CN116763977A - 掺杂含铷介孔生物活性玻璃负载aie的敷料及其制备方法 - Google Patents
掺杂含铷介孔生物活性玻璃负载aie的敷料及其制备方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明公开了一种掺杂含铷介孔生物活性玻璃负载AIE的敷料及其制备方法，属于医用敷料领域。本发明的掺杂含铷介孔生物活性玻璃负载AIE的敷料包括载有AIE材料的含铷介孔生物活性玻璃、丝素蛋白‑抗菌肽接枝共聚物和醛基化普朗尼克F127。本发明的原材料生产成本低，简单易得；敷料具有优异的吸水性、易去除性、生物相容性及可降解性、适合细胞生长的微孔结构、可控降解性能和优异的细胞相容性，同时具备良好的抗菌作用。此外，多孔生物活性玻璃微球具有窄的粒度分布，相对多孔的表面形态和中空结构，能够负载AIE从而实现细菌成像。
Description
技术领域
本发明涉及医用敷料领域，特别涉及一种掺杂含铷介孔生物活性玻璃负载AIE的敷料及其制备方法。
背景技术
皮肤是人体最大的器官，也是面临外界的第一道屏障。但是在日常生活中皮肤难免会受到不同程度的伤害，大面积的皮肤缺损会严重威胁人类的健康和生命，尤其是全层皮肤损伤性创面需要很长时间才可以愈合。在伤口愈合过程中，由于细菌等微生物的入侵，常常会引发伤口部位发炎感染等并发症，这是皮肤修复领域面临的一个巨大挑战。传统的伤口敷料不能对创面部位的伤口渗出液做到及时清洁，并且更换敷料时易对创面造成二次机械损伤，延缓伤口愈合进程。因此，人们对功能优异的皮肤修复敷料的需求也大大增加。良好的皮肤修复敷料除了具有促进创面愈合的功能外，其吸收能力、预防和对抗伤口部位感染的能力也应增强。
当前，治疗敷料种类繁多，例如医用纱布、静电纺丝纳米纤维、生物相容性膜、微纤维、水凝胶等。其中，水凝胶通过不同聚合物交联形成，其三维多孔结构和高含水量有利于吸收大量组织渗出物，同时又可以保持皮肤缺损部位相对湿润的环境，保持伤口表面水化，冷却创面以缓解疼痛，促进愈合过程，还可作为防止细菌感染的屏障，被广泛用于促进伤口愈合，尤其是慢性创面的愈合。因此，水凝胶用于烧伤特别是深度烧伤具有巨大的潜力与临床意义。随着临床应用的深入，水凝胶用于促进皮肤愈合和再生的潜能已经成为越来越广泛的研究热点。
促恢复和抗感染一直是治疗创伤的核心问题，也是临床治疗面临的一个严峻挑战。临床上，大面积烧伤的救治手段包括外科清创手术、自体皮肤移植和后期护理，这是一项复杂繁琐的程序，此外，由于清创不足将可能导致后期伤口愈合延缓，同时，切除手术需要较长时间且对伤口周边健康皮肤组织的影响也是在所难免的。此外，如今对于创面的治疗研究多聚焦于创面敷料，这些敷料功能较为单一，大多无法同时兼备多种性能，例如抗菌性、保湿性、组织粘附性等，并且这些敷料研发中很少聚焦于清创性能的设计，因此缺乏一定的临床应用价值。
常见的水凝胶分为天然高分子水凝胶、合成高分子水凝胶和复合水凝胶。天然高分子材料制备的水凝胶具有良好的生物相容性，且可在人体中自发降解，是理想的水凝胶材料:但其力学性能较差，且容易受外界刺激导致水凝胶结构破坏。合成高分子材料制备的水凝胶具有优良可调的力学性能，易于制备，材料组成稳定，但因为生物相容性较差而限制了应用。研究表明，将天然高分子材料和合成高分子材料相结合所制备的复合水凝胶具有力学可调性和生物相容性。
传统抗菌药物易发生耐药性，对人体健康有威胁。此外，单一抗菌剂的使用造成耐药性高发及二次感染的风险。
发明内容
