CN116458427B - 一种天门冬瓶内生根结薯的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及育苗技术领域，特别涉及一种天门冬瓶内生根结薯的方法，所述方法包括(1)继代培养、(2)生根培养和(3)移栽。通过本申请的方法提高了天门冬组培苗移栽的成活率，且经过所述的生根结薯方法，还实现了移栽大田后可提早结薯，提高产量，缩短生长期。
Description
【技术领域】
本发明涉及育苗技术领域，特别涉及一种天门冬瓶内生根结薯的方法。
【背景技术】
天门冬为百合科植物。又名天冬。性寒，味甘，微苦。具有养阴清热，润肺滋肾的功效。用于治阴虚发热、咳嗽吐血、肺痈、咽喉肿痛、消渴、便秘等病症。天门冬块根含淀粉33％，蔗糖4％及其他多种营养成分。
可见，天门冬是一种十分珍贵的中药资源，其营养丰富，且药用价值高。野生天门冬经长期采挖资源频临灭绝，因此，人们开始对天门冬进行人工栽培；目前，天门冬主要靠种子繁殖和分株繁殖：种子繁殖一般是在春季或秋季起畦，畦面碎好土后均匀撒播种子，适时淋水，20天后陆陆续续发芽，待苗长至高30cm以上且地下结小薯3个以上即可移栽大田种植；2.分株繁殖是选取根头大、芽头粗壮的健壮母株，将每株至少分成3簇，每簇带芽头2-5个，带有3个以上的小块根薯，切口要小，并抹上石灰以防感染，摊晾1天后种植，栽培方法同育苗后的移栽。但是，种子繁殖受天气影响较大，发芽率低，出苗时间长、苗不整齐；分株繁殖的繁殖系数低，每株只能分得3-5株。目前还提出了组织培养繁殖的方法，能有效克服种子繁殖和分株繁殖的缺点，但也存在“生根率不高”问题，直接影响到大田种植时的移栽成活率和结薯膨大时间。
基于此，本申请提出了一种天门冬瓶内生根结薯的方法，以解决上述问题。
【发明内容】
鉴于上述内容，有必要提供一种天门冬瓶内生根结薯的方法，该方法提高了组培苗移栽的成活率，且经过所述的生根结薯方法，还实现了移栽大田后可提早结薯，提高产量，缩短生长期。
为达到上述目的，本发明所采用的技术方案是：
一种天门冬瓶内生根结薯的方法，所述方法包括如下步骤：
(1)继代培养：将天门冬单芽接入继代培养基中进行增殖、优化培养；
(2)生根培养：选取经继代培养后，带芽4-6个的丛芽，转接到生根培养基内进行生根培养；
其中，所述生根培养基以MS为基础培养基，还添加以下质量浓度的组分：蔗糖30g/L、琼脂4g/L、IBA 1.0mg/L、NAA 1.5mg/L和ABT 1.0mg/L；
其中，上述的ABT溶液的配制具体为：量取ABT1.0mg溶解于1L的无菌水中，配制成浓度1.0mg/l的ABT溶液备用(注：ABT为北京索莱宝科技有限公司生产R8240生根粉)；
(3)移栽：将经过步骤(2)生根培养后的植株移栽至大田中，并进行常规的水肥管理。
进一步的，所述步骤(1)中的继代培养基以MS为基础培养基，还添加以下质量浓度的组分：蔗糖30g/L、琼脂4g/L、6-BA 0.5mg/L、NAA0.1mg/L和蛋白胨200mg/L。
其中，上述的蛋白胨是北京奥博星生物技术有限责任公司生产的干燥粉末状的蛋白胨。
本申请的继代培养基和生根培养基均需要经过121℃高温高压灭菌20min后得到。
进一步的，所述步骤(2)的生根培养基中还添加有质量浓度为10％的香蕉汁。
进一步的，所述香蕉汁通过以下方法得到：采集成熟香蕉果实，剥除外皮后取果肉，将果肉与水打成汁，得到香蕉汁备用。
进一步的，所述继代培养基和所述生根培养基的pH均为5.8。
进一步的，所述继代培养基和所述生根培养基的条件均为：温度23-27℃，光照2500-3000lx，光照时间10h/d。
进一步的，所述继代培养的天数为：25-30d。
进一步的，所述生根培养的天数为：25-36d。
本发明至少具有如下有益效果：
本申请通过继代培养和生根培养的结合，有效提高了组培苗的移栽成活率，其中，继代培养首先选用单芽接入继代培养基中，经培养得到带芽4-6个的丛芽，接着，经过生根培养基进行培养，经试验发现，采用丛芽和单芽转接生根相比，虽然生根率相差不大，但是丛芽转接生根培养能够明显缩短生根所需时间，提高生根效率；此外，申请人还发现，生根培养过程中，在生根培养基中加入10％的自制香蕉汁，能够大幅度提升生根率和结薯率，从而实现了移栽大田后可提早结薯，提高产量，缩短生长期。
【附图说明】
图1为试验二中，CK1、J1、J2和J3几组培养基对天门冬继代增殖情况对比图；
图2-3为试验三中，CK2组和S3组的生根结薯情况对比图。
【具体实施方式】
为使本发明的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂，下面对本发明的具体实施方式做详细的说明。在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本发明。但是本发明能够以很多不同于在此描述的其它方式来实施，本领域技术人员可以在不违背本发明内涵的情况下做类似改进，因此本发明不受下面公开的具体实施的限制。
实施例1：
本实施例为天门冬瓶内生根结薯的方法，所述方法包括如下步骤：
(1)继代培养：取天门冬单芽接入继代培养基中进行增殖、优化培养，培养天数为25d；其中，继代培养基以MS为基础培养基，还添加以下质量浓度的组分：蔗糖30g/L、琼脂4g/L、6-BA0.5mg/L、NAA0.1mg/L和蛋白胨200mg/L；
(2)生根培养：选取经继代培养后，带芽4个的丛芽，转接到生根培养基内进行生根培养，培养天数为25d；其中，所述生根培养基以MS为基础培养基，还添加以下质量浓度的组分：蔗糖30g/L、琼脂4g/L、IBA 1.0mg/L、NAA 1.5mg/L、ABT 1.0mg/L和10％香蕉汁；所述香蕉汁通过以下方法得到：采集成熟香蕉果实，剥除外皮后取果肉，将果肉与水打成汁，得到香蕉汁备用；
上述的ABT溶液的配制具体为：量取ABT1.0mg溶解于1L的无菌水中，配制成浓度1.0mg/l的ABT溶液备用(注：ABT为北京索莱宝科技有限公司生产R8240生根粉)；
(3)移栽：将经过步骤(2)生根培养后的植株移栽至大田中，并进行常规的水肥管理。
所述继代培养基和所述生根培养基的pH均为5.8。所述继代培养基和所述生根培养基的条件均为：温度25℃，光照2600lx，光照时间10h/d。
实施例2：
本实施例为天门冬瓶内生根结薯的方法，所述方法包括如下步骤：
(1)继代培养：取天门冬单芽接入继代培养基中进行增殖、优化培养，培养天数为30d；其中，继代培养基以MS为基础培养基，还添加以下质量浓度的组分：蔗糖30g/L、琼脂4g/L、6-BA0.5mg/L、NAA0.1mg/L和蛋白胨200mg/L；
(2)生根培养：选取经继代培养后，带芽5个的丛芽，转接到生根培养基内进行生根培养，培养天数为36d；其中，所述生根培养基以MS为基础培养基，还添加以下质量浓度的组分：蔗糖30g/L、琼脂4g/L、IBA 1.0mg/L、NAA 1.5mg/L、ABT 1.0mg/L和10％香蕉汁；所述香蕉汁通过以下方法得到：采集成熟香蕉果实，剥除外皮后取果肉，将果肉与水打成汁，得到香蕉汁备用；
上述的ABT溶液的配制具体为：量取ABT1.0mg溶解于1L的无菌水中，配制成浓度1.0mg/l的ABT溶液备用(注：ABT为北京索莱宝科技有限公司生产R8240生根粉)；
(3)移栽：将经过步骤(2)生根培养后的植株移栽至大田中，并进行常规的水肥管理。
所述继代培养基和所述生根培养基的pH均为5.8。所述继代培养基和所述生根培养基的条件均为：温度23℃，光照2500lx，光照时间10h/d。
效果验证：
为了说明本申请的效果，申请人做如下试验：
试验一：比较不同继代培养基的培养效果
本试验比较不同继代培养基的处理效果，采用实施例1的方式进行继代培养，各组除了继代培养基不同之外，其他方式完全相同，所述的继代培养基处理各组对应编号，如下表1(其中，J1为实施例1所述的继代培养基)：
表1继代培养基处理及对应编号
经过上述继代培养基进行继代增殖培养后，各组的丛芽培养情况如表2所示：
表2不同培养基的继代培养丛芽情况
根据表2结果可知，不添加蛋白胨的继代培养基接种芽的增殖系数最低，为3.66，植株颜色浅绿，芽较细，添加200mg/l、300mg/l、400mg/l蛋白胨的培养基植株颜色变得深绿，芽较粗，其增殖系数也迅速提高，均达到5以上，其中J1培养基的增殖系数最高，达到5.88，此外，申请人还收集了培养照片，如图1所示，图1中也可直观看出，J1培养基的增殖效果最佳，综上，从成本及增殖系数来看，J1培养基增殖效果最佳。
试验二：比较不同生根培养基的培养效果
本试验比较不同生根培养基的处理效果，采用实施例1的方式进行生根培养，各组除了生根培养基不同之外，其他方式完全相同，所述的生根培养基处理各组对应编号，如下表3(其中，S3为实施例1所述的继代培养基)：
表3生根培养基处理及对应编号
其中，表3中的香蕉汁A-C分别为：
所述的香蕉汁A为实施例1所述的香蕉汁；
所述的香蕉汁B为通过以下方法得到：剥除外皮后称取一定量的果肉，加入85℃的热水(自来水烧热)和占果肉重量0.5％的柠檬酸，打成浆汁B，过滤后得到香蕉汁B备用；
所述的香蕉汁C为通过以下方法得到：采集成熟带皮香蕉果实，将带皮香蕉果实与水打成汁，得到香蕉汁C备用。
经过上述生根培养基进行生根结薯培养后，各组的生根结薯情况如表5所示：
表4不同培养基的生根结薯情况
| 培养基类型 | 生根率/％ | 结薯率/％ |
| CK2 | 87.04±3.21bc | 5.00±2.89e |
| S1 | 89.62±1.69abc | 19.11±0.80d |
| S2 | 90.07±0.51abc | 80.96±3.02b |
| S3 | 94.55±0.52a | 90.60±0.99a |
| S4 | 92.14±0.91ab | 86.23±0.56a |
| S5 | 78.81±2.03d | 70.86±1.01c |
| S6 | 85.96±1.28c | 81.25±0.90b |
从表4可以看出，培养基CK2的生根率达到87.04％，而结薯率仅有5.00％，添加了生根粉ABT之后的培养基S1生根率和结薯率均提高了，分别达到89.62％，19.11％，由此可见生根粉对生根率和结薯率均有不同程度提高，在S1培养基的基础上添加不同浓度和不同处理的香蕉汁，生根率和结薯率差较大，加入10％香蕉汁B的S5培养基生根率只有78.81％，结薯率也只有70.86％，加入10％的香蕉汁C的S6培养基生根率和结薯率高于S6而显著低于S3，S3培养基的生根率和结薯率均最高，分别达到94.55％，90.60％，此外，申请人还将S3和CK2组的生根结薯情况进行拍照记录，如图2-3所示，可直观看出，S3的生根结薯情况显著优于CK2组。
试验三：比较采用单芽和丛芽转接生根情况
本试验测试单芽和丛芽转接的生根率以及发根时间，具体是将天门冬分别采用继代单芽和继代丛芽转接同一种培养基进行生根培养，所述的生根培养基为MS+NAA 1.5mg/L+IBA 1.0mg/L+蔗糖30g/L+琼脂4g/L中，培养温度均为25℃，光照均为2600lx，光照时间均为10h/d，将二者培养效果对比；
记录数据如表5所示：
表5单芽和丛芽转接生根率情况1
| 处理 | 平均生根率/％ | 平均发根时间 |
| 单芽生根 | 84.22 | 45d |
| 丛芽生根 | 86.31 | 32d |
从表5可以看出，丛芽、单芽平均生根率分别为86.31％，84.22％，丛芽生根率高出单芽2.09％；但是，丛芽转接的发根时间远比单芽转接的发根时间要短。
接着，申请人又分别将单芽和丛芽转接至本申请的生根培养基进行生根培养，所述的生根培养基为MS+蔗糖30g/L+琼脂4g/L+IBA 1.0mg/L+NAA 1.5mg/L+ABT 1.0mg/L+10％香蕉汁A，培养温度均为25℃，光照均为2600lx，光照时间均为10h/d，将二者培养效果对比；
记录数据如表6所示：
表6单芽和丛芽转接生根率情况2
| 处理 | 平均生根率/％ | 平均发根时间 |
| 单芽生根 | 91.24 | 40d |
| 丛芽生根 | 94.55 | 25d |
从表6可以看出，丛芽、单芽平均生根率分别为94.55％，90.24％，丛芽生根率高出单芽4.31％；丛芽转接的发根时间为25d，单芽转接的发根时间为40d，远比丛芽转接的发根时间要长。
根据表5-6结果可知，虽然单芽转接和丛芽转接二者的生根率差不多，但其发根时间相差较大，在同一培养中，接丛芽生根能够大大缩短出苗时间，表6的结果验证了丛芽和单芽在本申请生根培养基中具有同样的规律，即丛芽的生根率比单芽高，且丛芽的发根时间远小于单芽。
以上所述实例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明的保护范围应以所附权利要求为准。
Claims (7)
1.一种天门冬瓶内生根结薯的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：
（1）继代培养：将天门冬单芽接入继代培养基中进行增殖、优化培养；
（2）生根培养：选取经继代培养后，带芽4-6个的丛芽，转接到生根培养基内进行生根培养；
其中，所述生根培养基以MS为基础培养基，还添加以下质量浓度的组分：蔗糖30g/L、琼脂4g/L、IBA 1.0mg/L、NAA 1.5mg/L和ABT 1.0mg/L；
（3）移栽：将经过步骤（2）生根培养后的植株移栽至大田中，并进行常规的水肥管理；
步骤（1）中的继代培养基以MS为基础培养基，还添加以下质量浓度的组分：蔗糖30g/L、琼脂4g/L、6-BA 0.5mg/L、NAA 0.1mg/L和蛋白胨200mg/L。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（2）的生根培养基中还添加有质量浓度为10%的香蕉汁。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述香蕉汁通过以下方法得到：采集成熟香蕉果实，剥除外皮后取果肉，将果肉与水打成汁，得到香蕉汁备用。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述继代培养基和所述生根培养基的pH均为5.8。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述继代培养基和所述生根培养基的条件均为：温度23-27℃，光照2500-3000lx，光照时间10h/d。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述继代培养的天数为：25-30d。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述生根培养的天数为：25-36d。
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