CN116327652A - 一种皮肤抗衰老组合物及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种皮肤抗衰老组合物及其制备方法，其特征在于：至少包含以下原料中的一种或其混合物：0.05%~5%的草莓果提取物，0.05%~5%膜荚黄芪根提取物，1%~10%的桑根皮提取物，0.01%~2%的十八烷醇二‑叔丁基‑4‑羟基氢化肉桂酸酯；所述草莓果提取物中非瑟酮含量不低于75%；膜荚黄芪根提取物中环黄芪醇含量不低于75%；桑根皮提取物中氧化白藜芦醇含量不低于75%；所述百分比均为质量百分比。本发明所得皮肤抗衰老组合物具有稳定性好，对线粒体具有保护作用，抗衰老效果好等优点。
Description
技术领域
本发明涉及化妆品领域，特别涉及一种皮肤抗衰老组合物及其制备方法。
背景技术
人体衰老同时皮肤也在衰老，皮肤内源性衰老的特征是弹性丧失，出现皱纹，皮肤萎缩变薄，出现色斑等。
目前，医学界有关衰老原因的各种学说中，自由基攻击和线粒体DNA 损伤学说是其中两个极具代表性的学说，二者相互联系、互相渗透，进而发展出衰老的线粒体自由基学说。大量研究表明，衰老的发展过程与自由基增多、线粒体功能异常密切相关。
据文献报道，与年轻细胞相比，衰老线粒体在代谢过程中，会产生更多的自由基。在ATP 合成过程中的生理条件下，电子传递链ETC 复合物会产生自由基，这些自由基会从衰老细胞的线粒体膜中漏出，自由基的过量产生，会耗尽抗氧化酶如超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)、谷胱甘肽还原酶(GR) 等的生理水平，从而导致DNA 的损伤，出现免疫抑制和导致皮肤癌。在衰老过程中，呼吸链复合物活性抑制、氧化应激和线粒体膜电位都会发生变化。
草莓（FRAGARIA CHILOENSIS）果提取物中富含非瑟酮，也叫漆黄素，是一种类黄酮，化学结构为3,3',4',7-四羟基黄酮。非瑟酮可以通过Nrf-2 信号通路对UVB 照射引发的光损伤进行修复；可以通过p53 提高视上皮细胞的存活率，降低SIRT1 水平；可以抑制TNF- α诱导的人角质形成细胞的炎症反应和过氧化氢诱导的氧化损伤；还可以减轻UVB 诱导的促分裂素原活化蛋白激酶MAPK 磷酸化，并提高人皮肤成纤维细胞中的基质金属蛋白酶表达、减缓炎症反应。
膜荚黄芪（ASTRAGALUSMEMBRANACEUS）根提取物中富含环黄芪醇，环黄芪醇属于三萜皂苷类化合物，是一种端粒酶激活剂，可通过增加端粒酶活性从而延缓端粒变短，对抗细胞衰老；还可以抑制内质网应激，进而保持减少线粒体依赖性细胞死亡；抑制炎性小体NLRP3 的激活，抑制炎性衰老。
桑（MORUS ALBA）根皮提取物富含氧化白藜芦醇，可通过激活ERK-NRF2 通路减少线粒体自由基产生。
非瑟酮、环黄芪醇和氧化白藜芦醇在不同层面上对线粒体发挥作用，起到抗老化的效果。但它们都存在溶解性问题，在水中和化妆品常用油脂中均为微溶状态，因此存在应用困难无法透皮吸收的问题；且氧化白藜芦醇性质活泼，容易变色，极大影响了在化妆品中的功效和应用。
发明内容
本发明要解决的技术问题是，提供一种皮肤抗衰老组合物及其制备方法，所述皮肤抗衰老组合物具有稳定性好、线粒体保护效果好、抗衰老效果好的优点。