有鉴于此，本发明的目的在于优化现有技术且提供一种掺杂含铷介孔生物活性玻璃负载AIE的敷料，同时本发明还提出了上述敷料的制备方法，该材料在创面使用时可实现同时细菌成像和抗菌、抗炎作用。
为解决上述技术问题，本发明采用以下技术方案予以实现：
一种掺杂含铷介孔生物活性玻璃负载AIE的敷料，包括载有AIE的含铷介孔生物活性玻璃、丝素蛋白接枝抗菌肽(SF-AMP)和醛基化普朗尼克F127(F127-CHO)，其中，醛基化普朗尼克F127的醛基与丝素蛋白和抗菌肽上的氨基发生席夫交联成复合材料，复合材料负载在载有AIE的含含铷介孔生物活性玻璃上形成敷料。
本发明中，天然高分子丝素蛋白(SF)接枝生物活性药物抗菌肽(AMP)和醛基化普朗尼克F127(F127-CHO)作为复合基底材料，负载在载有AIE的含铷介孔生物活性玻璃上，获得监测和杀灭细菌的集成体系。本发明通过化学改性的方法将抗菌肽接枝到丝素蛋白(SF)表面，制备了具有良好、持久抗菌活性的丝素蛋白，醛基化普朗尼克F127为三嵌段热敏共聚物，其含有的醛基官能团可与丝素蛋白上的氨基发生席夫碱反应进行交联，其中抗菌肽上的氨基也可与F127-CHO交联形成席夫碱键，由此构成具有抗菌性能的水凝胶伤口敷料；与此同时，AIE(溴甲基四苯乙烯)负载于含铷介孔活性玻璃药物载体中，实现AIE细菌成像，金属铷与SF-AMP双重抗菌。
本发明的掺杂含铷介孔生物活性玻璃负载AIE的敷料的制备方法，包括如下步骤：
(1)醛基化普朗尼克(F127-CHO)的制备
将普朗尼克F127(12.3g，1mmol)溶解在70mL无水二氯甲烷中，然后加入30mL吡啶和1.14g(6mmol)对甲苯磺酰氯。体系在室温下反应24小时。之后，混合物用3mol/L盐酸萃取，有机相用10g NaHCO3洗涤。经四氢呋喃/乙醚混合溶剂重结晶，真空干燥后，得F-127对氨基苯磺酸酯。
将F-127对氨基苯磺酸酯(2.5g)溶解在50mL N,N-二甲基甲酰胺中，然后加入4-羟基苯甲醛(0.11g，0.9mmol)和K2CO3(0.12g，0.9mmol)。将混合物在80℃搅拌72小时，然后冷却至室温。加入50mL H2O后用二氯甲烷萃取反应溶液。有机层用MgSO4干燥，浓缩并在冷乙醚中沉淀(过量十倍)。过滤后，将F127-CHO在室温下真空干燥24小时。
(2)丝素蛋白的制备
首先去除桑蚕茧的茧衣，剥离蚕蛹，并将其剪成片状，便于较为充分的脱胶，称取20g蚕茧，将蚕茧放入0.5wt％的碳酸钠溶液浸入2L水浴锅中脱胶，加热煮沸30min，并在去离子水中清洗3次，然后按照上述步骤重复脱胶3次，用去离子水冲洗，以便去掉残余的丝胶及碳酸钠溶液，然后在烘箱中干燥备用。将10g上述烘干后的丝素蛋白溶解在80mL溴化锂(9.3M)溶液中，在60℃下完全溶解后加入0.48g NaOH反应1h，加入1mL HCl中和未反应完的NaOH继续反应3h。反应结束后将溶液过滤除去不溶物，移至透析袋(MW:12000-14000Da)用蒸馏水透析48小时。溶液冻干后收集得到丝素蛋白(SF)。
(3)丝素蛋白接枝抗菌肽(SF-AMP)的制备
将500mg丝素蛋白溶解在200mL纯水中形成4mg/mL的丝素蛋白水溶液，然后将500mg抗菌肽(AMP)加入到SF水溶液中，磁力搅拌约4小时以获得澄清溶液。将750mgEDC和660mgHoBt溶解于10mL的DMSO/H2O(1:1)溶液中。然后使用NaOH和HCl溶液将上述溶液的pH调节至4.75，继续反应4小时，然后将pH调节至7.0结束反应。将上述完成反应后的混和溶液置于去离子水中透析一天，每天至少更换三次透析液，用截留分子量为8-15kDa纤维素透析袋进行透析。经-50℃冷冻干燥后得到冻干的SF-AMP粉末。
