CN116555098A - 复合微生物制剂及其在水土环境修复中的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种复合微生物制剂及其在水土环境修复中的应用。所述一种复合微生物制剂，由菌剂和载体组成；所述菌剂为根瘤菌、沼泽红假单胞菌和荧光假单胞菌组成；所述载体，包括下述重量份原料：4‑8份壳聚糖、2‑10份蛭石、4‑12份麦饭石、8‑16份海泡石、2‑8份异亮氨酸。本发明公开的复合微生物制剂，根瘤菌和沼泽红假单胞菌可以共同吸附和沉淀重金属，而荧光假单胞菌则还能够还原和氧化重金属，三种微生物在生态系统中具有不同的作用，进而共同促进水土生态系统的恢复。

Description

复合微生物制剂及其在水土环境修复中的应用
技术领域
本发明涉及一种复合微生物制剂及其在水土环境修复中的应用。
背景技术
土壤是人类赖以生存的主要自然资源之一，对地球生态系统物质、能量交换与循环起到重要作用，同时也是人类生态环境的重要组成部分。土壤一旦受到污染，其对环境的影响是持续且不可逆转的。重金属污染指的是比重大于5的金属或其他类型化合物对环境造成的污染。近年来，重金属污染已成为人们越来越重视的环境问题之一，不论是在水资源还是土壤资源中都广泛存在着重金属污染。在土壤资源中，重金属污染物主要包括铅、汞、砷、铜、镉等；在水资源中，则主要包括砷、汞、镉、铅、铬、铜、锌、镍、锰、银等。与其他类型的有机化合物污染不同，重金属污染具有富集性，难以被自然净化。重金属在土壤中分布广泛，一旦环境产生变化，其形态就会转化，从而造成严重的环境污染。土壤污染物是妨碍土壤正常功能，降低作物产量和质量，并通过粮食、蔬菜、水果等间接影响人体健康的物质。
据首次全国土壤污染状况调查结果显示，土壤环境状况总体不容乐观，部分地区土壤污染较重，耕地土壤环境质量堪忧，工矿业废弃地土壤环境问题突出。土壤总的点位超标率为16.1％，其中，镉、汞、砷、铜、铅、铬、锌、镍八种无机污染物点位超标率分别为7.0％、1.6％、2.7％、2.1％、1.5％、1.1％、0.9％、4.8％。其中，重污染企业用地超标点位占36.3％，工业废弃地超标点位占34.9％，工业园区超标点位占29.4％，干线公路两侧超标点位占20.3％等等。
随着全球环境破坏的日益严重，土壤污染成为世界各国研究的重点之一。各国纷纷制定了相关法规和标准，以保护土壤环境和人民健康。在土壤重金属污染治理方面，物理和化学方法虽然成熟高效，但能耗和材料消耗较高，成本较高，难以推广。因此，微生物治理技术具有较大的发展潜力。微生物治理技术的机理是利用自然存在的或培育出的功能菌群，在适宜的环境条件下促进或增强微生物的代谢功能，从而减少或降解有害污染物质，降低土壤重金属的活性。因此，探索有效的土壤重金属污染修复技术成为当务之急。
发明内容
针对现有技术中存在的不足，本发明所要解决的技术问题是提供一种复合微生物制剂及其在水土环境修复中的应用。
本发明提供了一种复合微生物制剂，由菌剂和载体组成；
所述菌剂为根瘤菌、沼泽红假单胞菌和荧光假单胞菌组成。
根瘤菌(Rhizobium)是一类革兰氏阴性菌，可以与豆科植物共生，形成根瘤，通过共生作用将空气中的氮还原成氨，以供植物吸收。此外，根瘤菌还具有较强的修复土壤中重金属的能力。具体而言，根瘤菌可以通过以下方式对重金属进行治理：(1)直接沉淀：根瘤菌表面的菌体可以通过吸附、沉淀等方式将土壤中的重金属沉淀到菌体表面，从而实现重金属的去除；(2)转化：根瘤菌具有较强的代谢能力，可以将土壤中的一些重金属离子通过代谢反应转化成为不易吸收的形态，减少重金属对植物的毒害；(3)吸附：根瘤菌表面的菌体具有一定的吸附能力，可以将土壤中的重金属离子吸附到其表面，从而减少重金属对植物的毒害。总的来说，根瘤菌能够治理土壤重金属的能力主要来自于其菌体表面的一系列特殊结构和代谢反应。通过沉淀、转化、吸附等方式，根瘤菌能够有效地降低土壤中重金属的浓度，从而减少对植物的毒害，提高土壤的肥力和植物的生长。
沼泽红假单胞菌(Rhodopseudomonas palustris)是一种光合细菌，具有高蛋白、多种生物活性物质和适应性强等特点。在土壤重金属污染修复中，沼泽红假单胞菌能够降低土壤重金属浓度。这是因为沼泽红假单胞菌能够通过吸附和转化等方式有效地去除土壤中的重金属，特别是对于一些难以降解的重金属有良好的分解和转化能力，从而达到修复土壤污染的效果。沼泽红假单胞菌对于各种有机废水和毒物也具有较强的分解和转化能力，因此对于修复土壤中有机物和毒物的污染同样具有潜在的应用价值。此外，沼泽红假单胞菌也具有较强的适应性，能够耐受较高浓度的有机废水和污染物，因此在修复农田土壤中也具有广阔的应用前景。
荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)可以用于治理土壤中重金属污染。荧光假单胞菌是一类广泛存在于土壤中的革兰氏阴性细菌，具有多种生物学功能。其中一些菌株具有重金属耐受性和去除能力。这些菌株通过吸附、沉淀、还原、氧化等机制来去除土壤中的重金属，从而减轻土壤重金属污染的危害。荧光假单胞菌能够分泌一些特殊的代谢产物，如螯合剂和胞外多糖，这些代谢产物可以与重金属离子结合，形成难溶的沉淀物，从而降低土壤中重金属的浓度。此外，荧光假单胞菌还能够通过表面吸附重金属离子来减少土壤中重金属的浓度。荧光假单胞菌在重金属污染土壤中的应用已经得到了广泛的研究。研究表明，荧光假单胞菌的应用可以有效地降低土壤中重金属的浓度，同时也可以促进植物生长和提高土壤肥力。因此，荧光假单胞菌可以作为一种重要的土壤修复菌种来治理土壤中的重金属污染。
根瘤菌、沼泽红假单胞菌和荧光假单胞菌是常见的土壤细菌，它们在土壤修复和农业生产中都具有重要作用。以下是三者的一些比较：
(1)营养特性：根瘤菌与豆科植物共生，通过菌根结节将空气中的氮还原成植物能够吸收的氨，起到促进植物生长的作用；沼泽红假单胞菌是一种光合细菌，能够通过光合作用固定大量的二氧化碳并产生有机物质，同时能够吸收无机物质作为营养；荧光假单胞菌是一种革兰氏阴性菌，能够在有机物质存在的条件下生长和繁殖。
(2)修复能力：根瘤菌具有沉淀、转化、吸附重金属的能力，通过吸附重金属离子来降低土壤中的重金属浓度；沼泽红假单胞菌具有分解、降解和吸附重金属的能力，能够通过生物转化、沉淀和吸附的方式去除土壤中的重金属；荧光假单胞菌具有分解有机物质、去除重金属和改善土壤结构的能力，可以分解土壤中的有机物质并降低土壤中的重金属含量。
(3)应用范围：根瘤菌通常用于豆科植物的种植和栽培，能够促进植物生长和提高产量；沼泽红假单胞菌和荧光假单胞菌则广泛应用于土壤修复和农业生产中，对不同类型的土壤和不同的农作物都具有一定的适应性。
综上，根瘤菌、沼泽红假单胞菌和荧光假单胞菌都具有各自的优势和适用范围，然后现有技术中并公开过根瘤菌、沼泽红假单胞菌和荧光假单胞菌三者联合使用，修复土壤环境，特别是修复土壤中的重金属。
发明人经过大量摸索，通过联合使用这三种微生物，可以将它们的不同特性结合起来，发挥协同作用，提高修复效果。根瘤菌和沼泽红假单胞菌可以共同吸附和沉淀重金属，而荧光假单胞菌则还能够还原和氧化重金属。此外，这三种微生物在生态系统中具有不同的作用，可以共同促进土壤生态系统的恢复和健康发展。因此，联合使用这三种微生物有望成为一种有效的修复土壤中重金属污染的方法。
优选地，
所述菌剂由根瘤菌、沼泽红假单胞菌和荧光假单胞菌按质量比(1-5):(1-5):(1-5)组成。
所述菌剂中根瘤菌浓度为(1.2-3.6)×108个/mL，沼泽红假单胞菌浓度为(1.2-3.6)×108个/mL，荧光假单胞菌浓度为(1.2-3.6)×108个/mL。
所述载体，包括下述重量份原料：4-8份壳聚糖、2-10份蛭石、4-12份麦饭石、8-16份海泡石、2-8份异亮氨酸。将壳聚糖、蛭石、麦饭石、海泡石和异亮氨酸按照上述重量份比例混合，室温搅拌均匀，得到所述载体。
壳聚糖是由甲壳素酸水解得到的天然高分子化合物，具有生物降解性、生物相容性和生物活性等特性。壳聚糖可作为一种土壤修复剂，能够吸附土壤中的重金属和有机物质，改善土壤物理性质，并促进土壤微生物生长。