为解决上述技术问题，本发明采用以下技术方案：一种皮肤抗衰老组合物，其特征在于：至少包含以下原料中的一种或其混合物：0.05%~5%的草莓（FRAGARIACHILOENSIS）果提取物，0.05%~5%膜荚黄芪（ASTRAGALUSMEMBRANACEUS）根提取物，1%~10%的桑（MORUSALBA）根皮提取物，0.01%~2%的十八烷醇二-叔丁基-4-羟基氢化肉桂酸酯；所述草莓（FRAGARIACHILOENSIS）果提取物中非瑟酮含量不低于75%；膜荚黄芪（ASTRAGALUS MEMBRANACEUS）根提取物中环黄芪醇含量不低于75%；桑（MORUS ALBA）根皮提取物中氧化白藜芦醇含量不低于75%；所述百分比均为质量百分比。
一种皮肤抗衰老组合物的制备方法，其特征在于，采用以下制备步骤：
A、按如下质量比称取0.05%~5%的草莓（FRAGARIA CHILOENSIS）果提取物、0.05%~5%的膜荚黄芪（ASTRAGALUSMEMBRANACEUS）根提取物、1%~10%的桑（MORUS ALBA）根皮提取物、20%~60%的溶剂、5%~30%的PPG-13-癸基十四醇聚醚-24、0.1%~2%的二（月桂酰胺谷氨酰胺）赖氨酸钠、0.01%~2%的十八烷醇二-叔丁基-4-羟基氢化肉桂酸酯、其余为水；所述溶剂选自1，3-丁二醇、1，2-丙二醇、1，3-丙二醇、2，3-丁二醇、二丙二醇、甘油、PEG-4、PEG-6、PEG-8、1，2-戊二醇、1，2-己二醇中的任意一种或它们的任意比混合物；
B、将步骤A称取的物质混合后，倒入德国伍德公司生产的小型超临界二氧化碳萃取设备的超临界反应釜内，调整反应釜内温度至60~70℃，设置釜内CO2 压力为10~30Mpa，超临界处理4~8h，然后泄压释放CO2，冷却至室温，得预混物；
C、将步骤 B所得预混物加入TRILOS 超高压纳米均质机ND1000，设定压力100~200MPa，室温下高压均质2~6 次，即得皮肤抗衰老组合物。
本发明的有益效果在于：所得皮肤抗衰老组合物具有稳定性好，对皮肤线粒体保护效果好、抗衰老效果好的有益效果。
为证明本发明的有益效果，进行了如下实验。
（1）稳定性实验：
按照表1 所示的活性物质量百分比制备组合物，实施例1-6 为本发明技术针对不同活性物含量比例制备的组合物。
对比例 1 组合与实施例 3 所述一致，但不采用超临界技术，只简单搅拌混合。
对比例 2 组合与实施例 3 所述一致，但不采用超高压纳米均质机高压均质技术，只简单搅拌混合。
对比例 3 采用实施例 3 所述方法制备，不添加草莓（FRAGARIA CHILOENSIS）果提取物，其他物质与实施例 3 所述一致。
对比例 4 采用实施例3 所述方法制备，不添加膜荚黄芪（ASTRAGALUSMEMBRANACEUS）根提取物，其他物质与实施例3 所述一致。
对比例 5 采用实施例 3 所述方法制备，不添加桑（MORUS ALBA）根皮提取物，其他物质与实施例 3 所述一致。
对比例 6 采用实施例 3 所述方法制备，不添加溶剂，其他物质与实施例 3 所述一致。
对比例 7 采用实施例 3 所述方法制备，不添加 PPG-13-癸基十四醇聚醚-24，其他物质与实施例 3 所述一致。
对比例 8 采用实施例 3 所述方法制备，不添加二（月桂酰胺谷氨酰胺）赖氨酸钠，其他物质与实施例 3 所述一致。
对比例 9 采用实施例 3 所述方法制备，不添加十八烷醇二-叔丁基-4-羟基氢化肉桂酸酯，其他物质与实施例 3 所述一致。
表1 实施例和对比例中活性物质量百分比及制备方法
将上述样品和其 5%质量浓度水溶液，分别放置于 5℃，45℃及光照条件下进行稳定性实验，并于2 周，4 周，8 周和 12 周分别测试样品的变化情况，稳定性测试情况如下表 2 所示。
表2 稳定性实验结果
○表示无变色，无异味，无析出，无分层。
从测试情况看，本发明制备的组合物具有更好的光照和高低温稳定性。
