CN1162089C - 畜禽用微生态调节剂 - Google Patents

Abstract

本发明畜禽用微生态调节剂，涉及微生物的培养技术及微生态菌种的应用。它是由对胃肠道有一定疗效的乳酸杆菌、凝结芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌、粪链球菌经不同配比组成，基于微生态平衡理论、拮抗理论对畜禽的微生态进行调节，达到防治肠道疾病，提高肌体免疫力的目的。

Description

畜禽用微生态调节剂

技术领域

本发明涉及微生物的培养技术及微生态菌种的应用

背景技术

多年研究表明，乳酸菌对肠道疾病有明显的疗效，并且可以在生长发酵过程中产生B族维生素、烟酸、叶酸等营养物质，对抗癌和免疫功能赋活作用也多有报道。

动物体内共生着大量的正常微生物菌群，这些微生物在长期进化过程中和动物形成了共生关系，在动物体内的营养、免疫、生长刺激、生物拮抗等方面发挥着重要作用，保护着生物有机体的健康。在正常情况下，动物体内微生物体系处于平衡状态，微生物之间及微生物与寄生体之间形成了相互作用的生理性统一体，这个统一体的内部结构和存在状态就是人们所说的微生态平衡问题，这种平衡是具体的而不是抽象的，不同的年龄、不同发育时期、不同种属、不同生活环境及不同个体之间都有其独特的微生态平衡。关于微生态的定义康白教授提出“研究正常微生物与其宿主相互关系的生命科学的分支”，也可以认为是“研究正常微生物结构和功能以及与其宿主相互关系的科学”，但当正常微生物之间及正常微生物群与其宿主之间的微生态平衡在外界环境影响下，由生理性组合转变为病理性组合的状态时，就破坏了微生态平衡，引起了微生态的失调，造成各种疾病的产生。以腹泻为例，能分离出的病原体有痢疾杆菌、沙门氏菌、致病性大肠杆菌、产毒性大肠杆菌、霍乱弧菌、志贺氏菌、螺旋体、立克次体等等，这些病原体在健康体内也可以分离出来，这就不易确定那种是导致疾病的病原菌，通过对微生物从定性定量和定位来检查，就会发现许多微生物由于量上的差异、宿主的转换、定位的转移等就可以从不致病转为致病。但正常的微生物群对宿主不但没有害处而且是有益的和必要的，正常情况下微生物群体自身可以通过互相抑制维持微生态的平衡，但一旦微生态失调，就会导致宿主的疾病，这就需要用微生态调节剂来调整微生态结构，维持微生态的平衡，微生态调节剂可以促进体内有益微生物的生长，增强微生态自我调节能力，提高宿主健康水平。

微生态调节剂是指通过改善微生态平衡而发挥有益作用达到提高宿主健康水平和健康状态的微生物极其代谢产物。微生态调节剂可以改善微生物菌群的平衡从而达到提高宿主健康状况的理论根据有：

1、微生态平衡理论：在正常情况下所形成的微生态平衡为动态平衡，对微生态有益菌抑制有害菌的生长，使微生态处于正常平衡状态，一旦该平衡状态遭到破坏，有害菌大量繁殖造成微生态失调，就会表现出临床症状，维持这种动态平衡的力量为微生物之间的相互抑制作用，通用宿主体内正常微生物优势菌群成员或其他有益微生物制成的微生态调节剂可以调节失调的微生态平衡，使平衡向正常健康状态发展，同时增强微生态自身调节能力。

2、拮抗理论(屏蔽理论)：由于正常菌群的定值、地位影响有害菌的定值和地位，正常菌的代谢产物(如乙酸、乳酸、细菌素等)可以阻止致病菌的生长繁殖，发挥其生物的拮抗作用。

3、有益厌氧菌的生长：动物在出生时组织是无菌的，很快好氧菌和兼性厌氧菌会定值消耗组织中的氧，降低肠道内氧化还原电位，促使正常菌群中的厌氧菌生长繁殖。

4、微生物与宿主在肠道内互为有利：微生物所产生的各种酶、维生素、刺激素等都可以被宿主利用，宿主又可供给微生物营养物质和能量，甚至基因都可以交换，如抗性因子、产毒因子。微生物制剂可以作为非特异性免疫调节因子促进机体吞噬细胞的吞噬功能，并能刺激B淋巴细胞产生抗体能力，它可以抑制腐败微生物的过度生长，降低肠道内有毒物质，如胺、酚等，保证能源、物质和基因的正常交换。

该研究的目的就是利用有益微生物来拮抗有害菌的生长，促进有益菌尽快建立体内微生态平衡，减少腹泻的发生。仔猪早期断奶易发生腹泻是因为仔猪体内胃蛋白酶源是无活性的，需要在pH3.0酸性条件下才能转化为有活性的胃蛋白酶，早期断奶仔猪消化系统不完善，胃酸分泌不足，仔猪所食用的饲料pH值一般在5.8-6.5，进食后胃酸更加不足，再加上胰腺和．小肠腺分泌的消化酶活性不高，猪只能消化饲料中的一小部分食物，因而易患消化不良性腹泻，另一原因是仔猪断奶后开始吃固体饲料，造成肠壁黏膜损伤等肠道免疫反应，使消化吸收面积减少，造成食物中蛋白质消化吸收率降低，大量未被吸收的营养物质在肠道内的存在和适宜的生长环境(pH值6-6.5)会造成大肠杆菌大量繁殖，造成微生态平衡的破坏，同时大肠杆菌产生的毒素对胃肠黏膜进一步损坏，进而使消化吸收能力更差，大量蛋白质被大肠杆菌分解产生尸胺、组胺、腐胺等毒素，致使肠道内容物腐败，肠道内渗透压升高，水分难于被吸收，导致腹泻加重。利用乳酸菌等有益菌可使其腹泻改变，有益菌在肠道内繁殖，可以抑制大肠杆菌的生长，从而维护了动物肠道内的微生态平衡，可明显减少腹泻的发生，同时大大提高了动物的健康水平，增强了对疾病的免疫力。将从国内外乳制品中分离的乳酸菌进行实验可以发现对早期断奶仔猪和鸡白痢等病症有明显疗效。

微生态调节剂的研究提出和风行于全世界约在30年前，70年代德国的Volkov Rusch博士在赫尔本建立了微生态研究所，主要从事用大肠杆菌、双岐杆菌、乳酸菌等活菌体进行生态疗法研究，到了80年代日本就有了26种医用微生态调节剂，利用乳酸菌防治人和牲畜疾病的研究国内外都有大量研究和例证：

国内有酶珠得乐(双岐杆菌)、金双岐(双岐杆菌)、促菌生(腊样芽孢杆菌)、整常生(地衣芽孢杆菌)、降脂生(肠球菌)、抑菌生(枯草芽孢杆菌)等。多菌株联合的产品如培菲康(双岐杆菌、嗜酸乳杆菌、粪链球菌)、三株口服液(双岐杆菌、乳酸杆菌、粪链球菌)、乳康生(腊样芽孢杆菌、干酪乳杆菌)、乳酸生、昂立一号等。

菌种特征：

1)、嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)

是草食哺乳动物肠道内常见细菌，菌体呈长链状，在固体培养基上的菌落一般较小，呈不规则圆形，灰白色，半透明，用放大镜观察菌落呈凹凸不平的玻璃窗花样，边缘为线状或卷发状。该菌最适宜生长温度为35-38℃，15℃以下不能生长，能在含2％氯化钠和2％胆盐的环境中生长。有复杂的营养需求，在培养基中添加酵母膏和乳清或VB₂、泛酸钙、叶酸，能分解多种糖类，如乳糖、半乳糖、果糖、麦芽糖、甘露糖等，分解后产酸。最适pH值5.5-6.0，生成L-D乳酸，还能产生乙酸、双氧水、抗生物质等，抑制致病菌、腐败菌的生长，对金黄色葡萄球菌(Staphglococcus aurens)和产气荚膜梭菌比对大肠杆菌有更强的抗菌性，对病原性或潜在的病原性细菌有强烈的特异抑制作用。

2)、凝结芽孢杆菌(Bacilius cogulans)

是1989年美国食品药物管理局和美国饲料协会不定期地发表可以用在畜禽生产中的43种微生物之中的一种，凝结芽孢杆菌是国外用于畜禽生产中的芽孢菌种之一。该菌属革兰氏阳性芽孢杆菌，生长最适温度在40-43℃，过氧化氢酶阳性，同型发酵可产生L-乳酸，液体培养呈短杆状，经高速离心和真空冷冻干燥后菌粉经实验对常见肠道病原菌如大肠杆菌、伤寒沙门氏菌(Salmonella typhi)、福氏志贺氏菌(Shigella  flexneri)、肠类沙门氏菌(Salmonella antcritidis)和变形杆菌(Protacus sp.)都有抑制作用，该菌固体发酵过程中产生的过氧化氢、有机酸(乳酸、乙酸、蚁酸)、胺类、细菌素(细菌素对DNA的代谢、蛋白质的合成、能量代谢都有影响，对原生质膜可起到类似酶的作用)和小分子肽等均可抑制其他菌的生长，其抑菌活性耐热，在酸性(pH5.5以下)条件下稳定，抗酸性蛋白酶，抑菌物质在培养14-28小时后稳定。

3)粪链球菌(Streptococcus faccalis)

粪链球菌是人和动物肠道内常见的细菌，能分解葡萄糖、蔗糖、果糖、乳糖、半乳糖、麦芽糖等多种糖类产酸。该菌最低生长温度为10℃，最高生长温度为45℃，能通过pH值为2.5的胃酸环境而在肠道内生长繁殖，发酵糖类生成L-乳酸，分泌杀菌素(Bacterio C1nelikesubstonces)，可抑制多种腐败菌。

4)乳酸杆菌(Staphglococcus sp)

是乳酸杆菌属一种，具有乳酸杆菌的特征，菌体呈细长杆状，单个或链状，产生细菌素、有机酸，对痢疾杆菌有较强的抑制作用。

大部分微生物通过胃时不能活着进入肠道，主要因为胃酸酸性过强，对微生物的抑制作用很强，胆汁中的脱氧胆酸对许多微生物的杀灭作用也很强，多数微生物在动物胃中会被杀死，我们所选用的嗜酸乳杆菌、乳酸杆菌、粪链球菌以及凝结芽孢杆菌均有能抵抗脱氧胆酸和胃酸的能力，能够适应内脏中的生活环境，可以进入生物肠道，乳酸杆菌、粪链球菌和凝结芽孢杆菌所产生的乳酸为L-乳酸，产生的B族维生素、烟酸、叶酸有菌膜的屏蔽作用，并对多种致病菌和腐败菌有不同抑制作用，多种有益菌在肠道内的繁殖可以改善肠道微生态环境，促进微生态平衡。

发明内容

本发明的目的是提供几种由凝结芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌、乳酸杆菌、粪链球菌不同配比所组合的用于畜禽的微生态调节剂及其有关的培养工艺。

凝结芽孢杆菌的生产工艺：取凝结芽孢杆菌菌种于已加入PH为7的由酵母膏1份，蛋白胨1份，葡萄糖0.6份，硫酸锰0.0005份，磷酸氢二钾0.2份及用5份麸皮与100份水熬煮的经四层纱布过滤的5％麸皮水100份构成的种子培养基再加2份琼脂制成的斜面培养试管内于23-30℃通风条件下培养24小时后再转移入已加入上述种子培养基的摇瓶中于30-32℃通风条件下通风条件下培养24小时，再转移入已加入PH为7的由1份酵母膏，1份蛋白胨，2.5份葡萄糖，0.1份硫酸镁，0.0005份硫酸锰，0.2份磷酸氢二钾，100份水构成的发酵培养基的发酵罐内于30-32℃通风培养25小时，再转移入1.6万转高速离心机中连续离心，取沉淀菌泥并按1∶0.5的比例加入5％保护剂水溶液混匀后于-35℃--40℃真空冷冻升华干燥后粉碎备用。

嗜酸乳杆菌的生产工艺：取嗜酸乳杆菌种于已加入10％脱脂牛奶的试管中在35-37℃静止培养4小时，转移入已加入10％脱脂牛奶的三角烧瓶中在35-37℃静止培养4-6小时，再转移入已加入牛肉膏1份，蛋白胨1份，葡萄糖1份，酵母膏0.5份，磷酸氢二钾0.2份，硫酸镁0.2份，硫酸锰0.0005份，乙酸钠0.5份，柠檬酸二铵0.2份，乳糖0.25份，脱脂奶粉1.5份，吐温0.05份及水100份，PH为6.0-6.5的种子罐中在35-37℃静止培养16小时，再转移入已加入与种子罐中同样试剂的发酵罐中在35-37℃静止培养36小时，转移入1.6万转高速离心机中连续离心弃水取沉淀菌泥并并按1∶0.5的比例加入5％保护剂水溶液混匀后于-35--40℃真空冷冻升华干燥后粉碎备用。

乳酸杆菌的生产工艺：取乳酸杆菌菌种于已加入10％脱脂牛奶的试管中在37-42℃静止培养4小时，转移入也有10％脱脂牛奶的三角烧瓶中在37-42℃静止培养4-6小时，转移入存有10％脱脂牛奶或与嗜酸乳杆菌种子罐内同样试剂的种子罐中在37-42℃时静止培养16小时，再转移入与上述种子罐内相同试剂的发酵罐中在37-42℃静止培养24小时，转移入1.6万转高速离心机中连续离心弃水取菌泥并按1∶0.5的比例加入5％保护剂水溶液混匀后在-35--40℃真空升华干燥后粉碎备用。

粪链球菌生产工艺：取粪链球菌菌种于已加入琼脂2份，牛肉膏1份，蛋白胨1份，氯化钠0.5份，水100份的PH为7.0-7.2的斜面试管内在37℃通风培养24小时，再转移入已加入牛肉膏1份，蛋白胨1份，氯化钠0.5份，水100份的PH为7.0-7.2的摇瓶中在37℃通风培养24小时，转移入与摇瓶中同样试剂的种子罐中在37℃通风培养24小时，再转移入与摇瓶中同样试剂的发酵罐中在37℃通风培养24小时，转移入1.6万转高速离心机中连续离心弃水取菌泥，并按1∶0.5的比例加入5％保护剂水溶液混匀在-35--40℃真空冷冻升华干燥，粉碎备用。

一种畜禽用微生态调节剂，其特征在于由凝结芽孢杆菌，乳酸杆菌，粪链球菌，嗜酸乳杆菌中的三至四种菌配合而成。

一种畜禽用微生态调节剂，其特征在于配比为凝结芽孢杆菌干菌粉40-50％，乳酸杆菌干菌粉10-15％，粪链球菌干菌粉10-15％，嗜酸乳杆菌干菌粉20-40％。

一种畜禽用微生态调节剂，其特征在于配比为凝结芽孢杆菌干菌粉40-60％，乳酸杆菌干菌粉25-30％，粪链球菌干菌粉10-35％。

一种畜禽用微生态调节剂，其特征在于配比为凝结芽孢杆菌干菌粉60％，粪链球菌干菌粉15-20％，嗜酸乳杆菌干菌粉20-25％。

一种畜禽用微生态调节剂，其特征在于配比为凝结芽孢杆菌干菌粉40-50％，乳酸杆菌干菌粉20-30％，嗜酸乳杆菌干菌粉20-40％。

本微生态调节剂的特点有：

1、可以降低肠道PH值，激活蛋白酶。

2、抑制病原菌、腐败菌的生长繁殖。

3、促进消化液的分泌，增进胃肠蠕动，减缓胃排空速度，更利于消化吸收，可提高仔猪的日增重。

4、提高肌体免疫力。

5、促进矿物元素的吸收。

6、可直接参与机体代谢。

7、降低胃肠疾病的发病率，治疗腹泻等疾病。

8、保持仔猪胃肠道微生态平衡，促进益生菌生长。

9、产生的有机酸直接参与体内分解代谢，释放出能量，无残留、无毒害，不会产生抗药性并可减少抗生素的使用。

10、作为风味剂可以改善饲料的适口性。

用途：保持胃肠道微生态平衡，防治和治疗肠道疾病

成分：菌体(活菌体及死亡菌体)及其代谢产物

剂型：固体粉剂，散剂

保质期：常温下可保存18个月

使用方法：

1)预防和增加抵抗力用法：粉剂加水溶解后直接口服，仔猪出生第7天开始日服一次，3-4天为一周期。可起到预防和增强抵抗能力作用。鸡出壳后第三天粉剂溶解后加入饮用水中直接饮用，3-4天为一周期。

2)治疗用：发现黄、白痢及腹泻症状后，粉剂加水溶解后大猪拌入少量饲料内直接采食；仔猪采用灌服，第一天日服两次，此后每日一次直到症状消失后再继续服用两到三日。

鸡只等禽类发现白痢及腹泻症状后，粉剂加水溶解后拌入少量饲粉内直接采食，第一天日服两次，此后每日一次直到症状消失后再继续服用两到三日。

注意事项：

1、勿高温或潮湿保存。

2、腹泻严重时可加大剂量。

3、治疗过程中病症消失后应继续使用几天以巩固微生态平衡。

本发明的实施例有：

	凝结芽孢杆菌	乳酸杆菌	粪链球菌	嗜酸乳杆菌
					1	50	10	10	30
2	40	10	10	40
					3	40	15	15	30
4	40	14	10	36
					5	45	10	15	35
6	50	15	10	25
					7	50	15	15	20
8	40	30	30
					9	60	25	15
10	40	25	35
					11	60	30	10
12	55	25	20
					13	55	20	25
14	44	28	28
					15	60		15	25
16	60		20	20
					17	60		16	24
18	60		17	23
					19	60		18	22
20	60		19	21
					21	60		17.5	22.5
22	40	30		30
					23	50	20		30
24	40	20		40
					26	50	30		20
26	45	25		30
					27	45	20		35
28	40	25		35

Claims (6)

1.一种畜禽用微生态调节剂，其特征在于配比为凝结芽孢杆菌干菌粉40-50％，乳酸杆菌干菌粉10-15％，粪链球菌干菌粉10-15％，嗜酸乳杆菌干菌粉20-40％。

2.一种畜禽用微生态调节剂，其特征在于配比为凝结芽孢杆菌干菌粉40-60％，乳酸杆菌干菌粉25-30％，粪链球菌干菌粉10-35％。

3.一种畜禽用微生态调节剂，其特征在于配比为凝结芽孢杆菌干菌粉60％，粪链球菌干菌粉15-20％，嗜酸乳杆菌干菌粉20-25％。

4.一种畜禽用微生态调节剂，其特征在于配比为凝结芽孢杆菌干菌粉40-50％，乳酸杆菌干菌粉20-30％，嗜酸乳杆菌干菌粉20-40％。

5.根据权利要求1或2或3或4所述畜禽用微生态调节剂的用途，其特征在于专用于畜禽的微生态平衡调节，防治肠道疾病。

6.根据权利要求1或2或3或4所述的畜禽用微生态调节剂，其特征在于凝结芽孢杆菌的生产工艺：取凝结芽孢杆菌菌种于已加入pH为7的由酵母膏1份，蛋白胨1份，葡萄糖0.6份，硫酸锰0.0005份，磷酸氢二钾0.2份及用5份麸皮与100份水熬煮的经四层纱布过滤的5％麸皮水100份构成的种子培养基再加2份琼脂制成的斜面培养试管内于23-30℃通风条件下培养24小时后再转移入已加入上述种子培养基的摇瓶中于30-32℃通风条件下通风条件下培养24小时，再转移入已加入pH为7的由1份酵母膏，1份蛋白胨，2.5份葡萄糖，0.1份硫酸镁，0.0005份硫酸锰，0.2份磷酸氢二钾，100份水构成的发酵培养基的发酵罐内于30-32℃通风培养25小时，再转移入1.6万转高速离心机中连续离心，取沉淀菌泥并按1∶0.5的比例加入5％保护剂水溶液混匀后于-35℃--40℃真空冷冻升华干燥后粉碎备用，嗜酸乳杆菌的生产工艺：取嗜酸乳杆菌种于已加入10％脱脂牛奶的试管中在35-37℃静止培养4小时，转移入已加入10％脱脂牛奶的三角烧瓶中在35-37℃静止培养4-6小时，再转移入已加入牛肉膏1份，蛋白胨1份，葡萄糖1份，酵母膏0.5份，磷酸氢二钾0.2份，硫酸镁0.2份，硫酸锰0.0005份，乙酸钠0.5份，柠檬酸二铵0.2份，乳糖0.25份，脱脂奶粉1.5份，吐温0.05份及水100份，pH为6.0-6.5的种子罐中在35-37℃静止培养16小时，再转移入已加入与种子罐中同样试剂的发酵罐中在35-37℃静止培养36小时，转移入1.6万转高速离心机中连续离心弃水取沉淀菌泥并并按1∶0.5的比例加入5％保护剂水溶液混匀后于-35-40℃真空冷冻升华干燥后粉碎备用，乳酸杆菌的生产工艺：取乳酸杆菌菌种于已加入10％脱脂牛奶的试管中在37-42℃静止培养4小时，转移入也有10％脱脂牛奶的三角烧瓶中在37-42℃静止培养4-6小时，转移入存有10％脱脂牛奶或与嗜酸乳杆菌种子罐内同样试剂的种子罐中在37-42℃时静止培养16小时，再转移入与上述种子罐内相同试剂的发酵罐中在37-42℃静止培养24小时，转移入1.6万转高速离心机中连续离心弃水取菌泥并按1∶0.5的比例加入5％保护剂水溶液混匀后在-35--40℃真空升华干燥后粉碎备用，粪链球菌生产工艺：取粪链球菌菌种于已加入琼脂2份，牛肉膏1份，蛋白胨1份，氯化钠0.5份，水100份的pH为7.0-7.2的斜面试管内在37℃通风培养24小时，再转移入已加入牛肉膏1份，蛋白胨1份，氯化钠0.5份，水100份的pH为7.0-7.2的摇瓶中在37℃通风培养24小时，转移入与摇瓶中同样试剂的种子罐中在37℃通风培养24小时，再转移入与摇瓶中同样试剂的发酵罐中在37℃通风培养24小时，转移入1.6万转高速离心机中连续离心弃水取菌泥，并按1∶0.5的比例加入5％保护剂水溶液混匀后在-35--40℃真空冷冻升华干燥，粉碎备用，并按权利要求1或2或3或4所规定的组分配比而成。