CN116287007A - 一种蘑菇发酵液的制备方法及含有该蘑菇发酵液的化妆品 - Google Patents

一种蘑菇发酵液的制备方法及含有该蘑菇发酵液的化妆品 Download PDF

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mushroom fermentation
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Abstract

本申请涉及化妆品的领域，尤其涉及一种蘑菇发酵液的制备方法及含有该蘑菇发酵液的化妆品。蘑菇发酵液含有蘑菇酵母菌发酵有效成分和酵母溶胞物有效成分，蘑菇发酵液由蘑菇发酵底物经酵母菌菌液发酵得到。蘑菇发酵液的制备方法包括如下过程：将酵母菌菌液接种到蘑菇发酵底物中进行发酵；发酵结束后，将物料进行加热回流，冷却离心；将离心后收集到的蘑菇发酵原液灭菌，加入防腐剂，制备得到蘑菇发酵液。本申请提供的蘑菇发酵液具有抗氧化、修复角质、抗衰老和抗炎等综合作用的效果。

Description

一种蘑菇发酵液的制备方法及含有该蘑菇发酵液的化妆品
技术领域
本申请涉及化妆品的领域，尤其是涉及一种蘑菇发酵液的制备方法及含有该蘑菇发酵液的化妆品。
背景技术
伴随社会进步与发展，人们的日常生活节奏普遍加快，人们也面临日趋严重的皮肤问题。一类皮肤问题出现往往伴生其他皮肤问题的出现。如皮肤氧化伴生出现皮肤衰老、颜色暗沉；皮肤粉刺伴生出现皮肤感染红肿；皮肤角质层破坏伴生出现皮肤干燥、过敏、感染等问题。因此针对各类皮肤问题的改善也需要从多个方面对皮肤问题进行护理改善。然而目前市面上大多数化妆品仅包含针对某一皮肤问题的有效成分，而需要综合护理皮肤就需要各类化妆品进行组合使用，使用过程较为麻烦，也增加了皮肤护理成本。
蘑菇中含有丰富的氨基酸、多糖和活性物质，可以有效滋养皮肤，改善多种皮肤问题，是潜在的化妆品有效成分。如何减小蘑菇中有效成分对皮肤的刺激，提高皮肤对蘑菇中有效成分的吸收利用也是需要解决的问题。
发明内容
为了减少蘑菇中有效成分对皮肤的刺激，提高其制成的化妆品的抗氧化、修复角质、抗衰老和抗炎等综合作用，本申请提供一种蘑菇发酵液及其制备方法以及含有其作为有效成分的化妆品。
第一方面，本申请提供一种蘑菇发酵液的制备方法，采用如下的技术方案：
一种蘑菇发酵液的制备方法，包括如下步骤：
S1，将酵母菌菌液接种到蘑菇发酵底物中，发酵后制备得到蘑菇酵母菌发酵有效成分；
S2，发酵结束后，将物料加热回流，冷却离心，去除菌体和沉淀，减压浓缩得到蘑菇发酵原液；
S3，将蘑菇发酵原液灭菌，加入防腐剂，制备得到蘑菇发酵液。
通过采用上述技术方案，一方面，利用酵母菌对蘑菇中的成分进行转化和分解，使蘑菇中的有效成分变为更易被吸收的小分子，可以降低蘑菇中有效成分对皮肤的刺激。同时由酵母菌发酵后的产物不仅能对皮肤表面微生态产生调节功能，还能调节皮肤自身的生理活性，有利于增加皮肤护理功效，提高肤感。另一方面，酵母菌发酵过程中，酵母菌吸收利用了蘑菇中的有效成分，使酵母菌发生自溶，可以得到酵母菌溶胞物。酵母菌溶胞物中富含高比例的氨基酸、核苷、核苷酸、肽、甾醇、微量元素、维生素B族、葡聚糖等营养物质，可以充分给皮肤细胞提供基础营养，帮助皮肤细胞恢复健康和活力。
通过上述方法得到的蘑菇发酵液，降低了蘑菇中有效成分对皮肤的刺激，同时蘑菇发酵液中的营养物质能够滋养皮肤细胞，综合改善皮肤问题。通过实验，申请人发现上述蘑菇发酵液具有抗氧化、修复角质、抗衰老和抗炎等综合作用。
优选的，所述S1具体为，将3-6重量份的酵母菌菌液接种到300重量份的蘑菇发酵底物中，设置发酵温度为25-30℃，摇荡发酵48-72h制备得到蘑菇酵母菌发酵有效成分。
通过采用上述技术方案，优化酵母菌菌液对蘑菇发酵底物进行发酵时两者的质量，同时对发酵过程中的温度和时间进行控制，使得对蘑菇中有效成分进行转化和分解，有利于有效成分变为更易被吸收的小分子，从而更好地制备得到蘑菇酵母菌发酵有效成分。
优选的，所述S2具体为，发酵结束后，加入1,3-丁二醇和丙三醇，搅拌，在惰性气体的保护下，在90-110℃下加热回流1h，冷却后在3000-4000rpm转速下离心20-30min，去除菌体和沉淀得到蘑菇发酵原液。
通过采用上述技术方案，90-110℃条件下，酵母菌发生自溶，更有利于酵母菌吸收利用蘑菇有效成分产生酵母菌溶胞物，然后去除沉淀后制备得到蘑菇发酵原液。
优选的，所述S3具体为，将离心后收集到的蘑菇发酵原液在100-110℃的条件下灭菌20-40min；灭菌后，降温，在60-75℃条件下与防腐剂混合，得到蘑菇发酵液。
通过采用上述技术方案，对蘑菇发酵原液进行灭菌和防腐剂处理得到的蘑菇发酵液可以提高蘑菇发酵原液的使用安全性以及延长蘑菇发酵原液的保存期限。
优选的，所述防腐剂为1，2-己二醇和对羟基苯乙酮的混合物，所述对羟基苯乙酮占灭菌后制得物料的质量百分数的0.3-0.6％，所述1,2-己二醇占灭菌后制得物料的质量百分数的0.5-2％。
通过采用上述技术方案，1，2-己二醇具有杀菌和保湿的功效并且具有溶剂的组用，同时不对人的身体健康产生负面作用；对羟基苯乙酮具备抗炎护心，镇定缓解的作用，在与1,2-己二醇复配后具有协同增效作用，能进一步提高蘑菇发酵液的抗腐蚀作用。
优选的，所述S1中，酵母菌菌液的制备方法为：将酵母菌接种于YPD固体培养基中进行划线活化，于30℃培养箱中培养48h，获得平板菌落；将所述平板菌落取一环接种至YPD液体培养基中，在30℃培养箱中培养48h，得到酵母菌菌液。
通过采用上述技术方案，使酵母菌充分活化，制备得到酵母菌菌液，菌液浓度106-108CFU/mL，酵母菌菌液具有良好的发酵能力。
优选的，所述S1中，蘑菇发酵底物的制备方法为：将蘑菇搅碎，取蘑菇粉加入水中，搅拌后灭菌，得到蘑菇发酵底物；所述蘑菇粉与水的质量比为(3-6):1000。
通过采用上述技术方案，制备得到可供酵母菌菌液发酵的蘑菇发酵底物。
优选的，所述蘑菇为DjonDjon黑蘑菇、香菇、双孢菇中的一种。
通过采用上述技术方案，DjonDjon黑蘑菇、香菇和双孢菇制成的蘑菇发酵底物经酵母菌菌液发酵制得的蘑菇发酵液均具有良好的抗氧化、修复角质、抗衰老和抗炎等综合作用。
第二方面，本申请提供一种化妆品组合物，采用如下的技术方案：
一种化妆品，包括上述的蘑菇发酵液。
通过采用上述技术方案，用上述蘑菇发酵液作为有效成分制成的化妆品，具有抗氧化、修复角质、抗衰老和抗炎等功效，此化妆品具有综合护理皮肤的效果，可以缓解多类皮肤问题。
