CN116338052A - 一种o-磺基-l-酪氨酸钠盐及其有关物质的高效液相色谱分析方法 - Google Patents

一种o-磺基-l-酪氨酸钠盐及其有关物质的高效液相色谱分析方法 Download PDF

Info

Publication number
CN116338052A
CN116338052A CN202310360705.3A CN202310360705A CN116338052A CN 116338052 A CN116338052 A CN 116338052A CN 202310360705 A CN202310360705 A CN 202310360705A CN 116338052 A CN116338052 A CN 116338052A
Authority
CN
China
Prior art keywords
mobile phase
trifluoroacetic acid
high performance
performance liquid
acetonitrile
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202310360705.3A
Other languages
English (en)
Inventor
年成
陈卫
张飞
郭旭升
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Anhui Yingke Biotechnology Co ltd
Original Assignee
Anhui Yingke Biotechnology Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Anhui Yingke Biotechnology Co ltd filed Critical Anhui Yingke Biotechnology Co ltd
Priority to CN202310360705.3A priority Critical patent/CN116338052A/zh
Publication of CN116338052A publication Critical patent/CN116338052A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
    • G01N30/06—Preparation
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/26—Conditioning of the fluid carrier; Flow patterns
    • G01N30/28—Control of physical parameters of the fluid carrier
    • G01N30/34—Control of physical parameters of the fluid carrier of fluid composition, e.g. gradient
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/62—Detectors specially adapted therefor
    • G01N30/74—Optical detectors
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N2030/022—Column chromatography characterised by the kind of separation mechanism
    • G01N2030/027—Liquid chromatography
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
    • G01N2030/042—Standards
    • G01N2030/047—Standards external

Landscapes

  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Spectroscopy & Molecular Physics (AREA)
  • Treatment Of Liquids With Adsorbents In General (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)

Abstract

本发明提供了一种O‑磺基‑L‑酪氨酸钠盐及其有关物质的高效液相色谱分析方法。具体地，提供了一种分析O‑磺基‑L‑酪氨酸钠盐及其有关物质的高效液相色谱法，本发明的方法色谱图基线平稳，出峰时间合理，峰型对称性好且重现性好，非常适合O‑磺基‑L‑酪氨酸钠盐的定性和定量检测。

Description

一种O-磺基-L-酪氨酸钠盐及其有关物质的高效液相色谱分 析方法
技术领域
本发明涉及一种O-磺基-L-酪氨酸钠盐及其有关物质的高效液相色谱分析方法。
背景技术
O-磺基-L-酪氨酸钠盐(O-Sulfo-L-tyrosine sodium salt)，CAS号：98930-06-4,分子式C9H10NO6S·Na分子量283.23，为类白色或黄色粉末，结构式：
Figure BDA0004165018760000011
O-磺基-L-酪氨酸钠盐是一种用于蛋白质组学研究的氨基酸化合物，在生物体内酪氨酸被磺酸化是一个较为普遍的现象。因此，酪氨酸-O-磺酸在多肽及蛋白质合成上有着较广泛的应用，强酸性基团磺酸的引入极大地改善了酪氨酸的亲水性，在多肽合成中引入酪氨酸-O-磺酸能在一定程度上改善多肽的水溶性，有利于后续多肽的合成以及纯化工作。
O-磺基-L-酪氨酸钠盐的合成工艺在不断改进下已逐步完善，但检测方法未见有相关报导或相关文献，化学合成的O-磺基-L-酪氨酸钠盐在合成工艺中，难免引入一系列的杂质，其存在将严重影响O-磺基-L-酪氨酸钠盐的产品质量。为后续的多肽合成引入不必要的杂质。因此，为了保证O-磺基-L-酪氨酸钠盐产品质量，提高安全性，对其有关物质进行严格的质量控制具有非常重要的意义。
发明内容
本发明的目的是提供一种可以高效、定量检测O-磺基-L-酪氨酸钠盐及其有关物质的高效液相色谱分析方法。
具体地，提供了一种O-磺基-L-酪氨酸钠盐及其有关物质的高效液相色谱分析方法，包括步骤：
(i)提供一样品；
(ii)将所述样品上样至高效液相色谱仪进行分析从而得到色谱分析数据，其中，所述色谱的检测条件包括：
色谱柱：C8柱，150mm×4.6mm，3.5μm；
流动相由流动相A和流动相B组成；
流动相A：0.01％～0.1％v/v的三氟乙酸水溶液；
流动相B：体积比乙腈:水：三氟乙酸＝(450～600)：(350～650)：(0～1)；
洗脱方式：梯度洗脱；和
检测波长为200-230nm。
在另一优选例中，所述流动相A为0.04％-0.1％v/v三氟乙酸水溶液，更佳地0.05-0.08％v/v三氟乙酸水溶液。
在另一优选例中，流动相B中水、乙腈、三氟乙酸的体积比为(480～520)：(480～520)：(0.4-0.6)，更佳地水、乙腈、三氟乙酸的体积比为500：500：0.5。
在另一优选例中，其流动相A为0.05％v/v三氟乙酸水溶液；流动相B中水、乙腈、三氟乙酸的体积比为500：500：0.5。
在另一优选例中，所述样品的稀释溶剂为水。
在另一优选例中，所述方法包括一个或多个下述特征：
其柱温为25～50℃，较佳地35-45℃，更佳地，40℃。
流速为0.5～1.2mL/min，较佳地0.8-1.2mL/min，更佳地1.0mL/min；
进样量为5-20μL，较佳地，10-15μL；和/或
紫外检测波长为210-220nm，更佳地214nm。
在另一优选例中，所述色谱柱的固定相为辛烷基硅烷键合硅胶(LP-C8)，更佳地所述色谱柱为Ultimate LP-C8,150mm×4.6mm，3.5μm。
在另一优选例中，色谱仪为E2695(Waters)。
在另一优选例中，洗脱梯度为：
Figure BDA0004165018760000021
Figure BDA0004165018760000031
在另一优选例中，洗脱梯度为：
Figure BDA0004165018760000032
在另一优选例中，所述方法中包括，色谱仪：E2695(Waters)色谱柱：UltimateLP-C8 150mm×4.6mm，3.5μm
流动相A：0.5％或0.1％v/v三氟乙酸
流动相B：水、乙腈、三氟乙酸的体积比为500：500：0.5；流速：1.0ml/min
柱温：40℃
进样量：10ul
检测波长：214nm
洗脱梯度：
Figure BDA0004165018760000033
Figure BDA0004165018760000041
在另一优选例中，所述有关杂质包括L-酪氨酸。使用本发明的方法，L-酪氨酸在主峰后0.5-1min内出峰，其峰型和分离度等都符合测定要求。
在另一优选例中，所述方法还包括步骤：使用标准样品，通过保留时间对样品进行定性分析。
在另一优选例中，所述方法还包括步骤：使用标准样品通过所述方法建立外标曲线，从而定量分析待测样品中的待测物浓度。
应理解，在本发明范围内中，本发明的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅，在此不再一一累述。
附图说明
图1是实施例2中初始比例中含有机相的梯度程序的谱图；
图2是实施例2中初始比例中不含有机相的梯度程序的谱图；
图3是实施例3中50％乙腈为流动相B的谱图；
图4是实施例3中含0.05％TFA的50％乙腈为流动相B的谱图；
图5是实施例4的一个谱图。
具体实施方式
本发明人经过广泛而深入的研究，通过大量筛选和测试，提供了一种分析O-磺基-L-酪氨酸钠盐及其有关物质的高效液相色谱法，本发明的方法色谱图基线平稳，出峰时间合理，峰型对称性好且重现性好，非常适合O-磺基-L-酪氨酸钠盐的定性和定量检测。在此基础上完成了本发明。
术语
除非另有定义，否则本文中所用的全部技术术语和科学术语均具有如本发明所属领域普通技术人员通常理解的相同含义。
如本文所用，术语“含有”或“包括(包含)”可以是开放式、半封闭式和封闭式的。换言之，所述术语也包括“基本上由…构成”、或“由…构成”。
如本文所用，术语“室温”或“常温”是指温度为4-40℃，较佳地，25±5℃。
高效液相色谱分析方法
一种O-磺基-L-酪氨酸钠盐及其有关物质的高效液相色谱分析方法，其特征在于，包括步骤：
(i)提供一样品；
(ii)将所述样品上样至高效液相色谱仪进行分析从而得到色谱分析数据，其中，所述色谱的检测条件包括：
色谱柱：C8柱，150mm×4.6mm，3.5μm；
流动相由流动相A和流动相B组成；
流动相A：0.01％～0.1％v/v的三氟乙酸水溶液；
流动相B：体积比乙腈:水：三氟乙酸＝(450～600)：(350～650)：(0～1)；
洗脱方式：梯度洗脱；和
检测波长为200-230nm。
优选地，洗脱梯度为：
Figure BDA0004165018760000051
优选地，色谱条件包括：
仪器：E2695(Waters)
色谱柱：UltimateLP-C8 150mm×4.6mm，3.5μm
流动相A：0.01％～0.1％三氟乙酸水溶液
流动相B：水：乙腈：三氟乙酸＝(350～650)：(450～600)：(0～1)(体积比)
流速：0.5～1.2ml/min
柱温：25～50℃
进样量：10ul
检测波长：214nm
洗脱梯度：
Figure BDA0004165018760000061
通常，所述有关杂质包括L-酪氨酸。使用本发明的方法，L-酪氨酸在一般主峰后0.5-1min内出峰，其峰型和分离度等都符合测定要求。
进一步地，所述方法还包括步骤：使用标准样品，通过保留时间对样品进行定性分析。
进一步地，所述方法还包括步骤：使用标准样品通过所述方法建立外标曲线，从而定量分析待测样品中的待测物浓度。
本发明的主要优点包括：
本发明提供了一种分析O-磺基-L-酪氨酸钠盐及其有关物质的高效液相色谱法，本发明的方法色谱图基线平稳，出峰时间合理，峰型对称性好且重现性好，非常适合O-磺基-L-酪氨酸钠盐的定性和定量检测。
下面结合具体实施，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则百分比和份数按重量计算。
实施例1
供试品溶液：取O-磺基-L-酪氨酸钠盐样品约10mg，以纯水作为溶剂溶解并定容后作为供试品溶液。
仪器与色谱条件：
仪器：E2695(Waters)
色谱柱：UltimateLP-C8 150mm×4.6mm，3.5μm
流动相A：条件变动项
流动相B：水：乙腈：三氟乙酸＝500：500：0(体积比)
流速：1.0ml/min
柱温：40℃
进样量：10ul
检测波长：214nm
洗脱梯度：
Figure BDA0004165018760000071
分别以0.05％和0.1％的三氟乙酸水溶液作为流动相A，其他条件不变，记录色谱图。
实验结论：
选用上述两个浓度的三氟乙酸作为流动相时，峰形对称度等均满足测定需求，但0.1％三氟乙酸pH为1.5-2.5左右，而0.05％三氟乙酸pH为2.0-3.5左右，为避免色谱柱在过酸性的环境下出现填料流失等情况，故采用0.05％三氟乙酸作为流动相A。
实施例2
仪器与色谱条件：
仪器：E2695(Waters)
色谱柱：UltimateLP-C8 150mm×4.6mm，3.5μm
流动相A：0.1％三氟乙酸
流动相B：水：乙腈：三氟乙酸＝500：500：0(体积比)
流速：1.0ml/min
柱温：40℃
进样量：10ul
检测波长：214nm
洗脱梯度：条件变动相
分别以下列两个梯度进行检测，其他条件不变记录色谱图：
梯度1：
Figure BDA0004165018760000081
梯度2：
Figure BDA0004165018760000082
实验结论：
梯度1初始比例中包含流动相B时，流动相中含有约5％的乙腈，由于乙腈的洗脱能力较强，导致主峰出峰时间过于提前(如图1)，与溶剂峰集中在前部，无法进行定量检测，故选用梯度2作为实验梯度(如图2)。
实施例3
仪器与色谱条件：
仪器：E2695(Waters)
色谱柱：UltimateLP-C8 150mm×4.6mm，3.5μm
流动相A：0.1％三氟乙酸
流动相B：条件变动项
流速：1.0ml/min
柱温：40℃
进样量：10ul
检测波长：214nm
洗脱梯度：
Figure BDA0004165018760000091
分别以含0.05％三氟乙酸的50％乙腈溶液和50％乙腈溶液作为流动相B，其他条件不变的情况下，记录色谱图。
实验结论：
当流动相B中不含0.05％的三氟乙酸时，梯度变化过程中基线波动较大(如图3)，对定量检测带来较大的干扰，加入0.05％三氟乙酸后，基线相对平稳，有利于定量检测。故选用含有0.05％三氟乙酸的50％乙腈作为流动相B(如图4)。
本发明研究了流动相A、流动相B、洗脱梯度对结果的影响。
由实施例1的实验表明，流动相A为0.05％TFA时流动相pH范围较佳，对机器及色谱柱损伤小，且与0.1％TFA相比峰形对称度等相差不大，因此，选择0.05％TFA作为流动相A。
实施例4
仪器与色谱条件：
仪器：E2695(Waters)
色谱柱：UltimateLP-C8 150mm×4.6mm，3.5μm
流动相A：0.05％三氟乙酸
流动相B：含0.05％三氟乙酸的50％乙腈溶液
流速：1.0ml/min
柱温：40℃
进样量：10ul
检测波长：214nm
洗脱梯度：
Figure BDA0004165018760000101
从图5可以看出，以0.05％三氟乙酸作为流动相A，含0.05％三氟乙酸的50％乙腈溶液作为流动相B，色谱图基线平稳，出峰时间合理，峰型对称性好且重现性好，非常适合O-磺基-L-酪氨酸钠盐的定性和定量检测。且所述检测方法主峰与前后杂质之间的分离度(如L-酪氨酸在主峰后约0.5min出峰，其与主峰的分离度，峰形等均符合测定需求)、理论塔板数和拖尾因子均可以满足方法要求。
由实施例2的实验表明，初始梯度中不可含有有机相，否则出峰时间过于提前，导致主峰与溶剂峰无法完全分离，影响检测结果，故选用耐低pH及纯水相冲洗的C8柱月旭Ultimate LP-C8作为本方法色谱柱，故调整梯度程序为初始比例为不含有机相的纯水相冲洗出主峰后逐步增加有机相比例。
由实施例3的实验表明，以50％乙腈溶液作为流动相B时，梯度过程中吸收值差异较大，基线不平稳，所以，选择含有0.05％的三氟乙酸的50％乙腈溶液作为本方法的流动相B。
实施例4的实验表明，本发明的实验条件下，色谱图的峰型、基线、重现性和与杂质的分离度都具有优异的效果，而且所述色谱条件温和，对色谱柱损伤小。
本发明的方法使用辛烷基固定相填料色谱柱，该类型色谱柱具有更高低pH耐受性并耐纯水相冲洗，以及较低的载碳量，在特定的色谱条件下，可以更准确有效地测定O-磺基-L-酪氨酸钠盐及其有关物质。本发明提供的检测方法主峰与前后杂质之间的分离度、理论塔板数和拖尾因子均可以满足方法要求。
在本发明提及的所有文献都在本申请中引用作为参考，就如同每一篇文献被单独引用作为参考那样。此外应理解，在阅读了本发明的上述讲授内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。

Claims (10)

1.一种O-磺基-L-酪氨酸钠盐及其有关物质的高效液相色谱分析方法，其特征在于，包括步骤：
(i)提供一样品；
(ii)将所述样品上样至高效液相色谱仪进行分析从而得到色谱分析数据，其中，所述色谱的检测条件包括：
色谱柱：C8柱，150mm×4.6mm，3.5μm；
流动相由流动相A和流动相B组成；
流动相A：0.01％～0.1％v/v的三氟乙酸水溶液；
流动相B：体积比乙腈:水：三氟乙酸＝(450～600)：(350～650)：(0～1)；
洗脱方式：梯度洗脱；和
检测波长为200-230nm。
2.根据权利要求1所述的高效液相色谱分析方法，其特征在于，所述流动相A为0.04％-0.1％v/v三氟乙酸水溶液，更佳地0.05-0.08％v/v三氟乙酸水溶液。
3.根据权利要求1所述的高效液相色谱分析方法，其特征在于，流动相B中水、乙腈、三氟乙酸的体积比为(480～520)：(480～520)：(0.4-0.6)，更佳地水、乙腈、三氟乙酸的体积比为500：500：0.5。
4.根据权利要求1所述的高效液相色谱分析方法，其特征在于，其流动相A为0.05％v/v三氟乙酸水溶液；流动相B中水、乙腈、三氟乙酸的体积比为500：500：0.5。
5.根据权利要求1所述的高效液相色谱分析方法，其特征在于，所述方法包括一个或多个下述特征：
其柱温为25～50℃，较佳地35-45℃，更佳地，40℃；
流速为0.5～1.2mL/min，较佳地0.8-1.2mL/min，更佳地1.0mL/min；
进样量为5-20μL，较佳地，10-15μL；和/或
紫外检测波长为210-220nm，更佳地214nm。
6.根据权利要求1所述的高效液相色谱分析方法，其特征在于，所述色谱柱的固定相为辛烷基硅烷键合硅胶(LP-C8)，更佳地所述色谱柱为Ultimate LP-C8,150mm×4.6mm，3.5μm。
7.根据权利要求1至6任一项所述的高效液相色谱分析方法，其特征在于，洗脱梯度为：
Figure FDA0004165018750000021
8.根据权利要求1至6任一项所述的高效液相色谱分析方法，其特征在于，洗脱梯度为：
Figure FDA0004165018750000022
9.根据权利要求1所述的高效液相色谱分析方法，其特征在于，所述方法中包括，色谱仪：E2695(Waters)
色谱柱：UltimateLP-C8 150mm×4.6mm，3.5μm
流动相A：0.5％或0.1％v/v三氟乙酸
流动相B：水、乙腈、三氟乙酸的体积比为500：500：0.5；
流速：1.0ml/min
柱温：40℃
进样量：10ul
检测波长：214nm
洗脱梯度：
Figure FDA0004165018750000031
10.根据权利要求1所述的高效液相色谱分析方法，其特征在于，所述方法还包括步骤：使用标准样品通过所述方法建立外标曲线，从而定量分析待测样品中的待测物浓度。
CN202310360705.3A 2023-04-06 2023-04-06 一种o-磺基-l-酪氨酸钠盐及其有关物质的高效液相色谱分析方法 Pending CN116338052A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202310360705.3A CN116338052A (zh) 2023-04-06 2023-04-06 一种o-磺基-l-酪氨酸钠盐及其有关物质的高效液相色谱分析方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202310360705.3A CN116338052A (zh) 2023-04-06 2023-04-06 一种o-磺基-l-酪氨酸钠盐及其有关物质的高效液相色谱分析方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN116338052A true CN116338052A (zh) 2023-06-27

Family

ID=86883995

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202310360705.3A Pending CN116338052A (zh) 2023-04-06 2023-04-06 一种o-磺基-l-酪氨酸钠盐及其有关物质的高效液相色谱分析方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN116338052A (zh)

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Van Wandelen et al. Using quaternary high-performance liquid chromatography eluent systems for separating 6-aminoquinolyl-N-hydroxysuccinimidyl carbamate-derivatized amino acid mixtures
US4133753A (en) Method of ion exchange chromatography
CN108445071B (zh) 一种高准确度糖化血红蛋白标准物质定值方法
CN111443151B (zh) 复方氨基酸注射液中微量半胱氨酸含量的检测方法
JPS62209055A (ja) アミノ酸分析のためのアミノ酸蛍光誘導体混合物とアミノ酸分析のためのアミノ酸蛍光誘導体混合物の製造方法とアミノ酸蛍光誘導体混合物をアミノ酸分析に使用する方法
US4399227A (en) Process for determination of glycosylated hemoglobin and reagent therefor
JP2782470B2 (ja) グリコヘモグロビンの分離方法および分離装置並びに分離カラム
CN113049719A (zh) 一种检测游离睾酮的方法及试剂盒
CN110632214B (zh) 兽用硫酸庆大霉素中组胺含量的测定方法
Prados et al. A fully automated HPLC method for the determination of catecholamines in biological samples utilizing ethylenediamine condensation and peroxyoxalate chemiluminescence detection
CN113219089B (zh) 一种柱后衍生-液相色谱检测尿素的方法
DE69219384T2 (de) Packungen mit über Spacer an Träger gebundenem Protein
CN116338052A (zh) 一种o-磺基-l-酪氨酸钠盐及其有关物质的高效液相色谱分析方法
CN116559352A (zh) 肉及肉制品中l-羟脯氨酸的检测方法
CN115463642B (zh) 多功能基团修饰的硅胶及其制备和应用
US6497820B1 (en) Rapid method for separation of small molecules using reverse phase high performance liquid chromatography
CN112432906B (zh) 一种基于圆二色光谱技术的手性物质的定性定量分析方法
CN110632197B (zh) 一种二硫化二苯并噻唑生产工艺中苯并噻唑及其衍生物的分析检测方法
CN110095554B (zh) 高效液相色谱分析米力农有关物质的方法
Kuhlenbeck et al. On-line solid phase extraction using the Prospekt-2 coupled with a liquid chromatography/tandem mass spectrometer for the determination of dextromethorphan, dextrorphan and guaifenesin in human plasma
CN112034066A (zh) 一种分离测定瑞博西尼及杂质的方法
AU744950B2 (en) Rapid method for separation of small molecules using reverse phase high performance liquid chromatography
EP1019731B1 (en) High speed chromatographic method for hemoglobin variants screening and quantification of hemoglobins a 2? and f
CN116858978B (zh) 一种同时检测门冬胰岛素和德谷胰岛素的方法及其血浆样品处理方法
CN111122742B (zh) 一种待测样品中二巯基聚乙二醇残留量的检测方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination