CN116375685A - 一种法舒地尔衍生物及其制备方法和应用 - Google Patents
一种法舒地尔衍生物及其制备方法和应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN116375685A CN116375685A CN202310322562.7A CN202310322562A CN116375685A CN 116375685 A CN116375685 A CN 116375685A CN 202310322562 A CN202310322562 A CN 202310322562A CN 116375685 A CN116375685 A CN 116375685A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- mmol
- added
- reaction
- fasudil
- water
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- NGOGFTYYXHNFQH-UHFFFAOYSA-N fasudil Chemical class C=1C=CC2=CN=CC=C2C=1S(=O)(=O)N1CCCNCC1 NGOGFTYYXHNFQH-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 54
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 21
- 229960002435 fasudil Drugs 0.000 claims abstract description 27
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 25
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 115
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 54
- -1 fasudil compound Chemical class 0.000 claims description 48
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 12
- 238000006482 condensation reaction Methods 0.000 claims description 10
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 8
- 208000032382 Ischaemic stroke Diseases 0.000 claims description 7
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 claims description 6
- 125000003545 alkoxy group Chemical group 0.000 claims description 4
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 claims description 3
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 3
- 230000002253 anti-ischaemic effect Effects 0.000 claims description 3
- 125000004093 cyano group Chemical group *C#N 0.000 claims description 3
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims description 3
- 230000000324 neuroprotective effect Effects 0.000 claims description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims 2
- 230000000926 neurological effect Effects 0.000 claims 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 claims 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 abstract description 60
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 abstract description 53
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 30
- 210000005013 brain tissue Anatomy 0.000 abstract description 26
- 208000006011 Stroke Diseases 0.000 abstract description 14
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 abstract description 10
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 abstract description 8
- 230000002490 cerebral effect Effects 0.000 abstract description 7
- 206010008190 Cerebrovascular accident Diseases 0.000 abstract description 6
- 239000011435 rock Substances 0.000 abstract description 6
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 abstract description 5
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 abstract description 4
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 abstract description 4
- 230000000302 ischemic effect Effects 0.000 abstract description 4
- 230000007760 free radical scavenging Effects 0.000 abstract description 3
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 abstract description 3
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 abstract description 3
- 210000003050 axon Anatomy 0.000 abstract description 2
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 abstract description 2
- 230000000916 dilatatory effect Effects 0.000 abstract description 2
- 230000004112 neuroprotection Effects 0.000 abstract description 2
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 abstract description 2
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 abstract description 2
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 196
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 100
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 93
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 84
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 66
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 61
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 57
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 55
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 52
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 50
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 48
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 33
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 31
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 29
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical class O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 28
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 27
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 27
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 26
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 25
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 24
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 23
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 23
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 23
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 21
- 238000000967 suction filtration Methods 0.000 description 21
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 19
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 19
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 18
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 18
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 description 18
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 16
- AWJUIBRHMBBTKR-UHFFFAOYSA-N isoquinoline Chemical compound C1=NC=CC2=CC=CC=C21 AWJUIBRHMBBTKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 1-Ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide Substances CCN=C=NCCCN(C)C LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 3-(dimethylamino)propyliminomethylidene-ethylazanium;chloride Chemical compound Cl.CCN=C=NCCCN(C)C FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N hydroxybenzotriazole Substances O=C1C=CC=C2NNN=C12 NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 14
- BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L potassium carbonate Chemical compound [K+].[K+].[O-]C([O-])=O BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 14
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 14
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 13
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 13
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 13
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 13
- WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N Acetic anhydride Chemical compound CC(=O)OC(C)=O WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 12
- 238000002330 electrospray ionisation mass spectrometry Methods 0.000 description 12
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 12
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 12
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 12
- AUJXJFHANFIVKH-GQCTYLIASA-N trans-methylferulate Chemical compound COC(=O)\C=C\C1=CC=C(O)C(OC)=C1 AUJXJFHANFIVKH-GQCTYLIASA-N 0.000 description 12
- WHIDHHUCCTYJKA-UHFFFAOYSA-N isoquinoline-5-sulfonyl chloride Chemical compound N1=CC=C2C(S(=O)(=O)Cl)=CC=CC2=C1 WHIDHHUCCTYJKA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 11
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 11
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 10
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 10
- SQGYOTSLMSWVJD-UHFFFAOYSA-N silver(1+) nitrate Chemical compound [Ag+].[O-]N(=O)=O SQGYOTSLMSWVJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 10
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 9
- 239000012065 filter cake Substances 0.000 description 9
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 9
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 9
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 9
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 9
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 8
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 8
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 8
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 8
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 8
- 150000003254 radicals Chemical class 0.000 description 8
- FYSNRJHAOHDILO-UHFFFAOYSA-N thionyl chloride Chemical compound ClS(Cl)=O FYSNRJHAOHDILO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 8
- SMZOUWXMTYCWNB-UHFFFAOYSA-N 2-(2-methoxy-5-methylphenyl)ethanamine Chemical compound COC1=CC=C(C)C=C1CCN SMZOUWXMTYCWNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N 2-Propenoic acid Natural products OC(=O)C=C NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 206010067484 Adverse reaction Diseases 0.000 description 7
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 7
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 7
- 230000006838 adverse reaction Effects 0.000 description 7
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 7
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 7
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 7
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 7
- 229910000027 potassium carbonate Inorganic materials 0.000 description 7
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 7
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 7
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 7
- ILWVAHWMSULXIG-UHFFFAOYSA-N 1-sulfanyloctan-1-ol Chemical compound CCCCCCCC(O)S ILWVAHWMSULXIG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- ZDSKIIMVDTYOLV-UHFFFAOYSA-N 2,2-dimethylchromene-6-carbaldehyde Chemical compound C1=C(C=O)C=C2C=CC(C)(C)OC2=C1 ZDSKIIMVDTYOLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- UPTYCYWTFGTCCG-UHFFFAOYSA-N 5-(1-piperazinylsulfonyl)isoquinoline Chemical compound C=1C=CC2=CN=CC=C2C=1S(=O)(=O)N1CCNCC1 UPTYCYWTFGTCCG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- AVXURJPOCDRRFD-UHFFFAOYSA-N Hydroxylamine Chemical class ON AVXURJPOCDRRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 102000004889 Interleukin-6 Human genes 0.000 description 6
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 6
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- REFJWTPEDVJJIY-UHFFFAOYSA-N Quercetin Chemical compound C=1C(O)=CC(O)=C(C(C=2O)=O)C=1OC=2C1=CC=C(O)C(O)=C1 REFJWTPEDVJJIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 6
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 6
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 6
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 6
- JTLOUXXZZFFBBW-UHFFFAOYSA-N isoferulic acid methyl ester Natural products COC(=O)C=CC1=CC=C(OC)C(O)=C1 JTLOUXXZZFFBBW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- AUJXJFHANFIVKH-UHFFFAOYSA-N methyl cis-ferulate Natural products COC(=O)C=CC1=CC=C(O)C(OC)=C1 AUJXJFHANFIVKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 6
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 6
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 6
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 description 5
- 229910002651 NO3 Inorganic materials 0.000 description 5
- NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N Nitrate Chemical compound [O-][N+]([O-])=O NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 230000002292 Radical scavenging effect Effects 0.000 description 5
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 5
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 5
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 5
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 5
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 5
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 5
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 5
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 5
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 5
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 5
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 5
- IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N hydrogen chloride Substances Cl.Cl IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 229910000041 hydrogen chloride Inorganic materials 0.000 description 5
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 5
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 5
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 5
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 5
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 5
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 5
- 229910001961 silver nitrate Inorganic materials 0.000 description 5
- LVPFMTDPQFCFSL-UHFFFAOYSA-N 4-(2-methylbut-3-yn-2-yloxy)benzaldehyde Chemical compound C#CC(C)(C)OC1=CC=C(C=O)C=C1 LVPFMTDPQFCFSL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N Malonic acid Chemical compound OC(=O)CC(O)=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108010019160 Pancreatin Proteins 0.000 description 4
- PCMORTLOPMLEFB-ONEGZZNKSA-N Sinapic acid Natural products COC1=CC(\C=C\C(O)=O)=CC(OC)=C1O PCMORTLOPMLEFB-ONEGZZNKSA-N 0.000 description 4
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 4
- 230000036461 convulsion Effects 0.000 description 4
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 4
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 4
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 4
- 235000019136 lipoic acid Nutrition 0.000 description 4
- AGBQKNBQESQNJD-UHFFFAOYSA-N lipoic acid Chemical compound OC(=O)CCCCC1CCSS1 AGBQKNBQESQNJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 4
- 210000005036 nerve Anatomy 0.000 description 4
- 229940055695 pancreatin Drugs 0.000 description 4
- NLKNQRATVPKPDG-UHFFFAOYSA-M potassium iodide Substances [K+].[I-] NLKNQRATVPKPDG-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 4
- 239000012086 standard solution Substances 0.000 description 4
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 4
- 229960002663 thioctic acid Drugs 0.000 description 4
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 4
- FHPNLCLHMNPLEW-UHFFFAOYSA-N 1-[chloro-(4-fluorophenyl)methyl]-4-fluorobenzene Chemical compound C1=CC(F)=CC=C1C(Cl)C1=CC=C(F)C=C1 FHPNLCLHMNPLEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HGINCPLSRVDWNT-UHFFFAOYSA-N Acrolein Chemical compound C=CC=O HGINCPLSRVDWNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000016988 Hemorrhagic Stroke Diseases 0.000 description 3
- IHKNVZISLLDMOR-UHFFFAOYSA-N O-Acetylferulic acid Natural products COC1=CC(C=CC(O)=O)=CC=C1OC(C)=O IHKNVZISLLDMOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- IHKNVZISLLDMOR-GQCTYLIASA-N O-acetylferulic acid Chemical compound COC1=CC(\C=C\C(O)=O)=CC=C1OC(C)=O IHKNVZISLLDMOR-GQCTYLIASA-N 0.000 description 3
- ZVOLCUVKHLEPEV-UHFFFAOYSA-N Quercetagetin Natural products C1=C(O)C(O)=CC=C1C1=C(O)C(=O)C2=C(O)C(O)=C(O)C=C2O1 ZVOLCUVKHLEPEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HWTZYBCRDDUBJY-UHFFFAOYSA-N Rhynchosin Natural products C1=C(O)C(O)=CC=C1C1=C(O)C(=O)C2=CC(O)=C(O)C=C2O1 HWTZYBCRDDUBJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 3
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 3
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 3
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 3
- 230000034994 death Effects 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 3
- MGJZITXUQXWAKY-UHFFFAOYSA-N diphenyl-(2,4,6-trinitrophenyl)iminoazanium Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC([N+](=O)[O-])=CC([N+]([O-])=O)=C1N=[N+](C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 MGJZITXUQXWAKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 3
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 3
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 3
- 210000002216 heart Anatomy 0.000 description 3
- 239000005457 ice water Substances 0.000 description 3
- 230000017306 interleukin-6 production Effects 0.000 description 3
- 208000020658 intracerebral hemorrhage Diseases 0.000 description 3
- MWDZOUNAPSSOEL-UHFFFAOYSA-N kaempferol Natural products OC1=C(C(=O)c2cc(O)cc(O)c2O1)c3ccc(O)cc3 MWDZOUNAPSSOEL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 3
- 230000031700 light absorption Effects 0.000 description 3
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 3
- 230000037353 metabolic pathway Effects 0.000 description 3
- 230000004224 protection Effects 0.000 description 3
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229960001285 quercetin Drugs 0.000 description 3
- 235000005875 quercetin Nutrition 0.000 description 3
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- PCMORTLOPMLEFB-UHFFFAOYSA-N sinapinic acid Natural products COC1=CC(C=CC(O)=O)=CC(OC)=C1O PCMORTLOPMLEFB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 3
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 3
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000004584 weight gain Effects 0.000 description 3
- 235000019786 weight gain Nutrition 0.000 description 3
- KSEBMYQBYZTDHS-HWKANZROSA-M (E)-Ferulic acid Natural products COC1=CC(\C=C\C([O-])=O)=CC=C1O KSEBMYQBYZTDHS-HWKANZROSA-M 0.000 description 2
- NTMNKCUDLWGDMX-VAWYXSNFSA-N (Z)-2-acetyl-3-(3,4-dihydroxyphenyl)-4-oxopent-2-enoic acid Chemical compound CC(=O)C(\C(O)=O)=C(\C(C)=O)C1=CC=C(O)C(O)=C1 NTMNKCUDLWGDMX-VAWYXSNFSA-N 0.000 description 2
- JVKUCNQGESRUCL-UHFFFAOYSA-N 2-Hydroxyethyl 12-hydroxyoctadecanoate Chemical compound CCCCCCC(O)CCCCCCCCCCC(=O)OCCO JVKUCNQGESRUCL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 4-Dimethylaminopyridine Chemical compound CN(C)C1=CC=NC=C1 VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NGSWKAQJJWESNS-UHFFFAOYSA-N 4-coumaric acid Chemical compound OC(=O)C=CC1=CC=C(O)C=C1 NGSWKAQJJWESNS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RGHHSNMVTDWUBI-UHFFFAOYSA-N 4-hydroxybenzaldehyde Chemical compound OC1=CC=C(C=O)C=C1 RGHHSNMVTDWUBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GOZMBJCYMQQACI-UHFFFAOYSA-N 6,7-dimethyl-3-[[methyl-[2-[methyl-[[1-[3-(trifluoromethyl)phenyl]indol-3-yl]methyl]amino]ethyl]amino]methyl]chromen-4-one;dihydrochloride Chemical compound Cl.Cl.C=1OC2=CC(C)=C(C)C=C2C(=O)C=1CN(C)CCN(C)CC(C1=CC=CC=C11)=CN1C1=CC=CC(C(F)(F)F)=C1 GOZMBJCYMQQACI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-M Acrylate Chemical compound [O-]C(=O)C=C NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N Argon Chemical compound [Ar] XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YVOLJDALUCDWPL-UHFFFAOYSA-N C(C)(=O)/C(/C(=O)O)=CC1=CC=C(C=C1)O Chemical compound C(C)(=O)/C(/C(=O)O)=CC1=CC=C(C=C1)O YVOLJDALUCDWPL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101100348341 Caenorhabditis elegans gas-1 gene Proteins 0.000 description 2
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 2
- 102000016285 Guanine Nucleotide Exchange Factors Human genes 0.000 description 2
- 108010067218 Guanine Nucleotide Exchange Factors Proteins 0.000 description 2
- OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N Hydrazine Chemical compound NN OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101100447658 Mus musculus Gas1 gene Proteins 0.000 description 2
- JLTDJTHDQAWBAV-UHFFFAOYSA-N N,N-dimethylaniline Chemical compound CN(C)C1=CC=CC=C1 JLTDJTHDQAWBAV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GLUUGHFHXGJENI-UHFFFAOYSA-N Piperazine Chemical compound C1CNCCN1 GLUUGHFHXGJENI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N Piperidine Chemical compound C1CCNCC1 NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920001304 Solutol HS 15 Polymers 0.000 description 2
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 231100000215 acute (single dose) toxicity testing Toxicity 0.000 description 2
- 230000003064 anti-oxidating effect Effects 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 230000008499 blood brain barrier function Effects 0.000 description 2
- 230000036770 blood supply Effects 0.000 description 2
- 210000001218 blood-brain barrier Anatomy 0.000 description 2
- 238000007664 blowing Methods 0.000 description 2
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 2
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 2
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 238000004821 distillation Methods 0.000 description 2
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 2
- 238000003810 ethyl acetate extraction Methods 0.000 description 2
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 2
- KSEBMYQBYZTDHS-HWKANZROSA-N ferulic acid Chemical compound COC1=CC(\C=C\C(O)=O)=CC=C1O KSEBMYQBYZTDHS-HWKANZROSA-N 0.000 description 2
- 229940114124 ferulic acid Drugs 0.000 description 2
- 235000001785 ferulic acid Nutrition 0.000 description 2
- KSEBMYQBYZTDHS-UHFFFAOYSA-N ferulic acid Natural products COC1=CC(C=CC(O)=O)=CC=C1O KSEBMYQBYZTDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000006870 function Effects 0.000 description 2
- 230000007946 glucose deprivation Effects 0.000 description 2
- ZFGMDIBRIDKWMY-PASTXAENSA-N heparin Chemical compound CC(O)=N[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](COS(O)(=O)=O)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](C(O)=O)O[C@@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](OS(O)(=O)=O)[C@@H](O[C@@H]3[C@@H](OC(O)[C@H](OS(O)(=O)=O)[C@H]3O)C(O)=O)O[C@@H]2O)CS(O)(=O)=O)[C@H](O)[C@H]1O ZFGMDIBRIDKWMY-PASTXAENSA-N 0.000 description 2
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 2
- 229960001008 heparin sodium Drugs 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 2
- 208000028867 ischemia Diseases 0.000 description 2
- 238000002386 leaching Methods 0.000 description 2
- 230000031142 liver development Effects 0.000 description 2
- 230000007040 lung development Effects 0.000 description 2
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 2
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 2
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000004065 mitochondrial dysfunction Effects 0.000 description 2
- 239000012046 mixed solvent Substances 0.000 description 2
- 239000012452 mother liquor Substances 0.000 description 2
- 239000010413 mother solution Substances 0.000 description 2
- VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N n'-amino-n-iminomethanimidamide Chemical compound N\N=C\N=N VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N 0.000 description 2
- 238000011017 operating method Methods 0.000 description 2
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 description 2
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 2
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 2
- 229940127557 pharmaceutical product Drugs 0.000 description 2
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 2
- 230000036470 plasma concentration Effects 0.000 description 2
- 125000001436 propyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- 238000010791 quenching Methods 0.000 description 2
- 230000000171 quenching effect Effects 0.000 description 2
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 2
- BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N renifolin D Natural products CC(=C)[C@@H]1Cc2c(O)c(O)ccc2[C@H]1CC(=O)c3ccc(O)cc3O BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N 0.000 description 2
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 2
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 2
- 230000003068 static effect Effects 0.000 description 2
- 230000035882 stress Effects 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N sulfuric acid Substances OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QAIPRVGONGVQAS-DUXPYHPUSA-N trans-caffeic acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C1=CC=C(O)C(O)=C1 QAIPRVGONGVQAS-DUXPYHPUSA-N 0.000 description 2
- QURCVMIEKCOAJU-UHFFFAOYSA-N trans-isoferulic acid Natural products COC1=CC=C(C=CC(O)=O)C=C1O QURCVMIEKCOAJU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010792 warming Methods 0.000 description 2
- UNKUGCCLZXXHQP-UHFFFAOYSA-N (4-isoquinolin-5-ylsulfonylpiperazin-1-yl)-phenylmethanone Chemical compound C1CN(S(=O)(=O)C=2C3=CC=NC=C3C=CC=2)CCN1C(=O)C1=CC=CC=C1 UNKUGCCLZXXHQP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ACEAELOMUCBPJP-UHFFFAOYSA-N (E)-3,4,5-trihydroxycinnamic acid Natural products OC(=O)C=CC1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 ACEAELOMUCBPJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WBYWAXJHAXSJNI-VOTSOKGWSA-M .beta-Phenylacrylic acid Natural products [O-]C(=O)\C=C\C1=CC=CC=C1 WBYWAXJHAXSJNI-VOTSOKGWSA-M 0.000 description 1
- PAAZPARNPHGIKF-UHFFFAOYSA-N 1,2-dibromoethane Chemical compound BrCCBr PAAZPARNPHGIKF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VEFLKXRACNJHOV-UHFFFAOYSA-N 1,3-dibromopropane Chemical compound BrCCCBr VEFLKXRACNJHOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FQUYSHZXSKYCSY-UHFFFAOYSA-N 1,4-diazepane Chemical compound C1CNCCNC1 FQUYSHZXSKYCSY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ULTHEAFYOOPTTB-UHFFFAOYSA-N 1,4-dibromobutane Chemical compound BrCCCCBr ULTHEAFYOOPTTB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IBODDUNKEPPBKW-UHFFFAOYSA-N 1,5-dibromopentane Chemical compound BrCCCCCBr IBODDUNKEPPBKW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SGRHVVLXEBNBDV-UHFFFAOYSA-N 1,6-dibromohexane Chemical compound BrCCCCCCBr SGRHVVLXEBNBDV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- QSILYWCNPOLKPN-UHFFFAOYSA-N 3-chloro-3-methylbut-1-yne Chemical compound CC(C)(Cl)C#C QSILYWCNPOLKPN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NHQDETIJWKXCTC-UHFFFAOYSA-N 3-chloroperbenzoic acid Chemical compound OOC(=O)C1=CC=CC(Cl)=C1 NHQDETIJWKXCTC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LSQARZALBDFYQZ-UHFFFAOYSA-N 4,4'-difluorobenzophenone Chemical compound C1=CC(F)=CC=C1C(=O)C1=CC=C(F)C=C1 LSQARZALBDFYQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NGSWKAQJJWESNS-ZZXKWVIFSA-M 4-Hydroxycinnamate Natural products OC1=CC=C(\C=C\C([O-])=O)C=C1 NGSWKAQJJWESNS-ZZXKWVIFSA-M 0.000 description 1
- 229960000549 4-dimethylaminophenol Drugs 0.000 description 1
- BWDBEAQIHAEVLV-UHFFFAOYSA-N 6-methylheptan-1-ol Chemical compound CC(C)CCCCCO BWDBEAQIHAEVLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical compound [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DFYRUELUNQRZTB-UHFFFAOYSA-N Acetovanillone Natural products COC1=CC(C(C)=O)=CC=C1O DFYRUELUNQRZTB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000010444 Acidosis Diseases 0.000 description 1
- 208000031104 Arterial Occlusive disease Diseases 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- RQCXTONUIQLRRP-CSKARUKUSA-N BrCCCCCCOC1=C(C=C(C=C1)/C=C/C(=O)OC)OC Chemical compound BrCCCCCCOC1=C(C=C(C=C1)/C=C/C(=O)OC)OC RQCXTONUIQLRRP-CSKARUKUSA-N 0.000 description 1
- RULQVVLDQMKCPE-VQHVLOKHSA-N BrCCCCCOC1=C(C=C(C=C1)/C=C/C(=O)OC)OC Chemical compound BrCCCCCOC1=C(C=C(C=C1)/C=C/C(=O)OC)OC RULQVVLDQMKCPE-VQHVLOKHSA-N 0.000 description 1
- VWEWZEYMQDJWPQ-SOFGYWHQSA-N BrCCCCOC1=C(C=C(C=C1)/C=C/C(=O)OC)OC Chemical compound BrCCCCOC1=C(C=C(C=C1)/C=C/C(=O)OC)OC VWEWZEYMQDJWPQ-SOFGYWHQSA-N 0.000 description 1
- 201000006474 Brain Ischemia Diseases 0.000 description 1
- KXDHJXZQYSOELW-UHFFFAOYSA-M Carbamate Chemical compound NC([O-])=O KXDHJXZQYSOELW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 206010008089 Cerebral artery occlusion Diseases 0.000 description 1
- 206010008111 Cerebral haemorrhage Diseases 0.000 description 1
- 206010008120 Cerebral ischaemia Diseases 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 206010069729 Collateral circulation Diseases 0.000 description 1
- 230000005778 DNA damage Effects 0.000 description 1
- 231100000277 DNA damage Toxicity 0.000 description 1
- 101100114697 Danio rerio cpeb1 gene Proteins 0.000 description 1
- 238000001061 Dunnett's test Methods 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000008157 ELISA kit Methods 0.000 description 1
- 208000005189 Embolism Diseases 0.000 description 1
- 102100030011 Endoribonuclease Human genes 0.000 description 1
- 101710199605 Endoribonuclease Proteins 0.000 description 1
- 208000010228 Erectile Dysfunction Diseases 0.000 description 1
- 208000010412 Glaucoma Diseases 0.000 description 1
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 description 1
- 206010021143 Hypoxia Diseases 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 206010022489 Insulin Resistance Diseases 0.000 description 1
- 108010083687 Ion Pumps Proteins 0.000 description 1
- 231100000002 MTT assay Toxicity 0.000 description 1
- 238000000134 MTT assay Methods 0.000 description 1
- NULAJYZBOLVQPQ-UHFFFAOYSA-N N-(1-naphthyl)ethylenediamine Chemical compound C1=CC=C2C(NCCN)=CC=CC2=C1 NULAJYZBOLVQPQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 206010067482 No adverse event Diseases 0.000 description 1
- 208000001132 Osteoporosis Diseases 0.000 description 1
- 208000037273 Pathologic Processes Diseases 0.000 description 1
- YGYAWVDWMABLBF-UHFFFAOYSA-N Phosgene Chemical compound ClC(Cl)=O YGYAWVDWMABLBF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002582 Polyethylene Glycol 600 Polymers 0.000 description 1
- NPYPAHLBTDXSSS-UHFFFAOYSA-N Potassium ion Chemical compound [K+] NPYPAHLBTDXSSS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000001253 Protein Kinase Human genes 0.000 description 1
- 208000001647 Renal Insufficiency Diseases 0.000 description 1
- 102100039314 Rho-associated protein kinase 2 Human genes 0.000 description 1
- 101710088493 Rho-associated protein kinase 2 Proteins 0.000 description 1
- 101710113029 Serine/threonine-protein kinase Proteins 0.000 description 1
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 1
- 208000032851 Subarachnoid Hemorrhage Diseases 0.000 description 1
- 102000019259 Succinate Dehydrogenase Human genes 0.000 description 1
- 108010012901 Succinate Dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- 208000007536 Thrombosis Diseases 0.000 description 1
- 208000032594 Vascular Remodeling Diseases 0.000 description 1
- 235000005811 Viola adunca Nutrition 0.000 description 1
- 240000009038 Viola odorata Species 0.000 description 1
- 235000013487 Viola odorata Nutrition 0.000 description 1
- 235000002254 Viola papilionacea Nutrition 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 230000007950 acidosis Effects 0.000 description 1
- 208000026545 acidosis disease Diseases 0.000 description 1
- 238000011047 acute toxicity test Methods 0.000 description 1
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 1
- 230000003044 adaptive effect Effects 0.000 description 1
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 1
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 1
- 238000000540 analysis of variance Methods 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000000702 anti-platelet effect Effects 0.000 description 1
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 1
- 230000010100 anticoagulation Effects 0.000 description 1
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 1
- 229910052786 argon Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000008321 arterial blood flow Effects 0.000 description 1
- 208000021328 arterial occlusion Diseases 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 description 1
- RWCCWEUUXYIKHB-UHFFFAOYSA-N benzophenone Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(=O)C1=CC=CC=C1 RWCCWEUUXYIKHB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012965 benzophenone Substances 0.000 description 1
- PASDCCFISLVPSO-UHFFFAOYSA-N benzoyl chloride Chemical compound ClC(=O)C1=CC=CC=C1 PASDCCFISLVPSO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HSDAJNMJOMSNEV-UHFFFAOYSA-N benzyl chloroformate Chemical compound ClC(=O)OCC1=CC=CC=C1 HSDAJNMJOMSNEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DGUVYSKQPBATBX-UHFFFAOYSA-N benzylbenzene;hydrochloride Chemical compound Cl.C=1C=CC=CC=1CC1=CC=CC=C1 DGUVYSKQPBATBX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- WCTZPQWLFWZYJE-UHFFFAOYSA-N bis(4-fluorophenyl)methanol Chemical compound C=1C=C(F)C=CC=1C(O)C1=CC=C(F)C=C1 WCTZPQWLFWZYJE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 description 1
- 230000036765 blood level Effects 0.000 description 1
- 210000004958 brain cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000006931 brain damage Effects 0.000 description 1
- 231100000874 brain damage Toxicity 0.000 description 1
- 208000029028 brain injury Diseases 0.000 description 1
- 125000000484 butyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 235000004883 caffeic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229940074360 caffeic acid Drugs 0.000 description 1
- 230000001964 calcium overload Effects 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 238000010523 cascade reaction Methods 0.000 description 1
- 230000005779 cell damage Effects 0.000 description 1
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 1
- 208000037887 cell injury Diseases 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 206010008118 cerebral infarction Diseases 0.000 description 1
- WIIZWVCIJKGZOK-RKDXNWHRSA-N chloramphenicol Chemical compound ClC(Cl)C(=O)N[C@H](CO)[C@H](O)C1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 WIIZWVCIJKGZOK-RKDXNWHRSA-N 0.000 description 1
- 229960005091 chloramphenicol Drugs 0.000 description 1
- FZFAMSAMCHXGEF-UHFFFAOYSA-N chloro formate Chemical compound ClOC=O FZFAMSAMCHXGEF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000013985 cinnamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229930016911 cinnamic acid Natural products 0.000 description 1
- QAIPRVGONGVQAS-UHFFFAOYSA-N cis-caffeic acid Natural products OC(=O)C=CC1=CC=C(O)C(O)=C1 QAIPRVGONGVQAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012230 colorless oil Substances 0.000 description 1
- 230000001143 conditioned effect Effects 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 230000016396 cytokine production Effects 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000263 cytotoxicity test Toxicity 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 230000002939 deleterious effect Effects 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 150000008049 diazo compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000012470 diluted sample Substances 0.000 description 1
- CZZYITDELCSZES-UHFFFAOYSA-N diphenylmethane Chemical compound C=1C=CC=CC=1CC1=CC=CC=C1 CZZYITDELCSZES-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QILSFLSDHQAZET-UHFFFAOYSA-N diphenylmethanol Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(O)C1=CC=CC=C1 QILSFLSDHQAZET-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NWVNXDKZIQLBNM-UHFFFAOYSA-N diphenylmethylpiperazine Chemical compound C1CNCCN1C(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 NWVNXDKZIQLBNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MQRJBSHKWOFOGF-UHFFFAOYSA-L disodium;carbonate;hydrate Chemical class O.[Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O MQRJBSHKWOFOGF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000001647 drug administration Methods 0.000 description 1
- 229940000406 drug candidate Drugs 0.000 description 1
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 125000001301 ethoxy group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])O* 0.000 description 1
- PQVSTLUFSYVLTO-UHFFFAOYSA-N ethyl n-ethoxycarbonylcarbamate Chemical compound CCOC(=O)NC(=O)OCC PQVSTLUFSYVLTO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003492 excitotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000063 excitotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 239000003777 experimental drug Substances 0.000 description 1
- 238000005562 fading Methods 0.000 description 1
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000012737 fresh medium Substances 0.000 description 1
- 238000003958 fumigation Methods 0.000 description 1
- 238000002290 gas chromatography-mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 1
- 125000004051 hexyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 230000013632 homeostatic process Effects 0.000 description 1
- ZAVGJDAFCZAWSZ-UHFFFAOYSA-N hydroxyfasudil Chemical compound C1=CC=C2C(O)=NC=CC2=C1S(=O)(=O)N1CCCNCC1 ZAVGJDAFCZAWSZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000007954 hypoxia Effects 0.000 description 1
- 201000001881 impotence Diseases 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 230000004941 influx Effects 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 239000011630 iodine Substances 0.000 description 1
- HVTICUPFWKNHNG-UHFFFAOYSA-N iodoethane Chemical compound CCI HVTICUPFWKNHNG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002427 irreversible effect Effects 0.000 description 1
- 230000004171 ischemic cascade Effects 0.000 description 1
- 201000006370 kidney failure Diseases 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- GLXDVVHUTZTUQK-UHFFFAOYSA-M lithium hydroxide monohydrate Substances [Li+].O.[OH-] GLXDVVHUTZTUQK-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229940040692 lithium hydroxide monohydrate Drugs 0.000 description 1
- 230000028161 membrane depolarization Effects 0.000 description 1
- 230000003340 mental effect Effects 0.000 description 1
- 230000006996 mental state Effects 0.000 description 1
- WSFSSNUMVMOOMR-BJUDXGSMSA-N methanone Chemical compound O=[11CH2] WSFSSNUMVMOOMR-BJUDXGSMSA-N 0.000 description 1
- WBYWAXJHAXSJNI-UHFFFAOYSA-N methyl p-hydroxycinnamate Natural products OC(=O)C=CC1=CC=CC=C1 WBYWAXJHAXSJNI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000003470 mitochondria Anatomy 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 230000004770 neurodegeneration Effects 0.000 description 1
- 210000004498 neuroglial cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000016273 neuron death Effects 0.000 description 1
- 230000001546 nitrifying effect Effects 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000001893 nitrooxy group Chemical group [O-][N+](=O)O* 0.000 description 1
- 238000010606 normalization Methods 0.000 description 1
- 238000001543 one-way ANOVA Methods 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 239000006186 oral dosage form Substances 0.000 description 1
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 230000009054 pathological process Effects 0.000 description 1
- 230000035778 pathophysiological process Effects 0.000 description 1
- 125000001147 pentyl group Chemical group C(CCCC)* 0.000 description 1
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 1
- 230000004962 physiological condition Effects 0.000 description 1
- 238000007747 plating Methods 0.000 description 1
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 1
- 235000013824 polyphenols Nutrition 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 229910001414 potassium ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000651 prodrug Substances 0.000 description 1
- 229940002612 prodrug Drugs 0.000 description 1
- 108060006633 protein kinase Proteins 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 239000003642 reactive oxygen metabolite Substances 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 239000013558 reference substance Substances 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000012047 saturated solution Substances 0.000 description 1
- 230000002000 scavenging effect Effects 0.000 description 1
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012679 serum free medium Substances 0.000 description 1
- 239000000779 smoke Substances 0.000 description 1
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 1
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 229910001415 sodium ion Inorganic materials 0.000 description 1
- AKHNMLFCWUSKQB-UHFFFAOYSA-L sodium thiosulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=S AKHNMLFCWUSKQB-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 235000019345 sodium thiosulphate Nutrition 0.000 description 1
- 238000007711 solidification Methods 0.000 description 1
- 230000008023 solidification Effects 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 238000005556 structure-activity relationship Methods 0.000 description 1
- FDDDEECHVMSUSB-UHFFFAOYSA-N sulfanilamide Chemical compound NC1=CC=C(S(N)(=O)=O)C=C1 FDDDEECHVMSUSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000472 sulfonyl group Chemical group *S(*)(=O)=O 0.000 description 1
- 150000003462 sulfoxides Chemical class 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- JRMUNVKIHCOMHV-UHFFFAOYSA-M tetrabutylammonium bromide Chemical compound [Br-].CCCC[N+](CCCC)(CCCC)CCCC JRMUNVKIHCOMHV-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 125000003831 tetrazolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 238000013151 thrombectomy Methods 0.000 description 1
- 230000002537 thrombolytic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011269 treatment regimen Methods 0.000 description 1
- 230000006433 tumor necrosis factor production Effects 0.000 description 1
- 208000001072 type 2 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 230000024883 vasodilation Effects 0.000 description 1
- 238000012795 verification Methods 0.000 description 1
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
- C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
- C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D217/00—Heterocyclic compounds containing isoquinoline or hydrogenated isoquinoline ring systems
- C07D217/02—Heterocyclic compounds containing isoquinoline or hydrogenated isoquinoline ring systems with only hydrogen atoms or radicals containing only carbon and hydrogen atoms, directly attached to carbon atoms of the nitrogen-containing ring; Alkylene-bis-isoquinolines
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
- C07D405/14—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing three or more hetero rings
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
- C07D409/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
- Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
- Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
- Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Neurology (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Vascular Medicine (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Abstract
本发明提供了一种法舒地尔衍生物及其制备方法和应用，属于医药合成技术领域。本发明提供的法舒地尔衍生物，具有式I所示结构；法舒地尔是ROCK抑制剂，通过抑制ROCK起到强效扩张血管、保护神经元细胞、促进轴突再生、保护缺血脑组织的作用。本发明以法舒地尔作为母核结构，制得的法舒地尔衍生物自由基清除效率高，副作用小，抑制炎症因子效力强，抗氧化应激能力好，能够用于制备神经保护及治疗脑卒中疾病的药物。
Description
技术领域
本发明涉及医药合成技术领域，特别涉及一种法舒地尔衍生物及其制备方法和应用。
背景技术
脑卒中(Stroke)，又称为中风，是全球第二大最常见的死亡原因。脑卒中给社会和家庭带来了沉重的经济和精神负担，而且随着人口老龄化，这种负担将在未来20年内会大大增加。根据脑卒中病理学特征，脑卒中分为缺血性脑卒中(Ischemic stroke)和出血性脑卒中(Haemorrhagic stroke)。出血性脑卒中因出血位置不同主要分为脑内出血和蛛网膜下腔出血。缺血性脑卒中主要由动脉闭塞引起，占脑卒中总数的71％。
脑动脉阻塞导致严重的氧糖剥夺(Oxygen and glucose deprivation,OGD)，引发了一系列细胞和分子事件，从而导致不可逆的脑损伤。神经元更容易受到缺氧的影响，在缺血性卒中后迅速失调或死亡。缺血后，OGD引起线粒体功能障碍，导致ATP耗竭和大量活性氧(Reactive oxidative species,ROS)产生。与其它脑细胞相比，神经元对能量的需求更高，但对能量储备不足。ATP耗竭后会引发局部缺血级联反应，包括离子泵衰竭、钠离子、氯离子和水分子的内流，细胞内钾离子外排和膜去极化。神经元在缺血性卒中后无法维持其正常的跨膜离子梯度和体内稳态，进而引发多种病理过程，包括兴奋性毒性、线粒体功能障碍、氧化和硝化应激、酸中毒、Ca2+超载、蛋白质错误折叠、炎症、DNA损伤、凋亡等。这些病理生理过程会对神经元、神经胶质细胞和内皮细胞产生有害作用，并且通过正反馈回路相互激活，从而导致神经细胞死亡。
根据缺血性脑卒中的病理特点，缺血性脑卒中最有效的治疗方法是恢复血栓或栓塞所阻塞的脑动脉血流量。目前临床治疗缺血性脑卒中的策略主要集中在两个方面：一是改善供血，通过溶栓、血栓切除、抗凝血、抗血小板聚集、扩张血管、血管重构、建立侧支循环和调节血液状态等治疗策略，恢复和促进脑缺血区血液供应；二是保护神经细胞的结构和功能，通过药物阻断神经细胞死亡的级联反应，减轻缺血引起的神经细胞损伤，提高损伤神经细胞的功能恢复。但是，在实际临床应用中，围绕上述两种治疗策略开发的药物却非常有限。
发明内容
有鉴于此，本发明目的在于提供一种法舒地尔衍生物及其制备方法和应用，本发明提供的法舒地尔衍生物具有神经保护功效，对于脑卒中有良好的治疗效果。
为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：
本发明提供了一种法舒地尔衍生物，具有式I所示结构：
式I中，n＝0或1；
式I中，R1为H、羟基、烷基、烷氧基、氰基或酰基中的一种；
R2为
其中R3为H或F；
R4为H、-OMe或-OAc；
R5为-OH、-OAc或
m＝1～5；
R6为H或-OMe。
本发明提供了上述法舒地尔衍生物的制备方法，包括以下步骤：
具有式a所示结构的法舒地尔类化合物与具有Cl-R2或HO-R2所示结构的化合物进行缩合反应，得到具有式I所示结构的法舒地尔衍生物；
优选的，所述具有Cl-R2所示结构的化合物包括
所述具有HO-R2所示结构的化合物包括
优选的，所述缩合反应在三乙胺存在下进行。
优选的，所述缩合反应的温度为0～30℃，时间为1～8h。
本发明提供了上述法舒地尔衍生物在制备保护神经药物中的应用。
优选的，所述保护神经药物为抗缺血性脑卒中药物。
本发明提供了一种法舒地尔衍生物，具有式I所示结构。Rho是一种小的GTP酶，可以被鸟嘌呤核苷酸交换因子(Guanine nucleotide exchange factors,GEF)激活。ROCK是Rho相关的螺旋状激酶，是最早发现的Rho蛋白下游靶点之一，属于丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶家族，相对分子质量为160kDa，研究表明ROCK抑制剂在多种疾病的治疗中具有潜在的价值，如哮喘、癌症、勃起功能障碍、青光眼、胰岛素抵抗、肾衰竭、神经元变性和骨质疏松症等。选择性的ROCK-Ⅱ抑制剂在中枢神经系统相关疾病有广泛的应用。法舒地尔是ROCK抑制剂，通过抑制ROCK起到强效扩张血管、保护神经元细胞、促进轴突再生、保护缺血脑组织的作用。本发明以法舒地尔作为母核结构，制得的法舒地尔衍生物自由基清除效率高，副作用小，抑制炎症因子效力强，抗氧化应激能力好，能够用于制备神经保护及治疗脑卒中疾病的药物。
附图说明
图1为DF23、DF13的平均血药浓度-时间曲线；
图2为DF13的提取离子色谱图；
图3为代谢物M1的提取离子色谱图；
图4为代谢物M2的提取离子色谱图；
图5为化合物DF13的可能代谢途径；
图6为化合物DF23对小鼠体重的影响；
图7为化合物DF23对小鼠的脏器指数影响；
图8为化合物DF13对体重的影响；
图9为化合物DF13对雌雄小鼠的脏器指数影响；
图10为OGD在50μM时诱导DF系列化合物的细胞活力。
具体实施方式
本发明提供了一种法舒地尔衍生物，具有式I所示结构：
式I中，n＝0或1；
式I中，R1为H、羟基、烷基、烷氧基、氰基或酰基中的一种；在本发明中，所述烷氧基优选为乙氧基。
R2为
中的一种；
其中R3为H或F；
R4为H、-OMe或-OAc；
R5为-OH、-OAc或
m＝1～5；
R6为H或-OMe。
在本发明中，
表示连接位点。
作为本发明的具体实施例，所述法舒地尔衍生物具有式I-1～式I-23任意一项所示结构，详见表1：
表1法舒地尔衍生物结构
本发明提供了上述法舒地尔衍生物的制备方法，包括以下步骤：
具有式a所示结构的法舒地尔类化合物与具有Cl-R2或HO-R2所示结构的化合物进行缩合反应，得到具有式I所示结构的法舒地尔衍生物；
在本发明中，所述具有Cl-R2所示结构的化合物包括
所述具有HO-R2所示结构的化合物包括
在本发明中，所述具有式a所示结构的法舒地尔类化合物与具有Cl-R2或HO-R2所示结构的化合物的摩尔比优选为1:1。式a所示化合物来源为市售或自行制备。
在本发明中，所述缩合反应优选在三乙胺存在下进行。在本发明中，所述缩合反应的温度优选为0～30℃，更优选为10～20℃，时间优选为1～8h，更优选为2～6h。在本发明中，所述缩合反应使用的有机溶剂优选为四氢呋喃和/或二氯甲烷。
本发明提供了上述法舒地尔衍生物在制备保护神经药物中的应用。
在本发明中，所述保护神经药物为抗脑卒中药物，更优选为抗缺血性脑卒中药物。
下面结合实施例对本发明提供的法舒地尔衍生物及其制备方法和应用进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。
以下实施例中，化合物的熔点采用X-4型数字熔点测定仪测定，温度计未经校正。核磁共振1H-NMR采用Bruker ARX-400核磁共振仪测定，TMS为内标。液质(LC-MS-ESI)采用Agilent 1100SeriesMSD Trap(SL)测定，气质(GC-MS-ESI)采用Agilent 6890-5975GC-MS测定。所用试剂均为分析纯。
实施例1
异喹啉-5-磺酸硫酸盐(2)的合成
向500mL三口瓶中加入50％发烟硫酸(124g,含SO30.78mol)，冰浴降温至10℃以下，缓慢滴加异喹啉(1)(50g,0.39mol)，滴加过程控制温度低于20℃，滴加过程不断产生白烟，放热剧烈。3h滴加完毕，移至油浴60℃搅拌40h，仍有少量原料剩余。中途反应液逐渐变黏稠，补加浓硫酸(40mL)。停止反应，冷却至室温后将反应液缓慢倒入碎冰(600mL)中，于冷肼0℃反应约3h，析出大量白色固体，抽滤，滤饼用二氯甲烷淋洗，干燥得白色固体69.7g，收率59％。m.p.>300℃。1H NMR(600MHz,DMSO-d6):δ(ppm)9.92(s,1H),9.17(d,J＝6.7Hz,1H),8.74(d,J＝6.7Hz,1H),8.51(d,J＝7.6Hz,2H),7.99(t,J＝7.7Hz,1H).
异喹啉-5-磺酰氯盐酸盐(3)的合成
向250mL单口瓶中加入异喹啉-5-磺酸硫酸盐(2)(30.0g,0.1mol)，氯化亚砜(120mL,1.65mol)，干燥的DMF(1mL)，升温至回流反应，反应液先逐渐变澄清，然后析出大量固体，回流20h后反应完全，停止反应，减压蒸馏除去剩余的氯化亚砜，得到淡黄色固体。向反应瓶中加入干燥的二氯甲烷(80mL)打浆，4h后抽滤，滤饼用干燥的二氯甲烷洗，干燥得24.3g白色粉末状固体，收率92％。
异喹啉-5-磺酰氯的合成
向250mL烧杯中加入水(60mL)，冰浴降温至5℃缓慢加入异喹啉-5-磺酰氯盐酸盐(5g)，使用碳酸氢钠固体调pH至6，二氯甲烷萃取(60mL×3)，冰水洗(20mL×2)，饱和食盐水洗(20mL)，无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液经减压浓缩得3.6g淡黄色固体，收率83.7％。
法舒地尔(4)的合成
向50mL三口瓶中加入高哌嗪(1.32g,13.2mmol)，干燥的二氯甲烷(10mL)，干燥的Et3N(4.44g,43.9mmol)，冰浴降温至5℃，缓慢滴加异喹啉-5-磺酰氯(2.0g,8.78mmol)的二氯甲烷(10mL)溶液，滴加过程放热剧烈，控温不超过5℃，1.5h滴加完毕，2h后反应完全，停止反应，反应液倒入水中(20mL)，二氯甲烷萃取(20mL×3)，饱和碳酸钠水溶液洗(20mL×2)，水洗(20mL×2)，饱和食盐水洗(20mL)，无水硫酸镁干燥，抽滤，滤液经减压浓缩得2.7g黄色油状物，10倍硅胶柱层析，洗脱剂DCM:MeOH＝20:1得黄色固体1.68g，收率66％，文献报道为油状物。1H NMR(600MHz,DMSO-d6):δ(ppm)9.35(s,1H),8.69(d,J＝6.1Hz,1H),8.45(d,J＝6.1Hz,1H),8.35(d,J＝7.3Hz,1H),8.19(d,J＝8.1Hz,1H),7.69(t,J＝7.9Hz,1H),3.50(t,J＝5.3Hz,2H),3.45(t,J＝5.3Hz,2H),2.98(t,J＝5.3Hz,2H),2.94(t,J＝5.8Hz,2H),2.05(s,1H),1.86-1.82(m,2H).ESI MS:m/z292.2[M+H]+.
二苯基氯甲烷(5a)的合成
向50mL三口瓶中加入二苯甲酮(5.0g,27.4mmol)，无水甲醇(10mL)，冰浴降温至0℃，分批加入NaBH4(1.56g,41.2mmol)，加毕后继续搅拌30min，反应完全，加1N盐酸淬灭多余的NaBH4，减压浓缩除去甲醇，向残余物中加入水(20mL)，乙酸乙酯萃取(20mL×2)，水洗(20mL×2)，饱和食盐水洗(10mL)，无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液经减压浓缩得5g无色透明液体，久置后析出针状晶体，收率99％。
向50mL三口瓶中加入二苯基甲醇(5.0g,27.1mmol)，干燥的吡啶(2滴)，干燥的二氯甲烷(20mL)，冰浴降温至0℃，滴加氯化亚砜(3mL,40.7mmol)的二氯甲烷溶液(5mL)，控温不超过5℃，滴加完毕后继续搅拌1h，反应完全。将反应液倒入冰水中(20mL)，分出有机层，水层用二氯甲烷萃取(20mL×2)，合并有机层，用饱和碳酸钠水溶液洗(20mL×2)，水洗(20mL×2)，饱和食盐水洗(20mL)，无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液经减压浓缩得5.2g无色液体，收率95％。
双(4-氟苯基)氯甲烷(5b)的合成
向50mL三口瓶中加入双(4-氟苯基)甲酮(5.0g,22.9mmol)，无水甲醇(10mL)，冰浴降温至0℃，分批加入NaBH4(1.28g,33.9mmol)，加毕后继续搅拌30min，反应完全，加1N盐酸淬灭多余的NaBH4，减压浓缩除去甲醇，向残余物中加水(20mL)，乙酸乙酯萃取(20mL×2)，水洗(20mL×2)，饱和食盐水洗(10mL)，无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液经减压浓缩得5.0g无色透明液体，收率99％。
向50mL三口瓶中加入双(4-氟苯基)甲醇(5.0g,22.7mmol)，干燥的吡啶(3d)，干燥的二氯甲烷(10mL)，冰浴降温至0℃，滴加氯化亚砜(2.5mL,34.0mmol)的二氯甲烷溶液(10mL)，控温不超过5℃，滴加完毕后继续搅拌1h，反应完全。将反应液倒入冰水中(20mL)，分出有机层，水层用二氯甲烷萃取(20mL×2)，合并有机层，用饱和碳酸钠水溶液洗(20mL×2)，水洗(20mL×2)，饱和食盐水洗(20mL)，无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液经减压浓缩得5.3g无色液体，收率98％。
5-({4-[双(苯基)甲基]-1,4-二氮杂
-1-基}磺酰基)异喹啉(DF06)的合成
向50mL单口瓶中加入法舒地尔(0.40g,1.37mmol)，二苯基氯甲烷(0.30g,1.51mmol)，碳酸钾粉末(0.57g,4.12mmol)，乙腈(10mL)，加热至回流16h基本反应完全，停止反应。反应液冷却至室温后，减压浓缩除去溶剂，向残余物加入水(20mL)，DCM萃取(20mL×3)，水洗(20mL×2)，饱和食盐水洗(20mL)，无水硫酸镁干燥，抽滤，滤液经减压浓缩得0.74g油状物，10倍硅胶柱层析，洗脱剂EA:PE＝1:30→EA:PE＝1:10得到白色固体(0.12g,21％)，m.p.160-162℃。1H NMR(600MHz,CDCl3):δ(ppm)9.36(s,1H),8.69(d,J＝6.1Hz,1H),8.47(d,J＝6.1Hz,1H),8.36(d,J＝7.3Hz,1H),8.19(d,J＝8.1Hz,1H),7.69(t,J＝7.7Hz,1H),7.32-7.30(m,4H),7.25-7.22(m,4H),7.17-7.15(m,2H),4.59(s,1H),3.57(t,J＝5.8Hz,2H),3.40(t,J＝4.8Hz,2H),2.70(t,J＝5.0Hz,2H),2.65(t,J＝5.6Hz,2H),1.80-1.76(m,2H).ESI MS:m/z458.3[M+H]+.
5-({4-[双(4-氟苯基)甲基]-1,4-二氮杂
-1-基}磺酰基)异喹啉(DF07)的合成
向50mL单口瓶中加入法舒地尔(1.00g,3.43mmol)，双(4-氟苯基)氯甲烷(0.82g,3.43mmol)，碳酸钾粉末(1.42g,10.30mmol)，乙腈(20mL)，加热至回流16h基本反应完全，停止反应。反应液冷却至室温后减压浓缩除去溶剂，向残余物加入水反应液倒入水中(20mL)，DCM萃取(20mL×3)，水洗(20mL×2)，饱和食盐水洗(20mL)，无水硫酸镁干燥，抽滤，滤液经减压浓缩得1.9g油状物，10倍硅胶柱层析，洗脱剂EA:PE＝1:30→EA:PE＝1:10得到白色固体0.70g，收率41％，m.p.129-130℃。1H NMR(600MHz,DMSO-d6):δ(ppm)9.52(s,1H),8.72(d,J＝6.1Hz,1H),8.48(d,J＝8.2Hz,1H),8.39(d,J＝6.1Hz,1H),8.35(dd,J＝1.0Hz,7.4Hz,1H),7.86(t,J＝7.9Hz,1H),7.31-7.29(m,4H),7.10-7.07(m,4H),4.74(s,1H),3.53(t,J＝5.9Hz,2H),3.38-3.36(m,2H),2.60-2.58(m,2H),2.52-2.50(m,2H),1.67-1.63(m,2H).ESIMS:m/z 494.3[M+H]+.
实施例2
5-(哌嗪-1-基磺酰基)异喹啉(8)的合成
向100mL三口瓶中加入哌嗪(2.0g,8.78mmol)，三乙胺(4.4g,43.9mmol)，干燥的二氯甲烷(15mL)，冰浴降温至0℃以下，缓慢滴加异喹啉-5-磺酰氯(2.0g,8.78mmol)的DCM溶液(10mL)，滴毕后继续于冰浴下反应，4h后TLC反应完全，将反应液倒入水中(20mL)，二氯甲烷萃取(20mL×3)，合并有机层，水洗(20mL×2)，饱和食盐水洗(20mL)，无水硫酸镁干燥，抽滤，滤液经减压浓缩得白色固体2.1g，未经纯化直接用于下一步。
5-(1,2-二硫杂环戊-3-基)-1-[4-(异喹啉-5-基磺酰基)哌嗪-1-基]戊烷-1-酮盐酸盐(DF08)的合成
向50mL单口瓶中加入硫辛酸(0.41g,1.98mmol)，EDCI(0.53g,2.70mmol)，HOBt(0.36g,2.70mmol)，Et3N(0.90g,90.1mmol)，干燥的二氯甲烷(10mL)，室温下搅拌1h后加入5-(哌嗪-1-基磺酰基)异喹啉(0.50g,1.80mmol)，继续于室温下搅拌24h，TLC基本反应完全，将反应液倒入水中(20mL)，二氯甲烷萃取(20mL×3)，合并有机层，水洗(20mL×2)，饱和食盐水洗(20mL)，无水硫酸镁干燥，抽滤，滤液经减压浓缩得0.7g黄色油状物。7g硅胶柱层析得到0.4g黄色油状物，加入干燥的乙酸乙酯溶解，滴加氯化氢的乙酸乙酯溶液，产生浑浊，搅拌一会变黏，减压浓缩，加入乙醚搅拌固化得黄色固体(0.35g,38％)，m.p.154-155℃。1H NMR(600MHz,DMSO-d6):δ(ppm)9.51(s,1H),8.70(d,J＝6.2Hz,1H),8.52(d,J＝8.2Hz,1H),8.45(d,J＝6.1Hz,1H),8.37(dd,J＝7.4,1.1Hz,1H),7.89(t,J＝7.9Hz,1H),3.56-3.52(m,1H),3.49-3.48(m,4H),3.17-3.13(m,1H),3.10-3.08(m,2H),3.08-3.07(m,1H),3.06-3.04(m,2H),2.39-2.33(m,1H),2.22(t,J＝7.4Hz,2H),1.84-1.78(m,1H),1.63-1.57(m,1H),1.51-1.46(m,1H),1.45-1.38(m,2H),1.31-1.25(m,2H).ESI MS:m/z466.2[M+H]+,488.2[M+Na]+.
实施例3
4-[(2-甲基丁-3-炔-2-基)氧基]苯甲醛(12)的合成
向1000mL单口瓶中加入对羟基苯甲醛(37.6g,0.31mol)，3-氯-3-甲基丁-1-炔(63.0g,0.61mol)，KI(22.7g,0.14mol)，碳酸钾粉末(85.0g,0.62mol)，PEG600(18.6g,31.0mmol)，丙酮(500mL)，氩气保护，回流反应60h，仍有原料剩余，停止反应，冷却至室温，抽滤，滤饼用乙酸乙酯洗，滤液减压浓缩除去大部分丙酮，加入水(100mL)，乙酸乙酯萃取(150mL×3)，合并有机层，水洗(100mL×2)，饱和食盐水洗(100mL)，无水硫酸镁干燥，抽滤，滤液经减压浓缩得80g黄色液体。
2,2-二甲基-2H-色烯-6-甲醛(13)的合成
向250mL单口瓶加入4-[(2-甲基丁-3-炔-2-基)氧基]苯甲醛(80g)，N,N-二甲基苯胺(80mL)，加热至190℃，搅拌48h后停止反应。反应液冷却至室温后加6N HCl(200mL)，乙酸乙酯萃取(150mL×3)，合并有机层，6N HCl洗(100mL×2)，水洗(100mL×2)，饱和食盐水洗(100mL)，无水硫酸镁干燥，抽滤，滤液经减压浓缩得棕黑色油状物79g。5倍硅胶柱层析，石油醚为洗脱剂，得到纯品淡黄色油状物18g，两步收率31％。
(E)-3-(2,2-二甲基-2H-色烯-6-基)丙烯酸(9)的合成
向100mL单口瓶中加入2,2-二甲基-2H-色烯-6-甲醛(8.0g,42.5mmol)，丙二酸(6.6g,63.8mmol)，干燥的吡啶(20mL)，哌啶(1.1g,12.8mmol)，甲苯(40mL)，分水器回流带水反应40h，TLC显示仍有原料剩余，补加丙二酸(1.1g,10.6mmol)，继续反应20h，TLC反应完全，停止反应，冷却至室温后，倒入水中(100mL)，用浓盐酸调pH至3，出现大量固体，抽滤，滤饼用水洗，干燥得7.2g棕色固体，乙醇重结晶得棕色晶体(5.3g,54％)。1HNMR(600MHz,DMSO-d6):δ(ppm)12.23(s,1H),7.49(d,J＝15.9Hz,1H),7.44-7.42(m,2H),6.77(d,J＝8.0Hz,1H),6.42(d,J＝9.9Hz,1H),6.37(d,J＝15.9Hz,1H),5.81(d,J＝9.8Hz,1H),1.39(s,1H).
(E)-3-(2,2-二甲基-2H-色烯-6-基)-1-[4-(异喹啉-5-基磺酰基)-1,4-二氮杂
-1-基]丙-2-烯-1-酮(DF09)的合成
向25mL单口瓶中加入(E)-3-(2,2-二甲基-2H-氨基-6-基)丙烯酸0.30g,1.30mmol)，EDCI(0.34g,1.78mmol)，HOBt(0.24g,1.78mmol)，Et3N(0.60g,5.92mmol)，干燥的二氯甲烷(10mL)，室温下搅拌30min后加入法舒地尔(0.43g,1.18mmol)，室温反应24h后TLC反应完全，停止反应。反应液加入水(15mL)，二氯甲烷萃取(20mL×3)，合并有机层，饱和的碳酸钠洗(20mL×2)，水洗(20mL×2)，饱和食盐水洗(20mL)，无水硫酸镁干燥，抽滤，滤液经减压浓缩得淡黄色油状物1.0g，经硅胶柱层析纯化得到白色固体(0.36g,55％)，m.p.152-153℃。1H NMR(600MHz,DMSO-d6):δ(ppm)9.45(d,J＝6.4Hz,1H),8.68(t,J＝6.1Hz,1H),8.45-8.41(m,1H),8.33-8.30(m,2H),7.84-7.80(m,2H),7.45(t,J＝6.4Hz,2H),7.37(t,J＝15.5Hz,1H),6.94(q,J＝2.3,8.1Hz,1H),6.42(d,J＝9.8Hz,1H),5.81(d,J＝9.8Hz,1H),3.84(t,J＝5.4Hz,1H),3.73(t,J＝6.0Hz,1H),3.68(t,J＝5.0Hz,1H),3.59-3.51(m,3H),3.43(q,J＝5.9Hz,2H),1.82-1.75(m,2H),1.39(s,6H).HRMS(ESI)calcd forC28H29N3O4SNa[M+Na]+:526.1771,found:526.1785.
实施例4
5-[(4-苯甲酰基哌嗪-1-基)磺酰基]异喹啉(DF10)的合成
向50mL三口瓶中加入二苯甲基哌嗪(0.50g,1.98mmol)，碳酸钾粉末(1.40g,9.90mmol)，干燥的DMF(5mL)，冰浴降温至5℃，分批加入异喹啉-5-磺酰氯盐酸盐(0.55g,2.01mmol)，加毕后继续与冰浴下搅拌，12h后TLC基本反应完全，停止反应，反应倒入水中，析出大量固体，搅拌均匀后抽滤，滤饼用水洗，干燥得0.72g白色固体，粗品经甲醇重结晶得到白色固体(0.40g,45％)，m.p.78-79℃。1HNMR(600MHz,DMSO-d6):δ(ppm)9.53(s,1H),8.68(d,J＝6.1Hz,1H),8.54(d,J＝8.2Hz,1H),8.45(d,J＝6.1Hz,1H),8.34(d,J＝7.3Hz,1H),7.90(t,J＝7.7Hz,1H),7.32(d,J＝7.4Hz,4H),7.23(t,J＝7.5Hz,4H),7.14(t,J＝7.3Hz,2H),4.28(s,1H),3.10(s,1H),2.32(s,4H).ESI MS:m/z 444.2[M+H]+.
5-({4-[双(4-氟苯基)甲基]哌嗪-1-基}磺酰基)异喹啉(DF11)的合成
向50mL三口瓶中加入4,4'-二氟苯甲哌嗪(0.40g,1.39mmol)，碳酸钾粉末(0.96g,6.96mmol)，干燥的DMF(5mL)，冰浴降温至5℃，分批加入异喹啉-5-磺酰氯盐酸盐(0.39g,1.46mmol)，加毕后继续与冰浴下搅拌，12h后TLC基本反应完全，停止反应，反应倒入水中，析出大量固体，搅拌均匀后抽滤，滤饼用水洗，干燥得0.4g白色固体，粗品经甲醇重结晶得到白色固体(0.23g,34％)，m.p.87-90℃。1HNMR(600MHz,DMSO-d6):δ(ppm)9.52(s,1H),8.69(d,J＝6.1Hz,1H),8.54(d,J＝8.2Hz,1H),8.45(d,J＝6.1Hz,1H),8.35(d,J＝6.8Hz,1H),7.90(t,J＝7.8Hz,1H),7.34(d,J＝8.0Hz,4H),7.06(t,J＝8.7Hz,4H),4.37(s,1H),3.09(s,1H),2.30(s,4H).ESI MS:m/z480.2[M+H]+.
实施例5
(2,2-二甲基-2H-色烯-6-基)[4-(异喹啉-5-基磺酰基)-1,4-二氮杂
-1-基]甲酮(DF12)的合成
向25mL单口瓶中加入2,2-二甲基-2H-甲烯-6-羧酸(0.40g,1.96mmol)，EDCI(0.51g,2.18mmol)，HOBt(0.36g,2.18mmol)，Et3N(0.90g,8.92mmol)，干燥的二氯甲烷(10mL)，室温下搅拌30min后加入法舒地尔(0.52g,1.78mmol)，室温反应24h后TLC反应完全，停止反应。反应液加入水(15mL)，二氯甲烷萃取(20mL×3)，合并有机层，饱和的碳酸钠洗(20mL×2)，水洗(20mL×2)，饱和食盐水洗(20mL)，无水硫酸镁干燥，抽滤，滤液经减压浓缩得淡黄色油状物1.0g，经硅胶柱层析纯化得到无色透明油状物(0.47g,50％)。1HNMR(600MHz,DMSO-d6):δ(ppm)9.45(d,J＝6.4Hz,1H),8.68(t,J＝6.1Hz,1H),8.45-8.41(m,1H),8.33-8.30(m,2H),7.84-7.80(m,2H),7.45(t,J＝6.4Hz,2H),7.37(t,J＝15.5Hz,1H),6.94(q,J＝8.1Hz,1H),6.42(d,J＝9.8Hz,1H),5.81(d,J＝9.8Hz,1H),3.84(t,J＝5.4Hz,1H),3.73(t,J＝6.0Hz,1H),3.68(t,J＝5.0Hz,1H),3.59-3.51(m,3H),3.43(q,J＝11.5Hz,2H),1.82-1.75(m,2H),1.39(s,6H).HRMS(ESI)calcdfor C26H27N3O4SNa[M+Na]+:500.1614,found:500.1628.
向上述无色透明油状物中加入干燥的乙酸乙酯(10mL)溶解，于冰浴下缓慢滴加1.2M氯化氢的乙酸乙酯溶液至无固体析出。滴加完毕于室温下搅拌30min，抽滤，滤饼用干燥的乙酸乙酯淋洗，干燥得对应的盐酸盐即化合物DF12。
实施例6
硫辛醇(17)的合成
向50mL三口瓶中硫辛酸(1.0g,4.85mmol)，重蒸的四氢呋喃(20mL)，氩气保护，冰浴降温至0℃以下缓慢滴加1M的BH3-THF溶液(10mL,9.69mmol)，控温在0℃。20min滴加完毕，9h后TLC显示反应完全，停止反应，通过注射器滴加甲醇(20mL)淬灭反应，至无气泡放出，减压浓缩除去四氢呋喃和甲醇，加入水(20mL)，乙酸乙酯萃取(20mL×3)，饱和碳酸钠水溶液溶液洗(20mL×2)，水洗(20mL×2)，饱和食盐水洗(20mL)，无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液经减压浓缩得0.9g黄色油状物。10g硅胶柱层析，洗脱剂EA:PE＝1:5得到0.6g黄色油状物，收率65％。1H NMR(600MHz,CDCl3):δ(ppm)3.64(t,J＝6.6Hz,2H),3.59-3.57(m,1H),3.20-3.17(m,1H),3.14-3.10(m,1H),2.49-2.44(m,1H),1.94-1.89(m,1H),1.72-1.66(m,2H),1.61(s,1H),1.60-1.56(m,2H),1.47-1.38(m,4H).ESI MS:m/z 175.1[M-H2O+H]+,215.1[M+Na]+.
5-(1,2-二硫杂环戊-3-基)戊基4-(异喹啉-5-基磺酰基)-1,4-二氮杂
-1-甲酸酯(DF13)的合成
向50mL三口瓶中加入固体光气(1.54g,5.20mmol)，干燥的二氯甲烷(10mL)，冰浴降温至0℃以下，缓慢滴加干燥的三乙胺(1.1g,5.20mmol)的二氯甲烷溶液(5mL)，滴毕后逐滴滴入硫辛醇(1.0g,5.20mmol)的二氯甲烷溶液(10mL)，70min滴加完毕，TLC监测，碘熏仍有少量原料剩余，移至室温过夜，次日TLC反应完全，减压浓缩至干，直接用于下一步。
向50mL三口瓶中加入法舒地尔(1.0g,3.47mmol)，三乙胺(1.1g,10.4mmol)，干燥的二氯甲烷(10mL)，冰浴降温至0℃以下滴加硫辛醇氯甲酸酯的二氯甲烷溶液(1.33g,5.20mmol,上一步收率按100％计算)，-14℃滴加，1h滴加完毕，4h后TLC反应完全，停止反应，反应液倒入水中，二氯甲烷萃取(20mL×4)，水洗(20mL×2)，饱和食盐水洗(20mL×2)，无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液经减压浓缩得1.4g棕色油状物。15g硅胶柱层析，洗脱剂EA:PE＝1:5→EA:PE＝1:1得到黄色油状(0.46g,26％)。1H NMR(600MHz,DMSO-d6):δ(ppm)9.49(s,1H),8.69(d,J＝6.1Hz,1H),8.46(d,J＝7.8Hz,1H),8.33-8.31(m,2H),7.85-7.82(m,1H),3.91(q,J＝11.9Hz,2H),3.63-3.58(m,1H),3.49-3.48(m,4H),3.42-3.39(m,4H),3.20-3.15(m,1H),3.13-3.08(m,1H),2.43-2.37(m,1H),1.89-1.84(m,1H),1.72-1.70(m,2H),1.69-1.63(m,1H),1.56-1.53(m,1H),1.52-1.51(m,2H),1.38-1.35(m,2H),1.31-1.30(m,2H).ESI MS:m/z 510.3[M+H]+,532.3[M+Na]+.
向上述黄色油状物加入干燥的乙酸乙酯(10mL)溶解，于冰浴下缓慢滴加1.2M氯化氢的乙酸乙酯溶液至无固体析出。搅拌一会变黏，减压浓缩至干，加入乙醚(20mL)搅拌固化，抽滤，滤饼用乙醚淋洗得黄色固体即为盐酸盐(DF13)。化合物DF13的纯度用Shimadzu2010AHPLC测定，纯度99.5％(面积归一化法)。色谱柱为Agilent ZORBA×80AExtend-C18(4.6×150mm,5μm)，流动相MeCN/H2O＝55％/45％，流速0.8mL/min，柱温25℃，检测波长210nm，保留时间为9.830min。
实施例7
(E)-3-(2,2-二甲基-2H-色烯-6-基)-1-[4-(异喹啉-5-基磺酰基)哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮(DF14)的合成
向50mL单口瓶中加入(E)-3-(2,2-二甲基-2H-氨基-6-基)丙烯酸(0.42g,1.98mmol)，EDCI(0.53g,2.70mmol)，HOBt(0.36g,2.70mmol)，Et3N(0.90g,90.1mmol)，干燥的二氯甲烷(10mL)，室温下搅拌1h后加入5-(哌嗪-1-基磺酰基)异喹啉(0.50g,1.80mmol)，继续于室温下搅拌24h，TLC基本反应完全，将反应液倒入水中(20mL)，二氯甲烷萃取(20mL×3)，合并有机层，水洗(20mL×2)，饱和食盐水洗(20mL)，无水硫酸镁干燥，抽滤，滤液经减压浓缩得0.9g黄色油状物，9g硅胶柱层析，得到淡黄色固体(0.4g,45％)，m.p.196-197℃。1H NMR(600MHz,DMSO-d6):δ(ppm)9.50(s,1H),8.71(d,J＝6.1Hz,1H),8.51(d,J＝8.2Hz,1H),8.47(d,J＝6.2Hz,1H),8.37(d,J＝7.4,0.9Hz,1H),7.89(t,J＝7.9Hz,1H),7.40-7.39(m,2H),7.31(d,J＝15.3Hz,1H),6.97(d,J＝15.3Hz,1H),6.72(d,J＝8.9Hz,1H),6.37(d,J＝9.9Hz,1H),5.79(d,J＝4.9Hz,1H),3.75(brs,2H),3.61(brs,2H),3,12(brs,4H),1.37(s,6H).HRMS(ESI)calcd for C27H27N3O4SNa[M+Na]+:512.1614，found:512.1626.
实施例8
4-(异喹啉-5-基磺酰基)-1,4-二氮杂
-1-甲酸苄酯(19)的合成
向500mL三口瓶中加入法舒地尔(20.0g,68.6mmol)，干燥的三乙胺(21.0g,82.4mmol)，DMAP(0.80g,6.8mmol)，干燥的二氯甲烷(200mL)，冰浴降温至0℃以下，滴加苄氧基甲酰氯(14.1g,82.4mmol)的二氯甲烷溶液(50mL)，滴加过程有放热，控制温度在0℃左右，滴毕后移至室温搅拌2h后基本反应完全，停止反应，将反应液倒入水中(100mL)，分出有机层，水层用二氯甲烷萃取(50mL×2)，合并有机层，水洗(100mL×2)，饱和食盐水洗(100mL)，无水硫酸镁干燥，抽滤，滤液经减压浓缩得红棕色油状物36.8g，7倍硅胶装柱，1.5倍硅胶拌样，洗脱剂EA:PE＝1:20→EA:PE＝1:1得到无色油状物25.4g，收率87％。1H NMR(600MHz,DMSO-d6):δ(ppm)9.49(s,1H),8.70(t,J＝6.6Hz,1H),8.46(dd,J＝8.0,4.0Hz,1H),8.33(t,J＝6.6Hz,2H),7.83(td,J＝15.4,7.9,3.2Hz,1H),7.37-7.30(m,5H),5.02(s,2H),3.56-3.48(m,4H),3.46-3.41(m,4H),1.75-1.72(m,2H).ESI-MS:m/z426.2[M+H]+.
Cbz-法舒地尔氮氧化物(20)的合成
向250mL三口瓶中加入Cbz-法舒地尔(10.0g,23.5mmol)，二氯甲烷(50mL)，冰浴下滴加间氯过氧苯甲酸(6.1g,35.3mmol)的二氯甲烷溶液(40mL)，滴加过程放热不明显，滴加完毕后移至室温，继续搅拌6h后反应完全。向反应液中加入硫代硫酸钠的饱和溶液至淀粉碘化钾试纸不变蓝，分出有机层，水层用二氯甲烷萃取(30mL×2)，合并有机层，用5％氢氧化钠水溶液洗(30mL×2)，水洗(30mL)，饱和食盐水洗(30mL)，有机相直接减压浓缩得9.12g黏稠状油状物，直接进行下一步。
Cbz-羟基法舒地尔(21)的合成
向500mL三口瓶中加入Cbz-法舒地尔氮氧化物(25.0g,56.6mmol)，二氯甲烷(80mL)，搅拌溶解后加入乙酸钠(13.9g,169.8mmol)和TBAB(5.5g,17.0mmol)的水溶液(60mL)，水浴下滴加苯甲酰氯(18.2g,113.3mmol)的二氯甲烷溶液(50mL)，12h后反应完全，分出有机层，水层用二氯甲烷萃取(50mL×2)，合并有机层，用水洗(50mL×2)，饱和食盐水洗(50mL)，无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液经减压浓缩得黄色半固体，加入乙酸乙酯打浆，抽滤，干燥得白色固体13.0g，收率52％，m.p.189-191℃，文献[137]：198.2-198.6℃。ESI-MS:m/z 440.1[M-H]-.
1-羟基法舒地尔(22)的合成
向25mL单口瓶中加入Cbz-羟基法舒地尔(1.67g,3.78mmol)，三氟乙酸(10mL)，油浴加热至65℃，12h后反应完全，减压蒸馏除去大部分三氟乙酸后，将反应液倒入水中，用碳酸氢钠固体调pH至8，析出近白色固体，抽滤，干燥得白色固体1.12g，收率97％[127]。1H NMR(600MHz,DMSO-d6):δ(ppm)11.71(brs,1H),8.46(d,J＝7.0Hz,1H),8.18-8.13(m,1H),7.60(d,J＝7.9Hz,1H),7.38(d,J＝7.0Hz,1H),7.10(d,J＝7.4Hz,1H),3.40-3.28(m,4H),2.77-2.73(m,2H),1.66(s,2H),1.28-1.23(m,2H),0.89-0.86(m,1H).
乙酰阿魏酸的合成
向100mL三口瓶中加入水(25mL)，氢氧化钠固体(2.7g,66.9mmol)，搅拌溶解后加入阿魏酸(5.0g,25.7mmol)，冰浴降温至0℃以下，缓慢滴加乙酸酐(3.3g,32.2mmol)，滴毕后室温反应12h，反应完全。停止反应，加入水(20mL)，6N盐酸调pH至3，析出白色固体，抽滤，滤饼转移至100mL烧瓶中，加入15倍(m/v)无水乙醇重结晶，得到白色针状固体4.62g，收率76％，m.p.197-200℃。
(E)-4-(3-{4-[(1-羟基异喹啉-5-基)磺酰基]-1,4-二氮杂
-1-基}-3-氧代丙-1-烯-1-基)-2-乙酸甲氧基苯酯(DF15)的合成
向50mL单口瓶中加入乙酰阿魏酸(0.81g,3.42mmol)，EDCI(0.47g,2.45mmol)，HOBt(0.33g,2.45mmol)，三乙胺(0.82g,8.15mmol)，二氯甲烷(25mL)，室温搅拌30min，加入1-羟基法舒地尔(0.50g,1.63mmol)，油浴25℃搅拌12h反应完全，将反应液倒入水中，二氯甲烷萃取(20mL×2)，水洗(20mL×2)，饱和食盐水洗(20mL)，无水硫酸镁干燥，抽滤，滤液经减压浓缩得0.94g黄色油状物，甲醇重结晶得白色固体0.28g，收率33％，m.p.230-232℃。1HNMR(400MHz,DMSO-d6):δ(ppm)11.62(d,J＝5.0Hz,1H),8.48-8.43(m,1H),8.19-8.16(m,1H),7.62-7.56(m,1H),7.49(d,J＝9.6Hz,1H),7.46-7.43(m,1H),7.37-7.29(m,1H),7.11(t,J＝9.0Hz,2H),7.05(t,J＝7.7Hz,1H),3.87-3.83(m,1H),3.76(t,J＝6.1Hz,1H),3.68(t,J＝4.8Hz,1H),3.59(t,J＝5.6Hz,1H),3.50(q,J＝11.2Hz,2H),3.40(q,J＝7.2Hz,2H),2.26(s,3H),1.82-1.77(m,2H).ESI-MS:548.7[M+Na]+.
实施例9
5-(1,2-二硫杂环戊-3-基)-1-{4-[(1-羟基异喹啉-5-基)磺酰基]-1,4-二氮杂
-1-基}基戊烷-1-酮(DF16)的合成/>
向50mL单口瓶中加入硫辛酸(0.74g,3.58mmol)，EDCI(0.47g,2.45mmol)，HOBt(0.33g,2.45mmol)，三乙胺(0.82g,8.15mmol)，二氯甲烷(25mL)，室温搅拌30min后加入1-羟基法舒地尔(0.50g,1.63mmol)，25℃搅拌12h反应完全，将反应液倒入水中(20mL)，二氯甲烷萃取(20mL×2)，水洗(20mL×2)，饱和食盐水洗(20mL)，无水硫酸镁干燥，抽滤，滤液经减压浓缩得0.5g淡黄色固体，乙醚打浆得白色固体0.3g，收率37％，m.p.186-188℃。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ(ppm)11.64(s,1H),8.48(d,J＝8.0Hz,1H),8.17(d,J＝7.6Hz,1H),7.60(td,J＝11.2,7.8,3.3Hz,1H),7.39-7.34(m,1H),7.05(dd,J＝7.4,3.4Hz,1H),3.64-3.59(m,1H),3.56-3.54(m,1H),3.47-3.46(m,1H),3.41-3.37(m,2H),3.36-3.35(m,1H),3.22-3.14(m,1H),3.12-3.08(m,1H),2.45-2.38(m,1H),2.27-2.21(m,2H),1.91-1.83(m,1H),1.76-1.68(m,2H),1.66-1.63(m,1H),1.57-1.51(m,1H),1.50-1.44(m,2H),1.39-1.33(m,2H).HRMS(ESI)calcd for C22H29N3O4S3Na[M+Na]+:512.1212,found:518.1210.
实施例10
4-[(1-乙氧基异喹啉-5-基)磺酰基]-1,4-二氮杂
-1-甲酸苄酯(DF18)的合成
向50mL单口瓶中加入Cbz-羟基法舒地尔(0.50g,1.13mmol)，碘乙烷(1.77g,11.3mmol)，碳酸钾粉末(0.47g,3.40mmol)，DMF(10mL)，70℃反应12h，基本反应完全，停止反应。将反应液倒入水中(20mL)，乙酸乙酯萃取(20mL×3)，合并有机层，水洗(20mL×2)，饱和食盐水洗(20mL)，无水硫酸镁干燥，抽滤，滤液经减压浓缩得0.7g淡黄色油状物，经硅胶柱层析得白色固体0.2g，收率38％，m.p.133-135℃。1H NMR(600Hz,CDCl3):δ(ppm)8.69(d,J＝8.0Hz,1H),8.16(d,J＝4.6Hz,1H),7.54-7.50(m,1H),7.36-7.30(m,5H),7.25(d,J＝8.0Hz,1H),7.22-7.18(m,1H),5.11(s,1H),5.10(s,1H),4.06(q,J＝7.2Hz,2H),3.66-3.57(m,4H),3.46-3.32(m,4H),2.00-1.91(m,2H),1.39(t,J＝7.2Hz,3H).HRMS(ESI)calcd forC24H27N3O5SNa[M+Na]+:492.1564,found:492.1578.
实施例11
(E)-4-{3-[4-(异喹啉-5-基磺酰基)-1,4-二氮杂
-1-基]-3-氧代丙-1-烯-1-基}-2-甲氧基苯基乙酸酯(DF19)的合成
向100mL单口瓶中加入乙酰阿魏酸(2.25g,9.52mmol)，EDCI(2.5g,14.28mmol)，HOBt(1.75g,14.28mmol)，三乙胺(4.35g,47.6mmol)，干燥的二氯甲烷(30mL)，室温下搅拌30min后加入法舒地尔(2.50g,8.58mmol)，油浴25℃，12h基本反应完全，停止反应。将反应液倒入水中(30mL)，二氯甲烷萃取(30mL×3)，饱和碳酸钠水溶液洗(20mL×2)，水洗(20mL)，饱和食盐水洗(20mL)，无水硫酸镁干燥，抽滤，滤液经减压浓缩5.4g黄色固体，硅胶柱层析得白色固体2.4g，收率55％，m.p.94-96℃。1H NMR(400Hz,DMSO-d6):δ(ppm)9.46(s,0.6H),8.68(t,J＝6.0Hz,1H),8.45(d,J＝8.2Hz,0.6H),8.40(d,J＝8.2Hz,0.4H),8.34-8.29(m,2H),7.85-7.79(m,1H),7.48-7.41(m,2H),7.31(s,0.4H),7.29(s,0.6H),7.13-7.05(m,2H),3.87(t,J＝5.4Hz,1H),3.84(s,3H),3.75(t,J＝5.9Hz,1H),3.69(t,J＝5.0Hz,1H),3.59(t,J＝5.6Hz,1H),3.57-3.52(m,2H),3.45-3.42(m,2H),2.26(s,3H),1.81-1.77(m,2H).HRMS(ESI)calcd for C26H27N3O6SNa[M+Na]+:532.1513,found:532.1523.
(E)-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(异喹啉-5-基磺酰基)-1,4-二氮杂
-1-基]丙-2-烯-1-酮(DF23)的合成
向250mL单口瓶中加入化合物DF19(1.3g,2.55mmol)，甲醇(20mL)，水(100mL)，氢氧化钠(1g,25.5mmol)，室温室温搅拌8h反应完全，停止反应。反应液冷却至室温后，冰浴下用1N的盐酸缓慢调pH至6，析出白色固体，抽滤得白色固体1.4g，加入丙酮重结晶得白色固体(0.5g,42％)，母液回收，m.p.187-188℃。1H NMR(400Hz,CDCl3):δ(ppm)9.36(s,0.7H),9.33(s,0.3H),8.69(d,J＝5.8Hz,1H),8.46-8.41(m,1H),8.37-8.30(m,1H),8.25-8.18(m,1H),7.74-7.70(m,1H),7.63-7.56(m,1H),7.09(d,J＝8.1Hz,0.7H),7.05(d,J＝8.0Hz,0.3H),6.96-6.90(m,2H),6.60(d,J＝15.4Hz,0.7H),6.53(d,J＝15.4Hz,0.3H),5.92(brs,1H),3.93(s,3H),3.86-3.76(m,4H),3.59-3.55(m,1H),3.51-3.40(m,3H),2.10-2.03(m,2H).HRMS(ESI)calcd for C24H25N3O5SNa[M+Na]+:490.1407,found:490.1430.
实施例12
乙酰芥子酸(26)的合成
向100mL三口瓶中加入水(25mL)，氢氧化钠固体(2.2g,58.0mmol)，搅拌溶解后加入芥子酸(5.0g,22.3mmol)，冰浴降温至0℃以下，缓慢滴加乙酸酐(2.9g,27.9mmol)，滴毕后室温反应，6h后TLC反应完全。停止反应，加入水(20mL)，6N盐酸调pH至3，析出白色固体，抽滤，滤饼转移至100mL烧瓶中，加入15倍(m/v)无水乙醇重结晶，得到白色固体4.2g，收率70％。
(E)-4-{3-[4-(异喹啉-5-基磺酰基)-1,4-二氮杂
-1-基]-3-氧代丙-1-烯-1-基}-2,6-二甲氧基乙酸苯酯(DF20)的合成/>
向100mL单口瓶中加入乙酰芥子酸(2.28g,9.52mmol)，EDCI(2.5g,14.28mmol)，HOBt(1.75g,14.28mmol)，三乙胺(4.35g,47.6mmol)，干燥的二氯甲烷(30mL)，室温搅拌30min，加入法舒地尔(2.50g,8.58mmol)，室温反应12h基本反应完全，停止反应。将反应液倒入水中(30mL)，二氯甲烷萃取(30mL×3)，饱和碳酸钠水溶液洗(20mL×2)，水洗(20mL)，饱和食盐水洗(20mL)，无水硫酸镁干燥，抽滤，滤液经减压浓缩5.0g黄色固体，硅胶柱层析得白色固体2.1g，收率46％，m.p.128-129℃。1H NMR(400Hz,CDCl3):δ(ppm)9.36(s,0.7H),9.33(s,0.3H),8.70(d,J＝5.6Hz,1H),8.43-8.38(m,1H),8.36-8.29(m,1H),8.24-8.18(m,1H),7.73-7.68(m,1H),7.62(d,J＝15.2Hz,0.7H),7.56(d,J＝15.4Hz,0.3H),6.72(s,1H),6.69-6.59(m,2H),3.85(s,6H),3.83-3.77(m,3H),3.58-3.43(m,4H),2.34(s,3H),2.10-2.03(m,2H).HRMS(ESI)calcdfor C27H30N3O7S[M+H]+:540.1799,found:540.1805.
(E)-3-(4-羟基-3,5-二甲氧基苯基)-1-[4-(异喹啉-5-基磺酰基)-1,4-二氮杂
-1-基]丙-2-烯-1-酮(DF24)的合成
向100mL单口瓶中加入化合物DF20(1.0g,1.85mmol)，甲醇(10mL)，水(50mL)，氢氧化钠(0.74g,18.5mmol)，室温搅拌8h反应完全，停止反应。反应液冷却至室温后，冰浴下用1N的盐酸缓慢调pH至6，析出白色固体，抽滤，干燥得白色固体0.8g，加入丙酮重结晶得白色固体(0.48g,52％)，m.p.100-101℃。1HNMR(400Hz,CDCl3):δ(ppm)9.42(s,1H),8.73(s,1H),8.50(s,1H),8.38-8.35(m,1H),8.25-8.21(m,1H),7.76-7.72(m,1H),7.62-7.55(m,1H),6.73(s,1.4H),6.72(s,0.6H),6.60(d,J＝15.2Hz,0.7H),6.53(d,J＝15.2Hz,0.7H),5.78(brs,1H),3.93(s,6H),3.87-3.78(m,4H),3.58-3.42(m,4H),2.07-2.04(m,2H).HRMS(ESI)calcd for C25H27N3O6SNa[M+Na]+:520.1513,found:520.1530.
实施例13
乙酰对香豆酸的合成
向100mL三口瓶中加入水(25mL)，氢氧化钠固体(3.2g,79.3mmol)，搅拌溶解后加入对香豆酸(5.0g,30.5mmol)，冰浴降温至0℃以下，缓慢滴加乙酸酐(3.9g,38.1mmol)，滴毕后室温反应，6h后TLC反应完全。停止反应，加入水(20mL)，6N盐酸调pH至3，析出白色固体，抽滤，滤饼转移至100mL烧瓶中，加入15倍(m/v)无水乙醇重结晶，得到白色固体5.0g，收率80％。
(E)-4-{3-[4-(异喹啉-5-基磺酰基)-1,4-二氮杂
-1-基]-3-氧代丙-1-烯-1-基}乙酸苯酯(DF21)的合成
向100mL单口瓶中加入乙酰对香豆酸(1.77g,9.52mmol)，EDCI(2.5g,14.28mmol)，HOBt(1.75g,14.28mmol)，三乙胺(4.35g,47.6mmol)，干燥的二氯甲烷(30mL)，室温下搅拌30min，加入法舒地尔(2.50g,8.58mmol)，油浴25℃，12h基本反应完全，停止反应。将反应液倒入水中(30mL)，二氯甲烷萃取(30mL×3)，饱和碳酸钠水溶液洗(20mL×2)，水洗(20mL)，饱和食盐水洗(20mL)，无水硫酸镁干燥，抽滤，滤液经减压浓缩5.0g黄色固体，硅胶柱层析得白色固体2.4g，收率58％，m.p.119-120℃。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ(ppm)9.34(t,J＝8.9Hz,1H),8.69(d,J＝6.1Hz,1H),8.42-8.37(m,1H),8.35-8.30(m,1H),8.23-8.16(m,1H),7.72-7.68(m,1H),7.64-7.60(m,1H),7.56-7.47(m,2H),7.19-7.16(m,0.3H),7.12-7.10(m,1.7H),6.73(d,J＝15.2Hz,0.6H),6.65(d,J＝15.4Hz,0.3H),3.87-3.76(m,4H),2.35(s,0.4H),2.31(s,2.6H),2.10-2.04(m,2H).HRMS(ESI)calcd for C25H26N3O5S[M+H]+:480.1588,found:480.1592.
实施例14
双乙酰咖啡酸的合成
向100mL三口瓶中加入水(25mL)，氢氧化钠固体(5.8g,144.4mmol)，搅拌溶解后加入咖啡酸(5.0g,27.8mmol)，冰浴降温至0℃以下，缓慢滴加乙酸酐(7.1g,69.4mmol)，滴毕后室温反应，6h后TLC反应完全。停止反应，加入水(20mL)，6N盐酸调pH至3，析出白色固体，抽滤，滤饼转移至100mL烧瓶中，加入15倍(m/v)无水乙醇重结晶，得到白色固体4.7g，收率65％。
(E)-4-{3-[4-(异喹啉-5-基磺酰基)-1,4-二氮杂
-1-基]-3-氧代丙-1-烯-1-基}-1,2-亚苯基二乙酸酯(DF22)的合成
向100mL单口瓶中加入双乙酰咖啡酸(2.27g,9.52mmol)，EDCI(2.50g,14.28mmol)，HOBt(1.75g,14.28mmol)，三乙胺(4.35g,47.6mmol)，干燥的二氯甲烷(30mL)，室温下搅拌30min后加入法舒地尔(2.50g,8.58mmol)，油浴25℃，12h基本反应完全，停止反应。将反应液倒入水中(30mL)，二氯甲烷萃取(30mL×3)，饱和碳酸钠水溶液洗(20mL×2)，水洗(20mL)，饱和食盐水洗(20mL)，无水硫酸镁干燥，抽滤，滤液经减压浓缩4.8g黄色固体，硅胶柱层析得白色固体2.1g，收率45％。1H NMR(600Hz,CDCl3):δ(ppm)9.36(s,0.7H),9.33(s,0.3H),8.70(d,J＝6.1Hz,1H),8.45(d,J＝6.1Hz,0.7H),8.42(d,J＝6.0Hz,0.3H),8.35(d,J＝7.7Hz,0.3H),8.33(d,J＝7.4Hz,0.7H),8.22(d,J＝8.2Hz,0.7H),8.19(d,J＝8.2Hz,0.3H),7.62(d,J＝15.3Hz,0.7H),7.53(d,J＝15.2Hz,0.3H),7.37(dd,J＝8.4,1.9Hz,0.7H),7.33-7.32(m,1H),7.28(d,J＝1.6Hz,0.3H),7.22-7.19(m,1H),6.69(d,J＝15.3Hz,0.7H),6.59(d,J＝15.3Hz,0.3H),3.85(t,J＝5.6Hz,1H),3.81-3.76(m,3H),3.53-3.49(m,2H),3.46-3.43(m,2H),2.31(s,3H),2.30(s,3H),2.07-2.02(m,2H).HRMS(ESI)calcd for C27H27N3O7SNa[M+Na]+:560.1452,found:560.1476.
实施例15
阿魏酸甲酯的合成
向500mL单口瓶中加入阿魏酸(20.0g,0.10mol)，甲醇(250mL)，搅拌下加入浓硫酸(10mL)，升温至回流，4h后反应完全，将反应液冷却至室温，倒入500mL烧杯中，冰浴下用碳酸氢钠固体调pH至7，析出大量墨绿色固体，抽滤，水洗，干燥得墨绿色固体20.5g，收率96％，m.p.62-64℃，文献[133]：65℃
(E)-3-{4-[(6-溴己基)氧基]-3-甲氧基苯基}丙烯酸甲酯的合成
向100mL单口瓶中加入阿魏酸甲酯(4.0g,19.2mmol)，碳酸钾粉末(2.7g,19.2mmol)，1,6-二溴己烷(14g,57.6mmol)，DMF(20mL)，升温至60℃过夜，12h后仍有原料剩余，停止反应。将反应液倒入水中(30mL)，二氯甲烷萃取(30mL×3)，水洗(30mL)，饱和食盐水洗(30mL)，无水硫酸镁干燥，抽滤，滤液经减压浓缩得黄色固体6.5g，5倍硅胶柱层析得白色固体4.4g，收率62％。ESI MS m/z:371.1[M+H]+；373.1[M+H]+.
(E)-3-{4-[(2-溴乙基)氧基]-3-甲氧基苯基}丙烯酸甲酯的合成
以阿魏酸甲酯和1,2-二溴乙烷为原料，得到化合物为白色固体(2.4g,40％)。
(E)-3-{4-[(3-溴丙基)氧基]-3-甲氧基苯基}丙烯酸甲酯的合成
以阿魏酸甲酯和1,3-二溴丙烷为原料，得到化合物为白色固体(2.8g,45％)。
(E)-3-{4-[(4-溴丁基)氧基]-3-甲氧基苯基}丙烯酸甲酯的合成
以阿魏酸甲酯和1,4-二溴丁烷为原料，得到化合物为白色固体(3.5g,53％)。
(E)-3-{4-[(5-溴戊基)氧基]-3-甲氧基苯基}丙烯酸甲酯的合成
以阿魏酸甲酯和1,5-二溴戊烷为原料，得到化合物为白色固体(4.1g,59％)。
(E)-3-(3-甲氧基-4-{[6-(硝基氧基)己基]氧基}苯基)丙烯酸甲酯的合成
向100mL单口瓶中加入(E)-3-{4-[(6-溴己基)氧基]-3-甲氧基苯基}丙烯酸甲酯(1.0g,2.70mmol)，硝酸银(0.69g,4.05mmol)，乙腈(50mL)，避光升温至60℃，12h后反应完全，反应冷却至室温后抽滤，滤液减压浓缩，加入乙腈重结晶得白色固体0.72g，收率76％。
(E)-3-(3-甲氧基-4-{[2-(硝基氧基)乙基]氧基}苯基)丙烯酸甲酯的合成
以化合物(E)-3-{4-[(2-溴乙基)氧基]-3-甲氧基苯基}丙烯酸甲酯和硝酸银为原料，得到化合物72a为白色固体(1.2g,55％)。
(E)-3-(3-甲氧基-4-{[3-(硝基氧基)丙基]氧基}苯基)丙烯酸甲酯的合成
以化合物(E)-3-{4-[(3-溴丙基)氧基]-3-甲氧基苯基}丙烯酸甲酯和硝酸银为原料，得到化合物72b为白色固体(1.6g,60％)。
(E)-3-(3-甲氧基-4-{[4-(硝基氧基)丁基]氧基}苯基)丙烯酸甲酯的合成
(E)-3-{4-[(4-溴丁基)氧基]-3-甲氧基苯基}丙烯酸甲酯和硝酸银为原料，得到化合物为白色固体(2.7g,80％)。
(E)-3-(3-甲氧基-4-{[4-(硝基氧基)戊基]氧基}苯基)丙烯酸甲酯的合成
(E)-3-{4-[(5-溴戊基)氧基]-3-甲氧基苯基}丙烯酸甲酯和硝酸银为原料，得到化合物为白色固体(3.2g,83％)。
(E)-3-(3-甲氧基-4-{[6-(硝基氧基)己基]氧基}苯基)丙烯酸的合成
向100mL单口瓶中加入(E)-3-(3-甲氧基-4-{[6-(硝基氧基)己基]氧基}苯基)丙烯酸甲酯(0.72g,1.95mmol)，一水合氢氧化锂(0.25g,5.84mmol)，THF(15mL)，甲醇(5mL)，水(5mL)，室温下反应，随着反应液进行，反应液逐渐变黑。24h后反应完全，抽滤得到无色透明液体，减压浓缩除去大部分溶剂，加入水(10mL)，冰浴下用1N盐酸调pH至4，抽滤，水洗，干燥得白色固体0.59g，收率86％。
(E)-3-(3-甲氧基-4-{[2-(硝基氧基)乙基]氧基}苯基)丙烯酸的合成
以(E)-3-(3-甲氧基-4-{[2-(硝基氧基)乙基]氧基}苯基)丙烯酸甲酯为原料，得到化合物为白色固体(1.0g,88％)。
(E)-3-(3-甲氧基-4-{[3-(硝基氧基)丙基]氧基}苯基)丙烯酸的合成
以(E)-3-(3-甲氧基-4-{[(3-(硝基氧基)丙基]氧基}苯基)丙烯酸甲酯为原料，得到化合物为白色固体(1.4g,90％)。
(E)-3-(3-甲氧基-4-{[4-(硝基氧基)丁基]氧基}苯基)丙烯酸的合成
以(E)-3-(3-甲氧基-4-{[4-(硝基氧基)丁基]氧基}苯基)丙烯酸甲酯为原料，得到化合物为白色固体(2.3g,90％)。
(E)-3-(3-甲氧基-4-{[5-(硝基氧基)戊基]氧基}苯基)丙烯酸的合成
以(E)-3-(3-甲氧基-4-{[4-(硝基氧基)戊基]氧基}苯基)丙烯酸甲酯为原料，得到化合物为白色固体(2.8g,92％)。
(E)-2-(4-{3-[4-(异喹啉-5-基磺酰基)-1,4-二氮杂
-1-基]-3-氧代丙-1-烯-1-基}-2-甲氧基苯氧)硝酸乙酯(DF26)的合成
向100mL单口瓶中加入(E)-3-(3-甲氧基-4-{[2-(硝基氧基)乙基]氧基}苯基)丙烯酸(1.66mmol)，EDCI(0.48g,2.49mmol)，HOBt(0.34g,2.49mmol)，三乙胺(0.84g,8.28mmol)，干燥的二氯甲烷(20mL)，室温下搅拌30min后加入法舒地尔(0.48g,1.66mmol)，室温反应8h反应完全，停止反应。将反应液倒入水中(30mL)，二氯甲烷萃取(30mL×3)，水洗(20mL)，饱和食盐水洗(20mL)，无水硫酸镁干燥，抽滤，滤液经减压浓缩得粗品，经硅胶柱层析得到白色固体(0.39g,42％)。1H NMR(600Hz,CDCl3):δ(ppm)9.34(s,0.7H),9.32(s,0.3H),8.69(d,J＝5.7Hz,1H),8.40(d,J＝6.1Hz,0.7H),8.38(d,J＝6.5Hz,0.3H),8.34(d,J＝7.4Hz,0.3H),8.20(d,J＝8.2Hz,0.7H),8.18(d,J＝8.2Hz,0.3H),7.71-7.67(m,1H),7.62(d,J＝15.2Hz,0.7H),7.58(d,J＝15.2Hz,0.3H),7.09-7.05(m,1H),7.01(brs,0.7H),6.99(brs,0.3H),6.89-6.86(m,1H),6.64(d,J＝15.2Hz,0.7H),6.58(d,J＝15.1Hz,0.3H),4.84(t,J＝4.6Hz,2H),4.33-4.29(m,2H),3.89(s,3H),3.86-3.76(m,4H),3.56-3.40(m,4H),2.08-2.04(m,2H).HRMS(ESI)calcd for C26H28N4O8SNa[M+Na]+:579.1520,found:579.1531.
(E)-6-(4-{3-[4(异喹啉-5-基磺酰基)-1,4-二氮杂
-1-基]-3-氧代丙-1-烯-1-基}-2-甲氧基苯氧基)硝酸己酯(DF27)的合成/>
向100mL单口瓶中加入(E)-3-(3-甲氧基-4-{[6-(硝基氧基)己基]氧基}苯基)丙烯酸(1.66mmol)，EDCI(0.48g,2.49mmol)，HOBt(0.34g,2.49mmol)，三乙胺(0.84g,8.28mmol)，干燥的二氯甲烷(20mL)，室温下搅拌30min后加入法舒地尔(0.48g,1.66mmol)，室温反应8h反应完全，停止反应。将反应液倒入水中(30mL)，二氯甲烷萃取(30mL×3)，水洗(20mL)，饱和食盐水洗(20mL)，无水硫酸镁干燥，抽滤，滤液经减压浓缩得粗品，经硅胶柱层析得到得到白色固体(0.41g,40％)，m.p.112-113℃。1H NMR(600Hz,CDCl3):δ(ppm)9.35(s,0.7H),9.32(s,0.3H),8.69(d,J＝5.7Hz,1H),8.42(d,J＝6.0Hz,0.7H),8.40(d,J＝5.9Hz,0.3H),8.35(d,J＝7.2Hz,0.3H),8.32(d,J＝7.3Hz,0.7H),8.20(d,J＝8.2Hz,0.7H),8.18(d,J＝8.2Hz,0.3H),7.71-7.68(m,1H),7.63(d,J＝15.2Hz,0.7H),7.59(d,J＝15.3Hz,0.3H),7.09(d,J＝8.1Hz,0.7H),7.05(d,J＝8.2Hz,0.3H),7.00(s,0.7H),6.97(s,0.3H),6.86-6.83(m,1H),6.63(d,J＝15.2Hz,0.7H),6.56(d,J＝15.2Hz,0.3H),4.46(t,J＝6.6Hz,2H),4.04(t,J＝6.5Hz,2H),3.89(s,3H),3.86-3.78(m,4H),3.56-3.40(m,4H),2.09-2.08(m,2H),1.89-1.84(m,2H),1.79-1.74(m,2H),1.59-1.47(m,4H).ESI HRMS m/z:[M+Na]+cacld for C30H36N4O8SNa:635.2146,found:635.2168.
(E)-5-(4-{3-[4-(异喹啉-5-基磺酰基)-1,4-二氮杂
-1-基]-3-氧代丙-1-烯-1-基}-2-甲氧基苯氧基)硝酸戊酯(DF28)的合成
向100mL单口瓶中加入(E)-3-(3-甲氧基-4-{[5-(硝基氧基)戊基]氧基}苯基)丙烯酸(1.66mmol)，EDCI(0.48g,2.49mmol)，HOBt(0.34g,2.49mmol)，三乙胺(0.84g,8.28mmol)，干燥的二氯甲烷(20mL)，室温下搅拌30min后加入法舒地尔(0.48g,1.66mmol)，室温反应8h反应完全，停止反应。将反应液倒入水中(30mL)，二氯甲烷萃取(30mL×3)，水洗(20mL)，饱和食盐水洗(20mL)，无水硫酸镁干燥，抽滤，滤液经减压浓缩得粗品，经硅胶柱层析得到白色固体(0.45g,45％)，m.p.138-139℃。1H NMR(400Hz,CDCl3):δ(ppm)9.36(s,0.7H),9.34(s,0.3H),8.69(d,J＝6.0Hz,1H),8.45-8.42(m,1H),8.36-8.32(m,1H),8.23-8.18(t,J＝8.2Hz,1H),7.73-7.69(m,1H),7.64-7.59(m,1H),7.09-7.04(m,1H),7.00-6.98(m,1H),6.84(d,J＝8.3Hz,1H),6.62(d,J＝15.3Hz,0.7H),6.56(d,J＝15.2Hz,0.3H),4.48(t,J＝6.5Hz,2H),4.05(t,J＝6.4Hz,2H),3.89(s,3H),3.86-3.78(m,4H),3.56-3.40(m,4H),2.08-2.04(m,2H),1.93-1.79(m,4H),1.65-1.58(m,2H).HRMS(ESI)calcd forC29H34N4O8SNa[M+Na]+:620.1990,found:620.2010.
(E)-4-(4-{3-[4-(异喹啉-5-基磺酰基)-1,4-二氮杂
-1-基]-3-氧代丙-1-烯-1-基}-2-甲氧基苯氧基)硝酸丁酯(DF29)的合成
向100mL单口瓶中加入(E)-3-(3-甲氧基-4-{[4-(硝基氧基)丁基]氧基}苯基)丙烯酸(1.66mmol)，EDCI(0.48g,2.49mmol)，HOBt(0.34g,2.49mmol)，三乙胺(0.84g,8.28mmol)，干燥的二氯甲烷(20mL)，室温下搅拌30min后加入法舒地尔(0.48g,1.66mmol)，室温反应8h反应完全，停止反应。将反应液倒入水中(30mL)，二氯甲烷萃取(30mL×3)，水洗(20mL)，饱和食盐水洗(20mL)，无水硫酸镁干燥，抽滤，滤液经减压浓缩得粗品，经硅胶柱层析得到白色固体(0.47g,48％)，m.p.125-126℃。1H NMR(600Hz,CDCl3):δ(ppm)9.34(s,0.7H),9.32(s,0.3H),8.69(d,J＝5.9Hz,1H),8.40(d,J＝6.1Hz,0.7H),8.38(d,J＝6.4Hz,0.3H),8.34(d,J＝7.3Hz,0.3H),8.31(d,J＝7.3Hz,0.7H),8.20(d,J＝8.2Hz,0.7H),8.18(d,J＝7.9Hz,0.3H),7.71-7.67(m,1H),7.62(d,J＝15.3Hz,0.7H),7.58(d,J＝15.2Hz,0.3H),7.09-7.05(m,1H),7.00(brs,0.7H),6.98(brs,0.3H),6.85-6.83(m,1H),6.63(d,J＝15.2Hz,0.7H),6.57(d,J＝15.5Hz,0.3H),4.57(t,J＝5.5Hz,2H),4.08(t,J＝5.5Hz,2H),3.88(s,3H),3.86-3.76(m,4H),3.56-3.40(m,4H),2.08-2.04(m,4H),1.97-1.96(m,4H).HRMS(ESI)calcd for C28H32N4O8SNa[M+Na]+:607.1833,found:607.1847.
(E)-3-(4-{3-[4-(异喹啉-5-基磺酰基)-1,4-二氮杂
-1-基]-3-氧代丙-1-烯-1-基}-2-甲氧基苯氧基)硝酸丙酯(DF30)的合成
向100mL单口瓶中加入(E)-3-(3-甲氧基-4-{[3-(硝基氧基)丙基]氧基}苯基)丙烯酸(1.66mmol)，EDCI(0.48g,2.49mmol)，HOBt(0.34g,2.49mmol)，三乙胺(0.84g,8.28mmol)，干燥的二氯甲烷(20mL)，室温下搅拌30min后加入法舒地尔(0.48g,1.66mmol)，室温反应8h反应完全，停止反应。将反应液倒入水中(30mL)，二氯甲烷萃取(30mL×3)，水洗(20mL)，饱和食盐水洗(20mL)，无水硫酸镁干燥，抽滤，滤液经减压浓缩得粗品，经硅胶柱层析得到白色固体(0.43g,45％)，m.p.143-144℃。1H NMR(600Hz,CDCl3):δ(ppm)9.34(s,0.7H),9.32(s,0.3H),8.69(d,J＝5.8Hz,1H),8.41-8.38(m,1H),8.34(d,J＝7.4Hz,0.3H),8.31(d,J＝6.9Hz,1H),8.20-8.17(m,1H),7.70-7.67(m,1H),7.63-7.57(m,1H),7.08(d,J＝8.5Hz,0.7H),7.06(d,J＝7.9Hz,1H),7.00(s,0.7H),6.98(s,0.3H),6.86-6.85(m,1H),6.63(d,J＝15.4Hz,0.7H),6.57(d,J＝14.8Hz,0.3H),4.70(t,J＝5.8Hz,2H),4.14(t,J＝5.8Hz,2H),3.89(s,1H),3.86-3.76(m,4H),3.57-3.40(m,4H),2.28-2.24(m,2H),2.09-2.03(m,2H).HRMS(ESI)calcd for C27H30N4O8SNa[M+Na]+:593.1677,found:593.1693.
测试例1
1、化合物对BV2细胞毒性试验
1.1实验试剂
表2.实验药品与试剂
1.2实验原理
MTT属于四氮唑盐类，用于检测细胞的存活和生长。活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶可以还原外源性MTT成为水不溶性的蓝紫色结晶甲臜，然后沉积在细胞中，而死细胞则不能还原。DMSO可以溶解细胞中的甲臜，然后用酶联免疫检测仪在570nm波长处检测光吸收值，可间接反映活细胞数量。
1.3实验方法
1)细胞培养
细胞用完全培养基(DMEM+10％FBS)培养传代：待细胞生长至融合度90％后，弃去原培养基，不含FBS的培养基洗一次，加入0.25％胰酶消化后，加入完全培养基终止消化，吹打均匀；离心(800rpm离心5min)；弃去上清液，加入完全培养基重悬细胞，按合适比例接种到培养皿。标上细胞名称、代次和传代日期后置于37℃培养箱静置培养。
2)MTT实验
细胞铺板：细胞培养传代至生长状态良好、融合度90％左右，开始用于实验。胰酶消化细胞，800rpm离心5min，弃上清，用新鲜培基(DMEM+10％FBS)重悬，并计数，以每孔3000个细胞的密度接种至96孔细胞培养板，置于37℃ 5％CO2培养箱培养过夜。
样品配制：取样品20μL于V孔板A行中，做好标记，其余各孔加12μLDMSO，按照3倍连续稀释方法稀释至G孔，每次稀释均震荡均匀。上药时，每个浓度取5μL加入到120μL培基(25倍稀释)，同时做DMSO对照孔，振荡混匀。取培养过夜的细胞，除去培养基，每孔加入195μL的DMEM，再分别加入5μL稀释好的含相应浓度化合物的培基，随后将培养板置于37℃ 5％CO2培养箱培养过夜。
表3.药物板型分布
检测：除去原液，每孔加100μL含MTT(0.5mg/mL)的新鲜无血清DMEM培基后，继续培养。4h后除去原液，每孔加入100μLDMSO，避光震荡10min，置于多功能读数仪读取552/690nm波长的吸光值。
1.4数据处理
细胞存活率计算公式：
用软件GraphPad Prism 6.0分析数据，化合物对细胞增殖的抑制活性以细胞存活率和化合物浓度为坐标绘图。IC50以S形剂量反应曲线方程拟合，曲线方程为：Y＝100/[1+10^(LogC-LogIC50)]，C是化合物浓度。
1.4实验结果
表4.DF系列化合物对BV2细胞的细胞毒性
结果显示DF系列化合物中，16个化合物的细胞毒性较小，TC50大于100μM；7个化合物具有一定细胞毒性TC50在10～100μM之间。
测试例2
2 化合物抗氧化试验
2.1 药品与试剂
表5.实验药品与试剂
2.2实验原理
1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)是一种稳定的自由基，为紫色结晶。稳定DPPH自由基在乙醇溶液中呈深紫色，在517nm波长处有一强吸收，DPPH可以捕获或清除其它的自由基，使其颜色逐渐消失，褪色程度与其接受的电子呈定量关系。因此，通过吸光度的变化可以衡量待测化合物的清除自由基能力。
2.3实验方法
1)试剂配制
所筛选样品粉末用DMSO溶解为10mM的溶液，然后按样品与乙醇1:9的体积配成不同浓度的溶液(DMSO的含量为10％)。
DPPH母液：称取0.0079gDPPH粉末溶于20mL的无水乙醇制成浓度为1mM的母液，4℃避光保存备用。使用时用无水乙醇稀释至0.2mM。
槲皮素溶液：称取5mg槲皮素溶于1mL的DMSO中，取100μL加DMSO 900μL稀释为0.5mg/mL，分装至小管内，每管40μL，使用时再与乙醇1:9的体积加无水乙醇360μL配制(DMSO的含量为10％)。
溶剂对照组：DMSO与无水乙醇按1:9体积比例混合(DMSO的含量为10％)，现用现配。
2)操作步骤
样本检测组(A0)：50μL DPPH溶液+50μL样品液的吸光度值；
样品颜色对照组(A1)：50μL无水乙醇+50μL样品液的吸光度值；
溶剂对照组(A2)：50μL DPPH溶液+50μL10％DMSO的无水乙醇的吸光度值；同时设3个复孔，于25℃培养箱孵育30min，然后测定其517nm波长处的吸光度值。
2.4数据处理
按以下公式计算其对DPPH自由基清除率，同时以槲皮素作为阳性对照。
清除率P(％)＝[1-(A0-A1)/A2]×100％
2.5实验结果
表6.DF化合物的自由基清除活性。a
a用DPPH法在1mM下测定自由基清除率。
采用DPPH法进一步考察化合物在1mM浓度时对DPPH自由基清除率大于50％的化合物的量效关系，结果如表7所示。表7中BN07的结构为：。
活性筛选共发现9个化合物的EC50小于100μM，具有明显的抗氧化作用。构效关系显示DF系列化合物中，含酚羟基的肉桂酸类化合物对自由基有很好的清除效果，EC50小于100μM。
表7.DF化合物的自由基清除活性。
测试例3
3.化合物抑制BV2细胞产生NO试验
3.1药品与试剂
表8.实验用品
3.2实验原理
NO在水溶液中极易被氧化成生成NO2-。在酸性条件下，NO2-与对氨基苯磺酰胺发生重氮化反应生成重氮化合物，然后与N-(1-萘基)乙烯二胺发生偶联反应，生成有颜色的产物，该浓度与NO浓度具有线性关系，在540nm波长处有最大光吸收峰。
3.3实验方法
1)样品配制
样品用DMSO稀释至待测浓度的1000倍，保存于-20℃。使用前，1μL样品加入999μLDMEM，混匀后待用。
2)标准曲线的绘制
以NaNO2标准的稀释液的浓度为横坐标，光密度(OD)值为横坐标，绘制标准曲线。
3)细胞复苏和培养
从液氮罐中取出冻存管，直接浸入37℃温水中，并不时摇动令其尽快融化。融化后的细胞加入5mL完全培养基(DMEM+10％灭活FBS)，800rmp离心5min，弃去上清后均匀接种至完全培养基中。
待细胞生长至融合度90％后，弃去原培养基，不含FBS的培养基洗一次，加入0.25％胰酶消化后，加入完全培养基终止消化，吹打均匀；离心(800rpm离心5min)；弃去上清液，加入完全培养基重悬细胞，按合适比例接种到培养皿。标上细胞名称、代次和传代日期后置于37℃培养箱静置培养。
4)种板及上药
实验设计：溶剂对照组(C)、模型组(M)和实验组。
0.25％胰酶-EDTA消化细胞，用含10％FBS的DMEM培养基调整细胞密度为1×106/mL，均匀接种至96孔板，每孔100μL，接种后放入培养箱培养24h。
按照设定的分组DMSO组、模型组(M)和样品组，分别加入198μL无血清DMEM、含0.1％DMSO的无血清DMEM和含药无血清DMEM，每个样品设3个复孔，置37℃，5％CO2培养箱孵育1h后，除正常对照组和DMSO组加入2μL无血清DMEM培养基外，其余各组分别加入2μLLPS(终浓度为1μg/ml)，终体积为200μL，继续孵育20～24h。
5)NO检测
用DMEM无血清培养基稀释标准品，并加入到新的96孔细胞培养板，每孔100μL；取100μL细胞培养液上清加到新的96孔细胞培养板。所有孔加入50μL GriessA试剂，震荡混匀，反应2分钟。再加入50μL Griess B试剂避光震荡反应10min。在540nm/630nm处测每孔的光吸收值。
3.4数据处理
根据待测化合物的OD值，利用标准曲线计算得到对应的NO浓度。
3.5实验结果
表9.DF化合物对LPS诱导的BV2细胞NO生成的抑制活性。
表9结果显示DF系列化合物中，只有DF08对LPS刺激BV2细胞产生NO的抑制能力较强，抑制率为59.2％。其它的化合物对LPS刺激BV2细胞产生NO的抑制能力均较弱。
测试例4
4.化合物抑制BV2细胞释放炎症因子试验。
4.1药品与试剂
表10实验用品
4.2实验方法
实验设分为溶剂对照组(C)、模型组(M)和样品组。
1)细胞种板：细胞用0.25％胰酶-EDTA消化，含10％FBS的DMEM培养基调整细胞密度为1×105/mL，均匀接种至24孔板，每孔400μL细胞悬液，含10000个细胞，种板后放入37℃5％CO2培养箱培养24h。
2)样品配制：1μL受试样品用加入999μL DMEM，混匀后使用；DMSO用DMEM稀释1000倍，用于C组和M组。
3)给药：培养24h后，取出24孔板，吸去上清液，溶剂对照组和模型组加入495μL含0.1％DMSO的无血清DMEM，样品组加入495μL稀释后的样品，加药完毕后将24孔板放入培养箱培养1h。
4)LPS刺激：1h后，M组和样品组加入5μL 100μg/mLLPS(终浓度为1μg/mL)，C组加入5μL含0.1％DMSO的无血清的DMEM培养基，加药完毕后将24孔板放入培养箱继续培养18h。
5)检测：所有孔上清稀释15倍后，按照ELISA试剂盒说明书进行检测。
4.3数据处理
抑制率计算公式：
4.4实验结果
表11.对LPS诱导的BV2细胞细胞因子产生的抑制活性。
DF系列化合物对LPS刺激BV2细胞产生TNF-α和IL-6的抑制率如表11所示。化合物DF13、DF28、DF30对LPS诱导BV2细胞产生TNF-α的抑制率大于50％。其它化合物对LPS诱导BV2细胞产生TNF-α的抑制率较低。化合物DF13、DF15、DF18和DF30对LPS诱导BV2细胞产生IL-6的抑制率大于50％，其中DF13的抑制率最高，在4μM的浓度时的抑制率为86.72％。大部分化合物对LPS诱导BV2细胞产生IL-6具有不同程度的促进作用。
测试例5
5药代动力学试验
5.1实验仪器
表12.实验用品
5.2实验试剂
表13.实验用品
5.3实验动物
SPF级SD大鼠36只，雌雄各半，体重200～250g，购于青龙山动物繁殖场，动物生产许可证编号20180004030364。动物饲养于江苏康缘药业股份有限公司南京研究院实验动物中心，其饲养于温度24±2℃、相对湿度60±10％、12h光照和12h黑暗交替的环境中，期间自由进食和饮水。
5.4实验方法
(1)溶液配制
标准溶液的配制：取DF13、DF23适量，精密称定，加入甲醇超声溶解，配制成浓度为1.0mg/mL的储备液。
内标溶液的配制：取氯霉素对照品约5mg，精密称定，置5mL量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，配制成浓度为1.0mg/mL的储备液。再用甲醇稀释成浓度为3μg/mL的内标(IS)溶液。
(2)血浆样品前处理
取大鼠血浆样品50μL，加入5μL的内标溶液，再加入500μL的乙酸乙酯萃取，充分振荡，12000rpm离心3min，取上清液挥干，然后用100μL的70％的甲醇溶液复溶，14000rpm离心10min，取上清液进样分析。
(3)分析条件
色谱条件：色谱柱为AgilentEclipse Plus C18(3.0×50mm,1.8μm)；柱温：40℃；流速：0.4mL/min；流动相为A(0.1％甲酸水溶液)-B(乙腈)，洗脱梯度；进样量：3μL。
表14.梯度洗脱条件.
(4)质谱条件
选用电喷雾离子源(ESI)，设定源参数分别为：喷雾电压(IonSprayVoltage/IS)-4500V；辅助气1(Ion Source Gas1/GS 1,N2)40Arb；辅助气2(Ion Source Gas 2/GS 2,N2)60Arb；辅助气加热温度(Temperature/TEM)500℃；气帘气(Curtain Gas/CUR)20Arb；碰撞气(Collision Gas/CAD,N2)8Pa；扫描方式为多重离子反应监测(MRM)；正离子模式。
表15.离子对、DP和CE的检测.
(5)动物给药及血浆样本采集
a)给药剂量
口服给药组10mg/kg；静脉给药组10mg/kg。
b)溶液的配制
DF23灌胃及静脉注射给药溶液：精密称取DF23适量，用5％(w/v)Solutol HS 15生理盐水溶液配制成浓度1mg/mL的混悬液，供大鼠灌胃给药用。另取DF23适量，用5％(w/v)Solutol HS 15生理盐水溶液配制成浓度2mg/mL的溶液，供静脉给药用。
DF13静脉注射给药溶液：精密称取DF13适量，用5％DMSO-5％吐温80-90％生理盐水配制成浓度2mg/mL的溶液，供静脉给药用。
c)给药方案与样品采集
DF23给药方案：取SD大鼠12只，随机分成A、B两组，雌雄各半，给药前禁食12h，自由饮水。其中A组为DF23灌胃给药组，给药剂量为10mg/kg(1mg/mL,1mL/100g)；B组为DF23静脉注射给药组，给药剂量为10mg/kg(2mg/mL,0.5mL/100g)。分别于给药前与给药后5min、10min、15min、30min、45min、1h、2h、4h由眼底静脉丛采血0.3mL，收集于肝素钠处理的离心管内，8000rpm离心5min，分离血浆于-80℃冰箱保存。
DF13给药方案：取SD大鼠6只，雌雄各半，给药前禁食12h，自由饮水。DF13为静脉注射给药组，给药剂量为10mg/kg(2mg/mL,0.5mL/100g)。分别于给药前与给药后2min、5min、10min、15min、30min、45min、1h、2h、4h由眼底静脉丛采血0.3mL，收集于肝素钠处理的离心管内，8000rpm离心5min，分离血浆于-80℃冰箱保存。
6.5数据处理
数据处理均由AB Sciex Multi Quant2.1软件自动计算获得，并采用DAS 3.0药代动力学软件，以非房室模型统计分析不同给药组DF23和DF13在大鼠体内的主要药动学参数。绝对生物利用度的计算公式如下：
(式中D为给药剂量，iv和og分别表示静脉注射给药和灌胃给药)
6.6.实验结果
表16.静脉和口服给药10mg/kg后SD大鼠体内化合物的血浆浓度(
n＝6)
药代动力学预实验显示，化合物DF13经口服给药后，在大鼠血浆中暴露量极低，基本低于定量下限，无法准确定量。因此，正式试验中仅开展DF13经静脉注射给药后的药代动力学研究。SD大鼠经单次口服(po)和尾静脉注射(iv)给药(10mg/kg)后，化合物DF23和DF13在大鼠体内的血药浓度如表16所示，平均血药浓度-时间(Concentration-Time)曲线如图1所示。
表17.DF23在大鼠静脉和口服给药后的药代动力学(
n＝6)
po给药10mg/kg后，DF23在大鼠体内暴露量为64±31μg*h/L，消除半衰期(t1/2z)为1.2±0.7h，达峰时间为0.8±0.3h。iv给药10mg/kg后，体内暴露量为6654±5441μg*h/L，消除半衰期(t1/2z)为0.1±0h，血浆清除率(CLz)为2.3±1.5L/h/kg。DF23的绝对生物利用度仅为0.97％，吸收口服吸收较差。
表18.DF13在大鼠静脉给药后的药代动力学(
n＝6)
SD大鼠经iv给药10mg/kg后，化合物DF13的药代动力学参数如表18所示。iv给药DF13后，大鼠体内暴露量为1943±533μg*h/L，消除半衰期(t1/2z)为0.2±0.1h，血浆清除率(CLz)为5.6±1.9L/h/kg。
上述结果表明，静脉注射给药后，两个化合物在大鼠血浆中均存在一定暴露量，化合物DF23和DF13的静脉注射给药半衰期非常短，分别为6min和12min；DF23的口服生物利用度较低，仅为0.97％。因此，分析两个化合物不宜作为口服剂型。
测试例6
6.脑组织分布试验
脑组织分布研究所用的实验仪器材料和试剂、实验动物、溶液配制、色谱条件、质谱条件与上文药代动力学试验相同，此处不再赘述。
6.1实验方法
1)给药方案与样品采集
DF23给药方案：取SD大鼠12只，雌雄各半，给药前禁食12h，自由饮水。静脉注射给药，给药剂量为10mg/kg(2mg/mL，0.5mL/100g)。分别于给药后5min、30min、1h处死取出脑组织，保存于-80℃冰箱保存。
DF13给药方案：取SD大鼠12只，雌雄各半，给药前禁食12h，自由饮水。静脉注射给药，给药剂量为10mg/kg(2mg/mL,0.5mL/100g)。分别于给药后5min、15min、30min处死取出脑组织，保存于-80℃冰箱保存。
2)脑组织样品前处理
取大鼠脑组织样品适量，按1:10加入生理盐水研磨成匀浆液备用；取脑组织匀浆液50μL，加入5μL的内标溶液，再加入500μL的乙酸乙酯萃取，充分振荡，12000rpm离心3min，取上清液挥干，然后用100μL的70％的甲醇溶液复溶，14000rpm离心10min，取上清液进样分析。
6.2实验结果
通过对SD大鼠单次静脉注射(10mg/kg)给予化合物DF23、DF13，评估其在脑组织的分布情况，结果如表19所示。给药5min后，化合物DF23在脑组织分布量达到3613.33±161.66ng/g，含量随时间逐渐减少，消除速度相对较快。化合物DF13在脑组织分布较少，30min后脑组织中已基本检测不到。综上所述，静脉注射给药后，2个化合物均能通过血脑屏障，DF23在脑组织分布相对较好，DF23消除速度较快；DF13在脑组织分布较少。
表19.化合物在SD大鼠脑组织中的含量(
n＝6)
测试例7
7.DF13代谢产物研究
化合物DF13是硫辛醇与法舒地尔的氨基甲酸酯前药，因此我们进一步分析其在大鼠血浆和脑组织中的代谢产物。经静脉注射给药(10mg/kg)后，与空白血浆样品相比，血浆样品中检测到DF13原型药(m/z 510.1550Da,[M+H]+)，DF13的提取离子色谱图如图2所示，共检测到2个代谢产物，质荷比m/z分别为526.1496(M1)和542.1463(M2)。利用精确分子量对代谢产物进行鉴定。
DF13代谢产物M1：在m/z为526.1496Da[M+H]+的提取离子流色谱图中，可以检测到1个色谱峰，保留时间为2.861min。根据精确分子质量，其分子量比DF13多了1个O(16)Da，推测M1为DF13氧化得到的，如图3所示，可能是硫辛醇结构中二硫键发生氧化生成亚砜。
DF13代谢产物M2：在m/z为542.1463Da[M+H]+的提取离子流色谱图中，可以检测到1个色谱峰，保留时间为3.137min。根据精确分子质量，其分子量比代谢产物M1多了1个O(16)Da，推测M2为M1进一步氧化得到，如图4所示，可能是M1结构中二硫键发生进一步氧化。
化合物DF13的可能代谢途径如图5所示。
测试例8
8.急性毒性试验
8.1实验动物
健康ICR小鼠，雌雄各半，SPF级，18～22g，购于河南斯克贝斯生物科技股份有限公司，许可证号为SCXK(豫)2020-0005。动物饲养于江苏康缘药业股份有限公司南京研究院实验动物中心，其饲养于温度24±2℃、相对湿度60±10％、12h光照和12h黑暗交替的环境中，期间自由进食和饮水。
8.2实验试剂与药品
表20.实验用品
8.3实验方法
(1)药物配置
准确称量DF23、DF13，先将其溶解于DMSO和吐温80(1:1)的混合溶媒中，待其全部溶解后，再向混合溶媒中添加9倍体积的生理盐水进行稀释，最终得到1.25mg/mL,2.5mg/mL和5mg/mL的药物溶液，分别作为给药剂量的低、中、高剂量。
(2)分组、饲养和给药
ICR小鼠适应性喂养一周后，按体重将雌、雄小鼠各自随机分配为4组(n＝8)：正常对照组(Vehicle)、DF13高中低三个剂量组(DF13-High、DF13-Medium和DF13-Low)和DF23高中低三个剂量组(DF23-High、DF23-Medium和DF23-Low)。各组均以10mL/kg的给药体积进行单次尾静脉注射。
(3)小鼠的生理状况和体重变化
给药后立即观察30min，监测小鼠是否出现不良反应或死亡；同时在1h、2h、4h、8h各观察1次，监测小鼠是否出现不良反应或死亡。此后每日监测并记录小鼠日常活动情况、精神状态，每周称量并记录每组小鼠的体重。
(4)小鼠脏器指数的检测
在给药2周后，对各组小鼠进行大体解剖，取出每只小鼠的心、肝、脾、肺、肾，同时用生理盐水冲洗，并用医用纱布吸干水分，置入EP管中保存待测。根据公式计算脏器指数，如下：
脏器指数(％)＝脏器重量/体重×10％
8.4数据统计
实验数据以平均值±标准误(Mean±SEM)表示，用GraphPadPrism 8.4软件进行统计，多组间比较采用单因素方差ANOVA法分析，方差齐性采用LSD法，P<0.05视为显著性差异。
8.5实验结果
8.5.1DF23对小鼠状态和体重的影响
各组小鼠通过尾静脉注射给药DF23后，高剂量组(50mg/kg)小鼠在给药后30min内出现抽搐，抽搐时长约为10min。低剂量组(25mg/kg)和中剂量组(25mg/kg)未表现出任何不良反应，且与正常组相比无明显差异。化合物DF02对小鼠体重的影响如图6所示，雄性小鼠在给药后的第一周与正常组相比体重显著减轻；同时，雌性小鼠的中剂量组和高剂量组在给药后的第一周与正常小鼠相比体重也显著减轻。上述结果表明DF23可能会影响小鼠体重的正常增长。
8.5.2DF23对小鼠脏器的影响
化合物DF23对小鼠的脏器指数影响如图7所示，各给药组雌雄小鼠的脾脏、心脏和肾脏指数与空白组相比均没有显著性差异；然而雌雄小鼠低剂量组的肺指数与空白组相比显著性增加。此外，雌性小鼠的低剂量和高剂量组的肝脏指数与空白组相比显著降低。上述结果表明DF23可能会影响雌雄小鼠的肺部以及雌性小鼠肝脏的正常发育。
综合上述体重和脏器指数变化，化合物DF23在给药一周内可能会影响小鼠体重的正常增长；12.5mg/kg的剂量可能会影响雌雄小鼠肺部的正常发育；50mg/kg的剂量会引发小鼠出现抽搐的不良反应，同时可能还会引发雌性小鼠肝脏发育的异常。另外，尾静脉注射给药50mg/kg和100mg/kg后，雌雄小鼠均立即出现抽搐，且在2min内直接死亡。因此对于ICR小鼠，DF23在25mg/kg及以上的剂量均是非安全剂量。
8.5.3DF13对小鼠状态和体重的影响
各组小鼠通过尾静脉注射给药DF13后，高剂量组(50mg/kg)的雌雄小鼠均立即出现抽搐现象，且雄性小鼠抽搐的时间较雌性小鼠的时间长，雄性小鼠抽搐的平均时间大约为7min，雌性小鼠的平均抽搐时间大约为4.5min；低剂量组(12.5mg/kg)和中剂量组(25mg/kg)小鼠的状态在8h内与正常组无明显异常。
化合物DF13对体重的影响如图8所示，各组雌雄小鼠在给药2周后测得的体重与空白组相比较轻；其中，雄性小鼠的低剂量组和中剂量组的体重与空白组相比显著降低，雌性小鼠的中剂量与空白组相比显著降低。上述结果表明：DF13高剂量会引发小鼠出现抽搐的不良反应，同时其可能会影响小鼠体重的正常增长，且无性别差异。
8.5.4DF13对小鼠脏器的影响
化合物DF13对雌雄小鼠的脏器指数影响如图9所示，各给药组雌雄小鼠的肺、脾脏、心脏和肾脏指数与空白组相比均没有显著性差异；然而雌雄小鼠低剂量组的肝脏指数与空白组相比显著性降低。上述数据表明：DF13低剂量可能会对小鼠的肝脏有一定的影响，且无性别差异。
综合上述体重和脏器指数变化，12.5mg/kg的剂量可能会影响小鼠肝脏的正常发育；50mg/kg的剂量会引发小鼠出现抽搐的不良反应，具体的原因需要进一步的验证。
测试例9
9.化合物抗OGD诱导PC12细胞损伤作用的试验
9.1实验材料
表21.实验用品
9.2实验方法
1)实验分组
实验设空白对照组、溶剂对照组(DMSO组)、模型组、模型+给药组。
2)操作步骤
将细胞以0.25％胰酶(含0.02％EDTA)消化，含10％胎牛血清的DMEM培养基调整细胞密度为1×105个/mL，均匀接种至96孔板，每孔100μL，接板后放入培养箱培养24h。培养24h后，吸去上清液，加入100μL无糖DMEM培养基，于5％CO2+95％N2，37℃孵育4h，后加入相应的含药培养基100μL，于正常培养箱孵育24h，同时设三个复孔。
(1)空白对照组：每孔加入100μL DMEM培养基；
(2)溶剂对照组：每孔加入100μL含有DMSO的DMEM培养基；
(3)模型组：每孔加入100μL无糖DMEM培养基；
(4)模型+给药组：每孔加入100μL无糖DMEM培养基。
OGD 4h结束后，在模型+给药组中，每孔加入相应的含药培养基100μL(用无糖配制2X药物)，加药完毕后将96孔板放入正常培养箱培养24h，对照组加入相应的DMEM培养基，以及模型组加入相应的无糖DMEM培养基。
24h时后，去除孔内液体，给予配制好的MTS孵育2h后，于490nm处检测吸光值。
9.3数据处理
所有数据采用GraphpadPrism 5软件进行统计，以Mean±SEM表示，对于两组间的比较用Students’t检验，当三组或三组以上比较时用单因素方差分析，后检验采用Dunnett’s test,P<0.05认为有统计学意义。
OGD在50μM时诱导DF系列化合物的细胞活力如图10所示。由图10可以看出，DF16可能对OGD细胞模型的细胞起到一定的保护作用。
综上所述，1、本发明提供的化合物的细胞毒性：25个DF系列化合物中，17个化合物的细胞毒性较小，TC50大于100μM；6个化合物具有一定细胞毒性TC50在10～100μM之间。
2、化合物的自由基清除率：7个DF系列化合物对自由基的清除率大于50％。在1mM浓度时，对DPPH自由基清除率大于50％的化合物的量效关系考察共发现2个化合物(DF23、DF24)的EC50小于100μM，具有明显的抗氧化作用。
3、化合物抑制BV2细胞释放NO活性：DF系列化合物中，只有化合物DF08对LPS刺激BV2细胞产生NO的抑制能力较强，抑制率为759.2％。其它的化合物对LPS刺激BV2细胞产生NO的抑制能力均较弱。
4、化合物抑制BV2释放TNF-α活性量效关系研究发现2个活性显著的化合物(DF23、DF13)。
5、化合物抑制BV2释放IL-6活性：DF13、DF15、DF18和DF30对LPS诱导BV2细胞产生IL-6的抑制率大于50％，其中DF13的抑制率最高，在4μM的浓度时的抑制率为86.72％。大部分化合物对LPS诱导BV2细胞产生IL-6具有不同程度的促进作用。量效关系研究发现2个活性显著的化合物(DF13、DF15)，化合物DF13的TC50较大(178.2μM)，对TNF-α和IL-6产生均有较好的抑制作用，而且安全性指数较高，值得进一步研究。
6、抗氧化抗炎活性筛选小结：2个化合物具有抗氧化活性(DF23、DF24)；3个化合物可以抑制BV2细胞释放TNF-α(DF23、DF13)；2个化合物可以抑制BV2细胞释放IL-6(DF13、DF15)。其中化合物DF13兼有抑制TNF-α和IL-6释放活性。根据上述结果，我们选择化合物DF23和DF13进行进一步体内的药代动力学、安全性和脑组织分布研究。
7、药代动力学研究：静脉注射给药后，2个化合物在大鼠血浆中均存在一定暴露量，化合物DF23和DF13的静脉注射给药半衰期非常短，分别为6min和12min；DF23的口服生物利用度较低，仅为0.97％。
8、脑组织分布研究：静脉注射给药后，2个化合物均能通过血脑屏障，DF23在脑组织分布相对较好，DF13在脑组织分布较少；DF23在脑组织中消除速度较快。
9、DF13代谢产物分析：静脉注射给药DF13的大鼠血浆中主要检测到2个代谢产物，主要代谢途径为氧化；在脑组织中未检测到代谢产物。此外，在血浆和脑组织中均未检测到原药法舒地尔、硫辛醇、羟基法舒地尔和硫辛酸。
10、急性毒性研究：化合物DF23在给药一周内可能会影响小鼠体重的正常增长；12.5mg/kg的剂量可能会影响雌雄小鼠肺部的正常发育；50mg/kg的剂量会引发小鼠出现抽搐的不良反应，同时可能还会引发雌性小鼠肝脏发育的异常。另外，尾静脉注射给药50mg/kg和100mg/kg后，雌雄小鼠均立即出现抽搐，且在2min内直接死亡。因此对于ICR小鼠，DF23在25mg/kg及以上的剂量均是非安全剂量。化合物DF13可能会影响小鼠体重的正常增长；12.5mg/kg的剂量可能会影响小鼠肝脏的正常发育；50mg/kg的剂量会引发小鼠出现抽搐的不良反应。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
Claims (8)
1.一种法舒地尔衍生物，具有式I所示结构：
式I中，n＝0或1；
式I中，R1为H、羟基、烷基、烷氧基、氰基或酰基中的一种；
R2为
中的一种；
其中R3为H或F；
R4为H、-OMe或-OAc；
R5为-OH、-OAc或
m＝1～5；
R6为H或-OMe。
2.根据权利要求1所述的法舒地尔衍生物，其特征在于，具有式I-1～式I-23任意一项所示结构：
3.权利要求1或2所述的法舒地尔衍生物的制备方法，包括以下步骤：
具有式a所示结构的法舒地尔类化合物与具有Cl-R2或HO-R2所示结构的化合物进行缩合反应，得到具有式I所示结构的法舒地尔衍生物；
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述具有Cl-R2所示结构的化合物包括
所述具有HO-R2所示结构的化合物包括
5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述缩合反应在三乙胺存在下进行。
6.根据权利要求4或5所述的制备方法，其特征在于，所述缩合反应的温度为0～30℃，时间为1～8h。
7.权利要求1或2所述的法舒地尔衍生物或权利要求3～6任意一项所述制备方法制备得到的法舒地尔衍生物在制备保护神经药物中的应用。
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述保护神经药物为抗缺血性脑卒中药物。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202310322562.7A CN116375685B (zh) | 2023-03-29 | 2023-03-29 | 一种法舒地尔衍生物及其制备方法和应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202310322562.7A CN116375685B (zh) | 2023-03-29 | 2023-03-29 | 一种法舒地尔衍生物及其制备方法和应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN116375685A true CN116375685A (zh) | 2023-07-04 |
| CN116375685B CN116375685B (zh) | 2023-12-12 |
Family
ID=86976264
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202310322562.7A Active CN116375685B (zh) | 2023-03-29 | 2023-03-29 | 一种法舒地尔衍生物及其制备方法和应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN116375685B (zh) |
Citations (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2001005790A1 (en) * | 1999-07-21 | 2001-01-25 | Astrazeneca Ab | New compounds |
| CN101139267A (zh) * | 2007-10-09 | 2008-03-12 | 沈阳药科大学 | 白藜芦醇衍生物、类似物及其制备方法和用途 |
| CN104557897A (zh) * | 2014-04-10 | 2015-04-29 | 中山大学 | 法舒地尔-硫辛酸二联体的合成及其应用 |
| CN107935976A (zh) * | 2017-11-13 | 2018-04-20 | 山东大学 | 香豆素酰胺衍生物及其应用 |
| CN109096235A (zh) * | 2018-11-01 | 2018-12-28 | 沈阳药科大学 | 2,2-二甲基苯并吡喃类衍生物及其制备方法和用途 |
| CN109734701A (zh) * | 2019-03-04 | 2019-05-10 | 中国药科大学 | Rock抑制剂-二氯乙酸复盐及其制备方法和用途 |
| CN111116449A (zh) * | 2019-11-22 | 2020-05-08 | 兰州大学 | 一种新型色胺衍生物及其制备方法和应用 |
| KR20200085178A (ko) * | 2019-01-04 | 2020-07-14 | 한국외국어대학교 연구산학협력단 | 광활성 형광체 화합물, 상기 광활성 형광체 화합물을 포함하는 조성물(광활성 형광체 조성물) 및 이들의 제조 방법 |
| CN111518028A (zh) * | 2020-05-12 | 2020-08-11 | 中国药科大学 | 一种一氧化氮供体型ripasudil衍生物及其制备方法和用途 |
-
2023
- 2023-03-29 CN CN202310322562.7A patent/CN116375685B/zh active Active
Patent Citations (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2001005790A1 (en) * | 1999-07-21 | 2001-01-25 | Astrazeneca Ab | New compounds |
| CN1361779A (zh) * | 1999-07-21 | 2002-07-31 | 阿斯特拉曾尼卡有限公司 | 新化合物 |
| CN101139267A (zh) * | 2007-10-09 | 2008-03-12 | 沈阳药科大学 | 白藜芦醇衍生物、类似物及其制备方法和用途 |
| CN104557897A (zh) * | 2014-04-10 | 2015-04-29 | 中山大学 | 法舒地尔-硫辛酸二联体的合成及其应用 |
| CN107935976A (zh) * | 2017-11-13 | 2018-04-20 | 山东大学 | 香豆素酰胺衍生物及其应用 |
| CN109096235A (zh) * | 2018-11-01 | 2018-12-28 | 沈阳药科大学 | 2,2-二甲基苯并吡喃类衍生物及其制备方法和用途 |
| KR20200085178A (ko) * | 2019-01-04 | 2020-07-14 | 한국외국어대학교 연구산학협력단 | 광활성 형광체 화합물, 상기 광활성 형광체 화합물을 포함하는 조성물(광활성 형광체 조성물) 및 이들의 제조 방법 |
| CN109734701A (zh) * | 2019-03-04 | 2019-05-10 | 中国药科大学 | Rock抑制剂-二氯乙酸复盐及其制备方法和用途 |
| CN111116449A (zh) * | 2019-11-22 | 2020-05-08 | 兰州大学 | 一种新型色胺衍生物及其制备方法和应用 |
| CN111518028A (zh) * | 2020-05-12 | 2020-08-11 | 中国药科大学 | 一种一氧化氮供体型ripasudil衍生物及其制备方法和用途 |
Non-Patent Citations (5)
| Title |
|---|
| 尉杰忠;谷青芳;闫玉清;余鸿强;郭敏芳;刘春云;宋国斌;柴智;王青;肖保国;张汉霆;降雨强;马存根;: "法舒地尔通过抑制脑内小胶质细胞活化并促进其M2极化而改善APP/PS1双转基因小鼠认知功能", 细胞与分子免疫学杂志, no. 12 * |
| 杨锡彤;王光明;: "法舒地尔治疗脑卒中的研究进展", 广东医学, no. 13 * |
| 赵克勤;夏友华;严忠文;周学海;: "法舒地尔治疗急性缺血性脑卒中的临床观察", 中国医院药学杂志, no. 06 * |
| 陈美惠;刘安民;巢晓娟;皮荣标;: "Rho激酶抑制剂法舒地尔对中枢神经系统疾病作用及其结构改造的研究进展", 中国新药杂志, no. 01 * |
| 韩美玲, 中国优秀硕士学位论文全文数据库, no. 2 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN116375685B (zh) | 2023-12-12 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US8084454B2 (en) | Compounds with anti-cancer activity | |
| RU2585763C2 (ru) | Новые ингибиторы s-нитрозоглутатионредуктазы | |
| CA2774133C (en) | Compounds effective as xanthine oxidase inhibitors, method for preparing the same, and pharmaceutical composition containing the same | |
| WO2020259432A1 (zh) | Kras-g12c抑制剂 | |
| JP5670266B2 (ja) | フラザノベンゾイミダゾール | |
| JP5898230B2 (ja) | Ｓ−ニトロソグルタチオンレダクターゼ阻害薬としての新規な置換二環芳香族化合物 | |
| US11370803B2 (en) | Heteroaryl plasma kallikrein inhibitors | |
| EP4233871A2 (en) | Inhibiting the transient receptor potential a1 ion channel | |
| KR20210097100A (ko) | 2-(1-아실옥시-n-펜틸)벤조산 및 염기성 아미노산 또는 아미노구아니딘이 형성하는 염, 이의 제조 방법 및 용도 | |
| WO2023062575A1 (en) | Cyclic vinyl sulfone compounds as wrn inhibitors | |
| EP3119791B1 (en) | Fumarate-co-releasing molecule hybrids, their use in the treatment of inflammatory or cardiovascular diseases and their process of preparation | |
| CN109096235B (zh) | 2,2-二甲基苯并吡喃类衍生物及其制备方法和用途 | |
| EP3781165A1 (en) | Aminopyrazines and related compounds useful as mitochondrial uncouplers | |
| CN116375685B (zh) | 一种法舒地尔衍生物及其制备方法和应用 | |
| KR102591689B1 (ko) | 섬유증 및 섬유증 관련 질병 치료용 조성물 | |
| TW200526642A (en) | Heterocyclic derivatives | |
| CN116041300B (zh) | 一种2,2-二甲基苯并吡喃类衍生物及其制备方法和应用 | |
| WO2022116968A1 (zh) | 一种新型n-杂环bet溴结构域抑制剂、其制备方法及医药用途 | |
| CN112778154B (zh) | 芳基烷基醚化合物及其衍生物，制备方法、药物组合物和应用 | |
| WO2024061172A1 (zh) | 一种脯氨酰羟化酶抑制剂及其用途 | |
| EP3353186B1 (en) | Highly efficient nrf2 activators-co-releasing molecule hybrids, their use in the treatment of inflammatory or cardiovascular diseases and their process of preparation | |
| CN118126023A (zh) | 吡唑酰胺类化合物及其制备方法与应用 | |
| CA2088503A1 (en) | Phenolic thioetheramides as 5-lipoxygenase inhibitors | |
| CN117263944A (zh) | 泛素特异性蛋白酶1抑制剂及其用途 | |
| CN117164561A (zh) | 一种氧代嘧啶类化合物及其制备方法和用途 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |