CN116396879A - 一种细长赖氨酸芽孢杆菌及其应用 - Google Patents

一种细长赖氨酸芽孢杆菌及其应用 Download PDF

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Abstract

本发明提出了一株能够实现黄曲霉毒素B1降解的细长赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus macroides)，于2021年11月29日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏编号为CGMCC No.23992。该菌株的特点是能够在有氧条件和无氧条件下均能实现花生粕中的黄曲霉毒素b1的高效生物降解，有氧条件下降解率达到90％以上，厌氧条件下降解率也达到了70％，同时该菌株有降低玉米赤霉烯酮的潜力。

Description

一种细长赖氨酸芽孢杆菌及其应用
技术领域
本发明涉及微生物技术领域，尤其涉及一种细长赖氨酸芽孢杆菌及其应用。
背景技术
黄曲霉毒素是主要由黄曲霉、寄生曲霉产生的次生代谢产物，常见的有黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2、M1、M2等，其中以黄曲霉毒素B1分布最广、毒性最强、危害最大，黄曲霉毒素B1的急性毒性是氰化钾的10倍，砒霜的 68倍，可诱发癌症，各种粮油作物如花生、玉米、稻米、大豆、小麦等特别容易受到感染，给食品带来了重大的安全风险。
在粮油作物的整条产业链中，各个相关科研机构院校企业在产业链的上中下游做了大量工作，如采用通过不产毒菌株的生物防治法在前端进行毒素控制，但我国的作物生产存在分散经营，规模化程度低等缺点，在收获储运过程中，容易进一步滋生黄曲霉毒素，对于这一阶段的黄曲霉毒素的解决方法刻不容缓，目前采用具体方法有物理吸附法，物理吸附的方法是通过一些吸附剂如蒙脱石，硅藻土进行吸附黄曲霉毒素，使得毒素不被动物体内吸收，未能实现真正降解，排出体外仍然对环境造成严重影响，另外吸附剂在吸附毒素的同时，还会吸附营养素；化学降解法，在降解毒素的同时会破坏营养，使得营养价值降低还有化学试剂残留的缺点，因此，生物降解法是最有吸引力的，虽然目前专利报道的能够生物降解的菌种较多，如缺陷假单胞菌、枯草芽孢杆菌、土曲霉、阿耶波多是芽孢杆菌等等，但目前生物降解法在产业上得到应用的案例少之又少，这是由多方面原因造成的，(1)现有菌株大多数对于黄曲霉毒素标准品有降解作用，但具体到花生粕这种具体复杂基质的时候，作用效果不明朗(2)大多数菌株需要耗氧发酵才能进行毒素降解，但耗氧发酵会对处理物料的堆积高度产生很大的限制，导致耗氧降解毒素的菌株的处理成本很高，但能够厌氧发酵进行毒素生物降解的菌株报道很少，厌氧菌株乳酸菌，酵母菌的黄曲霉毒素脱除是通过细胞壁多糖吸附黄曲霉毒素，这种吸附不是真正降解，毒素的存在仍具有很高的风险，如果能够获得高效厌氧降解黄曲霉毒素b1的菌株，那么处理成本可大大降低，产业化前景更佳。
发明内容
本发明提出了一株能够实现黄曲霉毒素B1降解的新菌株，细长赖氨酸芽孢杆菌，特点是能够在有氧条件和无氧条件下均能实现花生粕中的黄曲霉毒素 b1的高效生物降解，有氧条件下降解率达到90％以上，厌氧条件下降解率也达到了70％，同时该菌株有降低玉米赤霉烯酮的潜力。
本发明第一方面的目的在于，提供一种细长赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillusmacroides)菌株，其16s rDNA如SEQ ID NO:1所示。
在某些实施方案中，所述细长赖氨酸芽孢杆菌于2021年11月29日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏编号为 CGMCC No.23992。
在某些实施方案中，所述细长赖氨酸芽孢杆菌菌株的形式是活细菌、死细菌或其细胞组分。
在某些实施方案中，所述细长赖氨酸芽孢杆菌菌株是分离的形式。本文使用的术语“分离的”意指从其天然环境分离出来。