（2）线粒体保护相关试验
对以上表 1 中所列实施例和对照例进行线粒体相关测试，包括线粒体形态学变化，线粒体膜电位和 ROS 测试，测试方法和结果如下所示：
A、线粒体形态学测试：使用人成纤维细胞进行测试，在 96 孔细胞培养板上，每孔加入 2ml 的 50ug/ml 的人成纤维细胞， 使用半花菁衍生物(TPP-CY)进行染色，使用激光共聚焦显微技术测定三个实验组的线粒体形态学（数量、网络、分布）和线粒体膜电位。
对照设置：空白对照（无处理线粒体）、阴性对照（用 H2O2300mM 处理）、实验组（用H2O2300mM 处理加 0.1%实施例 2 样品处理）。测试数据情况如下表 3：
表 3 线粒体形态学测试结果
从以上表 3 线粒体形态学测试结果可见，本专利实施例对线粒体数量、线粒体网络连接、线粒体分布面积、线粒体膜电位提升都具有显著的效果。
B、ROS 测试
按空白对照（无处理线粒体）、阴性对照（用H2O2300mM 处理）、实验组（H2O2300mM处理加0.1%实施例2样品处理）分别处理的人成纤维细胞接种于96孔板中，每孔2×103 个细胞，置于5%CO2、37℃条件的细胞培养箱继续培养48h。用PBS替换细胞，细胞用10mM2',7'-二氯荧光素二乙酸酯(DCF-DA)探针于5%CO2、37ºC细胞培养箱内孵育20min，每 隔 3-5min颠倒混匀一次，使探针和细胞充分接触。采用MitoSOX RedMitochondrial SuperoxideIndicator荧光探针对以上三组处理48h后的细胞进行染色，再用荧光显微镜观察并拍摄荧光图片，最后用ImageJ软件测量各组的平均荧光强度。测试数据情况如下表4：
表4 线粒体 ROS 测试结果
由表4 可见，本专利实施例可降低线粒体内 ROS数量，对线粒体内ROS 具有清除效果。综上，本专利实施例对线粒体数量、线粒体网络连接、线粒体分布面积、线粒体膜电位提升都具有显著的效果，并且可降低线粒体内 ROS 数量，具有显著的线粒体保护效果。
（3）人体功效测试
为进一步证明本发明制备的抗衰老组合物的功效，进行人体功效测试，具体步骤如下：选择30名年龄在40-55岁，左右眼角皱纹等级一致且均大于1的非备孕，哺乳及妊娠期女性志愿者，连续28天早晚各一次在左脸颊使用含质量比0.5%的实施例5所得抗衰老组合物的面霜，右脸颊对照组使用不添加抗衰老组合物的面霜(使用量保持一致，约为0.5g/次)，面霜组成如表5，实验要求志愿者测试期间以室内活动为主，避免长时间无防护暴露于阳光下。选取志愿者眼角为测试部位，分别于使用前，使用 28 天后在志愿者洁面后进行测试，由同一人采用德国LMITechnologies公司PROMIS LITE皱纹测量仪测定皱纹数量，总皱纹平均深度与皱纹面积占比，另外使用皮肤水分测试仪Glossymeter GL 200检测皮肤光泽度值，人体功效测试结果如表6所示。
表 5 面霜组成
表 6 人体功效实验结果
由表 6可知，在使用前后的随访中，实验组的皱纹数量分别减少26.49%，皱纹面积平均占比分别减少33.57%，总皱纹平均深度分别减少26.32%。而针对皮肤光泽度，测量值越高，说明皮肤光泽度越好，如表6所示，实验组在使用含实施例5所得抗衰老组合物的面霜后，皮肤光泽度提高36.49%，说明本发明制备的一种皮肤抗衰老组合物具有较好的抗皱提亮作用。
综上所述，本发明所得皮肤抗衰老组合物既具有很好的稳定性同时又具有很好的线粒体保护效果和抗衰老效果。
具体实施方式
实施例 1：一种皮肤抗衰老组合物的制备方法，其特征在于，采用以下制备步骤：
A、按0.05% 的草莓（FRAGARIACHILOENSIS）果提取物、1%的膜荚黄芪
（ASTRAGALUSMEMBRANACEUS）根提取物、10%的桑（MORUSALBA）根皮提取物、20%的1，2-丙二醇、30%的PPG-13-癸基十四醇聚醚-24、2%的二（月桂酰胺谷氨酰胺）赖氨酸钠、0.01%的十八烷醇二-叔丁基-4-羟基氢化肉桂酸酯、其余为水
B、将以上混合物全部混合后，倒入德国伍德公司生产的小型超临界二氧化碳萃取设超临界反应釜内，调整超临界设备的反应釜内温度至60℃，设置釜内CO2 压力为30Mpa，在此状态下保持4h，然后泄压释放CO2，冷却至室温，得混合物；
C、将上述混合物通过TRILOS 超高压纳米均质机ND1000，压力设定为100MPa，室温下过6 次高压，即得一种皮肤抗衰老组合物。
实施例 2：一种皮肤抗衰老组合物的制备方法，其特征在于，采用以下制备步骤：
A、按1%的草莓（FRAGARIACHILOENSIS）果提取物、2%的膜荚黄芪（ASTRAGALUSMEMBRANACEUS）根提取物、8%的桑（MORUSALBA）根皮提取物、30%的1，3-丁二醇、25% 的PPG-13-癸基十四醇聚醚-24、1.5%的二（月桂酰胺谷氨酰胺）赖氨酸钠、0.1%的十八烷醇二-叔丁基-4-羟基氢化肉桂酸酯、其余为水；
B、将以上混合物全部混合后，倒入德国伍德公司生产的小型超临界二氧化碳萃取设超临界反应釜内，调整超临界设备的反应釜内温度至62℃，设置釜内CO2 压力为25Mpa，在此状态下保持5h，然后泄压释放CO2，冷却至室温，得混合物；
C、将上述混合物通过TRILOS 超高压纳米均质机ND1000，压力设定为120MPa，室温下过5 次高压，即得一种皮肤抗衰老组合物。
实施例 3：一种皮肤抗衰老组合物的制备方法，其特征在于，采用以下制备步骤：
A、按2%的草莓（FRAGARIA CHILOENSIS）果提取物、3%的膜荚黄芪（ASTRAGALUSMEMBRANACEUS）根提取物、6%的桑（MORUS ALBA）根皮提取物、40%的二丙二醇、20%的PPG-13-癸基十四醇聚醚-24、1.2%的二（月桂酰胺谷氨酰胺）赖氨酸钠、0.5%的十八烷醇二-叔丁基-4-羟基氢化肉桂酸酯、其余为水；
B、将以上混合物全部混合后，倒入德国伍德公司生产的小型超临界二氧化碳萃取设超临界反应釜内，调整超临界设备的反应釜内温度至64℃，设置釜内CO2 压力为22Mpa，在此状态下保持5.5h，然后泄压释放CO2，冷却至室温，得混合物；
C、将上述混合物通过TRILOS 超高压纳米均质机ND1000，压力设定为140MPa，室温下过4 次高压，即得一种皮肤抗衰老组合物。
实施例 4：一种皮肤抗衰老组合物的制备方法，其特征在于，采用以下制备步骤：
A、按3%的草莓（FRAGARIA CHILOENSIS）果提取物、4%的膜荚黄芪（ASTRAGALUSMEMBRANACEUS）根提取物、4%的桑（MORUS ALBA）根皮提取物、20%的二丙二醇、30%的丁二醇、15%的PPG-13-癸基十四醇聚醚-24、0.8%的二（月桂酰胺谷氨酰胺）赖氨酸钠、1.0%的十八烷醇二-叔丁基-4-羟基氢化肉桂酸酯、其余为水；
B、将以上混合物全部混合后，倒入德国伍德公司生产的小型超临界二氧化碳萃取设超临界反应釜内，调整超临界设备的反应釜内温度至66℃，设置釜内CO2 压力为20Mpa，在此状态下保持6h，然后泄压释放CO2，冷却至室温，得混合物；
C、将上述混合物通过TRILOS 超高压纳米均质机ND1000，压力设定为160MPa，室温下过4 次高压，即得一种皮肤抗衰老组合物。
实施例 5：一种皮肤抗衰老组合物的制备方法，其特征在于，采用以下制备步骤：
A、按4%的草莓（FRAGARIACHILOENSIS）果提取物、5%的膜荚黄芪（ASTRAGALUSMEMBRANACEUS）根提取物、2%的桑（MORUSALBA）根皮提取物、30%的1，3丙二醇、25% PEG-6、10%的PPG-13-癸基十四醇聚醚-24、0.4%的二（月桂酰胺谷氨酰胺）赖氨酸钠、1.5%的十八烷醇二-叔丁基-4-羟基氢化肉桂酸酯、其余为水；
B、将以上混合物全部混合后，倒入德国伍德公司生产的小型超临界二氧化碳萃取设超临界反应釜内，调整超临界设备的反应釜内温度至68℃，设置釜内CO2 压力为15Mpa，在此状态下保持7h，然后泄压释放CO2，冷却至室温，得混合物；
C、将上述混合物通过TRILOS 超高压纳米均质机ND1000，压力设定为180MPa，室温下过3 次高压，即得一种皮肤抗衰老组合物。
实施例 6：一种皮肤抗衰老组合物的制备方法，其特征在于，采用以下制备步骤：
A 、按5% 的草莓（FRAGARIA CHILOENSIS ）果提取物、0.05% 的膜荚黄芪
（ASTRAGALUS MEMBRANACEUS）根提取物、1%的桑（MORUS ALBA）根皮提取物、10%1，2-戊二醇、50%甘油、5%的PPG-13-癸基十四醇聚醚-24、0.1%的二（月桂酰胺谷氨酰胺）赖氨酸钠、2.0%的十八烷醇二-叔丁基-4-羟基氢化肉桂酸酯、其余为水；
B、将以上混合物全部混合后，倒入德国伍德公司生产的小型超临界二氧化碳萃取设超临界反应釜内，调整超临界设备的反应釜内温度至70℃，设置釜内CO2 压力为10Mpa，在此状态下保持 8h，然后泄压释放 CO2，冷却至室温，得混合物；
C、将上述混合物通过TRILOS 超高压纳米均质机ND1000，压力设定为200MPa，室温下过2 次高压，即得一种皮肤抗衰老组合物。
Claims (2)
1.一种皮肤抗衰老组合物，其特征在于：至少包含以下原料中的一种或其混合物：0.05%~5%的草莓果提取物，0.05%~5%膜荚黄芪根提取物，1%~10%的桑根皮提取物，0.01%~2%的十八烷醇二-叔丁基-4-羟基氢化肉桂酸酯；所述草莓果提取物中非瑟酮含量不低于75%；膜荚黄芪根提取物中环黄芪醇含量不低于75%；桑根皮提取物中氧化白藜芦醇含量不低于75%；所述百分比均为质量百分比。
2.权利要求1所述皮肤抗衰老组合物的制备方法，其特征在于，采用以下制备步骤：
A、按如下质量比称取0.05%~5%的草莓果提取物、0.05%~5%的膜荚黄芪根提取物、1%~10%的桑根皮提取物、20%~60%的溶剂、5%~30%的PPG-13-癸基十四醇聚醚-24、0.1%~2%的二（月桂酰胺谷氨酰胺）赖氨酸钠、0.01%~2%的十八烷醇二-叔丁基-4-羟基氢化肉桂酸酯、其余为水；所述溶剂选自1，3-丁二醇、1，2-丙二醇、1，3-丙二醇、2，3-丁二醇、二丙二醇、甘油、PEG-4、PEG-6、PEG-8、1，2-戊二醇、1，2-己二醇中的任意一种或它们的任意比混合物；
B、将步骤A称取的物质混合后，倒入德国伍德公司生产的小型超临界二氧化碳萃取设备的超临界反应釜内，调整反应釜内温度至60~70℃，设置釜内CO2 压力为10~30Mpa，超临界处理4~8h，然后泄压释放CO2，冷却至室温，得预混物；
C、将步骤B所得预混物加入TRILOS 超高压纳米均质机ND1000，设定压力为 100~200Mpa，室温下高压均质 2~6 次，即得皮肤抗衰老组合物。
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