(4)含铷介孔生物活性玻璃的制备
将8g模板剂P123、1.86g硝酸钙、1.44g磷酸三乙酯、14mL正硅酸乙酯溶解于150mL乙醇获得溶液A。将0.48g氯化铷溶解于10ml去离子水得溶液B，其中铷、钙、磷、硅的4种元素摩尔比为5:10:5:80。将溶液B倒入溶液A混合在烧杯中，室温下借助磁力搅拌器搅拌24小时，获得混合凝胶。将聚氨酯海绵浸入获得的凝胶10分钟，将海绵转入培养皿，吹风机加热，吹干5分钟，并按此步骤重复4次。待完全干燥后，700℃锻烧8小时，得到含铷介孔生物活性玻璃药物载体(Rb-BG)。
(5)载AIE介孔生物活性玻璃(Rb-BG-AIE)的制备
称取0.5gAIE溶于5mL无水乙醇溶液中，充分溶解后，往溶液中加入1g上述含铷介孔生物活性玻璃药物载体，室温下搅拌24小时。反应结束后离心收集沉淀，干燥后得到Rb-BG-AIE粉末。
泊洛沙姆407(Poloxamer 407)，商品名为普朗尼克F127(Pluronic F127，PF127)为三嵌段热敏共聚物。用其制备的水凝胶具有独特的温敏特性，在一定浓度和温度下可由溶胶转变为多孔三维结构的凝胶态。此外，由于普朗尼克F127的可注射性及良好的生物相容性，已被美国FDA批准用于人体。
丝素蛋白是从蚕丝提取的纤维蛋白。丝素蛋白水凝胶能够为细胞提供附着点和与细胞发生特异性作用，可调节的物理支撑，连接水凝胶内外的孔隙结构，进行氧气、营养物质和生长因子的交换，因此非常适合作为肌肉组织再生的细胞支架。
在烧伤等慢性创面愈合过程中，感染也是临床面临的一大挑战。创面修复的过程包括凝血期、炎症期和修复期三个阶段。感染通常发生在炎症期，引起局部组织变性、坏死。一般情况下，当创面感染得到稳定的控制后修复机制才会往下进行。由此可知创面感染在加重病症的同时也延缓了伤口的愈合。因此，赋予创面敷料优异的抗菌性能对促进伤口愈合具有重要意义。
普朗尼克F127为三嵌段热敏共聚物，其含有的醛基官能团可与丝素蛋白上的氨基发生席夫碱反应进行交联，其中抗菌肽上的氨基也可与F127-CHO交联形成席夫碱键。研究表明，席夫碱化合物具有固有的抗菌性能，有望成为新一代抗菌剂。同时，在创面敷料中引入聚集诱导发光(AIE)性质的荧光分子(TPE)，由此构成具有细菌成像与双重抗菌性能的水凝胶伤口敷料。
与现有技术相比，本发明具有的有益效果为：
首先，本发明的原材料生产成本低，简单易得；其次，敷料具有优异的吸水性、易去除性、生物相容性及可降解性、适合细胞生长的微孔结构、可控降解性能和优异的细胞相容性，同时具备良好的抗菌作用。此外，多孔生物活性玻璃微球具有窄的粒度分布，相对多孔的表面形态和中空结构，能够负载AIE从而实现细菌成像。
附图说明
图1为本发明的Rb-BG(A)和Rb-BG-AIE(B)的扫描电镜图；
图2为本发明实施例1-3的吸水率测试结果图；
图3为本发明实施例1-3的孔隙率测试结果图；
图4为本发明实施例1-3的水蒸气透过率测试结果图。
具体实施方式
为让本领域的技术人员更加清晰直观的了解本发明，下面将结合附图，对本发明作进一步的说明。
本发明中，各物质的具体制备方法如下：
醛基化普朗尼克(F127-CHO)的制备
将普朗尼克F127(12.3g，1mmol)溶解在70mL无水二氯甲烷中，然后加入30mL吡啶和1.14g(6mmol)对甲苯磺酰氯。体系在室温下反应24小时。之后，混合物用3mol/L盐酸萃取，有机相用10g NaHCO3洗涤。经四氢呋喃/乙醚混合溶剂重结晶，真空干燥后，得F-127对氨基苯磺酸酯。
