的凝结芽孢杆菌组合物，其特征在于，第一缓冲溶液包括浓度均为0.05~0.10mol/L的氯化钠、氯化钾、磷酸氢二钠，溶剂为水；
和或第一缓冲溶液的pH值为8.5~9.5。
5.根据权利要求2所述的凝结芽孢杆菌组合物，其特征在于，脂质溶液是将生物基聚合物与蛋白酶抑制剂混合后，与动物胆汁混合，再加入包埋介质得到。
6.根据权利要求2所述的凝结芽孢杆菌组合物，其特征在于，聚合物胶体溶液是将聚合物胶体溶于第二缓冲溶液中，再倒入包埋介质中得到。
7.根据权利要求6所述的凝结芽孢杆菌组合物，其特征在于，第二缓冲溶液为浓度为0.1~0.3mol/L的氢氧化钠、盐酸、双氧水中的任一种。
8.根据权利要求5或6所述的凝结芽孢杆菌组合物，其特征在于，包埋介质为琼脂糖凝胶、壳聚糖凝胶、醋酸纤维素酞酸酯中的一种或多种。
9.根据权利要求1所述的凝结芽孢杆菌组合物，其特征在于，凝结芽孢杆菌的制备方法，包括制备凝结芽孢杆菌培养基、接种凝结芽孢杆菌、发酵。
10.一种如权利要求1所述的可用于芦丁鸡饲料的凝结芽孢杆菌组合物的制备方法，包括以下步骤：
（1）将凝结芽孢杆菌与饲料混合后制粒和干燥，得到活性益生菌微丸；
（2）依次使用碱溶性酪蛋白保护溶液、脂质溶液和聚合物胶体溶液喷雾包裹活性益生菌微丸。
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| CN202310750332.0A CN116784436A (zh) | 2023-06-25 | 2023-06-25 | 一种用于芦丁鸡饲料的凝结芽孢杆菌组合物及其制备方法 |
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