CN116747220A - 麦角硫因在促进胶原蛋白生成中的用途 - Google Patents
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Abstract
本申请提供一种包括麦角硫因作为有效成分的胶原蛋白生成促进剂,一种麦角硫因在促进III型胶原蛋白生成中的用途,一种麦角硫因在制备预防或缓解与III型胶原蛋白降低相关的皮肤问题的产品中的用途。麦角硫因具有促进III型胶原蛋白生成的作用,从而麦角硫因可以作为胶原蛋白生成促进剂广泛用于制备促进III型胶原蛋白生成的产品。
Description
技术领域
本申请属于化妆品和食品技术领域,具体地,涉及麦角硫因在促进胶原蛋白生成中的用途。
背景技术
胶原蛋白(collagen)又称胶原,是由动物细胞合成的一种生物大分子蛋白质,广泛存在于动物体内,含量丰富,种类繁多,对细胞、组织乃至器官行驶正常功能以及损伤修复都有重大影响。
成人皮肤组织的胶原蛋白主要是I型和III型胶原蛋白。相比之下,胎儿皮肤中III型胶原蛋白的比例明显高于成人。III型胶原蛋白的减少与皮肤老化有关,导致缺乏弹性和再生能力。补充III型胶原蛋白可减少疤痕增生,促进皮肤再生和伤口愈合。人III型胶原蛋白可有效促进巨噬细胞从M1型向M2型转变、L929细胞的迁移能力和人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的血管生成。
然而,I型和III型胶原蛋白的生成并不是正相关的,能够促进I型胶原蛋白生成,并不意味着也能促进III型胶原蛋白生成,反之亦然。相关研究大多集中于I型胶原蛋白的生成,而对于如何能促进III型胶原蛋白的生成,目前的报道很少。
麦角硫因(Ergothioneine,EGT)是一种天然抗氧化剂,在人体内可以对细胞起到保护作用,是机体内的重要活性物质,其可以应用于食品、生物医学、化妆品等领域。尽管麦角硫因已得到了广泛地应用,但是其功效尚未完全阐释清楚,开发麦角硫因的新功效仍是目前亟待研究和解决的课题。
发明内容
针对现有技术存在的问题,本申请意外地发现,麦角硫因具有促进Ⅲ型胶原蛋白生成的作用,从而完成了本发明。
具体来说,本申请涉及如下方面:
本申请提供一种胶原蛋白生成促进剂,其包括麦角硫因作为有效成分。
进一步地,所述胶原蛋白包括III型胶原蛋白。
进一步地,所述的胶原蛋白生成促进剂的施用方式包括体内和/或体外。
本申请提供一种麦角硫因在促进III型胶原蛋白生成中的用途。
进一步地,所述麦角硫因的施用方式包括体内和/或体外。
本申请提供一种麦角硫因在制备预防或缓解与III型胶原蛋白降低相关的皮肤问题的产品中的用途。
进一步地,所述产品包括药品、医疗器械、化妆品或食品。
本申请发现麦角硫因具有促进III型胶原蛋白生成的作用,因此,麦角硫因可以作为胶原蛋白生成促进剂广泛用于制备促进III型胶原蛋白生成的产品。
具体实施方式
下面结合实施例进一步说明本申请,应当理解,实施例仅用于进一步说明和阐释本申请,并非用于限制本申请。
除非另外定义,本说明书中有关技术的和科学的术语与本领域内的技术人员所通常理解的意思相同。虽然在实验或实际应用中可以应用与此间所述相似或相同的方法和材料,本文还是在下文中对材料和方法做了描述。在相冲突的情况下,以本说明书包括其中定义为准,另外,材料、方法和例子仅供说明,而不具限制性。以下结合具体实施例对本申请作进一步的说明,但不用来限制本申请的范围。
针对现有技术存在的问题,本申请的发明人发现麦角硫因具有促进III型胶原蛋白生成的作用,因此提供一种胶原蛋白生成促进剂,其包括麦角硫因作为有效成分。
本领域技术人员可以理解,胶原蛋白生成促进剂可以以麦角硫因作为唯一的有效成分发挥促进III型胶原蛋白生成的作用,也可以含有其他有效成分与麦角硫因共同发挥促进III型胶原蛋白生成的作用。
在一些实施方式中,所述胶原蛋白生成促进剂的施用方式包括体内和/或体外施用。当体外施用时,例如涂抹或外敷时,麦角硫因在施用时的浓度可以为0.0001wt%-20wt%,例如可以为0.0001wt%、0.0002wt%、0.0003wt%、0.0004wt%、0.0005wt%、0.0006wt%、0.0007wt%、0.0008wt%、0.0009wt%、0.001wt%、0.002wt%、0.003wt%、0.004wt%、0.005wt%、0.006wt%、0.007wt%、0.008wt%、0.009wt%、0.01wt%、0.02wt%、0.03wt%、0.04wt%、0.05wt%、0.06wt%、0.07wt%、0.08wt%、0.09wt%、0.1wt%、0.2wt%、0.3wt%、0.4wt%、0.5wt%、0.6wt%、0.7wt%、0.8wt%、0.9wt%、1wt%、2wt%、3wt%、4wt%、5wt%、6wt%、7wt%、8wt%、9wt%、10wt%、11wt%、12wt%、13wt%、14wt%、15wt%、16wt%、17wt%、18wt%、19wt%、20wt%等,以及这些数值之间的任意范围;当体内施用时,例如口服时,麦角硫因在施用时的浓度可以为0.0001wt%-20wt%,例如可以为0.0001wt%、0.0002wt%、0.0003wt%、0.0004wt%、0.0005wt%、0.0006wt%、0.0007wt%、0.0008wt%、0.0009wt%、0.001wt%、0.002wt%、0.003wt%、0.004wt%、0.005wt%、0.006wt%、0.007wt%、0.008wt%、0.009wt%、0.01wt%、0.02wt%、0.03wt%、0.04wt%、0.05wt%、0.06wt%、0.07wt%、0.08wt%、0.09wt%、0.1wt%、0.2wt%、0.3wt%、0.4wt%、0.5wt%、0.6wt%、0.7wt%、0.8wt%、0.9wt%、1wt%、2wt%、3wt%、4wt%、5wt%、6wt%、7wt%、8wt%、9wt%、10wt%、11wt%、12wt%、13wt%、14wt%、15wt%、16wt%、17wt%、18wt%、19wt%、20wt%等,以及这些数值之间的任意范围;例如注射时,麦角硫因在施用时的浓度可以为10μg/L-50g/L,例如可以为10μg/L、100μg/L、1000μg/L、1g/L、10g/L、20g/L、30g/L、40g/L、50g/L等,以及这些数值之间的任意范围。
在一些实施方式中,上述胶原蛋白生成促进剂可以直接或间接地施用于皮肤,例如可以通过涂抹、外敷、注射或口服等方式施用于皮肤。
在一些实施方式中,上述胶原蛋白生成促进剂可以制成化妆品、医疗器械、药品、食品等。例如,上述胶原蛋白生成促进剂可以单独或与其他活性成分一起配制成化妆品、医疗器械、药品、食品等,用于促进III型胶原蛋白生成。
本申请还提供麦角硫因在促进III型胶原蛋白生成中的用途。麦角硫因在促进III型胶原蛋白生成中的用途可以为治疗用途,也可以为非治疗目的的用途,例如美容用途。
在一些实施方式中,所述麦角硫因的施用方式包括体内和/或体外。当体外施用时,例如涂抹或外敷时,麦角硫因在施用时的浓度可以为0.0001wt%-20wt%,例如可以为0.0001wt%、0.0002wt%、0.0003wt%、0.0004wt%、0.0005wt%、0.0006wt%、0.0007wt%、0.0008wt%、0.0009wt%、0.001wt%、0.002wt%、0.003wt%、0.004wt%、0.005wt%、0.006wt%、0.007wt%、0.008wt%、0.009wt%、0.01wt%、0.02wt%、0.03wt%、0.04wt%、0.05wt%、0.06wt%、0.07wt%、0.08wt%、0.09wt%、0.1wt%、0.2wt%、0.3wt%、0.4wt%、0.5wt%、0.6wt%、0.7wt%、0.8wt%、0.9wt%、1wt%、2wt%、3wt%、4wt%、5wt%、6wt%、7wt%、8wt%、9wt%、10wt%、11wt%、12wt%、13wt%、14wt%、15wt%、16wt%、17wt%、18wt%、19wt%、20wt%等,以及这些数值之间的任意范围;当体内施用时,例如口服时,麦角硫因在施用时的浓度可以为0.0001wt%-20wt%,例如可以为0.0001wt%、0.0002wt%、0.0003wt%、0.0004wt%、0.0005wt%、0.0006wt%、0.0007wt%、0.0008wt%、0.0009wt%、0.001wt%、0.002wt%、0.003wt%、0.004wt%、0.005wt%、0.006wt%、0.007wt%、0.008wt%、0.009wt%、0.01wt%、0.02wt%、0.03wt%、0.04wt%、0.05wt%、0.06wt%、0.07wt%、0.08wt%、0.09wt%、0.1wt%、0.2wt%、0.3wt%、0.4wt%、0.5wt%、0.6wt%、0.7wt%、0.8wt%、0.9wt%、1wt%、2wt%、3wt%、4wt%、5wt%、6wt%、7wt%、8wt%、9wt%、10wt%、11wt%、12wt%、13wt%、14wt%、15wt%、16wt%、17wt%、18wt%、19wt%、20wt%等,以及这些数值之间的任意范围;例如注射时,麦角硫因在施用时的浓度可以为10μg/L-50g/L,例如可以为10μg/L、100μg/L、1000μg/L、1g/L、10g/L、20g/L、30g/L、40g/L、50g/L等,以及这些数值之间的任意范围。
在本申请的促进III型胶原蛋白生成的用途中,麦角硫因可以直接或间接地施用于皮肤,例如可以通过涂抹、外敷、注射或口服等方式施用于皮肤。
在本申请的促进III型胶原蛋白生成的用途中,麦角硫因可以制成化妆品、医疗器械、药品、食品等。例如,麦角硫因可以单独或与其他活性成分一起配制成化妆品、医疗器械、药品、食品等,用于促进III型胶原蛋白生成。
本申请还提供麦角硫因在制备预防或缓解与III型胶原蛋白降低相关的皮肤问题的产品中的用途。其中,与III型胶原蛋白降低相关的皮肤问题可以是本领域已知的各种类型的由III型胶原蛋白降低引起的皮肤问题,例如皮肤弹性降低、皮肤弹性丧失、皮肤皱纹增加、皮肤松弛、皮肤屏障修复缓慢、皮肤粗糙等。
在一些实施方式中,麦角硫因的施用方式包括体内和/或体外。当体外施用时,例如涂抹或外敷时,麦角硫因在施用时的浓度可以为0.0001wt%-20wt%,例如可以为0.0001wt%、0.0002wt%、0.0003wt%、0.0004wt%、0.0005wt%、0.0006wt%、0.0007wt%、0.0008wt%、0.0009wt%、0.001wt%、0.002wt%、0.003wt%、0.004wt%、0.005wt%、0.006wt%、0.007wt%、0.008wt%、0.009wt%、0.01wt%、0.02wt%、0.03wt%、0.04wt%、0.05wt%、0.06wt%、0.07wt%、0.08wt%、0.09wt%、0.1wt%、0.2wt%、0.3wt%、0.4wt%、0.5wt%、0.6wt%、0.7wt%、0.8wt%、0.9wt%、1wt%、2wt%、3wt%、4wt%、5wt%、6wt%、7wt%、8wt%、9wt%、10wt%、11wt%、12wt%、13wt%、14wt%、15wt%、16wt%、17wt%、18wt%、19wt%、20wt%等,以及这些数值之间的任意范围;当体内施用时,例如口服时,麦角硫因在施用时的浓度可以为0.0001wt%-20wt%,例如可以为0.0001wt%、0.0002wt%、0.0003wt%、0.0004wt%、0.0005wt%、0.0006wt%、0.0007wt%、0.0008wt%、0.0009wt%、0.001wt%、0.002wt%、0.003wt%、0.004wt%、0.005wt%、0.006wt%、0.007wt%、0.008wt%、0.009wt%、0.01wt%、0.02wt%、0.03wt%、0.04wt%、0.05wt%、0.06wt%、0.07wt%、0.08wt%、0.09wt%、0.1wt%、0.2wt%、0.3wt%、0.4wt%、0.5wt%、0.6wt%、0.7wt%、0.8wt%、0.9wt%、1wt%、2wt%、3wt%、4wt%、5wt%、6wt%、7wt%、8wt%、9wt%、10wt%、11wt%、12wt%、13wt%、14wt%、15wt%、16wt%、17wt%、18wt%、19wt%、20wt%等,以及这些数值之间的任意范围;例如注射时,麦角硫因在施用时的浓度可以为10μg/L-50g/L,例如可以为10μg/L、100μg/L、1000μg/L、1g/L、10g/L、20g/L、30g/L、40g/L、50g/L等,以及这些数值之间的任意范围。
在本申请的制备预防或缓解与III型胶原蛋白降低相关的皮肤问题的产品中的用途中,麦角硫因可以直接或间接地施用于皮肤,例如可以通过涂抹、外敷、注射或口服等方式施用于皮肤。
在本申请的制备预防或缓解与III型胶原蛋白降低相关的皮肤问题的产品中的用途中,所述产品可以为化妆品、医疗器械、药品、食品等。例如,麦角硫因可以单独或与其他活性成分一起配制成化妆品、医疗器械、药品、食品等,用于预防或缓解与III型胶原蛋白降低相关的皮肤问题。
本申请中的麦角硫因是出于治疗或非治疗目的来实现以上作用。例如仅出于美容的目的实现麦角硫因在本申请中的作用。
实施例
实施例中使用的实验材料和实验设备的相关信息如表1所示。
表1
实验材料和实验设备 | 来源 |
人原代真皮成纤维细胞 | Lifeline公司 |
人成纤维细胞HFF | 上海富衡生物科技有限公司 |
DMEM培养基、胎牛血清、96孔细胞培养板 | Thermo |
CCK试剂 | 同仁生物 |
Human Collagen Type III ELISA试剂盒 | BIO-SWAMP公司 |
细胞培养箱 | Thermofisher i160 |
倒置显微镜 | Leica DMI1 |
生物安全柜 | Labconco Class II |
酶标仪 | BioTek 800TS |
实施例1
实验步骤:
1铺板
取对数生长期的人成纤维细胞HFF,弃去培养基,用PBS液清洗一遍,加入0.25wt%胰酶,在细胞培养箱放置1min,培养液终止消化。将培养液在1000rpm离心3min,然后用完全DMEM培养液重悬细胞,进行计数。按3×105细胞/ml的密度将人成纤维细胞HFF接种到12孔板中,每孔1ml。在37℃、5%CO2条件下于培养箱孵育24h后,去除培养液,PBS清洗。
2细胞分组
将步骤1清洗后的细胞分为2组,分别为空白对照组和麦角硫因组。每组3孔重复。其中,空白对照组:1ml的无血清培养液。麦角硫因组:1ml含0.2wt%麦角硫因的无血清培养液。
将上述各组混匀后,放置培养箱中继续培养72h。
3检测
使用相差显微镜观察细胞生长情况、形态和细胞单层的完整性,记录细胞形态和生长的变化。参照人Human Collagen III ELISA试剂盒测定III型胶原蛋白含量。
III型胶原蛋白促进率的计算方式为:
实验结果:
如表2所示,与空白对照组相比,麦角硫因组的III型胶原蛋白促进率显著提高,这说明麦角硫因可显著促进III型胶原蛋白的生成。
表2
III型胶原蛋白相对表达量(%) | III型胶原蛋白促进率(%) | |
空白对照组 | 100.0±12.3 | / |
麦角硫因组 | 148.3±20.1** | 48.3±20.1** |
注:*代表P<0.05,**代表P<0.01,***代表P<0.001
实施例2
1.样品制备
将麦角硫因固体粉末用基础培养液配制成溶液,并调节浓度至0.001wt%。
2.人原代真皮成纤维细胞的III型胶原蛋白生成量测试
当体外培养的成纤维细胞生长至80-90%汇合时,用胰酶将其消化并接种于96孔板。细胞在96孔板中贴附培养48h后,用步骤(1)中配制的麦角硫因样品处理细胞(N=3),同时设置含100ng/mL IGF-1的处理组为阳性对照组。48h后,取细胞培养上清液用于III型胶原蛋白的ELISA测试,所测得样品组的III型胶原蛋白含量与空白对照组进行统计比较,评估麦角硫因对III型胶原蛋白生成量的影响。
3.统计方法
所有结果以Mean±SD表示,计量资料差异比较采用unpaired t检验,P<0.05视为差异有统计学意义。
4.实验结果
利用Human Collagen Type III ELISA试剂盒测试麦角硫因对真皮成纤维细胞III型胶原蛋白合成量的影响,数据统计结果如表3所示。阳性对照品100ng/mL IGF-1对成纤维细胞的III型胶原蛋白合成量有显著促进作用(P<0.05)。麦角硫因在0.001wt%浓度下对III型胶原蛋白生成量具有显著促进作用(P<0.05)。
表3
分组 | 空白对照组 | 阳性对照组 | 样品组 |
相对III型胶原蛋白相对表达量 | 100.00% | 129.3% | 117.8% |
标准差SD | 0.08 | 0.05 | 0.07 |
P值(和空白对照组相比) | / | 0.0103 | 0.0360 |
Claims (7)
1.一种胶原蛋白生成促进剂,其包括麦角硫因作为有效成分。
2.根据权利要求1所述的胶原蛋白生成促进剂,所述胶原蛋白包括III型胶原蛋白。
3.根据权利要求1或2所述的胶原蛋白生成促进剂,其施用方式包括体内和/或体外。
4.麦角硫因在促进III型胶原蛋白生成中的用途。
5.根据权利要求4所述的用途,所述麦角硫因的施用方式包括体内和/或体外。
6.麦角硫因在制备预防或缓解与III型胶原蛋白降低相关的皮肤问题的产品中的用途。
7.根据权利要求6所述的用途,所述产品包括药品、医疗器械、化妆品或食品。
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