将F-127对氨基苯磺酸酯(2.5g)溶解在50mL N,N-二甲基甲酰胺中，然后加入4-羟基苯甲醛(0.11g，0.9mmol)和K2CO3(0.12g，0.9mmol)。将混合物在80℃搅拌72小时，然后冷却至室温。加入50mL H2O后用二氯甲烷萃取反应溶液。有机层用MgSO4干燥，浓缩并在冷乙醚中沉淀(过量十倍)。过滤后，将F127-CHO在室温下真空干燥24小时。
丝素蛋白的制备
首先去除桑蚕茧的茧衣，剥离蚕蛹，并将其剪成片状，便于较为充分的脱胶，称取20g蚕茧，将蚕茧放入0.5wt％的碳酸钠溶液浸入2L水浴锅中脱胶，加热煮沸30min，并在去离子水中清洗3次，然后按照上述步骤重复脱胶3次，用去离子水冲洗，以便去掉残余的丝胶及碳酸钠溶液，然后在烘箱中干燥备用。将10g上述烘干后的丝素蛋白溶解在80mL溴化锂(9.3M)溶液中，在60℃下完全溶解后加入0.48g NaOH反应1h，加入1mL HCl中和未反应完的NaOH继续反应3h。反应结束后将溶液过滤除去不溶物，移至透析袋(MW:12000-14000Da)用蒸馏水透析48小时。溶液冻干后收集得到丝素蛋白(SF)。
抗菌肽接枝丝素蛋白(SF-AMP)的制备
将500mg丝素蛋白溶解在200mL纯水中形成4mg/mL的丝素蛋白水溶液，然后将500mg抗菌肽(AMP)加入到SF水溶液中，磁力搅拌约4小时以获得澄清溶液。将750mgEDC和660mgHoBt(1-羟基苯并三唑)溶解于10mL的DMSO/H2O(1:1)溶液中。然后使用NaOH和HCl溶液将上述溶液的pH调节至4.75，继续反应4小时，然后将pH调节至7.0结束反应。将上述完成反应后的混和溶液置于去离子水中透析一天，每天至少更换三次透析液，用截留分子量为8-15kDa纤维素透析袋进行透析。经-50℃冷冻干燥后得到冻干的SF-AMP粉末。
含铷介孔生物活性玻璃的制备
将8g模板剂P123、1.86g硝酸钙、1.44g磷酸三乙酯、14mL正硅酸乙酯溶解于150mL乙醇获得溶液A。将0.48g氯化铷溶解于10ml去离子水得溶液B，其中铷、钙、磷、硅的4种元素摩尔比为5:10:5:80。将溶液B倒入溶液A混合在烧杯中，室温下借助磁力搅拌器搅拌24小时，获得混合凝胶。将聚氨酯海绵浸入获得的凝胶10分钟，将海绵转入培养皿，吹风机加热，吹干5分钟，并按此步骤重复4次。待完全干燥后，700℃锻烧8小时，得到含铷介孔生物活性玻璃药物载体(Rb-BG)。
载AIE介孔生物活性玻璃(Rb-BG-AIE)的制备
称取0.5gAIE(溴甲基四苯乙烯)溶于5mL无水乙醇溶液中，充分溶解后，往溶液中加入1g上述含铷介孔生物活性玻璃药物载体，室温下搅拌24小时。反应结束后离心收集沉淀，干燥后得到Rb-BG-AIE粉末。
实施例1
一种伤口敷料，包括以下质量百分浓度的组分：10％ F127-CHO、2％ SF-AMP；
本实施例所述伤口敷料的制备方法，包括以下步骤：
1.配制质量浓度为20％ F127-CHO水溶液，得到溶液A；
2.配制质量浓度为的4％ SF-AMP水溶液，记为溶液B；
3.将上述溶液A和溶液B按体积比1：1混合均匀，得到水凝胶，冻干之后得到水凝胶敷料。
实施例2
一种掺杂含铷介孔生物活性玻璃的伤口敷料，包括以下质量百分浓度的组分：10％F127-CHO、2％ SF-AMP、0.05mg/mL Rb-BG；