蛭石是一种层状硅酸盐矿物，主要由硅酸镁铝层片和水分子组成。蛭石具有良好的吸附性能和离子交换性能，能够吸附土壤中的重金属和有机物质，减少其对植物的毒害作用，同时改善土壤通气性和水分保持能力。
麦饭石是一种层状硅酸盐矿物，主要由硅酸铝层片和水分子组成。麦饭石具有良好的吸附性能和离子交换性能，能够吸附土壤中的重金属和有机物质，减少其对植物的毒害作用，同时改善土壤通气性和水分保持能力。
海泡石是一种以硅酸骨架为主的矿物，具有较高的离子交换性能和吸附能力，能够吸附土壤中的重金属和有机物质，减少其对植物的毒害作用，同时提高土壤肥力和保水能力。
异亮氨酸是一种氨基酸，其在土壤治理中可用作一种生物修复剂。异亮氨酸可以与重金属离子形成络合物，减少重金属离子的活性，从而减缓重金属离子对土壤和植物的毒性影响。同时，异亮氨酸还具有一定的抗氧化作用，能够减轻土壤中重金属离子引起的氧化损伤，保护土壤微生物和植物生长。除了在重金属污染的土壤治理中使用，异亮氨酸还可以作为一种生物促进剂，促进植物生长，提高土壤肥力。其能够促进根系生长，增加植物根系对营养物质的吸收能力，并且具有一定的激素样作用，能够促进植物生长、开花和结实等。
所述菌剂和载体的质量比为1:(1-20)，进一步优选为1:(1-10)，再进一步优选为1:(2-6)。
本发明还提供了一种复合微生物制剂的制备方法，包括下述步骤：
(1)制备菌剂：将根瘤菌、沼泽红假单胞菌和荧光假单胞菌，按比例混合得到菌剂；
(2)制备载体：将壳聚糖、蛭石、麦饭石、海泡石和异亮氨酸按照上述重量份比例混合，室温搅拌均匀，得到所述载体；
(3)制备复合微生物制剂：将菌剂加入到载体中，混合均匀，得到所述复合微生物制剂。
本发明还提供了一种复合微生物制剂在水土环境修复中的应用。优选地，所述水土环境为污水环境或土壤环境；再优选的，所述土壤环境中含有重金属，进一步优选地，所述重金属为镉、汞、砷、铜、铅、铬、锌和镍中的至少一种。
本发明公开的复合微生物制剂，根瘤菌和沼泽红假单胞菌可以共同吸附和沉淀重金属，而荧光假单胞菌则还能够还原和氧化重金属，三种微生物在生态系统中具有不同的作用，进而共同促进土壤生态系统的恢复。
具体实施方式
原料 原料介绍
根瘤菌 山东鑫卓源公司，货号20200705，根瘤菌，水分≤8％
沼泽红假单胞菌 编号CGMCC1.8929，购自中国普通微生物菌种保藏管理中心
荧光假单胞菌 编号CGMCC1.7375，购自中国普通微生物菌种保藏管理中心
壳聚糖 山东长霄生物公司食品级水溶性壳聚糖，有效物质含量99％
蛭石 昊乾牌，货号231，蛭石，二氧化硅含量36-42％
麦饭石 昊乾牌，货号72，饲料级麦饭石，二氧化硅含量56％
海泡石 昊乾牌，货号77，海泡石
异亮氨酸 南京松冠公司有效物含量99％食品级L-异亮氨酸
在无菌条件下将根瘤菌接种于LB液体培养基中(每升含5g酵母提取物，10g胰蛋白胨，10g NaCl)，28℃下110rpm振荡培养至对数生长期，离心后收集菌体，并用磷酸盐缓冲液反复洗涤3次，采用稀释平板计数测定细菌数量，根据菌落计数的方法控制含菌量为2.4×108个/mL，得到根瘤菌菌液。
在无菌条件下将沼泽红假单胞菌分别接种于LTSB液体培养基中(每升含胰蛋白胨17克，大豆花生胨3克，NaCl 5克，葡萄糖2.5克)，28℃下200rpm振荡培养至对数生长期，离心后收集菌体，并用磷酸盐缓冲液反复洗涤3次，采用稀释平板计数测定细菌数量，根据菌落计数的方法控制含菌量为2.4×108个/mL，得到沼泽红假单胞菌菌液。
在无菌条件下将荧光假单胞菌分别接种于LTSB液体培养基中(每升含胰蛋白胨17克，大豆花生胨3克，NaCl 5克，葡萄糖2.5克)，28℃下200rpm振荡培养至对数生长期，离心后收集菌体，并用磷酸盐缓冲液反复洗涤3次，采用稀释平板计数测定细菌数量，根据菌落计数的方法控制含菌量为2.4×108个/mL，得到荧光假单胞菌菌液。
实施例1
一种复合微生物制剂的制备方法，包括下述步骤：
(1)将前述制得的根瘤菌菌液、沼泽红假单胞菌菌液和荧光假单胞菌菌液，按质量比1:1:1，混合得到菌剂；
(2)将6重量份壳聚糖、6重量份蛭石、8重量份麦饭石、12重量份海泡石、5重量份异亮氨酸混合，室温搅拌均匀，得到载体；
(3)将菌剂加入到载体中，混合均匀，所述菌剂和载体的质量比为1:4，得到所述复合微生物制剂。
实施例2
一种复合微生物制剂的制备方法，包括下述步骤：
(1)将前述制得的根瘤菌菌液、沼泽红假单胞菌菌液和荧光假单胞菌菌液，按质量比1:5:5，混合得到菌剂；
(2)将6重量份壳聚糖、6重量份蛭石、8重量份麦饭石、12重量份海泡石、5重量份异亮氨酸混合，室温搅拌均匀，得到载体；
(3)将菌剂加入到载体中，混合均匀，所述菌剂和载体的质量比为1:4，得到所述复合微生物制剂。
实施例3
一种复合微生物制剂的制备方法，包括下述步骤：
(1)将前述制得的根瘤菌菌液、沼泽红假单胞菌菌液和荧光假单胞菌菌液，按质量比5:1:1，混合得到菌剂；
(2)将6重量份壳聚糖、6重量份蛭石、8重量份麦饭石、12重量份海泡石、5重量份异亮氨酸混合，室温搅拌均匀，得到载体；
(3)将菌剂加入到载体中，混合均匀，所述菌剂和载体的质量比为1:4，得到所述复合微生物制剂。
实施例4
一种复合微生物制剂的制备方法，包括下述步骤：
(1)将前述制得的根瘤菌菌液和沼泽红假单胞菌菌液，按质量比1:1，混合得到菌剂；
(2)将6重量份壳聚糖、6重量份蛭石、8重量份麦饭石、12重量份海泡石、5重量份异亮氨酸混合，室温搅拌均匀，得到载体；
(3)将菌剂加入到载体中，混合均匀，所述菌剂和载体的质量比为1:4，得到所述复合微生物制剂。
实施例5
一种复合微生物制剂的制备方法，包括下述步骤：
(1)将前述制得的根瘤菌菌液和荧光假单胞菌菌液，按质量比1:1，混合得到菌剂；
(2)将6重量份壳聚糖、6重量份蛭石、8重量份麦饭石、12重量份海泡石、5重量份异亮氨酸混合，室温搅拌均匀，得到载体；
(3)将菌剂加入到载体中，混合均匀，所述菌剂和载体的质量比为1:4，得到所述复合微生物制剂。
实施例6
一种复合微生物制剂的制备方法，包括下述步骤：
(1)将前述制得的沼泽红假单胞菌菌液和荧光假单胞菌菌液，按质量比1:1，混合得到菌剂；
(2)将6重量份壳聚糖、6重量份蛭石、8重量份麦饭石、12重量份海泡石、5重量份异亮氨酸混合，室温搅拌均匀，得到载体；
(3)将菌剂加入到载体中，混合均匀，所述菌剂和载体的质量比为1:4，得到所述复合微生物制剂。
实施例7
一种复合微生物制剂的制备方法，包括下述步骤：
(1)将6重量份壳聚糖、6重量份蛭石、8重量份麦饭石、12重量份海泡石、5重量份异亮氨酸混合，室温搅拌均匀，得到载体；
(2)将前述制得的根瘤菌菌液加入到载体中，混合均匀，所述根瘤菌菌液和载体的质量比为1:4，得到所述复合微生物制剂。
实施例8
一种复合微生物制剂的制备方法，包括下述步骤：
(1)将6重量份壳聚糖、6重量份蛭石、8重量份麦饭石、12重量份海泡石、5重量份异亮氨酸混合，室温搅拌均匀，得到载体；
(2)将前述制得的沼泽红假单胞菌菌液加入到载体中，混合均匀，所述沼泽红假单胞菌菌液和载体的质量比为1:4，得到所述复合微生物制剂。
实施例9
一种复合微生物制剂的制备方法，包括下述步骤：
(1)将6重量份壳聚糖、6重量份蛭石、8重量份麦饭石、12重量份海泡石、5重量份异亮氨酸混合，室温搅拌均匀，得到载体；
(2)将前述制得的荧光假单胞菌菌液加入到载体中，混合均匀，所述荧光假单胞菌菌液和载体的质量比为1:4，得到所述复合微生物制剂。
测试例---金属镍污染的修复试验
土壤样品采自标准试验田，理化性质如下：pH 7.2，有机质含量为44.16％，有效钾含量为22.47g/kg，全氮含量为3.02g/kg，全磷含量为0.94g/kg。经确认土壤未受重金属污染，在测试前，先将土壤经过2mm筛分并在连续三天内在100℃下灭菌1小时，以便消除其他因素的干扰。
测试例1：金属镍(Ni)污染的修复试验：
通过向土壤样品中加入NiSO4·6H2O溶液的方式，控制土壤样品中Ni(Ⅱ)初始浓度为500mg·kg-1；
将本发明的复合微生物制剂添加到土壤样品中，添加量为土壤样品总重量的1％；
25℃下，土壤样品震荡均匀，静置3天，并保持土壤水分含量为60％；
最后，将测试土壤样品中Ni(Ⅱ)的浓度并计算金属镍的去除率。
金属镍的去除率＝(Ni(Ⅱ)初始浓度-Ni(Ⅱ)的最终浓度)/Ni(Ⅱ)初始浓度×100％
表1复合微生物制剂除镍的测试结果
测试例2：金属镉(Cd)污染的修复试验：
通过向土壤样品中加入CdSO4·H2O溶液的方式，控制土壤样品中Cd(Ⅱ)初始浓度为500mg·kg-1；
将本发明的复合微生物制剂添加到土壤样品中，添加量为土壤样品总重量的1％；
25℃下，土壤样品震荡均匀，静置3天，并保持土壤水分含量为60％；
最后，将测试土壤样品中Cd(Ⅱ)的最终浓度并计算金属镉的去除率。
金属镉的去除率＝(Cd(Ⅱ)初始浓度-Cd(Ⅱ)的最终浓度)/Cd(Ⅱ)初始浓度×100％
表2复合微生物制剂除镉的测试结果
三种微生物联合使用可以结合它们的不同特性，协同作用，提高修复效果。根瘤菌和沼泽红假单胞菌可以共同吸附和沉淀重金属，荧光假单胞菌则能够还原和氧化重金属。此外，它们在生态系统中的不同作用可以共同促进土壤生态系统的恢复和健康发展。因此，联合使用这三种微生物是一种有效的方法，可用于修复重金属污染土壤等环境问题。
上述实施方式仅为本发明的优选实施方式，不能以此来限定本发明保护的范围，本领域的技术人员在本发明的基础上所做的任何非实质性的变化及替换均属于本发明所要求保护的范围。

Claims (9)

1.一种复合微生物制剂，由菌剂和载体组成；
所述菌剂为根瘤菌、沼泽红假单胞菌和荧光假单胞菌组成。
2.根据权利要求1所述的复合微生物制剂，其特征在于：所述菌剂由根瘤菌、沼泽红假单胞菌和荧光假单胞菌按质量比(1-5):(1-5):(1-5)组成。
3.根据权利要求1或2所述的复合微生物制剂，其特征在于：所述菌剂中根瘤菌浓度为(1.2-3.6)×108个/mL，沼泽红假单胞菌浓度为(1.2-3.6)×108个/mL，荧光假单胞菌浓度为(1.2-3.6)×108个/mL。
4.根据权利要求1或2或3所述的复合微生物制剂，其特征在于：所述载体，包括下述重量份原料：4-8份壳聚糖、2-10份蛭石、4-12份麦饭石、8-16份海泡石、2-8份异亮氨酸。
5.根据权利要求1或2或3所述的复合微生物制剂，其特征在于：所述菌剂和载体的质量比为1:(1-20)，进一步优选为1:(1-10)，再进一步优选为1:(2-6)。
6.根据权利要求1-5任一项所述的复合微生物制剂的制备方法，其特征在于，包括下述步骤：
(1)制备菌剂：将根瘤菌、沼泽红假单胞菌和荧光假单胞菌，按比例混合得到菌剂；
(2)制备载体：将壳聚糖、蛭石、麦饭石、海泡石和异亮氨酸按照上述重量份比例混合，室温搅拌均匀，得到所述载体；
(3)制备复合微生物制剂：将菌剂加入到载体中，混合均匀，得到所述复合微生物制剂。
7.根据权利要求1-5任一项所述的复合微生物制剂在水土环境修复中的应用。
8.根据权利要求7所述的复合微生物制剂在水土环境修复中的应用，其特征在于，所述水土环境为污水环境或土壤环境。
9.根据权利要求8所述的复合微生物制剂在水土环境修复中的应用，其特征在于，所述土壤环境中含有重金属。
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Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20100086304A (ko) * 2009-01-22 2010-07-30 경상대학교산학협력단 슈도모나스 플루오르센스 ｂｍ07 균주로부터 획득한 중금속흡착용 조성물
CN103555336A (zh) * 2013-10-31 2014-02-05 湖南泰谷生物科技股份有限公司 削减作物中镉含量的土壤调理剂及其制备方法和应用
CN104498410A (zh) * 2014-12-31 2015-04-08 西北农林科技大学 一种耐重金属根瘤菌及其应用
CN104542714A (zh) * 2014-12-26 2015-04-29 西北农林科技大学 根瘤菌Sinorhizobium meliloti CCNWSX0020的应用
CN106167774A (zh) * 2016-07-06 2016-11-30 四川省原子能研究院 根瘤菌Scot1305及其在促进植物修复土壤重金属污染中的应用
US20170020138A1 (en) * 2013-06-26 2017-01-26 Symbiota, Inc. Agricultural endophyte-plant compositions, and methods of use
CN111849501A (zh) * 2020-07-29 2020-10-30 盛世生态环境股份有限公司 一种用于修复土壤镍污染的土壤改良剂及其制备方法、使用方法
CN112725221A (zh) * 2020-12-15 2021-04-30 湘潭大学 一种荧光假单胞菌以及利用荧光假单胞菌制备异羟肟酸型铁载体的方法和应用
CN113732053A (zh) * 2021-10-13 2021-12-03 江苏景然生态建设集团有限公司 一种重金属土壤修复剂

Patent Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20100086304A (ko) * 2009-01-22 2010-07-30 경상대학교산학협력단 슈도모나스 플루오르센스 ｂｍ07 균주로부터 획득한 중금속흡착용 조성물
US20170020138A1 (en) * 2013-06-26 2017-01-26 Symbiota, Inc. Agricultural endophyte-plant compositions, and methods of use
CN103555336A (zh) * 2013-10-31 2014-02-05 湖南泰谷生物科技股份有限公司 削减作物中镉含量的土壤调理剂及其制备方法和应用
CN104542714A (zh) * 2014-12-26 2015-04-29 西北农林科技大学 根瘤菌Sinorhizobium meliloti CCNWSX0020的应用
CN104498410A (zh) * 2014-12-31 2015-04-08 西北农林科技大学 一种耐重金属根瘤菌及其应用
CN106167774A (zh) * 2016-07-06 2016-11-30 四川省原子能研究院 根瘤菌Scot1305及其在促进植物修复土壤重金属污染中的应用
CN111849501A (zh) * 2020-07-29 2020-10-30 盛世生态环境股份有限公司 一种用于修复土壤镍污染的土壤改良剂及其制备方法、使用方法
CN112725221A (zh) * 2020-12-15 2021-04-30 湘潭大学 一种荧光假单胞菌以及利用荧光假单胞菌制备异羟肟酸型铁载体的方法和应用
CN113732053A (zh) * 2021-10-13 2021-12-03 江苏景然生态建设集团有限公司 一种重金属土壤修复剂

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
VICTOR V. ATUCHIN ET AL.,: "Microorganisms for Bioremediation of Soils Contaminated with Heavy Metals", MICROORGANISMS, vol. 11, no. 864, pages 1 - 19 *
晋银佳等: "荧光假单胞菌产铁载体对油麦菜吸收砂基和水基中镉的影响", 环境工程学报, vol. 10, no. 1, pages 415 - 420 *

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