CN116332910A - 2-氨基嘧啶衍生物作为激酶抑制剂及其制备和应用 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及具有式（I）的2‑氨基嘧啶衍生物、含有式（I）化合物的药物组合物及所述化合物在制备预防或治疗激酶相关疾病药物的用途，特别是用于预防或治疗与蛋白质酪氨酸激酶相关癌症的用途。其中式（I）中的各取代基与说明书中的定义相同。

Description

2-氨基嘧啶衍生物作为激酶抑制剂及其制备和应用
技术领域
本发明属于医药技术领域，具体涉及2-氨基嘧啶衍生物及其用于制备癌症治疗药物的用途。
背景技术
FMS样酪氨酸激酶3(FLT3)是一种III型受体酪氨酸激酶，在造血作用和淋巴细胞增殖中发挥关键作用。FLT3由一个N-端细胞外结构区、一个跨膜区以及一个细胞内激酶区(含一个近膜结构域及一个激酶催化域)所组成，其中细胞内激酶区的激酶催化域由一个N端、一个含有活化环的C端以及一个含有ATP的结合位点的柔性激酶插入结构域所组成。FLT3的天然配体包括血小板源性生长因子(PDGF)、集落刺激因子1(CSF-1)和Kit激酶配体(KL)(Molecular Cell,2004,13,169)。当FLT3受体的细胞膜外结构域与配体结合后，FLT3会与相应的配体形成二聚体复合物从而使活化环开启，此时底物蛋白连接到ATP结合位点上从而催化底物蛋白的磷酸化，激活下游的磷脂酰肌醇-3-羟激酶(PI3K)通路和Ras通路。研究证明FLT3与Src、Grb2、Shc和Shp2等下游信号蛋白的激活直接相关(Curr Med Chem,2008,15,3113)。
FLT3的突变以及过度表达是造成多种恶性肿瘤、急性髓性白血病(AML)、急性淋巴细胞白血病(ALL)以及慢性髓性白血病(CML)的关键因素。AML的发病往往伴随着FLT3的异常活化，FLT3突变是造成其异常活化的主要原因。FLT3-ITD突变(近膜处的内部串联复制突变)在AML患者中最常见，大约30％的AML患者携带这种突变。此外，携带FLT3氨酸激酶结构域(FLT3-TKD)突变的AML患者占到5～10％。点突变最常见的是位于酪氨酸激酶结构域(FLT3-TKD)的天冬氨酸-酪氨酸的突变(D835Y)。与FLT3-ITD相似，FLT-TKD突变同样导致下游增殖途径的激活。D835Y点突变同样也是部分FLT3(ITD)抑制剂耐药的主要机制，如FLT3抑制剂Crenolanib耐药与D835Y点突变相关。FLT3突变的患者往往具有较差的预后。
早期FLT3抑制剂如舒尼替尼(Sunitinib)、索拉非尼(Sorafenib)和来他替尼(Lestaurtinib妥林(Midostaurin)是第一种单药方案能短时效地降低FLT3突变AML患者外周和骨髓原始细胞的数目的FLT3激酶抑制剂。临床试验表明，在年轻初诊AML患者中，米哚妥林联合传统化疗对WT型和FLT3突变都具有高的完全缓解率。但米哚妥林对FLT3的选择性仍然不高，需与常规化疗方案联合以达到更显著的治疗效果。因此开发活性、选择性更高的FLT3抑制剂仍然十分迫切。
细胞周期蛋白依赖性激酶(CDKs)属于丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Ser/Thrkinase)，CDKs家族主要参与调控细胞周期分裂、转录起始和某些特定代谢级联反应控制等。目前CDKs总共有21种，其按功能可以分为两类:调控细胞周期型CDKs和转录调控型CDKs。其中CDK9的功能是转录调控，促进转录延伸，不参与细胞周期的调节。CDK9具有两个亚型42kDa与55kDa，可分别与细胞周期蛋白cyclin T1、cyclin T2a、cyclin T2b或cyclinK形成二聚体，作为正性转录延长因子b(P-TEFb)的主要组成部分。抑制CDK9则可以防止P-TEFb活性复合物形成，抑制其延伸转录功能，从而阻断RNA聚合酶II转录延伸，抑制短寿命抗凋亡蛋白(如MCL-1，半衰期2～4h)的表达，最终导致癌细胞凋亡。研究表明，通过抑制CDK9可降低MCL-1、XIAP、Bcl-2等抗凋亡蛋白的表达(Int J Cancer.2012,130,1216)。
CDK9是临床针对血液系统肿瘤和淋巴瘤的热门靶点，目前已有多种药物进入临床实验阶段。CDK9抑制剂对ALL、AML、CML、NHL、MM等多种肿瘤细胞系有较强的生长抑制作用(Mol Cancer Ther；13(6)June 2014)。Flavopiridol是第一个进入临床实验阶段的CDK抑制剂，可以促进细胞周期阻滞，诱导肿瘤细胞凋亡，影响转录进程。Flavopiridol对淋巴瘤效果显著，响应率80％以上；与阿糖胞苷和米托蒽醌合用，可使新诊断急性髓性白血病(AML)的缓解率达到75％(Clin Cancer Res,2007,13(15),August 1)。
TG-02是Tragara制药公司收购的针对血液肿瘤、小淋巴细胞瘤的CDK9抑制剂。在体外，TG-02可以通过MAPK\ERK5通路抑制MM的增殖并且诱导凋亡。目前，TG-02正在进行多项临床Ⅰ期实验。已完成的临床试验显示TG-02可以影响白血病干细胞的增殖，并提高提高了其对化疗药物的敏感性。2015年11月，Tragara公司宣布同香港李氏制药公司合作，共同对TG-02进行开发，用于治疗血液及实体肿瘤。
此外，进入临床研究的CDK9抑制剂还有dinaciclib、seliciclib、SNS-032和RGB-286638等。
通过活性筛选，意外的发现本专利发明化合物具有显著的FLT3和CDK9抑制活性，具有治疗FLT3和CDK9相关疾病的潜力。
发明内容
本发明的目的是提供一种2-氨基嘧啶类蛋白激酶抑制剂。
本发明的另一个目的是提供所述的蛋白激酶抑制剂在制备预防或治疗FLT3、CDK9激酶相关疾病药物的用途。
为实现本发明的目的，本发明的技术方案如下：
本发明所述的如式(I)所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，其特征在于：
Figure BDA0004006585300000031
环A选自6～10元芳基或5～10元杂芳基；
环B选自6～10元芳基或5～10元杂芳基；
环C选自3～8元碳环或4～12元杂环基；
R1选自H、任选取代或未取代的C1-8直链或支链烷基、C3-8环烷基、C4-12杂环基、-NR11S(O)mR12、-NR11C＝OR12、-(CH2)nS(O)mR11、-(CH2)nS(O)mNR11R12、-(CH2)nP(O)mR11、-(CH2)nC＝ONR11R12或-(CH2)nSO＝NR11；
R2选自H、氘、卤素、氰基、氨基、硝基、-C＝OOR11、-C＝ONHR11R12、-C＝OR11、任选取代或未取代的C1-4烷基、C3-8环烷基或C1-4烷氧基；
R3、R4、R5分别独立地选自H、氘、卤素、羟基、C1-4烷氧基、C1-8直链或支链烷基、C3-8环烷基、-COOH、-C＝OR11、-C＝ONR11R12、-(CH2)nNR11R12、-NR11COR12、-NR11S(O)mR12、-S(O)mR11、-S(O)mNR11R12或-(CH2)n-C4-12杂环基，所述C1-8直链或支链烷基、C3-C8环烷基或-(CH2)n-C4-12杂环基可进一步被氘、卤素、羟基、氰基、C1-4烷氧基、C1-8直链或支链烷基、C3-8环烷基、-COOH、-C＝OR11、羟基取代的C1-8烷基、C1-2烷氧基取代的C1-8烷基、-C＝ONR11 R12、-(CH2)nNR11R12、-NR11COR12、-NR11S(O)mR12、-S(O)mR11、-S(O)mNR11R12或C4-12杂环基所取代；
或者，R3、R4和R5两两间连接，形成C3-8环烷基或C4-12杂环基，且所述的C3-8环烷基或C4-12杂环基可进一步被氘、卤素、羟基、氰基、C1-4烷氧基、C1-8烷基、-COOH、-C＝OR11、羟基取代的C1-8烷基、-C＝ONR11R12、-(CH2)nNR11R12、-NR11COR12、-NR11S(O)mR12、-S(O)mR11、-S(O)mNR11R12所取代；
R6和R7各自独立地选自H、氘、氰基、C1-8直链或支链烷基或C3-8环烷基；
或者，R6和R7两两间连接，形成C3-8环烷基或C4-12杂环基，且所述的C3-8环烷基或C4-12杂环基可进一步被氘、卤素、羟基、C1-4烷氧基、-C＝OR11、C1-8烷基、-(CH2)n NR11R12或-NR11COR12所取代；
m选自0、1或2；
n选自0、1或2；
Y选自C、O、S或N；
R8选自H、C1-4烷基、C3-8环烷基、C1-4烷氧基，或者不存在；
R9选自H、氘、卤素、氰基、C1-4烷基、C3-8环烷基、C1-4烷氧基，或者不存在；
R10选自H、氘、卤素、氰基、C1-4烷基、C3-8环烷基、C1-4烷氧基，或者不存在；
R11和R12各各自独立地选自H、任选取代或未取代的C1-4烷氧基、C1-8直链或支链烷基、C3-8环烷基、C4-12杂环基；
或者，R11和R12两两间连接，形成C3-8环烷基或C4-12杂环基，且所述的C3-8环烷基或C4-12杂环基可进一步被氘、卤素、羟基、氰基、C1-4烷氧基、-C＝OR11、C1-8烷基、-(CH2)nNR11R12或-NR11COR12所取代。
本发明优选实施方案，其特征在于：
环A选自苯基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、吡唑基、噁唑基、呋喃基、噻吩基或噻唑基；
环B选自噻吩基、噻唑基、呋喃基、咪唑基、吡唑基、吡咯基、噁唑基、苯基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、萘基、苯并呋喃基、苯并吡咯基、苯并噻唑基、苯并噻吩基、苯并咪唑基、苯并吡唑、苯并噁唑基、噻吩并吡咯基、环戊二烯并吡咯基、吡咯并吡咯基、吡咯并噻唑基、噻吩并噻唑基、吡唑并吡啶基、吡唑并嘧啶基、吡咯并哒嗪基、吡咯并嘧啶基或吡唑并嘧啶基；
环C选自
Figure BDA0004006585300000041
Figure BDA0004006585300000042
R1选自H、-NR11S(O)mR12、-NR11C＝OR12、-(CH2)nS(O)mR11、-(CH2)nS(O)mNR11R12、-
(CH2)nC＝ONR11R12或-(CH2)nSO＝NR11；
R2选自H、卤素、氰基、C1-4烷基或卤素取代的C1-4烷基；
R3、R4、R5分别独立地选自H、氘、卤素、C1-8直链或支链烷基、-C＝OR11、-(CH2)nNR11R12、-NR11COR12、-S(O)mR11或-(CH2)n-C4-12杂环基，所述C1-8直链或支链烷基或-(CH2)n-C4-12杂环基可进一步被氘、卤素、羟基、氰基、C1-4烷基、C1-2烷氧基、-CH2OH、-CH2CH2OH或C4-6杂环基所取代；
或者，R3、R4和R5两两间连接，形成C3-8环烷基或C4-12杂环基，且所述的C4-12杂环基可进一步被羟基、氰基、甲基、乙基、-CH2OH或-CH2CH2OH所取代；
R6和R7各自独立地选自H、氘、C1-8直链或支链烷基或C3-8环烷基；
m选自0、1或2；
n选自0、1或2；
Y选自O、S或N；
R8选自H、C1-4烷基、C1-4烷氧基，或者不存在；
R9选自H、氰基、C1-4烷基、C1-4烷氧基，或者不存在；
R10选自H、氰基、C1-4烷基、C1-4烷氧基，或者不存在；
R11和R12各自独立地选自H、任选取代或未取代的C1-4烷氧基、C1-8直链或支链烷基、C3-8环烷基、C4-12杂环基；
或者，R11和R12两两间连接，形成C3-8环烷基或C4-12杂环基，且所述的C3-8环烷基或C4-12杂环基可进一步被氘、卤素、羟基、氰基、C1-4烷氧基、-C＝OR11、C1-8烷基、-(CH2)nNR11R12或-NR11COR12所取代；
条件是，式(I)化合物不包含以下结构：
Figure BDA0004006585300000051
本发明优选实施方案，其特征在于：
环A选自苯基、吡啶基、吡嗪基；
环B选自噻吩基、噻唑基、呋喃基、咪唑基、吡咯基、苯基、吡啶基、萘基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并咪唑基、苯并噁唑基、苯并吡咯基、苯并噻唑基、噻吩并吡咯基、环戊二烯并吡咯基、吡咯并吡咯基、吡咯并噻唑基、噻吩并噻唑基、吡唑并吡啶基、吡唑并嘧啶基、吡咯并哒嗪基、吡咯并嘧啶基或吡唑并嘧啶基；
环C选自
Figure BDA0004006585300000061
Figure BDA0004006585300000062
R1选自H、-NR11S(O)mR12、-(CH2)nS(O)mR11、-(CH2)nS(O)mNR11R12、或-(CH2)nC＝ONR11R12；
R2选自H、卤素、氰基、C1-4烷基或卤素取代的C1-4烷基；
R3、R4、R5分别独立地选自H、氘、卤素、C1-8直链或支链烷基、-C＝OR11、-(CH2)nNR11R12、-NR11COR12或-(CH2)n-C4-12杂环基，所述C1-8直链或支链烷基或-(CH2)n-C4-12杂环基可进一步被氘、卤素、羟基、氰基、C1-4烷基、C1-2烷氧基、-CH2OH、-CH2CH2OH或C4-6杂环基所取代；
或者，R3、R4和R5两两间连接，形成C3-8环烷基或C4-12杂环基，且所述的C4-12杂环基可进一步被羟基、氰基、甲基、乙基、-CH2OH或-CH2CH2OH所取代；
R6和R7各自独立地选自H、氘；
m选自0、1或2；
n选自0、1或2；
Y选自O、S或N；
R8选自H、C1-4烷基、C1-4烷氧基，或者不存在；
R9选自H、氰基、C1-4烷基、C1-4烷氧基，或者不存在；
R10选自H、氰基、C1-4烷基、C1-4烷氧基，或者不存在；
R11和R12各自独立地选自H、C1-4烷氧基、C1-8直链或支链烷基、C3-8环烷基或C4-12杂环基、羟基取代的C1-8烷基、卤素取代的C1-8烷基或羟基取代的C4-12杂环基；
或者，R11和R12两两间连接，形成C3-8环烷基或C4-12杂环基，且所述的C3-8环烷基或C4-12杂环基可进一步被氘、卤素、羟基、氰基、C1-4烷氧基、-C＝OR11、C1-8烷基、-(CH2)nNR11R12或-NR11COR12所取代。
本发明优选实施方案，其特征在于：
环A选自苯基、吡啶基或吡嗪基；
环B选自苯基或吡啶基；
环C选自
Figure BDA0004006585300000071
Figure BDA0004006585300000072
R1选自H、-NR11S(O)mR12、-(CH2)nS(O)mR11、-(CH2)nS(O)mNR11R12、或-(CH2)nC＝ONR11R12；
R2选自H、卤素、氰基、C1-4烷基或卤素取代的C1-4烷基；
R3、R4、R5分别独立地选自H、氘、卤素、C1-6烷基、-C＝OR11、-(CH2)nNR11R12、-NR11COR12或-(CH2)n-C4-6杂环基，所述C1-6烷基或-(CH2)n-C4-6杂环基可进一步被氘、卤素、羟基、氰基、C1-4烷基、C1-2烷氧基、-CH2OH、-CH2CH2OH、
Figure BDA0004006585300000073
Figure BDA0004006585300000074
所取代；
或者，R3、R4和R5两两间连接，形成C3-5环烷基或C4-6杂环基，且所述的C4-6杂环基可进一步被氰基、甲基、乙基、羟基、-CH2OH或-CH2CH2OH所取代；
R6和R7各自独立地选自H、氘；
m选自0、1或2；
n选自0、1或2；
Y选自O、S或N；
R8选自H、C1-4烷基、C1-4烷氧基，或者不存在；
R9选自H、氰基、C1-4烷基、C1-4烷氧基，或者不存在；
R10选自H、氰基、C1-4烷基、C1-4烷氧基，或者不存在；
R11和R12各自独立地选自H、甲氧基、乙氧基、甲基、乙基、丙基、丁基、环丙基、环丁基、环戊基、-CH2OH-CH2CH2OH-CH2CHF2、
Figure BDA0004006585300000075
Figure BDA0004006585300000076
本发明优选实施方案，其特征在于：
环A选自苯基、吡啶基或吡嗪基；
环B选自苯基或吡啶基；
环C选自
Figure BDA0004006585300000081
Figure BDA0004006585300000082
R1选自H、-N(CH3)S(O)2CH3、-S(O)2CH3或-S(O)2NHC(CH3)3；
R2选自H、F、Cl、Br、氰基、甲基、乙基、丙基、丁基或CF3；
R3、R4、R5各自独立地选自H、氟、氯、溴、甲基、乙基、丙基、-CH2CH2OH、-COCH3、-COCH2OH、-CH2CH2OCH3、-N(CH3)2、-CH2N(CH3)2、
Figure BDA0004006585300000083
Figure BDA0004006585300000084
或者，R3、R4和R5两两间连接，形成C3-5环烷基或C4-6杂环基，且所述的C4-6杂环基可进一步被氰基、甲基、乙基、羟基、-CH2OH或-CH2CH2OH所取代；
R6和R7各自独立地选自H、氘；
Y选自O或N；
R8选自H、甲基、乙基、丙基、丁基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基，或者不存在；
R9选自H、氰基、甲基、乙基、丙基、丁基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基，或者不存在；
R10选自H、氰基、甲基、乙基、丙基、丁基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基，或者不存在。
本发明实施方案，具有如下结构的化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐：
Figure BDA0004006585300000091
Figure BDA0004006585300000101
Figure BDA0004006585300000111
/>
Figure BDA0004006585300000121
/>
Figure BDA0004006585300000131
/>
Figure BDA0004006585300000141
/>
Figure BDA0004006585300000151
/>
Figure BDA0004006585300000161
/>
Figure BDA0004006585300000171
本发明实施方案，具有如下结构的化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐：
Figure BDA0004006585300000172
/>
Figure BDA0004006585300000181
/>
Figure BDA0004006585300000191
/>
Figure BDA0004006585300000201
/>
Figure BDA0004006585300000211
/>
Figure BDA0004006585300000221
/>
Figure BDA0004006585300000231
/>
Figure BDA0004006585300000241
/>
Figure BDA0004006585300000251
本发明实施方案，具有如下结构的化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐：
Figure BDA0004006585300000252
/>
Figure BDA0004006585300000261
/>
Figure BDA0004006585300000271
/>
Figure BDA0004006585300000281
/>
Figure BDA0004006585300000291
本发明另一方面提供式(I)化合物或其药学上可接受的盐或酯或溶剂化物的制备方法，包括如下步骤：
方案一：式(I)化合物制备方法如下：
Figure BDA0004006585300000292
式i-1化合物与式i-2化合物，在碱存在条件下得到式i-3化合物，所采用的溶剂选自三乙胺、DIEA、DMAC、1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯、苯、甲苯、氯仿、正己烷、环己烷、二氯甲烷、1,2-二氯乙烷、甲基叔丁基醚、四氯化碳、乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸丁酯、丙酮、四氢呋喃、乙醚、乙腈、N，N-二甲基甲酰胺或二甲亚砜或它们中的一种或多种的混合溶剂，优选三乙胺、DIEA、DMAC、1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯、N，N-二甲基甲酰胺；所采用的碱选自三乙胺、DIEA、1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯、碳酸钾、碳酸钠、碳酸铯、氢氧化钠、氢氧化钾，优选三乙胺、DIEA、1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯；反应温度为0℃至100℃，优选50℃至70℃；
式i-3化合物与式i-4化合物，在金属催化剂存在条件下得到式(I)化合物，所采用的溶剂选自1,4-二氧六环、DMAC、1-甲基-2吡咯烷酮、异丙醇、叔丁醇、苯、甲苯、氯仿、正己烷、环己烷、甲基叔丁基醚、四氯化碳、乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸丁酯、丙酮、四氢呋喃、乙腈、N，N-二甲基甲酰胺或二甲亚砜或它们中的一种或多种的混合溶剂，优选1,4-二氧六环、四氢呋喃、甲苯、1-甲基-2吡咯烷酮、N，N-二甲基甲酰胺；所采用的碱选自碳酸钾、碳酸钠、碳酸铯、氢氧化钠、氢氧化钾、叔丁醇钠，优选碳酸钾、碳酸铯；所采用的金属催化剂为Pd2(dba)3、Pd(PPh3)2Cl2、Pd(OAc)2，优选Pd2(dba)3；所采用的配体为Xantphos(4,5-双二苯基膦-9,9-二甲基氧杂蒽)、XPhos(2-二环己基磷-2',4',6'-三异丙基联苯)、dppf(双(二苯基膦基)二茂铁)、PCyp3(三环戊基膦四氟硼酸盐)，优选Xantphos；反应温度为50℃至130℃，优选90℃至110℃；
其中，环A、环B、环C、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12、m、n如式(I)化合物所定义。
方案二：式(I)制备方法也可如下：
Figure BDA0004006585300000301
式i-1化合物与式i-2化合物，在碱存在条件下得到式i-3化合物，所采用的溶剂选自三乙胺、DIEA、DMAC、1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯、苯、甲苯、氯仿、正己烷、环己烷、二氯甲烷、1,2-二氯乙烷、甲基叔丁基醚、四氯化碳、乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸丁酯、丙酮、四氢呋喃、乙醚、乙腈、N，N-二甲基甲酰胺或二甲亚砜或它们中的一种或多种的混合溶剂，优选三乙胺、DIEA、DMAC、1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯、N，N-二甲基甲酰胺；所采用的碱选自三乙胺、DIEA、1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯、碳酸钾、碳酸钠、碳酸铯、氢氧化钠、氢氧化钾，优选三乙胺、DIEA、1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯；反应温度为0℃至100℃，优选50℃至70℃；
式i-3化合物与式i-4化合物，在酸存在条件下得到式(I)化合物，所采用的溶剂选自甲醇、乙醇、异丙醇、正丁醇、叔丁醇、1-甲基-2吡咯烷酮、二氧六环、苯、甲苯、氯仿、正己烷、环己烷、甲基叔丁基醚、四氯化碳、乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸丁酯、丙酮、四氢呋喃、乙腈、N，N-二甲基甲酰胺或二甲亚砜或它们中的一种或多种的混合溶剂，优选乙醇、异丙醇、正丁醇；所采用的酸选自乙酸、三氟乙酸、甲磺酸、樟脑磺酸、硫酸、磷酸、硝酸，优选甲磺酸、樟脑磺酸；反应温度为40℃至110℃，优选60℃至90℃；
其中，环A、环B、环C、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12、m、n如式(I)化合物所定义。
本发明还提供式(I)化合物中间体式i-4的制备方法，
方案一：当环C为环庚烷时，式i-4-1的制备方法如下：
Figure BDA0004006585300000311
式ii-1化合物与(甲氧基甲基)三苯基氯化磷，在碱存在条件下得到式ii-2化合物，所采用的溶剂选自1-甲基-2吡咯烷酮、二氧六环、苯、甲苯、氯仿、正己烷、环己烷、甲基叔丁基醚、四氯化碳、乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸丁酯、丙酮、四氢呋喃、乙腈、N，N-二甲基甲酰胺或二甲亚砜或它们中的一种或多种的混合溶剂，优选二氧六环、四氢呋喃；所采用的碱选自氢氧化钠、叔丁醇钾、钠氢、丁基锂，优选叔丁醇钾、钠氢；反应温度为-60℃至50℃，优选-40℃至30℃；
式ii-2化合物，在酸存条件下得到式ii-3化合物，所采用的溶剂选自1-甲基-2吡咯烷酮、二氧六环、苯、甲苯、氯仿、正己烷、环己烷、甲基叔丁基醚、四氯化碳、乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸丁酯、丙酮、四氢呋喃、乙腈、N，N-二甲基甲酰胺或二甲亚砜或它们中的一种或多种的混合溶剂，优选二氧六环、四氢呋喃；所采用的酸选自甲酸、乙酸、三氟乙酸、甲磺酸，优选甲酸；反应温度为50℃至100℃，优选60℃至80℃；
式ii-3化合物与式ii-8化合物，在酸存在条件下还原得到式ii-4化合物，所采用的溶剂选自二氧六环、苯、甲苯、氯仿、正己烷、环己烷、甲基叔丁基醚、四氯化碳、乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸丁酯、丙酮、四氢呋喃、乙腈、N，N-二甲基甲酰胺或二甲亚砜或它们中的一种或多种的混合溶剂，优选四氢呋喃；所采用的酸选自甲酸、乙酸、三氟乙酸，优选乙酸；所采用的还原剂为硼氢化钠、三乙酰氧基硼氢化钠、氰基硼氢化钠，优选三乙酰氧基硼氢化钠；反应温度为0℃至50℃，优选0℃至30℃；
式ii-4化合物在钯碳催化下经氢气还原得式i-4-1化合物；
其中，环B、R9、R10、R11、R12如式(I)化合物所定义。
方案二：当环C为环庚烷时，式i-4-2制备方法如下：
Figure BDA0004006585300000321
式ii-1化合物与式ii-8化合物，在酸存在条件下还原得到式ii-6化合物，所采用的溶剂选自二氧六环、苯、甲苯、氯仿、正己烷、环己烷、甲基叔丁基醚、四氯化碳、乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸丁酯、丙酮、四氢呋喃、乙腈、N，N-二甲基甲酰胺或二甲亚砜或它们中的一种或多种的混合溶剂，优选四氢呋喃；所采用的酸选自甲酸、乙酸、三氟乙酸，优选乙酸；所采用的还原剂为硼氢化钠、三乙酰氧基硼氢化钠、氰基硼氢化钠，优选三乙酰氧基硼氢化钠；反应温度为0℃至50℃，优选0℃至30℃；
式ii-6化合物在钯碳催化下经氢气还原得式i-4-2化合物；
其中，环B、R9、R10、R11、R12如式(I)化合物所定义。
方案三：当环C为环己亚胺时，i-4-3制备方法如下：
Figure BDA0004006585300000331
式iii-1化合物与NBS，在自由基引发剂过氧化二甲苯酰(BPO)存在条件下得到式iii-2化合物，所采用的溶剂选自苯、甲苯、氯仿、正己烷、环己烷、甲基叔丁基醚、四氯化碳、乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸丁酯、丙酮、四氢呋喃、乙腈或它们中的一种或多种的混合溶剂，优选四氯化碳、氯仿；反应温度为30℃至100℃，优选50℃至90℃；
式iii-2化合物，在硝酸银存在条件下得到式iii-3化合物，所采用的溶剂选自水、丙酮、四氢呋喃、乙腈或它们中的一种或多种的混合溶剂，优选水、乙腈；反应温度为30℃至100℃，优选60℃至90℃；
式iii-3化合物与式iii-4化合物，在加热条件下得到式iii-5化合物，所采用的溶剂选自二氧六环、苯、甲苯、氯仿、正己烷、环己烷、甲基叔丁基醚、四氯化碳、乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸丁酯、丙酮、四氢呋喃、乙腈、N，N-二甲基甲酰胺或二甲亚砜或它们中的一种或多种的混合溶剂，优选四氢呋喃、二氧六环；反应温度为50℃至100℃，优选60℃至90℃；
式iii-5化合物在钯碳催化下经氢气还原得式iii-6化合物；
式iii-6化合物在碱催化下经三氟乙酸酐保护氨基得式iii-7化合物；
式iii-7化合物，在雷尼镍催化下经氢气还原得到式iii-8化合物，所采用的溶剂选自甲醇、乙醇、异丙醇、正丁醇、叔丁醇、1-甲基-2吡咯烷酮、二氧六环、苯、甲苯、氯仿、正己烷、环己烷、甲基叔丁基醚、四氯化碳、乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸丁酯、丙酮、四氢呋喃、乙腈、N，N-二甲基甲酰胺或二甲亚砜或它们中的一种或多种的混合溶剂，优选甲醇；反应温度为0℃至60℃，优选30℃至40℃；
式iii-8化合物在碱存在条件下经水解得式i-4-3化合物，所采用的溶剂选自水、甲醇、乙醇、异丙醇、正丁醇、叔丁醇、二氧六环、四氢呋喃、乙腈或它们中的一种或多种的混合溶剂，优选甲醇、水；碱选自碳酸钾、碳酸钠、碳酸铯、氢氧化钠、氢氧化钾、叔丁醇钠，优选氢氧化钠；反应温度为50℃至100℃，优选60℃至90℃；
其中，环B、R9、R10如式(I)化合物所定义；
R13选自H、氘、卤素、氰基、C1-4烷基、C3-8环烷基或C1-4烷氧基。
采用类似以上制备方法，可以制备得到以下化合物：
Figure BDA0004006585300000341
/>
Figure BDA0004006585300000351
/>
Figure BDA0004006585300000361
/>
Figure BDA0004006585300000371
/>
Figure BDA0004006585300000381
/>
Figure BDA0004006585300000391
/>
Figure BDA0004006585300000401
/>
Figure BDA0004006585300000411
/>
Figure BDA0004006585300000421
/>
Figure BDA0004006585300000431
/>
Figure BDA0004006585300000441
/>
Figure BDA0004006585300000451
/>
Figure BDA0004006585300000461
/>
Figure BDA0004006585300000471
/>
Figure BDA0004006585300000481
/>
Figure BDA0004006585300000491
本发明还涉及一种药物组合物，其包含如式(I)所述的化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐和可药用的载体。
本发明所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物是胶囊剂、散剂、片剂、颗粒剂、丸剂、注射剂、糖浆剂、口服液、吸入剂、软膏剂、栓剂或贴剂。
本发明式(I)所述的化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐或药物组合物在制备用于预防或治疗单独或部分地由FLT3或者CDK9活性介导的疾病的治疗药物中的应用。
本发明式(I)所述的化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐或药物组合物在制备用于预防或治疗单独或部分地由FLT3或者CDK9活性介导的疾病的治疗药物中的应用，其特征在于，所述FLT3或者CDK9活性介导的疾病为激酶相关的恶性肿瘤。
本发明式(I)所述的化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐或药物组合物在制备用于预防或治疗单独或部分地由FLT3或者CDK9活性介导的疾病的治疗药物中的应用，其特征在于，所述激酶相关的恶性肿瘤选自：卵巢癌、宫颈癌、结肠直肠癌、乳腺癌、胰腺癌、胶质瘤、胶质母细胞瘤、黑色素瘤、前列腺癌、白血病、淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、胃癌、肺癌、肝细胞癌、胃肠道间质瘤、甲状腺癌、胆管癌、子宫内膜癌、肾癌、间变性大细胞淋巴瘤、多发性骨髓瘤、间皮瘤或者软组织肉瘤。
除非有相反陈述，下列用在说明书和权利要求书中的术语具有下述含义。
本发明中“芳基”指全碳单环或双环基团，“6～10元芳基”指含有6～10个碳的全碳芳基，例如苯基和萘基。所述芳基环可以稠合于杂芳基、杂环基或环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为芳基环。
芳基可以是取代的或未取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，独立地选自卤素、羟基、巯基、氰基、硝基、叠氮基、C1-8烷基、C3-8环烷基、3～8元杂环基、C1-8烷氧基、3-8元杂环基氧基。
本发明中“杂芳基”指包含1至4个杂原子的杂芳族体系，所述杂原子包括氮、氧和硫的杂原子，包括但不限于呋喃基、噻吩基、吡啶基、吡咯基、吡唑基、N-烷基吡咯基、嘧啶基、吡嗪基、咪唑基、四唑基等。
杂芳基可以是取代的或未取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，独立地选自卤素、羟基、巯基、氰基、硝基、叠氮基、C1-8烷基、C3-8环烷基、3～8元杂环基、C1-8烷氧基、3～8元杂环基氧基。
本发明中“C1-8烷基”指包括1至8个碳原子的直链烷基和含支链烷基，烷基指饱和的脂族烃基团，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、1,2-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1,1,2-三甲基丙基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2-乙基丁基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2,3-二甲基丁基、正庚基、2-甲基己基、3-甲基己基、4-甲基己基、5-甲基己基、2,3-二甲基戊基、2,4-二甲基戊基、2,2-二甲基戊基、3,3-二甲基戊基、2-乙基戊基、3-乙基戊基、正辛基、2,3-二甲基己基、2,4-二甲基己基、2,5-二甲基己基、2,2-二甲基己基、3,3-二甲基己基、4,4-二甲基己基、2-乙基己基、3-乙基己基、4-乙基己基、2-甲基-2-乙基戊基、2-甲基-3-乙基戊基或其各种支链异构体等。
C1-8烷基可以是取代的或未取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，独立地选自卤素、羟基、巯基、氰基、硝基、叠氮基、C1-8烷基、C3-8环烷基、3～8元杂环基、C1-8烷氧基或3～8元杂环基氧基。
本发明中“环烷基”指饱和单环烃取代基，“C3-8环烷基”指包括3至8个碳原子的单环环烷基，例如：单环环烷基的非限制性实施例包含环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基等。
环烷基可以是取代的或未取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，独立地选自卤素、羟基、巯基、氰基、硝基、叠氮基、C1-8烷基、C3-8环烷基、3～8元杂环基、C1-8烷氧基或3～8元杂环基氧基。
本发明中“杂环基”指饱和或部分不饱和单环或多环环状烃取代基，其中一个或多个环原子选自氮、氧或S(O)m(其中m是整数0、1、2)的杂原子，但不包括-O-O-、-O-S-或-S-S-的环部分，其余环原子为碳。“4～10元杂环基”指包含4至10个环原子的环基，“4～12元杂环基”指包含4至12个环原子的环基。单环杂环基的非限制性实施例包含氧杂环丁基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、硫代吗啉基、高哌嗪基等。多环杂环基包括螺环、稠环和桥环的杂环基。
本发明中“烷氧基”指-O-(烷基)，其中烷基的定义如上所述。“C1-8烷氧基”指含1-8个碳的烷基氧基，非限制性实施例包含甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基等。
“卤素”指氟、氯、溴或碘。
“药物组合物”表示含有一种或多种本文所述化合物或其生理学上可药用的盐或前体药物与其他化学组分的混合物，以及其他组分例如生理学可药用的载体和赋形剂。药物组合物的目的是促进对生物体的给药，利于活性成分的吸收进而发挥生物活性。
“
Figure BDA0004006585300000511
”代表取代基的连接键。
本发明制备步骤中，所用试剂的缩写分别表示：
DCM 二氯甲烷
THF 四氢呋喃
EA 乙酸乙酯
PE 石油醚
DMF N,N-二甲基甲酰胺
CDI 羰基二咪唑
TBTU O-苯并三氮唑-N,N,N’,N’-四甲基脲四氟硼酸
附图说明
图1、实施例105中各试验组对肿瘤生长的抑制曲线；
图2、实施例105中各试验组肿瘤瘤重分布。
具体实施方式
以下参照具体的实施例来说明本发明。本领域技术人员能够理解，这些实施例仅用于说明本发明，其不以任何方式限制本发明的范围。
下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的药材原料、试剂材料等，如无特殊说明，均为市售购买产品。
实施例1：6-(4-((3-甲磺酰基甲基-氨基)-吡嗪-2-基-甲基氨基)-5-三氟甲基嘧啶-2-基-氨基)-1,2,3,4-四氢异喹啉盐酸盐的合成
Figure BDA0004006585300000521
步骤1:N-(3-氰基吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300000522
室温下，向四口瓶中加入NaH(8.50g，212.50mmol)，N2保护，冰浴下滴加甲磺酰甲胺(20.50g，187.83mmol)的THF溶液(100mL)。搅拌2h后，冰浴下滴加2-氯-3-氰基吡嗪(25.00g，179.16mmol)的THF溶液(100mL)。滴毕后，50℃下反应39h终止。于冰浴下将反应淬灭后采用EA萃取，用饱和食盐水洗涤两次，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得红色固体29.66g，收率78％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.66(d,J＝2.3Hz,1H),8.64(d,J＝2.3Hz,1H),3.44(s,3H),3.25(s,3H)。
步骤2:N-(3-叔丁氧羰基氨基甲基吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300000523
室温下，依次向四口瓶中加入N-(3-氰基吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(5.00g，23.56mmol)、THF(200mL)、Boc2O(6.17g，28.27mmol)、Raney-Ni(35.00g)，充入H2，30℃下反应15h终止。反应冷却后，用硅藻土过滤除去Raney-Ni，滤液浓缩得黄色固体粗品，用PE打浆得淡黄色固体5.96g，收率80％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.57(d,J＝2.4Hz,1H),8.39(d,J＝2.2Hz,1H),4.70(d,J＝5.6Hz,2H),3.31(s,3H),3.05(s,3H),1.46(s,9H)；MS(ESI)m/z:339.0[M+Na]+。
步骤3:N-(3-氨基甲基吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺盐酸盐的合成
Figure BDA0004006585300000524
室温下，依次向四口瓶中加入N-(3-叔丁氧羰基氨基甲基吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(15.85g，50.10mmol)、DCM(127mL)、异丙醚(254mL)，溶清后于冰浴下搅拌滴加盐酸乙醇溶液(79mL)。滴毕后，30℃下反应2h终止。将反应移至冰浴下搅拌0.5h后，抽滤，得产物淡黄色固体9.42g，收率74％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.77(d,J＝2.5Hz,1H),8.68(d,J＝2.4Hz,1H),4.34(s,2H),3.24(s,3H),3.15(s,3H)；MS(ESI)m/z:217.1[M+H]+。
步骤4:6-(4-氯-5-三氟甲基嘧啶-2-基-氨基)-2-N-叔丁氧羰基-1,2,3,4-四氢异喹啉的合成
Figure BDA0004006585300000531
向单口瓶中加入6-氨基-2-N-叔丁氧羰基-1,2,3,4-四氢异喹啉(2.00g，8.05mmol)、DMAC(15mL)后，于冰浴中滴加DIEA(3.12g，24.16mmol)与2,4-二氯-5-三氟甲基嘧啶(2.27g，10.47mmol)的DMAC溶液(5mL)，60℃下反应4.5h终止。冷却至室温，EA萃取，饱和食盐水洗涤两次，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得淡黄色固体1.14g，收率33％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.79(s,1H),7.50(d,J＝9.9Hz,2H),7.15(d,J＝8.3Hz,1H),4.46(s,2H),3.54(t,J＝5.8Hz,2H),2.75(t,J＝5.7Hz,2H),1.43(s,9H)；MS(ESI)m/z:429.2[M+H]+。
步骤5:6-(4-((3-甲磺酰基甲基-氨基)-吡嗪-2-基-甲基氨基)-5-三氟甲基嘧啶-2-基-氨基)-2-N-叔丁氧羰基-1,2,3,4-四氢异喹啉的合成
Figure BDA0004006585300000532
室温下，依次向三口瓶中加入6-(4-氯-5-三氟甲基嘧啶-2-基-氨基)-2-氮-叔丁氧羰基-1,2,3,4-四氢异喹啉(0.50g，1.17mmol)、N-(3-氨基甲基吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺盐酸盐(0.38g，1.50mmol)、DMF(10mL)与DIEA(0.45g，3.48mmol)，N2保护下85℃反应2h终止。降至室温后用EA萃取，饱和食盐水洗涤三次，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩至干，加入EA打浆，抽滤得淡黄色固体0.59g，收率83％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.70(d,J＝2.4Hz,1H),8.59(d,J＝2.3Hz,1H),8.26(s,1H),7.49(s,1H),7.36(d,J＝8.1Hz,1H),6.96(d,J＝8.3Hz,1H),4.97(d,J＝4.7Hz,2H),4.40(s,2H),3.49(t,J＝5.6Hz,2H),3.21(s,3H),3.18(s,3H),2.65(t,J＝5.6Hz,2H),1.42(s,9H)；MS(ESI)m/z:609.1[M+H]+。
步骤6:6-(4-((3-甲磺酰基甲基-氨基)-吡嗪-2-基-甲基氨基)-5-三氟甲基嘧啶-2-基-氨基)-1,2,3,4-四氢异喹啉盐酸盐的合成
Figure BDA0004006585300000541
室温下，依次向单口瓶中加入6-(4-((3-甲磺酰基甲基-氨基)-吡嗪-2-基-甲基氨基)-5-三氟甲基嘧啶-2-基-氨基)-2-N-叔丁氧羰基-1,2,3,4-四氢异喹啉(0.10g，0.16mmol)、DCM(1.00mL)、异丙醚(1.6mL)，冰浴下滴加盐酸乙醇溶液(0.45mL)，室温下反应1.5h终止。抽滤，得类白色固体0.07g，收率80％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.70(d,J＝2.3Hz,1H),8.60(d,J＝1.9Hz,1H),8.38(s,1H),7.50(s,1H),7.35(d,J＝7.7Hz,1H),7.04(d,J＝8.4Hz,1H),4.99(d,J＝4.6Hz,2H),4.16(s,2H),3.32–3.25(m,2H),3.20(s,3H),3.18(s,3H),2.88(t,J＝5.3Hz,2H)；MS(ESI)m/z:509.2[M+H]+。
实施例2:6-(4-((3-甲磺酰基甲基-氨基)-吡嗪-2-基-甲基氨基)-5-三氟甲基嘧啶-2-基-氨基)-2-N-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉的合成
Figure BDA0004006585300000542
室温下，依次向单口瓶中加入6-(4-((3-甲磺酰基甲基-氨基)-吡嗪-2-基-甲基氨基)-5-三氟甲基嘧啶-2-基-氨基)-1,2,3,4-四氢异喹啉盐酸盐(0.20g，0.37mmol)、THF(10mL)、37％HCHO in H2O(0.18g，2.22mmol)，搅拌下倒入NaBH(OAc)3(0.31g，1.48mmol)后，于室温下反应0.5h终止。用EA萃取，用饱和碳酸氢钠溶液和饱和食盐水依次洗涤，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得产物白色固体0.15g，收率80％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.71(d,J＝2.5Hz,1H),8.59(d,J＝2.4Hz,1H),8.25(s,1H),7.40(s,1H),7.29(d,J＝5.5Hz,1H),6.85(d,J＝8.3Hz,1H),4.97(d,J＝4.8Hz,2H),3.40(s,2H),3.21(s,3H),3.18(s,3H),2.71(t,J＝5.5Hz,2H),2.54(t,J＝5.8Hz,2H),2.32(s,3H)；MS(ESI)m/z:523.2[M+H]+。
实施例3:6-(4-((3-甲磺酰基甲基-氨基)-吡嗪-2-基-甲基氨基)-5-三氟甲基嘧啶-2-基-氨基)-2-N-(2-羟基)-乙基-1,2,3,4-四氢异喹啉的合成
Figure BDA0004006585300000551
室温下，向单口瓶中依次加入6-(4-((3-甲磺酰基甲基-氨基)-吡嗪-2-基-甲基氨基)-5-三氟甲基嘧啶-2-基-氨基)-1,2,3,4-四氢异喹啉盐酸盐(0.10g，0.18mmol)、碳酸钾(0.30g，2.20mmol)、乙腈(5mL)，搅拌下滴加2-溴乙醇(0.23g，1.83mmol)，滴毕后于80℃下反应2h终止。将反应液浓缩至干，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得黄色固体0.03g，收率30％。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.70(d,J＝2.5Hz,1H),8.58(d,J＝2.4Hz,1H),8.24(s,1H),7.38(s,1H),7.27(d,J＝8.4Hz,1H),6.83(d,J＝8.3Hz,1H),4.96(d,J＝4.7Hz,2H),3.56(q,J＝6.1Hz,2H),3.49(s,2H),3.21(s,3H),3.18(s,3H),2.67(d,J＝3.9Hz,2H),2.64(d,J＝4.4Hz,2H),2.53(t,J＝6.2Hz,2H)；MS(ESI)m/z:553.6[M+H]+。
实施例4:6-(4-((3-甲磺酰基甲基-氨基)-吡嗪-2-基-甲基氨基)-5-三氟甲基嘧啶-2-基-氨基)-2-N-(4-哌啶基)-1,2,3,4-四氢异喹啉二盐酸盐的合成
Figure BDA0004006585300000552
步骤1:6-(4-((3-甲磺酰基甲基-氨基)-吡嗪-2-基-甲基氨基)-5-三氟甲基嘧啶-2-基-氨基)-2-N-(1-N-叔丁氧羰基哌啶基-4-基)-1,2,3,4-四氢异喹啉的合成
Figure BDA0004006585300000553
室温下，向单口瓶中依次加入6-(4-((3-甲磺酰基甲基-氨基)-吡嗪-2-基-甲基氨基)-5-三氟甲基嘧啶-2-基-氨基)-1,2,3,4-四氢异喹啉盐酸盐(0.35g，0.64mmol)、N-Boc-4-哌啶酮(1.92g，9.63mmol)、THF(20mL)，搅拌下加入三乙酰氧基硼氢化钠(2.72g，12.84mmol)，室温下反应1.5h终止。EA萃取、饱和碳酸氢钠溶液洗涤两次、饱和食盐水洗涤一次，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得白色固体0.29g，收率66％。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.70(d,J＝2.3Hz,1H),8.58(d,J＝2.1Hz,1H),8.24(s,1H),7.37(s,1H),7.27(d,J＝5.7Hz,1H),6.85(d,J＝8.3Hz,1H),4.96(d,J＝4.5Hz,2H),3.97(d,J＝12.1Hz,2H),3.60(s,2H),3.21(s,3H),3.18(s,3H),2.80–2.70(m,2H),2.67(s,4H),2.59–2.52(m,1H),1.78(d,J＝11.0Hz,2H),1.40(s,9H),1.37–1.27(m,2H)；MS(ESI)m/z:692.0[M+H]+。
步骤2:6-(4-((3-甲磺酰基甲基-氨基)-吡嗪-2-基-甲基氨基)-5-三氟甲基嘧啶-2-基-氨基)-2-N-(4-哌啶基)-1,2,3,4-四氢异喹啉二盐酸盐的合成
Figure BDA0004006585300000561
室温下，向单口瓶中依次加入6-(4-((3-甲磺酰基甲基-氨基)-吡嗪-2-基-甲基氨基)-5-三氟甲基嘧啶-2-基-氨基)-2-N-(1-N-叔丁氧羰基哌啶基-4-基)-1,2,3,4-四氢异喹啉(0.18g，0.26mmol)、DCM(6mL)，搅拌下滴加盐酸乙醇溶液(1mL)，室温下反应1h终止。反应液过滤得类白色固体0.16g，收率92％。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.72(s,1H),8.62(s,1H),8.43(s,1H),7.52(s,1H),7.39(d,J＝8.5Hz,1H),7.08(d,J＝8.5Hz,1H),5.02(d,J＝4.6Hz,2H),4.36(s,2H),3.72–3.51(m,2H),3.49–3.39(m,2H),3.38–3.26(m,1H),3.23(s,3H),3.20(s,3H),3.18–3.03(m,1H),3.02–2.81(m,3H),2.35(t,J＝11.3Hz,2H),2.08(q,J＝11.5Hz,2H)；MS(ESI)m/z:592.0[M+H]+。
实施例5:6-(4-((3-甲磺酰基甲基-氨基)-吡嗪-2-基-甲基氨基)-5-三氟甲基嘧啶-2-基-氨基)-2-N-(3-氧杂环丁基)-1,2,3,4-四氢异喹啉的合成
Figure BDA0004006585300000562
室温下，向单口瓶中依次加入6-(4-((3-甲磺酰基甲基-氨基)-吡嗪-2-基-甲基氨基)-5-三氟甲基嘧啶-2-基-氨基)-1,2,3,4-四氢异喹啉盐酸盐(0.20g，0.37mmol)、3-氧杂环丁酮(0.26g，3.67mmol)、THF(10mL)，搅拌下加入三乙酰氧基硼氢化钠(1.17g，5.50mmol)，室温下反应1h终止。EA萃取、饱和碳酸氢钠溶液洗涤两次、饱和食盐水洗涤一次，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得白色固体0.14g，收率66％。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.71(d,J＝2.5Hz,1H),8.59(d,J＝2.3Hz,1H),8.26(s,1H),7.42(s,1H),7.31(d,J＝5.9Hz,1H),6.86(d,J＝8.4Hz,1H),4.98(d,J＝4.7Hz,2H),4.61(t,J＝6.4Hz,2H),4.51(t,J＝6.0Hz,2H),3.56(p,J＝6.5Hz,1H),3.36(s,2H),3.22(s,3H),3.19(s,3H),2.72(t,J＝5.1Hz,2H),2.48(t,J＝5.7Hz,2H)；MS(ESI)m/z:565.0[M+H]+。
实施例6:6-(4-((3-甲磺酰基甲基-氨基)-吡嗪-2-基-甲基氨基)-5-三氟甲基嘧啶-2-基-氨基)-2-N-乙酰基-1,2,3,4-四氢异喹啉的合成
Figure BDA0004006585300000571
室温下，向单口瓶中依次加入6-(4-((3-甲磺酰基甲基-氨基)-吡嗪-2-基-甲基氨基)-5-三氟甲基嘧啶-2-基-氨基)-1,2,3,4-四氢异喹啉盐酸盐(0.20g，0.37mmol)、TEA(0.15g，1.47mmol)、DCM(10mL)，再于搅拌下缓慢滴加AcCl(0.03g，0.44mmol)，滴毕后于室温下反应1h终止。EA萃取，依次用饱和碳酸氢钠、饱和食盐水洗涤后经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得白色固体0.11g，收率55％。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.71(d,J＝2.2Hz,1H),8.60(s,1H),8.26(s,1H),7.51(s,1H),7.37(t,J＝7.9Hz,1H),6.99(d,J＝7.9Hz,1H),4.98(d,J＝3.9Hz,2H),4.52(d,J＝20.7Hz,2H),3.60(t,J＝5.7Hz,2H),3.22(d,J＝4.2Hz,3H),3.19(s,3H),2.69(dt,J＝50.6,5.6Hz,2H),2.07(s,3H)；MS(ESI)m/z:551.6[M+H]+。
实施例7:6-(4-((3-甲磺酰基甲基-氨基)-吡嗪-2-基-甲基氨基)-5-三氟甲基嘧啶-2-基-氨基)-2-N-(2-羟基乙酰基)-1,2,3,4-四氢异喹啉的合成
Figure BDA0004006585300000581
向单口瓶中依次加入6-(4-((3-甲磺酰基甲基-氨基)-吡嗪-2-基-甲基氨基)-5-三氟甲基嘧啶-2-基-氨基)-1,2,3,4-四氢异喹啉盐酸盐(0.30g，0.55mmol)、DCM(15mL)、乙醇酸(0.05g，0.66mmol)、HOBT(0.08g，0.61mmol)和EDCI(0.16g，0.83mmol)，15min后，于冰浴下滴加NMM(0.12g，1.21mmol)，滴毕后室温下反应5h终止。冰浴下用1N盐酸调节pH至5～6后DCM萃取，饱和碳酸氢钠溶液和饱和食盐水交替洗涤两次，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得类白色固体0.08g，收率26％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.70(d,J＝2.4Hz,1H),8.59(d,J＝2.2Hz,1H),8.26(s,1H),7.50(d,J＝6.1Hz,1H),7.37(d,J＝8.1Hz,1H),7.00(dd,J＝15.2,8.4Hz,1H),4.97(d,J＝4.6Hz,2H),4.49(d,J＝28.1Hz,2H),4.15(d,J＝5.5Hz,2H),3.58(dt,J＝49.9,5.4Hz,2H),3.22(s,3H),3.19(s,3H),2.70(dt,J＝29.6,4.9Hz,2H)；MS(ESI)m/z:567.2[M+H]+。
实施例8:7-甲氧基-6-(4-((3-甲磺酰基甲基-氨基)-吡嗪-2-基-甲基氨基)-5-三氟甲基嘧啶-2-基-氨基)-1,2,3,4-四氢异喹啉盐酸盐的合成
Figure BDA0004006585300000582
步骤1:2,2,2-三氟-N-(4-甲氧基苯基乙基)乙酰胺的合成
Figure BDA0004006585300000583
向单口瓶中加入4-甲氧基苯乙胺(5.00g，33.07mmol)、DCM(50mL)、TEA(6.76g，66.79mmol)，于冰浴下滴加TFAA(6.74g，32.07mmol)。滴毕后，室温下反应1.5h终止。EA萃取，依次用饱和碳酸氢钠溶液、饱和食盐水洗涤，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得白色固体6.95g，收率85％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.12(d,J＝8.4Hz,2H),6.86(d,J＝8.5Hz,2H),3.72(s,3H),3.37(q,J＝6.8Hz,2H),2.73(t,J＝7.3Hz,2H)。
步骤2:2,2,2-三氟-N-(4-甲氧基-3-硝基苯基乙基)乙酰胺的合成
Figure BDA0004006585300000591
向单口瓶中加入2,2,2-三氟-N-(4-甲氧基苯基乙基)乙酰胺(7.20g，29.12mmol)，于冰浴下加入TFA(72mL)后再缓慢滴加HNO3(1.84g，29.12mmol)。滴毕后，冰浴下反应1.5h终止。加水淬灭反应后EA萃取，饱和食盐水洗涤一次，再用饱和碳酸氢钠溶液将有机相pH值调至7～8后分液，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得白色固体5.36g，收率63％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.73(s,1H),7.51(d,J＝8.0Hz,1H),7.30(d,J＝8.5Hz,1H),3.90(s,3H),3.43(q,J＝6.8Hz,2H),2.83(t,J＝6.4Hz,2H)；MS(ESI)m/z:291.2[M-H]-。
步骤3:2,2,2-三氟-1-(7-甲氧基-6-硝基-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)乙烷-1-酮的合成
Figure BDA0004006585300000592
向三口瓶中加入2,2,2-三氟-N-(4-甲氧基-3-硝基苯基乙基)乙酰胺(5.11g，17.49mmol)和多聚甲醛(3.18g，104.92mmol)，N2保护，于冰浴下加入AcOH(21mL)后再搅拌滴加H2SO4(32mL)。滴毕后，升温至50℃反应4h终止。冷却后，将反应液倒入冰水中搅拌10min。水相用EA萃取两次，得有机相依次用饱和食盐水、饱和碳酸氢钠溶液、饱和食盐水各洗涤一次，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得黄色固体3.03g，收率57％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.79(s,1H),7.38(d,J＝20.0Hz,1H),4.89–4.80(m,2H),3.90(s,3H),3.82(q,J＝2.7Hz,2H),2.90(dt,J＝12.6,5.8Hz,2H)。
步骤4:7-甲氧基-6-硝基-1,2,3,4-四氢异喹啉的合成
Figure BDA0004006585300000593
向三口瓶中加入2,2,2-三氟-1-(7-甲氧基-6-硝基-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)乙烷-1-酮(2.80g，9.20mmol)和碳酸钾(5.09g，36.81mmol)，N2保护，加入EtOH(70mL)和H2O(14mL)，70℃下反应1h终止。减压浓缩除去乙醇后用EA萃取两次后经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，得黄色粘状粗品2.05g，未做进一步纯化，直接投入下步反应。MS(ESI)m/z:209.5[M+H]+。
步骤5:叔丁基-7-甲氧基-6-硝基-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-羧酸酯的合成
Figure BDA0004006585300000601
向单口瓶中加入粗品7-甲氧基-6-硝基-1,2,3,4-四氢异喹啉(2.05g，9.85mmol)、Boc2O(3.01g，13.78mmol)和DCM(50mL)后，于冰浴中滴加TEA(6.23g，61.53mmol)，室温反应16h终止。EA萃取，饱和食盐水洗涤两次，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得淡黄色固体1.52g，收率50％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.73(s,1H),7.24(s,1H),4.58(s,2H),3.89(s,3H),3.55(t,J＝5.0Hz,2H),2.76(t,J＝5.6Hz,2H),1.43(s,9H)。
步骤6:7-甲氧基-6-氨基-2-N-叔丁氧羰基-1,2,3,4-四氢异喹啉的合成
Figure BDA0004006585300000602
向三口瓶中加入叔丁基-7-甲氧基-6-硝基-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-羧酸酯(1.35g，4.38mmol)、铁粉(1.96g，35.03mmol)、氯化铵(0.94g，17.51mmol)、EtOH(30mL)和H2O(7.5mL)。N2保护，60℃反应2h终止。过滤，减压浓缩除去乙醇，EA萃取，饱和食盐水洗涤两次，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得白色固体0.82g，收率67％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ6.58(s,1H),6.39(s,1H),4.34(s,2H),3.72(s,3H),3.48(t,J＝5.6Hz,2H),2.56(t,J＝5.5Hz,2H),1.42(s,9H)。
步骤7:7-甲氧基-6-(4-氯-5-三氟甲基嘧啶-2-基-氨基)-2-N-叔丁氧羰基-1,2,3,4-四氢异喹啉的合成
Figure BDA0004006585300000603
向单口瓶中加入7-甲氧基-6-氨基-2-N-叔丁氧羰基-1,2,3,4-四氢异喹啉(0.82g，2.95mmol)、DMAC(20mL)后，于冰浴中滴加DIEA(1.14g，8.84mmol)与2,4-二氯-5-三氟甲基嘧啶(0.83g，3.83mmol)的DMAC溶液(5mL)。滴毕后，升温至40℃反应4h终止。冷却至室温，EA萃取，饱和食盐水洗涤两次，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得淡黄色固体0.53g，收率39％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.68(s,1H),7.24(s,1H),6.93(s,1H),4.51(s,2H),3.75(s,3H),3.55(t,J＝5.5Hz,2H),2.69(t,J＝5.4Hz,2H),1.44(s,9H)；MS(ESI)m/z:457.7[M-H]-。
步骤8:7-甲氧基-6-(4-((3-甲磺酰基甲基-氨基)-吡嗪-2-基-甲基氨基)-5-三氟甲基嘧啶-2-基-氨基)-2-N-叔丁氧羰基-1,2,3,4-四氢异喹啉的合成
Figure BDA0004006585300000611
室温下，依次向三口瓶中加入7-甲氧基-6-(4-氯-5-三氟甲基嘧啶-2-基-氨基)-2-N-叔丁氧羰基-1,2,3,4-四氢异喹啉(0.25g，0.54mmol)、N-(3-氨基甲基吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺盐酸盐(0.18g，0.71mmol)、DMF(15mL)与DIEA(0.21g，1.63mmol)。N2保护下85℃反应2.5h终止。降至室温后用EA萃取，饱和食盐水洗涤三次。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得黄色固体0.31g，收率88％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.69(d,J＝2.3Hz,1H),8.57(d,J＝2.1Hz,1H),8.23(s,1H),7.73(s,1H),6.83(s,1H),4.90(d,J＝4.7Hz,2H),4.44(s,2H),3.77(s,3H),3.49(t,J＝4.4Hz,2H),3.22(s,3H),3.16(s,3H),2.57(t,J＝3.0Hz,2H),1.43(s,9H)；MS(ESI)m/z:639.4[M+H]+。
步骤9:7-甲氧基-6-(4-((3-甲磺酰基甲基-氨基)-吡嗪-2-基-甲基氨基)-5-三氟甲基嘧啶-2-基-氨基)-1,2,3,4-四氢异喹啉盐酸盐的合成
Figure BDA0004006585300000612
室温下，依次向单口瓶中加入7-甲氧基-6-(4-((3-甲磺酰基甲基-氨基)-吡嗪-2-基-甲基氨基)-5-三氟甲基嘧啶-2-基-氨基)-2-N-叔丁氧羰基-1,2,3,4-四氢异喹啉(0.20g，0.31mmol)、DCM(1.6mL)、异丙醚(3.2mL)，于冰浴下滴加盐酸乙醇溶液(1mL)，30℃下反应1h终止。移至冰浴下搅拌15min后抽滤，得产物类白色固体0.16g，收率91％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.69(d,J＝2.4Hz,1H),8.59(d,J＝2.2Hz,1H),8.43(s,1H),7.71(s,1H),6.93(s,1H),4.96(d,J＝5.0Hz,2H),4.18(t,J＝5.5Hz,2H),3.78(s,3H),3.29–3.25(m,2H),3.21(s,3H),3.16(s,3H),2.75(t,J＝5.4Hz,2H)；MS(ESI)m/z:539.2[M+H]+。实施例9:7-(4-((3-甲磺酰基甲基-氨基)-吡嗪-2-基-甲基氨基)-5-三氟甲基嘧啶-2-基-氨基)-1,2,3,4-四氢异喹啉盐酸盐的合成
Figure BDA0004006585300000621
步骤1:7-(4-氯-5-三氟甲基嘧啶-2-基-氨基)-2-N-叔丁氧羰基-1,2,3,4-四氢异喹啉的合成
Figure BDA0004006585300000622
向单口瓶中加入7-氨基-2-N-叔丁氧羰基-1,2,3,4-四氢异喹啉(2.00g，8.05mmol)、DMAC(12mL)后，于冰浴中滴加DIEA(3.12g，24.16mmol)与2,4-二氯-5-三氟甲基嘧啶(2.27g，10.47mmol)的DMAC溶液(3mL)。滴毕后，升温至60℃反应0.5h终止。冷却后EA萃取，饱和食盐水洗涤两次，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(THF/DCM体系)得淡黄色固体1.11g，收率32％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.80(s,1H),7.47(d,J＝7.9Hz,2H),7.15(d,J＝8.4Hz,1H),4.48(s,2H),3.55(t,J＝5.7Hz,2H),2.75(t,J＝5.6Hz,2H),1.43(s,9H)；MS(ESI)m/z:427.2[M-H]-。
步骤2:7-(4-((3-甲磺酰基甲基-氨基)-吡嗪-2-基-甲基氨基)-5-三氟甲基嘧啶-2-基-氨基)-2-N-叔丁氧羰基-1,2,3,4-四氢异喹啉的合成
Figure BDA0004006585300000623
室温下，依次向三口瓶中加入7-(4-氯-5-三氟甲基嘧啶-2-基-氨基)-2-N-叔丁氧羰基-1,2,3,4-四氢异喹啉(0.50g，1.17mmol)、N-(3-氨基甲基吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺盐酸盐(0.38g，1.52mmol)，N2保护下加入DMF(12mL)与DIEA(0.45g，3.51mmol)。升温至85℃反应2h终止。降至室温后，用EA萃取，饱和食盐水洗涤三次。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/DCM体系)得白色固体0.58g，收率79％。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.71(d,J＝2.4Hz,1H),8.59(d,J＝2.3Hz,1H),8.26(s,1H),7.40(s,1H),7.36(d,J＝8.4Hz,1H),6.97(d,J＝8.3Hz,1H),4.97(d,J＝4.8Hz,2H),4.37(s,2H),3.52(t,J＝5.8Hz,2H),3.22(s,3H),3.18(s,3H),2.68(t,J＝5.4Hz,2H),1.42(s,9H)；MS(ESI)m/z:609.1[M+H]+。
步骤3:7-(4-((3-甲磺酰基甲基-氨基)-吡嗪-2-基-甲基氨基)-5-三氟甲基嘧啶-2-基-氨基)-1,2,3,4-四氢异喹啉盐酸盐的合成
Figure BDA0004006585300000631
室温下，依次向单口瓶中加入7-(4-((3-甲磺酰基甲基-氨基)-吡嗪-2-基-甲基氨基)-5-三氟甲基嘧啶-2-基-氨基)-2-N-叔丁氧羰基-1,2,3,4-四氢异喹啉(0.42g，0.69mmol)、DCM(4mL)、异丙醚(6mL)，于冰浴下滴加盐酸乙醇溶液(1mL)，室温下反应2.5h终止。移至冰浴下搅拌15min，抽滤得类白色固体0.30g，收率79％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.70(d,J＝2.4Hz,1H),8.61(d,J＝2.3Hz,1H),8.42(s,1H),7.45(s,1H),7.32(d,J＝8.0Hz,1H),7.05(d,J＝8.4Hz,1H),5.00(d,J＝5.0Hz,2H),4.10(t,J＝3.0Hz,2H),3.30(q,J＝3.4Hz,2H),3.20(s,3H),3.20(s,3H),2.93(t,J＝5.8Hz,2H)；MS(ESI)m/z:509.2[M+H]+。实施例10:5-(4-((3-甲磺酰基甲基-氨基)-吡嗪-2-基-甲基氨基)-5-三氟甲基嘧啶-2-基-氨基)-异吲哚啉盐酸盐的合成
Figure BDA0004006585300000632
步骤1:5-(4-氯-5-三氟甲基嘧啶-2-基-氨基)-2-N-叔丁氧羰基异吲哚啉的合成
Figure BDA0004006585300000633
向单口瓶中加入5-氨基-2-N-叔丁氧羰基异吲哚啉(1.00g，4.27mmol)、DMAC(8mL)后，于冰浴中滴加DIEA(1.65g，12.80mmol)与2,4-二氯-5-三氟甲基嘧啶(1.20g，5.55mmol)的DMAC溶液(2mL)。滴毕后，升温至50℃反应4h终止。冷却至室温，EA萃取，饱和食盐水洗涤两次，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩至干，加入少量EA于室温下打浆，过滤得淡黄色固体0.48g，收率27％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.81(d,J＝5.0Hz,1H),7.67(s,1H),7.57(d,J＝8.7Hz,1H),7.34–7.28(m,1H),4.58(t,J＝11.6Hz,4H),1.47(s,9H)；MS(ESI)m/z:413.2[M-H]-。
步骤2:5-(4-((3-甲磺酰基甲基-氨基)-吡嗪-2-基-甲基氨基)-5-三氟甲基嘧啶-2-基-氨基)-2-N-叔丁氧羰基异吲哚啉的合成
Figure BDA0004006585300000641
室温下，依次向三口瓶中加入5-(4-氯-5-三氟甲基嘧啶-2-基-氨基)-2-N-叔丁氧羰基异吲哚啉(0.42g，1.01mmol)、N-(3-氨基甲基吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺盐酸盐(0.33g，1.32mmol)，N2保护下加入DMF(5mL)与DIEA(0.39g，3.04mmol)。升温至85℃反应2h终止。降至室温后，用EA萃取，饱和食盐水洗涤两次。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩至干，加入少量EA于室温下打浆，过滤得淡黄色固体0.42g，收率70％。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.73–8.68(m,1H),8.59(d,J＝2.3Hz,1H),8.27(s,1H),7.66(d,J＝20.3Hz,1H),7.41(dd,J＝30.5,7.8Hz,1H),7.13(t,J＝7.7Hz,1H),4.99(d,J＝4.8Hz,2H),4.49(d,J＝13.1Hz,2H),4.42(s,2H),3.23(s,3H),3.19(s,3H),1.46(d,J＝3.2Hz,9H)；MS(ESI)m/z:595.4[M+H]+。
步骤3:5-(4-((3-甲磺酰基甲基-氨基)-吡嗪-2-基-甲基氨基)-5-三氟甲基嘧啶-2-基-氨基)-异吲哚啉盐酸盐的合成
Figure BDA0004006585300000642
室温下，依次向单口瓶中加入5-(4-((3-甲磺酰基甲基-氨基)-吡嗪-2-基-甲基氨基)-5-三氟甲基嘧啶-2-基-氨基)-2-N-叔丁氧羰基异吲哚啉(0.38g，0.64mmol)、DCM(6mL)、异丙醚(6mL)，于冰浴下滴加盐酸乙醇溶液(1.8mL)，30℃下反应2h终止。抽滤，得产物类白色固体0.28g，收率81％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.70(d,J＝2.4Hz,1H),8.60(d,J＝2.2Hz,1H),8.38(s,1H),7.68(s,1H),7.48(d,J＝7.5Hz,1H),7.23(d,J＝8.3Hz,1H),5.01(d,J＝4.8Hz,2H),4.41(d,J＝5.7Hz,4H),3.22(s,3H),3.20(s,3H)；MS(ESI)m/z:495.5[M+H]+。
实施例11:N-甲基-N-(3-(((2-((5,6,7,8-四氢-1,6-二氮杂萘-2-基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)甲磺酰胺盐酸盐的合成
Figure BDA0004006585300000651
步骤1:2-((二苯亚甲基)氨基)-7,8-二氢-1,6-二氮杂萘-6(5H)-羧酸叔丁酯的合成
Figure BDA0004006585300000652
室温下，依次向封管中加入二苯基甲亚胺(2.20g，12.27mmol)，2-氯-7,8-二氢-1,6-二氮杂萘-6(5H)-羧酸叔丁酯(3.00g，11.15mmol)，Pd2(dba)3(0.60g，0.62mmol)，Xantphos(0.70g，1.24mmol)和碳酸铯(7.3g，22.30mmol)并用1,4-二氧六环(50mL)溶解。氮气保护，升温至98℃反应16h终止。冷却至室温，反应液采用EA萃取，饱和食盐水洗涤两次，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得淡黄色固体2.60g，收率56％。MS(ESI)m/z:413.9[M+H]+。
步骤2:2-氨基-7,8-二氢-1,6-二氮杂萘-6(5H)-羧酸叔丁酯酯的合成
Figure BDA0004006585300000653
室温下，依次向单口瓶中加入2-((二苯亚甲基)氨基)-7,8-二氢-1,6-二氮杂萘-6(5H)-羧酸叔丁酯(2.60g，6.28mmol)和MeOH(50mL)，并于冰浴下加入盐酸羟胺(0.90g，12.56mmol)和醋酸钠(2.40g，18.84mmol)，室温下反应3h终止。过滤，浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得黄色固体1.33g，收率85％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.15(d,J＝8.4Hz,1H),6.29(d,J＝8.3Hz,1H),4.30(s,2H),3.57(t,J＝5.9Hz,2H),2.60(t,J＝5.8Hz,2H),1.42(s,9H)。MS(ESI)m/z:250.0[M+H]+。
步骤3:N-(3-(((2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300000661
室温下，向封管中依次加入N-(3-(氨基甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺盐酸盐(1.56g，6.28mmol)，DIEA(1.62g，12.56mmol)和2,4-二氯-5-(三氟甲基)嘧啶(1.50g，6.91mmol)。65℃下反应4h终止。反应液采用EA萃取，饱和食盐水洗涤两次，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得黄色固体0.52g，收率21％。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.63(d,J＝2.4Hz,1H),8.54(d,J＝2.5Hz,1H),8.43(s,1H),4.85(d,J＝5.4Hz,2H),3.31(s,3H),3.15(s,3H)。MS(ESI)m/z:396.8[M+H]+。
步骤4:2-((4-(((3-(N-甲基甲基磺酰氨基)吡嗪-2-基)甲基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-7,8-二氢-1,6-二氮杂萘-6(5H)-羧酸叔丁酯的合成
Figure BDA0004006585300000662
室温下，依次向封管中加入N-(3-(((2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.14g，0.35mmol)，2-氨基-7,8-二氢-1,6-二氮杂萘-6(5H)-羧酸叔丁酯(0.07g，0.28mmol)，Pd2(dba)3(0.03g，0.03mmol)，Xantphos(0.04g，0.06mmol)和碳酸铯(0.23g，0.70mmol)并用1,4-二氧六环(4mL)溶解。氮气保护，升温至98℃反应16h终止。冷却至室温，EA萃取，饱和食盐水洗涤两次，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)。有机相过柱纯化得淡黄色固体0.05g，收率30％。MS(ESI)m/z:609.8[M+H]+。
步骤5:N-甲基-N-(3-(((2-((5,6,7,8-四氢-1,6-二氮杂萘-2-基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)甲磺酰胺盐酸盐的合成
Figure BDA0004006585300000671
室温下，依次向单口瓶中加入2-((4-(((3-(N-甲基甲基磺酰氨基)吡嗪-2-基)甲基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-7,8-二氢-1,6-二氮杂萘-6(5H)-羧酸叔丁酯(0.05g，0.08mmol)和DCM(3mL)，冰浴下滴加盐酸乙醇溶液(1mL)，于室温下反应1.5h终止。移至冰浴下搅拌45min，抽滤，滤饼打浆得产物白色固体产物0.10g，收率96％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.68(d,J＝1.7Hz,1H),8.67(s,1H),8.59(d,J＝2.3Hz,1H),7.65(d,J＝8.6Hz,1H),7.55(d,J＝8.4Hz,1H),5.07(d,J＝5.3Hz,2H),4.21(s,2H),3.42(q,J＝2.9Hz,2H),3.28(s,3H),3.20(s,2H),3.18(t,J＝4.2Hz,2H)。MS(ESI)m/z:509.8[M+H]+。
实施例12:N-甲基-N-(3-(((2-((2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]吖庚英-7-基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)甲磺酰胺盐酸盐的合成
Figure BDA0004006585300000672
步骤1:7-硝基-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓的合成
Figure BDA0004006585300000673
室温下将2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓盐酸(1.10g，5.97mmol)溶入到三氟乙酸(8mL)中。0℃下缓慢加入硫酸(1.5mL)后再加入硝酸(0.87g，8.97mmol)，室温下反应3h后终止。饱和碳酸钠调节pH至8，EA萃取，洗涤，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得淡黄色固体1.03g，收率90％。MS(ESI)m/z:193.1[M+H]+。
步骤2:7-硝基-1,2,4,5-四氢-3H-苯并[d]氮杂卓-3-羧酸叔丁酯的合成
Figure BDA0004006585300000674
室温下，将7-硝基-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓(1.00g，5.20mmol)和三乙胺(0.33g，15.6mmol)，溶入到DCM(20mL)中。室温下缓慢加入Boc2O(1.50g，6.80mmol)反应3h终止。浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得淡黄色固体1.33g，收率88％。MS(ESI)m/z:315.1[M+Na]+。
步骤3:7-氨基-1,2,4,5-四氢-3H-苯并[d]氮杂卓-3-羧酸叔丁酯的合成
Figure BDA0004006585300000681
室温下，将7-硝基-1,2,4,5-四氢-3H-苯并[d]氮杂卓-3-羧酸叔丁酯(1.20g，4.10mmol)溶入到MeOH(15mL)中。加入10％Pd/C(500mg)并在氢气氛围下室温反应3h终止。过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得粉红色油0.77g，收率72％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ6.77(d,J＝7.9Hz,1H),6.36(d,J＝2.4Hz,1H),6.31(dd,J＝7.8,2.3Hz,1H),3.43–3.34(m,4H),2.71–2.60(m,4H),1.40(s,9H)。
步骤4:7-((4-(((3-(N-甲基甲基磺酰氨基)吡嗪-2-基)甲基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-1,2,4,5-四氢-3H-苯并[d]氮杂卓-3-羧酸叔丁酯的合成
Figure BDA0004006585300000682
室温下，依次向封管中加入N-(3-(((2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.22g，0.55mmol)，7-氨基-1,2,4,5-四氢-3H-苯并[d]氮杂卓-3-羧酸叔丁酯(0.13g，0.50mmol)，Pd2(dba)3(0.05g，0.05mmol)，Xantphos(0.06g，0.10mmol)和碳酸铯(0.40g，1.25mmol)并用1,4-二氧六环(8mL)溶解。氮气保护，升温至95℃反应16h终止。冷却至室温，反应液采用EA萃取，饱和食盐水洗涤两次，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得淡黄色固体0.09g，收率28％。MS(ESI)m/z:623.3[M+H]+。
步骤5:N-甲基-N-(3-(((2-((2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]吖庚英-7-基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)甲磺酰胺盐酸盐的合成
Figure BDA0004006585300000691
室温下，依次向单口瓶中加入7-((4-(((3-(N-甲基甲基磺酰氨基)吡嗪-2-基)甲基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-1,2,4,5-四氢-3H-苯并[d]氮杂卓-3-羧酸叔丁酯(0.08g，0.14mmol)和DCM(5mL)，并于冰浴下滴加盐酸乙醇溶液(1mL)，室温下反应1.5h终止。抽滤，得产物白色固体0.03g，收率39％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.71(d,J＝2.4Hz,1H),8.59(d,J＝2.4Hz,1H),8.26(s,1H),7.47(s,1H),7.37(d,J＝8.0Hz,1H),6.99(d,J＝8.2Hz,1H),4.98(d,J＝4.9Hz,2H),3.23(s,3H),3.20(s,3H),3.04–2.98(m,6H),2.96–2.92(m,2H)。MS(ESI)m/z:522.7[M+H]+。
实施例13:N-甲基-N-(3-(((5-三氟甲基-2-((1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡啶-2-基)甲磺酰胺盐酸盐的合成
Figure BDA0004006585300000692
步骤1:N-(3-氰基吡啶-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300000693
室温下，向封管中依次加入碳酸铯(9.39g，28.80mmol)，2-氯-3-氰基吡啶(2.00g，14.40mmol)和乙腈(90mL)。冰浴下缓慢滴加甲磺酰甲胺(1.73g，15.90mmol)。滴毕后，80℃下反应24h终止。浓缩反应液后采用EA萃取，饱和食盐水洗涤两次，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得红色固体1.60g，收率52％。MS(ESI)m/z:212.0[M+H]+。
步骤2:((2-(N-甲基甲基磺酰氨基)吡啶-3-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯的合成
Figure BDA0004006585300000694
/>
室温下，依次向四口瓶中加入N-(3-氰基吡啶-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.80g，3.79mmol)、THF(20mL)、Boc2O(1.03g，4.74mmol)、Raney-Ni(1.56g，26.54mmol)，充入H2，30℃下反应15h后终止。反应冷却后，利用硅藻土过滤除去Raney-Ni，滤液浓缩得粗品白色固体1.12g，收率94％。MS(ESI)m/z:315.9[M+H]+。
步骤3:N-(3-(氨基甲基)吡啶-2-基)-N-甲基甲磺酰胺盐酸盐的合成
Figure BDA0004006585300000701
室温下，依次向四口瓶中加入((2-(N-甲基甲基磺酰氨基)吡啶-3-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯(1.12g，3.55mmol)和DCM(5mL)。冰浴下搅拌滴加盐酸乙醇溶液(5mL)。滴毕后，置于室温下反应2h终止。将反应移至冰浴下继续搅拌0.5h后，抽滤，得淡黄色固体0.55g，收率62％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.55(dd,J＝4.7,1.8Hz,1H),8.21(dd,J＝7.8,1.8Hz,1H),7.56(dd,J＝7.8,4.8Hz,1H),4.16(q,J＝5.9Hz,2H),3.22(s,3H),3.08(s,3H)。MS(ESI)m/z:216.0[M+H]+。
步骤4:6-((5-三氟甲基-4-(((2-(N-甲基甲基磺酰氨基)吡啶-3-基)甲基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-羧酸叔丁酯的合成
Figure BDA0004006585300000702
室温下，依次向封管中加入6-((4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-羧酸叔丁酯(0.20g，0.47mmol)，N-(3-(氨基甲基)吡啶-2-基)-N-甲基甲磺酰胺盐酸(0.13g，0.52mmol)和DIEA(0.12g，0.94mmol)并用DMF(4mL)溶解。氮气保护，升温至85℃反应3h终止。冷却至室温，加水稀释，EA萃取。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得淡黄色油0.15g，收率52％。MS(ESI)m/z:608.3[M+H]+。
步骤5:N-甲基-N-(3-(((5-三氟甲基-2-((1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡啶-2-基)甲磺酰胺盐酸盐的合成
Figure BDA0004006585300000711
室温下，依次向单口瓶中加入6-((5-三氟甲基-4-(((2-(N-甲基甲基磺酰氨基)吡啶-3-基)甲基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-羧酸叔丁酯(0.11g，0.18mmol)和DCM(3mL)，冰浴下滴加盐酸乙醇溶液(1mL)，于室温下反应1.5h终止。抽滤，得产物白色固体0.09g，收率96％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.47(dd,J＝4.8,1.8Hz,1H),8.38(s,1H),7.73(dd,J＝7.8,1.8Hz,1H),7.43(dd,J＝7.8,4.7Hz,1H),7.39(s,1H),7.31(d,J＝5.2Hz,1H),6.98(d,J＝8.4Hz,1H),4.83(d,J＝5.7Hz,2H),4.14(t,J＝4.0Hz,2H),3.27(q,J＝3.2Hz,2H),3.16(s,3H),3.14(s,3H),2.76(t,J＝6.3Hz,2H)。MS(ESI)m/z:507.9[M+H]+。
实施例14:N-甲基-N-(3-(((2-((1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)甲磺酰胺二盐酸盐的合成
Figure BDA0004006585300000712
步骤1:N-(3-(((2-氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300000713
室温下，向封管中依次加入N-(3-(氨基甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺盐酸盐(0.50g，1.98mmol)，DIEA(0.64g，4.95mmol)和2,4-二氯嘧啶(0.35g，2.37mmol)，并用DMAC(5mL)溶解。60℃下反应3h终止。反应液采用EA萃取，饱和食盐水洗涤两次，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得黄色固体0.51g，收率78％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.66(d,J＝2.4Hz,1H),8.56(d,J＝2.5Hz,1H),7.93(d,J＝5.9Hz,1H),6.63(d,J＝5.9Hz,1H),4.75(d,J＝5.7Hz,2H),3.31(s,3H),3.16(s,3H)。MS(ESI)m/z:328.9[M+H]+。
步骤2:6-((4-(((3-(N-甲基甲基磺酰氨基)吡嗪-2-基)甲基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-羧酸叔丁酯的合成
Figure BDA0004006585300000721
室温下，依次向封管中加入N-(3-(((2-氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.20g，0.61mmol)，6-氨基-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-羧酸叔丁酯(0.17g，0.67mmol)，Pd2(dba)3(0.06g，0.07mmol)，Xantphos(0.08g，0.14mmol)和碳酸铯(0.46g，1.42mmol)并用1,4-二氧六环(5mL)溶解。氮气保护，升温至95℃反应16h终止。冷却至室温，反应液采用EA萃取，饱和食盐水洗涤两次，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得淡黄色固体0.06g，收率25％。MS(ESI)m/z:541.0[M+H]+。
步骤3:N-甲基-N-(3-(((2-((1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)甲磺酰胺二盐酸盐的合成
Figure BDA0004006585300000722
室温下，依次向单口瓶中加入6-((4-(((3-(N-甲基甲基磺酰氨基)吡嗪-2-基)甲基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-羧酸叔丁酯(0.06g，0.11mmol)和DCM(3mL)，并于冰浴下滴加盐酸乙醇溶液(1mL)，室温下反应1.5h终止。抽滤，得白色固体产物0.05g，收率85％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.71(d,J＝2.5Hz,1H),8.62(d,J＝2.5Hz,1H),7.95(d,J＝7.3Hz,1H),7.38(s,1H),7.35(d,J＝8.0Hz,1H),7.12(d,J＝8.5Hz,1H),6.48(d,J＝7.2Hz,1H),4.96(d,J＝4.8Hz,2H),4.17(s,2H),3.29(t,J＝4.4Hz,2H),3.17(s,3H),3.17(s,3H),2.95(t,J＝4.2Hz,2H)。MS(ESI)m/z:441.2[M+H]+。
实施例15:N-甲基-N-(3-((甲基(2-((1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)甲磺酰胺盐酸盐的合成
Figure BDA0004006585300000731
步骤1:N-(3-(((2-氯嘧啶-4-基)(甲基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300000732
室温下，依次加入N-(3-(((2-氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.20g，0.61mmol)，多聚甲醛(0.04g，1.22mmol)和醋酸(0.01mL)，并用DCM(5mL)溶解室温反应2h终止。冰浴下加入氰基硼氢化钠(0.06g，0.92mmol)，室温氮气保护反应16h后终止。反应液采用DCM萃取，饱和食盐水洗涤两次，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得黄色油0.15g，收率72％。MS(ESI)m/z:343.0[M+H]+。
步骤2:6-((4-(甲基((3-(N-甲基甲基磺酰氨基)吡嗪-2-基)甲基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-羧酸叔丁酯的合成
Figure BDA0004006585300000733
/>
室温下，依次向封管中加入N-(3-(((2-氯嘧啶-4-基)(甲基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.15g，0.44mmol)，6-氨基-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-羧酸叔丁酯(0.12g，0.48mmol)，Pd2(dba)3(0.04g，0.04mmol)，Xantphos(0.05g，0.08mmol)和碳酸铯(0.29g，0.88mmol)并用1,4-二氧六环(6mL)溶解。氮气保护，升温至95℃反应16h终止。冷却至室温，反应液采用EA萃取，饱和食盐水洗涤两次，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得淡黄色固体0.08g，收率34％。MS(ESI)m/z:555.2[M+H]+。
步骤3:N-甲基-N-(3-((甲基(2-((1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)甲磺酰胺盐酸盐的合成
Figure BDA0004006585300000741
室温下，依次向单口瓶中加入6-((4-(甲基((3-(N-甲基甲基磺酰氨基)吡嗪-2-基)甲基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-羧酸叔丁酯(0.08g，0.15mmol)和DCM(3mL)，并于冰浴下滴加盐酸乙醇溶液(1mL)，室温下反应1.5h终止。抽滤，得产物白色固体0.05g，收率66％。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ8.54(d,J＝2.4Hz,1H),8.48(d,J＝2.5Hz,1H),7.86(d,J＝6.0Hz,1H),7.36(s,1H),7.26(s,1H),6.92(d,J＝8.4Hz,1H),6.14(d,J＝6.4Hz,1H),5.16(s,2H),4.00(s,2H),3.24(s,3H),3.21(s,3H),3.17(t,J＝4.2Hz,2H),3.15(s,3H),2.83(t,J＝6.8Hz,2H)。MS(ESI)m/z:455.1[M+H]+。
实施例16:N-甲基-N-(3-(((5-甲基-2-((1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)甲磺酰胺盐酸盐的合成
Figure BDA0004006585300000742
步骤1:N-(3-(((2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300000743
室温下，向封管中依次加入N-(3-(氨基甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺盐酸盐(0.50g，1.98mmol)，DIEA(0.64g，4.95mmol)和2,4-二氯-5-甲基嘧啶(0.42g，2.57mmol)，并用DMAC(5mL)溶解。60℃下反应3h终止。反应液采用EA萃取，饱和食盐水洗涤两次，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得黄色固体0.50g，收率74％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.62(d,J＝2.4Hz,1H),8.52(d,J＝2.3Hz,1H),7.82(s,1H),4.75(d,J＝5.6Hz,2H),3.32(s,3H),3.14(s,3H),2.02(s,3H)。MS(ESI)m/z:343.1[M+H]+。
步骤2:6-((5-甲基-4-(((3-(N-甲基甲基磺酰氨基)吡嗪-2-基)甲基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-羧酸叔丁酯的合成
Figure BDA0004006585300000751
室温下，依次向封管中加入N-(3-(((2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.50g，1.46mmol)，6-氨基-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-羧酸叔丁酯(0.43g，1.75mmol)，Pd2(dba)3(0.14g，0.15mmol)，Xantphos(0.17g，0.30mmol)和碳酸铯(0.95g，2.92mmol)并用1,4-二氧六环(20mL)溶解。氮气保护，升温至95℃反应16h终止。冷却至室温，反应液采用EA萃取，饱和食盐水洗涤两次，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得淡黄色固体0.06g，收率25％。MS(ESI)m/z:555.2[M+H]+。
步骤3:N-甲基-N-(3-(((5-甲基-2-((1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)甲磺酰胺二盐酸盐的合成
Figure BDA0004006585300000752
室温下，依次向单口瓶中加入6-((5-甲基-4-(((3-(N-甲基甲基磺酰氨基)吡嗪-2-基)甲基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-羧酸叔丁酯(0.12g，0.22mmol)和DCM(3mL)，并于冰浴下滴加盐酸乙醇溶液(1mL)，室温下反应1.5h终止。抽滤，得产物白色固体0.05g，收率41％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.69(d,J＝2.5Hz,1H),8.61(d,J＝2.5Hz,1H),7.84(s,1H),7.32(s,1H),7.20(dd,J＝8.4,2.2Hz,1H),7.05(d,J＝8.5Hz,1H),4.99(d,J＝5.5Hz,2H),4.18(t,J＝4.4Hz,2H),3.30(t,J＝4.2Hz,2H),3.18(s,3H),3.16(s,3H),2.87(t,J＝6.3Hz,2H),2.05(s,3H)。MS(ESI)m/z:455.2[M+H]+。
实施例17:N-甲基-N-(3-(((5-甲基-2-((1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡啶-2-基)甲磺酰胺二盐酸盐的合成
Figure BDA0004006585300000761
步骤1:N-(3-(((2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡啶-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300000762
向单口瓶中加入N-(3-(氨基甲基)吡啶-2-基)-N-甲基甲磺酰胺盐酸盐(0.50g，1.98mmol)和DMAC(5mL)后，于冰浴中滴加DIEA(0.51g，3.96mmol)与2,4-二氯-5-甲基嘧啶(0.35g，2.38mmol)的DMAC溶液(1mL)。滴毕后，升温至65℃反应4.5h终止。冷却至室温，加水稀释EA萃取，饱和食盐水洗涤两次，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得淡黄色固体0.24g，收率37％。MS(ESI)m/z:342.1[M+H]+。
步骤2:6-((5-甲基-4-(((2-(N-甲基甲基磺酰氨基)吡啶-3-基)甲基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-羧酸叔丁酯的合成
Figure BDA0004006585300000763
室温下，依次向封管中加入N-(3-(((2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡啶-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.24g，0.70mmol)，6-氨基-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-羧酸叔丁酯(0.19g，0.77mmol)，Pd2(dba)3(0.06g，0.07mmol)，Xantphos(0.08g，0.14mmol)和碳酸铯(0.46g，1.40mmol)并用1,4-二氧六环(5mL)溶解。氮气保护，升温至98℃反应16h终止。冷却至室温，加水稀释，EA萃取。有机相过柱纯化(EA/PE体系)得淡黄色固体0.11g，收率29％。MS(ESI)m/z:554.2[M+H]+。
步骤3:N-甲基-N-(3-(((5-甲基-2-((1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡啶-2-基)甲磺酰胺二盐酸盐的合成
Figure BDA0004006585300000771
室温下，依次向单口瓶中加入6-((5-甲基-4-(((2-(N-甲基甲基磺酰氨基)吡啶-3-基)甲基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-羧酸叔丁酯(0.11g，0.20mmol)和DCM(3mL)，并于冰浴下滴加盐酸乙醇溶液(1mL)，于室温下反应1.5h终止。移至冰浴下搅拌45min，抽滤，滤饼打浆得产物白色固体0.08g，收率80％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.49(dd,J＝4.7,1.8Hz,1H),7.87(s,1H),7.79(dd,J＝7.8,1.8Hz,1H),7.44(dd,J＝7.7,4.7Hz,1H),7.26(d,J＝2.2Hz,1H),7.21(dd,J＝8.3,2.2Hz,1H),7.03(d,J＝8.4Hz,1H),4.82(d,J＝5.6Hz,2H),4.16(t,J＝4.0Hz,2H),3.27(q,J＝2.9Hz,2H),3.15(s,3H),3.11(s,3H),2.80(t,J＝6.3Hz,2H),2.07(s,3H)。MS(ESI)m/z:454.2[M+H]+。
实施例18:N-(3-(((5-氰基-2-((1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺盐酸盐的合成
Figure BDA0004006585300000772
步骤1:N-(3-(((2-氯-5氰基嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300000773
室温下，向封管中依次加入N-(3-(氨基甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺盐酸盐(0.83g，3.28mmol)，DIEA(0.89g，6.90mmol)和2,4-二氯-5-氰基嘧啶(0.60g，3.45mmol)，并用DMAC(5mL)溶解。60℃下反应4h终止。反应液采用EA萃取，饱和食盐水洗涤两次，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得黄色固体0.26g，收率22％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.65(d,J＝2.5Hz,1H),8.60(s,1H),8.56(d,J＝2.4Hz,1H),4.82(d,J＝5.6Hz,2H),3.30(s,3H),3.15(s,3H)。MS(ESI)m/z:353.8[M+H]+。
步骤2:6-((5-氰基-4-(((2-(N-甲基甲基磺酰氨基)吡嗪-3-基)甲基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-羧酸叔丁酯的合成
Figure BDA0004006585300000781
室温下，依次向封管中加入N-(3-(((2-氯-5氰基嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡啶-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.25g，0.71mmol)，6-氨基-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-羧酸叔丁酯(0.19g，0.78mmol)，Pd2(dba)3(0.06g，0.07mmol)，Xantphos(0.08g，0.14mmol)和碳酸铯(0.46g，1.42mmol)并用1,4-二氧六环(5mL)溶解。氮气保护，升温至95℃反应16h终止。冷却至室温，反应液采用EA萃取，饱和食盐水洗涤两次，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得淡黄色固体0.10g，收率25％。MS(ESI)m/z:565.8[M+H]+。
步骤3:N-甲基-N-(3-(((5-氰基-2-((1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)甲磺酰胺盐酸盐的合成
Figure BDA0004006585300000782
室温下，依次向单口瓶中加入6-((5-氰基-4-(((2-(N-甲基甲基磺酰氨基)吡啶-3-基)甲基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-羧酸叔丁酯(0.10g，0.18mmol)和DCM(3mL)，并于冰浴下滴加盐酸乙醇溶液(1mL)，室温下反应1.5h终止。抽滤，得产物白色固体0.04g，收率39％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.70(d,J＝2.3Hz,1H),8.59(d,J＝2.1Hz,1H),8.43(s,1H),7.49(s,1H),7.36(d,J＝2.1Hz,1H),7.01(d,J＝8.4Hz,1H),4.94(d,J＝5.3Hz,2H),4.11(s,2H),3.24(t,J＝4.2Hz,2H),3.21(s,3H),3.18(s,3H),2.87(t,J＝4.0Hz,2H)。MS(ESI)m/z:465.8[M+H]+。
实施例19:N-(3-(((5-氟-2-((1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺盐酸盐的合成
Figure BDA0004006585300000791
步骤1:N-(3-(((2-氯-5-氟嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300000792
室温下，向封管中依次加入N-(3-(氨基甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺盐酸盐(0.69g，2.70mmol)，DIEA(0.70g，5.40mmol)，2,4-二氯-5-氟嘧啶(0.50g，3.00mmol)和DMAC(5mL)。60℃下反应4h终止。反应液采用EA萃取，饱和食盐水洗涤两次，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得黄色固体0.50g，收率53％。MS(ESI)m/z:346.9[M+H]+。
步骤2:6-((5-氟-4-(((2-(N-甲基甲基磺酰氨基)吡嗪-3-基)甲基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-羧酸叔丁酯的合成
Figure BDA0004006585300000793
/>
室温下，依次向封管中加入N-(3-(((2-氯-5-氟嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.25g，0.72mmol)，6-氨基-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-羧酸叔丁酯(0.16g，0.65mmol)，Pd2(dba)3(0.06g，0.07mmol)，Xantphos(0.08g，0.14mmol)和碳酸铯(0.42g，1.30mmol)并用1,4-二氧六环(5mL)溶解。氮气保护，升温至98℃反应16h终止。冷却至室温，反应液采用EA萃取，饱和食盐水洗涤两次，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得淡黄色固体0.11g，收率30％。MS(ESI)m/z:558.8[M+H]+。
步骤3:N-甲基-N-(3-(((5-氟-2-((1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)甲磺酰胺盐酸盐的合成
Figure BDA0004006585300000801
室温下，依次向单口瓶中加入6-((5-氟-4-(((2-(N-甲基甲基磺酰氨基)吡啶-3-基)甲基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-羧酸叔丁酯(0.11g，0.19mmol)和DCM(3mL)，并于冰浴下滴加盐酸乙醇溶液(1mL)，室温下反应1.5h终止。移至冰浴下搅拌45min，抽滤，得产物白色固体0.10g，收率96％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.69(d,J＝2.5Hz,1H),8.61(d,J＝2.4Hz,1H),8.24(d,J＝5.0Hz,1H),7.35(s,1H),7.25(dd,J＝8.3,2.1Hz,1H),7.05(d,J＝8.4Hz,1H),4.97(d,J＝5.6Hz,2H),4.17(s,2H),3.31(q,J＝4.2Hz,2H),3.18(s,3H),3.18(s,3H),2.89(t,J＝6.3Hz,2H)。MS(ESI)m/z:458.8[M+H]+。
实施例20:N-(3-(((5-氟-2-((5,6,7,8-四氢-1,6-二氮杂萘-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺盐酸的合成
Figure BDA0004006585300000802
步骤1:2-((5-氟-4-(((3-(N-甲基甲基磺酰氨基)吡嗪-2-基)甲基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)-7,8-二氢-1,6-二氮杂萘-6(5H)-羧酸叔丁酯的合成
Figure BDA0004006585300000803
室温下，依次向封管中加入N-(3-(((2-氯-5-氟嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.25g，0.72mmol)，2-氨基-7,8-二氢-1,6-二氮杂萘-6(5H)-羧酸叔丁酯(0.16g，0.65mmol)，Pd2(dba)3(0.06g，0.07mmol)，Xantphos(0.08g，0.14mmol)和碳酸铯(0.42g，1.30mmol)并用1,4-二氧六环(5mL)溶解。氮气保护，升温至98℃反应16h终止。冷却至室温，反应液采用EA萃取，饱和食盐水洗涤两次，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得淡黄色固体0.09g，收率25％。MS(ESI)m/z:559.8[M+H]+。
步骤2:N-(3-(((5-氟-2-((5,6,7,8-四氢-1,6-二氮杂萘-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺盐酸盐的合成
Figure BDA0004006585300000811
室温下，依次向单口瓶中加入2-((5-氟-4-(((3-(N-甲基甲基磺酰氨基)吡嗪-2-基)甲基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)-7,8-二氢-1,6-二氮杂萘-6(5H)-羧酸叔丁酯(0.09g，0.16mmol)和DCM(3mL)，并于冰浴下滴加盐酸乙醇溶液(1mL)，室温下反应1.5h终止。移至冰浴下搅拌45min，抽滤，得淡黄色固体产物0.03g，收率37％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.71(d,J＝2.8Hz,1H),8.63(d,J＝2.6Hz,1H),8.38(d,J＝4.6Hz,1H),7.76(d,J＝8.5Hz,1H),7.25(d,J＝8.4Hz,1H),5.05(d,J＝5.5Hz,2H),4.27(s,2H),3.46(t,J＝10.8Hz,2H),3.28(s,3H),3.23(t,J＝4.2Hz,2H),3.18(s,3H)。MS(ESI)m/z:459.8[M+H]+。
实施例21:N-(3-(((5-氯-2-((1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺盐酸盐的合成
Figure BDA0004006585300000812
步骤1:N-(3-(((2,5-二氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300000813
室温下，向封管中依次加入N-(3-(氨基甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺盐酸盐(0.63g，2.48mmol)，DIEA(0.64g，4.96mmol)和2,4,5-三氯嘧啶(0.50g，2.72mmol)。65℃下反应4h终止。反应液采用EA萃取，饱和食盐水洗涤两次，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得黄色固体0.50g，收率56％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.65(d,J＝2.5Hz,1H),8.56(d,J＝2.4Hz,1H),8.21(s,1H),4.81(d,J＝5.6Hz,2H),3.31(s,3H),3.15(s,3H)。MS(ESI)m/z:362.9[M+H]+。
步骤2:6-((5-氯-4-(((2-(N-甲基甲基磺酰氨基)吡啶-3-基)甲基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-羧酸叔丁酯的合成
Figure BDA0004006585300000821
室温下，依次向封管中加入N-(3-(((2,5-二氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡啶-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.20g，0.55mmol)，6-氨基-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-羧酸叔丁酯(0.16g，0.66mmol)，Pd2(dba)3(0.05g，0.06mmol)，Xantphos(0.06g，0.12mmol)和碳酸铯(0.37g，1.12mmol)并用1,4-二氧六环(5mL)溶解。氮气保护，升温至98℃反应16h终止。冷却至室温，反应液采用EA萃取，饱和食盐水洗涤两次，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得淡黄色固体0.11g，收率36％。MS(ESI)m/z:575.2[M+H]+。
步骤3:N-甲基-N-(3-(((5-氯-2-((1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡啶-2-基)甲磺酰胺盐酸盐的合成
Figure BDA0004006585300000822
室温下，依次向单口瓶中加入6-((5-氯-4-(((2-(N-甲基甲基磺酰氨基)吡啶-3-基)甲基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-羧酸叔丁酯(0.11g，0.20mmol)和DCM(3mL)，并于冰浴下滴加盐酸乙醇溶液(1mL)，室温下反应1.5h终止。移至冰浴下搅拌45min，抽滤，得产物白色固体0.10g，收率96％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.70(d,J＝2.5Hz,1H),8.60(d,J＝2.5Hz,1H),8.19(s,1H),7.45(d,J＝2.1Hz,1H),7.31(dd,J＝8.4,2.2Hz,1H),7.04(d,J＝8.5Hz,1H),4.97(d,J＝5.4Hz,2H),4.16(t,J＝5.8Hz,2H),3.31(q,J＝2.9Hz,2H),3.21(s,3H),3.18(s,3H),2.88(t,J＝6.2Hz,2H)。MS(ESI)m/z:475.1[M+H]+。
实施例22:N-(3-(((5-氯-2-((5,6,7,8-四氢-1,6-二氮杂萘-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300000831
步骤1:2-((5-氯-4-(((3-(N-甲基甲基磺酰氨基)吡嗪-2-基)甲基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)-7,8-二氢-1,6-二氮杂萘-6(5H)-羧酸叔丁酯的合成
Figure BDA0004006585300000832
室温下，依次向封管中加入N-(3-(((2,5-二氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.28g，0.77mmol)，2-氨基-7,8-二氢-1,6-二氮杂萘-6(5H)-羧酸叔丁酯(0.17g，0.70mmol)，Pd2(dba)3(0.06g，0.06mmol)，Xantphos(0.07g，0.12mmol)和碳酸铯(0.50g，1.50mmol)并用1,4-二氧六环(8mL)溶解。氮气保护，升温至98℃反应16h终止。冷却至室温，反应液采用EA萃取，饱和食盐水洗涤两次，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得淡黄色固体0.13g，收率31％。MS(ESI)m/z:575.7[M+H]+。
步骤2:N-(3-(((5-氯-2-((5,6,7,8-四氢-1,6-二氮杂萘-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300000833
室温下，依次向单口瓶中加入2-((5-氯-4-(((3-(N-甲基甲基磺酰氨基)吡嗪-2-基)甲基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)-7,8-二氢-1,6-二氮杂萘-6(5H)-羧酸叔丁酯(0.09g，0.16mmol)和DCM(3mL)，并于冰浴下滴加盐酸乙醇溶液(1mL)，室温下反应1.5h终止。移至冰浴下搅拌45min，抽滤。所得固体在碳酸钠和甲醇的混合溶液中常温反应2h终止。过滤，浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得产物淡黄色固体0.04g，收率35％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.66(d,J＝2.6Hz,2H),8.56(d,J＝3.2Hz,2H),8.03(s,1H),7.65(d,J＝8.7Hz,1H),7.17(d,J＝8.5Hz,1H),4.93(d,J＝5.2Hz,2H),3.74(s,2H),3.24(s,3H),3.21(s,3H),2.98(t,J＝4.2Hz,2H),2.63(t,J＝4.6Hz,2H)。MS(ESI)m/z:475.7[M+H]+。
实施例23:N-(3-(((5-氯-2-((2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]吖庚英-7-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺盐酸盐的合成
Figure BDA0004006585300000841
步骤1～步骤3参考实施例12；
步骤4:7-((5-氯-4-(((3-((二羰基-l5-硫烷基)(甲基)氨基)吡嗪-2-基)甲基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)-1,2,4,5-四氢-3H-苯并[d]氮杂卓-3-羧酸叔丁酯的合成
Figure BDA0004006585300000842
室温下，依次向封管中加入N-(3-(((2，5-二嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.25g，0.69mmol)，7-氨基-1,2,4,5-四氢-3H-苯并[d]氮杂卓-3-羧酸叔丁酯(0.16g，0.63mmol)，Pd2(dba)3(0.05g，0.06mmol)，Xantphos(0.07g，0.12mmol)和碳酸铯(0.51g，1.58mmol)并用1,4-二氧六环(10mL)溶解。氮气保护，升温至95℃反应16h终止。冷却至室温，反应液采用EA萃取，饱和食盐水洗涤两次，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得淡黄色固体0.12g，收率26％。MS(ESI)m/z:589.2[M+H]+。
步骤5:N-(3-(((5-氯-2-((2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]吖庚英-7-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺盐酸盐的合成
Figure BDA0004006585300000843
室温下，依次向单口瓶中加入7-((5-氯-4-(((3-((二羰基-l5-硫烷基)(甲基)氨基)吡嗪-2-基)甲基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)-1,2,4,5-四氢-3H-苯并[d]氮杂卓-3-羧酸叔丁酯(0.09g，0.16mmol)和DCM(5mL)，并于冰浴下滴加盐酸乙醇溶液(1mL)，室温下反应1.5h终止。抽滤，得产物白色固体0.03g，收率38％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.70(d,J＝2.5Hz,1H),8.59(d,J＝2.5Hz,1H),8.01(s,1H),7.48(s,1H),7.36(d,J＝1.5Hz,1H),6.97(d,J＝7.8Hz,1H),4.94(d,J＝5.3Hz,2H),3.24(s,3H),3.20(s,3H),3.11–3.05(m,4H),3.01–2.95(m,4H)。MS(ESI)m/z:488.7[M+H]+。
实施例24:N-(3-(((5-氯-2-((3-(2-羟基乙基)-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]吖庚英-7-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300000851
室温下，依次向封管中加入N-(3-(((5-氯-2-((2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]吖庚英-7-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺盐酸盐(0.10g，0.20mmol)，溴乙醇(0.05g，0.40mmol)和碳酸钾(0.08g，0.60mmol)并用乙腈(2mL)溶解。氮气保护，升温至55℃反应6h终止。冷至室温，浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得产物淡黄色固体0.08g，收率79％。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.70(d,J＝2.4Hz,1H),8.58(d,J＝2.3Hz,1H),8.00(s,1H),7.37(s,1H),7.29(d,J＝8.2Hz,1H),6.90(d,J＝8.1Hz,1H),4.93(d,J＝5.3Hz,2H),3.57(t,J＝4.2Hz,2H),3.23(s,3H),3.19(s,3H),2.88–2.62(m,10H)。MS(ESI)m/z:532.9[M+H]+。
实施例25:N-(3-(((5-氯-2-((3-(2-甲氧基乙基)-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]吖庚英-7-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300000852
室温下，依次向封管中加入N-(3-(((5-氯-2-((2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]吖庚英-7-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺盐酸盐(0.08g，0.15mmol)，溴乙基甲醚(0.05g，0.38mmol)和碳酸钾(0.06g，0.45mmol)并用甲醇(3mL)溶解。氮气保护，升温至50℃反应16h终止。冷至室温，浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得产物淡黄色固体0.05g，收率65％。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.70(d,J＝2.5Hz,1H),8.58(d,J＝2.5Hz,1H),7.99(s,1H),7.33(s,1H),7.26(d,J＝8.1Hz,1H),6.86(d,J＝8.1Hz,1H),4.92(d,J＝5.3Hz,2H),3.44(t,J＝5.9Hz,2H),3.24(s,3H),3.23(s,3H),3.19(s,3H),2.76–2.67(m,4H),2.55–2.62(m,6H)。MS(ESI)m/z:546.9[M+H]+。
实施例26:N-(3-(((5-氯-2-(异色烷-6-基氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300000861
步骤1:2-(2-(羟甲基)-5-硝基苯基)乙烷-1-醇
Figure BDA0004006585300000862
0℃下，将化合物2-(羧基甲基)-4-硝基苯甲酸(5.00g，22.20mmol)和硼氢化钠(2.50g，66.60mmol)溶入到THF(50mL)中。冰浴下缓慢滴加BH3/THF(66.60mL，66.60mmol)，滴毕后，0℃下反应2h升至室温反应2h终止。甲醇淬灭，浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得黄色固体4.00g，收率91％。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.08(d,J＝6.8Hz,1H),8.07(s,1H),7.69(d,J＝8.6Hz,1H),4.67(s,2H),3.67(t,J＝6.5Hz,2H),2.83(t,J＝6.5Hz,2H)。MS(ESI)m/z:198.1[M+H]+。
步骤2:6-硝基异色烷的合成
Figure BDA0004006585300000863
室温下，依次向四口瓶中加入2-(2-(羟甲基)-5-硝基苯基)乙烷-1-醇(2.50g，12.70mmol)、三苯基膦(3.70g，13.90mmol)和琥珀酰亚胺(1.30g，13.30mmol)，氮气保护下0℃反应0.5h后缓慢滴加DIAD(3.40g，16.50mmol)，升至室温反应16h终止。水洗，EA萃取，饱和食盐水洗涤两次，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得淡黄色固体2.00g，收率88％。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.06(s,1H),8.02(dd,J＝8.5,2.3Hz,1H),7.34(d,J＝8.4Hz,1H),4.79(s,2H),3.91(t,J＝5.7Hz,2H),2.92(t,J＝5.8Hz,2H)。
步骤3:6-氨基异色烷的合成
Figure BDA0004006585300000871
室温下，将化合物6-硝基异色烷(1.80g，10.00mmol)和10％Pd/C(0.50g)溶入到甲醇(10mL)中。氢气氛围下反应16h终止。过滤，浓缩得淡黄色固体1.45g，收率97％。MS(ESI)m/z:149.9[M+H]+。
步骤4:N-(3-(((5-氯-2-(异色烷-6-基氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300000872
室温下，依次向封管中加入N-(3-(((2,5-二氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.40g，1.10mmol)，6-氨基异色烷(0.10g，0.70mmol)，Pd2(dba)3(0.05g，0.06mmol)，Xantphos(0.07g，0.12mmol)和碳酸铯(0.46g，1.40mmol)并用1,4-二氧六环(5mL)溶解。氮气保护，升温至105℃反应16h终止。冷却至室温，反应液采用EA萃取，饱和食盐水洗涤两次，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得淡黄色固体产物0.09g，收率26％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.70(s,1H),8.58(s,1H),8.01(s,1H),7.44(s,1H),7.30(d,J＝8.3Hz,1H),6.80(d,J＝8.4Hz,1H),4.93(d,J＝5.2Hz,2H),4.59(s,2H),3.82(t,J＝5.7Hz,2H),3.22(s,3H),3.19(s,3H),2.66(t,J＝5.7Hz,2H)。MS(ESI)m/z:476.1[M+H]+。
实施例27:N-(2-(((5-氯-2-((1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)苯基)-N-甲基甲磺酰胺盐酸盐的合成
Figure BDA0004006585300000873
步骤1:N-(2-氰基苯基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300000881
室温下，向封管中依次加入碳酸铯(8.10g，24.86mmol)，2-氟苯甲腈(2.00g，16.52mmol)和乙腈(60mL)。冰浴下缓慢滴加甲磺酰甲胺(2.30g，21.08mmol)，滴毕后，80℃下反应24h终止。冷却至室温，浓缩反应液后采用EA萃取，饱和食盐水洗涤两次，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得淡黄色固体2.50g，收率71％。MS(ESI)m/z:211.0[M+H]+。
步骤2:(2-(N-甲基甲基磺酰氨基)苯甲基)氨基甲酸叔丁酯的合成
Figure BDA0004006585300000882
室温下，依次向四口瓶中加入N-(2-氰基苯基)-N-甲基甲磺酰胺(2.50g，11.89mmol)、MeOH(20mL)、Boc2O(2.80g，12.80mmol)、Raney-Ni(4.20g，48.00mmol)，充入H2，30℃下反应15h后终止。冷却至室温，利用硅藻土过滤除去Raney-Ni，滤液浓缩得粗品白色固体2.40g，收率64％。MS(ESI)m/z:337.1[M+Na]+。
步骤3:N-(2-(氨基甲基)苯基)-N-甲基甲磺酰胺盐酸盐的合成
Figure BDA0004006585300000883
室温下，依次向四口瓶中加入(2-(N-甲基甲基磺酰氨基)苯甲基)氨基甲酸叔丁酯(2.40g，11.40mmol)和DCM(10mL)。冰浴下搅拌滴加盐酸乙醇溶液(3mL)。滴毕后，室温下反应5h终止。将反应移至冰浴下继续搅拌0.5h后，抽滤，得白色固体2.30g，收率80％。MS(ESI)m/z:215.1[M+H]+。
步骤4:N-(2-(((2,5-二氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)苯基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300000884
向单口瓶中加入N-(2-(氨基甲基)苯基)-N-甲基甲磺酰胺盐酸盐(2.30g，9.16mmol)和DMAC(50mL)后，于冰浴中滴加DIEA(2.40g，18.32mmol)与2,4,5三氯嘧啶(1.80g，10.08mmol)的DMAC溶液(1mL)。滴毕后，升温至60℃反应5h终止。冷却至室温，EA萃取，饱和食盐水洗涤两次，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得淡黄色固体2.80g，收率84％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.20(s,1H),7.54(d,J＝5.2Hz,1H),7.37(d,J＝4.9Hz,1H),7.35(s,2H),4.88(d,J＝5.2Hz,1H),4.49(d,J＝5.2Hz,1H),3.29(s,3H),3.10(s,3H)。MS(ESI)m/z:361.1[M+H]+。
步骤5:6-((5-氯-4-((2-(N-甲基甲基磺酰氨基)苯甲基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-羧酸叔丁酯的合成
Figure BDA0004006585300000891
室温下，依次向封管中加入N-(2-(((2,5-二氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)苯基)-N-甲基甲磺酰胺(1.00g，2.77mmol)，2-氨基-7,8-二氢-1,6-二氮杂萘-6(5H)-羧酸叔丁酯(0.70g，2.82mmol)，Pd2(dba)3(0.20g，0.22mmol)，Xantphos(0.25g，0.44mmol)和碳酸铯(2.26g，6.93mmol)并用1,4-二氧六环(15mL)溶解。氮气保护，升温至98℃反应16h终止。冷却至室温，反应液采用EA萃取，饱和食盐水洗涤两次，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得淡黄色固体0.55g，收率34％。MS(ESI)m/z:573.2[M+H]+。
步骤6:N-(2-(((5-氯-2-((1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)苯基)-N-甲基甲磺酰胺盐酸盐的合成
Figure BDA0004006585300000892
室温下，依次向单口瓶中加入6-((5-氯-4-((2-(N-甲基甲基磺酰氨基)苯甲基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-羧酸叔丁酯(0.55g，0.96mmol)和DCM(10mL)，并于冰浴下滴加盐酸乙醇溶液(1mL)，室温下反应3h终止。移至冰浴下搅拌45min，抽滤，得淡黄色固体产物0.39g，收率80％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.28(s,1H),7.59(d,J＝7.7Hz,1H),7.42(t,J＝7.0Hz,1H),7.40–7.32(m,3H),7.27(d,J＝7.7Hz,1H),7.03(d,J＝8.4Hz,1H),4.82(d,J＝6.0Hz,2H),4.14(t,J＝5.0Hz,2H),3.24(q,J＝4.8Hz,2H),3.15(s,3H),3.10(s,3H),2.76(t,J＝4.6Hz,2H)。MS(ESI)m/z:473.2[M+H]+。
实施例28:N-(3-(((5-氯-2-((1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡啶-2-基)-N-甲基甲磺酰胺盐酸盐的合成
Figure BDA0004006585300000901
步骤1:N-(3-氰基吡啶-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300000902
室温下，向封管中依次加入碳酸铯(8.10g，24.86mmol)，2-氯-3-氰基吡啶(2.00g，14.44mmol)和乙腈(60mL)。冰浴下缓慢滴加甲磺酰甲胺(2.36g，21.66mmol)，滴毕后，80℃下反应16h终止。冷却至室温，浓缩反应液后采用EA萃取，饱和食盐水洗涤两次，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得淡黄色固体1.70g，收率57％。MS(ESI)m/z:211.9[M+H]+。
步骤2:(2-(N-甲基甲磺胺基)吡啶-3-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯的合成
Figure BDA0004006585300000903
室温下，依次向四口瓶中加入N-(3-氰基吡啶-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(1.70g，5.39mmol)、MeOH(20mL)、Boc2O(2.80g，12.80mmol)、Raney-Ni(4.20g，48.00mmol)，充入H2，30℃下反应16h后终止。冷却至室温，利用硅藻土过滤除去Raney-Ni，滤液浓缩得粗品白色固体1.65g，收率65％。MS(ESI)m/z:316.2[M+H]+。
步骤3:N-(3-(氨基甲基)吡啶-2-基)-N-甲基甲磺酰胺盐酸盐的合成
Figure BDA0004006585300000904
室温下，依次向四口瓶中加入(2-(N-甲基甲磺胺基)吡啶-3-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯(1.65g，11.40mmol)和DCM(10mL)。冰浴下搅拌滴加盐酸乙醇溶液(3mL)。滴毕后，室温下反应3h终止。将反应移至冰浴下继续搅拌0.5h后，抽滤，得白色固体1.23g，收率95％。MS(ESI)m/z:216.1[M+H]+。
步骤4:N-(3-(((2,5-二氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡啶-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300000911
向单口瓶中加入N-(3-(氨基甲基)吡啶-2-基)-N-甲基甲磺酰胺盐酸盐(1.23g，4.89mmol)和DMAC(50mL)后，于冰浴中滴加DIEA(2.40g，18.32mmol)与2,4,5三氯嘧啶(0.90g，5.04mmol)的DMAC溶液(1mL)。滴毕后，升温至60℃反应4h终止。冷却至室温，EA萃取，饱和食盐水洗涤两次，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得淡黄色固体1.40g，收率75％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.44(d,J＝4.7Hz,1H),8.20(s,1H),7.79(d,J＝7.7Hz,1H),7.42(dd,J＝7.6,5.1Hz,1H),4.67(d,J＝5.9Hz,2H),3.26(s,3H),3.11(s,3H)。MS(ESI)m/z:362.0[M+H]+。
步骤5:6-((5-氯-4-(((2-(N-甲基甲基磺酰氨基)吡啶-3-基)甲基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-羧酸叔丁酯的合成
Figure BDA0004006585300000912
室温下，依次向封管中加入N-(3-(((2,5-二氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡啶-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.70g，1.93mmol)，2-氨基-7,8-二氢-1,6-二氮杂萘-6(5H)-羧酸叔丁酯(0.53g，2.13mmol)，Pd2(dba)3(0.17g，0.19mmol)，Xantphos(0.22g，0.38mmol)和碳酸铯(1.26g，3.86mmol)并用1,4-二氧六环(15mL)溶解。氮气保护，升温至95℃反应16h终止。冷却至室温，反应液采用EA萃取，饱和食盐水洗涤两次，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得淡黄色固体0.15g，收率14％。MS(ESI)m/z:574.3[M+H]+。
步骤6:N-(3-(((5-氯-2-((1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡啶-2-基)-N-甲基甲磺酰胺盐酸盐的合成
Figure BDA0004006585300000913
室温下，依次向单口瓶中加入6-((5-氯-4-(((2-(N-甲基甲基磺酰氨基)吡啶-3-基)甲基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-羧酸叔丁酯(0.15g，0.26mmol)和DCM(10mL)，并于冰浴下滴加盐酸乙醇溶液(1mL)，室温下反应2h终止。移至冰浴下搅拌45min，抽滤，得淡黄色固体产物0.08g，收率60％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.49(d,J＝4.6Hz,1H),8.29(s,1H),7.80(d,J＝7.7Hz,1H),7.44(t,J＝6.4Hz,1H),7.33(s,1H),7.27(d,J＝8.4Hz,1H),7.01(d,J＝8.4Hz,1H),4.81(d,J＝5.8Hz,2H),4.14(s,2H),3.25(t,J＝6.0Hz,2H),3.15(s,3H),3.13(s,3H),2.77(t,J＝6.2Hz,2H)。MS(ESI)m/z:474.1[M+H]+。
实施例29:5-氯-N4-(3-(甲磺酰)苯甲基)-N4-(1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)嘧啶-2,4-二胺盐酸盐的合成
步骤1:2,5-二氯-N-(3-(甲磺酰)苯甲基)嘧啶-4-胺的合成
Figure BDA0004006585300000921
室温下，依次向单口瓶中加入3-(甲基磺酰基)苯甲胺盐酸盐(2.50g，13.50mmol)和DIEA(3.50g，27.09mmol)并用DMAC(50mL)溶解。滴加2,4,5-三氯嘧啶(2.70g，14.72mmol)，氮气保护，升温至60℃反应3h终止。冷却至室温，反应液采用EA萃取，饱和食盐水洗涤两次，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得淡黄色油1.60g，收率89％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.22(s,1H),7.93(s,1H),7.84(d,J＝7.5Hz,1H),7.68(d,J＝7.6Hz,1H),7.63(t,J＝7.6Hz,1H),4.69(d,J＝6.1Hz,2H),3.21(s,3H)。MS(ESI)m/z:332.0[M+H]+。
步骤2:6-((5-氯-4-((3-(甲磺酰)苯甲基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-羧酸叔丁酯的合成
Figure BDA0004006585300000922
室温下，依次向封管中加入2,5-二氯-N-(3-(甲磺酰)苯甲基)嘧啶-4-胺(0.80g，2.41mmol)，2-氨基-7,8-二氢-1,6-二氮杂萘-6(5H)-羧酸叔丁酯(0.60g，2.41mmol)，Pd2(dba)3(0.22g，0.24mmol)，Xantphos(0.28g，0.48mmol)和碳酸铯(1.96g，6.03mmol)并用1,4-二氧六环(15mL)溶解。氮气保护，升温至95℃反应16h终止。冷却至室温，反应液采用EA萃取，饱和食盐水洗涤两次，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得淡黄色固体0.30g，收率23％。MS(ESI)m/z:544.2[M+H]+。
步骤3:5-氯-N4-(3-(甲磺酰)苯甲基)-N2-(1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)嘧啶-2,4-二胺盐酸盐的合成
Figure BDA0004006585300000931
室温下，依次向单口瓶中加入6-((5-氯-4-((3-(甲磺酰)苯甲基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-羧酸叔丁酯(0.30g，0.55mmol)和DCM(3mL)，并于冰浴下滴加盐酸乙醇溶液(1mL)，室温下反应1.5h终止。移至冰浴下搅拌45min，抽滤，打浆得淡黄色固体产物0.21g，收率79％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.22(s,1H),7.88(s,1H),7.83(d,J＝7.2Hz,1H),7.63(s,1H),7.62(t,J＝8.2Hz,1H),7.34(s,1H),7.32(d,J＝6.4Hz,1H),7.09(d,J＝8.4Hz,1H),4.74(d,J＝6.0Hz,2H),4.16(t,J＝3.6Hz,2H),3.28(q,J＝5.4Hz,2H),3.15(s,3H),2.80(t,J＝6.4Hz,2H)。MS(ESI)m/z:444.1[M+H]+。
实施例30:5-氯-N4-((6-(甲磺酰)吡啶-2-基)甲基)-N2-(1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)嘧啶-2,4-二胺盐酸盐的合成
Figure BDA0004006585300000932
步骤1:6-(甲硫基)氰基吡啶的合成
Figure BDA0004006585300000933
0℃下，将6-氯氰基吡啶(2.80g，20.21mmol)溶入到THF(20mL)中。氮气保护下缓慢滴加甲硫醇钠(2.83g，40.42mmol)的THF(10mL)溶液，滴毕后，65℃下反应16h终止。冷却至室温，浓缩反应液后采用EA萃取，饱和食盐水洗涤两次，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得淡黄色固体2.10g，收率70％。MS(ESI)m/z:151.1[M+H]+。
步骤2:6-(甲磺酰)氰基吡啶的合成
Figure BDA0004006585300000941
冰浴下将6-(甲硫基)氰基吡啶(1.00g，6.70mmol)溶入到DCM(35mL)。缓慢加入mCPBA(2.80g，16.70mmol)后升至室温反应16h终止。饱和NaOH(40mL)洗涤，DCM萃取，饱和食盐水洗涤两次，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得淡黄色固体0.93g，收率77％。MS(ESI)m/z:183.1[M+H]+。
步骤3:((6-甲基磺酰)吡啶-2-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯的合成
Figure BDA0004006585300000942
室温下，依次向四口瓶中加入6-(甲磺酰)氰基吡啶(0.50g，2.74mmol)、MeOH(20mL)、Boc2O(0.84g，3.84mmol)、Raney-Ni(0.50g，8.47mmol)，充入H2，室温下反应16h后终止。利用硅藻土过滤除去Raney-Ni，滤液浓缩得粗品白色固体0.30g，收率38％。MS(ESI)m/z:309.0[M+Na]+。
步骤4:(6-(甲磺酰)吡啶-2-基)甲胺盐酸盐的合成
Figure BDA0004006585300000943
室温下，依次向四口瓶中加入((6-甲基磺酰)吡啶-2-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯(0.30g，1.05mmol)和DCM(5mL)。冰浴下搅拌滴加盐酸乙醇溶液(2mL)。滴毕后，室温下反应3h终止。将反应移至冰浴下继续搅拌0.5h后，抽滤，得白色固体0.20g，收率86％。MS(ESI)m/z:187.1[M+H]+。
步骤5:2,5-二氯-N-((6-(甲磺酰)吡啶-2-基)甲基)嘧啶-4-胺的合成
Figure BDA0004006585300000944
向单口瓶中加入(6-(甲磺酰)吡啶-2-基)甲胺盐酸盐(0.20g，0.90mmol)和DMAC(5mL)后，于冰浴中滴加DIEA(0.35g，2.70mmol)与2,4,5-三氯嘧啶(0.21g，1.17mmol)的DMAC溶液(1mL)。滴毕后，升温至50℃反应4h终止。冷却至室温，EA萃取，饱和食盐水洗涤两次，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得淡黄色固体0.20g，收率67％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.28(s,1H),8.13(t,J＝7.8Hz,1H),7.94(d,J＝7.7Hz,1H),7.65(d,J＝7.9Hz,1H),4.79(d,J＝6.0Hz,2H),3.24(s,3H)。MS(ESI)m/z:333.0[M+H]+。
步骤6:6-((5-氯-4-(((6-(甲磺酰)吡啶-2-基)甲基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-羧酸叔丁酯的合成
Figure BDA0004006585300000951
室温下，依次向封管中加入2,5-二氯-N-((6-(甲磺酰)吡啶-2-基)甲基)嘧啶-4-胺(0.18g，0.54mmol)，2-氨基-7,8-二氢-1,6-二氮杂萘-6(5H)-羧酸叔丁酯(0.13g，0.54mmol)，Pd2(dba)3(0.03g，0.03mmol)，Xantphos(0.04g，0.06mmol)和碳酸铯(0.44g，1.35mmol)并用1,4-二氧六环(5mL)溶解。氮气保护，升温至105℃反应8h终止。冷却至室温，反应液采用EA萃取，饱和食盐水洗涤两次，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得淡黄色固体0.11g，收率37％。MS(ESI)m/z:545.1[M+H]+。
步骤7:5-氯-N4-((6-(甲磺酰)吡啶-2-基)甲基)-N2-(1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)嘧啶-2,4-二胺盐酸盐的合成
Figure BDA0004006585300000952
室温下，依次向单口瓶中加入6-((5-氯-4-(((6-(甲磺酰)吡啶-2-基)甲基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-羧酸叔丁酯(0.10g，0.18mmol)和DCM(10mL)，并于冰浴下滴加盐酸乙醇溶液(1mL)，室温下反应3h终止。移至冰浴下搅拌45min，抽滤，得淡黄色固体产物0.07g，收率84％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.31(s,1H),8.14(t,J＝7.8Hz,1H),7.96(d,J＝7.7Hz,1H),7.67(d,J＝7.9Hz,1H),7.30(s,1H),7.16(d,J＝8.4Hz,1H),7.02(d,J＝8.4Hz,1H),4.85(d,J＝5.9Hz,2H),4.13(t,J＝4.8Hz,2H),3.27(t,J＝3.2Hz,2H),3.24(s,3H),2.75(t,J＝4.6Hz,2H)。MS(ESI)m/z:445.1[M+H]+。
实施例31:N-叔丁基-3-(((5-氯-2-((1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)苯磺酰胺盐酸盐的合成
Figure BDA0004006585300000953
步骤1:N-叔丁基-3-氰基苯磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300000961
室温下，向单口瓶中依次加入叔丁胺(1.20g，16.30mmol)，三乙胺(3.00g，29.8mmol)，3-氰基苯磺酰氯(3.00g，14.90mmol)和DCM(5mL)。氮气保护常温反应3h终止。水洗，DCM萃取，饱和食盐水洗涤两次，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得白色固体3.10g，收率87％。MS(ESI)m/z:261.1[M+Na]+。
步骤2:(3-(叔丁基)磺胺甲酰)苄基)氨基甲酸叔丁酯的合成
Figure BDA0004006585300000962
室温下，依次向四口瓶中加入N-叔丁基-3-氰基苯磺酰胺(2.00g，8.40mmol)、MeOH(20mL)、Boc2O(2.20g，10.10mmol)、Raney-Ni(1.50g，25.40mmol)，充入H2，室温下反应16h后终止。冷却至室温，利用硅藻土过滤除去Raney-Ni，滤液浓缩得粗品白色固体2.80g，收率65％。
步骤3:3-(氨基甲基)-N-叔丁基苯磺酰胺盐酸盐的合成
Figure BDA0004006585300000963
室温下，依次向四口瓶中加入(3-(叔丁基)磺胺甲酰)苄基)氨基甲酸叔丁酯(2.80g，8.19mmol)和DCM(20mL)。冰浴下搅拌滴加盐酸乙酸乙酯溶液(1mL)。滴毕后，室温下反应3h终止。将反应移至冰浴下继续搅拌0.5h后，抽滤，得白色固体1.10g，收率74％。MS(ESI)m/z:243.1[M+H]+。
步骤4:N-叔丁基-3-(((2,5-二氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)苯磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300000964
向单口瓶中加入3-(氨基甲基)-N-叔丁基苯磺酰胺盐酸盐(1.10g，3.90mmol)和DMAC(10mL)后，于冰浴中滴加DIEA(1.00g，7.80mmol)与2,4,5-三氯嘧啶(0.80g，4.30mmol)的DMAC溶液(1mL)。滴毕后，升温至50℃反应4h终止。冷却至室温，EA萃取，饱和食盐水洗涤两次，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得淡黄色油1.10g，收率71％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.23(s,1H),7.73–7.69(m,2H),7.54–7.51(m,2H),4.65(d,J＝6.1Hz,2H),1.03(s,9H)。MS(ESI)m/z:389.0[M+H]+。
步骤5:6-((4-((3-(N-(叔丁基)氨磺酰)苯甲基)氨基)-5-氯嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-羧酸叔丁酯的合成
Figure BDA0004006585300000971
室温下，依次向封管中加入N-叔丁基-3-(((2,5-二氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)苯磺酰胺(1.10g，2.80mmol)，2-氨基-7,8-二氢-1,6-二氮杂萘-6(5H)-羧酸叔丁酯(0.44g，1.80mmol)，Pd2(dba)3(0.09g，0.10mmol)，Xantphos(0.12g，0.20mmol)和碳酸铯(1.50g，4.50mmol)并用1,4-二氧六环(30mL)溶解。氮气保护，升温至95℃反应16h终止。冷却至室温，反应液采用EA萃取，饱和食盐水洗涤两次，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得淡黄色固体0.69g，收率41％。MS(ESI)m/z:601.2[M+H]+。
步骤6:N-叔丁基-3-(((5-氯-2-((1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)苯磺酰胺盐酸盐的合成
Figure BDA0004006585300000972
室温下，依次向单口瓶中加入6-((4-((3-(N-(叔丁基)氨磺酰)苯甲基)氨基)-5-氯嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-羧酸叔丁酯(0.69g，1.15mmol)和DCM(5mL)，并于冰浴下滴加盐酸乙酸乙酯溶液(2mL)，室温下反应8h终止。移至冰浴下搅拌45min，抽滤，得淡黄色固体产物0.31g，收率50％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.25(s,1H),7.72(s,1H),7.70(s,1H),7.59–7.52(m,2H),7.23(d,J＝8.3Hz,1H),7.04(d,J＝8.4Hz,1H),4.74(d,J＝5.9Hz,2H),4.14(s,2H),3.27(t,J＝5.8Hz,2H),2.80(t,J＝6.0Hz,2H),0.99(s,9H)。MS(ESI)m/z:500.9[M+H]+。
实施例32:N-(3-(((5-氯-2-((1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)氨基)嘧啶-4-基)氧代)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺盐酸盐的合成
Figure BDA0004006585300000981
步骤1:N-(3-甲酰基吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺
Figure BDA0004006585300000982
室温下将将化合物N-(3-氰基吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(1.50g，7.07mmol)溶入到DCM(10mL)中。-75℃下缓慢滴加DIBAL-H(28mL，28.28mmol)，滴毕后，0℃下反应1h升至室温反应1h终止。1M盐酸淬灭，DCM萃取，浓缩得粗品黄色固体1.31g。
步骤2:N-(3-(羟甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300000983
-20℃下，依次向四口瓶中加入粗品N-(3-甲酰基吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(1.31g，6.09mmol)，THF(20mL)和NaBH4(0.80g，21.21mmol)，氮气保护下反应1h终止。冰水洗，EA萃取，饱和食盐水洗涤两次，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得淡黄色油640mg，Step 2与Step 3两步总收率31％。MS(ESI)m/z:217.9[M+H]+。
步骤3:N-(3-(((2,5-二氯嘧啶-4-基)氧代)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300000984
向单口瓶中加入N-(3-(羟甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.40g，1.84mmol)和DMF(5mL)后，于冰浴中缓慢加入NaH(0.09g，3.68mmol)与2,4,5-三氯嘧啶(0.51g，2.76mmol)的DMAC溶液(1mL)。滴毕后，室温反应16h终止。EA萃取，饱和食盐水洗涤两次，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得淡黄色固体0.15g，收率23％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.70(s,1H),8.69(d,J＝3.2Hz,1H),8.64(d,J＝2.4Hz,1H),5.78(s,2H),3.31(s,3H),3.14(s,3H)。MS(ESI)m/z:363.7[M+H]+。
步骤4:6-((5-氯-4-((3-(N-甲基甲基磺酰氨基)吡嗪-2-基)甲氧基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-羧酸叔丁酯的合成
Figure BDA0004006585300000991
室温下，依次向封管中加入N-(3-(((2,5-二氯嘧啶-4-基)氧代)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.10g，0.27mmol)，2-氨基-7,8-二氢-1,6-二氮杂萘-6(5H)-羧酸叔丁酯(0.08g，0.33mmol)，Pd2(dba)3(0.03g，0.03mmol)，Xantphos(0.04g，0.06mmol)和碳酸铯(0.22g，0.68mmol)并用1,4-二氧六环(3mL)溶解。氮气保护，升温至85℃反应6h终止。冷却至室温，反应液采用EA萃取，饱和食盐水洗涤两次，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得淡黄色固体0.09g，收率57％。MS(ESI)m/z:575.7[M+H]+。
步骤5:N-(3-(((5-氯-2-((1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)氨基)嘧啶-4-基)氧代)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺盐酸盐的合成
Figure BDA0004006585300000992
室温下，依次向单口瓶中加入6-((5-氯-4-((3-(N-甲基甲基磺酰氨基)甲基吡嗪-2-基)甲氧基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-羧酸叔丁酯(0.09g，0.16mmol)和DCM(5mL)，并于冰浴下滴加盐酸乙酸乙酯溶液(2mL)，室温下反应3h终止。移至冰浴下搅拌45min，抽滤，得淡黄色固体产物0.06g，收率79％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.74(d,J＝2.4Hz,1H),8.67(d,J＝2.4Hz,1H),8.37(s,1H),7.54(s,1H),7.45(d,J＝8.5Hz,1H),7.08(d,J＝8.4Hz,1H),5.78(s,2H),4.17(t,J＝4.6Hz,2H),3.32(q,J＝6.5Hz,2H),3.25(s,3H),3.17(s,3H),2.92(t,J＝6.4Hz,2H)。MS(ESI)m/z:475.7[M+H]+。
实施例33:N-(3-(((5-氯-2-((7-吗啡啉-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001001
步骤1-4的合成详见实施例21。
步骤5:2-硝基-5,6,8,9-四氢-7H-苯并[7]轮烯-7-酮的合成
Figure BDA0004006585300001002
5℃下，依次向单口瓶中加入7-苯并环庚酮(2.00g，12.48mmol)和H2SO4(15mL),滴加HNO3(1.18g，18.72mol)，滴毕升至室温反应2h终止。淬灭，调节pH值至中性，EA萃取，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得到粗品黄色固体3.06g。
步骤6:2-氨基-5,6,8,9-四氢-7H-苯并[7]轮烯-7-酮的合成
Figure BDA0004006585300001003
室温下，依次向单口瓶中加入2-硝基-5,6,8,9-四氢-7H-苯并[7]轮烯-7-酮(2.56g，12.48mmol)，MeOH(20mL)和Pd/C(1.30g)，氢气保护，室温反应15h终止。过滤，漂洗，浓缩母液得到粗品黄色固体1.20g，收率55％。MS(ESI)m/z:176.2[M+H]+。
步骤7:N-(3-(((5-氯-2-((7-氧基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001004
室温下，依次向单口瓶中加入N-(3-(((2,5-二氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(3.24g，8.90mmol)，2-氨基-5,6,8,9-四氢-7H-苯并[7]轮烯-7-酮(1.20g，6.85mmol)，Pd2(dba)3(0.63g，0.68mmol)，Xantphos(0.40g，0.68mmol)和Cs2CO3(6.69g，20.54mmol)和1,4-二氧六环(25mL)，氮气保护，升温至110℃反应36h终止。冷却，EA稀释，水洗，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得淡黄色固体0.58g，收率17％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.69(d,J＝2.5Hz,1H),8.58(d,J＝2.5Hz,1H),8.00(s,1H),7.51(d,J＝2.3Hz,1H),7.37–7.34(m,1H),7.01(d,J＝8.2Hz,1H),4.93(d,J＝5.3Hz,2H),3.23(s,3H),3.18(s,3H),2.78–2.71(m,4H),2.48–2.44(m,4H)。MS(ESI)m/z:502.2[M+H]+。
步骤8：N-(3-(((5-氯-2-((7-吗啡啉-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001011
室温下，依次向单口瓶中加入N-(3-(((5-氯-2-((7-氧基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.15g，0.30mmol)，吗啡啉(0.08g，0.90mmol)和THF(15mL)，缓慢加入NaBH(OAc)3(0.30g，1.34mmol)，升至室温反应18h终止。EA稀释，水洗，有机相经过无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(DCM/MeOH体系)得到淡黄色固体0.11g，收率63％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.69(d,J＝2.5Hz,1H),8.58(d,J＝2.5Hz,1H),7.98(s,1H),7.32(d,J＝4.0Hz,1H),7.25(dd,J＝8.1,2.3Hz,1H),6.87(d,J＝8.1Hz,1H),4.92(d,J＝5.3Hz,2H),3.53(t,J＝4.4Hz,4H),3.22(s,3H),3.19(s,3H),2.71–2.66(m,1H),2.59–2.53(m,4H),2.44(t,J＝4.5Hz,4H),1.96–1.89(m,2H),1.31–1.23(m,2H)。MS(ESI)m/z:573.2[M+H]+。
实施例34:N-(3-((5-氯-2-((7-(3-羟基氮杂环丁烷-1-基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001012
步骤1～步骤7参考实施例33；
步骤8:N-(3-((5-氯-2-((7-(3-羟基氮杂环丁烷-1-基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001021
室温下，依次向单口瓶中加入N-(3-((5-氯-2-((7-氧代-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.10g，0.20mmol)，氮杂环丁烷-3-醇(0.03g，0.40mmol)，钛酸四异丙酯(0.23g，0.80mmol)和DCM(10mL)。15℃反应0.5h后加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.08g，0.40mmol)，室温反应16h后终止。淬灭，浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得白色固体产物0.06g，收率54％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.69(d,J＝2.4Hz,1H),8.57(d,J＝2.4Hz,1H),7.98(s,1H),7.33(d,J＝1.3Hz,1H),7.27(dd,J＝8.2,2.2Hz,1H),6.87(d,J＝8.1Hz,1H),4.91(d,J＝5.3Hz,2H),4.30–4.23(m,1H),4.01–3.78(m,2H),3.35–3.30(m,2H),3.22(s,3H),3.19(s,3H),2.75–2.70(m,1H),2.67–2.61(m,1H),2.59–2.50(m,3H),1.96–1.89(m,2H),1.19–1.07(m,2H)。MS(ESI)m/z:559.3[M+H]+。
实施例35:N-(3-((5-氯-2-((7-(二甲氨基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]环-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001022
步骤1～步骤7参考实施例33；
步骤8：N-(3-((5-氯-2-((7-(二甲氨基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]环-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001031
室温下，向单口瓶中加入N-(3-((5-氯-2-((7-氧-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]环-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.15mg，0.30mmol)，AcOH(0.02g，0.30mmol)和二甲胺乙醇溶液(5mL)，15℃反应3h后加入NaBH4(OAc)3(0.32g，1.50mmol)，15℃反应16h终止。浓缩反应液，加水溶解，EA萃取，饱和食盐水洗涤两次，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析(DCM/MeOH)纯化得淡黄色固体0.04g，收率25％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.67(d,J＝2.5Hz,1H),8.56(d,J＝2.5Hz,1H),7.98(s,1H),7.41(d,J＝2.2Hz,1H),7.30(dd,J＝8.1,2.3Hz,1H),6.93(d,J＝8.2Hz,1H),4.92(d,J＝4.4Hz,2H),3.43(t,J＝11.8Hz,1H),3.22(s,3H),3.18(s,3H),2.76–2.68(m,4H),2.64(s,6H),2.24–2.16(m,2H),1.40–1.28(m,2H)，MS(ESI)m/z:531.1[M+H]+。
实施例36:N-(3-(((5-氯-2-((3-(2-吗啉代乙基)-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]吖庚英-7-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001032
步骤1～步骤5参考实施例23；
步骤6:N-(3-(((5-氯-2-((3-(2-吗啉代乙基)-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]吖庚英-7-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001041
室温下，依次向封管中加入N-(3-(((5-氯-2-((2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]吖庚英-7-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺盐酸盐(0.06g，0.12mmol)，4-(2-溴乙基)吗啉(0.03g，0.15mmol)和碳酸钾(0.04g，0.30mmol)并用乙腈(3mL)溶解。氮气保护，升温至50℃反应1.5h终止。冷至室温，浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得淡黄色固体0.04g，收率67％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.70(d,J＝2.4Hz,1H),8.58(d,J＝2.4Hz,1H),8.00(s,1H),7.36(m,1H),7.28(d,J＝8.1Hz,1H),6.90(d,J＝8.0Hz,1H),4.93(d,J＝5.3Hz,2H),3.57(m,6H),3.23(s,3H),3.19(s,3H),2.80(m,10H),2.43(m,4H)。MS(ESI)m/z:602.3[M+H]+。
实施例37:N-(3-(((5-氯-2-((1-甲基-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]吖庚英-7-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺盐酸盐的合成
Figure BDA0004006585300001042
步骤1:2-氯-N-(3-甲氧基苯乙基)丙酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001043
室温下，依次向三口瓶中加入2-(3-甲氧基苯基)乙烷-1-胺(10.00g，66.20mmol)和三乙胺(13.40g，132.40mmol)、乙腈(150mL)。氮气保护，0℃下缓慢滴加2-氯丙酰氯(9.60g，72.80mmol)，室温反应1h终止。浓缩反应液后采用EA萃取，饱和食盐水洗涤两次，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，得粗品淡黄色油16.00g，收率>100％。MS(ESI)m/z:242.2[M+H]+。
步骤2:7-羟基-1-甲基-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[d]氮杂卓-2-酮的合成
Figure BDA0004006585300001051
室温下，依次向三口瓶中加入2-氯-N-(3-甲氧基苯乙基)丙酰胺(7.50g，31.00mmol)和无水三氯化铝(8.30g，62.00mmol)，氮气保护160℃下反应36h后终止。冷却至室温，水洗，EA萃取，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得黄色固体4.20g，收率53％。MS(ESI)m/z:192.2[M+H]+。
步骤3:7-羟基-1-甲基-1,2,4,5-四氢-3H-苯并[d]氮杂-3-羧酸叔丁酯的合成
Figure BDA0004006585300001052
0℃下，依次向三口瓶中加入7-羟基-1-甲基-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[d]氮杂卓-2-酮(4.00g，21.00mmol)和THF(50mL)，氮气保护下缓慢滴加硼烷/二甲硫醚(21mL，42.00mmol)。滴毕，升至65℃反应3小时终止。稀盐酸淬灭，EA萃取，浓缩所得粗品溶于THF(20mL)中，并加入碳酸钠(8.60g，63.00mmol)和Boc2O(5.90g，27.00mmol)室温反应3h终止。浓缩反应液后采用EA萃取，饱和食盐水洗涤两次，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得淡黄色油2.10g，收率36％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ6.92(d,J＝8.9Hz,1H),6.58–6.46(m,2H),3.66(t,J＝6.7Hz,1H),3.58–3.49(m,1H),3.42(t,J＝6.4Hz,1H),3.30(d,J＝15.0Hz,1H),3.00–2.85(m,2H),2.66(t,J＝14.9Hz,1H),1.38(s,9H),1.16(d,J＝7.1Hz,3H)。
步骤4:1-甲基-7-((三氟甲基)磺酰)氧基)-1,2,4,5-四氢-3H-苯并[d]氮杂卓-3-羧酸叔丁酯的合成
Figure BDA0004006585300001053
0℃下，依次向三口瓶中加入7-羟基-1-甲基-1,2,4,5-四氢-3H-苯并[d]氮杂-3-羧酸叔丁酯(1.80g，6.50mmol)、吡啶(0.70g，9.10mmol)和DCM(50mL)，氮气保护缓慢滴加三氟甲基磺酸酐(2.20g，7.80mmol)，升至室温反应3h终止。浓缩反应液，水洗，EA萃取，饱和食盐水洗涤两次，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得淡黄色油2.00g，收率71％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.41–7.20(m,3H),3.68(q,J＝20.5Hz,1H),3.56–3.47(m,1H),3.46–3.34(m,2H),3.26–3.17(m,1H),3.08–2.98(m,1H),2.97–2.87(m,1H),1.35(s,9H),1.24–1.21(m,,3H)。MS(ESI)m/z:432.2[M+Na]+
步骤5:7-((二苯基亚甲基)氨基)-1-甲基-1,2,4,5-四氢-3H-苯并[d]氮杂-3-羧酸叔丁酯的合成
Figure BDA0004006585300001061
室温下，依次向封管中加入二苯甲酮亚胺(0.50g，2.93mmol)，1-甲基-7-((三氟甲基)磺酰)氧基)-1,2,4,5-四氢-3H-苯并[d]氮杂卓-3-羧酸叔丁酯(1.00g，2.44mmol)，Pd2(dba)3(0.22g，0.24mmol)，Xantphos(0.28g，0.48mmol)和碳酸铯(2.00g，6.10mmol)并用1,4-二氧六环(16mL)溶解。氮气保护，升温至95℃反应16h终止。冷却至室温，反应液采用EA萃取，饱和食盐水洗涤两次，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得淡黄色固体0.80g，收率74％。MS(ESI)m/z:441.4[M+H]+。
步骤6:7-氨基-1-甲基-1,2,4,5-四氢-3H-苯并[d]氮杂-3-羧酸叔丁酯的合成
Figure BDA0004006585300001062
室温下，依次向三口瓶中加入7-((二苯基亚甲基)氨基)-1-甲基-1,2,4,5-四氢-3H-苯并[d]氮杂-3-羧酸叔丁酯(0.80g，1.80mmol)，甲酸铵(1.70g，27.30mmol)和Pd/C(0.20g，0.18mmol)，溶于THF(5mL)和MeOH(15mL)的混合溶液中。氮气保护，升温至70℃反应6h终止。冷却至室温，过滤，反应液采用EA萃取，饱和食盐水洗涤两次，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得淡黄色油0.32g，收率64％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ6.78(d,J＝8.0Hz,1H),6.34–6.32(m,2H),3.72–3.69(m,1H),3.57–3.49(m,1H),3.27(dd,J＝13.8,2.7Hz,1H),3.18–3.04(m,1H),2.93–2.79(m,2H),2.67–2.56(m,1H),1.39(s,9H),1.13(d,J＝7.2Hz,3H)。
步骤7:7-((5-氯-4-((3-(N-甲基磺胺基)吡嗪-2-基)甲基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)-1-甲基-1,2,4,5-四氢-3H-苯并[d]氮杂卓-3-羧酸叔丁酯的合成
Figure BDA0004006585300001071
室温下，依次向单口瓶中加入N-(3-(((2-氯嘧啶-4-基)(甲基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.80g，2.19mmol)，7-氨基-1-甲基-1,2,4,5-四氢-3H-苯并[d]氮杂-3-羧酸叔丁酯(0.55g，1.99mmol)，Pd2(dba)3(0.18g，0.20mmol)，Xantphos(0.23g，0.40mmol)和碳酸铯(1.62g，4.98mmol)并用1,4-二氧六环(15mL)溶解。氮气保护，升温至100℃反应16h终止。冷却至室温，反应液采用EA萃取，饱和食盐水洗涤两次，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得淡黄色固体0.41g，收率36％。MS(ESI)m/z:603.4[M+H]+。
步骤8:N-(3-(((5-氯-2-((1-甲基-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]吖庚英-7-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺盐酸盐的合成
Figure BDA0004006585300001072
室温下，依次向单口瓶中加入7-((5-氯-4-((3-(N-甲基磺胺基)吡嗪-2-基)甲基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)-1-甲基-1,2,4,5-四氢-3H-苯并[d]氮杂卓-3-羧酸叔丁酯(0.40g，0.66mmol)和DCM(5mL)，0℃下滴加盐酸乙酸乙酯溶液(2mL)，室温反应2h终止。抽滤，得白色固体产物0.05g，收率95％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.71(d,J＝2.5Hz,1H),8.61(d,J＝2.5Hz,1H),8.11(s,1H),7.42–7.31(m,2H),7.04(d,J＝8.4Hz,1H),4.96(d,J＝5.4Hz,2H),3.32–3.26(m,3H),3.22(s,3H),3.19(s,3H),3.18–3.07(m,1H),2.91–2.81(m,2H),1.33(d,J＝7.2Hz,3H)。MS(ESI)m/z:503.3[M+H]+。
实施例38:N-(3-((5-氯-2-((3-(2-羟乙基)-1-甲基-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂-7-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001081
步骤1～步骤8参考实施例37；
步骤9:N-(3-((5-氯-2-((3-(2-羟乙基)-1-甲基-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂-7-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001082
室温下，依次向三口瓶中加入N-(3-(((5-氯-2-((3-(2-吗啉代乙基)-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]吖庚英-7-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.28g，0.52mmol)，溴乙醇(0.10g，0.79mmol)、碳酸钾(0.18g，1.30mmol)和乙腈(150mL)。氮气保护，55℃反应5h终止。浓缩反应液后采用EA萃取，饱和食盐水洗涤两次，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得淡黄色固体0.11g，收率39％。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.70(d,J＝2.5Hz,1H),8.58(d,J＝2.5Hz,1H),7.99(s,1H),7.34–7.21(m,2H),6.90(d,J＝8.1Hz,1H),4.93(d,J＝5.3Hz,2H),3.52(t,J＝4.3Hz,2H),3.22(s,3H),3.19(s,3H),3.03–2.93(m,1H),2.90–2.54(m,6H),2.49–2.29(m,2H),1.23(d,J＝6.8Hz,3H)。MS(ESI)m/z:546.7[M+H]+。
实施例39:N-(3-(((5-氯-2-((2-甲基-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]吖庚因-7-基)胺基)嘧啶-4-基)胺基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺盐酸盐的合成
Figure BDA0004006585300001083
步骤1:对甲苯磺酰丙氨酸甲酯
Figure BDA0004006585300001091
5℃下，依次向单口瓶中加入DL-丙氨酸甲酯盐酸盐(25.00g，179.11mmol)，TsCl(40.99g，215.01mmol)和DCM(500mL)，滴加TEA(54.37g，538.32mmol)，滴毕升至室温反应4h终止。水洗，DCM萃取，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得到白色固体43.08g，收率93％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.65(d,J＝8.3Hz,2H),7.38(d,J＝8.1Hz,2H),3.88–3.80(m,1H),3.44(s,3H),2.38(s,3H),1.14(d,J＝7.1Hz,3H)。MS(ESI)m/z:258.1[M+H]+。
步骤2:甲基N-(3-甲氧基苯乙基)-N-甲苯磺酰基氨基丙酸甲酯
Figure BDA0004006585300001092
5℃下，依次向单口瓶中加入对甲苯磺酰丙氨酸甲酯(43.08g，167.43mmol)，2-(3-甲氧基苯基)乙醇(50.93g，334.86mmol)，PPh3(131.75g，502.29mmol)，DIAD(101.57g，502.29mmol)和THF(20mL)，氮气保护，升至室温反应6h终止。EA稀释，水洗，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(PE/EA体系)得到黄色油状物158.31g。MS(ESI)m/z:392.3[M+H]+。
步骤3:N-(3-甲氧基苯乙基)-N-甲苯磺酰基丙氨酸
Figure BDA0004006585300001093
室温下，依次向单口瓶中加入甲基N-(3-甲氧基苯乙基)-N-甲苯磺酰基氨基丙酸甲酯(158.31g，404.39mmol)，LiOH H2O(50.90g，1.21mol)，EtOH(500mL)和H2O(100mL)，氮气保护，升温至80℃反应18h终止。冷却，浓缩，水稀释，EA反萃，水相调节pH至5-6，EA萃取，干燥，浓缩得黄色油状粗品51.08g，收率81％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.71(d,J＝8.0Hz,2H),7.37(d,J＝8.0Hz,2H),7.20(t,J＝7.8Hz,1H),6.80–6.72(m,3H),4.47(q,J＝7.2Hz,1H),3.73(s,3H),3.39–3.31(m,2H),2.90–2.77(m,2H),2.37(s,3H),1.26(d,J＝7.2Hz,3H)。MS(ESI)m/z:378.3[M+H]+。
步骤4:7-甲氧基-2-甲基-3-甲苯磺酰基-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]吖庚因-1-酮
Figure BDA0004006585300001101
室温下，依次向单口瓶中加入N-(3-甲氧基苯乙基)-N-甲苯磺酰基丙氨酸(51.08g，135.33mmol)和DCM(500mL)，氮气保护下，降温至-30℃，加入TFAA(142.12g，376.63mmol)和SnCl4(141.01g，541.30mmol)后反应18h终止。将反应液倒入冰水中，DCM萃取，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，分离制备得黄色固体10.63g，收率22％。MS(ESI)m/z:360.2[M+H]+。
步骤5:7-甲氧基-2-甲基-3-甲苯磺酰基-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]吖庚因
Figure BDA0004006585300001102
室温下，依次向单口瓶中加入7-甲氧基-2-甲基-3-甲苯磺酰基-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]吖庚因-1-酮(10.63g，29.57mmol)和TFA(110mL)，氮气保护下，加入Et3SiH(8.60g，73.93mmol)后室温反应3h终止。将反应液蒸干，EA溶解，水洗，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得黄色固体粗品14.00g。MS(ESI)m/z:346.2[M+H]+。
步骤6、7:7-甲氧基-2-甲基-1,2,4,5-四氢-3H-苯并[d]吖庚因-3-甲酸叔丁酯
Figure BDA0004006585300001103
室温下，依次向单口瓶中加入7-甲氧基-2-甲基-3-甲苯磺酰基-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]吖庚因(3.00g，8.68mmol)，MeOH(50mL)和镁条(2.08g，86.84mmol)，氮气保护下室温反应16h终止。将反应液浓缩得白色固体粗品6.00g。MS(ESI)m/z:192.3[M+H]+。
室温下，依次向单口瓶中加入上步白色固体粗品，Boc2O(1.77g，17.37mmol)，TEA(2.64g，26.05mmol)和t-BuOH(50mL)，氮气保护下85℃反应25h终止。将反应液浓缩，柱层析纯化(PE/EA体系)得无色油状物2.48g。收率98％。MS(ESI)m/z:236.3[M+H-56]+。
步骤8:2-甲基-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]吖庚因-7-酚
Figure BDA0004006585300001111
5℃下，依次向四口瓶中加入7-甲氧基-2-甲基-1,2,4,5-四氢-3H-苯并[d]吖庚因-3-甲酸叔丁酯(2.48g，8.51mmol)和DCM(30mL)，氮气保护下，加入BBr3(8.53g，34.04mmol)后室温反应2h终止。淬灭，浓缩得黄色油状粗品7.39g。MS(ESI)m/z:178.2[M+H]+。
步骤9:7-羟基-2-甲基-1,2,4,5-四氢-3H-苯并[d]吖庚因-3-甲酸叔丁酯
Figure BDA0004006585300001112
室温下，依次向单口瓶中加入7-羟基-2-甲基-1,2,4,5-四氢-3H-苯并[d]吖庚因-3-甲酸叔丁酯(7.39g，8.51mmol)，Boc2O(1.74g，17.02mmol)，TEA(2.58g，25.53mmol)和t-BuOH(50mL)，氮气保护下85℃反应25h终止。将反应液浓缩，EA稀释，水洗，有机相经过无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得黄色油状物1.47g。MS(ESI)m/z:222.3[M+H-56]+。
步骤10:2-甲基-7-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)-1,2,4,5-四氢-3H-苯并[d]吖庚因-3-甲酸叔丁酯
Figure BDA0004006585300001113
5℃条件下，依次向单口瓶中加入7-羟基-2-甲基-1,2,4,5-四氢-3H-苯并[d]吖庚因-3-甲酸叔丁酯(1.37g，4.94mmol)，TEA(1.25g，12.35mmol)和DCM(20mL)，滴加Tf2O(2.09g，7.41mmol)，滴加完毕后，氮气保护，升至室温反应3h终止。将反应液浓缩，柱层析纯化(PE/EA体系)，浓缩得黄色油状物2.24g。收率为63％。MS(ESI)m/z:354.2[M+H-56]+。
步骤11:7-((二苯亚甲基)胺基)-2-甲基-1,2,4,5-四氢-3H-苯并[d]吖庚因-3-甲酸叔丁酯
Figure BDA0004006585300001121
室温下，依次向单口瓶中加入2-甲基-7-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)-1,2,4,5-四氢-3H-苯并[d]吖庚因-3-甲酸叔丁酯(2.14g，5.23mmol)，二苯甲酮亚胺(1.09g，6.01mmol)，Pd2(dba)3(0.48g，0.52mmol)，Xantphos(0.60g，1.05mmol)和Cs2CO3(4.26g，13.07mmol)和1,4-二氧六环(25mL)，氮气保护，升温至110℃反应16h终止。冷却，EA稀释，水洗，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得淡黄色固体1.39g。收率为60％。
步骤12:7-氨基-2-甲基-1,2,4,5-四氢-3H-苯并[d]吖庚因-3-甲酸叔丁酯
Figure BDA0004006585300001122
室温下，依次向单口瓶中加入7-((二苯亚甲基)胺基)-2-甲基-1,2,4,5-四氢-3H-苯并[d]吖庚因-3-甲酸叔丁酯(1.29g，2.93mmol)，HCOONH4(1.84g，12.35mmol)，Pd/C(0.70g)，EA(10mL)和THF(20mL)，氢气保护，升至85℃反应16h终止。过滤，EA洗涤滤饼，浓缩，柱层析纯化(PE/EA体系)，浓缩得黄色油状物0.40g。收率为61％。MS(ESI)m/z:177.2[M+H-100]+。
步骤13:7-((5-氯-4-(((3-(N-甲基甲磺酰胺基)吡嗪-2-基)甲基)胺基)嘧啶-2-基)胺基)-2-甲基-1,2,4,5-四氢-3H-苯并[d]吖庚因-3-甲酸叔丁酯
Figure BDA0004006585300001123
室温下，依次向单口瓶中加入N-(3-(((2,5-二氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.79g，2.17mmol)，7-氨基-2-甲基-1,2,4,5-四氢-3H-苯并[d]吖庚因-3-甲酸叔丁酯(0.40g，1.45mmol)，Pd2(dba)3(0.13g，0.14mmol)，Xantphos(0.17g，0.29mmol)和Cs2CO3(1.18g，3.62mmol)和1,4-二氧六环(30mL)，氮气保护，升温至110℃反应6h终止。冷却，EA稀释，水洗，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得淡黄色固体0.30g，收率34％。MS(ESI)m/z:603.4[M+H]+。
步骤14:N-(3-(((5-氯-2-((2-甲基-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]吖庚因-7-基)胺基)嘧啶-4-基)胺基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺盐酸盐
Figure BDA0004006585300001131
室温下，依次向单口瓶中加入7-((5-氯-4-(((3-(N-甲基甲磺酰胺基)吡嗪-2-基)甲基)胺基)嘧啶-2-基)胺基)-2-甲基-1,2,4,5-四氢-3H-苯并[d]吖庚因-3-甲酸叔丁酯(0.30g，0.50mmol)，EA(10mL)和4N的HCl/EA溶液(3mL)，氮气保护，室温反应18h终止。反应液浓缩，打浆，过滤，浓缩得白色固体0.09g，收率37％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.70(d,J＝2.5Hz,1H),8.60(d,J＝2.5Hz,1H),8.12(s,1H),7.41(d,J＝2.3Hz,1H),7.26(m,1H),6.99(d,J＝8.3Hz,1H),4.95(d,J＝5.4Hz,2H),3.31–3.26(m,2H),3.21(s,3H),3.18(s,3H),3.08–2.99(m,3H),2.87–2.78(m,2H),1.22(d,J＝6.6Hz,3H)。MS(ESI)m/z:503.3[M+H]+。
实施例40:N-(3-(((5-氯-2-((3-(2-羟乙基)-2-甲基-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]吖庚因-7-基)胺基)嘧啶-4-基)胺基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001132
步骤1～步骤14参考实施例39；
步骤15:N-(3-(((5-氯-2-((3-(2-羟乙基)-2-甲基-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]吖庚因-7-基)胺基)嘧啶-4-基)胺基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺
Figure BDA0004006585300001133
室温下，依次向单口瓶中加入N-(3-(((5-氯-2-((2-甲基-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]吖庚因-7-基)胺基)嘧啶-4-基)胺基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺盐酸盐(0.42g，0.83mol)，2-溴乙醇(0.26g，2.09mol)，K2CO3(0.46g，3.34mol)和MeCN(10mL)，氮气保护，升至65℃反应36h终止。将反应液蒸干，柱层析纯化(DCM/MeOH体系)得到白色固体0.15g，收率34％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.69(d,J＝2.5Hz,1H),8.58(d,J＝2.5Hz,1H),7.99(s,1H),7.36(s,1H),7.28(d,J＝8.2Hz,1H),6.85(d,J＝8.1Hz,1H),4.92(d,J＝5.3Hz,2H),3.56(t,J＝29.7Hz,2H),3.23(s,3H),3.19(s,3H),3.17–3.10(m,1H),3.09–2.87(m,3H),2.87–2.72(m,2H),2.71–2.63(m,1H),2.62–2.51(m,2H),0.85–0.71(m,3H)。MS(ESI)m/z:547.3[M+H]+。
实施例41:N-(3-((5-氯-2-((4'-(羟甲基)-4'-甲基-5,6,8,9-四氢螺[苯并[7]轮烯-7,2'-恶唑烷]-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001141
步骤1～步骤7参考实施例33；
步骤4：N-(3-((5-氯-2-((4'-(羟甲基)-4'-甲基-5,6,8,9-四氢螺[苯并[7]轮烯-7,2'-恶唑烷]-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001142
室温下，向单口瓶中加入N-(3-((5-氯-2-((7-氧代-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)嘧啶-4-基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.20g，0.40mmol)，2-氨基-2-甲基丙烷-1,3-二醇(0.13g，1.19mmol)，TsOH(0.007g，0.04mmol)和甲苯(5mL)，110℃反应16h终止。冷却至室温后，浓缩反应液、制砂、柱层析(MeOH/DCM体系)纯化得淡黄色固体产物0.07g，收率51％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.69(d,J＝2.5Hz,1H),8.57(d,J＝2.5Hz,1H),7.95(s,1H),7.30(t,J＝2.8Hz,1H),7.25(dd,J＝8.0,2.2Hz,1H),6.86(d,J＝7.6Hz,1H),4.91(d,J＝5.4Hz,2H),3.74(d,J＝8.2Hz,1H),3.41(d,J＝8.1Hz,1H),3.31–3.25(m,2H),3.22(s,3H),3.18(s,3H),2.72–2.63(m,2H),2.46–2.32(m,2H),1.73–1.50(m,4H),1.12(s,3H)。MS(ESI)m/z:589.5[M+H]+。
实施例42:N-(3-(((5-氯-2-((3-(氧杂环丁烷-3-基)-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]吖庚因-7-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001151
步骤1～步骤9参考实施例23；
步骤10：N-(3-(((5-氯-2-((3-(氧杂环丁烷-3-基)-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]吖庚因-7-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺
Figure BDA0004006585300001152
5℃下，依次向单口瓶中加入N-(3-(((5-氯-2-((2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓-7-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺盐酸盐(0.15g，13.33mmol)，3-氧杂环丁酮(0.21g，2.85mmol)和THF(10mL)，缓慢加入NaBH(OAc)3(0.91g，4.28mmol)，升至室温反应1h终止。EA稀释，水洗，有机相经过无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(DCM/MeOH体系)，打浆，过滤得到产物白色固体0.08g，收率50％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.69(d,J＝2.5Hz,1H),8.57(d,J＝2.5Hz,1H),7.98(s,1H),7.33(d,J＝3.2Hz,1H),7.26(dd,J＝8.2,2.2Hz,1H),6.87(d,J＝8.2Hz,1H),4.91(d,J＝5.3Hz,2H),4.51(t,J＝6.4Hz,2H),4.43(t,J＝6.1Hz,2H),3.51–3.44(m,1H),3.22(s,3H),3.18(s,3H),2.79–2.68(m,4H),2.30–2.21(m,4H)。MS(ESI)m/z:545.2[M+H]+。
实施例43:N-(3-((5-氯-2-((3-(氧杂环丁烷-3-基甲基)-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂-7-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001161
步骤1～步骤9参考实施例23；
步骤10：氧杂环丁烷-3-基甲基磺酸酯的合成
Figure BDA0004006585300001162
室温下，依次向单口瓶中加入氧杂环丁烷-3-甲醇(1.00g，11.36mmol)，TEA(1.72g，17.03mmol)和DCM(10mL)，冰浴下缓慢滴加MsCl(1.95g，17.03mmol)，滴毕后，室温反应2h终止。用饱和碳酸氢钠洗两次，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，得淡黄色液体1.6g。
步骤11：N-(3-((5-氯-2-((3-(氧杂环丁烷-3-基甲基)-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂-7-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001163
室温下，向单口瓶中加入N-(3-((5-氯-2-((2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂-7-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺盐酸盐(200mg，0.38mmol)，氧杂环丁烷-3-基甲基磺酸盐(316mg，1.90mmol)，K2CO3(160mg，1.14mmol)，MeCN(5mL)，80℃反应16h终止。加水稀释，EA萃取，饱和食盐水洗涤两次，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析(DCM/MeOH)纯化得产物淡黄色固体0.04g，收率18％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.69(d,J＝2.5Hz,1H),8.57(d,J＝2.5Hz,1H),7.98(s,1H),7.33(s,2H),7.26(dd,J＝8.0,2.2Hz,1H),6.85(d,J＝8.1Hz,1H),4.92(d,J＝5.3Hz,2H),4.63(dd,J＝7.8,5.8Hz,2H),4.26(t,J＝6.1Hz,2H),3.22(s,3H),3.19(s,3H),2.82–2.60(m,6H),2.53–2.37(m,5H)。MS(ESI)m/z:559.2[M+H]+。
实施例44:N-(3-(((5-氯-2-((1,1-二甲基-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓-7-基)胺基)嘧啶-4-基)胺基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺盐酸盐的合成
Figure BDA0004006585300001171
步骤1:(3-甲氧基苯乙基)氨基甲酸叔丁酯的合成
Figure BDA0004006585300001172
室温下，依次向单口瓶中加入3-甲氧基苯乙胺(50.00g，330.67mmol)，三乙胺(100.38g，992.00mmol)和DCM(500mL)，0℃下缓慢滴加Boc2O(86.60g，396.80mmol)。氮气保护，室温反应18h终止。浓缩反应液，柱层析纯化(EA/PE体系)得无色油状物84.08g。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.22–7.15(m,1H),6.75–6.77(m,3H),3.73(s,3H),3.11–3.16(m,2H),2.66(t,J＝7.5Hz,2H),1.37(s,9H)。
步骤2:(2-溴-5-甲氧基苯乙基)氨基甲酸叔丁酯酯的合成
Figure BDA0004006585300001173
/>
室温下，依次向四口瓶中加入(3-甲氧基苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(84.08g，334.54mmol)和乙腈(900mL)，氮气保护降温0-5℃，缓慢加入NBS(65.50g，367.99mmol)，加入完毕后恢复室温反应2h后终止。浓缩反应液，EA稀释，水洗，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得黄色固体104.00g，收率94％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.45(d,J＝8.7Hz,1H),6.87(d,J＝3.1Hz,1H),6.76(dd,J＝8.8,3.1Hz,1H),3.74(s,3H),3.20–3.13(m,2H),2.78(t,J＝7.1Hz,2H),1.36(s,9H)。
步骤3:2-(2-溴-5-甲氧基苯基)乙基-1-胺盐酸盐的合成
Figure BDA0004006585300001174
室温下，依次向单口瓶中加入(2-溴-5-甲氧基苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(104.00g，314.94mmol)和DCM(200mL)，滴加HCl的EA溶液(400mL)，滴毕，氮气保护，室温条件反应1h后终止。浓缩反应液，得白色固体粗品130.00g，未做进一步纯化直接投入下一步。MS(ESI)m/z:230.2[M+H]+。
步骤4:N,N-二苄基-2-(2-溴-5-甲氧基苯基)乙基-1-胺的合成
Figure BDA0004006585300001181
室温下，依次向四口瓶中加入2-(2-溴-5-甲氧基苯基)乙基-1-胺盐酸盐(84.00g，315.13mmol)，K2CO3(152.43g，1100.00mmol)和乙腈(900mL)，0℃下缓慢加入BnBr(113.18g，661.76mmol)，加入完毕后，氮气保护，升温80℃反应18h后终止。浓缩反应液，EA稀释，水洗，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得黄色固体138.63g。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.40–7.36(m,1H),7.33–7.27(m,8H),7.24–7.19(m,2H),6.82(d,J＝3.1Hz,1H),6.73(dd,J＝8.7,3.1Hz,1H),3.69(s,3H),3.63(s,4H),2.90–2.84(m,2H),2.64–2.58(m,2H)。MS(ESI)m/z:410.3[M+H]+。
步骤5:2-(2-(2-(二苄基胺基)乙基)-4-甲氧基苯基)-2-甲基丙酸甲酯的合成
Figure BDA0004006585300001182
室温下，依次向封管中加入N,N-二苄基-2-(2-溴-5-甲氧基苯基)乙基-1-胺(10.00g，24.37mmol)，t-Bu3P(0.20g，0.97mmol)，Pd(dba)2(0.28g，0.49mmol)，ZnF2(1.26g，12.18mmol)和DMF(50mL)，氮气保护，加入((1-甲氧基-2-甲基丙-1-烯-1-基)氧基)三甲基硅烷(33.98g，194.95mmol)，升温80℃室温反应24h后终止。EA稀释，水洗，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得黄色固体粗品20.00g。MS(ESI)m/z:432.5[M+H]+。
步骤6:2-(2-(2-(二苄基胺基)乙基)-4-甲氧基苯基)-2-甲基丙酸的合成
Figure BDA0004006585300001183
室温下，依次向单口瓶中加入2-(2-(2-(二苄基胺基)乙基)-4-甲氧基苯基)-2-甲基丙酸甲酯(40.00g，92.68mmol)，NaOH(22.24g，556.10mmol)，EtOH(200mL)和H2O(50mL)，氮气保护，升温75℃反应36h后终止。浓缩反应液，水稀释，用稀盐酸调节pH＝5，EA萃取，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得黄色油状物6.85g，两步收率35％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.41–7.31(m,8H),7.27–7.22(m,2H),7.18(d,J＝8.8Hz,1H),6.67(dd,J＝8.7,2.9Hz,1H),6.44(d,J＝2.8Hz,1H),3.63(s,3H),3.62(s,4H),2.75–2.68(m,2H),2.64–2.60(m,2H),1.36(s,6H)。MS(ESI)m/z:418.5[M+H]+。
步骤7:2-(2-(2-氨基乙基)-4-甲氧基苯基)-2-甲基丙酸的合成
Figure BDA0004006585300001191
室温下，依次向单口瓶中加入2-(2-(2-(二苄基胺基)乙基)-4-甲氧基苯基)-2-甲基丙酸(16.88g，40.43mmol)，Pd(OH)2/C(3.36g)和THF(180mL)，氢气保护，室温反应18h后终止。过滤，浓缩滤液得白色固体粗品10.58g，未做进一步纯化直接投入下一步反应。MS(ESI)m/z:238.3[M+H]+。
步骤8:7-甲氧基-1,1-二甲基-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[d]氮杂卓-2-酮的合成
Figure BDA0004006585300001192
室温下，依次向单口瓶中加入2-(2-(2-氨基乙基)-4-甲氧基苯基)-2-甲基丙酸(10.58g，44.58mmol)，DIEA(17.29g，133.75mmol)和DCM(1000mL)，0℃条件分批加入TBTU(18.61g，57.96mmol)，氮气保护，室温反应18h后终止。水洗，DCM萃取，有机相经干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得无色油状物3.37g，两步收率34％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.36(d,J＝8.8Hz,1H),6.76(dd,J＝8.8,2.9Hz,1H),6.69(d,J＝2.9Hz,1H),3.72(s,3H),3.32–3.27(m,2H),3.06–3.01(m,2H),1.53(s,6H)。MS(ESI)m/z:220.3[M+H]+。
步骤9:7-甲氧基-1,1-二甲基-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓合成
Figure BDA0004006585300001201
0℃下，依次向四口瓶中加入7-甲氧基-1,1-二甲基-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[d]氮杂卓-2-酮(3.37g，15.37mmol)和THF(40mL)，氮气保护下缓慢滴加硼烷/二甲硫醚(16mL，30.74mmol)。氮气保护，升至65℃反应3h终止。稀盐酸淬灭，EA萃取，有机相经过干燥，过滤，浓缩得到无色油状粗品4.53g，未做进一步纯化直接投入下一步反应。MS(ESI)m/z:206.4[M+H]+。
步骤10:1,1-二甲基-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓-7-酚的合成
Figure BDA0004006585300001202
0℃下，依次向四口瓶中加入7-甲氧基-1,1-二甲基-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓(4.53g，22.08mmol)和DCM(20mL)，氮气保护下滴加BBr3(22.13g，88.33mmol)，滴毕，室温反应2h终止。淬灭，将反应液浓缩得到无色油状粗品22.07g，未做进一步纯化直接投入下一步反应。MS(ESI)m/z:192.3[M+H]+。
步骤11:7-羟基-1,1-二甲基-1,2,4,5-四氢-3H-苯并[d]氮杂卓-3-甲酸叔丁酯的合成
Figure BDA0004006585300001203
0℃下，依次向单口瓶中加入1,1-二甲基-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓-7-酚(4.22g，22.08mmol)，TEA(13.41g，132.48mmol)和DCM(100mL)，氮气保护滴加Boc2O(5.78g，26.50mmol)。升至室温反应15h终止。水洗，DCM萃取，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得白色固体0.70g，三步收率11％。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.11(d,J＝8.6Hz,1H),6.56(dd,J＝8.8,2.0Hz,1H),6.50–6.45(m,1H),3.49–3.39(m,4H),2.87(q,J＝7.6Hz,2H),1.40(s,9H),1.21(s,3H),1.19(s,3H)。
步骤12:1,1-二甲基-7-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)-1,2,4,5-四氢-3H-苯并[d]氮杂卓-3-甲酸叔丁酯的合成
Figure BDA0004006585300001211
0℃下，依次向单口瓶中加入7-羟基-1,1-二甲基-1,2,4,5-四氢-3H-苯并[d]氮杂卓-3-甲m酸叔丁酯(0.70g，2.40mmol)、TEA(0.61g，6.01mmol)和DCM(10mL)，缓慢滴加三氟甲基磺酸酐(1.02g，3.60mmol)，氮气保护，升至室温反应3h终止。水洗，DCM萃取，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得黄色油0.71g，收率70％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.54(d,J＝8.7Hz,1H),7.31–7.24(m,2H),3.55(d,J＝10.8Hz,2H),3.49–3.42(m,2H),3.10(q,J＝5.3Hz,2H),1.40(d,J＝8.0Hz,9H),1.28(s,3H),1.27(s,3H)。
步骤13:7-((二苯亚甲基)胺基)-1,1-二甲基-1,2,4,5-四氢-3H-苯并[d]氮杂卓-3-甲酸叔丁酯的合成
Figure BDA0004006585300001212
室温下，依次向单口瓶中加入二苯甲酮亚胺(0.37g，2.01mmol)，1,1-二甲基-7-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)-1,2,4,5-四氢-3H-苯并[d]氮杂卓-3-甲酸叔丁酯(0.71g，1.68mmol)，Pd2(dba)3(0.15g，0.17mmol)，Xantphos(0.19g，0.34mmol)和碳酸铯(1.37g，4.19mmol)和1,4-二氧六环(10mL)。氮气保护，升温至110℃反应18h终止。冷却至室温，EA稀释，水洗，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得淡黄色油0.19g，收率25％。
步骤14:7-氨基-1,1-二甲基-1,2,4,5-四氢-3H-苯并[d]氮杂卓-3-甲酸叔丁酯的合成
Figure BDA0004006585300001213
室温下，依次向单口瓶中加入7-((二苯亚甲基)胺基)-1,1-二甲基-1,2,4,5-四氢-3H-苯并[d]氮杂卓-3-甲酸叔丁酯(0.18g，0.40mmol)，甲酸铵(0.25g，3.96mmol)和Pd/C(0.18g)，THF(12mL)和EA(6mL)。氮气保护，升温至80℃反应4h终止。冷却至室温，过滤，EA漂洗，滤液浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得淡黄色油0.10g，收率84％。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ6.97(d,J＝8.4Hz,1H),6.37(dd,J＝8.1,2.3Hz,1H),6.30–6.25(m,1H),3.48–3.36(m,4H),2.82(q,J＝8.0Hz,2H),1.40(s,9H),1.18(s,3H),1.16(s,3H)。
步骤15:7-((5-氯-4-(((3-(N-甲基甲磺酰胺)吡嗪-2-基)甲基)胺基)嘧啶-2-基)胺基)-1,1-二甲基-1,2,4,5-四氢-3H-苯并[d]氮杂卓-3-甲酸叔丁酯的合成
Figure BDA0004006585300001221
室温下，依次向单口瓶中加入N-(3-(((2,5-二氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.15g，0.41mmol)，7-氨基-1,1-二甲基-1,2,4,5-四氢-3H-苯并[d]氮杂卓-3-甲酸叔丁酯(0.10g，0.34mmol)，Pd2(dba)3(0.03g，0.03mmol)，Xantphos(0.04g，0.06mmol)和碳酸铯(0.28g，0.90mmol)和1,4-二氧六环(3mL)。氮气保护，升温至110℃反应18h终止。冷却至室温，EA稀释，水洗，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得淡黄色固体0.04g，收率20％。MS(ESI)m/z:617.5
[M+H]+。
步骤16:N-(3-(((5-氯-2-((1,1-二甲基-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓-7-基)胺基)嘧啶-4-基)胺基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺盐酸盐的合成
Figure BDA0004006585300001222
室温下，依次向单口瓶中加入7-((5-氯-4-(((3-(N-甲基甲磺酰胺)吡嗪-2-基)甲基)胺基)嘧啶-2-基)胺基)-1,1-二甲基-1,2,4,5-四氢-3H-苯并[d]氮杂卓-3-甲酸叔丁酯(0.04g，0.06mmol)和DCM(2mL)，0℃下滴加盐酸乙醇溶液(5mL)，氮气保护，室温反应2h终止。反应液浓缩，加入EtOH/EA＝1/4的混合液打浆，得白色固体产物0.015g，收率43％。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.70(d,J＝2.5Hz,1H),8.62(d,J＝2.5Hz,1H),8.24(s,1H),7.29–7.25(m,2H),7.21(d,J＝8.6Hz,1H),4.98(d,J＝5.4Hz,2H),3.19(s,3H),3.18(s,3H),3.13–3.09(m,4H),3.05–3.00(m,2H),1.36(s,6H)。MS(ESI)m/z:517.3[M+H]+。
实施例45:N-(3-((5-氯-2-((2,3,4,5-四氢螺[苯并[d]氮杂卓-1,1'-环丙烷]-7-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺盐酸盐的合成
Figure BDA0004006585300001231
步骤1：2,2,2-三氟-N-(3-甲氧基苯乙基)乙酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001232
室温下，依次向单口瓶中加入3-甲氧基苯乙胺(20.00g，130.00mmol)，吡啶(14mL，170.00mmol)和DCM(200mL)，冰浴下缓慢滴加TFAA(24mL，170.00mmol)，滴毕后，25℃反应3h后终止。用稀盐酸洗涤，DCM萃取，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析(EA/PE)纯化得无色透明液体32.80g，收率100％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.21(t,J＝8.1Hz,1H),6.83–6.72(m,3H),3.73(s,3H),3.41(q,J＝7.2Hz,2H),2.78(t,J＝7.3Hz,2H)。MS(ESI)m/z:248.3[M+H]+。
步骤2：2,2,2-三氟-N-(2-碘-5-甲氧基苯乙基)乙酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001233
室温下，向三口瓶中加入2,2,2-三氟-N-(3-甲氧基苯乙基)乙酰胺(32.80g，130.00mmol)，CaCO3(29.20g，290.00mmol)和MeOH(350mL)，-78℃缓慢滴加ICl(60.29g，370.00mmol)的MeOH溶液，室温反应16h后终止，过滤，加EA溶解，饱和NaHSO3淬灭反应，有机相干燥，过滤、浓缩，得淡黄色固体53.20g，粗品未经进一步纯化直接用于下一步。
步骤3：N-烯丙基-2,2,2-三氟-N-(2-碘-5-甲氧基苯乙基)乙酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001234
室温下，依次向单口瓶中加入2,2,2-三氟-N-(2-碘-5-甲氧基苯乙基)乙酰胺(26.60g，130.00mmol)，3-溴丙烯(12.70g，200.00mmol)，四丁基溴化铵(2.14g，13.30mmol)，K2CO3(13.75g，200.00mmol)，KOH(11.66g，400.00mmol)和甲苯(1L)。80℃反应3h终止。0℃下加入1N稀盐酸调pH至5-6，EA萃取，有机相经无水Na2SO4干燥，过滤浓缩，得黄色油状物24.50g，粗品未经进一步纯化直接用于下一步。MS(ESI)m/z:414.2[M+H]+。
步骤4：2,2,2-三氟-1-(7-甲氧基-1-甲烯基-1,2,4,5-四氢-3H-苯并[d]氮杂卓-3-基)乙烷-1-酮的合成
Figure BDA0004006585300001241
室温下，向单口瓶中加入N-烯丙基-2,2,2-三氟-N-(2-碘-5-甲氧基苯乙基)乙酰胺(49.00g，120.00mmol)，PPh3(3.11g，11.86mmol)，AcOK(35.00g，0.36mmol)，四丁基溴化铵(38.00g，120.00mmol)和DMF(800mL)，氮气保护下加入Pd(OAc)2(1.33g，5.93mmol)，升温至90℃反应16h后终止，将反应冷却至室温，EA萃取，水洗，有机相合并，无水Na2SO4干燥，过滤，浓缩，柱层析(EA/PE)纯化得黄色油状物16.80g，三步收率50％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.30–7.24(m,1H),6.83–6.79(m,2H),5.31–5.16(m,2H),4.52(s,1H),4.43(s,1H),3.75–3.72(m,5H),3.00(t,J＝6.5Hz,2H)，MS(ESI)m/z:414.2[M+H]+。
步骤5：2,2,2-三氟-1-(7-甲氧基-4,5-二氢螺[苯并[d]氮杂卓-1,1'-环丙烷]-3(2H)-基)乙烷-1-酮的合成
Figure BDA0004006585300001242
0℃，N2保护下依次向三口瓶中加入DCM(20mL)、Et2Zn(80mL，77.12mmol)和CH2I2(23.00g，84.13mmol)的DCM稀释液(20mL)，0℃反应1h后加入,2,2-三氟-1-(7-甲氧基-1-甲烯基-1,2,4,5-四氢-3H-苯并[d]氮杂卓-3-基)乙烷-1-酮(4.00g，14.02mmol)的DCM稀释液(40mL)，0℃反应0.5h后缓慢滴加TFA(4.80g，42.06mmol)的DCM稀释液(20mL)，反应1h后终止。饱和NH4Cl淬灭，水洗，DCM萃取，无水Na2SO4干燥，过滤，浓缩，柱层析(EA/PE)纯化得白色固体1.27g，收率60％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.18–7.06(m,1H),6.77(t,J＝3.0Hz,1H),6.74–6.65(m,1H),3.81–3.63(m,5H),3.59–3.44(m,2H),3.11–2.96(m,2H),0.96–0.80(m,4H)，MS(ESI)m/z:300.2[M+H]+。
步骤6：7-甲氧基-2,3,4,5-四氢螺[苯并[d]氮杂卓-1,1'-环丙烷]的合成
Figure BDA0004006585300001251
室温下，向单口瓶中加入2,2,2-三氟-1-(7-甲氧基-4,5-二氢螺[苯并[d]氮杂卓-1,1'-环丙烷]-3(2H)-基)乙烷-1-酮(3.50g，11.69mmol)，NaOH(0.94g，23.39mmol)，H2O(15mL)和MeOH(30mL)，30℃反应2h终止，加入1N HCl调pH至7-8，浓缩溶剂，DCM/MeOH萃取，干燥，过滤，浓缩，粗品未做进一步纯化直接用于下一步。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.05(d,J＝8.3Hz,1H),6.69(d,J＝2.7Hz,1H),6.63(dd,J＝8.4,2.8Hz,1H),3.70(s,3H),2.96–2.90(m,2H),2.88–2.81(m,2H),2.64(s,2H),0.90–0.84(m,2H),0.79–0.71(m,2H)。MS(ESI)m/z:204.3[M+H]+。
步骤7：2,3,4,5-四氢螺[苯并[d]氮杂卓-1,1'-环丙烷]-7-醇的合成
Figure BDA0004006585300001252
室温下，向单口瓶中加入7-甲氧基-2,3,4,5-四氢螺[苯并[d]氮杂卓-1,1'-环丙烷](2.37g，11.69mmol)和DCM(40mL)，0℃加入BBr3(8.78g，35.07mmol)，反应2h终止，滴加MeOH淬灭，浓缩，粗品未做进一步纯化直接用于下一步。MS(ESI)m/z:190.3[M+H]+。
步骤8：7-羟基-4,5-二氢螺[苯并[d]氮杂卓-1,1'-环丙烷]-3(2H)-羧酸叔丁酯的合成
Figure BDA0004006585300001253
室温下，向单口瓶中加入2,3,4,5-四氢螺[苯并[d]氮杂卓-1,1'-环丙烷]-7-醇(3.38g，11.69mmol)，TEA(3.54g，35.07mmol)和DCM(50mL)，0℃下加入Boc2O(3.83g，17.54mmol)，30℃反应16h终止，水洗，DCM萃取，无水Na2SO4干燥，过滤，浓缩，柱层析(EA/PE)纯化得黄色固体1.60g，三步收率48％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ6.93(d,J＝8.2Hz,1H),6.54(d,J＝2.6Hz,1H),6.48(dd,J＝8.2,2.6Hz,1H),3.50–3.41(m,2H),3.28(s,2H),2.88–2.77(m,2H),1.42–1.34(m,9H),0.88–0.82(m,2H),0.79–0.69(m,2H)。
步骤9：7-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)-4,5-二氢螺环[苯并[d]氮杂卓-1,1'-环丙烷]-3(2H)-羧酸叔丁酯的合成
Figure BDA0004006585300001261
室温下，向三口瓶中加入7-羟基-4,5-二氢螺[苯并[d]氮杂卓-1,1'-环丙烷]-3(2H)-羧酸叔丁酯(1.60g，5.53mmol)，TEA(1.40g，13.82mmol)和DCM(30mL)，冷却至0℃，N2保护下缓慢滴加Tf2O(1.90g，6.63mmol)，30℃反应3h终止，水洗，DCM萃取，无水Na2SO4干燥，过滤，浓缩，柱层析(EA/PE)纯化得1.90g黄色油状物，收率81％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.36–7.29(m,2H),7.23(dd,J＝8.5,2.8Hz,1H),3.55–3.45(m,2H),3.35(s,2H),3.06–2.97(m,2H),1.41–1.31(m,9H),0.99–0.93(m,2H),0.93–
0.85(m,2H)。
步骤10：7-((二苯亚甲基)氨基)-4,5-二氢螺[苯并[d]氮杂卓-1,1'-环丙烷]-3(2H)-羧酸叔丁酯的合成
Figure BDA0004006585300001262
室温下，向单口瓶中加入7-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)-4,5-二氢螺环[苯并[d]氮杂卓-1,1'-环丙烷]-3(2H)-羧酸叔丁酯(1.90g，4.51mmol)，二苯酮亚胺(0.98g，5.41mmol)，Pd2(dba)3(0.41g，0.45mmol)，Xantphos(0.52g，0.90mmol)，Cs2CO3(4.40g，13.52mmol)和dioxane(40mL)，N2保护下100℃反应16h终止，将反应冷却至室温，水洗，EA萃取，无水Na2SO4干燥，过滤，浓缩，柱层析(EA/PE)纯化得0.84g黄色油状物，收率41％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.64–7.60(m,2H),7.53–7.49(m,1H),7.47–7.42(m,2H),7.34–7.30(m,3H),7.15–7.10(m,2H),6.90(d,J＝8.1Hz,1H),6.54(d,J＝2.2Hz,1H),6.39(dd,J＝8.0,2.2Hz,1H),3.44–3.34(m,2H),3.25(s,2H),2.84–2.72(m,2H),1.42–1.34(m,9H),0.88–0.81(m,2H),0.78–0.68(m,2H)。
步骤11：7-氨基-4,5-二氢螺[苯并[d]氮杂卓-1,1'-环丙烷]-3(2H)-羧酸叔丁酯的合成
Figure BDA0004006585300001271
室温下，向单口瓶中加入7-((二苯亚甲基)氨基)-4,5-二氢螺[苯并[d]氮杂卓-1,1'-环丙烷]-3(2H)-羧酸叔丁酯(0.80g，1.77mmol)，甲酸铵(1.11g，17.67mmol)，Pd/C(0.50g)，EA(10mL)和THF(20mL)，N2保护下升温至80℃反应3h终止，冷却至室温，过滤，滤饼用EA冲洗，滤液浓缩，柱层析(EA/PE)纯化得0.40g黄色固体，收率78％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ6.79(d,J＝8.1Hz,1H),6.34(d,J＝2.3Hz,1H),6.28(dd,J＝8.1,2.4Hz,1H),4.86(s,2H),3.47–3.41(m,2H),3.25(s,2H),2.82–2.69(m,2H),1.43–
1.36(m,9H),0.83–0.79(m,2H),0.76–0.62(m,2H)。
步骤12：7-((5-氯-4-((3-(N-甲基磺酰胺基)吡嗪-2-基)甲基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)-4,5-二氢螺[苯并[d]氮杂卓-1,1'-环丙烷]-3(2H)-羧酸叔丁基酯合成
Figure BDA0004006585300001272
室温下，向单口瓶中加入N-(3-(((2,5-二氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.55g，1.50mmol)，7-氨基-4,5-二氢螺[苯并[d]氮杂卓-1,1'-环丙烷]-3
(2H)-羧酸叔丁酯(0.22g，0.75mmol)，Pd2(dba)3(0.14g，0.15mmol)，Xantphos(0.18g，0.30mmol)，Cs2CO3(1.47g，4.51mmol)和dioxane(10mL)，N2保护下110℃反应16h终止，将反应冷却至室温，水洗，EA萃取，无水Na2SO4干燥，过滤，浓缩，柱层析(EA/PE)纯化得淡黄色固体0.18g，收率38％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.70(d,J＝2.5Hz,1H),8.58(d,J＝2.5Hz,1H),7.99(s,1H),7.40–7.28(m,2H),6.93(d,J＝8.3Hz,1H),4.92(d,J＝5.2Hz,2H),3.49–3.39(m,2H),3.30–3.26(m,2H),3.22(s,3H),3.18(s,3H),2.83–2.74(m,2H),1.41–1.35(m,9H),0.89–0.84(m,2H),0.81–0.72(m,2H)。MS(ESI)m/z:615.4[M+H]+。
步骤13：N-(3-((5-氯-2-((2,3,4,5-四氢螺[苯并[d]氮杂卓-1,1'-环丙烷]-7-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺盐酸盐的合成
Figure BDA0004006585300001281
室温下，向单口瓶中加入叔丁基7-((5-氯-4-((3-(N-甲基磺胺基)吡嗪-2-基)甲基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)-4,5-二氢螺[苯并[d]氮杂卓-1,1'-环丙烷]-3(2H)-羧酸盐(0.07g，0.11mmol)，HCl/EA(5mL)和MeOH(1mL)，30℃反应1h终止，浓缩，冻干，得淡黄色固体产物0.06g，收率88％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.70(d,J＝2.5Hz,1H),8.60(d,J＝2.5Hz,1H),8.11(s,1H),7.42–7.37(m,1H),7.32–7.27(s,1H),7.03(d,J＝8.4Hz,1H),4.95(d,J＝5.3Hz,2H),3.20(s,3H),3.18(s,3H),3.13–3.07(m,2H),3.07–2.97(m,4H),1.17–1.09(m,2H),0.93–0.88(m,2H)，MS(ESI)m/z:515.3[M+H]+。
实施例46:N-(3-((5-氯-2-((3-(2-羟乙基)-2,3,4,5-四氢螺[苯并[d]氮杂卓-1,1'-环丙烷]-7-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001282
步骤1～步骤13参考实施例45；
步骤14：N-(3-((5-氯-2-((3-(2-羟乙基)-2,3,4,5-四氢螺[苯并[d]氮杂卓-1,1'-环丙烷]-7-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001291
室温下，向单口瓶中加入N-(3-((5-氯-2-((2,3,4,5-四氢螺[苯并[d]氮杂卓-1,1'-环丙烷]-7-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺盐酸盐(0.20g，0.44mmol)，2-溴乙醇(0.22mg，1.76mmol)，K2CO3(0.24mg，1.76mmol)和MeCN(10mL)，65℃反应3h终止，将反应冷却至室温，加水稀释，EA萃取，有机相合并，无水Na2SO4干燥，过滤，浓缩，得白色固体产物0.06g，收率35％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.70(d,J＝2.5Hz,1H),8.59(d,J＝2.4Hz,1H),8.00(s,1H),7.52–7.42(m,1H),7.40–7.32(m,1H),7.04–6.96(m,1H),4.93(d,J＝5.3Hz,2H),3.85–3.68(m,2H),3.68–3.59(m,1H),3.54–3.34(m,3H),3.22(s,3H),3.19(s,3H),3.15–3.03(m,2H),3.01–2.92(m,1H),2.80–2.72(m,1H),1.52–1.30(m,2H),0.96–0.88(m,1H),0.58–0.46(m,1H)。MS(ESI)m/z:559.35[M+H]+。
实施例47:N-(3-(((5-氯-2-(((2,3,4,5-四氢-1H-1,5-亚甲基苯并[d]a嗪-7-基]氨基]嘧啶-4-基])氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001292
步骤1：7-硝基-2,3,4,5-四氢-1H-1,5-甲桥苯并[d]氮杂卓的合成
Figure BDA0004006585300001293
冰浴下，依次向100mL单口瓶中加入2,3,4,5-四氢-1,5-甲桥-1H-3-苯并氮杂卓盐酸盐(3.52g，18.00mmol)、三氟乙酸(24mL)，再依次缓慢滴加硫酸(4.5mL)、硝酸(2.61g，27.00mmol)，保持冰浴条件继续反应2h终止。将反应液倒入水中，并用2NNaOH水溶液调节pH至11，析出固体，过滤，收集滤饼，滤液采用DCM萃取1次，浓缩有机相与滤饼合并得粗品5.34g，未作进一步纯化直接用于下一步反应。
步骤2：7-硝基-1,2,4,5-四氢-3H-1,5-甲桥苯并[d]氮杂卓-3-羧酸叔丁酯的合成
Figure BDA0004006585300001301
室温下，依次向100mL单口瓶中加入7-硝基-2,3,4,5-四氢-1H-1,5-甲桥苯并[d]氮杂卓粗品(5.34g，18.00mmol)、DCM(80mL)、三乙胺(3.64g，36.00mmol)，随后缓慢加入Boc2O(3.92g，18.00mmol)，保持室温反应16h终止。反应液浓缩后柱层析纯化(EA/PE体系)得淡黄色固体4.30g，两步收率78％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.13(d,J＝8.1Hz,1H),8.08(t,J＝6.3Hz,1H),7.52(dd,J＝10.6 8.7Hz,1H),3.90–3.75(m,2H),3.32–3.19(m,3H),3.12–3.05(m,1H),2.30–2.22(m,1H),1.94(d,J＝10.9Hz,1H),1.14(d,J＝10.0Hz,9H)。
步骤3：7-氨基-1,2,4,5-四氢-3H-1,5-甲桥苯并[d]氮杂卓-3-羧酸叔丁酯的合成
Figure BDA0004006585300001302
室温下，依次向100mL单口瓶中加入7-硝基-1,2,4,5-四氢-3H-1,5-甲桥基苯并[d]氮杂卓-3-羧酸叔丁酯(4.30g，14.13mmol)、MeOH(40mL)、10％Pd/C(1.00g)，在氢气氛围下室温反应20h终止。反应液依次经过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得白色固体1.94g，收率50％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ6.84(t,J＝7.6Hz,1H),6.44(d,J＝4.3Hz,1H),6.35–6.30(m,1H),4.82(s,2H),3.71–3.54(m,2H),3.11(t,J＝11.0Hz,1H),3.01–2.89(m,3H),2.11–2.02(m,1H),1.73(d,J＝10.4Hz,1H),1.23(d,J＝3.7Hz,9H)。
步骤4：N-(3-(((5-氯-2-(((2,3,4,5-四氢-1H-1,5-亚甲基苯并[d]a嗪-7-基]氨基]嘧啶-4-基])氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001311
室温下，依次向20mL微波反应瓶中加入7-氨基-1,2,4,5-四氢-3H-1,5-甲桥苯并[d]氮杂卓-3-羧酸叔丁酯(0.16g,0.60mmol)、N-(3-(((2,5-二氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.13g,0.36mmol)、D-樟脑磺酸(0.21g,0.90mmol)、异丙醇(4.5mL)，微波条件下80℃反应2h终止。反应液浓缩后用EA萃取，依次经水洗、饱和氯化钠水溶液洗、干燥、过滤、浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得白色固体0.05g，收率28％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.70(d,J＝2.5Hz,1H),8.58(d,J＝2.4Hz,1H),8.00(s,1H),7.54(d,J＝1.8Hz,1H),7.35(dd,J＝8.0,1.8Hz,1H),7.00(d,J＝8.0Hz,1H),4.93(d,J＝5.3Hz,2H),3.23(s,3H),3.19(s,3H),2.94–2.86(m,4H),2.67–2.59(m,2H),2.25–2.17(m,1H),1.85(d,J＝10.4Hz,1H)。MS(ESI)m/z:501.3[M+H]+。
实施例48:N-(3-(((5-氯-2-((3-(2-羟乙基)-2,3,4,5-四氢-1H-1,5-甲桥苯并[d]氮杂卓-7-基]氨基)嘧啶-4-基)氨基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺盐酸盐的合成
Figure BDA0004006585300001312
步骤1～步骤4参考实施例47；
步骤5：N-(3-(((2-((3-(2-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-2,3,4,5-四氢-1H-1,5-甲桥苯并[d]氮杂卓-7-基)氨基)-5-氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001313
冰浴下，依次向10mL单口瓶中加入N-(3-(((5-氯-2-(((2,3,4,5-四氢-1H-1,5-甲桥苯并[d]氮杂卓-7-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.09g，0.17mmol)、(2-溴乙氧基)-特丁基二甲基硅烷(0.05g，0.20mmol)、K2CO3(0.07g，0.51mmol)、N,N-二甲基甲酰胺(3.50mL)，55℃反应9h终止。反应液倒入水中，EA萃取，依次经水洗、饱和氯化钠水溶液洗、干燥、过滤、浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得黄色固体0.08g，收率68％。MS(ESI)m/z:659.4[M+H]+。
步骤6：N-(3-(((5-氯-2-((3-(2-羟乙基)-2,3,4,5-四氢-1H-1,5-甲桥苯并[d]氮杂卓-7-基]氨基)嘧啶-4-基)氨基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺盐酸盐的合成
Figure BDA0004006585300001321
室温下，依次向10mL单口瓶中加入N-(3-(((2-((3-(2-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-2,3,4,5-四氢-1H-1,5-甲桥苯并[d]氮杂卓-7-基)氨基)-5-氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.08g，0.12mmol)、盐酸乙酸乙酯溶液(0.60mL，2.40mmol)，室温反应1h终止。过滤，滤饼用EA洗3次，得淡黄色固体产物0.06g，收率91％。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.71(d,J＝2.4Hz,1H),8.62(d,J＝2.2Hz,1H),8.16(s,1H),7.49(s,1H),7.34–7.20(m,2H),5.01(d,J＝5.4Hz,2H),3.66(t,J＝4.5Hz,2H),3.40–3.32(m,4H),3.31–3.26(m,2H),3.23(s,3H),3.18(s,3H),3.08(t,J＝4.5Hz,2H),2.20–2.11(m,1H),2.06(d,J＝10.9Hz,1H)。MS(ESI)m/z:545.2[M+H]+。
实施例49:N-(3-((5-氯-2-((3-(1-羟基-2-甲基丙烷-2-基)-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓-7-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺盐酸盐的合成
Figure BDA0004006585300001322
步骤1：7-硝基-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓的合成
Figure BDA0004006585300001331
室温下，依次向单口瓶中加入2,3,4,5-四氢-1H-苯并[D]氮杂卓盐酸盐(2.00g，10.89mmol)，和浓硫酸(20mL)，冰浴下缓慢加入硝酸钾(1.20g，11.98mmol)，0℃反应2h后终止。将反应液倒入冰水中，用饱和Na2CO3调pH至中性，EA萃取，有机相经无水Na2SO4干燥，过滤，浓缩，得黄色油状物0.84g，粗品未经进一步纯化直接用于下一步。MS(ESI)m/z:193.2[M+H]+。
步骤2：2-甲基-2-(7-硝基-1,2,4,5-四氢-3H-苯并[d]氮杂卓-3-基)丙酸甲酯的合成
Figure BDA0004006585300001332
室温下，向单口瓶中加入7-硝基-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓(0.84g，4.37mmol)，2-溴代异丁酸甲酯(1.58g，8.74mmol)，K2CO3(1.81g，13.11mmol)和MeCN(10mL)，80℃反应16h后终止。水洗，EA萃取，有机相经无水Na2SO4干燥，过滤，浓缩，柱层析(EA/PE体系)得黄色油状物0.64g，两步收率20％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.01(d,J＝2.5Hz,1H),7.97(dd,J＝8.2,2.5Hz,1H),7.39(d,J＝8.2Hz,1H),3.60(s,3H),2.98–2.94(m,4H),2.64–2.59(m,4H),1.26(s,6H)。MS(ESI)m/z:293.1[M+H]+。
步骤3：2-甲基-2-(7-硝基-1,2,4,5-四氢-3H-苯并[d]氮杂卓-3-基)-1-丙醇的合成2-methyl-2-(7-nitro-1,2,4,5-tetrahydro-3H-benzo[d]azepin-3-yl)propan-1-ol
Figure BDA0004006585300001333
室温下，依次向单口瓶中加入2-甲基-2-(7-硝基-1,2,4,5-四氢-3H-苯并[d]氮杂卓-3-基)丙酸甲酯(0.60g，130.00mmol)和THF(10mL)，-78℃下分批加入LiAlH4(0.31g，8.21mmol)，反应2h后终止。淬灭反应，过滤，滤液水洗后经无水Na2SO4干燥，过滤，浓缩，得红色固体0.28g，粗品未经进一步纯化直接用于下一步。MS(ESI)m/z:265.3[M+H]+。
步骤4：3-(1-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)-2-甲基丙烷-2-基)-7-硝基-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓的合成
Figure BDA0004006585300001341
室温下，向单口瓶中加入2-甲基-2-(7-硝基-1,2,4,5-四氢-3H-苯并[d]氮杂卓-3-基)-1-丙醇(0.28g，1.06mmol)，咪唑(0.12g，1.69mmol)和DCM(5mL)，冰浴下加入TBDPSCl(0.44g，1.59mmol)，室温反应2h后终止。水洗，DCM萃取，有机相合并，无水Na2SO4干燥，过滤，浓缩，柱层析(EA/PE)纯化得黄色固体0.31g，两步收率30％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.02–7.91(m,2H),7.63–7.56(m,5H),7.46–7.41(m,5H),7.37(d,J＝8.2Hz,1H),3.53–3.49(m,2H),2.94–2.85(m,4H),2.77–2.69(m,4H),1.06(d,J＝8.2Hz,6H),1.00(d,J＝4.2Hz,9H)。MS(ESI)m/z:503.5[M+H]+。
步骤5：3-(1-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)-2-甲基丙烷-2-基)-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓-7-胺的合成
Figure BDA0004006585300001342
室温下，向单口瓶中加入3-(1-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)-2-甲基丙烷-2-基)-7-硝基-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓(0.24g，0.51mmol)，10％Pd/C(0.12g)和EA(5mL)，H2氛围下室温反应16h后终止。过滤，浓缩，得黄色油状物0.19g，粗品未经进一步纯化直接用于下一步。MS(ESI)m/z:473.5[M+H]+。
步骤6：N-(3-((2-((3-(1-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)-2-甲基丙烷-2-基)-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓-7-基)氨基)-5-氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001351
室温下，向单口瓶中加入3-(1-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)-2-甲基丙烷-2-基)-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓-7-胺(0.15g，0.32mmol)，N-(3-(((2,5-二氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.17g，0.47mmol)，樟脑磺酸(0.15g，0.64mmol)和异丙醇(10mL)，80℃反应16h后终止，EA萃取，水洗，有机相用无水Na2SO4干燥，过滤，浓缩，柱层析(MeOH/DCM)体系纯化得黄色固体0.14g，两步收率46％。MS(ESI)m/z:799.5[M+H]+。
步骤7：N-(3-((5-氯-2-((3-(1-羟基-2-甲基丙烷-2-基)-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓-7-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺盐酸盐的合成
Figure BDA0004006585300001352
/>
室温下，向单口瓶中加入N-(3-((2-((3-(1-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)-2-甲基丙烷-2-基)-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓-7-基)氨基)-5-氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.12g，0.15mmol)，浓盐酸(4mL)和MeOH(1mL)，室温反应1h后终止，浓缩，柱层析(MeOH/DCM体系)纯化得淡黄色固体产物0.03g，收率39％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.70(d,J＝2.5Hz,1H),8.58(d,J＝2.5Hz,1H),8.00(s,1H),7.49(s,1H),7.36(t,J＝4.8Hz 1H),6.97(d,J＝8.3Hz,1H),4.93(d,J＝5.2Hz,2H),3.85–3.72(m,2H),3.62–3.54(m,2H),3.47–3.37(m,2H),3.24(s,3H),3.19(s,3H),2.92–2.78(m,3H),2.76–2.69(m,1H),1.30(s,6H)。MS(ESI)m/z:561.4[M+H]+。
实施例50:N-(3-(((5-氯-2-((3-(3-羟基-2-(羟甲基)-2-甲基丙基)-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓-7-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001361
步骤1：(2,2,5-三甲基-1,3-二恶烷-5-基)甲醇的合成
Figure BDA0004006585300001362
室温下，依次向单口瓶中加入1,1,1-三羟甲基乙烷(30.00g,249.69mmol)、丙酮(120mL)、对甲苯磺酸(0.11g,0.58mmol)，室温反应22h终止。加入三乙胺(0.25mL)淬灭反应，反应液浓缩后，加二氯甲烷溶解，过滤，滤液经浓缩、柱层析纯化(EA/PE体系)得无色油状物33.10g，收率83％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ3.56(d,J＝11.6Hz,2H),3.43(d,J＝11.7Hz,2H),3.35(d,J＝5.4Hz,2H),1.33(s,3H),1.27(s,3H),0.75(s,3H)。
步骤2：2,2,5-三甲基-1,3-二恶烷-5-甲醛的合成
Figure BDA0004006585300001363
室温下，依次向单口瓶中加入(2,2,5-三甲基-1,3-二恶烷-5-基)甲醇(3.50g,21.85mmol)、2,2,6,6-四甲基哌啶氧化物(0.04g,0.26mmol)、KBr(0.32g,2.18mmol)、DCM(20.00mL)、H2O(2.00mL)、NaHCO3(0.55g,6.55mmol)、NaOCl(10％水溶液，37.50mL)，室温反应1h终止。反应液用水和DCM稀释，分液得有机相，水相用DCM反萃一次，合并有机相，依次经饱和氯化钠水溶液洗，干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得黄色油状物1.69g，收率49％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ4.01(d,J＝12.0Hz,2H),3.74(d,J＝12.1Hz,2H),1.40(s,3H),1.21(s,3H),0.79(s,3H)。
步骤3：N-(3-(((5-氯-2-((3-((2,2,5-三甲基-1,3-二恶烷-5-基)甲基)甲基)-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓-7-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001371
室温下，依次向单口瓶中加入N-(3-(((5-氯-2-((2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓-7-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.13g,0.27mmol)、2,2,5-三甲基-1,3-二恶烷-5-甲醛(0.22g,1.36mmol)、三乙酰氧基硼氢化钠(0.40g,1.91mmol)、乙酸(0.08g,1.36mmol)、1,2-二氯乙烷(12.00mL)，60℃反应17h终止。反应液蒸干后粗品加二氯甲烷溶液，有机相依次经水洗，干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得黄色胶状物粗品0.15g，收率100％，直接用于下一步反应。MS(ESI)m/z:631.5[M+H]+。
步骤4：N-(3-(((5-氯-2-((3-(3-羟基-2-(羟甲基)-2-甲基丙基)-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓-7-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001372
室温下，依次向单口瓶中加入：N-(3-(((5-氯-2-((3-((2,2,5-三甲基-1,3-二恶烷-5-基)甲基)甲基)-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓-7-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.15g,0.25mmol)、乙醇(2mL)、盐酸乙醇溶液(1mL,4.00mmol)、H2O(0.02g,1.11mmol)，室温反应1h终止。蒸干反应液，加水溶解，EA洗3次，向水相中加入碳酸氢钠至pH达到9，搅拌1h，二氯甲烷萃取3次，合并有机相，依次经水洗，干燥，过滤，浓缩后即得黄色固体粉末0.04g，两步总收率25％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.69(d,J＝2.3Hz,1H),8.57(d,J＝2.1Hz,1H),7.98(s,1H),7.29(d,J＝2.2Hz,1H),7.27–7.22(m,1H),6.83(d,J＝8.2Hz,1H),4.91(d,J＝5.1Hz,2H),3.29(s,4H),3.22(s,3H),3.18(s,3H),2.73–2.58(m,8H),2.35(s,2H),0.76(s,3H)。MS(ESI)m/z:591.3[M+H]+。
实施例51:N-(3-((5-氯-2-((3-(2-羟乙基)-1,3,4,5-四氢螺[苯并[d]氮杂卓-2,1'-环丙烷]-7-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001381
步骤1：1-((4-甲基苯基)磺酰胺基)环丙烷-1-甲酸甲酯的合成
Figure BDA0004006585300001382
室温下，依次向单口瓶中加入1-氨基环丙烷-1-羧酸甲酯盐酸盐(10.00g，65.97mmol)，三乙胺(22.9mL，164.93mmol)和DCM(150mL)，0℃下滴加对甲苯磺酰氯(15.10g,79.16mmol)的DCM(50mL)溶液，室温反应5h终止。反应液采用DCM萃取，水洗，酸洗，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，打浆纯化得白色固体13.88g，收率78％。MS(ESI)m/z:270.3[M+H]+。
步骤2：1-((N-(3-甲氧基苯乙基)-4-甲基苯基)磺酰胺基)环丙烷-1-甲酸甲酯的合成
Figure BDA0004006585300001383
室温下，依次向单口瓶中加入1-((4-甲基苯基)磺酰胺基)环丙烷-1-甲酸甲酯(5.00g，18.57mmol)，2-(3-甲氧基苯基)乙烷-1-醇(2.81g，18.57mmol)，三苯基膦(14.61g，55.71mmol)，并用THF(50mL)溶解，氮气保护，0℃下，滴加偶氮二甲酸二异丙酯(10.97mL，55.71mmol)，滴毕，室温反应16h终止。反应液采用EA萃取，水洗，酸洗，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，得棕色油状物8.50g粗品，未做进一步纯化直接投入下一步反应。MS(ESI)m/z:404.4[M+H]+。
步骤3：1-((N-(3-甲氧基苯乙基)-4-甲基苯基)磺酰胺基)环丙烷-1-羧酸的合成
Figure BDA0004006585300001391
室温下，依次单口瓶中加入1-((N-(3-甲氧基苯乙基)-4-甲基苯基)磺酰胺基)环丙烷-1-甲酸甲酯(8.50g，18.57mmol)，一水合氢氧化锂(7.80g，185.70mmol)，并用THF(20mL)、甲醇(20mL)和水(10mL)溶解，室温反应24h终止。0℃，用1N HCl调节pH＝3～4，采用EA萃取，依次水和饱和食盐水洗涤，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得白色固体4.43g，两步收率61％。MS(ESI)m/z:390.4[M+H]+。
步骤4：7-甲氧基-3-对甲苯磺酰基-4,5-二氢螺[苯并[d]氮杂卓-2,1'-环丙烷]-1(3H)-酮的合成
Figure BDA0004006585300001392
室温下，依次单口瓶中加入1-((N-(3-甲氧基苯乙基)-4-甲基苯基)磺酰胺基)环丙烷-1-羧酸(4.43g，11.37mmol)，氯化亚砜(8.30mL，113.74mmol)，并用DCM(40mL)溶解，升温60℃反应2h终止。减压蒸除溶剂，得淡黄色油状物；用DCM(100mL)溶解，0℃，加入无水氯化铝(3.03g，22.74mmol)，室温反应16h终止。0℃，依次加入甲醇和水淬灭反应，反应液采用DCM萃取，水洗，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得白色固体1.47g，收率34％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.34–7.30(m,2H),7.22–7.16(m,3H),6.87–6.76(m,2H),4.05–3.92(m,1H),3.82(s,3H),3.64–3.62(m,1H),3.25–3.02(m,1H),2.96–2.85(m,1H),2.34(s,3H),2.13–1.96(m,1H),1.62–1.52(m,1H),1.48–1.38(m,1H),1.17–1.96(m,1H)。
步骤5：7-甲氧基-3-对甲苯磺酰基-1,3,4,5-四氢螺[苯并[d]氮杂卓-2,1'-环丙烷]-1-醇的合成
Figure BDA0004006585300001393
室温下，依次单口瓶中加入7-甲氧基-3-甲苯磺酰基-4,5-二氢螺[苯并[d]氮杂卓-2,1'-环丙烷]-1(3H)-酮(1.45g，3.90mmol)，并用甲醇(8mL)、THF(15mL)溶解，0℃，加入硼氢化钠(0.44g，11.71mmol)，室温反应2h终止。反应液采用EA萃取，水洗，饱和食盐水洗，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，得白色固体1.47g粗品，未做进一步纯化直接投入下一步反应。
步骤6：7-甲氧基-3-对甲苯磺酰基-1,3,4,5-四氢螺[苯并[d]氮杂卓-2,1'-环丙烷]的合成
Figure BDA0004006585300001401
/>
室温下，依次单口瓶中加入7-甲氧基-3-甲苯磺酰基-1,3,4,5-四氢螺[苯并[d]氮杂卓-2,1'-环丙烷]-1-醇(1.47g，3.90mmol)，并用DCM(30mL)溶解，-60℃下依次加入三乙基硅烷(1.90mL，11.70mmol)和三氟化硼乙醚溶液(2.00mL，7.80mmol)，-10℃下反应5h反应。反应液淬灭，DCM萃取，水洗，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得白色固体0.91g，两步收率65％。
步骤7：3-对甲苯磺酰基-1,3,4,5-四氢螺[苯并[d]氮杂卓-2,1'-环丙烷]-7-醇的合成
Figure BDA0004006585300001402
室温下，依次单口瓶中加入7-甲氧基-3-甲苯磺酰基-1,3,4,5-四氢螺[苯并[d]氮杂卓-2,1'-环丙烷](0.57g，1.59mmol)，并用DCM(8mL)溶解，0℃，加入三溴化硼(0.31mL，3.19mmol)，室温反应1h终止。淬灭，反应液浓缩除去DCM，EA萃取，饱和碳酸氢钠水溶液洗，饱和食盐水洗，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，得白色固体0.51g，收率93％。MS(ESI)m/z:344.3[M+H]+。
步骤8：3-对甲苯磺酰基-1,3,4,5-四氢螺[苯并[d]氮杂卓-2,1'-环丙烷]-7-基三氟甲磺酸酯的合成
Figure BDA0004006585300001403
室温下，依次单口瓶中加入3-甲苯磺酰基-1,3,4,5-四氢螺[苯并[d]氮杂卓-2,1'-环丙烷]-7-醇(0.50g，1.46mmol)，三乙胺(0.30mL,2.19mmol)，并用DCM(10mL)溶解，0℃下加入三氟甲磺酸酐(0.29mL，1.74mmol)，室温反应2h终止。反应液DCM萃取，水洗，酸洗，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，得白色固体0.61g，收率88％。
步骤9：1,1-二苯基-N-(3-对甲苯磺酰基-1,3,4,5-四氢螺[苯并[d]氮杂卓-2,1'-环丙烷]-7-基)甲胺的合成
Figure BDA0004006585300001411
室温下，依次单口瓶中加入3-甲苯磺酰基-1,3,4,5-四氢螺[苯并[d]氮杂卓-2,1'-环丙烷]-7-醇(0.61g，1.28mmol)，二苯基甲亚胺(0.30g，1.67mmol)，Pd2(dba)3(0.12g，0.13mmol)，Xantphos(0.15g，0.26mmol)和碳酸铯(1.00g，3.20mmol)并用1,4-二氧六环(10mL)溶解。氮气保护，升温至110℃反应16h终止。冷却至室温，反应液采用EA萃取，水洗，饱和食盐水洗，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，得淡黄色油状物粗品，未做进一步纯化直接投入下一步反应。MS(ESI)m/z:507.4[M+H]+。
步骤10：3-对甲苯磺酰基-1,3,4,5-四氢螺[苯并[d]氮杂卓-2,1'-环丙烷]-7-胺的合成
Figure BDA0004006585300001412
室温下，依次单口瓶中加入1,1-二苯基-N-(3-甲苯磺酰基-1,3,4,5-四氢螺[苯并[d]氮杂卓-2,1'-环丙烷]-7-基)甲胺(粗品)，并用四氢呋喃(10mL)溶解，1N HCl调节pH＝3～4，室温反应2h终止。反应液采用EA萃取，水洗，饱和碳酸氢钠洗和饱和食盐水洗涤，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得淡黄色固体0.15g，收率34％。MS(ESI)m/z:343.3[M+H]+。
步骤11：1,3,4,5-四氢螺[苯并[d]氮杂卓-2,1'-环丙烷]-7-胺的合成
Figure BDA0004006585300001421
室温下，依次单口瓶中加入3-甲苯磺酰基-1,3,4,5-四氢螺[苯并[d]氮杂卓-2,1'-环丙烷]-7-胺(0.20g，0.58mmol)，镁(0.28g，11.70mmol)，并用THF(6mL)和甲醇(20mL)溶解。氮气保护，升温至70℃反应40h终止。冷却室温，过滤，并充分洗涤滤饼，滤液浓缩，厚制备硅胶板纯化(EA/PE体系)得淡黄色固体0.10g粗品，未做进一步纯化直接投入下一步反应。MS(ESI)m/z:189.3[M+H]+。
步骤12：7-氨基-4,5-二氢螺[苯并[d]氮杂卓-2,1'-环丙烷]-3(1H)-羧酸叔丁酯的合成
Figure BDA0004006585300001422
室温下，依次单口瓶中加入1,3,4,5-四氢螺[苯并[d]氮杂卓-2,1'-环丙烷]-7-胺(0.10g，0.53mmol)，三乙胺(0.09mL，0.64mmol)并用DCM(5mL)溶解。0℃下加入Boc2O(0.13g，0.58mmol)，室温反应6h终止。反应液用DCM萃取，水洗，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得淡黄色固体0.04g，两步收率24％。
步骤13：7-((5-氯-4-((((3-(N-甲基甲基磺酰胺基)吡嗪-2-基)甲基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)-4,5-二氢螺[苯并[d]氮杂卓-2,1'-环丙烷]-3(1H)-羧酸叔丁酯的合成
Figure BDA0004006585300001423
室温下，依次向单口瓶中加入7-氨基-4,5-二氢螺[苯并[d]氮杂卓-2,1'-环丙烷]-3(1H)-羧酸叔丁酯(0.04g，0.14mmol)，N-(3-(((2,5-二氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.08g，0.21mmol)，Pd2(dba)3(0.02g，0.01mmol)，Xantphos(0.02g，0.03mmol)和碳酸铯(0.11g，0.35mmol)并用1,4-二氧六环(10mL)溶解。氮气保护，升温至110℃反应20h终止。冷却至室温，反应液采用EA萃取，水和饱和食盐水洗涤，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，制备得淡黄色固体0.06g，收率64％。MS(ESI)m/z:616.5[M+H]+。
步骤14：N-(3-(((5-氯-2-(((1,3,4,5-四氢螺[苯并[d]氮杂卓]-2,1'-环丙烷]-7-基]氨基)嘧啶丁-4-酰基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺盐酸盐的合成
Figure BDA0004006585300001431
室温下，依次向单口瓶中加入7-((5-氯-4-((((3-(N-甲基甲基磺酰胺基)吡嗪-2-基)甲基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)-4,5-二氢螺[苯并[d]氮杂卓-2,1'-环丙烷]-3(1H)-羧酸叔丁酯(0.06g，0.09mmol)和MeOH(2mL)，并于冰浴下滴加氯化氢乙酸乙酯溶液(1mL)，室温下反应3h终止。浓缩，EA(2mL)打浆，过滤，得淡黄色固体35mg，收率71％。MS(ESI)m/z:515.3[M+H]+。
步骤15：N-(3-(((5-氯-2-((3-(2-羟乙基)-1,3,4,5-四氢螺[苯并[d]氮杂卓]-2,1'-环丙烷]-7-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001432
室温下，依次向单口瓶中加入N-(3-(((5-氯-2-(((1,3,4,5-四氢螺[苯并[d]氮杂卓]-2,1'-环丙烷]-7-基]氨基)嘧啶丁-4-酰基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺盐酸盐(0.04g，0.06mmol)，碳酸铯(0.05g，0.16mmol)，2-溴乙醇(0.01g,0.08mmol)，DMF(3mL)。氮气保护下，升温85℃反应5h终止。冷却室温，反应液采用EA萃取，水洗和饱和食盐水洗，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，制备得淡黄色固体0.01g，收率，30％。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.69(d,J＝2.5Hz,1H),8.58(d,J＝2.5Hz,1H),7.99(s,1H),7.40–7.34(m,2H),6.79(d,J＝8.2Hz,1H),4.92(d,J＝5.3Hz,2H),3.85–3.35(m,4H),3.23(s,3H),3.18(s,3H),3.17–3.09(m,1H),2.77–2.54(m,2H),2.15–1.96(m,3H),1.94–1.70(m,2H),1.26–1.15(m,2H)。MS(ESI)m/z:559.4[M+H]+。
实施例52:N-(3-((5-氯-2-((3-(2-羟乙基)-2-氧代-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂-7-基)氨基)嘧啶-4-基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001441
步骤1:2-(2-(二苄基氨基)乙基)-4-甲氧基苯甲醛的合成
Figure BDA0004006585300001442
室温下，向三口瓶中加入N，N-二苄基-2-(2-溴-5-甲氧基苯基)乙烷(21.00g，51.20mmol)并用THF(250mL)溶解。氮气保护，降温至-78℃缓慢滴加正丁基锂(61.4mL，153.50mmol)反应0.5h后滴加DMF(7.50g，102.40mmol)反应1.0h，再升至室温反应2.0h终止。饱和氯化铵水溶液淬灭，EA萃取，浓缩，得淡黄色油状粗品19.00g，粗品收率大于100％。MS(ESI)m/z:360.4[M+H]+。
步骤2:(E)-N，N-二苄基-2-(5-甲氧基-2-(2-甲氧基乙烯基)苯基)乙烷-1-胺的合成
Figure BDA0004006585300001443
室温下，向三口瓶中加入(甲氧基甲基)三苯基氯化磷(21.66g，63.46mmol)并用THF(250mL)溶解。氮气保护，降温至0℃缓慢滴加正丁基锂(61.4mL，153.50mmol)反应0.5h后滴加2-(2-(二苄基氨基)乙基)-4-甲氧基苯甲醛(19.00g，51.82mmol)。滴毕，升至室温反应16h终止，饱和氯化铵水溶液淬灭，EA萃取，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得淡黄色油状粗品12.21g，收率60％。MS(ESI)m/z:388.5[M+H]+。
步骤3:2-(2-(2-(二苄基氨基)乙基)-4-甲氧基苯基)乙醛的合成
Figure BDA0004006585300001451
室温下，向单口瓶中加入(E)-N，N-二苄基-2-(5-甲氧基-2-(2-甲氧基乙烯基)苯基)乙烷-1-胺(12.00g，30.97mmol)并用丙酮(250mL)溶解。氮气保护，室温下缓慢滴加盐酸(10mL，60.00mmol)反应3h后终止。加水稀释，DCM萃取，浓缩，得淡黄色油状粗品12.89g，未做进一步纯化直接投入下一步。MS(ESI)m/z:374.4[M+H]+。
步骤4:2-(2-(2-(二苄基氨基)乙基)-4-甲氧基苯基)乙酸的合成
Figure BDA0004006585300001452
室温下，依次向单口瓶中加入2-(2-(2-(二苄基氨基)乙基)-4-甲氧基苯基)乙醛(12.00g，32.12mmol)，2-甲基-2-丁烯(22.47g，321.19mmol)，磷酸二氢钠(7.71g，64.24mmol)和亚氯酸钠(7.26g，80.30mmol)并用叔丁醇(100mL)和水(100mL)溶解。氮气保护，0℃反应1h后升至室温反应2h终止。亚硫酸钠淬灭反应，加水稀释，EA萃取，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得淡黄色固体6.38g，两步收率56％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.37–7.30(m,8H),7.26–7.22(m,2H),7.04(d,J＝8.4Hz,1H),6.68(dd,J＝8.4,2.8Hz,1H),6.59(d,J＝2.7Hz,1H),3.67(s,3H),3.64(s,4H),3.33(s,2H),2.78–
2.70(m,2H),2.57–2.51(m,2H)。MS(ESI)m/z:390.4[M+H]+。
步骤5:2-(2-(2-氨基乙基)-4-甲氧基苯基)乙酸的合成
Figure BDA0004006585300001453
室温下，依次向单口瓶中加入2-(2-(2-(二苄基氨基)乙基)-4-甲氧基苯基)乙酸(6.38g，16.38mmol)和氢氧化钯(3.00g)并用THF(100mL)溶解。氢气保护，室温反应16h终止。过滤，浓缩，得白色固体3.06g，收率90％。MS(ESI)m/z:210.3[M+H]+。
步骤6:7-甲氧基-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[d]氮杂卓-2-酮的合成
Figure BDA0004006585300001461
室温下，依次向单口瓶中加入2-(2-(2-氨基乙基)-4-甲氧基苯基)乙酸(3.06g，14.62mmol)，TBTU(6.11g，19.03mmol)和DIEA(3.77g，29.24mmol)并用DCM(500mL)溶解，氮气保护，室温反应16h终止。过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得白色固体1.40g，收率50％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.03(d,J＝4.2Hz,1H),6.70(dq,J＝4.9,2.9Hz,2H),3.71(s,3H),3.64(s,2H),3.43(q,J＝5.7Hz,2H),2.97(t,J＝6.0Hz,2H)。MS(ESI)m/z:192.2[M+H]+。
步骤7:7-羟基-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[d]氮杂卓-2-酮的合成
Figure BDA0004006585300001462
室温下，向单口瓶中加入7-甲氧基-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[d]氮杂卓-2-酮(1.40g，7.32mmol)并用DCM(50mL)溶解。氮气保护，0℃下缓慢滴加三溴化硼(3.66g，14.64mmol)升至室温反应2h终止。甲醇淬灭反应，浓缩得黄色固体粗品2.00g，未做进一步纯化直接投入下一步。MS(ESI)m/z:178.1[M+H]+。
步骤8:(2-氧代-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓-7-基)羧酸叔丁酯的合成
Figure BDA0004006585300001463
室温下，依次向单口瓶中加入7-羟基-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[d]氮杂卓-2-酮(2.00g，11.30mmol)、Boc2O(2.96g，13.56mmol)、DMAP(0.01g，0.11mmol)和三乙胺(4.57g，45.2mmol)并用DCM(30mL)溶解。氮气保护，室温反应3h终止。浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得白色固体1.23g，两步收率61％。MS(ESI)m/z:278.3[M+H]+。
步骤9:7-(苄氧基)-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[d]氮杂平-2-酮的合成
Figure BDA0004006585300001471
室温下，向单口瓶中加入(2-氧代-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓-7-基)羧酸叔丁酯(1.23g，4.33mmol)和TFA(3mL)并用DCM(30mL)溶解。氮气保护，室温反应2.0h终止。浓缩，加入碳酸钾(1.18g，8.67mmol)和溴化苄(0.76g，6.48mmol)并用乙腈溶解，氮气保护，升至85℃反应16h终止。浓缩，加水稀释，DCM萃取，有机相干燥、过滤、浓缩、柱层析纯化(EA/PE体系)得白色固体0.66g，收率57％。MS(ESI)m/z:268.3[M+H]+。
步骤10:7-(苄氧基)-3-(2-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)乙基)-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[d]氮杂卓-2-酮的合成
Figure BDA0004006585300001472
室温下，向单口瓶中加入7-(苄氧基)-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[d]氮杂卓-2-酮(0.66g，2.46mmol)和(2-溴乙氧基)(叔丁基)二苯基硅烷(1.34g，3.39mmol)并用DMSO(10mL)溶解。氮气保护，加入叔丁醇钾(360mg，3.21mmol)室温反应4h终止。加水稀释，EA萃取，有机相干燥浓缩柱层析纯化(EA/PE体系)得淡黄色油0.97g，收率72％。
步骤11:3-(2-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)乙基)-7-羟基-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[d]氮杂卓-2-酮的合成
Figure BDA0004006585300001473
室温下，向单口瓶中加入7-(苄氧基)-3-(2-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)乙基)-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[d]氮杂卓-2-酮(0.97g，1.77mmol)和Pd/C(0.50g，10％)并用EA(10mL)溶解，氢气氛围下室温反应36h终止。过滤，浓缩得白色固体0.80g，收率98％。MS(ESI)m/z:460.4[M+H]+。
步骤12:3-(2-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)乙基)-2-氧代-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓-7-基-三氟甲基磺酸酯的合成
Figure BDA0004006585300001481
室温下，向三口瓶中加入3-(2-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)乙基)-7-羟基-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[d]氮杂卓-2-酮(0.80g，1.74mmol)和三乙胺(0.35g，3.48mmol)并用DCM(10mL)溶解。0℃氮气保护，缓慢滴加三氟甲磺酸酐(0.74g，2.61mmol)。滴毕，升至室温反应2.0h终止。加水稀释，DCM萃取，有机相干燥浓缩柱层析纯化(EA/PE体系)得淡黄色油0.50g，收率48％。
步骤13:3-(2-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)乙基)-7-((二苯基亚甲基)氨基)-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[d]氮杂卓-2-酮的合成
Figure BDA0004006585300001482
室温下，向单口瓶中加入3-(2-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)乙基)-2-氧代-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓-7-基三氟甲基磺酸(0.50g，0.85mmol)，二苯酮亚胺(0.18g，1.01mmol)，Pd2(dba)3(0.04g，0.04mmol)，Xantphos(0.05g，0.08mmol)和碳酸铯(0.55g，1.70mmol)并用1，4-二氧六环(4mL)溶解。氮气保护，升至100℃反应8h终止。加水稀释，EA萃取，有机相干燥浓缩柱层析纯化(EA/PE体系)得淡黄色油0.28g，收率53％。
步骤14:7-氨基-3-(2-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)乙基)-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[d]氮杂卓-2-酮的合成
Figure BDA0004006585300001491
室温下，向单口瓶中加入3-(2-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)乙基)-7-((二苯基亚甲基)氨基)-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[d]氮杂卓-2-酮(0.28g，0.45mmol)和盐酸(1.35mL，1.35mmol)并用THF(4mL)溶解。氮气保护，室温反应2h终止。调节PH至弱碱，EA萃取，有机相干燥浓缩柱层析纯化(EA/PE体系)得淡黄色油0.14g，收率68％。
步骤15:N-(3-((2-((3-(2-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)乙基)-2-氧代-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓-7-基)氨基)-5-氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001492
室温下，依次向单口瓶中加入7-氨基-3-(2-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)乙基)-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[d]氮杂卓-2-酮(0.14g，0.31mmol)、N-(3-((((2,5-二氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.15g，0.40mmol)、Pd2(dba)3(0.02g,0.02mmol)、Xantphos(0.03g，0.05mmol)和碳酸铯(0.22g，0.68mmol)并用1，4二氧六环(4mL)溶解。氮气保护，升至100℃反应8h终止。加水稀释，EA萃取，有机相干燥浓缩柱层析纯化(EA/PE体系)得淡黄色油0.18g，收率74％。MS(ESI)m/z:785.5
[M+H]+。
步骤16:N-(3-((5-氯-2-((3-(2-羟乙基)-2-氧代-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓-7-基)氨基)嘧啶-4-基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001501
室温下，向单口瓶中加入N-(3-((2-((3-(2-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)乙基)-2-氧代-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓-7-基)氨基)-5-氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.18g，0.23mmol)和盐酸-甲醇溶液(1.17mL，0.69mmol)并用MeOH(4mL)溶解。氮气保护，室温反应2h终止。浓缩，有机相干燥浓缩柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得淡黄色固体0.04g，收率33％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.69(s,1H),8.61(s,1H),8.17(s,1H),7.28(s,1H),7.11(d,J＝8.0Hz,1H),6.92(d,J＝8.3Hz,1H),4.95(d,J＝5.4Hz,2H),3.75–3.73(m,4H),3.47–3.45(m,2H),3.39–3.36(m,2H),3.17(s,3H),3.16(s,3H),2.94(t,J＝5.5Hz,2H)。MS(ESI)m/z:547.3[M+H]+。
实施例53:N-(3-((5-氯-2-((3-(2-羟乙基)-1-甲基-2-氧-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂-7-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001502
步骤1：2-氯-N-(3-甲氧基苯乙基)丙酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001503
/>
室温下，依次向单口瓶中加入3-甲氧基苯乙胺(50.00g，330.68mmol)，TEA(83.00g，821.78mmol)和MeCN(500mL)，冰浴下缓慢滴加2-氯丙酰氯(50.00g，393.82mmol)，滴毕后，室温下反应1h后终止。用饱和碳酸氢钠水溶液洗一次，EA萃取，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析(EA/PE体系)纯化得黄色油状物76.00g，收率95％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.23–7.17(m,1H),6.78–6.76(m,3H),4.45(q,J＝6.7Hz,1H),3.73(s,3H),3.32–3.24(m,2H),2.70(t,J＝7.3Hz,2H),1.49(d,J＝6.7Hz,3H)。MS(ESI)m/z:242.2[M+H]+。
步骤2：7-羟基-1-甲基-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[d]氮杂卓-2-酮的合成
Figure BDA0004006585300001511
室温下，向三口瓶中加入2-氯-N-(3-甲氧基苯乙基)丙酰胺(76.00，314.41mmol)和AlCl3(126.00g，944.95mmol)，N2保护下180℃反应50h终止，甲醇溶解制砂，柱层析(MeOH/DCM体系)纯化得65.00g黄色固体，收率87％，1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ6.92(dd,J＝8.1,3.6Hz,1H),6.59–6.53(m,2H),4.17(q,J＝7.7Hz,1H),3.14–3.07(m,2H),2.90–2.76(m,2H),1.28(dd,J＝6.9,1.9Hz,3H)。MS(ESI)m/z:192.2[M+H]+。
步骤3：7-(苄氧基)-1-甲基-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[d]氮杂卓-2-酮的合成
Figure BDA0004006585300001512
室温下，向单口瓶中加入7-羟基-1-甲基-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[d]氮杂卓-2-酮(15.00g，78.44mmol)，BnBr(16.00g，91.13mmol)，NaOH(4.00g，91.13mmol)和EtOH(200mL)，80℃反应16h终止。将反应冷却至室温，浓缩溶剂，DCM制砂，柱层析(MeOH/DCM体系)纯化得6.0g黄色油状物，收率34％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.45–7.31(m,5H),7.05(d,J＝8.5Hz,1H),6.83–6.80(m,1H),6.76(d,J＝2.7Hz,1H),5.07(d,J＝5.7Hz,2H),4.25–4.14(m,1H),3.21–3.09(m,2H),2.98–2.68(m,2H),1.31(d,J＝6.9Hz,3H)。MS(ESI)m/z:282.3[M+H]+。
步骤4：(2-溴乙氧基)(叔丁基)二苯基硅烷的合成
Figure BDA0004006585300001513
室温下，向单口瓶中加入2-溴乙醇(10.00g，80.68mmol)，咪唑(8.80g，129.08mmol)，TBDPSCl(33.20g，121.02mmol)和DCM(200mL)，室温反应2h终止。水洗，EA萃取，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析(EA/PE体系)纯化得25.00g无色透明液体，收率87％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.62–7.60(m,4H),7.44–7.40(m,6H),3.89(t,J＝5.6Hz,2H),3.55(t,J＝5.5Hz,2H),0.98(s,9H)。
步骤5：7-(苄氧基)-3-(2-((叔丁基二苯基硅)氧基)乙基)-1-甲基-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[d]氮杂卓-2-酮的合成
Figure BDA0004006585300001521
室温下，向单口瓶中加入7-(苄氧基)-1-甲基-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[d]氮杂卓-2-酮(4.0g，14.21mmol)，DMF(10mL)，冰浴下加入NaH(1.14g，28.43mmol)，室温反应1h后加入(2-溴乙氧基)(叔丁基)二苯基硅烷(7.75g，21.32mmol)，N2保护下80℃反应3h终止，水洗，EA萃取，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析(EA/PE体系)纯化得4.30g黄色油状物，收率54％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.60–7.54(m,4H),7.47–7.35(m,11H),7.01(dd,J＝40.2,8.5Hz,1H),6.84–6.66(m,2H),5.12–5.02(m,2H),4.45–4.33(m,1H),4.24–4.13(m,1H),3.69–3.64(m,2H),3.56–3.49(m,1H),3.46–3.39(m,2H),3.13–2.97(m,2H),1.31(d,J＝6.7Hz,3H),0.96(s,9H)。
步骤6：3-(2-((叔丁基二苯基硅)氧基)乙基)-7-羟基-1-甲基-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[d]氮杂卓-2-酮的合成
Figure BDA0004006585300001522
室温下，向单口瓶中加入7-(苄氧基)-3-(2-((叔丁基二苯基硅)氧基)乙基)-1-甲基-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[d]氮杂卓-2-酮(4.3g，7.63mmol)，Pd/C(0.5g)和EA(50mL)，H2保护下50℃反应30h终止，过滤，浓缩得3.20g黄色油状物，粗品直接用于下一步，1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.61–7.54(m,4H),7.46–7.39(m,6H),6.98–6.80(m,1H),6.74–6.41(m,2H),4.50–4.26(m,1H),4.25–4.12(m,1H),3.72–3.63(m,2H),3.60–3.52(m,1H),3.48–3.36(m,2H),3.11–2.96(m,2H),1.30(dd,J＝6.8,2.1Hz,3H),0.98(d,J＝2.3Hz,9H)。
步骤7：3-(2-((叔丁基二苯基硅)氧基)乙基)-1-甲基-2-氧基-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓-7-基三氟甲磺酸酯的合成
Figure BDA0004006585300001531
室温下，向三口瓶中加入3-(2-((叔丁基二苯基硅)氧基)乙基)-7-羟基-1-甲基-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[d]氮杂卓-2-酮(3.20g，6.76mmol)，TEA(1.70g，16.90mmol)和DCM(50mL)，N2保护下0℃加入Tf2O(2.80g，10.14mmol)，0℃反应3h终止，柱层析(EA/PE体系)纯化得3.40g红色油状物，两步收率83％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.60–7.55(m,4H),7.48–7.37(m,8H),7.29–7.25(m,1H),4.70–4.43(m,1H),4.35–4.19(m,1H),3.72–3.66(m,2H),3.55–3.42(m,3H),3.22–3.17(m,1H),3.15–2.87(m,1H),1.38–1.31(m,3H),0.94(d,J＝2.9Hz,9H)。
步骤8：3-(2-((叔丁基二苯基硅)氧基)乙基)-7-((二苯基亚甲基)氨基)-1-甲基-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[d]氮杂卓-2-酮的合成
Figure BDA0004006585300001532
室温下，向单口瓶中加入3-(2-((叔丁基二苯基硅)氧基)乙基)-1-甲基-2-氧基-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓-7-基三氟甲磺酸酯(3.40g，5.61mmol)，二苯甲酮亚胺(1.20g，6.73mmol)，Pd2(dba)3(0.50g，0.56mmol)，Xantphos(0.60g，1.12mmol)，Cs2CO3(5.50g，16.84mmol)和dioxane(50mL)，N2保护下100℃反应16h终止，水洗，EA萃取，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析(EA/PE体系)纯化得黄色油状物0.90g，收率25％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.65–7.54(m,6H),7.48–7.37(m,10H),7.34–7.23(m,4H),7.20–7.02(m,3H),4.36–4.28(m,1H),4.20–4.11(m,1H),3.68–3.64(m,2H),3.59–3.44(m,2H),3.40–3.35(m,1H),3.12–2.92(m,2H),1.27–1.21(m,3H),0.99–0.94(m,9H)。
步骤9：7-氨基-3-(2-((叔丁基二苯基硅)氧基)乙基)-1-甲基-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[d]氮杂卓-2-酮的合成
Figure BDA0004006585300001541
室温下，向单口瓶中加入3-(2-((叔丁基二苯基硅)氧基)乙基)-7-((二苯基亚甲基)氨基)-1-甲基-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[d]氮杂卓-2-酮(0.75g，1.18mmol)，TFA(2mL)和THF(10mL)，20℃反应3h终止。用饱和碳酸氢钠水溶液调pH至6-7，EA萃取，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析(EA/PE体系)纯化得黄色固体0.27g，收率49％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.63–7.53(m,4H),7.48–7.39(m,6H),6.74(dd,J＝39.7,8.2Hz,1H),6.43–6.25(m,2H),4.31–4.21(m,1H),4.16–4.08(m,1H),3.72–3.62(m,2H),3.61–3.53(m,1H),3.42–3.33(m,2H),3.01–2.86(m,2H),1.28–1.25(m,3H),0.98(d,J＝2.8Hz,9H)。MS(ESI)m/z:473.4[M+H]+。
步骤10：N-(3-((2-((3-(2-((叔丁基二苯基硅)氧基)乙基)-1-甲基-2-氧基-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂平-7-基)氨基)-5-氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001542
室温下，向单口瓶中加入7-氨基-3-(2-((叔丁基二苯基硅)氧基)乙基)-1-甲基-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[d]氮杂卓-2-酮(0.27g，0.57mmol)，N-(3-(((2,5-二氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.83g，2.28mmol)，Pd2(dba)3(0.05g，0.06mmol)，Xantphos(0.07g，0.11mmol)，Cs2CO3(0.56g，1.71mmol)和dioxane(10mL)，N2保护下100℃反应24h终止，水洗，EA萃取，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析(EA/PE体系)纯化得黄色固体0.27g，收率53％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.65–8.63(m,1H),8.55–8.50(m,1H),7.96(s,1H),7.57–7.51(m,4H),7.44–7.36(m,7H),7.25(s,1H),6.93–6.80(m,1H),4.90(t,J＝5.0Hz,2H),4.37–4.32(m,1H),4.20–4.13(m,1H),3.55–3.49(m,2H),3.45–3.38(m,2H),3.17(s,3H),3.15(s,3H),3.13(d,J＝3.2Hz,1H),3.06–2.99(m,2H),1.28(t,J＝7.0Hz,3H),0.94(d,J＝1.8Hz,9H)。
步骤11：N-(3-((5-氯-2-((3-(2-羟乙基)-1-甲基-2-氧-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂-7-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001551
室温下，向单口瓶中加入N-(3-((2-((3-(2-((叔丁基二苯基硅)氧基)乙基)-1-甲基-2-氧基-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂平-7-基)氨基)-5-氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.27g，0.34mmol)，TBAF(0.11g，0.44mmol)和THF(5mL)，23℃反应0.5h终止，水洗，EA萃取，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析(MeOH/DCM体系)纯化得0.06g黄色固体，制备分离得0.02g白色固体，收率8％。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.68(d,J＝2.5Hz,1H),8.58(d,J＝2.5Hz,1H),8.07(s,1H),7.29(d,J＝7.8Hz,1H),7.19(s,1H),6.87(d,J＝8.4Hz,1H),4.95–4.89(m,2H),4.42(q,J＝6.8Hz,1H),4.25–4.19(m,2H),3.45–3.38(m,4H),3.32–3.27(m,1H),3.19–3.14(m,6H),3.08–3.02(m,2H),1.31–1.26(m,3H)。MS(ESI)m/z:561.3[M+H]+。
实施例54:N-(3-((5-氯-2-((3-(2-羟乙基)-4-氧代-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓-7-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001552
步骤1:N-(2,2-二甲氧基乙基)-2-(3-甲氧基苯基)乙酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001553
室温下，向单口瓶中加入3-甲氧基苯乙酸(50.00g，300.88mmol)和氯化亚砜(107.00g，899.16mmol)并用DCM(500mL)溶解。氮气保护，45℃反应2h终止，浓缩反应液得酰氯中间体待用。将氨基乙醛缩二甲醇(35.00g，332.89mmol)和三乙胺(61.00g，603.96mmol)一并溶入到DCM中，0℃下缓慢滴加酰氯中间体的DCM溶液，滴毕升至室温反应2h终止。加水稀释，EA萃取，有机相浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得淡黄色油状粗品63.00g，收率83％。MS(ESI)m/z:254.2[M+H]+。
步骤2:8-甲氧基-1,3-二氢-2H-苯并[d]氮杂卓-2-酮的合成
Figure BDA0004006585300001561
室温下，向单口瓶中加入N-(2,2-二甲氧基乙基)-2-(3-甲氧基苯基)乙酰胺(63.00g，0.25mol)并用醋酸(250mL)和浓盐酸(100mL)溶解。氮气保护，室温反应16h终止。冰水淬灭，DCM萃取，有机相浓缩，得棕黄色油状粗品80.00g。未做进一步纯化直接投入下一步。MS(ESI)m/z:190.2[M+H]+。
步骤3:8-甲氧基-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[d]氮杂平-2-酮的合成
Figure BDA0004006585300001562
室温下，向单口瓶中加入8-甲氧基-1,3-二氢-2H-苯并[d]氮杂卓-2-酮(80.00g)和醋酸(100mL)并用甲醇(600mL)溶解。氢气保护，室温下反应12h后终止。过滤，有机相浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得棕黄色油状粗品21.00g，两步收率43％。MS(ESI)m/z:192.3[M+H]+。
步骤4:(4-氧代-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓7-基)碳酸叔丁酯的合成
Figure BDA0004006585300001563
室温下，向三口瓶中加入8-甲氧基-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[d]氮杂卓-2-酮(21.00g，111.11mmol)并用DCM(400mL)溶解。0℃，氮气保护下缓慢滴加三溴化硼(68.00g，272.00mmol)，滴毕，升至室温反应3h终止，淬灭后浓缩反应液。所得粗品与Boc2O一并用DCM(400mL)溶解，0℃下缓慢滴加三乙胺(33.00g，326.73mmol)室温反应16h终止。加水稀释，DCM萃取，有机相浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得棕色固体7.20g，收率24％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.16(d,J＝9.1Hz,1H),7.01–6.99(m,2H),3.75(s,2H),3.45(q,J＝5.7Hz,2H),3.00(t,J＝6.0Hz,2H),1.49(s,9H)。
步骤5:8-(苄氧基)-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[d]氮杂卓-2-酮的合成
Figure BDA0004006585300001571
室温下，依次向单口瓶中加入(4-氧代-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓-7-基)碳酸叔丁酯(4.00g，14.40mmol)和三氟乙酸(10.00mL)并用DCM(500mL)溶解，室温反应3h终止。浓缩并使用乙腈(60mL)溶解，依次向反应液中加入碳酸钾(5.90g，43.30mmol)和溴化苄(3.70g，21.60mmol)，氮气保护，85℃反应16h终止。加水稀释，DCM萃取，有机相浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得黄色油1.00g，收率26％。MS(ESI)m/z:268.3[M+H]+。
步骤6:8-(苄氧基)-3-(2-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)乙基)-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[d]氮杂卓-2-酮的合成
Figure BDA0004006585300001572
室温下，依次向单口瓶中加入8-(苄氧基)-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[d]氮杂卓-2-酮(1.00g，3.74mmol)和(2-溴乙氧基)(叔丁基)二苯基硅烷(2.00g，5.61mmol)并用DMSO(15mL)溶解，氮气保护，缓慢加入叔丁醇钾(0.55g，4.86mmol)室温反应3h终止。加水稀释，EA萃取，有机相浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得淡黄色油0.50g，收率30％。
步骤7:3-(2-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)乙基)-8-羟基-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[d]氮杂卓-2-酮的合成
Figure BDA0004006585300001573
室温下，向单口瓶中加入8-(苄氧基)-3-(2-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)乙基)-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[d]氮杂卓-2-(0.50g，0.91mmol)和钯碳(1.00g，10％)并用EA(10mL)溶解。氢气保护，室温反应36h终止。过滤，浓缩得粗品淡黄色油0.40g。产物未做进一步纯化直接投入下一步。MS(ESI)m/z:460.4[M+H]+。
步骤8：3-(2-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)乙基)-4-氧代-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓-7-基三氟甲基磺酸酯的合成
Figure BDA0004006585300001574
室温下，依次向单口瓶中加入3-(2-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)乙基)-8-羟基-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[d]氮杂卓-2-酮(0.60g，1.30mmol)、三乙胺(0.39g，3.90mmol)和三氟甲磺酸酐(0.66g，2.35mmol)并用DCM(10mL)溶解。氮气保护，室温反应3h终止。浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得黄色油0.50g，两步收率65％。
步骤9:3-(2-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)乙基)-8-((二苯基亚甲基)氨基)-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[d]氮杂卓-2-酮的合成
Figure BDA0004006585300001581
室温下，向单口瓶中加入3-(2-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)乙基)-4-氧代-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓-7-基三氟甲基磺酸酯(0.50g，0.85mmol)，二苯酮亚胺(0.20g，1.09mmol)，Pd2(dba)3(0.04g，0.04mmol)，Xantphos(0.05g，0.08mmol)和碳酸铯(0.55g，1.70mmol)并用1，4-二氧六环(4mL)溶解。氮气保护，升至105℃反应8h终止。加水稀释，EA萃取，干燥，浓缩得黄色油0.70g。产物未经进一步纯化，直接用于下一步。
步骤10:8-氨基-3-(2-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)乙基)-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[d]氮杂卓-2-酮的合成
Figure BDA0004006585300001582
室温下，向单口瓶中加入3-(2-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)乙基)-8-((二苯基亚甲基)氨基)-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[d]氮杂卓-2-酮(0.70g，1.12mmol)和盐酸(1.35mL，1.35mmol)并用THF(4mL)溶解。氮气保护，室温反应2h终止。调节PH至弱碱，EA萃取，有机相干燥浓缩柱层析纯化(EA/PE体系)得淡黄色油0.15g，两步收率39％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.61–7.58(m,4H),7.47–7.40(m,6H),6.71(d,J＝8.2Hz,1H),6.39(dd,J＝8.1,2.4Hz,1H),6.29(d,J＝2.4Hz,1H),3.73–3.69(m,4H),3.63(s,2H),3.50(t,J＝5.7Hz,2H),2.88(t,J＝5.9Hz,2H),0.98(s,9H)。MS(ESI)m/z:459.4[M+H]+。
步骤11:N-(3-((2-((3-(2-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)乙基)-4-氧代-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓-7-基)氨基)-5-氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001591
室温下，依次向单口瓶中加入8-氨基-3-(2-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)乙基)-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[d]氮杂卓-2-酮(0.15g，0.33mmol)、N-(3-((((2,5-二氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.15g，0.40mmol)、Pd2(dba)3(0.02g,0.02mmol)、Xantphos(0.03g，0.05mmol)和碳酸铯(0.22g，0.68mmol)并用1，4二氧六环(4mL)溶解。氮气保护，升至105℃反应8h终止。加水稀释，EA萃取，有机相干燥浓缩柱层析纯化(EA/PE体系)得淡黄色油0.11g，收率43％。MS(ESI)m/z:785.8
[M+H]+。
步骤12:N-(3-((5-氯-2-((3-(2-羟乙基)-4-氧代-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂-7-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001592
室温下，向单口瓶中加入N-(3-((2-((3-(2-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)乙基)-4-氧代-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂平-7-基)氨基)-5-氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.11g，0.14mmol)和盐酸-甲醇溶液(1.17mL，0.69mmol)并用MeOH(4mL)溶解。氮气保护，室温反应2h终止。浓缩，有机相干燥浓缩柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得淡黄色固体0.04g，收率50％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.70(d,J＝2.5Hz,1H),8.58(d,J＝2.5Hz,1H),8.01(s,1H),7.42–7.36(m,1H),7.28(d,J＝2.3Hz,1H),6.88(d,J＝8.5Hz,1H),4.92(d,J＝5.3Hz,2H),3.76(t,J＝6.0Hz,2H),3.71(s,2H),3.49–3.44(m,2H),3.40–3.36(m,2H),3.23(s,3H),3.20(s,3H),2.97(t,J＝5.6Hz,2H)。MS(ESI)m/z:547.3[M+H]+。
实施例55:N-(3-((5-氯-2-((2,4-二甲基-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓-7-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001601
步骤1:1-(3-甲氧基苯基)丙烷-2-酮的合成
Figure BDA0004006585300001602
室温下，依次向单口瓶中加入3-甲氧基苯乙酸(100.00g，600.00mmol)，N-甲基咪唑(24mL，300.00mmol)和乙酸酐(285mL，3000.00mmol)，25℃反应16h后终止。调节pH至7-8，EA萃取，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，粗品未经进一步纯化，直接用于下一步。MS(ESI)m/z:165.3[M+H]+。
步骤2:1-(3-甲氧基苯基)丙烷-2-醇的合成
Figure BDA0004006585300001603
室温下，依次向单口瓶中加入1-(3-甲氧基苯基)丙烷-2-酮(98.80g，600.00mmol)，和MeOH(500mL)，0℃加入硼氢化钠(27.23g，720.00mmol)，室温反应1h后终止，淬灭，EA萃取，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤、浓缩，柱层析(EA/PE体系)纯化得淡黄色液体90.00g，两步收率90％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.18(t,J＝7.9Hz,1H),6.78–6.74(m,3H),3.88–3.80(m,1H),3.73(s,3H),2.69(dd,J＝13.1,6.6Hz,1H),2.53(dd,J＝13.2,6.4Hz,1H),1.04(d,J＝6.1Hz,3H)。
步骤3:对甲苯磺酰基丙氨酸甲酯的合成
Figure BDA0004006585300001611
室温下，依次向单口瓶中加入L-丙氨酸甲酯盐酸盐(23.00g，164.78mmol)，三乙胺(69mL，494.34mmol)和DCM(250mL)，0℃下滴加TsCl(38.00g，197.74mmol)，25℃反应3h终止。水洗，DCM萃取，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析(EA/PE体系)纯化得白色固体29.00g，收率69％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.65(d,J＝4.2Hz,2H),7.40(d,J＝4.0Hz,2H),3.89–3.81(m,1H),3.44(s,3H),2.38(s,3H),1.15(d,J＝7.2Hz,3H)。MS(ESI)m/z:258.3[M+H]+。
步骤4:N-(1-(3-甲氧基苯基)丙烷-2-基)-N-对甲苯磺酰基丙氨酸甲酯的合成
Figure BDA0004006585300001612
室温下，向单口瓶中加入对甲苯磺酰基丙氨酸甲酯(19.00g，73.84mmol)，1-(3-甲氧基苯基)丙烷-2-醇(18.41g，110.76mmol)，三苯基膦(58.11g，221.53mmol)和无水THF(400mL)，氮气保护，0℃下加入DIAD(44mL，221.53mmol)，15℃反应16h后终止。水洗，EA萃取，有机相合并，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析(EA/PE体系)纯化得黄色油状物12.50g，收率33％。MS(ESI)m/z:406.5[M+H]+。
步骤5:N-(1-(3-甲氧基苯基)丙烷-2-基)-N-对甲苯磺酰基丙胺酸的合成
Figure BDA0004006585300001613
室温下，向单口瓶中依次加入N-(1-(3-甲氧基苯基)丙烷-2-基)-N-对甲苯磺酰基丙氨酸甲酯(15.00g，3.70mmol)，NaOH(2.96g，7.40mmol)，H2O(20mL)和MeOH(100mL)80℃反应2h后终止。EA萃取，水相用稀盐酸调pH至6-7，EA萃取，无水Na2SO4干燥，过滤，浓缩，得黄色油状物6.66g，产物未经进一步纯化直接用于下一步。MS(ESI)m/z:392.5[M+H]+。
步骤6:7-甲氧基-2,4-二甲基-3-对甲苯磺酰基-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓-1-酮的合成
Figure BDA0004006585300001621
室温下，依次向单口瓶中加入N-(1-(3-甲氧基苯基)丙烷-2-基)-N-对甲苯磺酰基丙胺酸(6.66g，17.01mmol)和DCM(70mL)，0℃下滴加草酰氯(7mL)，20℃反应16h终止，浓缩后，-30℃氮气保护下加入DCM(70mL)和SnCl4(5.97mL，51.04mmol)，-30℃反应2h终止。淬灭，浓缩，DCM溶解，水洗，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(乙腈/0.05％TFA水体系)得黄色固体1.70g，两步收率12％。MS(ESI)m/z:374.4[M+H]+。
步骤7:7-甲氧基-2,4-二甲基-3-对甲苯磺酰基-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓的合成
Figure BDA0004006585300001622
室温下，依次向单口瓶中加入7-甲氧基-2,4-二甲基-3-对甲苯磺酰基-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓-1-酮(1.70g，4.55mmol)和TFA(20mL)，0℃加入三乙基硅烷(2.2mL，13.65mmol)，30℃反应16h终止，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得无色透明油状物1.05g，收率64％。MS(ESI)m/z:360.4[M+H]+。
步骤8：7-甲氧基-2,4-二甲基-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓的合成
Figure BDA0004006585300001623
室温下，依次向单口瓶中加入7-甲氧基-2,4-二甲基-3-对甲苯磺酰基-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓(1.00g，2.78mmol)，镁条(0.67g，27.82mmol)和MeOH(50mL)，30℃反应120h终止，浓缩，饱和NH4Cl溶解，EA萃取，有机相经无水Na2SO4干燥，过滤，浓缩，产物未经进一步纯化直接用于下一步。MS(ESI)m/z:206.4[M+H]+。
步骤9:2,4-二甲基-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓-7-醇的合成
Figure BDA0004006585300001631
室温下，依次向单口瓶中加入7-甲氧基-2,4-二甲基-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓(0.40g，1.95mmol)和DCM(10mL)，0℃下缓慢滴加三溴化硼(1.46g，5.84mmol)，0℃反应1h终止，淬灭，浓缩，产物未经进一步纯化直接用于下一步。MS(ESI)m/z:192.4[M+H]+。
步骤10:7-羟基-2,4-二甲基-1,2,4,5-四氢-3H-苯并[d]氮杂卓-3-羧酸叔丁酯的合成
Figure BDA0004006585300001632
室温下，依次向单口瓶中加入2,4-二甲基-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓-7-醇(0.37g，1.95mmol)，TEA(0.59g，5.84mmol)和DCM(10mL)，0℃下加入Boc2O(0.64g，2.92mmol)，10℃反应16h终止。水洗，DCM萃取，有机相经无水Na2SO4干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得黄色固体0.28g，三步收率34％。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ6.91(d,J＝7.9Hz,1H),6.57–6.51(m,2H),4.53–4.26(m,2H),3.01–2.89(m,2H),2.69–2.59(m,2H),1.34(s,9H),1.08–0.90(m,6H)。
步骤11:2,4-二甲基-7-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)-1,2,4,5-四氢-3H-苯并[d]氮杂卓-3-羧酸叔丁酯的合成
Figure BDA0004006585300001633
室温下，向三口瓶中加入7-羟基-2,4-二甲基-1,2,4,5-四氢-3H-苯并[d]氮杂卓-3-羧酸叔丁酯(0.25g，0.86mmol)，三乙胺(0.22g，2.14mmol)和DCM(10mL)，0℃下加入三氟甲磺酸酐(0.29g，1.03mmol)，0℃反应3h终止，水洗，DCM萃取，有机相经无水Na2SO4干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得无色透明油状物0.24g，收率65％。
步骤12:7-((二苯基亚甲基)氨基)-2,4-二甲基-1,2,4,5-四氢-3H-苯并[d]氮杂卓-3-羧酸叔丁酯的合成
Figure BDA0004006585300001641
室温下，向单口瓶中加入2,4-二甲基-7-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)-1,2,4,5-四氢-3H-苯并[d]氮杂卓-3-羧酸叔丁酯(0.24g，0.55mmol)，二苯酮亚胺(0.12g，0.66mmol)，Pd2(dba)3(0.05g，0.05mmol)，Xantphos(0.06g，0.11mmol)，Cs2CO3(0.54g，1.66mmol)和dioxane(10mL)，氮气保护下升温至100℃反应16h终止，冷却至室温，水洗，EA萃取，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得黄色固体0.11g，收率44％。MS(ESI)m/z:455.5[M+H]+。
步骤13:7-氨基-2,4-二甲基-1,2,4,5-四氢-3H-苯并[d]氮杂卓-3-羧酸叔丁酯的合成
Figure BDA0004006585300001642
室温下，依次向单口瓶中加入7-((二苯基亚甲基)氨基)-2,4-二甲基-1,2,4,5-四氢-3H-苯并[d]氮杂卓-3-羧酸叔丁酯(0.11g，0.24mmol)，甲酸铵(0.15g，2.42mmol)，Pd/C(70mg)，EA(3mL)和THF(6mL)，氮气保护下升温至80℃反应2h终止，冷却至室温，过滤，EA冲洗滤饼，滤液浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得黄色油状物0.04g，收率57％。
步骤14:N-(3-((5-氯-2-((2,4-二甲基-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓-7-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001643
室温下，向单口瓶中加入N-(3-(((2,5-二氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.08g，0.21mmol)，7-氨基-2,4-二甲基-1,2,4,5-四氢-3H-苯并[d]氮杂卓-3-羧酸叔丁酯(0.04g，0.14mmol)，樟脑磺酸(0.06g，0.27mmol)和异丙醇(10mL)，65℃反应16h终止，将反应冷却至室温，浓缩，加入HCl/EtOH(5mL)，室温反应2h终止，浓缩，饱和碳酸氢钠调pH值至碱性，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得黄色固体0.06g，收率70％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.69(d,J＝2.5Hz,1H),8.58(d,J＝2.5Hz,1H),8.00(s,1H),7.43–7.38(m,1H),7.32(d,J＝6.2Hz,1H),6.93(d,J＝8.2Hz,1H),4.92(d,J＝5.1Hz,2H),3.30–3.24(m,2H),3.24(s,3H),3.19(s,3H),3.19–3.11(m,2H),3.11–2.94(m,2H),1.42–1.34(m,6H)。MS(ESI)m/z:517.4[M+H]+。
实施例56:N-(3-(((5-氯-2-((3-(2-羟乙基)-1,3,4,5-四氢螺[苯并[d]氮杂卓-2,1'-环丙烷]-8-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001651
步骤1：1-(3-甲氧基苄基)环丙烷-1-胺的合成
Figure BDA0004006585300001652
室温下，依次向单口瓶中加入3-甲氧基苯乙腈(26.50g，180.06mmol)，THF(1000mL)，钛酸四异丙酯(53.74g,189.07mmol)，乙基溴化镁(360mL，360.12mmol)室温反应2h后，滴加BF3-Et2O溶液(93mL，360.12mmol)，室温反应1h终止。调节反应液pH值至10～12，EA萃取，水和饱和食盐水洗，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得黄色油状物8.80g，收率28％。MS(ESI)m/z:178.3[M+H]+。
步骤2：(1-(3-甲氧基苄基)环丙基)甘氨酸甲酯的合成
Figure BDA0004006585300001653
室温下，依次向单口瓶中加入1-(3-甲氧基苄基)环丙烷-1-胺(8.80g，49.63mmol)，碳酸铯(21.00g，64.52mmol)，并用DMF(30mL)溶解，氮气保护，60℃反应16h终止。反应液采用EA萃取，水和饱和食盐水洗，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得黄色油状物4.50g，收率36％。MS(ESI)m/z:250.3[M+H]+。
步骤3：N-(1-(3-甲氧基苄基)环丙基)-N-对甲苯磺酰基甘氨酸甲酯的合成
Figure BDA0004006585300001661
室温下，依次向单口瓶中加入(1-(3-甲氧基苄基)环丙基)甘氨酸甲酯(4.50g，18.05mmol)，并用THF(20mL)溶解，室温加入对甲苯磺酰氯(4.13g，21.66mmol)，85℃反应16h终止。减压浓缩，采用EA萃取，水洗、酸洗和饱和食盐水洗涤，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，得棕色油状物6.49g，收率89％。MS(ESI)m/z:404.4[M+H]+。
步骤4：N-(1-(3-甲氧基苄基)环丙基)-N-对甲苯磺酰基甘氨酸的合成
Figure BDA0004006585300001662
室温下，依次向单口瓶中加入N-(1-(3-甲氧基苄基)环丙基)-N-对甲苯磺酰基甘氨酸甲酯(6.49g，16.00mmol)，并用THF(20mL)，MeOH(20mL)和水(20mL)溶解，加入氢氧化钠(1.92g，48.00mmol)，反应2h终止。反应液调节pH＝3～4，EA萃取，水洗，饱和食盐水洗，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得淡黄色固体5.11g，收率86％。MS(ESI)m/z:390.4[M+H]+。
步骤5：8-甲氧基-3-对甲苯磺酰基-3,4-二氢螺[苯并[d]氮杂卓-2,1'-环丙烷]-5(1H)-酮的合成
Figure BDA0004006585300001663
室温下，依次向单口瓶中加入N-(1-(3-甲氧基苄基)环丙基)-N-对甲苯磺酰基甘氨酸(5.10g，13.09mmol)，并用DCM(50mL)和DMF(1d)溶解，0℃下加入草酰氯(2.49g，19.64mmol)，室温反应3h终止；减压浓缩后用DCM(50mL)溶解，-30℃下滴加无水四氯化锡(10.23g，39.27mmol)，-10℃反应3h终止，反应液淬灭后采用DCM萃取，水洗，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，得黄色固体粗品4.91g，产物未经进一步纯化直接投入下一步反应。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.54–7.51(m,3H),7.24(d,J＝8.1Hz,2H),6.88(dd,J＝8.7,2.6Hz,1H),6.63(d,J＝2.5Hz,1H),4.43(s,2H),3.79(s,3H),3.11(s,2H),2.33(s,3H),1.08–0.99(m,2H),0.85–0.78(m,2H)。MS(ESI)m/z:372.4[M+H]+。
步骤6：8-甲氧基-3-对甲苯磺酰基-1,3,4,5-四氢螺[苯并[d]氮杂卓-2,1'-环丙烷]的合成
Figure BDA0004006585300001671
室温下，依次向单口瓶中加入8-甲氧基-3-对甲苯磺酰基-3,4-二氢螺[苯并[d]氮杂卓-2,1'-环丙烷]-5(1H)-酮(4.90g，13.09mmol)，并用DCM(30mL)和TFA(15mL)溶解。0℃下加入三乙基硅烷(7.61g，65.45mmol)，室温反应5h终止。减压浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得白色固体4.31g，两步收率92％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.67(d,J＝8.0Hz,2H),7.38(d,J＝8.1Hz,2H),7.04(d,J＝8.3Hz,1H),6.66(dd,J＝8.2,2.7Hz,1H),6.54(d,J＝2.7Hz,1H),3.68(s,3H),3.61–3.38(m,2H),2.92(t,J＝5.0Hz,2H),2.89–2.60(m,2H),2.38(s,3H),0.92–0.72(m,2H),0.69–0.56(m,2H)。MS(ESI)m/z:358.3[M+H]+。
步骤7：8-甲氧基-1,3,4,5-四氢螺[苯并[d]氮杂卓-2,1'-环丙烷]盐酸盐的合成
Figure BDA0004006585300001672
室温下，依次单口瓶中加入8-甲氧基-3-对甲苯磺酰基-1,3,4,5-四氢螺[苯并[d]氮杂卓-2,1'-环丙烷](3.70g，10.35mmol)，并用THF(20mL)和MeOH(80mL)溶解。室温加入镁(2.49g，103.50mmol)，反应5h终止。淬灭，反应液采用EA，萃取，饱和食盐水洗，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得黄色油状物。随后用EA(15mL)溶解，室温加入氯化氢甲醇溶液(2mL)，反应0.5h终止。减压浓缩，EA打浆过滤得白色固体1.91g，收率77％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.12(d,J＝8.2Hz,1H),6.74(dd,J＝8.2,2.6Hz,1H),6.70(d,J＝2.7Hz,1H),3.72(s,3H),3.20–2.86(m,6H),1.10–0.94(m,2H),0.80–0.61(m,2H)。MS(ESI)m/z:204.3[M+H]+。
步骤8：2-(8-甲氧基-4,5-二氢螺[苯并[d]氮杂卓-2,1'-环丙烷]-3(1H)-基)乙酸甲酯的合成
Figure BDA0004006585300001681
/>
室温下，依次向单口瓶中加入8-甲氧基-1,3,4,5-四氢螺[苯并[d]氮杂卓-2,1'-环丙烷]盐酸盐(1.91g，7.96mmol)，碳酸铯(6.47g,19.90mmol)，DMF(10mL)和溴乙酸甲酯(1.46g，9.56mmol)，70℃反应3h终止。EA萃取，水和饱和食盐水洗，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得无色透明油状物1.91g，收率87％。MS(ESI)m/z:276.3[M+H]+。
步骤9：2-(8-羟基-4,5-二氢螺[苯并[d]氮杂卓-2,1'-环丙烷]-3(1H)-基)乙酸甲酯的合成
Figure BDA0004006585300001682
室温下，依次向单口瓶中加入2-(8-甲氧基-4,5-二氢螺[苯并[d]氮杂卓-2,1'-环丙烷]-3(1H)-基)乙酸甲酯(1.91g，6.94mmol)，DCM(50mL)溶解，0℃滴加三溴化硼(2.60g，10.41mmol)，氮气保护，室温反应4h终止。淬灭，反应液采用DCM萃取，水洗，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得白色固体1.00g，收率55％。MS(ESI)m/z:262.3[M+H]+。
步骤10：2-(8-((((三氟甲基)磺酰基)氧基)-4,5-二氢螺[苯并[d]氮杂卓-2,1'-环丙烷]-3(1H)-基)乙酸甲酯的合成
Figure BDA0004006585300001683
室温下，依次向单口瓶中加入2-(8-羟基-4,5-二氢螺[苯并[d]氮杂卓-2,1'-环丙烷]-3(1H)-基)乙酸甲酯(1.00g，3.83mmol)，TEA(0.58g，5.75mmol)并用DCM(15mL)溶解，0℃滴加三氟甲磺酸酐(1.30g，4.59mmol)，氮气保护，室温反应2h终止。反应液采用DCM萃取，水洗，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得无色透明油状物1.34g，收率89％。MS(ESI)m/z:394.3[M+H]+。
步骤11：2-(8-(((二苯基亚甲基)氨基)-4,5-二氢螺[苯并[d]氮杂卓-2,1'-环丙烷]-3(1H)-基)乙酸甲酯的合成
Figure BDA0004006585300001691
室温下，依次向单口瓶中加入2-(8-((((三氟甲基)磺酰基)氧基)-4,5-二氢螺[苯并[d]氮杂卓-2,1'-环丙烷]-3(1H)-基)乙酸甲酯(1.34g，3.41mmol)，二苯基甲亚胺(0.90g，5.11mmol)，Pd2(dba)3(0.47g，0.51mmol)，Xantphos(0.59g，1.02mmol)和碳酸铯(2.77g，8.53mmol)并用甲苯(20mL)溶解。氮气保护，升温至110℃反应20h终止。冷却至室温，反应液采用EA萃取，水洗，饱和食盐水洗，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，得淡黄色油状物粗品，未做进一步纯化直接投入下一步反应。
步骤12：2-(8-氨基-4,5-二氢螺[苯并[d]氮杂卓-2,1'-环丙烷]-3(1H)-基)乙酸甲酯的合成
Figure BDA0004006585300001692
室温下，依次向单口瓶中加入粗品2-(8-(((二苯基亚甲基)氨基)-4,5-二氢螺[苯并[d]氮杂卓-2,1'-环丙烷]-3(1H)-基)乙酸甲酯，并用THF(20mL)溶解，加入1N HCl(5mL)，室温反应2h终止。反应液采用EA萃取，依次水洗、饱和碳酸氢钠洗、饱和食盐水洗涤，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得淡黄色油状物0.28g，两步收率32％。MS(ESI)m/z:261.4[M+H]+。
步骤13：2-(8-((5-氯-4-((((3-(N-甲基甲基磺酰胺基)吡嗪-2-基)甲基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)-4,5-二氢螺[苯并[d]氮杂卓-2,1'-环丙烷]-3(1H)-基)乙酸甲酯的合成
Figure BDA0004006585300001701
室温下，依次向单口瓶中加入2-(8-氨基-4,5-二氢螺[苯并[d]氮杂卓-2,1'-环丙烷]-3(1H)-基)乙酸甲酯(0.14g，0.54mmol)，N-(3-(((2,5-二氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.23g，0.66mmol)，樟脑磺酸(0.25g，1.08mmol)，并用异丙醇(10mL)溶解。氮气保护，升温至85℃反应20h终止。冷却至室温，反应液采用DCM萃取，饱和碳酸钠和饱和食盐水洗涤，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得白色固体0.04g，收率11％。MS(ESI)m/z:587.4[M+H]+。
步骤14：N-(3-(((5-氯-2-((3-(2-羟乙基)-1,3,4,5-四氢螺[苯并[d]氮杂卓-2,1'-环丙烷]-8-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001702
室温下，依次向单口瓶中加入2-(8-((5-氯-4-((((3-(N-甲基甲基磺酰胺基)吡嗪-2-基)甲基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)-4,5-二氢螺[苯并[d]氮杂卓-2,1'-环丙烷]-3(1H)-基)乙酸甲酯(0.08g，0.13mmol)和THF(20mL)，0℃下加入氢化铝锂(0.03g，0.67mmol)，室温下反应10min终止。淬灭后，经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得类白固体产物0.04g，收率51％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.69(d,J＝2.5Hz,1H),8.58(d,J＝2.5Hz,1H),7.98(s,1H),7.24(dd,J＝8.1,2.2Hz,1H),7.11(d,J＝2.3Hz,1H),6.84(d,J＝8.1Hz,1H),4.90(d,J＝5.4Hz,2H),3.45–3.37(m,2H),3.22(s,3H),3.19(s,3H),3.02–2.92(m,2H),2.92–2.51(m,6H),0.54–0.36(m,2H),0.36–0.18(m,2H)。MS(ESI)m/z:559.4[M+H]+。
实施例57:N-(3-(((5-氯-2-((3-(3-羟基-2-(羟甲基)-2-甲基丙酮基)-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]吖庚因-7-基)胺基)嘧啶-4-基)胺基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001711
步骤1～步骤9参考实施例23；
步骤10：N-(3-(((5-氯-2-((3-(2,2,5-三甲基-1,3-二氧六环-5-羰基)-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]吖庚因-7-基)胺基)嘧啶-4-基)胺基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺
Figure BDA0004006585300001712
室温下，依次向单口瓶中加入N-(3-(((5-氯-2-((2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]吖庚因-7-基)胺基)嘧啶-4-基)胺基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺盐酸盐(0.15g,0.29mmol)、2,2,5-三甲基-1,3-二氧杂环己烷-5-甲酸(0.06g,0.34mmol)、TBTU(0.12g,0.37mmol)、DIEA(0.18g,1.43mmol)、DMAP(0.01g,0.06mmol)和DMF(10mL)，氮气保护，室温反应7h终止。EA稀释，水洗，有机相依次经干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得黄色固体0.13g，收率73％。MS(ESI)m/z:645.5[M+H]+。
步骤11：N-(3-(((5-氯-2-((3-(3-羟基-2-(羟甲基)-2-甲基丙酮基)-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]吖庚因-7-基)胺基)嘧啶-4-基)胺基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺
Figure BDA0004006585300001713
室温下，依次向单口瓶中加入N-(3-(((5-氯-2-((3-(2,2,5-三甲基-1,3-二氧六环-5-羰基)-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]吖庚因-7-基)胺基)嘧啶-4-基)胺基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.13g,0.21mmol)，HCl/EA溶液(3.30mL,0.83mmol)，EtOH(3mL)和H2O(0.5mL)，氮气保护，室温反应1h终止。浓缩反应液，水稀释，EA萃取，有机相经干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得黄色固体产物0.09g，收率74％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.69(d,J＝2.5Hz,1H),8.58(d,J＝2.5Hz,1H),7.99(s,1H),7.40(d,J＝2.3Hz,1H),7.28(dd,J＝8.2,2.2Hz,1H),6.90(d,J＝8.3Hz,1H),4.93(d,J＝5.3Hz,2H),3.60–3.52(m,8H),3.23(s,3H),3.19(s,3H),2.76(dd,J＝19.0,5.4Hz,4H),1.11(s,3H)。MS(ESI)m/z:605.2[M+H]+。
实施例58:N-(3-((5-氯-2-((7-((1,3-二羟基-2-甲基丙烷-2-基)氨基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001721
步骤1:2-硝基-5,6,8,9-四氢-7H-苯并[7]轮烯-7-酮肟的合成
Figure BDA0004006585300001722
室温下，依次向单口瓶中加2-硝基-5,6,8,9-四氢-7H-苯并[7]轮烯-7-酮(0.50g，2.44mmol)，盐酸羟胺(0.51g，7.32mmol)和醋酸钠(0.66g，4.88mmol)并用乙醇(10mL)和水(10mL)溶解，氮气保护，80℃反应16h终止。浓缩反应液，水洗，干燥得黄色固体粗品0.47g，产物未经进一步纯化直接用于下一步。MS(ESI)m/z:221.3[M+H]+。
步骤2:2-硝基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-胺的合成
Figure BDA0004006585300001723
室温下，依次向单口瓶中加入2-硝基-5,6,8,9-四氢-7H-苯并[7]轮烯-7-酮肟(0.47g，2.13mmol)，硼烷四氢呋喃络合物(6.39mL，6.39mmol)和THF(10mL)，氮气保护65℃反应16h终止。稀盐酸淬灭，饱和NaOH水洗，EA萃取，有机相合并，经无水Na2SO4干燥，过滤，浓缩得黄色固体粗品0.71g，产物未经进一步纯化直接用于下一步。MS(ESI)m/z:207.4[M+H]+。
步骤3:2-甲基-2-((2-硝基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)氨基)丙二酸二乙酯的合成
Figure BDA0004006585300001731
室温下，依次向单口瓶中加入2-硝基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-胺(0.71g，3.40mmol)，2-溴-2-甲基丙二酸二乙酯(2.58g，10.20mmol)，碳酸钠(1.08g，10.20mmol)和NMP(50mL)，氮气保护，70℃反应16h终止。加水稀释，EA萃取，有机相合并，干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE)体系，得黄色油0.63g，三步收率68％。MS(ESI)m/z:379.4[M+H]+。
步骤4:2-((2-氨基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)氨基)-2-甲基丙二酸二乙酯的合成
Figure BDA0004006585300001732
室温下，向单口瓶中加入2-甲基-2-((2-硝基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)氨基)丙二酸二乙酯(0.63g，1.66mmol)，Pd/C(0.20g)和EA(30mL)。氢气保护，室温反应16h终止。过滤，浓缩，得粉色油状物粗品0.50g，产物未经进一步纯化直接用于下一步。MS(ESI)m/z:349.4[M+H]+。
步骤5：2-((2-((5-氯-4-((3-(N-甲基甲磺酰胺基)吡嗪-2-基)甲基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)氨基)-2-甲基丙二酸二乙酯的合成
Figure BDA0004006585300001733
室温下，依次向单口瓶中加入N-(3-((2,5-二氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.46g，1.26mmol)，2-((2-氨基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)氨基)-2-甲基丙二酸二乙酯(0.40g，1.15mmol)，樟脑磺酸(0.80g，3.45mmol)和IPA(10mL)，85℃反应16h终止，浓缩溶剂，EA溶解，水洗，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得白色固体0.60g，两步收率54％。MS(ESI)m/z:675.5[M+H]+。
步骤6:N-(3-((5-氯-2-((7-((1,3-二羟基-2-甲基丙烷-2-基)氨基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001741
室温下，依次向单口瓶中加入2-((2-((5-氯-4-((3-(N-甲基甲磺酰胺基)吡嗪-2-基)甲基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)氨基)-2-甲基丙二酸二乙酯(0.50g，0.74mmol)和THF(20mL)，0℃下缓慢加入氢化铝锂(0.09g，2.22mmol)。氮气保护，室温反应16h终止。反应液淬灭，过滤，浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得黄色固体产物0.07g，收率16％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.70(d,J＝2.5Hz,1H),8.58(d,J＝2.5Hz,1H),7.99(s,1H),7.40–7.28(m,2H),6.90(d,J＝8.1Hz,1H),4.93(d,J＝5.4Hz,2H),3.59–3.41(m,4H),3.23(s,3H),3.20(s,3H),2.73–2.65(m,3H),2.60–2.53(m,2H),2.28–2.12(m,2H),1.38–1.31(m,2H),1.24(s,3H)。MS(ESI)m/z:591.4[M+H]+。
实施例59:N-(3-(((5-氯-2-((3-(2-羟基乙基)-1,1-二甲基-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓-7-基)胺基)嘧啶-4-基)胺基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001742
步骤1～步骤16参考实施例44；
步骤17:N-(3-(((5-氯-2-((3-(2-羟基乙基)-1,1-二甲基-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓-7-基)胺基)嘧啶-4-基)胺基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001751
室温下，依次向单口瓶中加入N-(3-(((5-氯-2-((1,1-二甲基-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓-7-基)胺基)嘧啶-4-基)胺基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺盐酸盐(0.03g，0.06mmol)，2-溴乙醇(0.02g，0.12mmol)，碳酸钾(0.03g，0.18mmol)和乙腈(5mL)，氮气保护，升温65℃反应24h终止。反应液浓缩，水稀释，EA萃取，有机相经过干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得白色固体产物0.01g，收率51％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.70(d,J＝2.5Hz,1H),8.58(d,J＝2.5Hz,1H),7.98(s,1H),7.34–7.28(m,1H),7.25–7.18(m,1H),7.08–7.05(m,1H),4.92(d,J＝5.3Hz,2H),3.55–3.45(m,2H),3.22(s,3H),3.18(s,3H),2.84–2.81(m,2H),2.68–2.51(m,4H),2.47–2.41(m,2H),1.23(s,6H)。MS(ESI)m/z:561.4[M+H]+。
实施例60:N-(3-(((5-氯-2-((4-氧代-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓-7-基)胺基)嘧啶-4-基)胺基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001752
步骤1～步骤5参考实施例54；
步骤6:8-羟基-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[d]氮杂卓-2-酮的合成
Figure BDA0004006585300001753
室温下，依次向单口瓶中加入8-(苄氧基)-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[d]氮杂卓-2-酮(1.57g，5.87mmol)，Pd/C(1.00g)和EA(20mL)。氢气保护，室温反应18h终止。反应液过滤，漂洗，浓缩滤液得灰色固体1.02g，收率为98％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ6.90(d,J＝8.2Hz,1H),6.57(dd,J＝8.2,2.6Hz,1H),6.50(d,J＝2.6Hz,1H),3.60(s,2H),3.40–3.36(m,2H),2.87(t,J＝8.0Hz,2H)。
步骤7:4-氧代-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓-7-基三氟甲磺酸酯的合成
Figure BDA0004006585300001761
室温下，依次向单口瓶中加入8-羟基-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[d]氮杂卓-2-酮(0.62g，3.50mmol)，N-苯基双(三氟甲磺酰亚胺)(2.50g，7.00mmol)，TEA(1.06g，10.50mmol)和DCM(50mL)。氮气保护，室温反应6h终止。浓缩反应液，柱层析纯化(EA/PE体系)得白色固体0.90g，收率为83％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.38–7.27(m,3H),3.83(s,2H),3.49–3.43(m,2H),3.05(t,J＝6.0Hz,2H)。MS(ESI)m/z:310.3[M+H]+。
步骤8:8-((二苯亚甲基)胺基)-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[d]氮杂卓-2-酮的合成
Figure BDA0004006585300001762
室温下，依次向单口瓶中加入二苯甲酮亚胺(0.69g，3.78mmol)，4-氧代-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓-7-基三氟甲磺酸酯(0.90g，2.91mmol)，Pd2(dba)3(0.27g，0.29mmol)，Xantphos(0.34g，0.58mmol)，碳酸铯(2.37g，7.26mmol)和1,4-二氧六环(20mL)。氮气保护，升温至110℃反应18h终止。冷却至室温，EA稀释，水洗，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得淡黄色固体0.51g，收率52％。MS(ESI)m/z:341.4[M+H]+。
步骤9:8-氨基-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[d]氮杂卓-2-酮的合成
Figure BDA0004006585300001763
室温下，依次向单口瓶中加入8-((二苯亚甲基)胺基)-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[d]氮杂卓-2-酮(0.51g，1.50mmol)，甲酸铵(0.94g，14.98mmol)和Pd/C(0.50g)，并用THF(12mL)和EA(6mL)溶解。氮气保护，升温至80℃反应3h终止。冷却至室温，过滤，水漂洗，滤液浓缩得白色固体粗品0.43g。MS(ESI)m/z:177.4[M+H]+。
步骤10:N-(3-(((5-氯-2-((4-氧代-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓-7-基)胺基)嘧啶-4-基)胺基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001771
室温下，依次向单口瓶中加入N-(3-(((2,5-二氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.31g，0.85mmol)，8-胺基-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[d]氮杂卓-2-酮(0.15g，0.85mmol)，樟脑磺酸(0.40g，1.70mmol)和异丙醇(10mL)。氮气保护，升温至85℃反应18h终止。冷却，浓缩反应液，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得白色固体0.08g，两步总收率19％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.69(d,J＝2.5Hz,1H),8.57(d,J＝2.5Hz,1H),8.00(s,1H),7.40(dd,J＝8.3,2.3Hz,1H),7.28(d,J＝2.2Hz,1H),6.89(d,J＝8.4Hz,1H),4.92(d,J＝5.3Hz,2H),3.59(s,2H),3.42–3.36(m,2H),3.22(s,3H),3.19(s,3H),2.89(t,J＝6.0Hz,2H)。MS(ESI)m/z:503.4[M+H]+。
实施例61:N-(3-((5-氯-2-((4-(2-羟乙基)-2,3,4,5-四氢苯并[f][1,4]恶嗪-8-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺盐酸盐的合成
Figure BDA0004006585300001772
步骤1:2-溴-1-(溴甲基)-4-硝基苯的合成
Figure BDA0004006585300001773
室温下，向单口瓶中加入2-溴-1-甲基-4-硝基苯(24.00g，111.11mmol)，NBS(19.80g，111.11mmol)和过氧化苯甲酰(0.24g，1.00mmol)并用四氯化碳(200mL)溶解。氮气保护，78℃反应16h终止。过滤，浓缩反应液得淡棕色油状粗品31.00g，产物未经进一步纯化，直接用于下一步。
步骤2:2-((2-溴-4-硝基苄基)氨基)乙烷-1-醇的合成
Figure BDA0004006585300001781
室温下，向单口瓶中加入乙醇胺(6.82g，0.11mol)，N,N-二异丙基乙胺(21.30g，171.72mmol)和2-溴-1-(溴甲基)-4-硝基苯(31.00g，111.11mmol)，并用DCM(3000mL)溶解。氮气保护，室温反应16h终止。冰水淬灭，DCM萃取，有机相浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得黄色油8.80g，两步收率30％。MS(ESI)m/z:275.1[M+H]+。
步骤3:8-硝基-2,3,4,5-四氢苯并[f][1,4]氧氮杂卓的合成
Figure BDA0004006585300001782
室温下，向单口瓶中加入2-((2-溴-4-硝基苄基)氨基)乙烷-1-醇(8.80g，32.00mmol)，碳酸钾(8.70g，64.00mmol)和碘化亚铜(0.61g，3.20mmol)并用异丙醇(340mL)溶解。氮气保护，82℃下反应16h终止。过滤，有机相浓缩，柱层析纯化(MeOH/EA体系)得黄色固体2.10g，收率34％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.90(dd,J＝8.3,2.4Hz,1H),7.76(d,J＝2.4Hz,1H),7.54(d,J＝8.3Hz,1H),4.11(t,J＝4.3Hz,2H),4.04(s,2H),3.17(s,2H)。MS(ESI)m/z:195.2[M+H]+。
步骤4:4-(2-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)乙基)-8-硝基-2,3,4,5-四氢苯并[f][1,4]氧氮杂卓的合成
Figure BDA0004006585300001783
室温下，向单口瓶中加入8-硝基-2,3,4,5-四氢苯并[f][1,4]氧氮杂卓(2.10g，10.80mmol)，(2-溴乙氧基)(叔丁基)二苯基硅烷(4.70g，13.00mmol)和碳酸钾(2.60g，19.40mmol)并用乙腈(30mL)溶解，氮气保护85℃反应16h终止。浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得黄色油状物4.20g，收率82％。MS(ESI)m/z:477.4[M+H]+。
步骤5:4-(2-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)乙基)-2,3,4,5-四氢苯并[f][1,4]氧氮杂卓-8-胺的合成
Figure BDA0004006585300001784
室温下，依次向单口瓶中加入4-(2-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)乙基)-8-硝基-2,3,4,5-四氢苯并[f][1,4]氧氮杂卓(4.20g，8.81mmol)和10％钯碳(2.00g)并用EA(50mL)溶解。氢气保护，室温反应4h终止。过滤，浓缩，得黄色油状物3.60g，收率92％。MS(ESI)m/z:447.3[M+H]+。
步骤6:N-(3-((2-((4-(2-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)乙基)-2,3,4,5-四氢苯并[f][1,4]氧氮杂卓-8-基)氨基)-5-氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001791
室温下，依次向单口瓶中加入4-(2-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)乙基)-2,3,4,5-四氢苯并[f][1,4]氧氮杂卓-8-胺(3.60g，8.10mmol)，N-(3-(((2,5-二氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(3.53g，9.72mmol)和樟脑磺酸(2.80g，12.10mmol)并用异丙醇(40mL)溶解，氮气保护，85℃反应16h终止。加水稀释，DCM萃取，有机相浓缩，得淡黄色油状物6.60g，产物未经进一步纯化，直接用于下一步。MS(ESI)m/z:773.3[M+H]+。
步骤7:N-(3-((5-氯-2-((4-(2-羟乙基)-2,3,4,5-四氢苯并[f][1,4]氧氮杂卓-8-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺盐酸盐的合成
Figure BDA0004006585300001792
室温下，向单口瓶中加入N-(3-((2-((4-(2-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)乙基)-2,3,4,5-四氢苯并[f][1,4]氧氮杂卓-8-基)氨基)-5-氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺粗品(1.80g)并用甲醇(3mL)溶解。室温下加入浓盐酸(3mL)反应3h终止。浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM＝1/10)得黄色固体0.92g，两步收率73％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.69(d,J＝2.5Hz,1H),8.60(d,J＝2.5Hz,1H),8.21(s,1H),7.43–7.16(m,3H),4.98(d,J＝5.5Hz,2H),4.37–4.32(m,2H),4.28–4.23(m,2H),3.82–3.77(m,2H),3.69–3.56(m,2H),3.24(s,3H),3.20(s,3H),3.20–3.14(m,2H)。MS(ESI)m/z:535.4[M+H]+。
实施例62:N-(3-((5-氯-2-((7-((2-羟乙基)氨基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺盐酸盐的合成
Figure BDA0004006585300001801
步骤1～步骤6参考实施例33；
步骤7:N-(3-((5-氯-2-((7-氧代-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)嘧啶-4-基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001802
室温下，依次向单口瓶中加入2-氨基-5,6,8,9-四氢-7H-苯并[7]轮烯-7-酮(0.90g，5.14mmol)，N-(3-((((2,5-二氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(1.87g，5.14mmol)和樟脑磺酸(2.38g，10.28mmol)并用异丙醇(50mL)溶解。氮气保护，85℃反应16h终止。反应液浓缩，柱层析纯化(EA/DCM)得黄色固体粗品2.1g。MS(ESI)m/z:502.5[M+H]+。
步骤8:2-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)乙胺的合成
Figure BDA0004006585300001803
室温下，依次向单口瓶中加入乙醇胺(0.40g，6.56mmol)，咪唑(0.91g，13.12mmol)和叔丁基二苯基氯硅烷(2.30g，8.52mmol)并用DCM(17mL)溶解。氮气保护，室温反应18h终止。反应液浓缩，柱层析纯化(DCM/PE)得白色固体粗品2.1g。MS(ESI)m/z:300.2[M+H]+。
步骤9:N-(3-((2-((7-((2-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)乙基)氨基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)-5-氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001811
室温下，依次向单口瓶中加入2-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)乙胺(0.10g，0.33mmol)，N-(3-((5-氯-2-((7-氧代-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.15g，0.30mmol)，醋酸(催化量)和三乙酰氧基硼氢化钠(0.10g，0.50mmol)并用DCM(10mL)溶解。氮气保护，室温反应16h终止。浓缩反应液，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得白色固体0.08g，两步收率34％。MS(ESI)m/z:785.7[M+H]+。
步骤10:N-(3-((5-氯-2-((7-((2-羟乙基)氨基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺盐酸盐的合成
Figure BDA0004006585300001812
室温下，依次向单口瓶中加入N-(3-((2-((7-((2-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)乙基)氨基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)-5-氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.08g，0.11mmol)和浓盐酸(5mL)并用甲醇(5mL)溶解。氮气保护，室温反应3h终止。浓缩，打浆得白色固体产物0.05g，收率82％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.69(d,J＝3.9Hz,1H),8.61(d,J＝2.4Hz,1H),8.25(s,1H),7.24(d,J＝2.2Hz,1H),7.10(dd,J＝8.0,2.2Hz,1H),6.97(d,J＝8.1Hz,1H),4.97(d,J＝5.6Hz,2H),3.69(t,J＝6.0Hz,2H),3.36–3.32(m,1H),3.18(s，3H),3.16(s，3H),3.02–2.98(m,2H),2.76–2.59(m,4H),2.30–2.24(m,2H),1.38–1.29(m,2H)。MS(ESI)m/z:547.4[M+H]+。
实施例63:N-(3-((2-((7-(双(2-羟乙基)氨基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)-5-氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰亚胺的合成
Figure BDA0004006585300001821
步骤1～步骤9参考实施例62；
步骤10:N-(3-((2-((7-((叔丁基二苯基硅基)氧基)乙基)(2-羟乙基)氨基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)-5-氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲硫酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001822
室温下，依次向单口瓶中加入2-溴乙醇(0.02g，0.16mmol)，N-(3-((2-((7-((2-((叔丁基二苯基硅基)氧基)乙基)氨基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)-5-氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.09g，0.11mmol)和碳酸钾(0.05g，0.33mmol)并用乙腈(5mL)溶解。氮气保护，85℃反应16h终止。过滤，浓缩反应液，得黄色固体粗品0.14g。MS(ESI)m/z:829.5[M+H]+。
步骤11:N-(3-((2-((7-(双(2-羟乙基)氨基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)-5-氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰亚胺的合成
Figure BDA0004006585300001831
室温下，依次向单口瓶中加入N-(3-((2-((7-((叔丁基二苯基硅基)氧基)乙基)(2-羟乙基)氨基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)-5-氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲硫酰胺(0.14g粗品)和浓盐酸(5mL)并用甲醇(5mL)溶解。氮气保护，室温反应3h终止。浓缩，打浆，柱层析纯化(MeOH/DCM)得淡黄色固体产物0.04g，两步收率66％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.70(d,J＝2.5Hz,1H),8.58(d,J＝2.5Hz,1H),7.99(s,1H),7.40–7.34(m,1H),7.29(dd,J＝8.2Hz,J＝2.2Hz,1H),6.90(d,J＝8.2Hz,1H),4.93(d,J＝5.4Hz,2H),3.71–3.37(m,4H),3.24(s,3H),3.21(s,3H),3.20–
3.16(m,1H),2.77–2.51(m,8H),2.25–2.03(m,2H),1.36–1.21(m,2H)。MS(ESI)m/z:591.4[M+H]+。
实施例64：N-(3-(((5-氯-2-((8-氰基-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓-7-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺
Figure BDA0004006585300001832
步骤1:7-氨基-8-溴-1,2,4,5-四氢-3H-苯并[d]氮杂卓-3-羧酸叔丁酯的合成
Figure BDA0004006585300001833
0℃下，依次向单口瓶中加入7-氨基-1,2,4,5-四氢-3H-苯并[d]氮杂卓-3-羧酸叔丁酯(2.61g，9.95mmol)和MeCN(30mL)，加入NBS(1.86g，10.45mmol)。氮气保护，室温反应2h终止。反应液浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得无色液体2.55g，收率75％。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.10(s,1H),6.58(s,1H),3.41–3.35(m,4H),2.68–2.62(m,4H),1.40(s,9H)。
步骤2:7-氨基-8-氰基-1,2,4,5-四氢-3H-苯并[d]氮杂卓-3-羧酸叔丁酯的合成
Figure BDA0004006585300001841
室温下，依次向单口瓶中加入7-氨基-8-溴-1,2,4,5-四氢-3H-苯并[d]氮杂卓-3-羧酸叔丁酯(2.35g，6.89mmol)，Pd(PPh3)4(9.55g，8.26mmol)，Zn(CN)2(3.32g，27.55mmol)和DMF(40mL)。氮气保护，100℃反应24h终止。反应液过滤，EA漂洗，有机相经氢氧化钠水溶液洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得白色固体0.76g，收率38％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.14(s,1H),6.57(s,1H),3.43–3.35(m,4H),2.72–2.65(m,4H),1.39(s,9H)。
步骤3:7-((5-氯-4-(((3-(N-甲基甲磺酰胺基)吡嗪-2-基)甲基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)-8-氰基-1,2,4,5-四氢-3H-苯并[d]氮杂卓-3-羧酸叔丁酯的合成
Figure BDA0004006585300001842
室温下，依次向单口瓶中加入7-氨基-8-氰基-1,2,4,5-四氢-3H-苯并[d]氮杂卓-3-羧酸叔丁酯(0.20g，0.70mmol)，N-(3-(((2,5-二氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.30g，0.84mmol)，Pd2(dba)3(0.06g，0.07mmol)，Xantphos(0.08g，0.14mmol)，Cs2CO3(0.57g，1.74mmol)和1,4-二氧六环(20mL)。氮气保护，110℃反应6h终止。冷却，EA稀释，水洗，有机相无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得白色固体0.25g，收率50％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.67(d,J＝2.5Hz,1H),8.55(d,J＝2.4Hz,1H),7.97(s,1H),7.47(s,1H),7.39(s,1H),4.84(d,J＝5.4Hz,2H),3.44–3.38(m,4H),3.15(s,3H),3.14(s,3H),2.84–2.72(m,4H),1.40(s,9H)。MS(ESI)m/z:614.4[M+H]+。
步骤4：N-(3-(((5-氯-2-((8-氰基-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓-7-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001851
室温下，依次向单口瓶中加入7-((5-氯-4-(((3-(N-甲基甲磺酰氨基)甲基)吡嗪-2-基)甲基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)-8-氰基-1,2,4,5-四氢-3H-苯并[d]氮杂卓-3-羧酸叔丁酯(0.04g,0.07mmol)和MeCN(5mL)，滴加TMSI(0.03g,0.14mmol)，氮气保护，室温反应1h终止。反应液倒入饱和碳酸氢钠水溶液中，DCM萃取，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得黄色固体0.02g，收率为54％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.68(d,J＝2.5Hz,1H),8.56(d,J＝2.5Hz,1H),7.98(s,1H),7.53(s,1H),7.45(s,1H),4.84(d,J＝5.4Hz,2H),3.17(s,3H),3.15(s,3H),3.11–3.06(m,4H),3.04–2.95(m,4H)。MS(ESI)m/z:514.4[M+H]+。
实施例65：N-(3-(((5-氯-2-((8-氰基-3-(2-羟乙基)-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓-7-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺
Figure BDA0004006585300001852
步骤1-4合成路线参考实施例64合成方法；
步骤5:N-(3-(((5-氯-2-((8-氰基-3-(2-羟乙基)-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓-7-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001853
室温下，依次向单口瓶中加入N-(3-(((5-氯-2-((8-氰基-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓-7-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.04g,0.07mmol)，2-溴乙醇(0.02g,0.18mmol)，K2CO3(0.05g，0.36mmol)和MeCN(4mL)。氮气保护，65℃反应24h终止。反应液浓缩，DCM稀释，水洗，有机相经干燥、过滤、浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得黄色固体0.03g，收率71％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.67(d,J＝2.5Hz,1H),8.56(d,J＝2.4Hz,1H),7.98(s,1H),7.49(s,1H),7.40(s,1H),4.84(d,J＝5.4Hz,2H),3.70–3.59(m,2H),3.16(s,1H),3.15(s,6H),3.13–2.57(m,10H)。MS(ESI)m/z:558.4[M+H]+。
实施例66：N-(3-(((5-氯-2-((3,4-二氢-2H-螺[苯并[f][1,4]氧氮杂卓-5,1'-环丙烷]-8-基]氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺
Figure BDA0004006585300001861
步骤1:2-(2-溴-4-硝基苯基)乙腈的合成
Figure BDA0004006585300001862
室温下，依向单口瓶中加入钠氢(13.60g，340.00mmol)，DMSO(250mL)，0℃下缓慢滴加氰乙酸乙酯(35.50g，340.00mmol)，反应1h后分批次加入2-溴-1-氟-4-硝基苯(25.0g，113.63mmol)，室温反应2h终止。反应液采用EA萃取，水洗，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，得棕色浓缩物，用二氧六环(250mL)和水(50mL)溶解，加入浓盐酸(50mL)，100℃反应16h终止，浓缩，残留物采用EA萃取，水洗，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，PE打浆得浅棕色固体粗品34.00g，反应未做进一步纯化直接用于下一步。MS(ESI)m/z:239.0[M-H]-。
步骤2:1-(2-溴-4-硝基苯基)环丙烷-1-腈的合成
Figure BDA0004006585300001863
室温下，依次向单口瓶中加入2-(2-溴-4-硝基苯基)乙腈(68.00g，170.00mmol)，1,2-二溴乙烷(95.00g，510.00mmol)，四丁基溴化铵(55.00g，170.00mmol)，并用乙腈(400mL)溶解，70℃反应5h终止。冷却室温，浓缩，得残留物采用EA萃取，依次用水、稀酸、饱和食盐水洗涤，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得黄色固体15.10g，两步收率56％。
步骤3:1-(2-溴-4-硝基苯基)环丙烷-1-甲酰胺合成
Figure BDA0004006585300001871
室温下，依次向单口瓶中加入1-(2-溴-4-硝基苯基)环丙烷-1-腈(15.10g，56.54mmol)，并用DMSO(100mL)溶解，再加入30％过氧化氢(64.10g，565.40mmol)和碳酸钾(15.61g，113.08mmol)，室温反应2h终止。加水(300mL)，过滤，得棕色固体12.0g，收率74％。MS(ESI)m/z:285.2[M+H]+。
步骤4:1-(2-溴-4-硝基苯基)环丙烷-1-胺的合成
Figure BDA0004006585300001872
室温下，依次向单口瓶中加入1-(2-溴-4-硝基苯基)环丙烷-1-甲酰胺(12.00g，42.09mmol)，并用叔丁醇(200mL)溶解，再加入8％次氯酸钠水溶液(45.0g，42.09
mmol)，分批次加入氢氧化钠(5.05g，126.24mmol)，室温反应16h终止。过滤，浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得棕色固体6.94g，收率64％。MS(ESI)m/z:257.2
[M+H]+。
步骤5:(1-(2-溴-4-硝基苯基)环丙基)甘氨酸甲酯的合成
Figure BDA0004006585300001873
室温下，依次向单口瓶中加入1-(2-溴-4-硝基苯基)环丙烷-1-胺(6.94g，27.00mmol)，溴乙酸甲酯(4.54g，29.70mmol)，碳酸铯(11.40g，35.10mmol)，并用DMF(120mL)溶解，80℃反应16h终止。反应液加水稀释，EA萃取，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得棕色油状物2.20g，收率25％。MS(ESI)m/z:329.3[M+H]+。
步骤6:2-((1-(2-溴-4-硝基苯基)环丙基)氨基)乙基-1-醇的合成
Figure BDA0004006585300001881
室温下，向单口瓶中加入(1-(2-溴-4-硝基苯基)环丙基)甘氨酸甲酯(2.00g，6.08mmol)，并用THF(30mL)溶解，0℃下加入氢化铝锂(0.24g，6.08mmol)反应0.5h终止。淬灭，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得棕色油状物0.65g，收率36％。MS(ESI)m/z:301.2[M+H]+。
步骤7:8-硝基-3,4-二氢-2H-螺[苯并[f][1,4]氧氮杂卓-5,1'-环丙烷]的合成
Figure BDA0004006585300001882
室温下，依次向单口瓶中加入2-((1-(2-溴-4-硝基苯基)环丙基)氨基)乙基-1-醇(0.65g，2.16mmol)，碳酸钾(0.60g，4.32mmol)，碘化亚铜(0.004g)，并用异丙醇(100mL)溶解，85℃反应16h终止。浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得棕色油状物0.10g，收率21％。MS(ESI)m/z:221.3[M+H]+。
步骤8:3,4-二氢-2H-螺[苯并[f][1,4]氧氮杂卓-5,1'-环丙烷]-8-胺的合成
Figure BDA0004006585300001883
室温下，依次向单口瓶中加入8-硝基-3,4-二氢-2H-螺[苯并[f][1,4]氧杂氮杂-5,1'-环丙烷](0.09g，0.39mmol)，Pd/C(0.01g)，并用THF(10mL)溶解，氢气氛围，30℃反应3h终止。过滤，浓缩，得棕色油状物粗品0.08g，未经进一步纯化直接用于下一步。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.91(d,J＝8.2Hz,1H),6.40(d,J＝2.4Hz,1H),6.31(dd,J＝8.2,2.4Hz,1H),4.05(t,J＝4.2Hz,2H),3.23(t,J＝4.2Hz,2H),1.01–0.92(m,4H)。MS(ESI)m/z:191.3[M+H]+。
步骤9:N-(3-(((5-氯-2-((3,4-二氢-2H-螺[苯并[f][1,4]氧氮杂卓-5,1'-环丙烷]-8-基]氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺
Figure BDA0004006585300001891
室温下，依次向单口瓶中加入3,4-二氢-2H-螺[苯并[f][1,4]氧杂氮杂-5,1'-环丙烷]-8-胺(0.03g，0.13mmol)，N-(3-(((2,5-二氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.05g，0.14mmol)，樟脑磺酸(0.06g，0.26mmol)，并用异丙醇(10mL)溶解。氮气保护，85℃反应20h终止。冷却至室温，浓缩，加水，碱化，过滤，得棕色固体，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得白色固体0.02g，两步收率34％。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.69(d,J＝2.5Hz,1H),8.58(d,J＝2.6Hz,1H),8.01(s,1H),7.29–7.06(m,2H),6.88(d,J＝8.3Hz,1H),4.92(d,J＝5.3Hz,2H),3.89(t,J＝5.3Hz,2H),3.24(s,3H),3.21(s,3H),2.95(t,J＝5.3Hz,2H),0.80(s,4H)。MS(ESI)m/z:517.4[M+H]+。
实施例67：N-(3-(((5-氯-2-((7-((2-羟乙基)(甲基)氨基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001892
步骤1：2-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)-N-甲基-1-乙胺的合成
Figure BDA0004006585300001893
室温下，依次向单口瓶中加入2-(甲氨基)-乙醇(2.00g，26.63mmol)，咪唑(2.72g,39.95mmol)，并用DCM(50mL)溶解，再加入叔丁基二苯基氯硅烷(8.30g，31.95mmol)，反应3h终止。反应液采用DCM萃取，水洗，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得无色透明油状物4.50g，收率54％。
步骤2：N-(3-(((2-((7-((2-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)乙基)(甲基)氨基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)-5-氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001901
室温下，依次向单口瓶中加入N-(3-(((5-氯-2-((7-氧代-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.30g，0.60mmol)，2-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)-N-甲基-1-乙胺(0.28g，0.90mmol)，并用THF(20mL)和冰醋酸0.2mL)溶解，室温反应1h后，加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.63g，2.99mmol)，升温45℃反应20h终止。反应液EA萃取，水和饱和食盐水洗，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得白色固体0.26g，收率54％。MS(ESI)m/z:799.7[M+H]+。
步骤3：N-(3-(((5-氯-2-((7-((2-羟乙基)(甲基)氨基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001902
室温下，向单口瓶中加N-(3-(((2-((7-((2-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)乙基)(甲基)氨基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)-5-氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.26g，0.33mmol)，并用DCM(5mL)溶解，室温下加入氯化氢乙醇溶液(4.0M，10mL)，反应24h终止。浓缩，DCM萃取，饱和碳酸钠水溶液和水洗，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得白色固体0.88g，收率47％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.70(d,J＝2.5Hz,1H),8.58(d,J＝2.5Hz,1H),7.99(s,1H),7.42–7.33(m,1H),7.29(dd,J＝8.0,2.3Hz,1H),6.91(d,J＝8.2Hz,1H),4.93(d,J＝5.3Hz,2H),3.66–3.48(m,2H),3.45–3.38(m,2H),3.24(s,3H),3.20(s,3H),2.72–2.55(m,5H),2.34(s,3H),2.17–2.01(m,2H),1.21–1.09(m,2H)。MS(ESI)m/z:561.4[M+H]+。
实施例68a和68b：(R)-N-(3-(((5-氯-2-((7-((2-羟乙基)(甲基)氨基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺
或(S)-N-(3-(((5-氯-2-((7-((2-羟乙基)(甲基)氨基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺
Figure BDA0004006585300001911
步骤1:按实施例67方法合成N-(3-(((5-氯-2-((7-((2-羟乙基)(甲基)氨基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺。
步骤2:(R)-N-(3-(((5-氯-2-((7-((2-羟乙基)(甲基)氨基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺或(S)-N-(3-(((5-氯-2-((7-((2-羟乙基)(甲基)氨基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的制备
Figure BDA0004006585300001912
将N-(3-(((5-氯-2-((7-((2-羟乙基)(甲基)氨基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.14g，0.25mmol)进行手性柱拆分制备，得产物绝对构型A峰(实施例68a，保留时间2.981min，323-1212)，白色固体0.05g，收率35％。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.70(d,J＝2.5Hz,1H),8.58(d,J＝2.5Hz,1H),7.99(s,1H),7.32(d,J＝1.8Hz,1H),7.26(dd,J＝7.6,2.0Hz,1H),6.87(d,J＝8.1Hz,1H),4.92(d,J＝5.3Hz,2H),3.44–3.38(m,2H),3.23(s,3H),3.20(s,3H),2.77–2.51(m,5H),2.47–2.39(m,2H),2.15(s,3H),2.00–1.89(m,2H),1.23–1.08(m,2H)。MS(ESI)m/z:561.4[M+H]+。
得产物绝对构型B峰(实施例68b，保留时间4.992min，323-1213)，白色固体0.06g，收率43％。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.70(d,J＝2.5Hz,1H),8.58(d,J＝2.5Hz,1H),7.99(s,1H),7.32(d,J＝1.8Hz,1H),7.26(dd,J＝7.6,2.0Hz,1H),6.87(d,J＝8.2Hz,1H),4.92(d,J＝5.3Hz,2H),3.44–3.38(m,2H),3.23(s,3H),3.20(s,3H),2.71–2.54(m,5H),2.47–2.39(m,2H),2.14(s,3H),2.01–1.86(m,2H),1.23–1.12(m,2H)。MS(ESI)m/z:561.4[M+H]+
分离制备方法：
仪器：Gilson GX-281
色谱柱：ChiralPak ID,250×20mm I.D.,5μm
流动相：A为(Hex:DCM＝3:1)(0.2％IPAmine)；B为ETOH
波长：254nm
流速：20ml/min
溶剂：EtOH:DCM＝1:1
梯度条件：B 50％
循环时间：34min
柱温：25℃
分离检测方法：
仪器：SHIMADZU LC-20
色谱柱：ChiralPak ID,4.6×50mm I.D.,3μm
流动相：A为(Hex:DCM＝3:1)(0.5％IPAmine)；B为ETOH
波长：254nm
柱温：25℃
流速：1mL/min
进样量:5μL
进样浓度：0.01mg/mL
溶剂：ETOH
梯度条件：B 50％
运行时长：7min
保留时间：2.981min,4.992min
实施例69：N-(3-((5-氯-2-((3-(3-羟基-2-(羟甲基)-2-甲基丙基)-2,3,4,5-四氢螺环[苯并[d]氮杂卓-1,1'-环丙烷]-7-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001921
步骤1～步骤13参考实施例45；步骤14～步骤15参考实施例50；
步骤16:N-(3-((5-氯-2-((3-((2,2,5-三甲基-1,3-二氧六环-5-基)甲基)-2,3,4,5-四氢螺环[苯并[d]氮杂卓-1,1'-环丙烷]-7-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001931
室温下，依次向单口瓶中加入N-(3-((5-氯-2-((2,3,4,5-四氢螺环[苯并[d]氮杂卓-1,1'-环丙烷]-7-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺盐酸盐(0.14g，0.27mmol)，Na2CO3(0.06g，0.54mmol)和EtOH(10mL)，15℃反应2h终止，过滤，滤液浓缩，加入2,2,5-三甲基-1,3-二氧六环-5-甲醛(0.09g，0.54mmol)，AcOH(0.04g，0.54mmol)和THF(10mL)，70℃反应16h后加入NaBH(OAc)3(0.13g，0.54mmol)，70℃反应1h后终止。加水稀释，EA萃取，有机相合并，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得黄色固体0.06g，收率41％，MS(ESI)m/z:657.5[M+H]+。
步骤17:N-(3-((5-氯-2-((3-(3-羟基-2-(羟甲基)-2-甲基丙基)-2,3,4,5-四氢螺环[苯并[d]氮杂卓-1,1'-环丙烷]-7-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001932
室温下，依次向单口瓶中加入N-(3-((5-氯-2-((3-((2,2,5-三甲基-1,3-二氧六环-5-基)甲基)-2,3,4,5-四氢螺环[苯并[d]氮杂卓-1,1'-环丙烷]-7-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.06g，0.09mmol)和HCl/EtOH(5mL)，15℃反应1h终止。浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得白色固体0.01g，收率18％，1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.69(d,J＝2.5Hz,1H),8.58(d,J＝2.4Hz,1H),7.98(s,1H),7.31–7.25(m,2H),6.90(d,J＝8.1Hz,1H),4.91(d,J＝5.2Hz,2H),3.32–3.25(m,4H),3.21(s,3H),3.18(s,3H),2.87–2.79(m,2H),2.75–2.58(m,2H),2.57–2.50(m,2H),2.42–2.26(m,2H),0.92–0.85(m,2H),0.82–0.76(m,2H),0.75(s,3H)。MS(ESI)m/z:617.5[M+H]+。
实施例70：N-(3-((5-氯-2-((3-((3-(羟甲基)氧代环丁烷-3-基)甲基)-2,3,4,5-四氢螺环[苯并[d]氮杂卓-1,1'-环丙烷]-7-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001941
步骤1～步骤13参考实施例45；
步骤14:N-(3-((5-氯-2-((3-((3-(羟甲基)氧代环丁烷-3-基)甲基)-2,3,4,5-四氢螺环[苯并[d]氮杂卓-1,1'-环丙烷]-7-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001942
室温下，向单口瓶中加入N-(3-((5-氯-2-((2,3,4,5-四氢螺[苯并[d]氮杂卓-1,1'-环丙烷]-7-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺盐酸盐(0.15g，0.29mmol)，3-溴甲基-3-羟甲基-1-氧杂环丁烷(0.11g，0.58mmol)，K2CO3(0.16g，1.16mmol)和乙腈(10mL)，80℃反应48h终止，将反应冷却至室温，加水稀释，EA萃取，有机相合并，干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得白色固体产物0.05g，收率31％，1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.70(d,J＝2.5Hz,1H),8.59(d,J＝2.5Hz,1H),7.99(s,1H),7.39–7.26(m,2H),6.91(d,J＝8.2Hz,1H),4.92(d,J＝5.2Hz,2H),4.33–4.23(m,4H),3.75–3.62(m,2H),3.22(s,3H),3.19(s,3H),2.87–2.74(m,2H),2.68–2.53(m,2H),2.48–2.35(m,2H),2.33–2.14(m,2H),0.89–0.68(m,4H)。MS(ESI)m/z:615.39[M+H]+。
实施例71：N-(3-((5-氯-2-((3-((3-(甲氧基甲基)氧代环丁烷-3-基)甲基)-2,3,4,5-四氢螺环[苯并[d]氮杂卓-1,1'-环丙烷]-7-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001943
步骤1～步骤13参考实施例45；
步骤14:3-溴甲基-3-甲氧基甲基-1-氧杂环丁烷的合成
Figure BDA0004006585300001951
室温下，依次向单口瓶中加入3-溴甲基-3-羟甲基-1-氧杂环丁烷(1.00g，5.52mmol)和THF(20mL)，0℃下加入NaH(0.55g，13.81mmol，60％)，反应0.5h后滴加碘甲烷(3.14g，22.09mmol)，室温反应2h后终止，淬灭，EA萃取，有机相合并，无水Na2SO4干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得无色透明液体0.64g，收率59％，1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ4.35–4.28(m,4H),3.83(s,2H),3.60(s,2H),3.33(s,3H)。
步骤15:N-(3-((5-氯-2-((3-((3-(甲氧基甲基)氧代环丁烷-3-基)甲基)-2,3,4,5-四氢螺环[苯并[d]氮杂卓-1,1'-环丙烷]-7-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001952
室温下，依次向单口瓶中加入N-(3-((5-氯-2-((2,3,4,5-四氢螺环[苯并[d]氮杂卓-1,1'-环丙烷]-7-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺盐酸盐(0.20g，0.39mmol)，3-溴甲基-3-甲氧基甲基-1-氧杂环丁烷(0.15g，0.78mmol)，K2CO3(0.21g，1.55mmol)和MeCN(10mL)，80℃反应36h终止，将反应冷却至室温，加水稀释，EA萃取，有机相合并，无水Na2SO4干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得白色固体产物0.05g，收率52％，1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.70(d,J＝2.5Hz,1H),8.59(d,J＝2.5Hz,1H),7.99(s,1H),7.32(d,J＝2.3Hz,1H),7.27(dd,J＝8.5Hz,1H),6.90(d,J＝8.3Hz,1H),4.92(d,J＝5.2Hz,2H),4.31(d,J＝5.8Hz,2H),4.26(d,J＝5.8Hz,2H),3.56(s,2H),3.34(s,3H),3.22(s,3H),3.19(s,3H),2.83–2.79(m,2H),2.56(s,2H),2.42–2.38(m,2H),2.21(s,2H),0.84–0.80(m,2H),0.78–0.74(m,2H)。MS(ESI)m/z:629.47[M+H]+。
实施例72：N-(3-(((5-氯-2-((1-甲基-4-氧-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓-7-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001961
步骤1：2-(2-碘-5-甲氧基苯基)乙酸的合成
Figure BDA0004006585300001962
室温下，依次向单口瓶中加入3-甲氧基苯乙酸(10.00g，60.18mmol)，I2(15.27g，60.18mmol)，PhI(OAc)2(19.38g，60.18mmol)，Pd(OAc)2(0.68g，3.01mmol)和DMF(100mL)。氮气保护，避光室温反应16h终止。EA稀释，水洗，饱和食盐水洗，有机相干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得紫红色固体粗品17.79g。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.70(d,J＝8.7Hz,1H),7.01(d,J＝3.0Hz,1H),6.67(dd,J＝8.7,3.0Hz,1H),3.74(s,3H),3.68(s,2H)。
步骤2:N-烯丙基-2-(2-碘-5-甲氧基苯基)乙酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001963
室温下，依次向单口瓶中加入2-(2-碘-5-甲氧基苯基)乙酸(45.50g，155.78mmol)，丙烯胺盐酸盐(16.03g，171.36mmol)，TBTU(65.03g，202.52mmol)，DIEA(100.68g，778.92mmol)，DMAP(3.81g，31.16mmol)和DMF(300mL)。氮气保护，室温反应16h终止。EA稀释，水洗，饱和食盐水洗，有机相干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得白色固体34.00g，两步收率66％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.68(d,J＝8.7Hz,1H),6.94(d,J＝3.1Hz,1H),6.64(dd,J＝8.7,3.1Hz,1H),5.86–5.76(m,1H),5.20–5.15(m,1H),5.08–5.04(m,1H),3.73(s,3H),3.72–3.68(m,2H),3.57(s,2H)。MS(ESI)m/z:332.1[M+H]+。
步骤3：8-甲氧基-5-亚甲基-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[d]氮杂卓-2-酮的合成
Figure BDA0004006585300001971
室温下，依次向单口瓶中加入N-烯丙基-2-(2-碘-5-甲氧基苯基)乙酰胺(34.00g，102.67mmol)，PPh3(2.70g，10.27mmol)，Pd(OAc)2(1.15g，5.13mmol)，AcOK(30.23g，308.02mmol)，TBAB(33.10g，102.67mmol)和DMF(600mL)。氮气保护，90℃反应16h终止。EA稀释，水洗，饱和食盐水洗，有机相干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得黄色油8.32g，收率为40％。MS(ESI)m/z:204.3[M+H]+。
步骤4：8-甲氧基-5-甲基-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[d]氮杂卓-2-酮的合成
Figure BDA0004006585300001972
室温下，依次向单口瓶中加入8-甲氧基-5-亚甲基-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[d]氮杂卓-2-酮(8.32g，40.94mmol)，Pd/C(4.00g)和EtOH(100mL)。氢气保护，室温反应24h终止。反应液过滤，漂洗，合并滤液，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得无色油1.17g，收率为14％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.12(d,J＝8.5Hz,1H),6.77(dd,J＝8.5,2.8Hz,1H),6.68(d,J＝2.7Hz,1H),3.71(s,3H),3.68(s,2H),3.54–3.47(m,1H),3.23–3.16(m,1H),3.08–2.99(m,1H),1.16(d,J＝6.9Hz,3H)。MS(ESI)m/z:206.3[M+H]+。
步骤5：8-羟基-5-甲基-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[d]氮杂卓-2-酮的合成
Figure BDA0004006585300001973
0℃下，依次向四口瓶中加入8-甲氧基-5-甲基-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[d]氮杂卓-2-酮(1.17g，5.70mmol)和DCM(20mL)，缓慢滴加BBr3(5.72g，22.80mmol)。滴毕，氮气保护，0℃下反应1h终止。反应液淬灭，浓缩得到黄色油3.02g，经多次纯化得灰色固体0.53g，收率49％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ6.99(d,J＝8.4Hz,1H),6.60(dd,J＝8.4,2.6Hz,1H),6.46(d,J＝2.6Hz,1H),3.58(s,2H),3.51–3.44(m,1H),3.22–3.14(m,1H),3.01–2.96(m,1H),1.14(d,J＝6.9Hz,3H)。MS(ESI)m/z:192.4[M+H]+。
步骤6:1-甲基-4-氧代-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓-7-基三氟甲磺酸酯的合成
Figure BDA0004006585300001981
室温下，依次向单口瓶中加入8-羟基-5-甲基-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[d]氮杂卓-2-酮(0.48g，2.51mmol)，N-苯基双(三氟甲磺酰亚胺)(1.79g，5.02mmol)，TEA(0.76g，7.53mmol)和DCM(20mL)。氮气保护，室温反应5h终止。浓缩反应液，柱层析纯化(EA/PE体系)得白色固体粗品1.07g。MS(ESI)m/z:324.3[M+H]+。
步骤7:8-((二苯亚甲基)氨基)-5-甲基-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[d]氮杂卓-2-酮的合成
Figure BDA0004006585300001982
室温下，依次向单口瓶中加入二苯甲酮亚胺(1.02g，4.10mmol)，1-甲基-4-氧代-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓-7-基三氟甲磺酸酯(1.02g，3.16mmol)，Pd2(dba)3(0.29g，0.32mmol)，Xantphos(0.37g，0.63mmol)，碳酸铯(2.57g，7.89mmol)和1,4-二氧六环(20mL)。氮气保护，升温至110℃反应16h终止。冷却至室温，EA稀释，水洗，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得淡黄色固体0.30g，两步收率27％。MS(ESI)m/z:355.4[M+H]+。
步骤8:8-氨基-5-甲基-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[d]氮杂卓-2-酮的合成
Figure BDA0004006585300001983
室温下，依次向单口瓶中加入8-((二苯亚甲基)氨基)-5-甲基-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[d]氮杂卓-2-酮(0.25g，0.71mmol)，甲酸铵(0.44g，7.05mmol)和Pd/C(0.25g)，THF(12mL)和EA(6mL)。氮气保护，升温至80℃反应16h终止。冷却至室温，过滤，水漂洗，滤液浓缩得白色固体粗品0.24g。MS(ESI)m/z:191.4[M+H]+。
步骤9:N-(3-(((5-氯-2-((1-甲基-4-氧-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓-7-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001984
室温下，依次向单口瓶中加入N-(3-(((2,5-二氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.10g，0.28mmol)，8-氨基-5-甲基-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[d]氮杂卓-2-酮(0.20g粗品，0.28mmol)，樟脑磺酸(0.13g，0.55mmol)和异丙醇(10mL)。氮气保护，升温至85℃反应16h终止。冷却，浓缩反应液，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得白色固体0.02g，两步收率20％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.70(d,J＝2.5Hz,1H),8.57(d,J＝2.5Hz,1H),8.00(s,1H),7.43(dd,J＝8.4,2.3Hz,1H),7.22(d,J＝2.3Hz,1H),6.98(d,J＝8.6Hz,1H),4.92(d,J＝5.3Hz,2H),3.57(s,2H),3.51–3.45(m,1H),3.22(s,3H),3.19(s,3H),3.21–3.14(m,1H),3.02–2.98(m,1H),1.16(d,J＝6.9Hz,3H)。MS(ESI)m/z:517.4[M+H]+。
实施例73:N-(3-((5-氯-2-((7-((1,3-二羟丙烷-2-基)氨基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300001991
步骤1～步骤7参考实施例33；
步骤8:2,2,10,10-四甲基-3,3,9,9-四苯基-4,8-二氧基-3,9-二硅烷-6-胺的合成
Figure BDA0004006585300001992
室温下，依次向单口瓶中加入丝氨醇(0.40g，4.40mmol)，咪唑(1.05g，15.40mmol)和叔丁基二苯基氯硅烷(2.78g，10.11mmol)并用DCM(30mL)溶解。氮气保护，室温反应18h终止。反应液浓缩，柱层析纯化(EA/PE)得无色油1.4g，收率56.5％。MS(ESI)m/z:568.6[M+H]+。
步骤9:N-(3-((5-氯-2-((7-((2,2,10,10-四甲基-3,3,9,9-四苯基-4,8-二氧基-3,9-二硅烷基-6-基)氨基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300002001
室温下，依次向单口瓶中加入2,2,10,10-四甲基-3,3,9,9-四苯基-4,8-二氧基-3,9-二硅烷-6-胺(0.17g，0.30mmol)，N-(3-((5-氯-2-((7-氧代-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.15g，0.30mmol)，醋酸(催化量)和三乙酰氧基硼氢化钠(0.10g，0.48mmol)并用DCM(10mL)溶解。氮气保护，室温反应16h终止。浓缩反应液，柱层析纯化(EA/PE体系)得白色固体0.21g，两步收率66％。MS(ESI)m/z:1053.4[M+H]+。
步骤10:N-(3-((5-氯-2-((7-((1,3-二羟丙烷-2-基)氨基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300002002
室温下，依次向单口瓶中加入N-(3-((5-氯-2-((7-((2,2,10,10-四甲基-3,3,9,9-四苯基-4,8-二氧基-3,9-二硅烷基-6-基)氨基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.21g，0.20mmol)和浓盐酸(5mL)并用甲醇(5mL)溶解。氮气保护，室温反应3h终止。浓缩，乙醇(10mL)溶解，碳酸钠(0.2g)游离。过滤，浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得白色固体产物0.06g，收率52％。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.69(d,J＝2.5Hz,1H),8.58(d,J＝2.5Hz,1H),7.99(s,1H),7.38(d,J＝6.7Hz,1H),7.30(d,J＝8.1Hz,1H),6.91(d,J＝8.2Hz,1H),4.93(d,J＝5.4Hz,2H),3.66(d,J＝5.1Hz,4H),3.25–3.23(m,4H),3.20(s,3H),3.25–3.24(m,1H),2.72–2.56(m,4H),2.35–2.31(m,2H),1.43–1.35(m,2H)。MS(ESI)m/z:577.4[M+H]+。
实施例74:N-(3-(((5-氯-2-((7-(异丙基(2-羟乙基)氨基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基]氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300002011
步骤1:N-异丙基-2-硝基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-胺的合成
Figure BDA0004006585300002012
/>
室温下，依次向单口瓶中加入2-硝基-5,6,8,9-四氢-7H-苯并[7]轮烯-7-酮(0.15g，0.73mmol)，异丙胺(0.06g，1.10mmol)，并用THF(10mL)溶解，室温下加入冰乙酸(一滴)，30℃反应1h，加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.31g，1.46mmol)继续反应3h终止。反应液浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得淡黄色固体0.16g，收率88％。MS(ESI)m/z:249.4[M+H]+。
步骤2:N-异丙基-N-(2-硝基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)甘氨酸甲酯的合成
Figure BDA0004006585300002013
室温下，依次向单口瓶中加入N-异丙基-2-硝基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-胺(0.16g，0.64mmol)，溴乙酸甲酯(0.20g，1.29mmol)，碳酸铯(0.42g，1.29mmol)并用DMF(10mL)溶解，130℃反应8h终止。反应液EA萃取，水和饱和食盐水洗，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得淡黄色油状物0.05g，收率24％。MS(ESI)m/z:321.4[M+H]+。
步骤3:N-(2-氨基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)-N-异丙基甘氨酸甲酯的合成
Figure BDA0004006585300002021
室温下，依次向单口瓶中加N-异丙基-N-(2-硝基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)甘氨酸甲酯(0.05g，0.16mmol)，Pd/C(0.01g)，并用THF(10mL)溶解，氢气氛围下25℃反应3h终止。过滤，浓缩，得淡黄色油状物粗品0.04g，产物未经进一步纯化直接用于下一步。MS(ESI)m/z:291.4[M+H]+。
步骤4:N-(2-((5-氯-4-((((3-(N-甲基甲磺酰胺基)吡嗪-2-基)甲基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)-N-异丙基甘氨酸甲酯的合成
Figure BDA0004006585300002022
室温下，依次向单口瓶中加入N-(2-氨基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)-N-异丙基甘氨酸甲酯(0.04g，0.14mmol)，N-(3-(((2,5-二氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.06g，0.15mmol)，樟脑磺酸(0.06g，0.28mmol)，并用异丙醇(15mL)溶解。氮气保护，85℃反应20h终止。冷却至室温，反应液采用EA萃取，饱和碳酸钠和饱和食盐水洗涤，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得白色固体0.04g，两步收率41％。MS(ESI)m/z:617.4[M+H]+。
步骤5:N-(3-(((5-氯-2-((7-(异丙基(2-羟乙基)氨基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基]氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300002023
室温下，依次向单口瓶中加入N-(2-((5-氯-4-((((3-(N-甲基甲磺酰胺基)吡嗪-2-基)甲基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)-N-异丙基甘氨酸甲酯(0.04g，0.06mmol)，用THF(10mL)溶解，0℃下加入氢化铝锂(0.01g，0.06mmol)，室温下反应20min终止。淬灭后，经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得类白固体产物0.02g，收率55％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.70(d,J＝2.5Hz,1H),8.58(d,J＝2.5Hz,1H),7.99(s,1H),7.35(s,1H),7.30(d,J＝8.2Hz,1H),6.90(d,J＝8.2Hz,1H),4.93(d,J＝5.3Hz,2H),3.66–3.41(m,2H),3.24(s,3H),3.23–3.20(m,1H),3.20(s,3H),2.88–2.51(m,7H),2.23–1.80(m,2H),1.35–0.93(m,8H).MS(ESI)m/z:589.5[M+H]+。
实施例75:N-(3-(((5-氯-2-((7-(环丙基(2-羟乙基)氨基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基]氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300002031
步骤1:N-环丙基-2-硝基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-胺的合成
Figure BDA0004006585300002032
室温下，依次向单口瓶中加入2-硝基-5,6,8,9-四氢-7H-苯并[7]轮烯-7-酮(0.15g，0.73mmol)，环丙胺(0.05g，0.95mmol)，并用THF(50mL)溶解，再加入冰乙酸(催化量)，升温30℃反应1h，加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.31g，1.46mmol)继续反应3h终止。反应液浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得淡黄色固体0.18g，收率99％。MS(ESI)m/z:247.2[M+H]+。
步骤2:N-环丙基-N-(2-硝基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)甘氨酸甲酯的合成
Figure BDA0004006585300002033
室温下，依次向单口瓶中加入N-环丙基-2-硝基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-胺(0.10g，0.41mmol)，溴乙酸甲酯(0.12g，0.81mmol)，碳酸铯(0.27g，0.81mmol)并用DMF(5mL)溶解，90℃反应5h终止。反应液EA萃取，水洗，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，得粗品棕色油状物0.09g，产物未经进一步纯化直接用于下一步。MS(ESI)m/z:319.4[M+H]+。
步骤3：N-(2-氨基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)-N-环丙基甘氨酸甲酯的合成
Figure BDA0004006585300002041
室温下，依次向单口瓶中加N-环丙基-N-(2-硝基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)甘氨酸甲酯(0.09g，0.28mmol)，10％Pd/C(0.01g)，并用THF(20mL)溶解，氢气氛围下25℃反应3h终止。过滤，浓缩，得粗品淡黄色油状物0.08g，产物未经进一步纯化直接用于下一步。MS(ESI)m/z:289.4[M+H]+。
步骤4：甲基N-(2-((5-氯-4-((((3-(N-甲基甲基磺酰胺基)吡嗪-2-基)甲基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)-N-环丙基甘氨酸酯的合成
Figure BDA0004006585300002042
室温下，依次向单口瓶中加入N-(2-氨基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)-N-环丙基甘氨酸甲酯(0.08g，0.28mmol)，N-(3-(((2,5-二氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.11g，0.31mmol)，樟脑磺酸(0.13g，0.56mmol)，并用异丙醇(15mL)溶解。氮气保护，升温至85℃反应20h终止。冷却至室温，反应液EA萃取，饱和碳酸钠洗涤，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得白色固体0.05g，三步收率29％。MS(ESI)m/z:615.4[M+H]+。
步骤5：N-(3-(((5-氯-2-((7-(环丙基(2-羟乙基)氨基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基]氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300002051
室温下，依次向单口瓶中加入甲基N-(2-((5-氯-4-((((3-(N-甲基甲基磺酰胺基)吡嗪-2-基)甲基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)-N-环丙基甘氨酸酯(0.05g，0.08mmol)，用THF(10mL)溶解，0℃下加入氢化铝锂(0.01g，0.08mmol)，室温下反应20min终止。淬灭后，经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得类白固体产物0.04g，收率53％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.70(d,J＝2.5Hz,1H),8.58(d,J＝2.5Hz,1H),7.99(s,1H),7.32(d,J＝2.2Hz,1H),7.28(dd,J＝8.2,2.2Hz,1H),6.88(d,J＝8.1Hz,1H),4.93(d,J＝5.3Hz,2H),3.41–3.37(m,2H),3.23(s,3H),3.20(s,3H),2.84–2.75(m,1H),2.69–2.53(m,6H),2.02–1.94(m,3H),1.32–1.25(m,2H),0.44–0.36(m,2H),0.33–0.25(m,2H).MS(ESI)m/z:587.4[M+H]+。
实施例76:N-(3-(((5-氯-2-((7-((2,2-二氟乙基)(2-羟乙基)氨基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300002052
步骤1:N-(2,2-二氟乙基)-2-硝基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-胺的合成
Figure BDA0004006585300002053
室温下，依次向单口瓶中加入2-硝基-5,6,8,9-四氢-7H-苯并[7]轮烯(0.30g，1.50mmol)，2，2-二氟乙胺(0.21g，2.70mmol)，醋酸(催化量)和三乙酰氧基硼氢化钠(0.78g，3.75mmol)，并用DCM(10mL)溶解。室温反应16h终止。反应液浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得黄色固体0.41g，粗品未经进一步纯化直接用于下一步。MS(ESI)m/z:271.4[M+H]+。
步骤2:N-(2,2-二氟乙基)-N-(2-硝基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)甘氨酸甲酯的合成
Figure BDA0004006585300002061
室温下，依次向单口瓶中加入N-(2,2-二氟乙基)-2-硝基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-胺(0.40g，1.48mmol)，溴乙酸甲酯(0.45g，2.96mmol)和碳酸铯(1.40g，4.44mmol)并用DMF(5mL)溶解。氮气保护，120℃反应16h终止。反应液EA萃取，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得淡黄色油状物0.20g，两步收率40％。MS(ESI)m/z:343.5[M+H]+。
步骤3:N-(2-氨基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)-N-(2,2-二氟乙基)甘氨酸甲酯的合成
Figure BDA0004006585300002062
室温下，依次向单口瓶中加入N-(2,2-二氟乙基)-N-(2-硝基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)甘氨酸甲酯(0.19g，0.56mmol)，铁粉(0.09g，1.67mmol)和氯化铵(0.09g，1.67mmol)并用乙醇(5mL)溶解。氮气保护，60℃反应4h终止。反应液过滤，浓缩，得黄色固体0.21g，粗品未经进一步纯化直接用于下一步。MS(ESI)m/z:313.5[M+H]+。
步骤4:N-(2-((5-氯-4-((3-(N-甲基甲磺酰胺基)吡嗪-2-基)甲基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)-N-(2,2-二氟乙基)甘氨酸甲酯的合成
Figure BDA0004006585300002063
室温下，依次向单口瓶中加入N-(2-氨基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)-N-(2,2-二氟乙基)甘氨酸甲酯(0.21g，0.56mmol)，N-(3-(((2,5-二氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.22g，0.62mmol)和樟脑磺酸(0.26g，1.12mmol)并用异丙醇(5mL)溶解。氮气保护，85℃反应16h终止。反应液浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得淡黄色固体0.25g，两步收率70％。MS(ESI)m/z:639.6[M+H]+。
步骤5:N-(3-(((5-氯-2-((7-((2,2-二氟乙基)(2-羟乙基)氨基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300002071
室温下，向单口瓶中加入N-(2-((5-氯-4-((3-(N-甲基甲磺酰胺基)吡嗪-2-基)甲基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)-N-(2,2-二氟乙基)甘氨酸甲酯(0.25g，0.39mmol)，并用THF(5mL)溶解。0℃下缓慢加入氢化铝锂(0.04g，0.98mmol)，氮气保护，室温反应4h终止。淬灭，过滤，浓缩，厚制备板纯化(MeOH/DCM体系)得淡黄色固体0.04g，收率18％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.70(d,J＝2.5Hz,1H),8.58(d,J＝2.5Hz,1H),7.99(s,1H),7.32(d,J＝2.5Hz,1H),7.28(dd,J＝8.2,2.2Hz,1H),6.88(d,J＝8.1Hz,1H),6.03–5.73(m,1H),4.92(d,J＝5.3Hz,2H),3.41–3.35(m,2H),3.23(s,3H),3.19(s,3H),2.84–2.74(m,2H),2.72–2.52(m,7H),2.00–1.93(m,2H),1.16–1.11(m,2H)。MS(ESI)m/z:611.6[M+H]+。
实施例77:(3R)-N-(2)-((5-氯-4-((3-(N-甲基甲磺酰胺基)吡嗪-2-基)甲基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)-3-羟基-N-甲基吡咯烷-1-甲酰胺的合成
Figure BDA0004006585300002072
步骤1:(R)-3-((叔丁基二苯基硅基)氧基)吡咯烷-1-甲酰氯的合成
Figure BDA0004006585300002073
室温下，依次向单口瓶中加入(R)-3-((叔丁基二苯基硅基)氧基)吡咯烷(1.00g，3.07mmol)，吡啶(0.49g，6.14mmol)和DCM(20mL)，0℃下滴加三光气(0.46g，1.53mmol)，0℃反应3h终止。反应液水洗，DCM萃取，有机相合并，经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得无色透明油状物0.96g，收率80％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.69–7.54(m,4H),7.54–7.36(m,6H),4.56–4.42(m,1H),3.74–3.61(m,1H),3.57–3.52(m,1H),3.45–3.37(m,1H),3.34–3.26(m,1H),2.02–1.85(m,2H),1.02(d,J＝2.4Hz,9H)。
步骤2:N-甲基-2-硝基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-胺的合成
Figure BDA0004006585300002081
室温下，依次向单口瓶中加入2-硝基-5,6,8,9-四氢-7H-苯并[7]轮烯-7-酮(0.40g，1.95mmol)，甲胺盐酸盐(0.26g，3.90mmol)，AcOH(0.23g，3.90mmol)和DCM(20mL)，10℃反应3h后加入三乙酰氧基硼氢化钠(2.06g，9.75mmol)，10℃反应1h终止。反应液水洗，将水相浓缩，DCM打浆，过滤，得黄色固体0.52g，粗品未经进一步纯化直接用于下一步。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.02(d,J＝2.5Hz,1H),7.96(dd,J＝8.2,2.5Hz,1H),7.41(d,J＝8.2Hz,1H),3.09–2.98(m,2H),2.77–2.63(m,3H),2.31(s,3H),2.02–1.89(m,2H),1.36–1.19(m,2H)。MS(ESI)m/z:221.4[M+H]+。
步骤3:(3R)-3-((叔丁基二苯基硅基)氧基)-N-甲基-N-(2-硝基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)吡咯烷-1-甲酰胺的合成
Figure BDA0004006585300002082
室温下，依次向单口瓶中加入N-甲基-2-硝基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-胺(0.20g，0.76mmol)，(R)-3-((叔丁基二苯基硅基)氧基)吡咯烷-1-甲酰氯(0.60g，1.54mmol)，TEA(0.55g，5.45mmol)和THF(10mL)，70℃反应4h终止，EA稀释，水洗，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得黄色固体0.19g，两步收率31％。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.06(d,J＝2.4Hz,1H),7.99(dd,J＝8.2,2.4Hz,1H),7.63–7.58(m,4H),7.50–7.43(m,7H),4.39–4.35(m,1H),3.89–3.81(m,1H),3.60(q,J＝8.6Hz,1H),3.29–3.20(m,2H),3.06(dd,J＝10.9,2.3Hz,1H),2.99–2.81(m,4H),2.48(s,3H),1.95–1.88(m,1H),1.86–1.78(m,3H),1.55–1.44(m,2H),1.01(s,9H)。MS(ESI)m/z:572.6[M+H]+。
步骤4：(3R)-N-(2-氨基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)-3-((叔丁基二苯基硅基)氧基)-N-甲基吡咯烷-1-甲酰胺的合成
Figure BDA0004006585300002091
室温下，依次向单口瓶中加入(3R)-3-((叔丁基二苯基硅基)氧基)-N-甲基-N-(2-硝基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)吡咯烷-1-甲酰胺(0.15g，0.26mmol)，Pd/C(0.05g，10％)并用EA(10mL)，氢气氛围下，15℃反应16h终止。过滤反应液，浓缩，得白色固体0.12g，收率84％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.64–7.55(m,4H),7.52–7.40(m,6H),6.75(d,J＝7.9Hz,1H),6.37–6.32(m,1H),6.28(dd,J＝7.8,2.3Hz,1H),4.38–4.33(m,1H),3.75–3.67(m,1H),3.59(q,J＝8.6Hz,1H),3.27–3.18(m,2H),3.07–3.01(m,1H),2.63–2.51(m,4H),2.47(s,3H),1.86–1.76(m,3H),1.74–1.66(m,1H),1.48–1.35(m,2H),1.00(s,9H)。MS(ESI)m/z:542.5[M+H]+。
步骤5:(3R)-3-((叔丁基二苯基硅基)氧基)-N-(2-((5-氯-4-((3-(N-甲基甲磺酰胺基)吡嗪)-2-基)甲基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)-N-甲基吡咯烷-1-甲酰胺的合成
Figure BDA0004006585300002092
室温下，依次向单口瓶中加入N-(3-(((2,5-二氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.10g，0.30mmol)，(3R)-N-(2-氨基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)-3-((叔丁基二苯基硅基)氧基)-N-甲基吡咯烷-1-甲酰胺(0.10g，0.18mmol)，樟脑磺酸(0.14g，0.36mmol)和异丙醇(10mL)，80℃反应16h终止。浓缩反应液，EA溶解，水洗，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得白色固体0.10g，收率63％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.69(d,J＝2.5Hz,1H),8.57(d,J＝2.4Hz,1H),7.99(s,1H),7.63–7.56(m,4H),7.51–7.41(m,6H),7.33(d,J＝1.6Hz,1H),7.28(d,J＝8.5Hz,1H),6.89(d,J＝8.1Hz,1H),4.92(d,J＝5.3Hz,2H),4.38–4.33(m,1H),3.79–3.71(m,1H),3.59(q,J＝8.7Hz,1H),3.28–3.19(m,2H),3.23(s,3H),3.18(s,3H),3.04(d,J＝10.8Hz,1H),2.71–2.59(m,3H),2.47(s,3H),1.88–1.78(m,3H),1.75–1.68(m,1H),1.47–1.36(m,2H),1.00(s,9H)。MS(ESI)m/z:868.3[M+H]+。
步骤6:(3R)-N-(2-((5-氯-4-((3-(N-甲基甲磺酰胺基)吡嗪-2-基)甲基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)-3-羟基-N-甲基吡咯烷-1-甲酰胺的合成
Figure BDA0004006585300002101
室温下，依次向单口瓶中加入(3R)-3-((叔丁基二苯基硅基)氧基)-N-(2-((5-氯-4-((3-(N-甲基甲磺酰胺基)吡嗪-2-基)甲基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)-N-甲基吡咯烷-1-甲酰胺(0.10g，0.11mmol)和HCl/EtOH(5mL)，室温反应16h终止。浓缩反应液，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得白色固体产物0.06g，收率82％。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.69(d,J＝2.5Hz,1H),8.57(d,J＝2.4Hz,1H),7.99(s,1H),7.34(s,1H),7.28(dd,J＝8.1,1.6Hz,1H),6.89(d,J＝8.0Hz,1H),4.92(d,J＝5.3Hz,2H),4.23–4.19(m,1H),3.81–3.74(m,1H),3.45–3.40(m,2H),3.25–3.20(m,1H),3.23(s,3H),3.19(s,3H),3.05–3.01(m,1H),2.74–2.53(m,4H),2.51(s,3H),1.93–1.86(m,1H),1.85–1.77(m,2H),1.73–1.67(m,1H),1.49–1.39(m,2H)。MS(ESI)m/z:630.4[M+H]+。
实施例78:(2-((5-氯-4-((((3-(N-甲基甲基磺酰胺基)吡嗪-2-基)甲基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)(2-羟乙基)氨基甲酸甲酯
Figure BDA0004006585300002102
步骤1:N-(2-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)乙基)-2-硝基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-胺的合成
Figure BDA0004006585300002111
室温下，依次向单口瓶中加入2-硝基-5,6,8,9-四氢-7H-苯并[7]轮烯-7-酮(0.20g，0.97mmol)，2-((叔丁基二苯基硅基)氧基)乙烷-1-胺(0.44g,1.46mmol)，并用THF(15mL)溶解，加入冰乙酸(催化量)，30℃反应1h后，加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.41g,1.94mmol)继续反应2h终止。反应液浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得淡黄色油状物0.47g，收率98％。MS(ESI)m/z:489.5[M+H]+。
步骤2:(2-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)乙基)(2-硝基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)氨基甲酸甲酯的合成
Figure BDA0004006585300002112
室温下，依次向单口瓶中加入N-(2-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)乙基)-2-硝基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-胺(0.50g，1.46mmol)，DIPEA(0.28g，2.19mmol)，并用DCM(5mL)溶解，室温下加入氯甲酸甲酯(0.17g，1.75mmol)，反应2h终止。浓缩，EA萃取，水和饱和食盐水溶液洗，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，得淡黄色油状物粗品0.40g，粗品未进一步纯化直接用于下一步。
步骤3:(2-氨基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)(2-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)乙基)氨基甲酸甲酯的合成
Figure BDA0004006585300002113
室温下，依次向单口瓶中加入(2-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)乙基)(2-硝基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)氨基甲酸甲酯(0.40g，0.73mmol)，铁粉(0.61g，10.97mmol)，并用乙醇(20mL)溶解，室温下加入饱和氯化铵水溶液(5mL)，60℃反应0.5h终止。冷却，过滤，EA萃取，水和饱和食盐水溶液洗，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，得淡黄色油状物粗品0.36g，直接用于下一步反应。MS(ESI)m/z:517.5[M+H]+。
步骤4:(2-((5-氯-4-((((3-(N-甲基甲磺酰胺基)吡嗪-2-基)甲基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)(2-羟乙基)氨基甲酸甲酯
Figure BDA0004006585300002121
室温下，依次向单口瓶中加(2-氨基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)(2-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)乙基)氨基甲酸甲酯(0.36g，0.70mmol)，N-(3-(((2,5-二氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.28g，0.77mmol)，樟脑磺酸(0.33g，1.40mmol)，并用异丙醇(15mL)溶解。氮气保护，70℃反应4h终止。冷却至室温，反应液采用EA萃取，饱和碳酸钠和饱和食盐水洗涤，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得白色固体产物0.02g，三步收率5％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.70(d,J＝2.5Hz,1H),8.58(d,J＝2.4Hz,1H),8.00(s,1H),7.39–7.33(m,1H),7.30(dd,J＝8.1,2.3Hz,1H),6.90(d,J＝8.1Hz,1H),4.93(d,J＝5.3Hz,2H),4.06–3.77(m,1H),3.58(s,3H),3.39(q,J＝6.4Hz,2H),3.23(s,3H),3.20(s,3H),3.11–3.03(m,2H),2.74–2.53(m,4H),1.90–1.78(m,2H),1.53–1.44(m,2H)。MS(ESI)m/z:605.4[M+H]+。
实施例79:(3S)-N-(2-((5-氯-4-((3-(N-甲基甲磺酰胺基)吡嗪-2-基)甲基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)-3-羟基-N-甲基吡咯烷-1-甲酰胺的合成
Figure BDA0004006585300002122
/>
步骤1:(S)-3-((叔丁基二苯基硅基)氧基)吡咯烷-1-甲酰氯的合成
Figure BDA0004006585300002123
室温下，依次向单口瓶中加入(S)-3-((叔丁基二苯基硅)氧基)吡咯烷(0.97g，2.98mmol)，吡啶(0.47g，5.96mmol)和DCM(20mL)，0℃下滴加三光气(0.44g，1.49mmol)，0℃反应3h终止，水洗，DCM萃取，有机相合并，经无水Na2SO4干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得无色透明油状物0.68g，收率65％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.64–7.56(m,4H),7.52–7.42(m,6H),4.53–4.43(m,1H),3.75–3.61(m,1H),3.56–3.52(m,1H),3.43–3.41(m,1H),3.38–3.24(m,1H),1.99–1.83(m,2H),1.02(d,J＝2.4Hz,9H)。
步骤2:(3S)-3-((叔丁基二苯基硅基)氧基)-N-甲基-N-(2-硝基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)吡咯烷-1-甲酰胺的合成
Figure BDA0004006585300002131
室温下，依次向单口瓶中加入N-甲基-2-硝基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-胺(0.22g，1.00mmol)，(S)-3-((叔丁基二苯基硅基)氧基)吡咯烷-1-甲酰氯(0.58g，1.50mmol)，TEA(0.60g，6.00mmol)和THF(10mL)，70℃反应4h终止，EA稀释，水洗，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得黄色固体0.24g，收率44％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.05(d,J＝2.4Hz,1H),7.99(dd,J＝8.2,2.5Hz,1H),7.62–7.57(m,4H),7.51–7.42(m,7H),4.38–4.34(m,1H),3.87–3.80(m,1H),3.59(q,J＝8.7Hz,1H),3.28–3.20(m,2H),3.07–3.03(m,1H),2.98–2.80(m,4H),2.48(s,3H),1.93–1.89(m,1H),1.85–1.77(m,3H),1.54–1.42(m,2H),1.00(s,9H)。
步骤3:(3S)-N-(2-氨基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)-3-((叔丁基二苯基硅基)氧基)-N-甲基吡咯烷-1-甲酰胺的合成
Figure BDA0004006585300002132
室温下，依次向单口瓶中加入(3S)-3-((叔丁基二苯基硅基)氧基)-N-甲基-N-(2-硝基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)吡咯烷-1-甲酰胺(0.24g，0.26mmol)，Pd/C(0.10g)和EA(10mL)，氢气氛围下15℃反应3h终止，过滤，浓缩，得白色固体0.20g，收率88％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.62–7.57(m,4H),7.50–7.43(m,6H),6.76(d,J＝7.9Hz,1H),6.36(s,1H),6.29(dd,J＝7.8,2.2Hz,1H),4.38–4.35(m,1H),3.76–3.68(m,1H),3.59(q,J＝8.9Hz,1H),3.27–3.20(m,2H),3.05(d,J＝11.0Hz,1H),2.68–2.52(m,4H),2.48(s,3H),1.86–1.79(m,3H),1.74–1.67(m,1H),1.48–1.36(m,2H),1.01(s,9H)。MS(ESI)m/z:542.5[M+H]+。
步骤4:(3S)-3-((叔丁基二苯基硅基)氧基)-N-(2-((5-氯-4-((3-(N-甲基甲磺酰胺基)吡嗪-2-基)甲基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)-N-甲基吡咯烷-1-甲酰胺的合成
Figure BDA0004006585300002141
室温下，依次向单口瓶中加入N-(3-(((2,5-二氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.20g，0.55mmol)，(3S)-N-(2-氨基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)-3-((叔丁基二苯基硅基)氧基)-N-甲基吡咯烷-1-甲酰胺(0.20g，0.36mmol)，樟脑磺酸(0.25g，1.09mmol)和异丙醇(15mL)，80℃反应16h终止，浓缩溶剂，EA溶解，水洗，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得白色固体0.17g，收率54％。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.70(d,J＝2.5Hz,1H),8.58(d,J＝2.4Hz,1H),8.00(s,1H),7.65–7.55(m,4H),7.53–7.41(m,6H),7.34(d,J＝1.8Hz,1H),7.29(d,J＝8.2Hz,1H),6.90(d,J＝8.1Hz,1H),4.93(d,J＝5.3Hz,2H),4.39–4.34(m,1H),3.80–3.71(m,1H),.59(q,J＝8.6Hz,1H),3.29–3.13(m,8H),3.10–3.01(m,1H),2.72–2.59(m,3H),2.48(s,3H),1.89–1.78(m,3H),1.76–1.69(m,1H),1.48–1.36(m,2H),1.01(s,9H)。
步骤5:(3S)-N-(2-((5-氯-4-((3-(N-甲基甲磺酰胺基)吡嗪-2-基)甲基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)-3-羟基-N-甲基吡咯烷-1-甲酰胺的合成
Figure BDA0004006585300002142
室温下，依次向单口瓶中加入(3S)-3-((叔丁基二苯基硅基)氧基)-N-(2-((5-氯-4-((3-(N-甲基甲磺酰胺基)吡嗪-2-基)甲基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)-N-甲基吡咯烷-1-甲酰胺(0.17g，0.19mmol)和HCl/EtOH(5mL)，15℃反应16h终止，浓缩溶剂，柱层析(MeOH/DCM)，得白色固体0.09g，收率73％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.70(d,J＝2.5Hz,1H),8.58(d,J＝2.5Hz,1H),7.99(s,1H),7.36–7.32(m,1H),7.29(dd,J＝8.1,2.2Hz,1H),6.90(d,J＝7.7Hz,1H),4.93(d,J＝5.3Hz,2H),4.24–4.19(m,1H),3.82–3.73(m,1H),3.46–3.40(m,2H),3.27–3.21(m,1H),3.24(s,3H),3.19(s,3H),3.06–3.01(m,1H),2.78–2.53(m,3H),2.52(s,3H),1.94–1.87(m,1H),1.85–1.76(m,2H),1.74–1.68(m,1H),1.49–1.38(m,2H)。MS(ESI)m/z:630.4[M+H]+。
实施例80:N-(3-((5-氯-2-((1-(2-羟乙基)-5',6',8',9'-四氢螺环[氮杂环丁烷-3,7'-苯并[7]轮烯]-2'-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300002151
步骤1:3-(2-甲氧基-2-氧代亚乙基)氮杂环丁烷-1-羧酸苄酯的合成
Figure BDA0004006585300002152
室温下，依次向单口瓶中加入3-氧代氮杂环丁烷-1-羧酸苄酯(20.00g，97.46mmol)，甲氧甲酰基亚甲基三苯基磷(35.80g，107.21mmol)和甲苯(300mL)，115℃反应4h终止，浓缩，水洗，EA萃取，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得白色固体13.27g，收率70％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.38–7.30(m,5H),5.91(s,1H),5.07(s,2H),4.79(s,2H),4.67(s,2H),3.64(s,3H)。MS(ESI)m/z:262.4[M+H]+。
步骤2:3-(2-甲氧基-2-羰基甲基)-3-苯乙基氮杂环丁烷-1-羧酸苄酯的合成
Figure BDA0004006585300002153
室温下，依次向三口瓶中加入CuI(0.47g，2.48mmol)和无水THF(50mL)，冷却至-10℃，氮气保护下缓慢滴加苯乙基溴化镁(125mL，124.39mmol)，反应0.5h后滴加3-(2-甲氧基-2-氧代亚乙基)氮杂环丁烷-1-羧酸苄酯(13.00g，49.75mmol)，0℃反应4h终止。淬灭，水洗，EA萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得无色透明油状物9.02g，收率50％。MS(ESI)m/z:368.5[M+H]+。
步骤3:2-(1-((苄氧基)羰基)-3-苯乙基氮杂环丁烷-3-基)乙酸的合成
Figure BDA0004006585300002161
室温下，依次向单口瓶中加入3-(2-甲氧基-2-羰基甲基)-3-苯乙基氮杂环丁烷-1-羧酸苄酯(9.00g，24.49mmol)，一水氢氧化锂(3.08g，73.48mmol)，MeOH(90mL)和H2O(30mL)，-15℃反应16h终止，EA萃取，水洗，水相调pH至中性，EA萃取，有机相无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，得无色油状物4.38g，收率50％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.36–7.16(m,10H),5.03(s,2H),3.89–3.66(m,4H),2.66(s,2H),2.60–2.53(m,2H),1.93–1.87(m,2H)。MS(ESI)m/z:354.5[M+H]+。
步骤4:8',9'-二氢螺环[氮杂环丁烷-3,7'-苯并[7]轮烯]-5'(6'H)-酮的合成
Figure BDA0004006585300002162
室温下，依次向单口瓶中加入2-(1-((苄氧基)羰基)-3-苯乙基氮杂环丁烷-3-基)乙酸(4.38g，12.39mmol)和DCM(50mL)，滴加草酰氯(3.15mL，37.18mmol)和DMF(催化量)，20℃反应0.5h终止。浓缩溶剂，加入DCM(50mL)，0℃氮气保护下加入AlCl3(3.30g，24.78mmol)，20℃反应16h终止。淬灭，调pH至弱碱性，浓缩得黄色固体1.04g，粗品未经进一步纯化直接用于下一步。MS(ESI)m/z:202.4[M+H]+。
步骤5:5',6',8',9'-四氢螺环[氮杂环丁烷-3,7'-苯并[7]轮烯]的合成
Figure BDA0004006585300002163
室温下，依次向单口瓶中加入8',9'-二氢螺环[氮杂环丁烷-3,7'-苯并[7]轮烯]-5'(6'H)-酮(0.65g，3.23mmol)和TFA(4mL)，0℃下加入Et3SiH(1.53mL，9.69mmol)，15℃反应16h终止。浓缩溶剂，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得白色固体0.18g，两步收率26％。MS(ESI)m/z:188.4[M+H]+。
步骤6:2'-硝基-5',6',8',9'-四氢螺环[氮杂环丁烷-3,7'-苯并[7]轮烯]的合成
Figure BDA0004006585300002171
室温下，依次向单口瓶中加入5',6',8',9'-四氢螺环[氮杂环丁烷-3,7'-苯并[7]轮烯](0.18g，0.96mmol)和DCM(5mL)，-30℃下加入H2SO4(0.15mL，2.88mmol)和HNO3(0.08mL，1.06mmol)，反应2h终止。加水，调pH至中性，DCM萃取，有机相无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，得0.22g红色固体，粗品直接用于下一步。MS(ESI)m/z:233.4[M+H]+。
步骤7:2-(2'-硝基-5',6',8',9'-四氢螺环[氮杂环丁烷-3,7'-苯并[7]轮烯]-1-基)乙烷-1-醇的合成
Figure BDA0004006585300002172
室温下，依次向单口瓶中加入2'-硝基-5',6',8',9'-四氢螺环[氮杂环丁烷-3,7'-苯并[7]轮烯](0.22g，0.96mmol)，2-溴乙醇(0.18g，1.44mmol)，K2CO3(0.26g，1.92mmol)和MeCN(10mL)，80℃反应16h终止，浓缩溶剂，加水，DCM萃取，有机相无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得黄色固体0.03g，两步收率10％。MS(ESI)m/z:277.5[M+H]+。
步骤8:2-(2'-氨基-5',6',8',9'-四氢螺环[氮杂环丁烷-3,7'-苯并[7]轮烯]-1-基)乙烷-1-醇的合成
Figure BDA0004006585300002173
室温下，依次向单口瓶中加入2-(2'-硝基-5',6',8',9'-四氢螺环[氮杂环丁烷-3,7'-苯并[7]轮烯]-1-基)乙烷-1-醇(0.03g，0.10mmol)，Pd/C(0.01g)和MeOH(3mL)，30℃反应2h终止。过滤，滤饼用MeOH冲洗，滤液浓缩，得黄色固体0.03g，粗品未经进一步纯化直接用于下一步。MS(ESI)m/z:247.5[M+H]+。
步骤9:N-(3-((5-氯-2-((1-(2-羟乙基)-5',6',8',9'-四氢螺环[氮杂环丁烷-3,7'-苯并[7]轮烯]-2'-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300002181
室温下，依次向单口瓶中加入N-(3-(((2,5-二氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.04g，0.12mmol)，2-(2'-氨基-5',6',8',9'-四氢螺环[氮杂环丁烷-3,7'-苯并[7]轮烯]-1-基)乙烷-1-醇(0.03g，0.10mmol)，樟脑磺酸(0.06g，0.24mmol)和IPA(5mL)，80℃反应16h终止。反应液浓缩，加碳酸钾水溶液调碱，DCM萃取，水洗，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得白色固体产物0.03g，两步收率49％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.69(d,J＝2.5Hz,1H),8.57(d,J＝2.5Hz,1H),7.98(s,1H),7.32(d,J＝2.3Hz,1H),7.26(dd,J＝8.1,2.2Hz,1H),6.88(d,J＝8.3Hz,1H),4.91(d,J＝5.3Hz,2H),3.80–3.63(m,4H),3.60(d,J＝5.0Hz,2H),3.22(s,3H),3.19(s,3H),3.16–3.12(m,2H),2.59–2.50(m,4H),2.03–1.62(m,4H)。MS(ESI)m/z:573.5[M+H]+。
实施例81:N-(2-((5-氯-4-((3-(N-甲基甲磺酰胺基)吡嗪-2-基)甲基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)-N-(2-羟乙基)环丙烷甲酰胺的合成
Figure BDA0004006585300002182
步骤1～步骤5参考实施例62；
步骤6:N-(2-((叔丁基二苯基硅基)氧基)乙基)-N-(2-((5-氯-4-((3-(N-甲基甲磺胺基)吡嗪-2-基)甲基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)环丙烷甲酰胺的合成
Figure BDA0004006585300002191
室温下，依次向三口瓶中加入N-(3-(2-((7-((2-((叔丁基二苯基硅基)氧基)乙基)氨基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)-5-氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.10g，0.13mmol)，三乙胺(0.03g，0.33mmol)和DCM(4mL)，0℃下缓慢滴加环丙基甲酰氯(0.01g，0.11mmol)，室温反应2h终止。水洗，DCM萃取，有机相合并，经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，得黄色油状物粗品0.14g，产物未经进一步纯化直接用于下一步。
步骤7:N-(2-((5-氯-4-((3-(N-甲基甲磺酰胺基)吡嗪-2-基)甲基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)-N-(2-羟乙基)环丙烷甲酰胺的合成
Figure BDA0004006585300002192
室温下，依次向单口瓶中加入N-(2-((叔丁基二苯基硅基)氧基)乙基)-N-(2-((5-氯-4-((3-(N-甲基甲磺胺基)吡嗪-2-基)甲基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)环丙烷甲酰胺(0.14g粗品)溶于MeOH(5mL)中，缓慢滴加HCl(1mL)，室温反应2h终止。浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得黄色固体产物0.04g，两步收率50％。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.70(d,J＝2.5Hz,1H),8.59(d,J＝2.4Hz,1H),8.01(s,1H),7.38–7.22(m,2H),6.91(t,J＝8.7Hz,1H),4.93(d,J＝5.2Hz,2H),3.50(t,J＝5.0Hz,1H),3.40(t,J＝6.2Hz,1H),3.33(t,J＝6.9Hz,2H),3.23(s,3H),3.19(s,3H),3.13–3.08(m,1H),2.89–2.52(m,4H),1.99–1.72(m,3H),1.54–1.41(m,2H),0.77–0.68(m,4H)。MS(ESI)m/z:615.4[M+H]+。
实施例82:N-(3-(((5-氯-2-((1'-(2-羟乙基)-5,6,8,9-四氢螺环[苯并[7]轮烯-7,4'-哌啶]-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺
Figure BDA0004006585300002201
步骤1:4-(2,2-二甲基-4,6-二氧代-1,3-二恶烷-5-亚基)哌啶-1-甲酸苄酯的合成
Figure BDA0004006585300002202
室温下，依次向单口瓶中加入4-氧哌啶-1-甲酸苄酯(15.00g，64.30mmol)，丙二酸环(亚)异丙酯(9.27g，64.30mmol)和吡啶(15mL)，滴加哌啶(催化量)。氮气保护，45℃反应1h终止。MeOH稀释，打浆，过滤，漂洗得白色固体21.36g，收率92％。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.39–7.30(m,5H),5.11(s,2H),3.63–3.47(m,4H),3.12(t,J＝5.9Hz,4H),1.70(s,6H)。
步骤2:2-(1-((苄氧基)羰基)-4-苯乙基哌啶-4-基)乙酸的合成
Figure BDA0004006585300002203
-10℃，依次向四口瓶中加入4-(2,2-二甲基-4,6-二氧代-1,3-二恶烷-5-亚基)哌啶-1-甲酸苄酯(12.63g，35.17mmol)和THF(300mL)，缓慢加入CuI(0.27g，1.41mmol)，搅拌0.5h后加入苯乙基氯化镁溶液(88mL，97.92mmol)。氮气保护，-10℃条件下反应3h终止。反应液淬灭，EA萃取，有机相经浓缩得黄色固体粗品，用DMF(100mL)和H2O(100mL)溶解。氮气保护，135℃反应2d终止。调节pH<5，MTBE萃取，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得无色液体8.00g，收率60％。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.38–7.15(m,10H),5.07(s,2H),3.53–3.44(m,2H),3.39–3.34(m,2H),2.60–2.51(m,2H),2.37(s,2H),1.69–1.62(m,2H),1.60–1.54(m,2H),1.48–1.39(m,2H)。MS(ESI)m/z:382.6[M+H]+。
步骤3:8,9-二氢螺环[苯并[7]轮烯-7,4'-哌啶]-5(6H)-酮的合成
Figure BDA0004006585300002211
冰浴下，依次向单口瓶中加入2-(1-((苄氧基)羰基)-4-苯乙基哌啶-4-基)乙酸(8.00g，20.97mmol)，DCM(100mL)和DMF(2mL)，滴加草酰氯(15.97g，125.83mmol)。氮气保护，室温反应4h终止。反应液浓缩得黄色液体粗品，用DCM(500mL)溶解，加入AlCl3(15.97g，125.83mmol)。氮气保护，室温反应16h终止。淬灭，调节pH至碱性，EA萃取，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得淡黄色固体0.41g，收率9％。MS(ESI)m/z:230.5[M+H]+。
步骤4:5,6,8,9-四氢螺环[苯并[7]轮烯-7,4'-哌啶]的合成
Figure BDA0004006585300002212
室温下，依次向单口瓶中加入8,9-二氢螺环[苯并[7]轮烯-7,4'-哌啶]-5(6H)-酮(0.40g，1.74mmol)，TFA(10mL)和Et3SiH(2.03g，17.44mmol)。氮气保护，60℃反应24h终止。反应液浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得白色固体0.42g，粗品未经进一步纯化直接用于下一步。MS(ESI)m/z:216.5[M+H]+。
步骤9:2-硝基-5,6,8,9-四氢螺环[苯并[7]轮烯-7,4'-哌啶]的合成
Figure BDA0004006585300002213
0℃下，依次向单口瓶中加入5,6,8,9-四氢螺环[苯并[7]轮烯-7,4'-哌啶](0.40g，1.86mmol)和DCM(10mL)，滴加H2SO4(0.3mL)和HNO3(0.08g，1.30mmol)。氮气保护，0℃反应2h终止。淬灭，调碱，DCM萃取，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，得黄色油状物0.25g，两步收率52％。MS(ESI)m/z:261.5[M+H]+。
步骤6:2-(2-硝基-5,6,8,9-四氢螺环[苯并[7]轮烯-7,4'-哌啶]-1'-基)乙-1-醇的合成
Figure BDA0004006585300002221
室温下，依次向单口瓶中加入2-硝基-5,6,8,9-四氢螺环[苯并[7]轮烯-7,4'-哌啶](0.25g，0.96mmol)，2-溴乙醇(0.18g，1.44mmol)，K2CO3(0.27g，1.92mmol)和MeCN(10mL)。氮气保护，80℃反应20h终止。浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得黄色液体0.22g，收率75％。MS(ESI)m/z:305.5[M+H]+。
步骤7:2-(2-氨基-5,6,8,9-四氢螺环[苯并[7]轮烯-7,4'-哌啶]-1'-基)乙-1-醇的合成
Figure BDA0004006585300002222
室温下，依次向单口瓶中加入2-(2-硝基-5,6,8,9-四氢螺环[苯并[7]轮烯-7,4'-哌啶]-1'-基)乙-1-醇(0.22g，0.72mmol)，Pd/C(100mg)和EA(10mL)。氢气保护，室温反应20h终止。过滤，洗涤，有机相经合并，浓缩得无色液体0.15g，收率74％。MS(ESI)m/z:275.5[M+H]+。
步骤8:N-(3-(((5-氯-2-((1'-(2-羟乙基)-5,6,8,9-四氢螺环[苯并[7]轮烯-7,4'-哌啶]-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300002223
室温下，依次向单口瓶中加入2-(2-氨基-5,6,8,9-四氢螺环[苯并[7]轮烯-7,4'-哌啶]-1'-基)乙-1-醇(0.15g,0.55mmol)，N-(3-(((2,5-二氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.22g,0.60mmol)，樟脑磺酸(0.19g,0.82mmol)和异丙醇(15mL)。氮气保护，80℃反应20h终止。反应液浓缩，调碱游离，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得白色固体0.15g，收率46％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.69(d,J＝2.5Hz,1H),8.57(d,J＝2.5Hz,1H),7.97(s,1H),7.29(d,J＝2.3Hz,1H),7.22(dd,J＝8.1,2.2Hz,1H),6.83(d,J＝8.3Hz,1H),4.91(d,J＝5.2Hz,2H),3.49(t,J＝8.0Hz,2H),3.22(s,3H),3.18(s,3H),2.59–2.52(m,4H),2.47–2.34(m,6H),1.51–1.39(m,8H)。MS(ESI)m/z:601.7[M+H]+。
实施例83:N-(3-((5-氯-2-((7-(4-羟基哌啶-1-基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300002231
步骤1～步骤3参考实施例35；
步骤4:N-(3-((5-氯-2-((7-(4-羟基哌啶-1-基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300002232
室温下，依次向单口瓶中加入N-(3-((5-氯-2-((7-氧代-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.12g，0.24mmol)，4-羟基哌啶(0.05g，0.48mmol)，钛酸四异丙酯(0.27g，0.96mmol)和DCM(10mL)，15℃反应0.5h后加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.10g，0.48mmol)，室温反应16h终止。淬灭，浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得白色固体产物0.09g，收率66％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.69(d,J＝2.4Hz,1H),8.58(d,J＝2.4Hz,1H),7.98(s,1H),7.38(s,1H),7.28(dd,J＝8.0,2.2Hz,1H),6.91(d,J＝8.1Hz,1H),4.92(d,J＝5.3Hz,2H),3.69–3.49(m,1H),3.28–3.24(m,1H),3.23(s,3H),3.19(s,3H),3.16–2.76(m,4H),2.70–2.56(m,4H),2.38–2.16(m,2H),1.96–1.79(m,2H),1.76–1.52(m,2H),1.41–1.27(m,2H)。MS(ESI)m/z:587.4[M+H]+。
实施例84:N-(3-(((5-氯-2-((3-异丙基-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[c]氮杂卓-7-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300002241
步骤1:3-甲基-1-(三苯基-5-亚膦基)丁-2-酮的合成
Figure BDA0004006585300002242
室温下，依次向单口瓶中加入1-溴-3-甲基丁-2-酮(4.50g，27.27mmol)，三苯基膦(8.60g,32.72mmol)，并用甲苯(150mL)溶解，110℃反应6h终止反应，冷却至室温，过滤得白色固体，加入DCM(50mL)，氢氧化钠水溶液(20mL)，室温反应5h终止。反应液采用DCM萃取，水洗，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，得白色固体7.29g，收率77％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.69–7.63(m,6H),7.57–7.53(m,3H),7.49–7.44(m,6H),3.70(d,J＝26.3Hz,1H),2.60–2.45(m,1H),1.19(d,J＝6.8Hz,6H)。
步骤2:2-(二溴甲基)-4-硝基苯甲腈的合成
Figure BDA0004006585300002243
室温下，依次向单口瓶中加入2-甲基-4-硝基苯甲腈(9.00g，55.50mmol)，NBS(29.60g，166.51mmol)，BPO(1.34g，5.55mmol)并用四氯化碳(200mL)溶解，85℃反应40h终止。冷却至室温，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得白色固体8.60g，收率48％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.90(d,J＝2.1Hz,1H),8.31(dd,J＝8.5,2.2Hz,1H),7.88(d,J＝8.5Hz,1H),7.04(s,1H)。
步骤3:2-甲酰基-4-硝基苯甲腈的合成
Figure BDA0004006585300002244
室温下，依次向单口瓶中加入2-(二溴甲基)-4-硝基苯甲腈(14.60g，45.63mmol)，硝酸银(23.30g，137.01mmol)，并用乙腈(150mL)、水(70mL)溶解，80℃反应20h终止。冷却，过滤，DCM萃取，水洗，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得淡黄色固体2.54g，收率32％。
步骤4:(E)-2-(4-甲基-3-氧代戊-1-烯-1-基)-4-硝基苯甲腈的合成
Figure BDA0004006585300002251
室温下，依次向单口瓶中加入2-甲酰基-4-硝基苯甲腈(2.50g，14.19mmol)，3-甲基-1-(三苯基-5-亚膦基)丁-2-酮(5.40g，15.61mmol)，并用THF(150mL)溶解。氮气保护，升温至85℃反应5h终止。冷却至室温，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得淡黄色固体3.19g，收率92％。
步骤5:4-氨基-2-(4-甲基-3-氧戊基)苯甲腈的合成
Figure BDA0004006585300002252
/>
室温下，依次向单口瓶中加入(E)-2-(4-甲基-3-氧代戊-1-烯-1-基)-4-硝基苯甲腈(1.30g，5.32mmol)，钯碳(0.13g)，并用THF(150mL)溶解。氢气氛围，室温反应16h终止。冷却至室温，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得无色透明油状物0.81g，收率70％。MS(ESI)m/z:217.4[M+H]+。
步骤6:N-(4-氰基-3-(4-甲基-3-氧戊基)苯基)-2,2,2-三氟乙酰胺的合成
Figure BDA0004006585300002253
室温下，依次向单口瓶中加入4-氨基-2-(4-甲基-3-氧戊基)苯甲腈(0.65g，3.01mmol)，并用THF(150mL)溶解，后加入三乙胺(0.46g，4.52mmol)，三氟乙酸酐(0.76g，3.61mmol)，室温反应3h终止。浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得无色透明油状物0.95g，收率95％。MS(ESI)m/z:313.4[M+H]+。
步骤7:2,2,2-三氟-N-(3-异丙基-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[c]氮杂卓-7-基)乙酰胺的合成
Figure BDA0004006585300002254
室温下，依次向单口瓶中加入N-(4-氰基-3-(4-甲基-3-氧戊基)苯基)-2,2,2-三氟乙酰胺(0.95g，3.04mmol)，雷尼镍(0.50g)，并用甲醇(50mL)溶解，氢气氛围下室温反应16h终止。过滤，浓缩，EA/PE打浆，过滤得白色固体0.81g，收率85％。MS(ESI)m/z:301.4[M+H]+。
步骤8:3-异丙基-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[c]氮杂卓-7-胺的合成
Figure BDA0004006585300002261
室温下，依次向单口瓶中加入2,2,2-三氟-N-(3-异丙基-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[c]氮杂卓-7-基)乙酰胺(0.80g，2.67mmol)，氢氧化钠水溶液(5mL)并用甲醇(15mL)溶解，65℃反应3h终止。冷却，反应液采用EA萃取，水洗，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得淡黄色油状物0.40g，收率73％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ6.74(d,J＝7.8Hz,1H),6.38(d,J＝2.2Hz,1H),6.26(dd,J＝7.9,2.3Hz,1H),3.66(s,2H),2.78(t,J＝13.0Hz,1H),2.61–2.52(m,2H),1.82–1.75(m,1H),1.66–1.58(m,1H),1.18–1.09(m,1H),0.86(d,J＝4.3Hz,3H),0.84(d,J＝4.3Hz,3H)。MS(ESI)m/z:205.5[M+H]+。
步骤9:N-(3-(((5-氯-2-((3-异丙基-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[c]氮杂卓-7-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300002262
室温下，依次向单口瓶中加入3-异丙基-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[c]氮杂卓-7-胺(0.06g，0.29mmol)，N-(3-(((2,5-二氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.12g，0.32mmol)，樟脑磺酸(0.14g，0.56mmol)，并用异丙醇(15mL)溶解。氮气保护，85℃反应16h终止。冷却至室温，碱化，过滤，浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得白色固体产物0.10g，收率64％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.70(d,J＝2.5Hz,1H),8.58(d,J＝2.5Hz,1H),8.00(s,1H),7.38(d,J＝1.3Hz,1H),7.32(dd,J＝8.1,2.2Hz,1H),6.91(d,J＝8.2Hz,1H),4.94(d,J＝5.3Hz,2H),3.78(s,2H),3.24(s,3H),3.20(s,3H),2.84(t,J＝13.1Hz,1H),2.69–2.57(m,2H),1.85–1.77(m,1H),1.70–1.62(m,1H),1.21–1.10(m,1H),0.87(d,J＝1.4Hz,3H),0.85(d,J＝1.4Hz,3H)。MS(ESI)m/z:531.6[M+H]+。
实施例85:N-(3-((5-氯-2-((7-(3-羟基氮杂环丁烷-1-基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300002271
步骤1～步骤3参考实施例3；
步骤4:N-(3-((5-氯-2-((7-(3-羟基氮杂环丁烷-1-基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300002272
室温下，依次向单口瓶中加入N-(3-((5-氯-2-((7-氧代-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.10g，0.20mmol)，氮杂环丁烷-3-醇(0.03g，0.40mmol)，钛酸四异丙酯(0.23g，0.80mmol)和DCM(10mL)。15℃反应0.5h后加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.08g，0.40mmol)，室温反应16h后终止。淬灭，浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得白色固体产物0.06g，收率54％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.69(d,J＝2.4Hz,1H),8.57(d,J＝2.4Hz,1H),7.98(s,1H),7.33(d,J＝1.3Hz,1H),7.27(dd,J＝8.2,2.2Hz,1H),6.87(d,J＝8.1Hz,1H),4.91(d,J＝5.3Hz,2H),4.30–4.23(m,1H),4.01–3.78(m,2H),3.35–3.30(m,2H),3.22(s,3H),3.19(s,3H),2.75–2.70(m,1H),2.67–2.61(m,1H),2.59–2.50(m,3H),1.96–1.89(m,2H),1.19–1.07(m,2H)。MS(ESI)m/z:559.3[M+H]+。
实施例86:N-(3-(((5-氯-2-((7-(((S)-3-羟基吡咯烷-1-基)甲基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺盐酸盐
Figure BDA0004006585300002281
步骤1:(S)-3-((叔丁基二苯基硅基)氧基)吡咯烷的合成
Figure BDA0004006585300002282
0℃下，依次向单口瓶中加入(S)-3-吡咯烷醇盐酸盐(1.00g，8.09mmol)，咪唑(0.83g，12.14mmol)和DCM(10mL)，滴加TBDPSCl(2.67g，9.71mmol)。氮气保护，室温反应3h终止。DCM稀释，水洗，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得无色液体1.55g，收率59％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.62–7.59(m,4H),7.50–7.42(m,6H),4.39–4.35(m,1H),3.07–3.01(m,1H),2.92–2.86(m,2H),2.81(dd,J＝11.7,2.8Hz,1H),1.77–1.66(m,2H),1.01(s,9H)。MS(ESI)m/z:326.5[M+H]+。
步骤2:7-(甲氧基甲烯基)-2-硝基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯的合成
Figure BDA0004006585300002283
-40℃下，依次向单口瓶中加入2-硝基-5,6,8,9-四氢-7H-苯并[7]轮烯-7-酮(1.00g，4.87mmol)和THF(100mL)，分批加入t-BuOK(1.15g，10.23mmol)，搅拌0.5h后加入(甲氧基甲基)三苯基氯化磷(3.34g，9.75mmol)。氮气保护，室温反应2h终止。淬灭，EA稀释，水洗，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得黄色液体0.60g，收率53％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.04(d,J＝2.5Hz,1H),7.98(dd,J＝8.3,2.5Hz,1H),7.44(dd,J＝8.3,2.3Hz,1H),5.98(s,1H),3.51(s,3H),2.89–2.82(m,4H),2.30–2.26(m,2H),2.10–2.06(m,2H)。MS(ESI)m/z:234.3[M+H]+。
步骤3:2-硝基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-甲醛的合成
Figure BDA0004006585300002284
室温下，依次向单口瓶中加入7-(甲氧基甲烯基)-2-硝基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯(0.60g，2.57mmol)，甲酸(10mL)和THF(20mL)。氮气保护，80℃反应2h终止。反应液浓缩，EA稀释，水洗，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得黄色固体0.57g，粗品未经进一步纯化直接用于下一步。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.04(d,J＝2.5Hz,1H),7.97(dd,J＝8.3,2.5Hz,1H),7.43(d,J＝8.3Hz,1H),3.03–2.89(m,4H),2.75–2.68(m,1H),2.16–2.11(m,2H),1.45–1.37(m,2H)。
步骤4:(3S)-3-((叔丁基二苯基硅基)氧基)-1-((2-硝基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]环烯-7-基)甲基)吡咯烷的合成
Figure BDA0004006585300002291
室温下，依次向单口瓶中加入2-硝基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-甲醛(0.20g，0.91mmol)，(S)-3-((叔丁基二苯基硅基)氧基)吡咯烷(0.59g，1.82mmol)，醋酸(0.5mL)和THF(20mL)，搅拌0.5h后加入NaBH(OAc)3(1.16g，5.47mmol)。氮气保护，室温反应2h终止。EA稀释，水洗，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得无色液体0.54g，粗品未经进一步纯化直接用于下一步。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.00(d,J＝2.5Hz,1H),7.95(dd,J＝8.2,2.5Hz,1H),7.62–7.59(m,4H),7.49–7.38(m,7H),4.36–4.31(m,1H),2.98–2.80(m,4H),2.60–2.54(m,2H),2.42–2.38(m,2H),2.23–2.13(m,2H),2.04–1.88(m,3H),1.79–1.66(m,2H),1.00(s,9H),0.95–0.82(m,2H)。MS(ESI)m/z:529.6[M+H]+。
步骤5:7-(((S)-3-((叔丁基二苯基硅基)氧基)吡咯烷-1-基)甲基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-胺的合成
Figure BDA0004006585300002292
室温下，依次向单口瓶中加入(3S)-3-((叔丁基二苯基硅基)氧基)-1-((2-硝基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)甲基)吡咯烷(0.54g，1.02mmol)，Pd/C(0.50g)和EA(5mL)。氢气氛围，室温反应12h终止。过滤，洗涤，有机相经合并，浓缩得无色液体0.48g，三步收率94％。MS(ESI)m/z:499.6[M+H]+。
步骤6:N-(3-(((2-((7-(((S)-3-((叔丁基二苯基硅基)氧基)吡咯烷-1-基)甲基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯基[7]轮烯-2-基)氨基)-5-氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300002301
室温下，依次向单口瓶中加入7-(((S)-3-((叔丁基二苯基硅基)氧基)吡咯烷-1-基)甲基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-胺(0.20g,0.40mmol)，N-(3-(((2,5-二氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.16g，0.44mmol)，樟脑磺酸(0.14g，0.60mmol)和异丙醇(20mL)。氮气保护，80℃反应6h终止。反应液浓缩，EA稀释，水洗，有机相经干燥、过滤、浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得黄色固体0.22g，收率65％。MS(ESI)m/z:825.6[M+H]+。
步骤7:N-(3-(((5-氯-2-((7-(((S)-3-羟基吡咯烷-1-基)甲基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺盐酸盐的合成
Figure BDA0004006585300002302
室温下，依次向单口瓶中加入N-(3-(((2-((7-(((S)-3-((叔丁基二苯基硅基)氧基)吡咯烷-1-基)甲基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯基[7]轮烯-2-基)氨基)-5-氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.22g,0.26mmol)，甲醇(5mL)和浓盐酸水溶液(10mL)。氮气保护，室温反应2h终止。反应液浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得白色固体产物0.14g，收率92％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.70(d,J＝2.5Hz,1H),8.58(d,J＝2.5Hz,1H),7.99(s,1H),7.33–7.26(m,2H),6.88(d,J＝8.1Hz,1H),4.92(d,J＝5.3Hz,2H),4.43–4.32(m,1H),3.23(s,3H),3.20(s,3H),3.18–3.13(m,2H),3.08–2.82(m,3H),2.77–2.53(m,5H),2.13–1.92(m,4H),1.88–1.75(m,1H),1.05–0.92(m,2H)。MS(ESI)m/z:587.5[M+H]+。
实施例87a和87b:N-(3-(((5-氯-2-(((R)-7-(((S)-3-羟基吡咯烷-1-基)甲基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺、N-(3-(((5-氯-2-(((S)-7-(((S)-3-羟基吡咯烷-1-基)甲基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺
Figure BDA0004006585300002311
步骤1:N-(3-(((5-氯-2-(((R)-7-(((S)-3-羟基吡咯烷-1-基)甲基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺和N-(3-(((5-氯-2-(((S)-7-(((S)-3-羟基吡咯烷-1-基)甲基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的制备
Figure BDA0004006585300002312
将N-(3-(((5-氯-2-((7-(((S)-3-羟基吡咯烷-1-基)甲基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(2.34g，3.99mmol)进行手性拆分制备，最终得产物绝对构型A峰(实施例87a，保留时间3.645min)淡黄色固体1.00g，收率43％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.69(d,J＝2.5Hz,1H),8.57(d,J＝2.4Hz,1H),7.98(s,1H),7.27–7.22(m,2H),6.84(d,J＝8.1Hz,1H),4.91(d,J＝5.3Hz,2H),4.19–4.14(m,1H),3.22(s,3H),3.18(s,3H),2.70–2.61(m,4H),2.56–2.52(m,2H),2.39–2.33(m,1H),2.28–2.23(m,1H),2.20–2.11(m,2H),1.98–1.91(m,3H),1.74–1.66(m,1H),1.53–1.48(m,1H),0.91–0.79(m,2H)。MS(ESI)m/z:587.6[M+H]+。
得产物绝对构型B峰(实施例87b，保留时间4.467min)白色固体0.91g，收率39％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.69(d,J＝2.5Hz,1H),8.57(d,J＝2.4Hz,1H),7.97(s,1H),7.26–7.22(m,2H),6.84(d,J＝8.0Hz,1H),4.91(d,J＝5.2Hz,2H),4.20–4.14(m,1H),3.22(s,3H),3.18(s,3H),2.69–2.61(m,4H),2.59–2.51(m,2H),2.40–2.34(m,1H),2.29–2.23(m,1H),2.20–2.11(m,2H),2.00–1.92(m,3H),1.74–1.67(m,1H),1.55–1.48(m,1H),0.90–0.80(m,2H)。MS(ESI)m/z:587.6[M+H]+。
分离制备方法：
仪器：Gilson GX-281
色谱柱：CHIRALPAK ID
流动相：A为(Hex:DCM＝3:1)(0.5％2M NH3-MeOH)；B为EtOH
波长：254nm
流速：20ml/min
溶剂：EtOH:DCM＝1:1
梯度条件：B 20％
柱温：25℃
收集条件：45℃减压浓缩，冻干。
分离检测方法：
仪器：SHIMADZU-20AD
色谱柱：CHIRALPAK ID-3
流动相：A为(Hex:DCM＝3:1)(0.1％DEA)；B为ETOH
波长：254nm
柱温：25℃
流速：1.0mL/min
进样量:5μL
溶剂：EtOH
梯度条件：B 20％
运行时长：6min
保留时间：3.645min(A峰)，4.467min(B峰)
实施例88:N-(3-(((5-氯-2-((7-(((R)-3-羟基吡咯烷-1-基)甲基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺盐酸盐
Figure BDA0004006585300002321
步骤1:(R)-3-((叔丁基二苯基硅基)氧基)吡咯烷的合成
Figure BDA0004006585300002331
冰浴下，依次向单口瓶中加入(R)-3-吡咯烷醇(1.00g，11.48mmol)，咪唑(1.17g，17.22mmol)和DCM(10mL)，滴加TBDPSCl(3.84g，13.77mmol)。氮气保护，升至室温反应3h终止。DCM稀释，水洗，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得无色液体2.32g，收率62％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.62–7.60(m,4H),7.50–7.42(m,6H),4.40–4.36(m,1H),3.09–3.02(m,1H),2.93–2.88(m,2H),2.82(dd,J＝11.8,2.8Hz,1H),1.79–1.67(m,2H),1.01(s,9H)。MS(ESI)m/z:326.5[M+H]+。
步骤2:(3R)-3-((叔丁基二苯基硅基)氧基)-1-((2-硝基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)甲基)吡咯烷的合成
Figure BDA0004006585300002332
室温下，依次向单口瓶中加入2-硝基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-甲醛(0.15g，0.68mmol)，(R)-3-((叔丁基二苯基硅基)氧基)吡咯烷(0.45g，1.37mmol)，醋酸(0.3mL)和THF(15mL)，搅拌0.5h后加入NaBH(OAc)3(0.87g，4.11mmol)。氮气保护，室温反应2h终止。EA稀释，水洗，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得无色液体0.37g，粗品未经进一步纯化直接用于下一步。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.00(d,J＝2.5Hz,1H),7.95(dd,J＝8.2,2.5Hz,1H),7.62–7.59(m,4H),7.49–7.38(m,7H),4.36–4.31(m,1H),2.97–2.81(m,4H),2.60–2.54(m,2H),2.42–2.36(m,2H),2.23–2.12(m,2H),2.04–1.88(m,3H),1.80–1.66(m,2H),1.00(s,9H),0.94–0.82(m,2H)。MS(ESI)m/z:529.6[M+H]+。
步骤3:7-(((R)-3-((叔丁基二苯基硅基)氧基)吡咯烷-1-基)甲基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-胺的合成
Figure BDA0004006585300002333
室温下，依次向单口瓶中加入(3R)-3-((叔丁基二苯基硅基)氧基)-1-((2-硝基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)甲基)吡咯烷(0.37g，0.70mmol)，Pd/C(500mg)和EA(5mL)。氢气氛围，室温反应12h终止。过滤，洗涤，有机相经合并，浓缩得无色液体0.31g，三步收率91％。MS(ESI)m/z:499.6[M+H]+。
步骤4:N-(3-(((2-((7-(((R)-3-((叔丁基二苯基硅基)氧基)吡咯烷-1-基)甲基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯基[7]轮烯-2-基)氨基)-5-氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300002341
室温下，依次向单口瓶中加入7-(((R)-3-((叔丁基二苯基硅基)氧基)吡咯烷-1-基)甲基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-胺(0.31g,0.62mmol)，N-(3-(((2,5-二氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.25g,0.68mmol)，樟脑磺酸(0.22g,0.93mmol)和异丙醇(20mL)。氮气保护，80℃反应24h终止。反应液浓缩，EA稀释，水洗，有机相经干燥、过滤、浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得黄色固体0.51g，收率为99％。MS(ESI)m/z:825.6[M+H]+。
步骤5:N-(3-(((5-氯-2-((7-(((R)-3-羟基吡咯烷-1-基)甲基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺盐酸盐的合成
Figure BDA0004006585300002342
室温下，依次向单口瓶中加入N-(3-(((2-((7-(((R)-3-((叔丁基二苯基硅基)氧基)吡咯烷-1-基)甲基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯基[7]轮烯-2-基)氨基)-5-氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.51g,0.62mmol)，甲醇(5mL)和浓盐酸水溶液(10mL)。氮气保护，室温反应2h终止。反应液浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得白色固体0.20g，收率为56％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.69(d,J＝2.5Hz,1H),8.58(d,J＝2.5Hz,1H),7.99(s,1H),7.33–7.25(m,2H),6.88(d,J＝8.3Hz,1H),4.92(d,J＝5.3Hz,2H),4.42–4.36(m,1H),3.23(s,3H),3.19(s,3H),3.17–2.79(m,5H),2.77–2.53(m,5H),2.09–1.92(m,4H),1.88–1.78(m,1H),1.04–0.92(m,2H)。MS(ESI)m/z:587.5[M+H]+。
实施例89:N-(3-(((5-氯-2-((7-(4-(2-羟乙基)哌嗪-1-基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300002351
步骤1～步骤7参考实施例33；
步骤8:N-(3-((5-氯-2-((7-(4-(2-羟乙基)哌嗪-1-基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300002352
室温下，依次向单口瓶中加入N-(3-((5-氯-2-((7-氧基-6,7,8,9-四氢基-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酸酰胺(0.10g，0.20mmol)，N-羟乙基哌嗪(0.03g,0.26mmol)，三乙酰氧基硼氢化钠(0.09g，0.40mmol)和醋酸(催化量)并用DCM(10mL)溶解。氮气保护，室温反应8h终止。反应液采用DCM萃取，水洗，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得淡黄色固体产物0.02g，收率22％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.70(d,J＝2.6Hz,1H),8.59(d,J＝2.4Hz,1H),7.99(s,1H),7.36(s,1H),7.27(d,J＝8.2Hz,1H),6.89(d,J＝8.1Hz,1H),4.93(d,J＝5.3Hz,2H),3.56(t,J＝6.2Hz,2H),3.24(s,3H),3.20(s,3H),3.07–2.85(m,2H),2.73–2.56(m,13H),2.03–1.88(m,2H),1.36–1.25(m,2H)。MS(ESI)m/z:616.2[M+H]+。
实施例90:N-(3-(((5-氯-2-((7-(((2-羟基乙基)(甲基)氨基)甲基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺
Figure BDA0004006585300002361
步骤1:2-((叔丁基二苯基硅基)氧基)-N-甲基-N-((2-硝基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)甲基)乙基-1-胺的合成
Figure BDA0004006585300002362
室温下，依次向单口瓶中加入2-硝基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-甲醛(0.15g，0.68mmol)，2-((叔丁基二苯基硅基)氧基)-N-甲基乙基-1-胺(0.43g，1.37mmol)，醋酸(0.3mL)和THF(15mL)，搅拌0.5h后加入NaBH(OAc)3(0.87g，4.11mmol)。氮气保护，室温反应3h终止。EA稀释，水洗，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得无色液体0.37g，粗品未经进一步纯化直接用于下一步。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.98(d,J＝2.2Hz,1H),7.96(dd,J＝2.3,1.2Hz,1H),7.67–7.61(m,4H),7.48–7.36(m,7H),3.72–3.67(m,2H),2.95–2.76(m,4H),2.49–2.46(m,2H),2.14(s,3H),2.14–2.07(m,2H),2.03–1.95(m,2H),1.82–1.76(m,1H),0.99(s,9H),0.88–0.80(m,2H)。MS(ESI)m/z:517.6[M+H]+。
步骤2:7-(((2-((叔丁基二苯基硅基)氧基)乙基)(甲基)氨基)甲基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-胺的合成
Figure BDA0004006585300002363
室温下，依次向单口瓶中加入2-((叔丁基二苯基硅基)氧基)-N-甲基-N-((2-硝基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)甲基)乙基-1-胺(0.37g，0.72mmol)，Pd/C(0.50g)和EA(5mL)。氢气氛围，室温反应3h终止。过滤，洗涤，有机相经合并，浓缩得无色液体0.32g，两步收率96％。MS(ESI)m/z:487.7[M+H]+。
步骤3:N-(3-(((2-((7-(((2-((叔丁基二苯基硅基)氧基)乙基)(甲基)氨基)甲基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)-5-氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300002371
室温下，依次向单口瓶中加入7-(((2-((叔丁基二苯基硅基)氧基)乙基)(甲基)氨基)甲基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-胺(0.32g,0.66mmol)，N-(3-(((2,5-二氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.26g，0.72mmol)，樟脑磺酸(0.23g，0.99mmol)和异丙醇(20mL)。氮气保护，80℃反应6h终止。反应液浓缩，EA稀释，水洗，有机相经干燥、过滤、浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得黄色固体0.29g，收率54％。MS(ESI)m/z:813.7[M+H]+。
步骤4:N-(3-(((5-氯-2-((7-(((2-羟基乙基)(甲基)氨基)甲基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300002372
室温下，依次向单口瓶中加入N-(3-(((2-((7-(((2-((叔丁基二苯基硅基)氧基)乙基)(甲基)氨基)甲基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)-5-氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.29g,0.36mmol)，甲醇(10mL)和浓盐酸水溶液(10mL)。氮气保护，室温反应2h终止。反应液浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得白色固体产物0.18g，收率86％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.69(d,J＝2.5Hz,1H),8.57(d,J＝2.5Hz,1H),7.98(s,1H),7.33–7.21(m,2H),6.86(d,J＝8.2Hz,1H),4.92(d,J＝5.2Hz,2H),3.74–3.44(m,2H),3.22(s,3H),3.19(s,3H),2.85–2.51(m,6H),2.40–2.08(m,4H),2.02–1.64(m,4H),0.97–0.79(m,2H)。MS(ESI)m/z:575.6[M+H]+。
实施例91:N-(3-(((5-氯-2-((4'-羟基-5,6,8,9-四氢螺环[苯并[7]轮烯-7,2'-吡咯烷]-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300002381
步骤1:(E)-2-硝基-5,6,8,9-四氢-7H-苯并[7]轮烯-7-酮肟的合成
Figure BDA0004006585300002382
室温下，依次向单口瓶中加入2-硝基-5,6,8,9-四氢-7H-苯并[7]轮烯-7-酮(1.00g，4.90mmol)，盐酸羟胺(1.00g，14.70mmol)和乙酸钠(1.33g，9.80mmol)并用乙醇(8mL)和水(8mL)溶解。氮气保护，80℃反应16h终止。浓缩反应液，水洗，过滤得黄色固体粗品1.40g，粗品未经进一步纯化，直接用于下一步。MS(ESI)m/z:221.4[M+H]+。
步骤2:N-(7-烯丙基-2-硝基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)羟胺的合成
Figure BDA0004006585300002383
/>
室温下，依次向单口瓶中加入(E)-2-硝基-5,6,8,9-四氢-7H-苯并[7]轮烯-7-酮肟(1.10g，5.00mmol)，3,5-二氟苯硼酸(催化量)和丙烯基硼酸二异丙酯(1.00g，5.90mmol)并用DCE(10mL)溶解。氮气保护，50℃反应16h终止。浓缩，EA萃取，合并干燥，浓缩有机相得黄色油状粗品1.60g，粗品未经进一步纯化，直接用于下一步。MS(ESI)m/z:263.4[M+H]+。
步骤3:7-烯丙基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2,7-二胺的合成
Figure BDA0004006585300002384
室温下，依次向单口瓶中加入N-(7-烯丙基-2-硝基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)羟胺(1.60g，6.10mmol)，锌粉(3.97g，61.00mmol)和氯化铵(3.23g，61.00mmol)并用THF(10mL)和水(5mL)溶解。氮气保护，72℃反应16h终止。过滤，浓缩得黄色固体粗品3.10g，粗品未经进一步纯化，直接用于下一步。MS(ESI)m/z:217.5[M+H]+。
步骤4:7-烯丙基-N7-苄基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2,7-二胺的合成
Figure BDA0004006585300002391
室温下，依次向单口瓶中加入7-烯丙基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2,7-二胺(3.10g，6.10mmol)，苯甲醛(0.84g，7.90mmol)，醋酸(催化量)和三乙酰氧基硼氢化钠(3.20g，15.30mmol)并用DCM(15mL)溶解。氮气保护，室温反应16h终止。反应液过滤，浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得淡黄色油1.00g，四步收率53％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.36–7.29(m,4H),7.25–7.19(m,1H),6.75(d,J＝8.0Hz,1H),6.39(d,J＝2.4Hz,1H),6.24(dd,J＝8.0,2.4Hz,1H),5.91–5.81(m,1H),5.08–5.01(m,2H),4.21(d,J＝4.1Hz,2H),2.95–2.70(m,2H),2.38–2.29(m,2H),2.14(d,J＝6.0Hz,2H),1.55–1.37(m,4H)。MS(ESI)m/z:307.5[M+H]+。
步骤5:1’-苄基-1,3,4’-三溴-5,6,8,9-四氢螺环[苯并[7]轮烯-7,2’-吡咯烷]-2-胺的合成
Figure BDA0004006585300002392
室温下，依次向三口瓶中加入7-烯丙基-N7-苄基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2,7-二胺(1.00g，3.26mmol)并用DCM(15mL)溶解。-30℃下氮气保护，缓慢滴加溴化氢(0.37mL，3.26mmol)，滴毕，-30℃反应1h后滴加溴素(0.18mL，3.26mmol)反应1h终止。0℃缓慢滴加三乙胺(0.93mL，6.52mmol)室温反应16h终止。加水稀释，DCM萃取，合并，干燥，浓缩，得棕色油状粗品1.70g，粗品未经进一步纯化，直接用于下一步。MS(ESI)m/z:541.3[M+H]+。
步骤6:2-氨基-1'-苄基-1-溴-5,6,8,9-四氢螺环[苯并[7]轮烯-7,2'-吡咯烷]-4'-乙酸酯的合成
Figure BDA0004006585300002401
室温下，依次向单口瓶中加入1’-苄基-1,3,4’-三溴-5,6,8,9-四氢螺环[苯并[7]轮烯-7,2’-吡咯烷]-2-胺(1.70g，3.26mmol)，醋酸钾(0.90g，9.60mmol)和18-冠-6(催化量)并用乙腈(40mL)溶解。氮气保护，80℃反应16h终止。浓缩反应液，加水稀释，DCM萃取，合并，干燥，过滤，浓缩得棕色油状粗品2.10g，粗品未经进一步纯化，直接用于下一步。MS(ESI)m/z:443.5[M+H]+。
步骤7:2-氨基-1'-苄基-1-溴-5,6,8,9-四氢螺环[苯并[7]轮烯-7,2'-吡咯烷]-4'-醇的合成
Figure BDA0004006585300002402
室温下，依次向单口瓶中加入2-氨基-1'-苄基-1-溴-5,6,8,9-四氢螺环[苯并[7]轮烯-7,2'-吡咯烷]-4'-乙酸酯(2.10g，3.26mmol)和碳酸钾(1.23g，9.60mmol)并用甲醇(10mL)和四氢呋喃(5mL)溶解。氮气保护，室温反应16h终止。过滤，洗涤滤饼，合并滤液，浓缩得黄色油状粗品1.40g，粗品未经进一步纯化，直接用于下一步。
步骤8:2-氨基-5,6,8,9-四氢螺环[苯并[7]轮烯-7,2'-吡咯烷]-4'-醇的合成
Figure BDA0004006585300002403
室温下，依次向单口瓶中加入2-氨基-1'-苄基-1-溴-5,6,8,9-四氢螺环[苯并[7]轮烯-7,2'-吡咯烷]-4'-醇(1.40g，3.26mmol)和钯碳(0.20g)并用乙酸乙酯(10mL)溶解。氢气保护，室温反应16h终止。过滤，洗涤滤饼，合并滤液，浓缩得棕黄色固体粗品0.81g，粗品未经进一步纯化，直接用于下一步。MS(ESI)m/z:233.5[M+H]+。
步骤9:N-(3-(((5-氯-2-((4'-羟基-5,6,8,9-四氢螺环[苯并[7]轮烯-7,2'-吡咯烷]-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300002411
室温下，依次向单口瓶中加入2-氨基-5,6,8,9-四氢螺环[苯并[7]轮烯-7,2'-吡咯烷]-4'-醇(0.80g，3.26mmol)，N-(3-(((2,5-二氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(1.20g，3.45mmol)和樟脑磺酸(1.20g，5.20mmol)并用异丙醇(10mL)溶解。氮气保护，85℃反应16h终止。冷却至室温，加入碳酸钾(0.92g，7.00mmol)游离过夜。过滤，浓缩，高效色谱柱层析纯化(MeCN/H2O体系)得淡黄色固体产物0.03g，五步收率2％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.69(d,J＝2.3Hz,1H),8.58(d,J＝2.3Hz,1H),7.99(s,1H),7.33(s,1H),7.27(d,J＝8.0Hz,1H),6.89(dd,J＝8.3,3.7Hz,1H),4.92(d,J＝5.3Hz,2H),4.38–4.31(m,1H),3.32–3.31(m,1H),3.23(s,3H),3.19(s,3H),2.93–2.90(m,1H),2.80–2.65(m,4H),2.02–1.89(m,2H),1.79–1.65(m,4H)。MS(ESI)m/z:559.5[M+H]+。
实施例92:N-(3-(((5-氯-2-((5,6,8,9-四氢螺环[苯并[7]轮烯-7,2'-吡咯烷]-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300002412
步骤1～步骤8参考实施例92；
步骤9:N-(3-(((5-氯-2-((5,6,8,9-四氢螺环[苯并[7]轮烯-7,2'-吡咯烷]-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300002413
室温下，依次向单口瓶中加入2-氨基-5,6,8,9-四氢螺环[苯并[7]轮烯-7,2'-吡咯烷](0.80g，3.26mmol)，N-(3-(((2,5-二氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(1.20g，3.45mmol)和樟脑磺酸(1.20g，5.20mmol)并用异丙醇(10mL)溶解。氮气保护，85℃反应16h终止。冷却至室温，加入碳酸钾(0.92g，7.00mmol)游离过夜。过滤，浓缩，高效色谱柱层析纯化(MeCN/H2O体系)得淡黄色固体粗品0.01g，五步收率1％。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.69(d,J＝2.5Hz,1H),8.58(d,J＝2.5Hz,1H),7.99(s,1H),7.33(d,J＝1.7Hz,1H),7.28(dd,J＝8.1,1.6Hz,1H),6.89(d,J＝8.2Hz,1H),4.92(d,J＝5.3Hz,2H),3.23(s,3H),3.20(s,3H),3.07(t,J＝7.1Hz,2H),2.81–2.57(m,4H),1.91–1.86(m,1H),1.84–1.60(m,7H)。MS(ESI)m/z:543.7[M+H]+。
实施例93:N-(3-(((5-氯-2-((7-(((S)-2,3-二羟基丙基)(甲基)氨基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300002421
步骤1参考实施例77；
步骤2:(2S)-3-(甲基(2-硝基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)氨基)丙烷-1,2-二醇的合成
Figure BDA0004006585300002422
室温下，依次向单口瓶中加入N-甲基-2-硝基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-胺(0.50g，2.27mmol)，D-(+)-甘油醛(0.30g，3.40mmol)，AcOH(0.27g，4.54mmol)和无水THF(20mL)，50℃反应3h后加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.96g，4.54mmol)，反应1h终止。加MeOH淬灭，浓缩溶剂，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得黄色油状物0.20g，收率30％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.04(d,J＝2.5Hz,1H),7.98(dd,J＝8.2,2.5Hz,1H),7.43(d,J＝8.3Hz,1H),3.54–3.50(m,1H),3.38–3.36(m,1H),3.30–3.28(m,1H),3.01–2.92(m,2H),2.81–2.70(m,3H),2.48–2.43(m,1H),2.36–2.29(m,1H),2.23–2.16(m,3H),2.07–1.99(m,2H),1.28–1.19(m,2H)。MS(ESI)m/z:295.5[M+H]+。
步骤3:(2S)-3-((2-氨基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)(甲基)氨基)丙烷-1,2-二醇的合成
Figure BDA0004006585300002431
/>
室温下，依次向单口瓶中加入(2S)-3-(甲基(2-硝基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)氨基)丙烷-1,2-二醇(0.20g，1.07mmol)，Pd/C(0.05g)和MeOH(10mL)，氢气氛围下35℃反应3h终止。过滤，浓缩，得黄色油状物0.12g，粗品未经进一步纯化直接用于下一步。MS(ESI)m/z:265.5[M+H]+。
步骤4:N-(3-(((5-氯-2-((7-(((S)-2,3-二羟基丙基)(甲基)氨基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300002432
室温下，依次向单口瓶中加入N-(3-(((2,5-二氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.21g，0.59mmol)，(2S)-3-((2-氨基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)(甲基)氨基)丙烷-1,2-二醇(0.12g，0.45mmol)，樟脑磺酸(0.27g，1.18mmol)和IPA(10mL)，80℃反应16h终止。浓缩，加入水(10mL)和K2CO3(0.25g，1.80mmol)，室温搅拌过夜。DCM萃取，水洗，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得白色固体产物0.08g，两步收率20％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.69(d,J＝2.4Hz,1H),8.58(d,J＝2.3Hz,1H),7.99(s,1H),7.42–7.38(m,1H),7.32–7.27(m,1H),6.92(d,J＝8.0Hz,1H),4.92(d,J＝5.2Hz,2H),3.90–3.72(m,1H),3.42–3.35(m,2H),3.32–3.28(m,2H),3.23(s,3H),3.19(s,3H),2.88–2.76(m,1H),2.75–2.54(m,7H),2.30–2.15(m,2H),1.40–1.26(m,2H)。MS(ESI)m/z:591.6[M+H]+。
实施例94:N-(3-(((5-氯-2-((7-(((R)-2,3-二羟基丙基)(甲基)氨基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300002441
步骤1参考实施例77；
步骤2:(2R)-3-(甲基(2-硝基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)氨基)丙烷-1,2-二醇的合成
Figure BDA0004006585300002442
室温下，依次向单口瓶中加入N-甲基-2-硝基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-胺(0.30g，1.36mmol)，L-(-)-甘油醛(0.18g，2.04mmol)，AcOH(0.16g，2.73mmol)和无水THF(20mL)，50℃反应2h后加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.58g，2.73mmol)，反应0.5h终止，加MeOH淬灭，浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得黄色油状物0.11g，收率27％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.09(t,J＝2.9Hz,1H),8.01(dd,J＝8.3,2.5Hz,1H),7.47(dd,J＝8.3,2.6Hz,1H),3.83–3.71(m,1H),3.38–3.35(m,1H),3.30–3.26(m,1H),3.11–2.93(m,3H),3.89–3.76(m,3H),2.72–2.53(m,3H),2.38–2.11(m,3H),1.46–1.33(m,2H)。MS(ESI)m/z:295.5[M+H]+。
步骤3:(2R)-3-((2-氨基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)(甲基)氨基)丙烷-1,2-二醇的合成
Figure BDA0004006585300002443
室温下，依次向单口瓶中加入(2R)-3-(甲基(2-硝基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)氨基)丙烷-1,2-二醇(0.11g，0.37mmol)，Pd/C(0.05g)和MeOH(10mL)，氢气氛围下35℃反应3h终止。过滤，浓缩，得无色透明油状物0.06g。MS(ESI)m/z:265.5[M+H]+。
步骤4:N-(3-(((5-氯-2-((7-(((R)-2,3-二羟丙基)(甲基)氨基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300002451
室温下，依次向单口瓶中加入N-(3-(((2,5-二氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.10g，0.29mmol)，(2R)-3-((2-氨基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)(甲基)氨基)丙烷-1,2-二醇(0.06g，0.23mmol)，樟脑磺酸(0.14g，0.59mmol)和IPA(10mL)，80℃反应16h终止，浓缩，加入水(10mL)和K2CO3(0.25g，1.80mmol)，室温搅拌过夜，DCM萃取，水洗，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得白色固体产物0.05g，两步收率23％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.69(d,J＝2.4Hz,1H),8.57(d,J＝2.4Hz,1H),7.98(s,1H),7.40–7.36(m,1H),7.30(d,J＝7.3Hz,1H),6.92(d,J＝8.1Hz,1H),4.92(d,J＝5.3Hz,2H),3.89–3.80(m,1H),3.41–3.38(m,2H),3.32–3.28(m,2H),3.23(s,3H),3.19(s,3H),2.86–2.76(m,1H),2.74–2.54(m,7H),2.30–2.17(m,2H),1.38–1.27(m,2H)。MS(ESI)m/z:591.6[M+H]+。
实施例95:N-(3-(((5-氯-2-((3-(4-羟基丁烷-2-基)-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[c]氮杂卓-7-基]氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300002452
步骤1:4-(苄氧基)-2-甲基丁酸的合成
Figure BDA0004006585300002453
室温下，依次向单口瓶中加入α-甲基-γ-丁内酯(5.00g，50.00mmol)，溴化苄(35.00g,200.00mmol)，氢氧化钾(15.00g，230.00mmol)并用甲苯(120mL)溶解，升温至110℃反应5h后，冷却至室温，浓缩，加入甲醇(100mL)、水(50mL)，升温至90℃反应16h终止。冷却，加水稀释，甲基叔丁基醚反萃，水相调酸，DCM萃取，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，得淡黄色油状物10.30g，收率98％。MS(ESI)m/z:209.5[M+H]+。
步骤2:4-(苄氧基)-N-甲氧基-N,2-二甲基丁酰胺的合成
Figure BDA0004006585300002461
室温下，依次向单口瓶中加入4-(苄氧基)-2-甲基丁酸(1.00g，4.85mmol)，甲氧基甲基胺盐酸盐(0.70g，7.22mmol)，CDI(1.56g，9.62mmol)并用DCM(20mL)溶解，室温反应3h终止。反应液采用DCM萃取，萃取，水洗，有机相经无水硫酸钠干燥，浓缩，得无色透明油状物0.70g，收率82％。
步骤3:6-(苄氧基)-4-甲基己基-1-烯-3-酮的合成
Figure BDA0004006585300002462
室温下，依次向单口瓶中加入4-(苄氧基)-N-甲氧基-N,2-二甲基丁酰胺(0.70g，2.79mmol)，并用THF(10mL)溶解，降温-30℃滴加乙烯基溴化镁的THF溶液(8.36mL，8.36mmol)，室温反应3h终止。反应液采用EA萃取，水洗和饱和食盐水洗，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得无色透明油状物0.41g，收率67％。
步骤4:(E)-2-(6-(苄氧基)-4-甲基-3-氧己基-1-烯-1-基)-4-硝基苯甲腈的合成
Figure BDA0004006585300002463
室温下，依次向单口瓶中加入2-溴4-硝基苯腈(0.33g，1.44mmol)，6-(苄氧基)-4-甲基己基-1-烯-3-酮(0.41g，1.87mmol)，醋酸钯(0.01g，0.03mmol)，三(2-甲基苯基)膦(0.01g，0.04mmol)，DIEA(0.56g，4.32mmol)并用DMF(10mL)溶解。氮气保护，升温至100℃反应16h终止。冷却至室温，反应液采用EA萃取，水和饱和食盐水洗涤，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得黄色固体0.38g，收率73％。
步骤5:(E)-4-氨基-2-(6-(苄氧基)-4-甲基-3-氧己基-1-烯-1-基)苯甲腈的合成
Figure BDA0004006585300002471
室温下，依次向单口瓶中加入(E)-2-(6-(苄氧基)-4-甲基-3-氧己基-1-烯-1-基)-4-硝基苯甲腈(0.38g，1.04mmol)，铁粉(0.50g)，并用乙醇(10mL)溶解，升温60℃反应4h终止。冷却至室温，过滤，采用EA萃取，水洗，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，得棕色透明油状物0.32g，粗品未经进一步纯化，直接用于下一步反应。MS(ESI)m/z:335.5[M+H]+。
步骤6:(E)-N-(3-(6-(苄氧基)-4-甲基-3-氧己基-1-烯-1-基)-4-氰基苯基)-2,2,2-三氟乙酰胺的合成
Figure BDA0004006585300002472
室温下，依次向单口瓶中加入(E)-4-氨基-2-(6-(苄氧基)-4-甲基-3-氧己基-1-烯-1-基)苯甲腈(0.32g，0.96mmol)，三乙胺(0.15g，1.44mmol)并用DCM(10mL)溶解，加入三氟乙酸酐(0.24g，1.15mmol)，室温反应16h终止。浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得无色透明油状物0.27g，两步收率65％。
步骤7:2,2,2-三氟-N-(3-(4-羟基丁-2-基)-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[c]氮杂卓-7-基)乙酰胺的合成
Figure BDA0004006585300002473
室温下，依次向单口瓶中加入(E)-N-(3-(6-(苄氧基)-4-甲基-3-氧己基-1-烯-1基)-4-氰基苯基)-2,2,2-三氟乙酰胺(0.27g，0.62mmol)，雷尼镍(0.20g)，并用甲醇(15mL)溶解，氢气氛围下室温反应40h终止。过滤，浓缩，得淡黄色固体0.11g，粗品未经进一步纯化，直接用于下一步反应。MS(ESI)m/z:331.5[M+H]+。
步骤8:3-(7-氨基-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[c]氮杂卓-3-基)-1-丁醇的合成
Figure BDA0004006585300002474
室温下，依次向单口瓶中加入2,2,2-三氟-N-(3-(4-羟基丁-2-基)-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[c]氮杂卓-7-基)乙酰胺(0.11g，0.33mmol)，氢氧化钠水溶液(1mL)并用甲醇(5mL)溶解，升温至60℃反应3h终止。冷却，反应液采用EA萃取，水洗，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，厚制备板纯化(MeOH/DCM体系)得淡黄色油状物0.02g，两步收率14％。MS(ESI)m/z:235.5[M+H]+。
步骤9:N-(3-(((5-氯-2-((3-(4-羟基丁烷-2-基)-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[c]氮杂卓-7-基]氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300002481
室温下，依次向单口瓶中加入3-(7-氨基-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[c]氮杂卓-3-基)-1-丁醇(0.02g，0.09mmol)，N-(3-(((2,5-二氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.04g，0.10mmol)，樟脑磺酸(0.02g，0.56mmol)，并用异丙醇(10mL)溶解。氮气保护，升温至85℃反应16h终止。冷却至室温，碱化，过滤，得淡黄色固体粗品，厚制备板纯化(MeOH/DCM体系)得淡黄色油状物0.02g，收率42％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.70(d,J＝2.5Hz,1H),8.59(d,J＝2.4Hz,1H),8.03(s,1H),7.49(s,1H),7.43(d,J＝8.2Hz,1H),7.06(d,J＝8.2Hz,1H),4.95(d,J＝5.3Hz,2H),4.12–3.92(m,2H),3.50–3.44(m,1H),3.42–3.38(m,1H),3.25(s,3H),3.20(s,3H),3.16–3.05(m,1H),2.92(t,J＝13.1Hz,1H),2.71–2.62(m,1H),1.98–1.81(m,2H),1.69–1.61(m,1H),1.42–1.26(m,2H),0.89(d,J＝6.9Hz,3H)。MS(ESI)m/z:561.6[M+H]+。
实施例96:N-(3-(((5-氯-2-((7-(2-羟基-1-吗啉乙基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺
Figure BDA0004006585300002482
步骤1:2-(2-硝基-5,6,8,9-四氢-7H-苯并[7]轮烯-7-亚基)乙酸乙酯的合成
Figure BDA0004006585300002491
0℃下，依次向三口瓶中加入氢化钠(0.70g，18.27mmol)和THF(25mL)，氮气保护，滴加磷酰乙酸三乙酯(3.30g，14.62mmol)，反应0.5h后加入2-硝基-5,6,8,9-四氢-7H-苯并[7]轮烯-7-酮(2.50g，12.18mmol)，0℃反应0.5h终止。冰水淬灭，EA萃取，水洗，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，得淡黄色固体2.50g，收率75％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.11(d,J＝2.5Hz,1H),8.02(dd,J＝8.2,2.4Hz,1H),7.49(d,J＝8.3Hz,1H),5.77(s,1H),4.09(q,J＝7.1Hz,2H),3.02–2.88(m,6H),2.45–2.37(m,2H),1.21(t,J＝7.1Hz,3H)。
步骤2:2-溴-2-(7-溴-2-硝基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)乙酸乙酯的合成
Figure BDA0004006585300002492
依次向单口瓶中加入2-(2-硝基-5,6,8,9-四氢-7H-苯并[7]轮烯-7-亚基)乙酸乙酯(2.45g，8.90mmol)、DCM(25mL)和溴素(4.27g，26.70mmol)。氮气保护，室温反应12h终止。淬灭反应，分液，水洗，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，得褐色油状粗品3.80g，产物未经进一步纯化，直接用于下一步。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.11(t,J＝3.0Hz,1H),8.03(dd,J＝8.3,2.5Hz,1H),7.49(dd,J＝8.3,1.6Hz,1H),5.15(s,1H),4.27–4.16(m,2H),3.28–3.15(m,2H),3.07–2.88(m,3H),2.40–2.32(m,1H),2.10–1.96(m,1H),1.24(t,J＝7.1Hz,3H)。
步骤3:2-吗啉-2-(3-硝基-6,9-二氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)乙酸乙酯的合成
Figure BDA0004006585300002493
室温下，依次向单口瓶中加入2-溴-2-(7-溴-2-硝基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)乙酸乙酯(1.40g，3.26mmol)，吗啡啉(0.43g，4.88mmol)，三乙胺(1.00g，9.77mmol)和DMAc(10mL)。氮气保护，80℃反应12h终止。反应液加水稀释，EA萃取，水洗，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得褐色油状物0.30g，两步收率39％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.06–7.99(m,2H),7.49–7.44(m,1H),7.44(d,J＝8.2Hz,1H),5.90(t,J＝5.8Hz,1H),5.76(s,1H),4.08–4.01(m,2H),3.71–3.50(m,6H),3.12–2.99(m,2H),2.33–2.19(m,6H),1.08(t,J＝7.1Hz,3H)。
步骤4:2-(2-氨基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)-2-吗啉乙酸乙酯的合成
Figure BDA0004006585300002501
室温下，依次向单口瓶中加入2-吗啉-2-(3-硝基-6,9-二氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)乙酸乙酯(1.00g，2.77mmol)，Pd/C(0.10g)和EA(20mL)。氢气氛围，室温反应12h终止。反应液过滤，EA淋洗滤饼，浓缩，得无色油状粗品1.00g。产物未经进一步纯化，直接用于下一步。
步骤5:2-(2-氨基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)-2-吗啉乙基-1-醇的合成
Figure BDA0004006585300002502
室温下，依次向单口瓶中加入2-(2-氨基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)-2-吗啉乙酸乙酯(1.00g，3.03mmol)和THF(15mL)。0℃，氮气保护下，加入LiAlH4(0.13g，3.33mmol)，反应1h终止。淬灭反应，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(DCM/MeOH体系)得无色油状物0.05g，两步收率6％。MS(ESI)m/z:291.5[M+H]+。
步骤6:N-(3-(((5-氯-2-((7-(2-羟基-1-吗啉乙基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺
Figure BDA0004006585300002511
室温下，依次向单口瓶中加入2-(2-氨基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)-2-吗啉乙基-1-醇(0.05g，0.17mmol)，N-(3-(((2,5-二氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.07g，0.19mmol)，樟脑磺酸(0.08g，0.34mmol)和异丙醇(2mL)。氮气保护，80℃反应12h终止。反应液浓缩，MeOH溶解，碳酸钾游离，加入EA稀释，过滤，滤液浓缩，厚制备板纯化(THF/PE体系)，得到淡黄色固体产物0.04g，收率38％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.70(d,J＝2.4Hz,1H),8.58(d,J＝2.4Hz,1H),7.98(s,1H),7.31–7.22(m,2H),6.85(d,J＝8.1Hz,1H),4.93(d,J＝5.3Hz,2H),3.57–3.50(m,6H),3.23(s,3H),3.20(s,3H),2.73–2.57(m,7H),2.16–2.06(m,2H),1.94–1.85(m,2H),1.14–0.96(m,3H)。MS(ESI)m/z:617.6[M+H]+。
实施例97:N-(3-(((5-氯-2-((3-((2-羟基乙基)(甲基)氨基)-1-甲基-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[b]氮杂卓-7-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺
Figure BDA0004006585300002512
步骤1:2-溴-1-(1-哌啶基)乙酮的合成
Figure BDA0004006585300002513
依次向三口瓶中加入哌啶(4.64g，54.50mmol)、三乙胺(6.02g,59.45mmol)和DCM(100mL)，氮气保护，0℃下，滴加溴乙酰溴(10.00g，49.54mmol)，反应2h终止。冰水淬灭反应，分液，水洗，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得无色油状物5.00g，收率49％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ4.10(s,2H),3.44–3.40(m,4H),1.61–1.53(m,4H),1.46–1.41(m,2H)。MS(ESI)m/z:206.3[M+H]+。
步骤3:4-硝基-2-乙烯基苯胺的合成
Figure BDA0004006585300002521
室温下，依次向单口瓶中加入2-溴-4-硝基苯胺(5.00g，23.04mmol)，乙烯基三氟硼酸钾(4.63g，34.56mmol)，Pd(dppf)Cl2(0.84g，1.15mmol)，碳酸铯(18.77g，57.60mmol)，水(15mL)和THF(150mL)。氮气保护，80℃反应12h终止。反应液加水，EA萃取，水洗，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得黄色固体3.30g，收率88％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.13(d,J＝2.6Hz,1H),7.90(dd,J＝9.1,2.7Hz,1H),6.89(dd,J＝17.2,10.9Hz,1H),6.70(d,J＝9.1Hz,1H),5.78(d,J＝17.3Hz,1H),5.34(d,J＝10.9Hz,1H)。MS(ESI)m/z:165.3[M+H]+。
步骤4:N-甲基-4-硝基-2-乙烯基苯胺的合成
Figure BDA0004006585300002522
依次向四口瓶中加入4-硝基-2-乙烯基苯胺(3.30g，20.10mmol)和THF(40mL)。氮气保护，控温-60℃，滴加甲基锂乙醚溶液(13.8mL，22.11mmol)。滴毕反应1h，再滴加碘甲烷(3.42g，24.12mmol)，缓慢恢复室温，反应5h终止。冰水淬灭，EA萃取，水洗，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得黄色固体1.30g，收率36％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.10(d,J＝2.8Hz,1H),8.05(dd,J＝9.1,2.7Hz,1H),6.89(dd,J＝17.1,11.0Hz,1H),6.64(d,J＝9.1Hz,1H),5.79(d,J＝17.1Hz,1H),5.39(d,J＝10.9Hz,1H),2.85(d,J＝4.6Hz,3H)。
步骤5:2-(甲基(4-硝基-2-乙烯基苯基)氨基)-1-(1-哌啶基)乙酮的合成
Figure BDA0004006585300002523
依次向四口瓶中加入N-甲基-4-硝基-2-乙烯基苯胺(1.30g，7.30mmol)和THF(20mL)。0℃，氮气保护下，加入NaH(0.58g，14.59mmol)，反应1h后滴加2-溴-1-(1-哌啶基)乙酮(1.80g，8.75mmol)，反应2h终止。向体系加入冰水淬灭，EA萃取，水洗，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得黄色油状物1.06g，收率48％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.11(d,J＝2.8Hz,1H),8.04(dd,J＝9.1,2.8Hz,1H),7.03(d,J＝9.1Hz,1H),6.77(dd,J＝17.5,10.9Hz,1H),5.83(d,J＝17.5Hz,1H),5.36(d,J＝10.9Hz,1H),4.18(s,2H),3.42(t,J＝5.5Hz,2H),3.31(t,J＝5.3Hz,2H),2.96(s,3H),1.56–1.54(m,2H),1.53–1.39(m,4H)。MS(ESI)m/z:304.5[M+H]+。
步骤6:1-甲基-7-硝基-1,2-二氢-3H-苯并[b]氮杂卓-3-酮的合成
Figure BDA0004006585300002531
室温下，依次向单口瓶中加入2-(甲基(4-硝基-2-乙烯基苯基)氨基)-1-(1-哌啶基)乙酮(1.40g，4.85mmol)，DCM(40mL)，三氟甲磺酸酐(4.93g，17.48mmol)和2-氟吡啶(1.56g，16.02mmol)。氮气保护下，反应4h终止。浓缩反应液，向体系加入1，4-二氧六环和NaHCO3饱和溶液，反应1h终止。EA萃取，水洗，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得黄色固体0.50g，收率47％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.61(d,J＝2.7Hz,1H),8.20(dd,J＝9.3,2.8Hz,1H),7.69(d,J＝11.9Hz,1H),7.28(d,J＝9.3Hz,1H),6.48(d,J＝11.8Hz,1H),3.65(s,2H),3.27(s,3H)。
步骤7:(1-甲基-3-氧代-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[b]氮杂卓-7-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
Figure BDA0004006585300002532
依次向单口瓶中加入1-甲基-7-硝基-1,2-二氢-3H-苯并[b]氮杂卓-3-酮(0.50g，2.29mmol)，Boc2O(0.75g，3.44mmol)，Pd/C(0.10g)和EA(10mL)。氢气氛围，反应5h终止。过滤反应液，EA淋洗滤饼，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得无色油状物0.20g，收率30％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.27(d,J＝2.3Hz,1H),7.21(dd,J＝8.8,1.8Hz,1H),6.91(d,J＝8.7Hz,1H),3.58(s,2H),2.97–2.92(m,2H),2.78(s,3H),2.68–2.63(m,2H),1.46(s,9H)。
步骤8:(3-((2-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)乙基)(甲基)氨基)-1-甲基-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[b]氮杂卓-7-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
Figure BDA0004006585300002541
室温下，依次向单口瓶中加入(1-甲基-3-氧代-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[b]氮杂卓-7-基)氨基甲酸叔丁酯(0.15g，0.52mmol)，N-甲基-2-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基)乙胺(0.41g，1.29mmol)和DCM(5mL)。加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.33g，1.55mmol)，反应2h终止。向体系加入冰水淬灭反应，分液，水洗，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得无色油状物0.20g，收率66％。MS(ESI)m/z:588.9[M+H]+。步骤9:2-((7-氨基-1-甲基-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[b]氮杂卓-3-基)(甲基)氨基)乙醇的合成
Figure BDA0004006585300002542
依次向单口瓶中加入(3-((2-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)乙基)(甲基)氨基)-1-甲基-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[b]氮杂卓-7-基)氨基甲酸叔丁酯(0.20g，0.34mmol)、MeOH(2mL)和浓盐酸(0.5mL)。室温反应12h终止。淬灭反应，EA萃取，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得无色油状纯品0.05g，收率59％。MS(ESI)m/z:250.5[M+H]+。
步骤10:N-(3-(((5-氯-2-((3-((2-羟基乙基)(甲基)氨基)-1-甲基-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[b]氮杂卓-7-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300002543
室温下，依次向单口瓶中加入2-((7-氨基-1-甲基-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[b]氮杂卓-3-基)(甲基)氨基)乙醇(0.05g，0.20mmol)，N-(3-(((2,5-二氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.08g，0.22mmol)，樟脑磺酸(0.09g，0.40mmol)和异丙醇(2mL)。氮气保护，80℃反应12h终止。反应液浓缩，MeOH溶解，加入K2CO3游离产物，加入EA稀释，过滤，制备板分离纯化(MeOH/DCM体系)得到淡黄色固体0.04g，收率35％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.70(d,J＝2.5Hz,1H),8.58(d,J＝2.4Hz,1H),7.96(s,1H),7.31–7.28(m,2H),6.76(d,J＝8.6Hz,1H),4.92(d,J＝5.3Hz,2H),3.62–3.53(m,2H),3.41–3.39(m,1H),3.26–3.23(m,1H),3.23(s,3H),3.19(s,3H),2.89–2.74(m,5H),2.65–2.55(m,3H),2.48–2.35(m,3H),2.04–1.97(m,1H),1.43–1.36(m,1H)。MS(ESI)m/z:576.9[M+H]+。实施例98:N-(3-(((5-氯-2-((7-(-1-吗啉乙基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺
Figure BDA0004006585300002551
步骤1～步骤4参考实施例96；
步骤5:7-(1-吗啉乙基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-胺的合成
Figure BDA0004006585300002552
室温下，依次向单口瓶中加入2-(2-氨基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)-2-吗啉乙酸乙酯(1.00g,3.03mmol)和THF(15mL)。0℃，氮气保护下，加入LiAlH4(0.13g,3.33mmol)，反应1h终止。淬灭反应，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(DCM/MeOH体系)得无色油状粗品0.05g，收率6％。MS(ESI)m/z:275.5[M+H]+。
步骤6:N-(3-(((5-氯-2-((7-(-1-吗啉乙基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺
Figure BDA0004006585300002561
室温下，依次向单口瓶中加入7-(1-吗啉乙基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-胺(0.05g,0.18mmol)，N-(3-(((2,5-二氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.07g，0.19mmol)，樟脑磺酸(0.08g，0.34mmol)和异丙醇(2mL)。氮气保护，80℃反应12h终止。反应液浓缩，MeOH溶解，碳酸钾游离，加入EA稀释，过滤，滤液浓缩，厚制备板纯化(THF/PE体系)，得到淡黄色固体产物0.02g，收率19％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.70(d,J＝2.5Hz,1H),8.58(d,J＝2.4Hz,1H),7.98(s,1H),7.29(d,J＝2.2Hz,1H),7.25(dd,J＝8.1,2.2Hz,1H),6.85(d,J＝8.1Hz,1H),4.92(d,J＝5.3Hz,2H),3.61–3.53(m,4H),3.23(s,3H),3.19(s,3H),2.67–2.63(m,4H),2.41–2.29(m,5H),1.91–1.83(m,2H),1.66–1.60(m,1H),1.43–1.30(m,3H),1.02–0.93(m,2H)。MS(ESI)m/z:601.7[M+H]+。
实施例99:N-(3-(((5-氯-2-((7-(1-((S)-3-羟基吡咯烷-1-基)乙基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300002562
/>
步骤1～步骤3参考实施例86；
步骤4:(7-甲酰基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
Figure BDA0004006585300002563
室温下，依次向单口瓶中加入2-硝基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-甲醛(1.80g，8.21mmol)、Fe粉(4.60g，82.10mmol)、Boc2O(5.40g，24.63mmol)和EtOH(30mL)。氮气保护下，室温反应4h终止。过滤反应液，滤饼用EtOH淋洗，旋干滤液，加入EA和饱和NaHCO3溶液分液，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得无色油状物2.00g，收率84％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.24(d,J＝2.3Hz,1H),7.13(dd,J＝8.2,2.2Hz,1H),6.99(d,J＝8.1Hz,1H),2.79–2.68(m,4H),2.66–2.61(m,1H),2.13–2.04(m,2H),1.47(s,9H),1.37–1.28(m,2H)。MS(ESI)m/z:289.4[M+H]+。
步骤5:(7-(1-羟乙基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
Figure BDA0004006585300002571
-40℃下，依次向四口瓶中加入THF(25mL)和甲基溴化镁的四氢呋喃溶液(24.90mL，24.90mmol)，滴加(7-甲酰基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基甲酸叔丁酯(1.20g，4.15mmol)的THF(25mL)溶液。氮气保护，-40℃反应2h终止。淬灭反应，EA萃取，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得无色油状物0.70g，收率55％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.21(d,J＝2.2Hz,1H),7.11(dd,J＝8.0,2.2Hz,1H),6.96(d,J＝8.1Hz,1H),3.51–3.43(m,1H),2.74–2.58(m,4H),1.99–1.84(m,2H),1.62–1.53(m,1H),1.46(s,9H),1.08–0.88(m,2H),0.96(d,J＝6.4Hz,3H)。
步骤6:(7-乙酰基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
Figure BDA0004006585300002572
室温下，依次向单口瓶中加入(7-(1-羟乙基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基甲酸叔丁酯(0.80g，2.62mmol)、NaOAc(0.43g，5.25mmol)、DCM(20mL)和PCC(1.13g，5.25mmol)。氮气保护下，室温反应2h终止。过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得无色油状物0.75g，收率94％。
步骤7:(7-(1-((S)-3-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)吡咯烷-1-基)乙基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
Figure BDA0004006585300002581
室温下，依次向四口瓶中加入(7-乙酰基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基甲酸叔丁酯(0.40g，1.32mmol)、(S)-3-((叔丁基二苯基硅基)氧基)吡咯烷(0.64g，1.98mmol)、DCM(10mL)和三乙酰氧基硼氢化钠(0.84g，3.96mmol)。氮气保护下，室温反应12h终止。加水淬灭加入无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得无色油状物0.50g，收率62％。MS(ESI)m/z:613.9[M+H]+。
步骤8:(3S)-1-(1-(2-氨基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)乙基)吡咯烷-3-醇的合成
Figure BDA0004006585300002582
室温下，依次向单口瓶中加入(7-(1-((S)-3-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)吡咯烷-1-基)乙基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基甲酸叔丁酯(0.50g，0.82mmol)、MeOH(5mL)和浓HCl(1mL)。室温反应12h终止。游离，EA萃取，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得无色油状物0.20g，收率90％。MS(ESI)m/z:275.6[M+H]+。
步骤9:N-(3-(((5-氯-2-((7-(1-((S)-3-羟基吡咯烷-1-基)乙基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300002583
室温下，依次向单口瓶中加入(3S)-1-(1-(2-氨基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)乙基)吡咯烷-3-醇(0.20g，0.73mmol)，N-(3-(((2,5-二氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.29g，0.80mmol)，樟脑磺酸(0.34g，1.45mmol)和异丙醇(5mL)。氮气保护，80℃反应12h终止。反应液浓缩，MeOH溶解，碳酸钾游离，加入EA稀释，过滤，浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得白色固体0.30g，收率68％。MS(ESI)m/z:601.8[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.69(d,J＝2.5Hz,1H),8.58(d,J＝2.4Hz,1H),7.98(s,1H),7.30(d,J＝2.3Hz,1H),7.24(dd,J＝8.1,2.4Hz,1H),6.85(d,J＝8.1Hz,1H),4.92(d,J＝5.3Hz,2H),4.19–4.12(m,1H),3.23(s,3H),3.19(s,3H),2.80–2.54(m,6H),2.47–2.41(m,1H),2.36–2.27(m,1H),2.05–1.90(m,3H),1.87–1.79(m,1H),1.73–1.65(m,1H),1.56–1.48(m,1H),1.07(q,J＝12.1Hz,1H),0.89–0.81(m,1H),0.79(d,J＝6.3Hz,3H)。MS(ESI)m/z:601.8[M+H]+。
实施例100:N-(3-(((5-氯-2-((7-(1-((R)-3-羟基吡咯烷-1-基)乙基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300002591
步骤1～步骤6参考实施例99；
步骤7:(7-(1-((R)-3-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)吡咯烷-1-基)乙基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
Figure BDA0004006585300002592
室温下，依次向四口瓶中加入(7-乙酰基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]环烯-2-基)氨基甲酸叔丁酯(0.40g，1.32mmol)、(R)-3-((叔丁基二苯基硅基)氧基)吡咯烷(0.64g，1.98mmol)、DCM(10mL)和三乙酰氧基硼氢化钠(0.84g，3.96mmol)。氮气保护下，室温反应12h终止。加水淬灭，加入无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(EA/PE体系)得无色油状粗品0.50g，产物未经进一步纯化，直接进行下一步。MS(ESI)m/z:614.0[M+H]+。
步骤8:(3R)-1-(1-(2-氨基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)乙基)吡咯烷-3-醇的合成
Figure BDA0004006585300002601
室温下，依次向单口瓶中加入(7-(1-((R)-3-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)吡咯烷-1-基)乙基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基甲酸叔丁酯(0.50g，0.82mmol)、MeOH(5mL)和浓HCl(1mL)。室温反应12h终止。K2CO3游离，加入EA分液，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得无色油状物0.20g，两步收率55％。
步骤9:N-(3-(((5-氯-2-((7-(1-((R)-3-羟基吡咯烷-1-基)乙基)-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的合成
Figure BDA0004006585300002602
室温下，依次向单口瓶中加入(3R)-1-(1-(2-氨基-6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯-7-基)乙基)吡咯烷-3-醇(0.20g,0.73mmol)，N-(3-(((2,5-二氯嘧啶-4-基)氨基)甲基)吡嗪-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(0.29g，0.80mmol)，樟脑磺酸(0.34g，1.45mmol)和异丙醇(5mL)。氮气保护，80℃反应12h终止。反应液浓缩，MeOH溶解，碳酸钾游离，加入EA稀释，过滤，浓缩，柱层析纯化(MeOH/DCM体系)得白色固体0.30g，收率68％。MS(ESI)m/z:601.8[M+H]+。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.70(d,J＝2.5Hz,1H),8.58(d,J＝2.4Hz,1H),7.99(s,1H),7.31(d,J＝2.3Hz,1H),7.24(dd,J＝8.2,2.3Hz,1H),6.85(d,J＝8.2Hz,1H),4.92(d,J＝5.3Hz,2H),4.18–4.13(m,1H),3.21(s,3H),3.17(s,3H),2.77–2.55(m,6H),2.47–2.41(m,1H),2.37–2.27(m,1H),2.05–1.92(m,3H),1.86–1.79(m,1H),1.71–1.64(m,1H),1.56–1.48(m,1H),1.07(q,J＝12.1Hz,1H),0.89–0.82(m,1H),0.79(d,J＝6.2Hz,3H)。MS(ESI)m/z:601.6[M+H]+。
实施例101
胶囊
组分 用量
活性成分 100mg
淀粉 81mg
交联聚维酮 16mg
硬脂酸镁 1mg
胶态二氧化硅 2mg
总重 200mg
将实施例1-100所得任一化合物或其立体异构体或其药学上可接受的盐、淀粉、交联聚维酮、硬脂酸镁和胶态二氧化硅，混合后填入囊壳。
实施例102
胶囊
组分 用量
活性成分 250mg
淀粉 35mg
交联聚维酮 12mg
硬脂酸镁 1mg
胶态二氧化硅 2mg
总重 300mg
将实施例1-100所得任一化合物或其立体异构体或其药学上可接受的盐、淀粉、交联聚维酮、硬脂酸镁和胶态二氧化硅，混合后填入囊壳。
实施例103
激酶活性测试
本试验采用γ试33p-ATP同位素测试法测试化合物对激酶FLT3(ITD)，FLT3(D835Y)，CDK9/cyclin T1的抑制作用，并得出化合物对该酶抑制活性的半数抑制浓度IC50。
1.基础反应缓冲液
20mM Hepes(pH 7.5),10mM MgCl2,1mM EGTA,0.02％Brij35,0.02mg/ml BSA,0.1mM Na3VO4,2mM DTT,1％DMSO。
2.化合物配制
化合物采用100％DMSO溶解至特定的浓度，之后采用自动加样装置梯度稀释成不同浓度的待测样品(DMSO溶解液)。
3.反应步骤
3.1使用基础反应缓冲液稀释反应底物；
3.2将激酶加入底物溶液中，轻柔混匀；
3.3采用自动加样系统将100％DMSO稀释的不同浓度化合物加入激酶溶液中，室温下孵育20min；
3.4室温下加入33P-ATP(10μM,10μCi/μl)启动激酶反应，反应2h
4.检测
反应液经离子交换过滤系统除去未反应的ATP及反应产生的ADP等离子后检测底物中33P同位素放射量。
5.数据处理
依据放射量计算加入不同浓度抑制剂体系中的激酶活性从而得到不同浓度化合物对激酶活性的抑制作用，采用graphpad prism拟合得化合物抑制IC50。
本发明化合物的生物化学活性通过以上的试验进行测定，测得的IC50值参见下表：
Figure BDA0004006585300002621
/>
Figure BDA0004006585300002631
/>
Figure BDA0004006585300002641
本实验对比化合物为323-1267、323-1271、PKC412，其中323-1267、323-1271参考WO2009071535A1制得，FLT3抑制剂PKC412购买自一飞生物，批号：F489645。
Figure BDA0004006585300002642
结论：本发明化合物可同时抑制FLT3、CDK9两种激酶，具有显著的FLT3(ITD)、FLT3(D835Y)、CDK9/cyclin T1激酶抑制活性，且对FLT3(ITD)、FLT3(D835Y)、CDK9/cyclin T1激酶抑制活性优于323-1271、323-1267和PKC412，在预防或治疗FLT3、CDK9活性介导的激酶相关的恶性肿瘤中具有良好的应用前景。
实施例104
AML细胞抑制活性测试
FLT3野生型HL-60细胞增殖抑制试验
本实验采用MTT的方法测试化合物对HL-60细胞活性作用，并得出化合物抑制HL-60细胞增殖活性的半数抑制浓度IC50：
将培养的细胞收集、重悬和计数，并调整细胞终浓度为200000个/mL，将细胞接种到96孔板中，每孔100μL。与此同时进行药物治疗。将待测样品母液用DMSO梯度稀释药液后用无血清培养基稀释同等倍数配制各个待测药物并将各组药液加入96孔板中，每孔100μL，同时设立设阴性孔，空白孔。将96孔板在37℃，5％CO2的培养箱中继续培养72h。向96孔板中加入CCK8试剂，每孔10μL，于培养箱中继续培养6h。用酶标仪于450nm波长下测量溶液吸光度值。计算增殖抑制率(proliferation inhibition rate,PI)按照以下公式计算：PI(％)＝(1-Atest/Acontrol)×100％其中Atest为加药组的吸光度值，Acontrol为阴性对照组的吸光度值。根据增殖抑制率，利用Graphpad Prism 6.0软件计算半数抑制浓度IC50值。
FLT3(ITD)突变型MV-4-11细胞增殖抑制试验
本实验采用MTT的方法测试化合物对MV-4-11细胞活性作用，并得出化合物抑制MV-4-11细胞增殖活性的半数抑制浓度IC50：
将培养的细胞收集、重悬和计数，并调整细胞终浓度为200000个/mL，将细胞接种到96孔板中，每孔100μL。与此同时进行药物治疗。将待测样品母液用DMSO梯度稀释药液后用无血清培养基稀释同等倍数配制各个待测药物并将各组药液加入96孔板中，每孔100μL，同时设立设阴性孔，空白孔。将96孔板在37℃，5％CO2的培养箱中继续培养72h。向96孔板中加入CCK8试剂，每孔10μL，于培养箱中继续培养6h。用酶标仪于450nm波长下测量溶液吸光度值。计算增殖抑制率(proliferation inhibition rate,PI)按照以下公式计算：PI(％)＝(1-Atest/Acontrol)×100％其中Atest为加药组的吸光度值，Acontrol为阴性对照组的吸光度值。根据增殖抑制率，利用Graphpad Prism 6.0软件计算半数抑制浓度IC50值。本发明化合物的生物化学活性通过以上的试验进行测定，测得的IC50值参见下表：
Figure BDA0004006585300002651
/>
Figure BDA0004006585300002661
/>
Figure BDA0004006585300002671
/>
Figure BDA0004006585300002681
CDK9抑制剂Bay1251152购买自MCE(MedChemExpress)中国，批号：28855。
Figure BDA0004006585300002682
结论：本发明化合物同时对FLT3(ITD)突变型MV-4-11细胞有较强的生长抑制作用，部分化合物对FLT3野生型HL-60细胞有生长抑制作用，且相对于323-1271、323-1267、PKC412、Bay1251152对FLT3(ITD)突变型MV-4-11细胞的生长抑制作用更强，在FLT3活性介导的激酶相关的恶性肿预防或治疗中有有良好的应用前景，部分化合物通过抑制CDK9活性对FLT3野生型肿瘤细胞也有较强的抑制作用。
实施例105
MV-4-11小鼠移植瘤药效
扩大培养MV-4-11细胞，收集对数生长期的细胞，去除培养液，用PBS洗剂两次，于裸小鼠腋下皮下接种细胞1×107个细胞/100μL，继续饲养，每天观察小鼠的生长情况，当肿瘤体积平均值达到60-150mm3，肿瘤体积标准差SD≤1/3时，按照统计学方法进行分组并给药，每天1次，连续给药21天。给药期间每周测量肿瘤体积2次和每天称重小鼠体重，绘制肿瘤生长曲线并计算肿瘤体积抑制率TGI，在第22天将动物进行安乐死并进行拍照，分离每个肿瘤并称重。实验结果以均值±SEM表示。
各试验组肿瘤生长曲线见图1；
各试验组肿瘤瘤重分布见图2；
各试验组肿瘤体积抑制率TGI变化如下表所示；
TGI变化 第0天 第3天 第7天 第10天 第14天 第17天 第21天
G2:I-1,30mg/kg,Qd×21,PO 0.00％ 48.78％ 78.20％ 88.97％ 95.06％ 95.13％ 100.0％
G3:I-21,30mg/kg,Qd×21,PO 0.00％ 7.98％ 17.81％ 48.61％ 56.87％ 48.33％ 39.70％
G4:I-21,15mg/kg,Qd×21,IV 0.00％ 58.14％ 75.73％ 83.58％ 85.81％ 83.57％ 81.38％
G5:I-23,50mg/kg,Qd×21,PO 0.00％ 49.82％ 68.40％ 90.66％ 95.62％ 97.67％ 98.02％
G6:I-24,30mg/kg,Qd×21,PO 0.00％ 36.15％ 70.64％ 96.19％ 98.11％ 99.66％ 100.0％
G7:I-25,30mg/kg,Qd×21,PO 0.00％ 23.45％ 85.08％ 97.99％ 99.31％ 99.73％ 100.0％
结论：本发明化合物具有显著抑制体内MV-4-11癌细胞生长的活性。

Claims (13)

1.一种具有式(I)所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，其特征在于：
Figure FDA0004006585290000011
环A选自6～10元芳基或5～10元杂芳基；
环B选自6～10元芳基或5～10元杂芳基；
环C选自3～8元碳环或4～12元杂环基；
R1选自H、任选取代或未取代的C1-8直链或支链烷基、C3-8环烷基、C4-12杂环基、-NR11S(O)mR12、-NR11C＝OR12、-(CH2)nS(O)mR11、-(CH2)nS(O)mNR11R12、-(CH2)nP(O)mR11、-(CH2)nC＝ONR11R12或-(CH2)nSO＝NR11；
R2选自H、氘、卤素、氰基、氨基、硝基、-C＝OOR11、-C＝ONHR11R12、-C＝OR11、任选取代或未取代的C1-4烷基、C3-8环烷基或C1-4烷氧基；
R3、R4、R5分别独立地选自H、氘、卤素、羟基、C1-4烷氧基、C1-8直链或支链烷基、C3-8环烷基、-COOH、-C＝OR11、-C＝ONR11R12、-(CH2)nNR11R12、-NR11COR12、-NR11S(O)mR12、-S(O)mR11、-S(O)mNR11R12或-(CH2)n-C4-12杂环基，所述C1-8直链或支链烷基、C3-8环烷基或-(CH2)n-C4-12杂环基可进一步被氘、卤素、羟基、氰基、C1-4烷氧基、C1-8直链或支链烷基、C3-8环烷基、-COOH、-C＝OR11、羟基取代的C1-8烷基、C1-2烷氧基取代的C1-8烷基、-C＝ONR11R12、-(CH2)nNR11R12、-NR11COR12、-NR11S(O)mR12、-S(O)mR11、-S(O)mNR11R12或C4-12杂环基所取代；
或者，R3、R4和R5两两间连接，形成C3-8环烷基或C4-12杂环基，且所述的C3-8环烷基或C4-12杂环基可进一步被氘、卤素、羟基、氰基、C1-4烷氧基、C1-8烷基、-COOH、-C＝OR11、羟基取代的C1-8烷基、-C＝ONR11R12、-(CH2)nNR11R12、-NR11COR12、-NR11S(O)mR12、-S(O)mR11、-S(O)mNR11R12所取代；
R6和R7各自独立地选自H、氘、氰基、C1-8直链或支链烷基或C3-8环烷基；
或者，R6和R7两两间连接，形成C3-8环烷基或C4-12杂环基，且所述的C3-8环烷基或C4-12杂环基可进一步被氘、卤素、羟基、C1-4烷氧基、-C＝OR11、C1-8烷基、-(CH2)n NR11R12或-NR11COR12所取代；
m选自0、1或2；
n选自0、1或2；
Y选自C、O、S或N；
R8选自H、C1-4烷基、C3-8环烷基、C1-4烷氧基，或者不存在；
R9选自H、氘、卤素、氰基、C1-4烷基、C3-8环烷基、C1-4烷氧基，或者不存在；
R10选自H、氘、卤素、氰基、C1-4烷基、C3-8环烷基、C1-4烷氧基，或者不存在；
R11和R12各自独立地选自H、任选取代或未取代的C1-4烷氧基、C1-8直链或支链烷基、C3-8环烷基、C4-12杂环基；
或者，R11和R12两两间连接，形成C3-8环烷基或C4-12杂环基，且所述的C3-8环烷基或C4-12杂环基可进一步被氘、卤素、羟基、氰基、C1-4烷氧基、-C＝OR11、C1-8烷基、-(CH2)nNR11R12或-NR11COR12所取代。
2.根据权利要求1所述的化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，其特征在于：
环A选自苯基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、吡唑基、噁唑基、呋喃基、噻吩基或噻唑基；
环B选自噻吩基、噻唑基、呋喃基、咪唑基、吡唑基、吡咯基、噁唑基、苯基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、萘基、苯并呋喃基、苯并吡咯基、苯并噻唑基、苯并噻吩基、苯并咪唑基、苯并吡唑、苯并噁唑基、噻吩并吡咯基、环戊二烯并吡咯基、吡咯并吡咯基、吡咯并噻唑基、噻吩并噻唑基、吡唑并吡啶基、吡唑并嘧啶基、吡咯并哒嗪基、吡咯并嘧啶基或吡唑并嘧啶基；
环C选自
Figure FDA0004006585290000021
Figure FDA0004006585290000022
R1选自H、-NR11S(O)mR12、-NR11C＝OR12、-(CH2)nS(O)mR11、-(CH2)nS(O)mNR11R12、-
(CH2)nC＝ONR11R12或-(CH2)nSO＝NR11；
R2选自H、卤素、氰基、C1-4烷基或卤素取代的C1-4烷基；
R3、R4、R5分别独立地选自H、氘、卤素、C1-8直链或支链烷基、-C＝OR11、-(CH2)nNR11R12、-NR11COR12、-S(O)mR11、或-(CH2)n-C4-12杂环基，所述C1-8直链或支链烷基或-(CH2)n-C4-12杂环基可进一步被氘、卤素、羟基、氰基、C1-4烷基、C1-2烷氧基、-CH2OH、-CH2CH2OH或C4-6杂环基所取代；
或者，R3、R4和R5两两间连接，形成C3-8环烷基或C4-12杂环基，且所述的C4-12杂环基可进一步被羟基、氰基、甲基、乙基、-CH2OH或-CH2CH2OH所取代；
R6和R7各自独立地选自H、氘、C1-8直链或支链烷基或C3-8环烷基；
m选自0、1或2；
n选自0、1或2；
Y选自O、S或N；
R8选自H、C1-4烷基、C1-4烷氧基，或者不存在；
R9选自H、氰基、C1-4烷基、C1-4烷氧基，或者不存在；
R10选自H、氰基、C1-4烷基、C1-4烷氧基，或者不存在；
R11和R12各自独立地选自H、任选取代或未取代的C1-4烷氧基、C1-8直链或支链烷基、C3-8环烷基、C4-12杂环基；
或者，R11和R12两两间连接，形成C3-8环烷基或C4-12杂环基，且所述的C3-8环烷基或C4-12杂环基可进一步被氘、卤素、羟基、氰基、C1-4烷氧基、-C＝OR11、C1-8烷基、-(CH2)nNR11R12或-NR11COR12所取代；
条件是，式(I)化合物不包含以下结构：
Figure FDA0004006585290000031
3.根据权利要求2所述的化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，其特征在于：
环A选自苯基、吡啶基、吡嗪基；
环B选自噻吩基、噻唑基、呋喃基、咪唑基、吡咯基、苯基、吡啶基、萘基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并咪唑基、苯并噁唑基、苯并吡咯基、苯并噻唑基、噻吩并吡咯基、环戊二烯并吡咯基、吡咯并吡咯基、吡咯并噻唑基、噻吩并噻唑基、吡唑并吡啶基、吡唑并嘧啶基、吡咯并哒嗪基、吡咯并嘧啶基或吡唑并嘧啶基；
环C选自
Figure FDA0004006585290000032
Figure FDA0004006585290000033
R1选自H、-NR11S(O)mR12、-(CH2)nS(O)mR11、-(CH2)nS(O)mNR11R12、或-(CH2)nC＝ONR11R12；
R2选自H、卤素、氰基、C1-4烷基或卤素取代的C1-4烷基；
R3、R4、R5分别独立地选自H、氘、卤素、C1-8直链或支链烷基、-C＝OR11、-(CH2)nNR11R12、-NR11COR12或-(CH2)n-C4-12杂环基，所述C1-8直链或支链烷基或-(CH2)n-C4-12杂环基可进一步被氘、卤素、羟基、氰基、C1-4烷基、C1-2烷氧基、-CH2OH、-CH2CH2OH或C4-6杂环基所取代；
或者，R3、R4和R5两两间连接，形成C3-8环烷基或C4-12杂环基，且所述的C4-12杂环基可进一步被羟基、氰基、甲基、乙基、-CH2OH或-CH2CH2OH所取代；
R6和R7各自独立地选自H、氘；
m选自0、1或2；
n选自0、1或2；
Y选自O、S或N；
R8选自H、C1-4烷基、C1-4烷氧基，或者不存在；
R9选自H、氰基、C1-4烷基、C1-4烷氧基，或者不存在；
R10选自H、氰基、C1-4烷基、C1-4烷氧基，或者不存在；
R11和R12各自独立地选自H、C1-4烷氧基、C1-8直链或支链烷基、C3-8环烷基或C4-12杂环基、羟基取代的C1-8烷基、卤素取代的C1-8烷基或羟基取代的C4-12杂环基；
或者，R11和R12两两间连接，形成C3-8环烷基或C4-12杂环基，且所述的C3-8环烷基或C4-12杂环基可进一步被氘、卤素、羟基、氰基、C1-4烷氧基、-C＝OR11、C1-8烷基、-(CH2)nNR11R12或-NR11COR12所取代。
4.根据权利要求3所述的化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，其特征在于：
环A选自苯基、吡啶基或吡嗪基；
环B选自苯基或吡啶基；
环C选自
Figure FDA0004006585290000041
Figure FDA0004006585290000042
R1选自H、-NR11S(O)mR12、-(CH2)nS(O)mR11、-(CH2)nS(O)mNR11R12、或-(CH2)nC＝ONR11R12；
R2选自H、卤素、氰基、C1-4烷基或卤素取代的C1-4烷基；
R3、R4、R5分别独立地选自H、氘、卤素、C1-6烷基、-C＝OR11、-(CH2)nNR11R12、-NR11COR12或-(CH2)n-C4-6杂环基，所述C1-6烷基或-(CH2)n-C4-6杂环基可进一步被氘、卤素、羟基、氰基、C1-4烷基、C1-2烷氧基、-CH2OH、-CH2CH2OH、
Figure FDA0004006585290000051
Figure FDA0004006585290000052
所取代；
或者，R3、R4和R5两两间连接，形成C3-5环烷基或C4-6杂环基，且所述的C4-6杂环基可进一步被氰基、甲基、乙基、羟基、-CH2OH或-CH2CH2OH所取代；
R6和R7各自独立地选自H、氘；
m选自0、1或2；
n选自0、1或2；
Y选自O、S或N；
R8选自H、C1-4烷基、C1-4烷氧基，或者不存在；
R9选自H、氰基、C1-4烷基、C1-4烷氧基，或者不存在；
R10选自H、氰基、C1-4烷基、C1-4烷氧基，或者不存在；
R11和R12各自独立地选自H、甲氧基、乙氧基、甲基、乙基、丙基、丁基、环丙基、环丁基、环戊基、-CH2OH-CH2CH2OH-CH2CHF2、
Figure FDA0004006585290000053
Figure FDA0004006585290000054
5.根据权利要求4所述的化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，其特征在于：
环A选自苯基、吡啶基或吡嗪基；
环B选自苯基或吡啶基；
环C选自
Figure FDA0004006585290000055
Figure FDA0004006585290000056
R1选自H、-N(CH3)S(O)2CH3、-S(O)2CH3或-S(O)2NHC(CH3)3；
R2选自H、F、Cl、Br、氰基、甲基、乙基、丙基、丁基或CF3；
R3、R4、R5各自独立地选自H、氘、氟、氯、溴、甲基、乙基、丙基、-CH2CH2OH、-COCH3、-COCH2OH、-CH2CH2OCH3、-N(CH3)2、-CH2N(CH3)2、
Figure FDA0004006585290000061
Figure FDA0004006585290000062
或者，R3、R4和R5两两间连接，形成C3-5环烷基或C4-6杂环基，且所述的C4-6杂环基可进一步被氰基、甲基、乙基、羟基、-CH2OH或-CH2CH2OH所取代；
R6和R7各自独立地选自H、氘；
Y选自O或N；
R8选自H、甲基、乙基、丙基、丁基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基，或者不存在；
R9选自H、氰基、甲基、乙基、丙基、丁基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基，或者不存在；
R10选自H、氰基、甲基、乙基、丙基、丁基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基，或者不存在。
6.具有如下结构的化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐：
Figure FDA0004006585290000071
Figure FDA0004006585290000081
Figure FDA0004006585290000091
Figure FDA0004006585290000101
Figure FDA0004006585290000111
/>
Figure FDA0004006585290000121
/>
Figure FDA0004006585290000131
/>
Figure FDA0004006585290000141
/>
Figure FDA0004006585290000151
7.具有如下结构的化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐：
Figure FDA0004006585290000152
/>
Figure FDA0004006585290000161
/>
Figure FDA0004006585290000171
/>
Figure FDA0004006585290000181
/>
Figure FDA0004006585290000191
/>
Figure FDA0004006585290000201
/>
Figure FDA0004006585290000211
/>
Figure FDA0004006585290000221
8.具有如下结构的化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐：
Figure FDA0004006585290000231
/>
Figure FDA0004006585290000241
/>
Figure FDA0004006585290000251
/>
Figure FDA0004006585290000261
9.一种药物组合物，其特征在于，包含如权利要求1～8任一项所述的化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐和可药用的载体。
10.如权利要求9所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物是胶囊剂、散剂、片剂、颗粒剂、丸剂、注射剂、糖浆剂、口服液、吸入剂、软膏剂、栓剂或贴剂。
11.根据权利要求1～8中任一项所述的化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐，或权利要求9所述的药物组合物在制备用于预防或治疗单独或部分地由FLT3或者CDK9活性介导的疾病的治疗药物中的应用。
12.根据权利要求11所述的化合物、其立体异构体、其药学上可接受盐或其药物组合物在制备用于预防或治疗单独或部分地由FLT3或者CDK9活性介导的疾病的治疗药物中的应用，其特征在于，所述FLT3或者CDK9活性介导的疾病为激酶相关的恶性肿瘤。
13.根据权利要求12所述的化合物、其立体异构体、其药学上可接受盐或其药物组合物在制备用于预防或治疗单独或部分地由FLT3或者CDK9活性介导的疾病的治疗药物中的应用，其特征在于，所述激酶相关的恶性肿瘤选自：卵巢癌、宫颈癌、结肠直肠癌、乳腺癌、胰腺癌、胶质瘤、胶质母细胞瘤、黑色素瘤、前列腺癌、白血病、淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、胃癌、肺癌、肝细胞癌、胃肠道间质瘤、甲状腺癌、胆管癌、子宫内膜癌、肾癌、间变性大细胞淋巴瘤、多发性骨髓瘤、间皮瘤或者软组织肉瘤。
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