CN110150146B - 一种血叶兰组培繁殖方法 - Google Patents
一种血叶兰组培繁殖方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN110150146B CN110150146B CN201910176794.XA CN201910176794A CN110150146B CN 110150146 B CN110150146 B CN 110150146B CN 201910176794 A CN201910176794 A CN 201910176794A CN 110150146 B CN110150146 B CN 110150146B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- culture
- capsules
- water
- culture medium
- days
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01G—HORTICULTURE; CULTIVATION OF VEGETABLES, FLOWERS, RICE, FRUIT, VINES, HOPS OR SEAWEED; FORESTRY; WATERING
- A01G31/00—Soilless cultivation, e.g. hydroponics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
- A01H4/00—Plant reproduction by tissue culture techniques ; Tissue culture techniques therefor
- A01H4/001—Culture apparatus for tissue culture
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
- A01H4/00—Plant reproduction by tissue culture techniques ; Tissue culture techniques therefor
- A01H4/008—Methods for regeneration to complete plants
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Botany (AREA)
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
- Pretreatment Of Seeds And Plants (AREA)
Abstract
本发明公开了一种血叶兰组培繁殖方法。本发明通过蒴果消毒和种子萌发、壮苗生根和移栽,获得了大量优质的血叶兰种苗。通过本发明能对血叶兰进行快速培养繁殖,并且无需添加植物生长调节剂,培养后的血叶兰苗株成苗率高,苗株品质好,栽培后适应性强,作为药用植物安全环保,通过生物技术手段在短时间内,满足了商业化生产的需求,为企业规模化、产业化培养血叶兰提供了技术支持。同时本发明的方法消毒效果好,污染率低,步骤精炼,培养周期短,从而大大提高了成苗率及工作效率,节约了资源。
Description
技术领域:
本发明属于植物组织培养技术领域,具体涉及一种血叶兰组培繁殖方法。
背景技术:
血叶兰(Ludisia discolor)又名石蚕,属兰科(Orchidaceae)血叶兰属多年生草本植物。血叶兰是高档的观叶观花植物,同时还是名贵药用植物。我国医学书籍《中华本草》、《全国中草药汇编》等均有记载,最早记载于慈济宫保生大帝药签,而今,是海南黎族医生处方的重要药材,药用历史悠久,民间应用广泛。
由于血叶兰具有很好的药用价值,而其种子在自然条件下难以萌发,资源再生慢,加上长期无节制的采挖,资源濒临枯竭。为了更好的保护血叶兰野生资源,应大力发展人工栽培,满足市场需求,保障血叶兰资源的可持续利用。然而关于血叶兰组织培养的快繁技术研究仍然处于初级阶段,在很大程度上阻碍了血叶兰的规模化生产。并且现有的其他兰花品种的组织培养不能直接运用到血叶兰培养上,所以目前急需一种血叶兰组培繁殖方法。
发明内容:
本发明的目的在于提供一种育苗优良,培养繁殖快,成苗率高、能获得足量血叶兰种苗的血叶兰组培繁殖方法。
为达到上述目的,本发明采用的技术方案为:
本发明的血叶兰的组培繁殖方法,包括以下步骤:
a、蒴果消毒和种子萌发:选取无病虫害、长势良好、植株健壮的血叶兰进行人工授粉获得蒴果,选取授粉后20-30天成熟的蒴果清洗后进行消毒处理,将消毒后的蒴果剖开,将种子接种到种子萌发培养基上进行培养,先进行暗培养,培养温度为(25±1)℃,然后再进行常规光照培养,培养温度为(25±1)℃,光照时间为12h/d,光照强度为1500-2000lx,种子萌发形成小苗;所述的种子萌发培养基为:每升含有花宝1号1.5-2.5g、香蕉90-140g、土豆40-80g、肌醇0.05-0.15g、蔗糖10-15g、琼脂5-7g和活性炭1-2g,其余为水,pH值为5.6-5.8;
b、壮苗生根:将小苗转入壮苗生根培养基中,培养温度(25±1)℃,光照时间为12h/d,光照强度为1500-2000lx,获得生根的试管苗;所述的壮苗生根培养基为:每升含有花宝1号2-4g、香蕉90-140g、土豆40-80g、椰汁60-100mL、蛋白胨1-3g、肌醇0.05-0.15g、蔗糖10-15g、琼脂5-7g和活性炭1-2g,其余为水,pH值为5.6-5.8;
c、移栽:将试管苗在自然光下炼苗6-9天,然后取出试管苗并洗净附着在根部的培养基,移栽至培养基质中培养获得血叶兰种苗。
选用无病虫害长势良好的血叶兰植株做母本能降低苗株的发病率,保证在组培过程中不受其他因素的干扰,增加种子萌发成活率。种子由种皮包裹,采用质量分数0.15%的升汞水溶液消毒不会造成种子褐化,消毒15min,可以使消毒效果更好,减少细菌污染的同时,提高成活率。种子萌发过程中先进行暗培养,模拟种子在地下的原始生境,能够使种子在培养过程中逐渐适应培养条件,有利于存活。
所述的选取授粉后20-30天成熟的蒴果清洗后进行消毒处理具体为:选取授粉后20-30天成熟的蒴果,去除表面泥沙,然后用洗洁精清洗干净,置于流水下冲洗30min,在超净工作台上,将蒴果用体积分数75%的酒精水溶液浸泡1min,无菌水冲洗1次,然后浸泡在质量分数0.15%的升汞水溶液中消毒15min,消毒后,用无菌水冲洗5-8次,用无菌滤纸吸干蒴果表面水分。
所述的种子萌发培养基优选为:每升含有花宝1号2g、香蕉120g、土豆50g、肌醇0.1g、蔗糖13g、琼脂6g和活性炭1.5g,其余为水,pH值为5.6。
所述的壮苗生根培养基优选为:每升含有花宝1号3g、香蕉120g、土豆50g、椰汁80mL、蛋白胨2g、肌醇0.1g、蔗糖13g、琼脂6g和活性炭1.5g,其余为水,pH值为5.6。
所述的培养基质优选为椰块,或者椰块和沙石按体积比为1:1混合的混合基质。
本发明通过果荚消毒和种子萌发、壮苗生根和移栽,获得了大量优质的血叶兰种苗。本发明的方法消毒效果好、培养繁殖快、成苗率高,从而能够降低血叶兰在组培过程中的污染率,增大成苗率,提高工作效率。
本发明的有益效果是:通过本发明能对血叶兰进行快速培养繁殖,并且无需添加植物生长调节剂,培养后的血叶兰苗株成苗率高,苗株品质好,栽培后适应性强,作为药用植物安全环保,通过生物技术手段在短时间内,满足了商业化生产的需求,为企业规模化、产业化培养血叶兰提供了技术支持。同时本发明的血叶兰组培繁殖方法消毒效果好,播种无菌率为97%,污染率低,步骤精炼,培养周期短,从而大大提高了成苗率及工作效率,节约了资源。
附图说明:
图1为本发明的血叶兰组培繁殖的流程示意图。
具体实施方式:
以下实施例是对本发明的进一步说明,而不是对本发明的限制。
实施例1:
(1)材料选取:选取无病虫害、长势良好、植株健壮的血叶兰,通过人工授粉获得蒴果;
(2)蒴果预处理:选取授粉后25天成熟的蒴果,用软刷毛将选取的蒴果在水池中进行初步清洗,去除表面泥沙,然后用洗洁精清洗干净,置于流水下冲洗30min;
(3)蒴果消毒:在超净工作台上,将蒴果用体积分数75%的酒精水溶液浸泡1min,无菌水冲洗1次,然后浸泡在质量分数0.15%的升汞水溶液中消毒15min,消毒后,用无菌水冲洗5次,用无菌滤纸吸干蒴果表面水分后放置于培养皿中备用;
(4)种子萌发:将消毒后的蒴果剖开,将种子均匀分布于种子萌发培养基上进行培养,先进行30d的暗培养,培养温度为(25±1)℃,然后再进行常规光照培养60d,培养温度为(25±1)℃,光照时间为12h/d,光照强度为1800lx,种子萌发形成小苗,消毒成功率约95%,萌发率96%;种子萌发培养基为:每升含有花宝1号2g、香蕉120g、土豆50g、肌醇0.1g、蔗糖13g、琼脂6g和活性炭1.5g,其余为水,pH值为5.6;
(5)壮苗生根:种子萌发成苗后,选择带1-2片叶的小苗转入壮苗生根培养基中培养90d,培养温度(25±1)℃,光照时间为12h/d,光照强度为1800lx,试管苗生长至4-5cm高,叶2-4片,根2-4条,生根率为100%;壮苗生根培养基为:每升含有花宝1号3g、香蕉120g、土豆50g、椰汁80mL、蛋白胨2g、肌醇0.1g、蔗糖13g、琼脂6g和活性炭1.5g,其余为水,pH值为5.6;
(6)移栽:当试管苗生长至4-5cm高,根2-4条,叶2-4片时,将试管苗放在自然光下炼苗5天,打开组培瓶瓶盖炼苗2天;然后取出试管苗,用清水洗净附着在根部的培养基,清洗时注意不要损害根部,然后移栽至椰块中,保持湿度和透气,空气湿度为80%,温度为25℃,由此得到血叶兰种苗,移栽成活率为97%。
实施例2:
(1)材料选取:选取无病虫害、长势良好、植株健壮的血叶兰,通过人工授粉获得蒴果;
(2)蒴果预处理:选取授粉后25天成熟的蒴果,用软刷毛将选取的蒴果在水池中进行初步清洗,去除表面泥沙,然后用洗洁精清洗干净,置于流水下冲洗30min;
(3)蒴果消毒:在超净工作台上,将蒴果用体积分数75%的酒精水溶液浸泡1min,无菌水冲洗1次,然后浸泡在质量分数0.15%的升汞水溶液中消毒15min,消毒后,用无菌水冲洗5次,用无菌滤纸吸干蒴果表面水分后放置于培养皿中备用;
(4)种子萌发:将消毒后的蒴果剖开,将种子均匀分布于种子萌发培养基上进行培养,先进行30d的暗培养,培养温度为(25±1)℃,然后再进行常规光照培养60d,培养温度为(25±1)℃,光照时间为12h/d,光照强度为1800lx,种子萌发形成小苗,消毒成功率约93%,萌发率95%;种子萌发培养基为:每升含有花宝1号2.5g、香蕉110g、土豆40g、肌醇0.05g、蔗糖14g、琼脂5g和活性炭1.8g,其余为水,pH值为5.6;
(5)壮苗生根:种子萌发成苗后,选择带1-2片叶的小苗转入壮苗生根培养基中培养90d,培养温度(25±1)℃,光照时间为12h/d,光照强度为1800lx,试管苗生长至4-5cm高,叶2-4片,根2-4条,生根率为100%;壮苗生根培养基为:每升含有花宝1号4g、香蕉110g、土豆40g、椰汁70mL、蛋白胨3g、肌醇0.05g、蔗糖14g、琼脂5g和活性炭1.8g,其余为水,pH值为5.6;
(6)移栽:当试管苗生长至4-5cm高,根2-4条,叶2-4片时,将试管苗放在自然光下炼苗5天,打开组培瓶瓶盖炼苗2天;然后取出试管苗,用清水洗净附着在根部的培养基,清洗时注意不要损害根部,然后移栽至椰块和沙石按体积比为1:1混合的混合基质中,保持湿度和透气,空气湿度为80%,温度为25℃,由此得到血叶兰种苗,移栽成活率为约94%。
实施例3:
(1)材料选取:选取无病虫害、长势良好、植株健壮的血叶兰,通过人工授粉获得蒴果;
(2)蒴果预处理:选取授粉后25天成熟的蒴果,用软刷毛将选取的蒴果在水池中进行初步清洗,去除表面泥沙,然后用洗洁精清洗干净,置于流水下冲洗30min;
(3)蒴果消毒:在超净工作台上,将蒴果用体积分数75%的酒精水溶液浸泡1min,无菌水冲洗1次,然后浸泡在质量分数0.15%的升汞水溶液中消毒15min,消毒后,用无菌水冲洗5次,用无菌滤纸吸干蒴果表面水分后放置于培养皿中备用;
(4)种子萌发:将消毒后的蒴果剖开,将种子均匀分布于种子萌发培养基上进行培养,先进行30d的暗培养,培养温度为(25±1)℃,然后再进行常规光照培养60d,培养温度为(25±1)℃,光照时间为12h/d,光照强度为1800lx,种子萌发形成小苗,消毒成功率约95%,萌发率92%;种子萌发培养基为:每升含有花宝1号1.5g、香蕉140g、土豆60g、肌醇0.08g、蔗糖12g、琼脂7g和活性炭1.3g,其余为水,pH值为5.6;
(5)壮苗生根:种子萌发成苗后,选择带1-2片叶的小苗转入壮苗生根培养基中培养90d,培养温度(25±1)℃,光照时间为12h/d,光照强度为1800lx,试管苗生长至4-5cm高,叶2-4片,根2-4条,生根率为100%;壮苗生根培养基为:每升含有花宝1号2g、香蕉140g、土豆60g、椰汁60mL、蛋白胨1g、肌醇0.08g、蔗糖12g、琼脂7g和活性炭1.3g,其余为水,pH值为5.6;
(6)移栽:当试管苗生长至4-5cm高,根2-4条,叶2-4片时,将试管苗放在自然光下炼苗5天,打开组培瓶瓶盖炼苗2天;然后取出试管苗,用清水洗净附着在根部的培养基,清洗时注意不要损害根部,然后移栽至椰块和沙石按体积比为1:1混合的混合基质中,保持湿度和透气,空气湿度为80%,温度为25℃,由此得到血叶兰种苗,移栽成活率为约93%。
实施例4:
(1)材料选取:选取无病虫害、长势良好、植株健壮的血叶兰,通过人工授粉获得蒴果;
(2)蒴果预处理:选取授粉后25天成熟的蒴果,用软刷毛将选取的蒴果在水池中进行初步清洗,去除表面泥沙,然后用洗洁精清洗干净,置于流水下冲洗30min;
(3)蒴果消毒:在超净工作台上,将蒴果用体积分数75%的酒精水溶液浸泡1min,无菌水冲洗1次,然后浸泡在质量分数0.15%的升汞水溶液中消毒15min,消毒后,用无菌水冲洗5次,用无菌滤纸吸干蒴果表面水分后放置于培养皿中备用;
(4)种子萌发:将消毒后的蒴果剖开,将种子均匀分布于种子萌发培养基上进行培养,先进行30d的暗培养,培养温度为(25±1)℃,然后再进行常规光照培养60d,培养温度为(25±1)℃,光照时间为12h/d,光照强度为1800lx,种子萌发形成小苗,消毒成功率约93%,萌发率94%;种子萌发培养基为:每升含有花宝1号2.5g、香蕉100g、土豆50g、肌醇0.1g、蔗糖15g、琼脂7g和活性炭1g,其余为水,pH值为5.6;
(5)壮苗生根:种子萌发成苗后,选择带1-2片叶的小苗转入壮苗生根培养基中培养90d,培养温度(25±1)℃,光照时间为12h/d,光照强度为1800lx,试管苗生长至4-5cm高,叶2-4片,根2-4条,生根率为100%;壮苗生根培养基为:每升含有花宝1号2g、香蕉100g、土豆50g、椰汁80mL、蛋白胨1g、肌醇0.1g、蔗糖15g、琼脂7g和活性炭1g,其余为水,pH值为5.6;
(6)移栽:当试管苗生长至4-5cm高,根2-4条,叶2-4片时,将试管苗放在自然光下炼苗5天,打开组培瓶瓶盖炼苗2天;然后取出试管苗,用清水洗净附着在根部的培养基,清洗时注意不要损害根部,然后移栽至椰块中,保持湿度和透气,空气湿度为80%,温度为25℃,由此得到血叶兰种苗,移栽成活率为约94%。
实施例5:
(1)材料选取:选取无病虫害、长势良好、植株健壮的血叶兰,通过人工授粉获得蒴果;
(2)蒴果预处理:选取授粉后25天成熟的蒴果,用软刷毛将选取的蒴果在水池中进行初步清洗,去除表面泥沙,然后用洗洁精清洗干净,置于流水下冲洗30min;
(3)蒴果消毒:在超净工作台上,将蒴果用体积分数75%的酒精水溶液浸泡1min,无菌水冲洗1次,然后浸泡在质量分数0.15%的升汞水溶液中消毒15min,消毒后,用无菌水冲洗5次,用无菌滤纸吸干蒴果表面水分后放置于培养皿中备用;
(4)种子萌发:将消毒后的蒴果剖开,将种子均匀分布于种子萌发培养基上进行培养60d,先进行30d的暗培养,培养温度为(25±1)℃,然后再进行常规光照培养,培养温度为(25±1)℃,光照时间为12h/d,光照强度为1800lx,种子萌发形成小苗,消毒成功率约94%,萌发率92%;种子萌发培养基为:每升含有花宝1号1.5g、香蕉90g、土豆80g、肌醇0.13g、蔗糖11g、琼脂6g和活性炭2g,其余为水,pH值为5.6;
(5)壮苗生根:种子萌发成苗后,选择带1-2片叶的小苗转入壮苗生根培养基中培养90d,培养温度(25±1)℃,光照时间为12h/d,光照强度为1800lx,试管苗生长至4-5cm高,叶2-4片,根2-4条,生根率为100%;壮苗生根培养基为:每升含有花宝1号3g、香蕉90g、土豆80g、椰汁90mL、蛋白胨3g、肌醇0.13g、蔗糖11g、琼脂6g和活性炭2g,其余为水,pH值为5.6;
(6)移栽:当试管苗生长至4-5cm高,根2-4条,叶2-4片时,将试管苗放在自然光下炼苗5天,打开组培瓶瓶盖炼苗2天;然后取出试管苗,用清水洗净附着在根部的培养基,清洗时注意不要损害根部,然后移栽至椰块和沙石按体积比为1:1混合的混合基质中,保持湿度和透气,空气湿度为80%,温度为25℃,由此得到血叶兰种苗,移栽成活率为约92%。
实施例6:
(1)材料选取:选取无病虫害、长势良好、植株健壮的血叶兰,通过人工授粉获得蒴果;
(2)蒴果预处理:选取授粉后25天成熟的蒴果,用软刷毛将选取的蒴果在水池中进行初步清洗,去除表面泥沙,然后用洗洁精清洗干净,置于流水下冲洗30min;
(3)蒴果消毒:在超净工作台上,将蒴果用体积分数75%的酒精水溶液浸泡1min,无菌水冲洗1次,然后浸泡在质量分数0.15%的升汞水溶液中消毒15min,消毒后,用无菌水冲洗5次,用无菌滤纸吸干蒴果表面水分后放置于培养皿中备用;
(4)种子萌发:将消毒后的蒴果剖开,将种子均匀分布于种子萌发培养基上进行培养60d,先进行30d的暗培养,培养温度为(25±1)℃,然后再进行常规光照培养,培养温度为(25±1)℃,光照时间为12h/d,光照强度为1800lx,种子萌发形成小苗,消毒成功率约93%,萌发率94%;种子萌发培养基为:每升含有花宝1号2g、香蕉130g、土豆70g、肌醇0.15g、蔗糖10g、琼脂5g和活性炭1.8g,其余为水,pH值为5.6;
(5)壮苗生根:种子萌发成苗后,选择带1-2片叶的小苗转入壮苗生根培养基中培养90d,培养温度(25±1)℃,光照时间为12h/d,光照强度为1800lx,试管苗生长至4-5cm高,叶2-4片,根2-4条,生根率为100%;壮苗生根培养基为:每升含有花宝1号4g、香蕉130g、土豆70g、椰汁100mL、蛋白胨2g、肌醇0.15g、蔗糖10g、琼脂5g和活性炭1.8g,其余为水,pH值为5.6;
(6)移栽:当试管苗生长至4-5cm高,根2-4条,叶2-4片时,将试管苗放在自然光下炼苗5天,打开组培瓶瓶盖炼苗2天;然后取出试管苗,用清水洗净附着在根部的培养基,清洗时注意不要损害根部,然后移栽至椰块中,保持湿度和透气,空气湿度为80%,温度为25℃,由此得到血叶兰种苗,移栽成活率为约95%。
实施例7:
(1)材料选取:选取无病虫害、长势良好、植株健壮的血叶兰,通过人工授粉获得蒴果;
(2)蒴果预处理:选取授粉后20天成熟的蒴果,用软刷毛将选取的蒴果在水池中进行初步清洗,去除表面泥沙,然后用洗洁精清洗干净,置于流水下冲洗30min;
(3)蒴果消毒:在超净工作台上,将蒴果用体积分数75%的酒精水溶液浸泡1min,无菌水冲洗1次,然后浸泡在质量分数0.15%的升汞水溶液中消毒15min,消毒后,用无菌水冲洗8次,用无菌滤纸吸干蒴果表面水分后放置于培养皿中备用;
(4)种子萌发:将消毒后的蒴果剖开,将种子均匀分布于种子萌发培养基上进行培养,先进行30d的暗培养,培养温度为(25±1)℃,然后再进行常规光照培养60d,培养温度为(25±1)℃,光照时间为12h/d,光照强度为1500lx,种子萌发形成小苗,消毒成功率约92%,萌发率91%;种子萌发培养基为:每升含有花宝1号2g、香蕉120g、土豆50g、肌醇0.1g、蔗糖13g、琼脂6g和活性炭1.5g,其余为水,pH值为5.8;
(5)壮苗生根:种子萌发成苗后,选择带1-2片叶的小苗转入壮苗生根培养基中培养90d,培养温度(25±1)℃,光照时间为12h/d,光照强度为1500lx,试管苗生长至4-5cm高,叶2-4片,根2-4条,生根率为100%;壮苗生根培养基为:每升含有花宝1号3g、香蕉120g、土豆50g、椰汁80mL、蛋白胨2g、肌醇0.1g、蔗糖13g、琼脂6g和活性炭1.5g,其余为水,pH值为5.8;
(6)移栽:当试管苗生长至4-5cm高,根2-4条,叶2-4片时,将试管苗放在自然光下炼苗7天,打开组培瓶瓶盖炼苗1天;然后取出试管苗,用清水洗净附着在根部的培养基,清洗时注意不要损害根部,然后移栽至椰块中,保持湿度和透气,空气湿度为85%,温度为22℃,由此得到血叶兰种苗,移栽成活率为87%。
实施例8:
(1)材料选取:选取无病虫害、长势良好、植株健壮的血叶兰,通过人工授粉获得蒴果;
(2)蒴果预处理:选取授粉后30天成熟未开裂的蒴果,用软刷毛将选取的蒴果在水池中进行初步清洗,去除表面泥沙,然后用洗洁精清洗干净,置于流水下冲洗30min;
(3)蒴果消毒:在超净工作台上,将蒴果用体积分数75%的酒精水溶液浸泡1min,无菌水冲洗1次,然后浸泡在质量分数0.15%的升汞水溶液中消毒15min,消毒后,用无菌水冲洗5次,用无菌滤纸吸干蒴果表面水分后放置于培养皿中备用;
(4)种子萌发:将消毒后的蒴果剖开,将种子均匀分布于种子萌发培养基上进行培养60d,先进行30d的暗培养,培养温度为(25±1)℃,然后再进行常规光照培养,培养温度为(25±1)℃,光照时间为12h/d,光照强度为2000lx,种子萌发形成小苗,消毒成功率约92%,萌发率90%;种子萌发培养基为:每升含有花宝1号2g、香蕉120g、土豆50g、肌醇0.1g、蔗糖13g、琼脂6g和活性炭1.5g,其余为水,pH值为5.6;
(5)壮苗生根:种子萌发成苗后,选择带1-2片叶的小苗转入壮苗生根培养基中培养90d,培养温度(25±1)℃,光照时间为12h/d,光照强度为2000lx,试管苗生长至4-5cm高,叶2-4片,根2-4条,生根率为100%;壮苗生根培养基为:每升含有花宝1号3g、香蕉120g、土豆50g、椰汁80mL、蛋白胨2g、肌醇0.1g、蔗糖13g、琼脂6g和活性炭1.5g,其余为水,pH值为5.6;
(6)移栽:当试管苗生长至4-5cm高,根2-4条,叶2-4片时,将试管苗放在自然光下炼苗5天,打开组培瓶瓶盖炼苗2天;然后取出试管苗,用清水洗净附着在根部的培养基,清洗时注意不要损害根部,然后移栽至椰块中,保持湿度和透气,空气湿度为75%,温度为28℃,由此得到血叶兰种苗,移栽成活率为90%。
Claims (5)
1.一种血叶兰组培繁殖方法,其特征在于,包括以下步骤:
a、蒴果消毒和种子萌发:选取无病虫害、长势良好、植株健壮的血叶兰进行人工授粉获得蒴果,选取授粉后20-30天成熟的蒴果清洗后进行消毒处理,将消毒后的蒴果剖开,将种子接种到种子萌发培养基上进行培养,先进行暗培养,培养温度为(25±1)℃,然后再进行常规光照培养,培养温度为(25±1)℃,光照时间为12h/d,光照强度为1500-2000lx,种子萌发形成小苗;所述的种子萌发培养基为:每升含有花宝1号1.5-2.5g、香蕉90-140g、土豆40-80g、肌醇0.05-0.15g、蔗糖10-15g、琼脂5-7g和活性炭1-2g,其余为水,pH值为5.6-5.8;