优选的，化妆品中所述蘑菇发酵液的质量分数为3-80％。
通过采用上述技术方案，优化化妆品中蘑菇发酵液的质量分数更有利于制备出具有良好的抗氧化、修复角质、抗衰老和抗炎功效的化妆品。
综上所述，本申请包括以下至少一种有益技术效果：
1.本申请利用酵母对蘑菇中有效成分进行转化和分解，使有效成分变为更易被吸收的小分子；吸收蘑菇有效成分的酵母菌发生自溶，可以得到酵母菌溶胞物。上述方法得到的蘑菇发酵液，含有蘑菇酵母菌发酵有效成分和酵母菌溶胞物有效成分，降低了蘑菇中有效成分对皮肤的刺激；同时蘑菇发酵液中的营养物质能够滋养皮肤细胞。蘑菇发酵液具有抗氧化、修复角质、抗衰老和抗炎等综合作用，能够综合改善皮肤问题；
2.用蘑菇发酵液作为有效成分制成的化妆品，具有抗氧化、修复角质、抗衰老和抗炎等功效，此化妆品具有综合护理皮肤，综合改善多类皮肤问题的效果。
附图说明
图1是本申请不同体积分数的蘑菇发酵液对成纤维细胞活力的影响。
图2是本申请不同体积分数的蘑菇发酵液对角质形成细胞活力的影响。
具体实施方式
以下结合制备例和实施例对本申请作进一步详细说明。
制备例
制备例1
本制备例公开了一种酵母菌菌液的制备，具体过程如下：将酵母菌接种于YPD固体培养基中进行划线活化，于30℃培养箱中培养48h，获得平板菌落；将平板菌落取一环接种至100mL的YPD液体培养基中，在30℃培养箱中培养48h，得到酵母菌菌液，浓度为106-108CFU/mL。其中酵母菌购自安琪酵母股份有限公司。
制备例2
本制备例公开了一种乳酸菌菌液的制备，具体过程如下：将乳酸菌接种于MRS固体培养基中进行划线活化，于37℃培养箱中培养48h，获得平板菌落；将平板菌落取一环接种至100mL的MRS液体培养基中，在37℃培养箱中培养48h，得到乳酸菌菌液，浓度为106-108CFU/mL。其中乳酸菌购自郑州和合生物工程有限公司。
制备例3
本制备例公开了DjonDjon黑蘑菇发酵底物的制备，具体过程如下：将DjonDjon黑蘑菇搅碎，取3gDjonDjon黑蘑菇蘑菇粉加入1000g水中，搅拌均匀后在温度为100℃条件下灭菌30min，得到蘑菇发酵底物。其中DjonDjon黑蘑菇产地：海地，干粉。
制备例4
本制备例公开了DjonDjon黑蘑菇发酵底物的制备，具体过程同制备例3，不同点在于DjonDjon黑蘑菇蘑菇粉的用量为6g，灭菌温度为110℃，灭菌时间20min。
制备例5
本制备例公开了香菇发酵底物的制备，具体过程同制备例4，不同点在于将DjonDjon黑蘑菇蘑菇粉替换为香菇蘑菇粉。其中香菇购自浙江品菌食品有限公司。
制备例6
本制备例公开了双孢菇发酵底物的制备，具体过程同制备例4，不同点在于将DjonDjon黑蘑菇蘑菇粉替换为双孢菇蘑菇粉。其中双孢菇购自宝鸡六盘韵生物科技有限公司。
实施例
实施例1公开了一种蘑菇发酵液的制备方法。
以下以实施例1为例进行说明，一种蘑菇发酵液的制备方法，包括如下步骤：
S1：将4.5g酵母菌菌液接种到300g蘑菇发酵底物中，设置发酵温度为30℃，在180rpm转速下摇荡培养48小时；其中酵母菌发酵液采用制备1所得，蘑菇发酵底物采用制备例4所得；
S2：发酵结束后，加入1,3-丁二醇15g，丙三醇30g，搅拌均匀，在氮气氛围下，90℃加热回流1h，冷却后制得的物料4000rpm转速下离心20min，去除菌体和沉淀得到蘑菇发酵原液；
S3：将蘑菇发酵原液在110℃的条件下灭菌20min；灭菌后得到灭菌物料；在60℃条件下将100g灭菌物料与0.3g1，2-己二醇和2g对羟基苯乙酮混合，制备得蘑菇发酵液。
实施例2
本实施例与实施例1基本相同，不同点在于S1中酵母菌菌液用量为3g。
实施例3
本实施例与实施例1基本相同，不同点在于酵母菌菌液用量为6g。
实施例4
本实施例与实施例1基本相同，不同点在于S1中蘑菇发酵底物采用制备例3所得。
实施例5
本实施例与实施例1基本相同，不同点在于S1中蘑菇发酵底物采用制备例5所得。
实施例6
本实施例与实施例1基本相同，不同点在于S1中蘑菇发酵底物采用制备例6所得。
实施例7
本实施例与实施例3基本相同，不同点在于S1中发酵温度为28℃，发酵时长为60h；S2中在100℃加热回流1h，冷却后在3500rpm转速下离心25min；S3中蘑菇发酵液原液在105℃的条件下灭菌30min，在65℃条件下将100g灭菌物料与0.3g1，2-己二醇和2g对羟基苯乙酮混合，制备得蘑菇发酵液。
实施例8
本实施例与实施例3基本相同，不同点在于S1中发酵温度为25℃，发酵时长为72h；S2中在110℃加热回流1h，冷却后在3000rpm转速下离心30min；S3中蘑菇发酵液原液在100℃的条件下灭菌40min，在75℃条件下将100g灭菌物料与0.3g1，2-己二醇和2g对羟基苯乙酮混合，制备得蘑菇发酵液。
实施例9
本实施例与实施例3基本相同，不同点在于S1中将100g灭菌物料与0.6g1，2-己二醇和0.5g对羟基苯乙酮混合，
对比例
对比例1
本对比例与实施例1基本相同，不同点在于S1中将酵母菌菌液替换为乳酸菌菌液，且乳酸菌菌液采用制备例1所得，发酵温度为35℃。
对比例2
本对比例与实施例1基本相同，不同点在于S2中不经过加热回流这一步骤。
性能检测
对实施例1-9和对比例1-2所得的蘑菇发酵液液作为样品进行如下性能测试。
1.DPPH自由基清除能力
检测方法如下：
(1)0.12mg/ml DPPH乙醇溶液：称取1,1-二苯基-2-三硝基苯肼12mg于100ml容量瓶中，用无水乙醇定容置100ml；
(2)将样品用无水乙醇稀释5倍，充分震荡，3000rpm离心10min取上清液用于之后的实验；
(3)于1.5ml离心管中，每孔加入500μl的DPPH自由基溶液和500μl样品溶液作为样品组；每孔加入500μl的DPPH自由基溶液和500μl无水乙醇作为空白组；每孔加入500μl无水乙醇和500μl样品溶液作为样品底值组；每孔加入200μl无水乙醇作为溶剂底值组；
室温反应30min后利用酶标仪测定在517nm处的吸光度。DPPH自由基清除率计算公式啊如下：
DPPH自由基清除率(％)＝[1-(A样品组-A样品底值)/(A空白组-A溶剂底值)]*100％，结果如表1。
表1实施例1-9及对比例1-2性能检测数据表
Figure SMS_1
2、羟自由基清除能力
方法参考常规的水杨酸法测定羟自由基的清除能力试验，这里不做过多赘述，且其中各物料剂反应参数具体见表2。
表2羟基自由基实验方案
Figure SMS_2
Figure SMS_3
反应完成后羟基自由基清除率计算公式：
羟基自由基清除率(％)＝[1-(A样品组-A样品底值)/A空白组]*100％，结果如表3。
表3实施例1-9及对比例1-2性能检测数据表
Figure SMS_4
参见表1和表3，结合实施例1和对比例1，可以看出，利用酵母菌制备的蘑菇发酵液液相比乳酸菌制备的蘑菇发酵液液，具有优异的DPPH自由基清除能力和羟基自由基清除率。这是由于酵母菌对蘑菇中成分进行转化和分解，降低了蘑菇中有效成分对皮肤的刺激，同时蘑菇发酵液中的营养物质能够滋养皮肤细胞，综合改善皮肤问题，具有良好的抗氧化性。同时添加蘑菇发酵液液制备出的化妆品可以防止皮肤老化造成的自由基损伤，可以增强皮肤的抵抗力、增加皮肤抵抗光老化的能力，抵抗皮肤炎症的反应，减少色斑、发红和敏感等肌肤情况的发生。
参见表1和表3，结合实施例1和对比例2，可以看出，当制备蘑菇发酵液时不进行加热回流处理时，制备出的蘑菇发酵液的抗氧化性下降。这可能是因为加热回流可以使制得的物料混合性更好，从而离心后便于将菌体和沉淀物去除，进而使得得到的蘑菇发酵液纯度更高，随着其的抗氧化性能更好。
参照表1和表3，结合实施例1-3，可以看出，随着酵母菌菌液质量的不断增加，所制备出的蘑菇发酵液的抗氧化性越好。这是由于酵母菌菌液可以充分的对蘑菇中的有效成分进行转化和分解为更易吸收的小分子，从而降低蘑菇发酵液对皮肤的刺激性，同时还可以具有优异的抗氧化性。
参照表1和表3，结合实施例1和4，可以看出，在适当的范围内改变制备例蘑菇发酵底物中蘑菇粉的质量，得到的蘑菇发酵液均具有良好的抗氧化性。
参照表1和表3，结合实施例,3、7和8，可以看出，在适当的范围内改变制备步骤中的各参数，制备出的蘑菇发酵液均具有良好的抗氧化性能。
参照表1和表3，结合实施例3和9，可以看出，在适当范围内改变防腐剂中1，2-己二醇和对羟基苯乙酮的加入量，制得的蘑菇发酵液的抗氧化性依然很好。
3、蘑菇发酵液对I型胶原蛋白表达的影响，其中I型胶原蛋白检测试剂盒购自南京建成。
成纤维细胞先加过氧化氢刺激后加样品处理。实验设置空白组、模型组、阳性对照组、产品组，阳性对照组为VC。具体过程如下：
将1×106个细胞/孔接种到6孔板中培养24h，1000μmol/ml H2O2处理两个小时后吸弃原培养基，空白对照组未做处理。随后阳性对照组、实验组中分别加入含阳性对照、实施例1和对比例1所制得的蘑菇发酵液的DMEM，空白对照组、模型组中加入完全培养基继续处理24h，吸弃培养基，用PBS洗涤后加入200μL的裂解液(含终浓度为1mM的PMSF)，用移液器吹打均匀，于4℃，10000rpm离心10min收集上清后续按照I型胶原蛋白检测试剂盒检测其含量。结果见表4：
表4 I型胶原蛋白的含量
含量(ng/mg)
空白组 7.79
模型组 4.11
阳性对照组 5.43
实施例1组 6.42
对比例1组 5.40
从表4中可以看出，经过氧化氢处理之后细胞内I型胶原的含量显著降低，而分别通过阳性对照和蘑菇发酵液的作用，细胞内的I型胶原的含量显著提高，结果表明，蘑菇发酵液能提高细胞内I型胶原的含量，且效果略优于阳性对照和对比例1所制得的蘑菇菌发酵液。综上所述，实施例所制得的蘑菇菌发酵液具有较好的抗衰老作用。
4、对成纤维细胞/角质形成细胞活力的影响
成纤维细胞来源于中国科学院昆明细胞库；角质形成细胞来源于北京协和医学院。
将对数生长期良好成纤细胞和角质形成细胞分别以5×103个细胞/100μL的密度接种于96孔板中，单独的DMEM培养基用作空白对照，于37℃、5％CO2恒温培养箱中过夜。分别加入实施例1制得的不同体积分数的蘑菇发酵液，每个体积分数做3个复孔，正常细胞组不做处理，培养24h。每孔加入10μL CCK-8试剂，于37℃继续孵育1h，测定样品在波长450nm的OD值。
Figure SMS_5
结果见图1和图2。
由图1可知，蘑菇发酵液体积分数为10％时，细胞存活率达96％，因此产品对成纤维细胞几乎无毒性。
由图2可知，蘑菇发酵液对角质形成细胞无毒性作用。在体积分数为10％、20％和40％时对细胞增殖有促进作用，而且呈剂量依赖性。
5、蘑菇发酵液对炎症相关因子TNF-α表达的影响
HaCaT细胞来源于北京协和医学院；TNF-αELISA试剂盒购自北京索莱宝科技有限公司。
HaCaT细胞先照射UVB后产品处理，阳性对照为1％甘草酸二钾。
将1×104个细胞/孔接种到96孔板中培养24h，吸弃原培养基，加入1mL PBS，细胞暴露于10mj/cm2 UVB照射，空白对照组未做处理。照射后阳性对照组、产品组分别加入阳性对照、实施例1和对比例1制得的蘑菇发酵液，模型组、空白组加入DMEM培养基继续处理24h。随后吸弃培养基，用PBS洗涤后加入200μL的裂解液(含终浓度为1mM的PMSF)，用移液器吹打均匀，于4℃，10000rpm离心10min收集上清液，用TNF-αELISA试剂盒检测炎症相关因子TNF-α的含量。结果见表5。
表5TNF-α的含量测定
含量(pg/mg)
空白组 22.69
模型组 24.80
阳性对照组 23.46
实施例1组 21.27
对比例1组 22.53
由表5可知，经UVB照射后，细胞内TNF-α含量显著增加，经过甘草酸二钾和产品处理后，炎症因子TNF-α的含量显著降低，且实施例1所得到的蘑菇发酵液的抗炎作用要优于1％甘草酸二钾和对比例所得到的蘑菇发酵液。因此，实施例1制得的蘑菇发酵液具有良好的抗炎作用。
6、人体斑贴试验
按受试者入选标准选择参加试验的人员30名。
选用面积不超过50mm2、深度约1mm的合格斑试器材。将实施例1制得的蘑菇发酵液分别加入放入斑试器小室内，用量约为0.020mL—0.025mL(液体)。将斑试器用低致敏胶带贴敷于受试者的前臂曲侧，用手掌轻压使之均匀地贴敷于皮肤上，持续24h。随后分别于去除斑试器后30min(待压痕消失后)按表6观察皮肤反应，并观察结果记录于表7。
表6皮肤封闭型斑贴试验皮肤反应分级标准
Figure SMS_6
表7人体斑贴实验结果
Figure SMS_7
通过人体斑贴实验结果可以看出，蘑菇发酵液对人体皮肤无不良反应，安全性良好。
7、肤感
为了测定以本申请蘑菇发酵液为有效成份的化妆品利用剂型例1中制造的化妆品以10名健康成年男女为对象进行考察，填写调查问卷表，从香气、吸收性、粘腻感、保湿性、顺滑感和油腻感方面来评价。结果如表9所示，其中应用剂型制造包含上述实施例1中蘑菇发酵液(3％)，其组成如表8所示；在其他应用剂型中，根据需要，蘑菇发酵液的含量也可以为化妆品总量的3-80％的任一数值。同时，以本申请蘑菇发酵液为有效成份的化妆品剂型并不仅限于乳液型基剂。评分标准：各指标均以10分制进行打分，10分为最好、1分为最差，以0.5分为最小评分单位。
表8应用剂型含量表
Figure SMS_8
/>
Figure SMS_9
表9化妆品肤感测试结果
Figure SMS_10
参照表9，可以看出，由蘑菇发酵液制成的应用剂型化妆品具有良好的保湿性、顺滑感同时皮肤的油腻感和干痒性得到很好的改善，具有很好的皮肤体验感。
本具体实施例仅仅是对本申请的解释，其并不是对本申请的限制，本领域技术人员在阅读完本说明书后可以根据需要对本实施例做出没有创造性贡献的修改，但只要在本申请的权利要求范围内都受到专利法的保护。

Claims (10)

1.一种蘑菇发酵液的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：
S1，将酵母菌菌液接种到蘑菇发酵底物中，发酵后制备得到蘑菇酵母菌发酵有效成分；
S2，发酵结束后，将物料加热回流，冷却离心，去除菌体和沉淀，减压浓缩得到蘑菇发酵原液；
S3，将蘑菇发酵原液灭菌，加入防腐剂，制备得到蘑菇发酵液。
2.根据权利要求1所述的蘑菇发酵液的制备方法，其特征在于：所述S1具体为，将3-6重量份的酵母菌菌液接种到300重量份的蘑菇发酵底物中，设置发酵温度为25-30℃，摇荡发酵48-72h制备得到蘑菇酵母菌发酵有效成分。
3.根据权利要求1所述的蘑菇发酵液的制备方法，其特征在于：所述S2具体为，发酵结束后，加入1,3-丁二醇和丙三醇，搅拌，在惰性气体的保护下，在90℃-110℃下加热回流1h，冷却后在3000-4000rpm转速下离心20-30min，去除菌体和沉淀得到蘑菇发酵原液。
4.根据权利要求1所述的蘑菇发酵液的制备方法，其特征在于：所述S3具体为，将离心后收集到的蘑菇发酵原液在100℃-110℃的条件下灭菌20-40min；灭菌后，降温，在60-75℃条件下与防腐剂混合，得到蘑菇发酵液。
5.根据权利要求4所述的蘑菇发酵液的制备方法，其特征在于：所述防腐剂为1，2-己二醇和对羟基苯乙酮的混合物，所述对羟基苯乙酮占灭菌后制得物料的质量百分数的0.3-0.6%，所述1,2-己二醇占灭菌后制得物料的质量百分数的0.5-2%。
6.根据权利要求1所述的蘑菇发酵液的制备方法，其特征在于：所述S1中，酵母菌菌液的制备方法为：将酵母菌接种于YPD固体培养基中进行划线活化，于30℃培养箱中培养48h，获得平板菌落；将所述平板菌落取一环接种至YPD液体培养基中，在30℃培养箱中培养48h，得到酵母菌菌液。
7.根据权利要求1所述的蘑菇发酵液的制备方法，其特征在于：所述S1中，蘑菇发酵底物的制备方法为：将蘑菇搅碎，取蘑菇粉加入水中，搅拌均匀后灭菌，得到蘑菇发酵底物；所述蘑菇粉与水的质量比为（3-6）:1000。
8.根据权利要求7所述的蘑菇发酵液的制备方法，其特征在于：所述蘑菇为DjonDjon黑蘑菇、香菇、双孢菇中的一种。
9.一种化妆品，其特征在于：包括权利要求1-8任一制备的蘑菇发酵液。
10.根据权利要求9所述的一种化妆品，其特征在于：化妆品中所述蘑菇发酵液的质量分数为3-80%。
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