CN116420622A - 一种促进墨兰根状茎增殖方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种促进墨兰根状茎增殖方法，将墨兰中间繁殖体根状茎接种于根状茎芽增殖培养基进行继代培养，所述的根状茎增殖培养基含有罗汉果糖蜜。罗汉果糖蜜中含有的多种成分与外源激素共同作用下，墨兰根状茎内源激素含量的发生变化，促进墨兰根状茎增殖，从而提高墨兰根状茎增殖系数。本发明使用的根状茎增殖培养基成本低，并且增殖效率高、速度快，根状茎品质好，具有很好的应用前景。
Description
技术领域
本发明涉及农业生物技术中植物组织培养的方法，具体地说，涉及一种促进墨兰根状茎增殖方法。
背景技术
兰花是广西特色优势花卉，历史悠久，文化底蕴深厚，具有重要的经济价值和文化价值，但国兰仍然是目前最难组织培养的兰花种类之一，迄今未能从根本上解决国兰离体器官发生难的问题，生产上仍以分株繁殖为主，这严重制约了国兰产业化发展。
罗汉果甜苷是罗汉果甜苷中含量和甜度均较高的成分，具有止咳祛痰、抗癌、抗氧化、调节血糖等诸多药理活性，成为兼具治疗功能的天然非糖甜味剂，具有广阔的市场前景。广西桂林市是罗汉果发源地，也是世界最大的罗汉果生产、集散和加工基地。在罗汉果鲜果提取罗汉果甜苷主要成分罗汉果甜苷V后会产生副产品糖蜜，通常经简单处理后直接外排，造成极大的资源浪费。
发明内容
本发明的目的是克服现有技术中的不足，提供一种促进墨兰根状茎增殖方法。
本发明是通过以下技术方案实现：一种促进墨兰根状茎增殖方法，将墨兰根状茎接种于含有罗汉果糖蜜的根状茎增殖培养基进行继代培养。
优选地，所述的根状茎增殖培养基每升含有罗汉果糖蜜10-20克、6-苄氨基嘌呤(6-BA)0.1 -0.5毫克、1-萘乙酸(NAA)1.0-2.0毫克、蔗糖0-10克、琼脂粉5-7克，余量为MS培养基，pH值为5.4-6.0。
优选地，所述的罗汉果糖蜜是指罗汉果苷提取企业提取罗汉果苷后废弃的浓缩汁。
优选地，所述的继代培养方式为：将墨兰根状茎接种在根状茎增殖培养基中，首先在培养温度为25～28℃进行全暗培养1-3天，然后转至培养温度为25-28℃，光照强度为2000-3000lx培养40-60天。
优选地，所述的墨兰根状茎是指墨兰品种‘企剑白墨墨兰’长度为1-2厘米、去除茎尖的根状茎。
本发明将罗汉果糖蜜应用于墨兰根状茎增殖培养，罗汉果糖蜜主要成份为果糖、葡萄糖、蔗糖、半乳糖以及萜类化合物，可以作为培养基的能源物质，与外源激素共同作用下能显著进墨兰根状茎增殖，从而提高墨兰根状茎增殖系数，初步解决墨兰根状茎生长缓慢的问题。
本发明使用根状茎增殖培养基成本低，并且增殖效率高、速度快，根状茎品质好，具有很好的应用前景。
具体实施方式
下面结合具体实施方式，对本发明的技术方案作进一步的详细说明，但不构成对本发明的任何限制。
实施例1
将长度为1.0-2.0厘米、去除茎尖的墨兰品种‘企剑白墨墨兰’根状茎分别接种在根状茎增殖培养基a和b中，首先在培养温度为25℃进行全暗培养1天，然后转至培养温度为25℃，光照强度为2000lx培养条件下培养40天后，在根状茎增殖培养基a培养的‘企剑白墨墨兰’根状茎增殖系数达到2.75，而在根状茎增殖培养基b培养的‘企剑白墨墨兰’根状茎增殖系数为0.23。其中，根状茎增殖培养基a的培养基成分为MS+10g/L罗汉果糖蜜+0.1mg/L6-BA+1.0mg/L NAA+0g/L蔗糖+5g/L琼脂，pH值为5.4；根状茎增殖培养基b的培养基成分为MS+0.1mg/L 6-BA+1.0mg/L NAA+0g/L蔗糖+5g/L琼脂，pH值为5.4。
实施例2
将长度为1.0-2.0厘米、去除茎尖的墨兰品种‘企剑白墨墨兰’根状茎分别接种在根状茎增殖培养基c和d中，首先在培养温度为26℃进行全暗培养2天，然后转至培养温度为26℃，光照强度为2500lx培养条件下培养50天后，在根状茎增殖培养基a培养的‘企剑白墨墨兰’根状茎增殖系数达到2.86，而在根状茎增殖培养基d培养的‘企剑白墨墨兰’根状茎增殖系数为0.95。其中，根状茎增殖培养基c的培养基成分为MS+15g/L罗汉果糖蜜+0.3mg/L6-BA+1.5mg/L NAA+5g/L蔗糖+6g/L琼脂，pH值为5.8；根状茎增殖培养基b的培养基成分为MS+0.3mg/L 6-BA+1.5mg/L NAA+5g/L蔗糖+6g/L琼脂，pH值为5.8。
实施例3
将长度为1.0-2.0厘米、去除茎尖的墨兰品种‘企剑白墨墨兰’根状茎分别接种在根状茎增殖培养基e和f中，首先在培养温度为28℃进行全暗培养3天，然后转至培养温度为28℃，光照强度为3000lx培养条件下培养60天后，在根状茎增殖培养基e培养的‘企剑白墨墨兰’根状茎增殖系数达到3.15，而在根状茎增殖培养基f培养的‘企剑白墨墨兰’根状茎增殖系数为1.13。其中，根状茎增殖培养基e的培养基成分为MS+20g/L罗汉果糖蜜+0.5mg/L6-BA+2.0mg/L NAA+10g/L蔗糖+7g/L琼脂，pH值为6.0；根状茎增殖培养基f的培养基成分为MS+0.5mg/L 6-BA+2.0mg/L NAA+10g/L蔗糖+7g/L琼脂，pH值为6.0。
对比例1
将长度为1.0-2.0厘米、去除茎尖的墨兰品种‘企剑白墨墨兰’根状茎分别接种在根状茎增殖培养基中，首先在培养温度为25℃进行全暗培养1天，然后转至培养温度为25℃，光照强度为2000lx培养条件下培养40天后，在根状茎增殖培养基培养的‘企剑白墨墨兰’根状茎增殖系数达到1.31。其中，根状茎增殖培养基的培养基成分为MS+5g/L罗汉果糖蜜+0.1mg/L 6-BA+1.0mg/L NAA+0g/L蔗糖+5g/L琼脂，pH值为5.4。
对比例2
将长度为1.0-2.0厘米、去除茎尖的墨兰品种‘企剑白墨墨兰’根状茎分别接种在根状茎增殖培养基中，首先在培养温度为25℃进行全暗培养1天，然后转至培养温度为25℃，光照强度为2000lx培养条件下培养40天后，在根状茎增殖培养基培养的‘企剑白墨墨兰’根状茎增殖系数达到1.99。其中，根状茎增殖培养基的培养基成分为MS+25g/L罗汉果糖蜜+0.1mg/L 6-BA+1.0mg/L NAA+0g/L蔗糖+5g/L琼脂，pH值为5.4。
上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其它的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。
Claims (5)
1.一种促进墨兰根状茎增殖方法，将墨兰根状茎接种于根状茎增殖培养基进行继代培养，其特征在于，所述的增殖培养基含罗汉果糖蜜。
2.根据权利要求1所述的一种促进墨兰根状茎增殖方法，其特征在于，所述的根状茎增殖培养基每升含有罗汉果糖蜜10-20克、6-苄氨基嘌呤0.1-0.5毫克、1-萘乙酸1.0-2.0毫克、蔗糖0-10克、琼脂粉5-7克，余量为MS培养基，pH值为5.4-6.0。
3.根据权利要求1所述的一种促进墨兰根状茎增殖方法，其特征在于，所述的罗汉果糖蜜是指罗汉果苷提取企业提取罗汉果苷后废弃的浓缩汁。
4.根据权利要求1所述的一种促进墨兰根状茎增殖方法，其特征在于，所述的继代培养方式为：将墨兰根状茎接种在根状茎增殖培养基中，首先在培养温度为25～28℃进行全暗培养1-3天，然后转至培养温度为25-28℃，光照强度为2000-3000lx培养40-60天。
5.根据权利要求1所述的一种促进墨兰根状茎增殖方法，其特征在于，所述的墨兰根状茎是指墨兰品种‘企剑白墨墨兰’长度为1.0-2.0厘米、去除茎尖的根状茎。
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