CN116536212A - 一株沙雷氏菌awh-ns6及其在溶磷和促进植物生长中的应用 - Google Patents

一株沙雷氏菌awh-ns6及其在溶磷和促进植物生长中的应用 Download PDF

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Abstract

本发明涉及生物技术领域，具体涉及一株沙雷氏菌AWH‑NS6及其在溶磷和促进植物生长中的应用，所述的沙雷氏菌AWH‑NS6于2023年4月18日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:M2023545，其分离自磷匮缺荒漠环境优势植物梭梭根际，其具有耐盐、嗜碱和耐高温的效果，并且具有较好的溶解无机磷的能力，最高溶磷量为480.07μg·mL‑1，发酵液的pH值降至4.43，验证了难溶性磷的溶解与pH值密切相关，且呈负相关，植物接种实验表明，该菌株可显著提高“紫花苜蓿”的株高、根长和生物量积累，说明沙雷氏菌AWH‑NS6是一株具有生境特点的植物根际促生菌，具有广阔的应用前景。

Description

一株沙雷氏菌AWH-NS6及其在溶磷和促进植物生长中的应用
技术领域
本发明涉及生物技术领域，具体涉及一株沙雷氏菌AWH-NS6及其在溶磷和促进植物生长中的应用。
背景技术
磷作为所有生命体必需的大量元素之一，在农业生产系统中必不可缺。据调查，地球上大多数土壤的磷含量很低(全球土壤平均磷含量约为0.04％)，其中约一半是农业用地，而我国约有74％的农业用地缺磷；此外，土壤中还有一大部分磷或固着于土壤颗粒表面，或以有机磷化合物的形式固定在土壤中，很难被植物吸收利用。因此，磷已经成为限制作物生长、产量和品质的关键因子之一。同时，自然界中用于生产磷肥的磷酸盐矿石是不可再生资源，进一步加剧了磷的匮缺。另一方面，农业生产中磷肥的不当施用，造成大量无法利用的磷渗入地下和地表水，扰乱自然生态系统的营养平衡，导致生物多样性和生态环境安全受到严重威胁。因此，积极寻求植物高效吸收和利用磷的策略迫在眉睫。
溶磷细菌(PSB)是土壤生态系统的重要组成部分，它的生命活动直接或间接地影响着土壤健康。PSB作为一类优良的根际促生菌，能够通过增加难溶性磷的溶解，提高土壤有效磷含量，从而易于为植物吸收利用，或通过分泌IAA和生物固氮等其他方式促进植物的生长。PSB主要通过分泌有机酸来溶解难溶性磷酸盐，产生的有机酸类物质通过羟基和羧基螯合与磷酸盐结合的阳离子，或通过释放H+降低pH，最终提供可溶性的磷酸盐供有机体生长所需。因此，在PSB发挥功能的过程中，会伴随着pH值的下降，与菌株自身的溶磷能力密切相关。针对溶磷菌，本领域技术人员做了诸多研究，例如发明专利CN112280702B公开了一种溶磷菌、溶磷菌剂、生物菌肥及应用，所述的溶磷菌为伯克霍尔德菌；发明专利CN105349453B公开了一株嗜线虫沙雷氏菌，所述的菌株对蛋白质具有很好的降解效果和具有很好的溶磷效果，但是其不具有耐盐、嗜碱和耐高温的效果。
位于内蒙古西部的巴丹吉林沙漠，是中国第二大沙漠。该沙漠气候极为干旱，降水稀少，年均降水量约76.9mm，并且蒸发量是降水量的40～80倍。夏季高温酷热，冬、春季大风强劲，生长着霸王、梭梭和骆驼刺等防风固沙树种。梭梭作为该荒漠植物群系中的优势建群种，在长期进化过程中形成了超强的抗逆能力和耐贫瘠特性。梭梭拥有极发达的根系，不仅有利于寻找地层深处的水源，同时也有利于吸收营养，还为极端荒漠环境中微生物的生存营造了一个天然栖息地。关于该生境中的PSB资源的挖掘和其与植物互作方面的相关研究鲜见报道。
发明人在研究过程中意外的获得了一株具有较强溶磷效果的沙雷氏菌AWH-NS6，所述的沙雷氏菌AWH-NS6可生长温度范围为4～40℃、可生长pH为4.0～11.0、能够耐受6.5％(w/v)的NaCl，说明其具有耐盐、嗜碱和耐高温的效果。所述的沙雷氏菌AWH-NS6的固氮酶活性为30.57±1.06nmol C2H4·h-1·mL-1，分泌IAA的量为15.92±0.26μg·mL-1，可显著提高紫花苜蓿的株高、根长和生物量积累，说明其具有促进植物生长的效果。接种沙雷氏菌AWH-NS6的紫花苜蓿，其根系活力、叶绿素含量和净光合速率也得到显著增加，可知接种沙雷氏菌AWH-NS6能显著促进紫花苜蓿根系发育以及提升其光合作用能力，最终表现为植物的生物量积累，具有促进植物生长的效果，具有广阔的应用前景。
发明内容
针对上述技术问题，本发明的首要目的是提供一株具有溶磷效果的沙雷氏菌(Serratiasp.)AWH-NS6，所述的沙雷氏菌AWH-NS6于2023年4月18日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:M2023545，保藏地址为：中国武汉·武汉大学，邮编430072，电话：027-68754052。
本发明的第二目的是提供一种菌剂，所述的菌剂含有所述的沙雷氏菌AWH-NS6。
本发明的第三目的是提供一种植物肥料，含有所述的沙雷氏菌AWH-NS6或沙雷氏菌AWH-NS6发酵液或其发酵无菌滤液。
本发明的第四目的是提供一种土壤生态环境调节剂，含有所述的沙雷氏菌AWH-NS6或沙雷氏菌AWH-NS6发酵液或其发酵无菌滤液。
本发明的第五目的是提供所述的沙雷氏菌AWH-NS6在活化土壤中难溶性磷的应用。
本发明的第六目的是提供所述的沙雷氏菌AWH-NS6在提升磷肥利用率中的应用。
本发明的第七目的是提供如所述的沙雷氏菌AWH-NS6或所述的菌剂在防止由施用磷肥引起的土壤板结、酸化、有害物质积累中的应用。
本发明的第八目的是提供所述的沙雷氏菌AWH-NS6或其菌株发酵液或其发酵无菌滤液在作为或制备植物促生剂或促进植物生长中的应用。
本发明的第九目的是提供所述的沙雷氏菌AWH-NS6或所述的菌剂在制备植物肥料和/或土壤生态环境调节剂中的应用。
本发明的第十目的是提供所述的沙雷氏菌AWH-NS6在制备用于生物修复盐碱地的微生物菌剂中的应用。
本发明的第十一目的是提供如所述的沙雷氏菌AWH-NS6作为耐热功能和/或耐低温功能菌株的应用。
本发明的第十二目的是提供所述的沙雷氏菌AWH-NS6作为耐酸功能和/或耐碱功能菌株的应用。
本发明的有益效果是：(1)本发明提供了一株沙雷氏菌AWH-NS6，所述的沙雷氏菌AWH-NS6发酵液具有较好的溶解无机磷的能力，最高的溶磷含量为480.07μg·mL-1，发酵液的pH值降至4.43，验证了难溶性磷的溶解与pH值密切相关，且呈负相关。
(2)所述的沙雷氏菌AWH-NS6可生长温度范围为4～40℃、可生长pH为4.0～11.0、能够耐受6.5％(w/v)的NaCl，说明其具有耐盐、嗜碱和耐高温的效果。
(3)所述的沙雷氏菌AWH-NS6的固氮酶活性为30.57±1.06nmol C2H4·h-1·mL-1，分泌IAA的量为15.92±0.26μg·mL-1，可显著提高紫花苜蓿的株高、根长和生物量积累，说明其具有促进植物生长的效果。
(4)接种沙雷氏菌AWH-NS6的紫花苜蓿，其根系活力、叶绿素含量和净光合速率也得到显著增加，可知接种沙雷氏菌AWH-NS6能显著促进紫花苜蓿根系发育以及提升其光合作用能力，最终表现为植物的生物量积累，具有促进植物生长的效果，具有广阔的应用前景。
附图说明
图1菌株分离及染色结果
注：A：在NBRIP平板上产生的透明圈；B：革兰氏染色结果
图2菌株的培养特性观察。
注：A：可生长培养基；B：可生长温度；C：可生长pH值和D：耐盐性
图3基于16S rRNA基因序列的系统进化树。
注：分支节点上的值(>50％)是基于1000次重复；黑色圆圈表示在最大似然树和最大简约树中也形成了相应的节点；标尺，每个位点有0.10个核苷酸替换。
图4沙雷氏菌AWH-NS6在NBRIP液体培养基中的溶磷能力和pH值随培养时间的动态变化。
图5沙雷氏菌AWH-NS6对紫花苜蓿生长的影响。
注：A和B为植物照片；C：株高；D：根长(平均值±标准误，n＝6)。
图6接种沙雷氏菌AWH-NS6对紫花苜蓿幼苗生物量积累的影响。
注：A：地上部鲜重；B：地上部干重；C：地下部鲜重；D：地下部根干重(平均值±标准误，n＝6)。
图7沙雷氏菌AWH-NS6对紫花苜蓿生长的影响注：A：根系活力；B：净光合速率和C：叶绿素含量(平均值±标准误，n＝6)。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明所请求保护的技术方案进行说明，应当说明的是，本发明的保护范围并不受以下实施例的限制。
下述实施例中所涉及的仪器、试剂、材料等，若无特别说明，均为现有技术中已有的常规仪器、试剂、材料等，可通过正规商业途径获得。下述实施例中所涉及的实验方法，检测方法等，若无特别说明，均为现有技术中已有的常规实验方法，检测方法等。
以下实施例中，利用Excel 2010整理数据，SPSS 19.0进行单因素方差分析(P＜0.05)及差异显著性检验，并采用Duncan法进行多重比较。
以下实施例中所述的无机磷酸盐固体培养基(National Botanical ResearchInstitute Phosphorus，NBRIP)，配方为：葡萄糖10g·L-1，磷酸钙5g·L-1，氯化镁5g·L-1，七水硫酸镁0.25g·L-1，氯化钾0.2g·L-1，硫酸铵0.1g·L-1，琼脂15g·L-1，pH值7.0±0.2。
紫花苜蓿(Medicago sativa L.)作为我国西北地区的一种优质多年生豆科牧草，因其干草产量高、适口性好和易消化等特点，饲喂牲畜后，能为人类提供高品质的肉和奶制品等。可见，优质紫花苜蓿的培育和生产对于我国西北地区草牧业发展尤为重要。因此，本研究使用选择性培养基，对巴丹吉林沙漠梭梭根际土壤中的菌株进行分离，分析评价从上述土壤所分离的优良菌株的分类学地位、生物学特性和全基因数据。进一步采用盆栽试验研究其对紫花苜蓿生长的影响，以期为研发应用于牧草栽培的微生物菌肥提供理论依据和菌种资源。
实施例一、菌株的分离及鉴定
1.土样采集及菌株的分离
供试土样采集自内蒙古阿拉善右旗巴丹吉林沙漠梭梭根际(40°24′3.81″N，103°25′57.7″E，海拔1283m)，采集土层深度为10cm的土样。将采集的土样放置于无菌离心管中，并于4℃便携式小冰箱中保存，带回实验室立即进行溶磷细菌的分离。称取10g土样于100mL0.9％氯化钠溶液的锥形瓶中，置于25℃、150r·min-1摇床中振荡30min，然后静置1h，将土悬液上清缓慢倒入无菌离心管中，5000rpm离心8min。离心完成后弃除大部分上清液，重悬剩余部分，吸取10mL重悬液至灭菌离心管，由此得到10-1的土悬液。取10-1的土悬液1mL至9mL 0.9％的无菌氯化钠溶液得到10-2的土悬液，依此逐级稀释至10-6。然后，分别取100μL稀释后的溶液涂布于无机磷酸盐固体培养基(NBRIP)。置于28℃培养箱中培养5天。待培养基上菌落形态清楚可见，挑取在培养基上产生明显透明圈的单菌落于NBRIP液体培养基中富集培养，并收集菌液，再次划线纯化。以菌株在NBRIP平板上是否产生明显、清晰的透明圈为筛选依据，从梭梭根际土壤中筛选到1株能够产生明显透明圈的菌株，如图1A所示，将其命名为AWH-NS6，加入甘油保存于-80℃超低温冰箱。
2.菌株的形态和生理生化特性分析
使用海博生物革兰氏染色液试剂盒(HB8278)对菌株进行革兰氏染色。用海博生物氧化酶试纸(HB2100)和3％(v/v)H2O2起泡法测定菌株的氧化酶活性和过氧化氢酶活性。采用平板划线法将菌株接种于不同的固体培养基(R2A、TSA、LB、MA、TY、PYG、ISP2和NA)中，观察其生长状况。将菌株接种到最适生长培养基中，放置于不同温度(4、10、15、20、25、28、30、35、40和42℃)的培养箱中，测定菌株的可生长温度范围。配制不同pH值的最适液体培养基，将菌株接种于不同pH值的培养基中，测定菌株生长的最适pH值。将最适液体培养基调至最适pH值，进一步配制成不同的NaCl(0～7％)浓度梯度，并接种菌液。在28℃、180rpm·min-1的摇床中培养，测定菌株的耐盐性(Li等，2022)。使用API 20NE、API ZYM和API 50CH三种API细菌鉴定系统(BioMérieux)对菌株的生化特征进行测定，具体操作方法见韩庆庆(贝莱斯芽孢杆菌GB03调控苜蓿结瘤固氮的机制初探，2022)第二章中关于使用API系统分析菌株GB03和Sm1021的生化特性。
纯化初筛获得的菌株，并对其生理生化特性进行分析。形态学分析表明菌株AWH-NS6为革兰氏阴性细菌(图1B)。菌株AWH-NS6在LB、TSA、R2A、ISP2、MA、NA、PYG和TY培养基上均能良好的生长(图2A)。菌株AWH-NS6在LB平板上培养1天时，菌落呈白色、表面光滑的圆形，直径约0.5～1.5mm。经实验观察，菌株AWH-NS6的可生长温度范围为4～40℃(图2B)、可生长pH为4.0～11.0(图2C)、能够耐受6.5％(w/v)的NaCl(图2D)。菌株AWH-NS6对氧化酶呈阴性反应，对过氧化氢酶呈阳性反应。
从表1中可以发现，在20NE检测中，菌株AWH-NS6对七叶灵水解，葡萄糖同化和柠檬酸同化等13个反应呈阳性。在酶活反应中，菌株AWH-NS6对碱性磷酸酶，亮氨酸芳氨酶和缬氨酸芳氨酶等12个反应呈阳性，对α-半乳糖甙酶反应呈弱阳性。在糖类氧化产酸反应中，菌株AWH-NS6对鼠李糖，α-甲基-D-葡萄糖甙和海藻糖等26个反应呈阳性。这些结果表明菌株AWH-NS6能够利用的不同碳水化合物和氨基酸的类型及其特定酶活性。
表1菌株AWH-NS6的生理生化特征
注：阳性结果用+表示，阴性结果用-表示，弱阳性结果用(+)表示。
上述表格中的外框或者下划线是实验中不同孔管的要求，加外边框的孔要求将该管加满或稍凸出，下面画横线的要求该管用矿物油覆盖，既没有下划线也没有框的就只需要把管加满。
3.菌株的分子生物学鉴定
菌株基因组DNA的提取方法按照细菌总DNA提取试剂盒(TianGen，北京)的操作说明进行。
使用细菌通用引物27F：5’-AGAGTTTGATCCT GGCTCAG-3'和1492R：5′-GGTTACCTTGTTACGACTT-3’扩增菌株16S rRNA基因序列。
PCR扩增体系：Taq预混酶(5U·μL-1)10μL，正向引物27F(10pmol·μL-1)0.5μL，反向引物1492R(10pmol·μL-1)0.5μL，模板(细菌基因组DNA)0.5μL，去离子水8.5μL。
扩增条件：94℃预变性3min，94℃变性30s，55℃复性30s，72℃延伸90s，进行30个循环，最后72℃延伸10min。
然后通过1％琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物，PCR产物送北京奥科鼎盛生物技术有限公司测序。通过EzTaxon(https://www.ezbiocloud.net/apps)和Genbank(https:// www.ncbi.nlm.nih.gov/genbank/)在线数据库比对分析上述测序得到的16S rRNA基因序列。
使用MEGA7.0软件构建Neighbor-joining系统进化树，同时使用Kimura的双参数模型计算进化距离，用bootstrap进行检验，并重复1000次。从菌株AWH-NS6的全基因组中注释得到大小为1529bp完整的16S rRNA基因序列。进一步构建了基于16S rRNA基因序列的最大似然树，分析结果表明菌株AWH-NS6属于沙雷氏菌属，且与菌株Serratia inhibens S40T亲缘关系最近，如图3所示。所述的沙雷氏菌的拉丁名为Serratia sp.，将其命名为沙雷氏菌(Serratia sp.)AWH-NS6。
将所述的沙雷氏菌AWH-NS6于2023年4月18日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:M2023545，保藏地址为：中国武汉·武汉大学，邮编430072，电话：027-68754052。
以下实施例中，将所述的沙雷氏菌(Serratia sp.)AWH-NS6简写为沙雷氏菌AWH-NS6。
实施例二、沙雷氏菌AWH-NS6的促生能力评估
1.沙雷氏菌AWH-NS6的促生特性分析
采用钼锑抗比色法测定沙雷氏菌AWH-NS6培养液中的可溶性磷含量。参照姚拓等(2004)方法，配制试剂、制作标准曲线，然后测定沙雷氏菌AWH-NS6培养液中的可溶性磷含量。用酸度计(Sartorius-PB-21)进行培养液pH的测定。采用乙炔还原法测定沙雷氏菌AWH-NS6的固氮酶活性(韩庆庆，2022)。用比色法测定菌株分泌的IAA含量。参照张英(2013)的方法，配制试剂、制作标准曲线，然后测定沙雷氏菌AWH-NS6培养液中的IAA含量，以确定沙雷氏菌AWH-NS6产IAA能力的强弱。
2.沙雷氏菌AWH-NS6的促生特性分析
从表2中可以发现，沙雷氏菌AWH-NS6的固氮酶活性为30.57±1.06nmol C2H4·h-1·mL-1，分泌IAA的量为15.92±0.26μg·mL-1。沙雷氏菌AWH-NS6的溶磷能力随培养时间的动态变化如图4所示。沙雷氏菌AWH-NS6发酵液中的可溶性磷含量在48h内增长较快，96h时达到最大值，其值为480.07μg·mL-1。沙雷氏菌AWH-NS6在溶解难溶性无机磷酸盐的过程中，会伴随发酵液pH值的下降。沙雷氏菌AWH-NS6发酵液的pH值在24h内下降速度最快，pH值降低了2.93，之后逐渐趋于稳定。但随着培养时间的增加，沙雷氏菌AWH-NS6的pH值缓慢升高。但在144h后，沙雷氏菌AWH-NS6发酵液的pH值略有下降，在192h时，沙雷氏菌AWH-NS6发酵液的pH值较144h降低了0.05。
表2菌株AWH-NS6的生理生化特征
实施例四、沙雷氏菌AWH-NS6对紫花苜蓿生长的影响
选取大肠杆菌菌株(Escherichia coli DH5α，兰州大学草地农业科技学院牧草逆境与遗传改良研究所赵祺副教授提供)为阴性对照，贝莱斯芽孢杆菌菌株(Bacillusvelezensis GB03，兰州大学草地农业科技学院牧草逆境与遗传改良研究所张金林教授提供)为阳性对照，综合比较分析接种菌株对植物生长的影响。精选一批紫花苜蓿种子(甘农3号)于50mL的锥形瓶中，用浓硫酸浸泡5min，弃上清液，无菌水冲洗4～5次。然后用4％(w/v)的次氯酸钠进行表面消毒3min，期间轻轻摇动锥形瓶，弃上清，用无菌水充分冲洗10次。置于4℃冰箱春化24h后平铺于培养皿中进行萌发。种子种植和生长均在兰州大学草地农业生态系统国家重点实验室植物生长室进行，培养条件如下：温度为28±2/23±2℃(白天/黑夜)，光照周期为14h/10h(光照/黑暗)，光强度为800μmol·m-2·s-1，相对湿度为70±10％。待种子长出子叶后，挑取萌发整齐的种子移入灭菌蛭石中。幼苗生长7天后进行间苗，每盆留1株长势一致的幼苗，并在每株幼苗茎基部接种1mL OD600＝0.8的菌悬液，同时接种等量的无菌水作为空白对照。幼苗生长14天后进行第二次接菌，接种方法与第一次接菌保持一致。接菌30天后取样，用刻度尺测量株高和根长；用称重法测定植株鲜干重；叶绿素含量和根系活力测定方法参考李慧萍等(2022)已发表的文章中关于祁连山云杉林根际土壤PSB菌株对白三叶生长的影响中所使用的分析方法。
1.沙雷氏菌AWH-NS6对紫花苜蓿株高和根长的影响
在植物接种试验中，我们选取大肠杆菌菌株(Escherichia coli DH5α，对植物无明显促生效果)为阴性对照，贝莱斯芽孢杆菌菌株(Bacillus velezensis GB03，对植物具有显著促生作用的商业化模式菌株)为阳性对照，综合比较分析了上述沙雷氏菌AWH-NS6对植物生长效应的影响。与空白对照相比，接种沙雷氏菌AWH-NS6后，幼苗株高和根长分别显著增加了99.13％和43.80％(P＜0.05)(图5C，D)。与大肠杆菌DH5α相比，接种沙雷氏菌AWH-NS6后，幼苗株高和根长分别显著增加了86.94％和52.70％(P＜0.05)(图5C，D)。与接种菌株贝莱斯芽孢杆菌GB03相比，接种沙雷氏菌AWH-NS6的紫花苜蓿株高和根长增加差异不显著(P＜0.05)(图5C，D)，表明沙雷氏菌AWH-NS6能够显著的促进紫花苜蓿的株高和根长。
2.沙雷氏菌AWH-NS6对紫花苜蓿生物量积累的影响
如图6所示，主要展示了本研究中筛选的沙雷氏菌AWH-NS6对紫花苜蓿生物量积累的影响。与空白对照和阴性对照相比，接种菌株LT-4紫花苜蓿的生物量积累增加效果显著(P＜0.05)(图6)。与阳性对照贝莱斯芽孢杆菌菌株GB03相比，接种沙雷氏菌AWH-NS6的紫花苜蓿株高和根长增加差异不显著(P＜0.05)(图6)。接种沙雷氏菌AWH-NS6后紫花苜蓿地上部鲜重分别是空白对照和大肠杆菌DH5α的2.83和2.67倍(图6A)，地上部干重分别增加了212.01％和126.70％(图6B)；地下部鲜重分别是空白对照和大肠杆菌DH5α的3.67和3.08倍(图6C)，地下部干重分别增加了207.90％和89.50％(图6D)，表明沙雷氏菌AWH-NS6能够显著促进紫花苜蓿生物量的积累。
3.沙雷氏菌AWH-NS6对紫花苜蓿根系活力和光合能力的影响
接种沙雷氏菌AWH-NS6菌株对紫花苜蓿根系活力和光合能力的影响如图7所示。接种沙雷氏菌AWH-NS6后，紫花苜蓿根系活力分别是空白对照和阴性对照的3.49和2.24倍(图7A)。经沙雷氏菌AWH-NS6接种处理的紫花苜蓿，叶绿素a含量分别是空白对照和阴性对照的1.43和1.46倍(P＜0.05)，叶绿素b含量分别是空白对照和阴性对照1.73和1.68倍(P＜0.05)(图7B)。进一步分析发现，与空白对照以及阴性对照相比，接种沙雷氏菌AWH-NS6后，紫花苜蓿的净光合速率分别显著增加了136.63％和89.84％(P＜0.05)(图7C)。且沙雷氏菌AWH-NS6对紫花苜蓿叶绿素a，叶绿素b含量和净光合速率的增加效果与阳性对照GB03相比差异不显著(P＜0.05)，表明沙雷氏菌AWH-NS6能够显著促进紫花苜蓿的根系活力和光合能力。
综上所述，(1)本发明提供了一株沙雷氏菌AWH-NS6，所述的沙雷氏菌AWH-NS6发酵液具有较好的溶解无机磷的能力，最高的溶磷含量为480.07μg·mL-1，发酵液的pH值降至4.43，验证了难溶性磷的溶解与pH值密切相关，且呈负相关。
(2)所述的沙雷氏菌AWH-NS6可生长温度范围为4～40℃、可生长pH为4.0～11.0、能够耐受6.5％(w/v)的NaCl，说明其具有耐盐、嗜碱和耐高温的效果。
(3)所述的沙雷氏菌AWH-NS6的固氮酶活性为30.57±1.06nmol C2H4·h-1·mL-1，分泌IAA的量为15.92±0.26μg·mL-1，可显著提高紫花苜蓿的株高、根长和生物量积累，说明其具有促进植物生长的效果。
(4)接种沙雷氏菌AWH-NS6的紫花苜蓿，其根系活力、叶绿素含量和净光合速率也得到显著增加，可知接种沙雷氏菌AWH-NS6能显著促进紫花苜蓿根系发育以及提升其光合作用能力，最终表现为植物的生物量积累，具有促进植物生长的效果，具有广阔的应用前景。

Claims (10)

1.一株具有溶磷效果的沙雷氏菌(Serratiasp.)AWH-NS6，其特征在于，所述的沙雷氏菌AWH-NS6于2023年4月18日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCCNO:M2023545。
2.一种菌剂，其特征在于，所述的菌剂含有权利要求1所述的沙雷氏菌AWH-NS6。
3.一种植物肥料，其特征在于，含有权利要求1所述的沙雷氏菌AWH-NS6或沙雷氏菌AWH-NS6发酵液或其发酵无菌滤液。
4.一种土壤生态环境调节剂，其特征在于，含有权利要求1所述的沙雷氏菌AWH-NS6或沙雷氏菌AWH-NS6发酵液或其发酵无菌滤液。
5.如权利要求1所述的沙雷氏菌AWH-NS6在活化土壤中难溶性磷的应用。
6.如权利要求1所述的沙雷氏菌AWH-NS6或其菌株发酵液或其发酵无菌滤液在作为或制备植物促生剂或促进植物生长中的应用。
7.如权利要求1所述的沙雷氏菌AWH-NS6或权利要求2所述的菌剂在提升磷肥利用率中的应用。
8.如权利要求1所述的沙雷氏菌AWH-NS6或权利要求2所述的菌剂在防止由施用磷肥引起的土壤板结、酸化、有害物质积累中的应用。
9.如权利要求1所述的沙雷氏菌AWH-NS6或权利要求2所述的菌剂在制备植物肥料和/或土壤生态环境调节剂中的应用。
10.如权利要求1所述的沙雷氏菌AWH-NS6在制备用于生物修复盐碱地的微生物菌剂中的应用。
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