在某些实施方案中，本发明通过污泥和发霉花生粒作为基质进行定向筛选，采用LB培养基按照菌落生长形态进行了多次的分离纯化后，对获得纯净的单一菌株进行16srDNA测序鉴定，得到所述细长赖氨酸芽孢杆菌。
在某些实施方案中，所述细长赖氨酸芽孢杆菌菌株是生物纯的形式。本文使用的术语“生物纯的”是指实验室培养物形式的菌株，其基本上不含其他种类的生物。优选地，所述细长赖氨酸芽孢杆菌菌株的形式是单一生物种类的培养物。
本文使用的术语“细长赖氨酸芽孢杆菌菌株”还包括所述细长赖氨酸芽孢杆菌菌株的突变株。本文使用的术语“突变株”包括含有与SEQ ID NO:1有至少95％同一性，优选至少96％同一性，优选至少97％同一性，优选至少98％同一性，更优选至少99％同一性的核苷酸序列，而在细菌基因组的其他序列中包含突变的衍生菌株。突变株可通过基因工程技术获得，意味着有本发明的菌株遗传物质的改变或意味着有本发明菌株遗传物质与其他分子的重组。通常，为了获得这样的突变菌株，本领域技术人员可使用标准的诱变技术例如UV辐射或暴露于致诱变的化学制品。本文使用的序列“同一性”可使用本领域技术人员已知的标准技术确定。例如，同源性可使用在线的同源性算法“BLAST”程序确定，所述程序可在http://www.ncbi.nlm.nih.gov/BLAST/公开获得。
本文使用的术语“细长赖氨酸芽孢杆菌菌株”还包括这样的菌株：其含有的核苷酸序列与亲本细长赖氨酸芽孢杆菌菌株的核苷酸序列SEQ ID NO:1有至少50、60、70、75、80、85或90％的同一性，优选至少95％、96％、97％、 98％或99％的同一性。
本发明第二方面的目的在于，提供所述细长赖氨酸芽孢杆菌菌株在降解黄曲霉毒素B1和/或降解玉米赤霉烯酮中的应用。
在某些实施方案中，所述细长赖氨酸芽孢杆菌的发酵产物用于降解黄曲霉毒素B1和/或玉米赤霉烯酮，所述发酵产物为发酵液、发酵上清液、细胞悬浮液和/或胞内物质。
在某些实施方案中，所述发酵产物为有氧发酵产物和/或厌氧发酵产物。
在某些实施方案中，所述菌株的发酵培养基包含以下成分：牛肉膏3g/L，胰蛋白胨30g/L，NaCl 10g/L，KH2PO4 1g/L，葡萄糖20g/L。
本发明第三方面的目的在于，提供用于降解黄曲霉毒素B1和/或降解玉米赤霉烯酮的制剂，所述制剂包括所述细长赖氨酸芽孢杆菌的发酵产物，所述发酵产物为发酵液、发酵上清液、细胞悬浮液和/或胞内物质。
在某些实施方案中，所述发酵产物为有氧发酵产物和/或厌氧发酵产物。
在某些实施方案中，所述菌株的发酵培养基包含以下成分：牛肉膏3g/L，胰蛋白胨30g/L，NaCl 10g/L，KH2PO4 1g/L，葡萄糖20g/L。
在某些实施方案中，所述制剂的形式为液体、喷粉、干燥可湿性粉剂或干燥可湿性颗粒。
本发明第四方面的目的在于，提供一种降解黄曲霉毒素B1和/或降解玉米赤霉烯酮的方法，所述方法包括将本发明所述的菌株与含有黄曲霉毒素 B1和/或玉米赤霉烯酮的物料共同发酵的步骤，或所述方法包括将本发明所述菌株的发酵产物或以上任一项所述的制剂与含有黄曲霉毒素B1和/或玉米赤霉烯酮的物料混合的步骤。
在某些实施方案中，本发明所述的菌株与含有黄曲霉毒素B1和/或玉米赤霉烯酮的物料共同发酵的步骤为有氧发酵或厌氧发酵。
在某些实施方案中，本发明所述菌株的发酵产物为有氧发酵产物和/或厌氧发酵产物，如发酵液、发酵上清液、细胞悬浮液和/或胞内物质。
与现有技术相比，本发明具有以下优点：
(1)一般的菌株只能对黄曲霉毒素标准有较好的脱毒效果，应用到具体基质时效果不佳，而本发明的菌株对花生粕本身内含的黄曲霉毒素具有高效的降解效果；
(2)目前生物降解的菌株大多数为需氧菌，在氧缺少的条件下脱毒效率很差，导致物料处理的堆高受到很大限制，产业化成本很高，而本发明的菌株能够在无氧条件下也能实现花生粕的黄曲霉毒素b1的高效降解，能够显著降低产业化成本。
具体实施方式
以下，针对本发明的内容进行详细说明。以下所记载的技术特征的说明基于本发明的代表性的实施方案、具体例子而进行，但本发明不限定于这些实施方案、具体例子。需要说明的是：
本说明书中，使用“数值A～数值B”表示的数值范围是指包含端点数值A、 B的范围。
本说明书中，使用“以上”或“以下”表示的数值范围是指包含本数的数值范围。
本说明书中，使用“可以”表示的含义包括了进行某种处理以及不进行某种处理两方面的含义。
本说明书中，使用“任选”或“任选的”表示某些物质、组分、执行步骤、施加条件等因素使用或者不使用。
本说明书中，所使用的单位名称均为国际标准单位名称，并且如果没有特别声明，所使用的“％”均表示重量或质量百分含量。
本说明书中，如没有特别声明，则“多(个/种)”指的是具有两个/种或两个 /种以上的情况。
本说明书中，所提及的“一些具体/优选的实施方案”、“另一些具体/优选的实施方案”、“实施方案”等是指所描述的与该实施方案有关的特定要素 (例如，特征、结构、性质和/或特性)包括在此处所述的至少一种实施方案中，并且可存在于其它实施方案中或者可不存在于其它实施方案中。另外，应理解，所述要素可以任何合适的方式组合在各种实施方案中。
本发明提出了一株能够实现黄曲霉毒素B1降解的新菌株，细长赖氨酸芽孢杆菌，特点是能够在有氧条件和无氧条件下均能实现花生粕中的黄曲霉毒素 b1的高效生物降解，有氧条件下降解率达到90％以上，厌氧条件下降解率也达到了70％，同时该菌株有降低玉米赤霉烯酮的潜力。
本发明第一方面的目的在于，提供一种细长赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillusmacroides)菌株，其16s rDNA如SEQ ID NO:1所示。
在某些具体实施方式中，所述细长赖氨酸芽孢杆菌于2021年11月29日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏编号为CGMCC No.23992。
在某些具体实施方式中，所述细长赖氨酸芽孢杆菌菌株的形式是活细菌、死细菌或其细胞组分。
在某些具体实施方式中，所述细长赖氨酸芽孢杆菌菌株是分离的形式。本文使用的术语“分离的”意指从其天然环境分离出来。
在某些具体实施方式中，本发明通过污泥和发霉花生粒作为基质进行定向筛选，采用LB培养基按照菌落生长形态进行了多次的分离纯化后，对获得纯净的单一菌株进行16s rDNA测序鉴定，得到所述细长赖氨酸芽孢杆菌。
在某些具体实施方式中，所述细长赖氨酸芽孢杆菌菌株是生物纯的形式。本文使用的术语“生物纯的”是指实验室培养物形式的菌株，其基本上不含其他种类的生物。优选地，所述细长赖氨酸芽孢杆菌菌株的形式是单一生物种类的培养物。
本文使用的术语“细长赖氨酸芽孢杆菌菌株”还包括所述细长赖氨酸芽孢杆菌菌株的突变株。本文使用的术语“突变株”包括含有与SEQ ID NO:1有至少95％同一性，优选至少96％同一性，优选至少97％同一性，优选至少98％同一性，更优选至少99％同一性的核苷酸序列，而在细菌基因组的其他序列中包含突变的衍生菌株。突变株可通过基因工程技术获得，意味着有本发明的菌株遗传物质的改变或意味着有本发明菌株遗传物质与其他分子的重组。通常，为了获得这样的突变菌株，本领域技术人员可使用标准的诱变技术例如UV辐射或暴露于致诱变的化学制品。本文使用的序列“同一性”可使用本领域技术人员已知的标准技术确定。例如，同源性可使用在线的同源性算法“BLAST”程序确定，所述程序可在http://www.ncbi.nlm.nih.gov/BLAST/公开获得。
本文使用的术语“细长赖氨酸芽孢杆菌菌株”还包括这样的菌株：其含有的核苷酸序列与亲本细长赖氨酸芽孢杆菌菌株的核苷酸序列SEQ ID NO:1有至少50、60、70、75、80、85或90％的同一性，优选至少95％、96％、97％、 98％或99％的同一性。
本发明第二方面的目的在于，提供所述细长赖氨酸芽孢杆菌菌株在降解黄曲霉毒素B1和/或降解玉米赤霉烯酮中的应用。
在某些具体实施方式中，所述细长赖氨酸芽孢杆菌的发酵产物用于降解黄曲霉毒素B1和/或玉米赤霉烯酮，所述发酵产物为发酵液、发酵上清液、细胞悬浮液和/或胞内物质。
在某些具体实施方式中，所述发酵产物为有氧发酵产物和/或厌氧发酵产物。
在某些具体实施方式中，所述菌株的发酵培养基包含以下成分：牛肉膏 3g/L，胰蛋白胨30g/L，NaCl 10g/L，KH2PO4 1g/L，葡萄糖20g/L。
本发明第三方面的目的在于，提供用于降解黄曲霉毒素B1和/或降解玉米赤霉烯酮的制剂，所述制剂包括所述细长赖氨酸芽孢杆菌的发酵产物，所述发酵产物为发酵液、发酵上清液、细胞悬浮液和/或胞内物质。
在某些具体实施方式中，所述发酵产物为有氧发酵产物和/或厌氧发酵产物。
在某些具体实施方式中，所述菌株的发酵培养基包含以下成分：牛肉膏 3g/L，胰蛋白胨30g/L，NaCl 10g/L，KH2PO4 1g/L，葡萄糖20g/L。
在某些具体实施方式中，所述制剂的形式为液体、喷粉、干燥可湿性粉剂或干燥可湿性颗粒。
本发明第四方面的目的在于，提供一种降解黄曲霉毒素B1和/或降解玉米赤霉烯酮的方法，所述方法包括将本发明所述的菌株与含有黄曲霉毒素B1和/ 或玉米赤霉烯酮的物料共同发酵的步骤，或所述方法包括将本发明所述菌株的发酵产物或以上任一项所述的制剂与含有黄曲霉毒素B1和/或玉米赤霉烯酮的物料混合的步骤。
在某些具体实施方式中，本发明所述的菌株与含有黄曲霉毒素B1和/或玉米赤霉烯酮的物料共同发酵的步骤为有氧发酵或厌氧发酵。
在某些具体实施方式中，本发明所述菌株的发酵产物为有氧发酵产物和/ 或厌氧发酵产物，如发酵液、发酵上清液、细胞悬浮液和/或胞内物质。
另外，本发明的菌株可以与其他已被公开的菌株、酶等混合发酵来实现本发明的目的，如与乳酸菌、酵母菌、蛋白酶或淀粉酶等其中的一种或多种进行混合后发酵。
在某些具体实施方案中，所述乳酸菌可以包括但不限于片球菌、保加利亚乳酸菌、嗜酸乳酸菌等。
在某些具体实施方案中，所述酵母菌可以包括但不限于酿酒酵母菌(CN103805525B)、毕赤酵母菌株(CN109957520A或CN113073057A或 CN111378586A或CN111378585A)和德尔布有孢酵母菌(CN108130282A)等。
在某些具体实施方案中，所述蛋白酶可以包括但不限于酸性蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶、风味蛋白酶、内切蛋白酶、外切蛋白酶、木瓜蛋白酶和胰蛋白酶等。
在某些具体实施方案中，所述淀粉酶可以包括但不限于新型淀粉酶(CN106479996B)、高温淀粉酶、中温淀粉酶、真菌淀粉酶和细菌淀粉酶等。
实施例1菌株的筛选分离鉴定
通过污泥和发霉花生粒作为基质进行定向筛选，采用LB培养基按照菌落生长形态进行了多次的分离纯化，并进行了16s rDNA测序鉴定。
菌株筛选：
取2个250mL三角瓶，分别加入厌氧池淤泥(浦东新区高东路118号)100ml 和220ml，每个三角瓶内加入20g发霉花生，分别用纱布和塑料膜封口，编号1、2，常温静置培养；
待发霉花生表皮脱落后，在1、2三角瓶内分别取1mL淤泥，向淤泥中加水，分别稀释10、100、1000、10000倍，然后挑取少量淤泥涂布到香豆素固体筛选平板 (KH2PO4 0.25g/L，(NH4)2SO4 0.5g/L，CaCl2 0.005g/L，MgSO4·7H2O 0.25g/L，FeCl3·6H2O 0.003g/L，KNO30.5g/L，香豆素0.5g/L，Agar 15g/L， pH为7)上，置于培养箱，28℃培养；
待筛选平板上生长出单菌落后，用牙签挑取些许，稀释后，涂布到LB固体平板上扩培，置于培养箱，37℃培养；
接种，将扩培后的菌株，接种到LB液体培养基中，置于摇床，37℃培养；
冻管制备，将培养好的菌株，做成甘油冻管，-80℃保存；
菌株鉴定：
提取总DNA(细菌DNA试剂盒，生工，编号SK8255，提取方法参考按照试剂盒说明书提取)，以其为模板，利用细菌16S rRNA通用引物，
上游引物27F序列：5’-GTTTGATCATGGCTCAG-3’(SEQ ID NO:2)，
下游引物1492R序列：5’-TACGGTTACCTTGTTACGACTT-3’(SEQ ID NO:3)，
进行PCR扩增(扩增温度设定参见下表)，得到长度约为1.5kb的扩增产物，将扩增产物回收，送由生工生物工程(上海股份有限公司)进行测序。
Figure RE-GDA0003505644620000081
测序结果如SEQ ID NO:1所示。
综合以上信息，将其归类为赖氨酸芽胞杆菌，命名为细长赖氨酸芽胞杆菌。将该菌株于2021年11月29日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心 (CGMCC)，北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，分类命名为赖氨酸芽胞杆菌(Lysinibacillus macroides)，保藏号为CGMCC No.23992。
实施例2黄曲霉毒素B1标准品降解测试
将赖氨酸芽孢杆菌采用LB培养基在37℃培养24h，获得种子液，将部分种子液离心获得上清液，在37℃进行黄曲霉毒素b1标准品(来源于Medchemexpress)的降解实验，具体步骤为：采用50ml离心管，对照加入10ml水，实验1加入10ml种子液，实验2加入10ml上清液，实验3加入经过加热95℃，10min的灭活上清液10ml，分别加入黄曲霉毒素b1标准品，使得体系中的黄曲霉毒素b1的含量在200ppb左右，实验过程中采用避光处理,孵育48h。
检测方法参考：黄曲霉毒素B1，B2，G1，G2的检测方法(GB5009.22-2016)。实验结果如表1所示：
表1 AFB1标准品测试结果
Figure RE-GDA0003505644620000091
从实验结果展示可以看出，赖氨酸芽孢杆菌的种子液和上清液均能显著降低AFB1，上清液的结果表明赖氨酸芽孢杆菌不属于细胞吸附，属于真正的生物酶降解作用。
实施例3花生粕黄曲霉毒素降解测试(有氧)
将自带黄曲毒素b1的花生粕进行黄曲霉毒素b1有氧条件下降解测试，将LB 平板活化好的菌株接入牛肉膏液体培养基(具体配方为牛肉膏3g/L，蛋白胨10g/L， NaCl 10g/L，KH2PO4 1g/L，glucose 1g/L，pH用NaOH调节为7)中，37℃，200rpm，培养周期为24h后菌株的OD值为3，获得种子液。将细长赖氨酸芽孢杆菌种子液，接种量为10％，水份含量为35％，接入300g花生粕，置于1L烧杯，四层纱布封口，每隔24h进行翻料，发酵7d，发酵结束后，物料进行80℃烘干，物料进行80℃烘干，将发酵花生粕烘干后，使用粉碎机粉碎至可通过20目筛。使用分析纯的甲醇和去离子水配制80％(v/v)的甲醇溶液。在50ml离心罐管中加入粉碎后的花生粕和甲醇溶液(5g/25ml)，振荡10min，4000rpm离心10min，取上清液，进行发酵前后的黄曲毒素b1检测(发酵前的花生粕同样粉碎至20目)。
检测方法参考：黄曲霉毒素B1，B2，G1，G2的检测方法(GB5009.22-2016)。检测结果如表2所示：
表2花生粕有氧黄曲霉毒素降解测试
发酵前AFB1 ppb 发酵后AFB1 ppb
花生粕AFB1含量 225 21
从实验结果表明，赖氨酸芽孢杆菌的脱毒效率很高，降解率达到了90％以上。
实施例4花生粕黄曲霉毒素降解测试(厌氧)
将自带黄曲毒素b1的花生粕进行黄曲霉毒素b1无氧条件下降解测试，培养至OD为3的细长赖氨酸芽孢杆菌种子液，接种量为10％，水份含量为35％，300g 物料，用塑料膜进行封口培养，隔绝氧气，发酵7d。发酵结束后，物料进行80 ℃烘干，将发酵花生粕烘干后，使用粉碎机粉碎至可通过20目筛。使用分析纯的甲醇和去离子水配制80％(v/v)的甲醇溶液。在50ml离心罐管中加入粉碎后的花生粕和甲醇溶液(5g/25ml)，振荡10min，4000rpm离心10min，取上清液，进行发酵前后的黄曲毒素b1检测。
检测方法参考：黄曲霉毒素B1，B2，G1，G2的检测方法(GB5009.22-2016)。检测结果如表3所示：
表3花生粕无氧黄曲霉毒素降解测试
Figure RE-GDA0003505644620000101
Figure RE-GDA0003505644620000111
从实验结果表明，赖氨酸芽孢杆菌在厌氧条件下也能具备高效的脱毒效率，该菌株具备很高的应用价值潜力。
实施例5发霉玉米粉的玉米赤霉烯酮降解测试
将发霉玉米粉(来源辽宁桓仁)按照10％的接种量接入细长赖氨酸芽孢杆菌 (种子液OD为3)，以及来自甘肃省科学院生物研究所的细长赖氨酸芽孢杆菌(购自明舟生物，BMZ145592)，与本发明筛选获得的细长赖氨酸芽孢杆菌同样的条件进行培养和降解测试，即将LB平板活化好的菌株接入牛肉膏液体培养基(具体配方为牛肉膏3g/L，蛋白胨10g/L，NaCl 10g/L，KH2PO4 1g/L，glucose 1g/L， pH用NaOH调节为7)中，37℃，200rpm，培养周期为24h，培养至OD为3，将细长赖氨酸芽孢杆菌种子液，接种量为10％，水份含量为35％，接入300g玉米粉，置于1L烧杯，四层纱布封口，每隔24h进行翻料，进行37℃培养，发酵 3d，发酵结束后105℃烘干，进行玉米赤霉烯酮检测。
检测方法参考：玉米赤霉烯酮的检测方法(GB5009.209-2016)。检测结果如表4所示：
表4玉米赤霉烯酮的降解测试
Figure RE-GDA0003505644620000112
从实验结果表明，经过发酵后玉米赤霉烯酮的含量降低了36.7％，表明该菌株有降低玉米赤霉烯酮的能力，且本发明菌株比BMZ145592菌株的降解效果更为显著。
虽然本发明已以较佳实施例公开如上，但其并非用以限定本发明，任何熟悉此技术的人，在不脱离本发明的精神和范围内，都可做各种的改动与修饰，因此本发明的保护范围应该以权利要求书所界定的为准。
序列表
<110> 丰益（上海）生物技术研发中心有限公司
<120> 一种细长赖氨酸芽孢杆菌及其应用
<160> 3
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 1491
<212> DNA
<213> 赖氨酸芽胞杆菌(Bacillus lysine)
<400> 1
ccaggctcag gacgaacgct ggcggcgtgc ctaatacatg caagtcgagc gaacagaaaa 60
ggagcttgct cctttgacgt tagcggcgga cgggtgagta acacgtgggc aacctaccct 120
atagtttggg ataactccgg gaaaccgggg ctaataccga ataatctctt ttgcttcatg 180
gtaaaagact gaaagacggt ttcggctgtc gctataggat gggcccgcgg cgcattagct 240
agttggtgag gtaacggctc accaaggcga cgatgcgtag ccgacctgag agggtgatcg 300
gccacactgg gactgagaca cggcccagac tcctacggga ggcagcagta gggaatcttc 360
cacaatgggc gaaagcctga tggagcaacg ccgcgtgagt gaagaaggtt ttcggatcgt 420
aaaactctgt tgtaagggaa gaacaagtac agtagtaact ggctgtacct tgacggtacc 480
ttattagaaa gccacggcta actacgtgcc agcagccgcg gtaatacgta ggtggcaagc 540
gttgtccgga attattgggc gtaaagcgcg cgcaggcggt cctttaagtc tgatgtgaaa 600
gcccacggct caaccgtgga gggtcattgg aaactggggg acttgagtgc agaagaggaa 660
agtggaattc caagtgtagc ggtgaaatgc gtagagattt ggaggaacac cagtggcgaa 720
ggcgactttc tggtctgtaa ctgacgctga ggcgcgaaag cgtggggagc aaacaggatt 780
agataccctg gtagtccacg ccgtaaacga tgagtgctaa gtgttagggg gtttccgccc 840
cttagtgctg cagctaacgc attaagcact ccgcctgggg agtacggtcg caagactgaa 900
actcaaagga attgacgggg gcccgcacaa gcggtggagc atgtggttta attcgaagca 960
acgcgaagaa ccttaccagg tcttgacatc ccgttgacca ctgtagagat atagtttccc 1020
cttcgggggc aacggtgaca ggtggtgcat ggttgtcgtc agctcgtgtc gtgagatgtt 1080
gggttaagtc ccgcaacgag cgcaaccctt gatcttagtt gccatcattt agttgggcac 1140
tctaaggtga ctgccggtga caaaccggag gaaggtgggg atgacgtcaa atcatcatgc 1200
cccttatgac ctgggctaca cacgtgctac aatggacgat acaaacggtt gccaactcgc 1260
gagagggagc taatccgata aagtcgttct cagttcggat tgtaggctgc aactcgccta 1320
catgaagccg gaatcgctag taatcgcgga tcagcatgcc gcggtgaata cgttcccggg 1380
ccttgtacac accgcccgtc acaccacgag agtttgtaac acccgaagtc ggtgaggtaa 1440
ccttttggag ccagccgccg aaggtgggat agatgattgg ggtgaagtcg t 1491
<210> 2
<211> 17
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 2
gtttgatcat ggctcag 17
<210> 3
<211> 22
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 3
tacggttacc ttgttacgac tt 22

Claims (10)

1.细长赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus macroides)菌株，其包含与SEQ ID NO:1具有至少95％同一性，优选至少99％同一性的核苷酸序列，最优选地，其包含SEQ ID NO:1的核苷酸序列。
2.如权利要求1所述的细长赖氨酸芽孢杆菌菌株，于2021年11月29日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏编号为CGMCC No.23992。
3.权利要求1或2所述菌株在降解黄曲霉毒素B1和/或降解玉米赤霉烯酮中的应用。
4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，将所述菌株的发酵产物用于降解黄曲霉毒素B1和/或玉米赤霉烯酮，所述发酵产物为发酵液、发酵上清液、细胞悬浮液和/或胞内物质。
5.如权利要求4所述的应用，其特征在于，所述发酵产物为有氧发酵产物和/或厌氧发酵产物。
6.用于降解黄曲霉毒素B1和/或降解玉米赤霉烯酮的制剂，其特征在于，所述制剂包括权利要求1或2所述菌株的发酵产物，所述发酵产物为发酵液、发酵上清液、细胞悬浮液和/或胞内物质。
7.如权利要求6所述的制剂，其特征在于，所述发酵产物为有氧发酵产物和/或厌氧发酵产物。
8.如权利要求6或7所述的制剂，其特征在于，所述制剂的形式为液体、喷粉、干燥可湿性粉剂或干燥可湿性颗粒。
9.降解黄曲霉毒素B1和/或降解玉米赤霉烯酮的方法，其特征在于，所述方法包括将权利要求1或2所述的菌株与含有黄曲霉毒素B1和/或玉米赤霉烯酮的物料共同发酵的步骤，或所述方法包括将权利要求1或2所述菌株的发酵产物或权利要求6-8任一项所述的制剂与含有黄曲霉毒素B1和/或玉米赤霉烯酮的物料混合的步骤。
10.如权利要求9所述的方法，其特征在于，所述权利要求1或2所述的菌株与含有黄曲霉毒素B1和/或玉米赤霉烯酮的物料共同发酵的步骤为有氧发酵或厌氧发酵；所述权利要求1或2所述菌株的发酵产物为有氧发酵产物和/或厌氧发酵产物，如发酵液、发酵上清液、细胞悬浮液和/或胞内物质。
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