本实施例的伤口敷料的制备方法，包括以下步骤：
1.配制质量浓度为20％ F127-CHO水溶液，加入0.1mg/mL的Rb-BG得到溶液A；
2.配制质量浓度为的4％ SF-AMP水溶液，记为溶液B；
3.将上述溶液A和溶液B按体积比1：1混合均匀，得到水凝胶，冻干之后得到水凝胶敷料。
实施例3
一种掺杂含铷介孔生物活性玻璃负载AIE的伤口敷料，包括以下质量百分浓度的组分：10％F127-CHO、2％ SF-AMP、0.05mg/mL Rb-BG-AIE；
本实施例所述伤口敷料的制备方法，包括以下步骤：
1.配制质量浓度为20％F127-CHO水溶液，加入0.1mg/mL的Rb-BG-AIE得到溶液A；
2.配制质量浓度为的4％ SF-AMP水溶液，记为溶液B；
3.将上述溶液A和溶液B按体积比1：1混合均匀，得到水凝胶，冻干之后得到水凝胶敷料。
实验步骤：
1.扫描电子显微镜(SEM)
如图1所示，图1(A)为Rb-BG的扫描电镜图，图1(B)为Rb-BG-AIE的扫描电镜图，Rb-BG和Rb-BG-AIE均为块状结构，粒径范围大概在200-300nm。
2.吸水率测试
称取各实施例的敷料支架质量m0，以及计算敷料支架的面积s，放入一定体积的去离子水当中，37℃条件下浸泡一段时间后称取饱和浸润敷料支架的重量mt，称取重量时用滤纸擦去表面多余的水分。不同时间点的吸水率W根据公式计算如下：
W＝(mt-m0)/s；
图2为各实施例中制备的伤口敷料的吸水率测试结果，从表中可看到，各实施吸水率差别不大，但是实施例3中的吸水率有所下降，这是由于加入介孔活性玻璃后伤口敷料的孔径有少量的下降，Rb-BG-AIE的加入增加了交联密度，交联点增多使水凝胶伤口敷料内部孔隙数量减少、尺寸减小，水凝胶内部交联更加紧密，较好的吸水率有利于伤口的渗透平衡，不易于失水。
3.孔隙率测试
将已知体积(V1)的乙醇倒入装样品的有刻度的容器中，注意乙醇浸没样品。将容器放入大干燥器中抽真空1h，充分浸润样品，除去样品孔洞中的所有空气，记录此时的体积V2。取出样品后，将剩余乙醇的体积记录为V3。按照公式计算孔隙率M(％)：
M＝(V1-V3)/(V2-V3)；
如图3所示为实例的孔隙率测试结果，实施例1为80.9％，实施例2为85.7％，实施例3为75.3％，Rb-BG-AIE的加入增加了交联密度，交联点增多使水凝胶伤口敷料内部孔隙变小，水凝胶内部交联更加紧密，最终导致了干燥形成的海绵样品孔洞逐渐减小，造成了孔隙率的下降。
3.水蒸气透过率测试
将试样装夹在透湿杯中，放置在37℃下，试样的两侧形成一定的湿度差，水蒸气会在湿度差的作用下，由高湿侧穿过试样向低湿侧渗透，通过对透湿杯重量随时间的变化进行测定，即可求而出试样的水蒸气透过率的等参数。
WVTR＝((w0-w1)×24)/(s×t)；
其中W0表示体系初始质量(g)，W1表示体系最终质量(g)，s代表面积(cm2)，t代表测试时间，WVRT单位为(g/m2·24h)。
如图4所示为各实施例的水蒸气透过率，实施例1为2383.59±426.92g/m2·24h，实施例2为2278.93±532.56g/m2·24h，实施例3为2067.31±428.64g/m2·24h。在37℃时，各实施例的WVTR在2000～2500g/m2·24h的范围内，表明水凝胶可以有效减少水分蒸发，保持伤口湿润。通过对比水蒸气透过率可以看出，Rb-BG-AIE的加入使水凝胶伤口敷料失水的速度减缓，水蒸气透过率略有降低。Rb-BG-AIE水凝胶伤口敷料的水蒸气透过率最好。
4.拉伸性能测试
表1伤口敷料的拉伸强度和断裂伸长率
| 拉伸强度(MPa) | 断裂伸长率(％) | |
| 实施例1 | 0.14±0.08 | 21.87±2.01 |
| 实施例2 | 0.23±0.14 | 24.78±1.21 |
| 实施例3 | 0.39±0.24 | 15.28±6.48 |
将实施例1-3的材料分别剪成75×15mm的长方形，在室温，湿度60％条件下用厚度仪测其厚度，然后使用万能材料实验机测定其拉伸力学性能，设定参数如下：拉伸速度为10mm/min，夹持距离为65mm，样品宽度为15mm。拉伸断裂强度由公式进行计算：
式中F(N)为试样断裂时的负荷，b(mm)、d(mm)分别为样品宽度与厚度。
实施例3中的拉伸性能明显增强，这是因为Rb-BG-AIE在水凝胶内部均匀分散，从而在水凝胶中起到强化的作用。除此之外，Rb-BG-AIE的加入增加了交联密度，使水凝胶内部交联更加紧密。
上述对实施例的描述是为便于该技术领域的普通技术人员能理解和应用本发明。熟悉本领域技术的人员显然可以容易地对这些实施例做出各种修改，并把在此说明的一般原理应用到其他实施例中而不必经过创造性的劳动。因此，本发明不限于这里的实施例，本领域技术人员根据本发明的揭示，对于本发明做出的改进和修改都应该在本发明的保护范围之内。
Claims (10)
1.一种掺杂含铷介孔生物活性玻璃负载AIE的敷料，其特征在于，
包括载有AIE材料的含铷介孔生物活性玻璃、丝素蛋白-抗菌肽接枝共聚物和醛基化普朗尼克F127。
2.如权利要求1所述的一种掺杂含铷介孔生物活性玻璃负载AIE的敷料，其特征在于，
所述醛基化普朗尼克F127的质量百分浓度为10％；
所述丝素蛋白-抗菌肽接枝共聚物的质量百分浓度为2％；
所述载有AIE材料的含铷介孔生物活性玻璃在敷料中的浓度为0.05mg/mL。
3.如权利要求1或2所述的一种掺杂含铷介孔生物活性玻璃负载AIE的敷料的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)制备醛基化普朗尼克F127水溶液；
(2)制备丝素蛋白-抗菌肽接枝共聚物的水溶液；
(3)制备载有AIE材料的含铷介孔生物活性玻璃；
(4)将载有AIE材料的含铷介孔生物活性玻璃加入醛基化普朗尼克F127水溶液中，再与制备丝素蛋白-抗菌肽接枝共聚物的水溶液按1：1比例混合，得到水凝胶，冻干之后得到敷料。
4.如权利要求3所述的一种掺杂含铷介孔生物活性玻璃负载AIE的敷料的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中，所述的醛基化普朗尼克F127的制备方法包括：
(11)将普朗尼克F127溶解在无水二氯甲烷中，然后加入吡啶和对甲苯磺酰氯，在室温下反应后，混合物用3mol/L盐酸萃取，有机相用NaHCO3洗涤；经四氢呋喃/乙醚混合溶剂重结晶，真空干燥后，得普朗尼克F127对氨基苯磺酸酯；
(12)将普朗尼克F127对氨基苯磺酸酯溶解在N,N-二甲基甲酰胺中，然后加入4-羟基苯甲醛和K2CO3；将混合物在80℃搅拌溶解，然后冷却至室温；加入H2O后用二氯甲烷萃取反应溶液；有机层用MgSO4干燥，浓缩并在冷乙醚中沉淀；过滤后，得到的F127-CHO在室温下真空干燥。
5.如权利要求3所述的一种掺杂含铷介孔生物活性玻璃负载AIE的敷料的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中，丝素蛋白-抗菌肽接枝共聚物的制备方法包括：
(21)将丝素蛋白溶解在纯水中制备成丝素蛋白水溶液，然后将抗菌肽加入到丝素蛋白水溶液中，磁力搅拌以获得澄清溶液；
(22)将EDC和HoBt溶解于DMSO/H2O(1:1,v/v)溶液中；然后将溶液的pH调节至4.75，继续反应，反应完成后继续将pH调节至7.0结束反应；将上述完成反应后的混和溶液置于去离子水中透析，每天至少更换三次透析液，用截留分子量为8-15kDa纤维素透析袋进行透析；冷冻干燥后得到冻干的丝素蛋白-抗菌肽接枝共聚物粉末。
6.如权利要求5所述的一种掺杂含铷介孔生物活性玻璃负载AIE的敷料的制备方法，其特征在于，所述丝素蛋白的制备方法包括：
首先去除桑蚕茧的茧衣，剥离蚕蛹，并将其剪成片状；
将茧衣放入碳酸钠溶液中脱胶，加热煮沸后，在去离子水中清洗；
按照上述步骤重复脱胶3次，用去离子水冲洗，然后在烘箱中干燥备用；
将烘干后的丝素蛋白溶解在溴化锂溶液中，完全溶解后加入NaOH，加入HCl中和未反应完的NaOH；反应结束后将溶液过滤除去不溶物，移至透析袋用蒸馏水透析，溶液冻干后收集得到丝素蛋白。
7.如权利要求3所述的一种掺杂含铷介孔生物活性玻璃负载AIE的敷料的制备方法，其特征在于，所述步骤(3)中，载有AIE材料的含铷介孔生物活性玻璃的制备方法包括：
称取AIE材料溶于无水乙醇溶液中，充分溶解后，往溶液中加入含铷介孔生物活性玻璃并搅拌；反应结束后离心收集沉淀，干燥后即得载有AIE材料的含铷介孔生物活性玻璃粉末。
8.如权利要求7所述的一种掺杂含铷介孔生物活性玻璃负载AIE的敷料的制备方法，其特征在于，含铷介孔生物活性玻璃的制备方法包括：
将模板剂P123、硝酸钙、磷酸三乙酯、正硅酸乙酯溶解于乙醇获得溶液A，将氯化铷溶解于去离子水得溶液B，其中铷、钙、磷、硅的4种元素摩尔比为5:10:5:80；
将溶液B倒入溶液A混合，室温下借助磁力搅拌器搅拌获得混合凝胶；
将聚氨酯海绵浸入获得的凝胶中，将海绵转入培养皿，吹风机加热，吹干，并按此步骤重复操作；
待完全干燥后，700℃锻烧，得到含铷介孔生物活性玻璃。
9.一种载有AIE材料的含铷介孔生物活性玻璃，其特征在于，包括含铷介孔生物活性玻璃和AIE材料，AIE材料负载于含铷介孔生物活性玻璃上。
10.如权利要求9所述的一种载有AIE材料的含铷介孔生物活性玻璃的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
称取AIE材料溶于无水乙醇溶液中，充分溶解后，往溶液中加入含铷介孔生物活性玻璃并搅拌；反应结束后离心收集沉淀，干燥后即得载有AIE材料的含铷介孔生物活性玻璃粉末；
其中，含铷介孔生物活性玻璃的制备方法包括：
将模板剂P123、硝酸钙、磷酸三乙酯、正硅酸乙酯溶解于乙醇获得溶液A，将氯化铷溶解于去离子水得溶液B，其中铷、钙、磷、硅的4种元素摩尔比为5:10:5:80；
将溶液B倒入溶液A混合，室温下借助磁力搅拌器搅拌获得混合凝胶；
将聚氨酯海绵浸入获得的凝胶中，将海绵转入培养皿，吹风机加热，吹干，并按此步骤重复操作；
待完全干燥后，700℃锻烧，得到含铷介孔生物活性玻璃。
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Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
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