b、壮苗生根:将小苗转入壮苗生根培养基中,培养温度(25±1)℃,光照时间为12h/d,光照强度为1500-2000lx,获得生根的试管苗;所述的壮苗生根培养基为:每升含有花宝1号2-4g、香蕉90-140g、土豆40-80g、椰汁60-100mL、蛋白胨1-3g、肌醇0.05-0.15g、蔗糖10-15g、琼脂5-7g和活性炭1-2g,其余为水,pH值为5.6-5.8;
c、移栽:将试管苗在自然光下炼苗6-9天,然后取出试管苗并洗净附着在根部的培养基,移栽至培养基质中培养获得血叶兰种苗。
2.根据权利要求1所述的血叶兰组培繁殖方法,其特征在于,所述的选取授粉后20-30天成熟的蒴果清洗后进行消毒处理具体为:选取授粉后20-30天成熟的蒴果,去除表面泥沙,然后用洗洁精清洗干净,置于流水下冲洗30min,在超净工作台上,将蒴果用体积分数75%的酒精水溶液浸泡1min,无菌水冲洗1次,然后浸泡在质量分数0.15%的升汞水溶液中消毒15min,消毒后,用无菌水冲洗5-8次,用无菌滤纸吸干蒴果表面水分。
3.根据权利要求1或2所述的血叶兰组培繁殖方法,其特征在于,所述的种子萌发培养基为:每升含有花宝1号2g、香蕉120g、土豆50g、肌醇0.1g、蔗糖13g、琼脂6g和活性炭1.5g,其余为水,pH值为5.6。
4.根据权利要求1或2所述的血叶兰组培繁殖方法,其特征在于,所述的壮苗生根培养基为:每升含有花宝1号3g、香蕉120g、土豆50g、椰汁80mL、蛋白胨2g、肌醇0.1g、蔗糖13g、琼脂6g和活性炭1.5g,其余为水,pH值为5.6。
5.根据权利要求1所述的血叶兰组培繁殖方法,其特征在于,所述的培养基质为椰块,或者椰块和沙石按体积比为1:1混合的混合基质。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201910176794.XA CN110150146B (zh) | 2019-03-08 | 2019-03-08 | 一种血叶兰组培繁殖方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201910176794.XA CN110150146B (zh) | 2019-03-08 | 2019-03-08 | 一种血叶兰组培繁殖方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN110150146A CN110150146A (zh) | 2019-08-23 |
CN110150146B true CN110150146B (zh) | 2021-01-01 |
Family
ID=67638409
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201910176794.XA Expired - Fee Related CN110150146B (zh) | 2019-03-08 | 2019-03-08 | 一种血叶兰组培繁殖方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN110150146B (zh) |
Families Citing this family (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN115700074A (zh) * | 2022-10-25 | 2023-02-07 | 海南大学 | 一种一次性成苗培养基及其应用 |
Family Cites Families (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101569285B (zh) * | 2009-06-02 | 2011-10-26 | 中国科学院华南植物园 | 兜兰的杂交育种及其种苗繁殖方法 |
CN102283114B (zh) * | 2011-06-23 | 2016-01-13 | 中国科学院华南植物园 | 兰花无菌播种和试管成苗繁殖方法及所采用的广谱培养基 |
CN105165617B (zh) * | 2015-10-09 | 2017-07-04 | 福建省农业科学院农业生物资源研究所 | 血叶兰种子的组织培养与快速育苗方法 |
-
2019
- 2019-03-08 CN CN201910176794.XA patent/CN110150146B/zh not_active Expired - Fee Related
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN110150146A (zh) | 2019-08-23 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN101258835B (zh) | 铁皮石斛优质种苗快速繁殖方法 | |
CN101822220B (zh) | 一种春兰名品茎尖组织培养快速繁殖方法 | |
CN100444722C (zh) | 杜鹃兰的组织培养与快速繁殖方法 | |
CN101889547B (zh) | 齿瓣石斛种子无菌快速繁殖方法 | |
CN105706900B (zh) | 杂交兰与西藏虎头兰杂交种子无菌播种育苗的方法 | |
CN105638458B (zh) | 一种川贝母的组织培养方法 | |
CN105104207A (zh) | 一种通过花药培养获得甜叶菊再生植株的方法 | |
CN101116424B (zh) | 高效诱导培养百合小鳞茎的方法 | |
CN113661924B (zh) | 保亭花的组培快速繁殖方法 | |
CN102187810A (zh) | 一种所罗门姜黄的组织培养繁殖方法 | |
CN109105263A (zh) | 一种国兰根状茎组织培养快速繁殖方法 | |
CN101180950B (zh) | 春石斛组织培养快繁方法 | |
CN101124892B (zh) | 兰属地生兰种子无菌播种育苗方法 | |
CN108834894B (zh) | 一种钩藤的组织培养方法 | |
CN110214702A (zh) | 霍山石斛组培苗培育及炼苗方法 | |
CN106613960A (zh) | 一种海伦兜兰愈伤组织再生体系快速繁殖方法 | |
CN105191803A (zh) | 一种铁皮石斛组培袋苗生产方法 | |
CN110150146B (zh) | 一种血叶兰组培繁殖方法 | |
CN103155869A (zh) | 甜樱桃砧木Colt组织培养方法 | |
CN108243959A (zh) | 一种以黄粱木茎段为外植体的高效再生方法 | |
CN115474552B (zh) | 一种黄叶万年麻植物组织培养方法 | |
CN110810242A (zh) | 一种蒜头果的快速繁殖方法 | |
CN110036910B (zh) | 一种血叶兰组培快速繁殖方法 | |
CN101518205B (zh) | 一种茅膏菜无菌播种繁殖方法 | |
CN110036909B (zh) | 一种血叶兰快速培养繁殖方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
GR01 | Patent grant | ||
GR01 | Patent grant | ||
CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20210101 |
|
CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |