CN116165039B - 一种代替传统兔脑粉的兔脑组织制备方法 - Google Patents

一种代替传统兔脑粉的兔脑组织制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN116165039B
CN116165039B CN202310100076.0A CN202310100076A CN116165039B CN 116165039 B CN116165039 B CN 116165039B CN 202310100076 A CN202310100076 A CN 202310100076A CN 116165039 B CN116165039 B CN 116165039B
Authority
CN
China
Prior art keywords
rabbit brain
freeze
brain tissue
drying
rabbit
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN202310100076.0A
Other languages
English (en)
Other versions
CN116165039A (zh
Inventor
李小英
焦东燕
邓大永
刘芳
王晓红
王玉玉
何亮
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Baoding Tianyue Bioengineering Co ltd
Original Assignee
Baoding Tianyue Bioengineering Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Baoding Tianyue Bioengineering Co ltd filed Critical Baoding Tianyue Bioengineering Co ltd
Priority to CN202310100076.0A priority Critical patent/CN116165039B/zh
Publication of CN116165039A publication Critical patent/CN116165039A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN116165039B publication Critical patent/CN116165039B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
    • G01N1/28—Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
    • G01N1/286—Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q involving mechanical work, e.g. chopping, disintegrating, compacting, homogenising
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
    • G01N1/28—Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
    • G01N1/34—Purifying; Cleaning
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
    • G01N1/28—Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
    • G01N1/42—Low-temperature sample treatment, e.g. cryofixation
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/86—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving blood coagulating time or factors, or their receptors
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A40/00—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production
    • Y02A40/90—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production in food processing or handling, e.g. food conservation

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)

Abstract

本发明涉及凝血试剂原材料技术领域，提出了一种代替传统兔脑粉的兔脑组织制备方法，对兔脑进行预处理后使用清洗液洗涤，然后水洗，最后进行冻干；所述清洗液包括氯化钠、乙二胺四乙酸钠(EDTA)和防腐剂。通过上述技术方案，解决了现有技术中制备兔脑粉的方法复杂，使用易制毒制剂及原料成本高的问题。

Description

一种代替传统兔脑粉的兔脑组织制备方法
技术领域
本发明涉及凝血试剂原材料技术领域，具体的，涉及一种代替传统兔脑粉的兔脑组织制备方法。
背景技术
组织因子(TF)是一个分子量约47kDa的跨膜糖蛋白，通过与因子Ⅶ/FⅦa结合而启动血液凝固级联反应。TF可同时激活凝血因子Ⅸ和Ⅹ，启动内、外源性两种凝血酶联放大反应,在血栓形成过程中起着重要作用。TF是组织凝血活酶的重要成分，组织凝血活酶在临床上用于凝血酶原时间(PT)的测定。凝血酶原时间测定是血液学检验常规项目之一，可用于筛查遗传性出血性疾病、检查肝脏疾病和其它获得性出血性疾病及监控抗凝剂治疗等。
长期以来TF一直采自兔脑、猪肺、人脑、胎盘等组织器官，目前主要的PT试剂的原材料是兔脑粉，传统的兔脑粉制备工艺需要使用丙酮进行提取。
目前制备兔脑粉的方法复杂，需要使用丙酮提取。丙酮属于易制毒物质，受公安部门管制；丙酮具高度易燃性，有严重火灾危险；丙酮具有中枢神经系统的麻醉作用，对于操作人员身体毒害极大；丙酮半衰期较长，对环境污染严重，废弃的丙酮处理起来比较困难。
兔脑粉作为原材料成本较高，导致PT试剂成本高，利润空间小。
发明内容
本发明提出一种代替传统兔脑粉的兔脑组织制备方法，解决了现有技术中制备兔脑粉的方法复杂，使用易制毒制剂及原料成本高的问题。
本发明的技术方案如下：
一种代替兔脑粉的兔脑组织制备方法，对兔脑进行预处理后使用清洗液洗涤，然后水洗，最后进行冻干；
所述清洗液包括氯化钠、EDTA和防腐剂。
作为进一步的技术方案，所述清洗液包括氯化钠0.01-2％、EDTA 0.001-0.1％、防腐剂0.01-0.1％，余量为水。
作为进一步的技术方案，所述防腐剂为柳硫汞钠。
作为进一步的技术方案，所述清洗液洗涤5-6次；所述水洗2-3次。
作为进一步的技术方案，所述预处理具体为：将新鲜的兔脑剥去血管和脑膜，用生理盐水清洗后绞碎。
作为进一步的技术方案，所述冻干程序具体为：
S1、将洗涤后的兔脑放入已经预冷的冻干机中；
S2、控制温度-20℃，冻干18-24h；
S3、升温至-10℃，冻干2-4h；
S4、升温至0℃，冻干1-2h；
S5、升温至10℃，冻干2-4h。
作为进一步的技术方案，所述步骤S1中预冷为：控制温度-30℃，预冷5h。
作为进一步的技术方案，冻干完成后分装并放入干燥剂然后充氮气-20℃保存。
本发明还提出一种兔脑组织提取组织因子的方法，包括以下步骤：
A1、向得到的冻干兔脑组织中加入提取液混合均匀；
A2、水浴摇床；
A3、离心；
A4、取上清液，过滤即得兔脑组织因子提取液。
优选的，所述提取液包括：柠檬酸三钠、氯化钠、硫柳汞钠。
作为进一步的技术方案，所述步骤A1中，每1L提取液中加入5-10g冻干兔脑组织。
作为进一步水浴摇床具体为：40℃、150转/分，摇30min。
本发明还提出一种凝血酶原时间检测试剂，包括所述的兔脑组织因子提取液与缓冲液。
优选的，所述缓冲液包括：葡萄糖酸钙、甘露醇、硫柳汞钠、牛血清白蛋白/蛋白胨。
作为进一步的技术方案，所述兔脑组织因子提取液与缓冲液的比例为1：1。
本发明的工作原理及有益效果为：
1、本发明一种冻干兔脑组织，其可以替代兔脑粉来制备凝血酶原时间检测试剂(PT)。与兔脑粉制备工艺不同，不用研磨，直接绞碎后加入特殊保护剂、抗氧剂、防腐剂进行冻干，减少操作步骤，从而减少操作误差并节约劳动时间。冻干兔脑组织比传统丙酮兔脑粉原材料使用量少，节约试剂成本。酮为易制毒化学试剂，对人体有毒害作用，对环境污染也大，本研究避免了使用丙酮。冻干过程简单，易操作，冻后易储存，提高试剂的敏感度和试剂的悬浮性。
附图说明
下面结合附图和具体实施方式对本发明作进一步详细的说明。
图1为本发明实施例1和对比例1的兔脑组织为原料制备的PT试剂悬浮情况对比图；
图2为本发明实施例1和对比例1得到的兔脑组织为原料制备的PT试剂分装放置1天悬浮情况对比图；
图3为本发明实施例1和对比例1得到的兔脑组织为原料制备的PT试剂分装放置3天悬浮情况对比图；
图4为本发明实施例1和对比例1得到的兔脑组织为原料制备的PT试剂分装放置7天悬浮情况对比图；
图5为实施例1和对比例1生产出的不同批次PT试剂分别抽取30例样品敏感度测试对比图。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都涉及本发明保护的范围。
实施例1
制备兔脑组织：
以20kg兔脑为例：
(1)取新鲜的兔脑，剥去血管和脑膜，用生理盐水清洗5次，单次用量40L，然后用绞碎机将兔脑绞碎；
(2)清洗液(清洗液中含有氯化钠1％、EDTA0.01％和柳硫汞纳0.05％)洗5次，单次用量40L；
(3)纯化水洗2次，单次用量40L，清洗好的兔脑沥干水分，平铺在不锈钢盘上；
(4)尽快放入已经预冷的冻干机里(预冷冻设-30℃，5h)；将温度提升至-20℃，冻干20h；升温至-10℃，冻干3h，升温至0℃，冻干2h，升温至10℃，冻干3h；
(5)将冻干的兔脑组织取出，尽快放入准备好的塑料袋内，每袋200g，并放入商品化食品用袋装干燥剂；
(6)将装好冻干兔脑组织的袋子内充入氮气，以保证兔脑组织不被氧化，并于-20℃保存。
实施例2
制备兔脑组织：
以20kg兔脑为例：
(1)取新鲜的兔脑，剥去血管和脑膜，用生理盐水清洗5次，单次用量40L，然后用常规绞碎机将兔脑绞碎；
(2)清洗液(清洗液中含有氯化钠0.01％、EDTA 0.001％和柳硫汞纳0.01％)洗6次，单次用量30L；
(3)纯化水洗3次，单次用量30L，清洗好的兔脑沥干水分，平铺在不锈钢盘上；
(4)尽快放入已经预冷的冻干机里(预冷冻设-30℃，5h)；将温度提升至-20℃，冻干21h；升温至-10℃，冻干3.5h，升温至0℃，冻干2h，升温至10℃，冻干2.5h；
(5)将冻干的兔脑组织取出，尽快放入准备好的塑料袋内，每袋200g，并放入干燥剂；
(6)将装好冻干兔脑组织的袋子内充入氮气，以保证兔脑组织不被氧化，并于-20℃保存。
实施例3
制备兔脑组织：
以20kg兔脑为例：
(1)取新鲜的兔脑，剥去血管和脑膜，用生理盐水清洗5次，单次用量40L，用常规绞碎机将兔脑绞碎；
(2)清洗液(清洗液中含有氯化钠1％、EDTA0.06％和柳硫汞纳0.03％)洗5遍，每次洗涤用量为40L；
(3)纯化水洗2次，单次用量40L，清洗好的兔脑沥干水分，平铺在不锈钢盘上；
(4)尽快放入已经预冷的冻干机里(预冷冻设-30℃，5h)；将温度提升至-20℃，冻干19h；升温至-10℃，冻干2.5h，升温至0℃，冻干1.5h，升温至10℃，冻干3.5h；
(5)将冻干的兔脑组织取出，尽快放入准备好的塑料袋内，每袋200g，并放入干燥剂；
(6)将装好冻干兔脑组织的袋子内充入氮气，以保证兔脑组织不被氧化，并于-20℃保存。
实施例4
与实施例1相比，区别在于步骤(4)：尽快放入已经预冷的冻干机里(预冷冻设-30℃，5h)；将温度提升至-20℃，冻干12h；升温至-10℃，冻干3h，升温至0℃，冻干2h，升温至10℃，冻干3h。
实施例5
与实施例1相比，区别在于步骤(4)：尽快放入已经预冷的冻干机里(预冷冻设-30℃，5h)；将温度提升至-20℃，冻干30h；升温至-10℃，冻干3h，升温至0℃，冻干2h，升温至10℃，冻干3h。
对比例1
传统兔脑粉的制备方法：
取新鲜兔脑，剥去脑膜及血管，用生理盐水洗净，剪碎，然后加适量丙酮研磨，静置使脑粉沉淀，并倾去上层的丙酮液，如此反复数次，直到脑粉呈灰白色，接着将脑粉放置到真空干燥箱中干燥，使丙酮溶剂完全蒸发，即得到兔脑粉。
该方法生产规模较小，不利于大量生产，而且在操作过程中，容易使兔脑粉中组织因子的活性丧失，产率极低。
对比例2
与实施例1的区别在于将EDTA替换为等量的柠檬酸钠，其他与实施例1相同。
对比例3
与实施例1的区别在于将EDTA替换为等量的EGTA，其他与实施例1相同。
将实施例和对比例得到的兔脑粉均按照如下方法提取兔脑组织因子：
1)称量冻干兔脑组织8g，加入1L提取液，放入匀浆机内匀浆1.5min；
提取液中含有：0.8％柠檬酸三钠、0.06％氯化钠、0.02％硫柳汞钠；
2)于水浴摇床中，40℃、150转/分，摇30min；
3)离心机离心，转速3500转/分，离心30分钟；
4)取离心瓶内上清液过滤，得到兔脑组织因子提取液，2-8℃储存备用，沉淀放入指定容器弃掉。
将兔脑组织因子提取液与缓冲液按照一定比例(1:1)比例进行配比，即得到PT试剂。
缓冲液中含有：0.9％葡萄糖酸钙、0.02％硫柳汞钠、0.6％牛血清白蛋白；
测试一：敏感度测试
测试方法：将实施例和对比例得到的PT试剂在CS5100全自动血凝仪上分别测试SIEMENS质控水平1/2/3，比较测试值与水平1比值的大小，比值越大说明试剂敏感度越高。
测试结果如表1、2所示。
表1实施例的敏感度实验结果 单位：s
表2对比例的敏感度实验结果 单位：s
原料 对比例1 比值 对比例2 比值 对比例3 比值
SIEMENS1 12.5 —— 12.8 —— 11.5 ——
SIEMENS2 27.4 2.19 31.3 2.45 28.5 2.48
SIEMENS3 50.1 4.01 52.7 4.12 50.1 4.36
测试二：悬浮性实验
将实施例1得到的兔脑组织制备得到的PT试剂与对比例1的兔脑组织制备得到的PT试剂进行悬浮性对比实验：分别灌装4mL，2-8℃放置，于第0天、第1天、第3天和第7天进行拍照，观察两种试剂的悬浮情况。
如图1-4分别为第0天、第1天、第3天和第7天的悬浮情况照片，图中左为对比例1得到的PT试剂，右为实施例1得到的PT试剂。对比例1中按照传统方法制备得到的兔脑组织为原料的试剂较为浑浊，第一天出现明显分层，悬浮性不好；而用实施例1中得到的冻干兔脑组织为原料配制的试剂较为清澈，第七天也无明显的沉降现象。
测试三：随机抽样实验
1、利用本发明的按照实施例1和对比例1生产出的不同批次PT试剂进行敏感度测试，分别抽取30例样品，测试结果如表3和图5所示。
表3随机抽样实验结果 单位：s
对比例1和实施例1两种原材料制备的试剂测试正常样本值基本一致，而对比例1兔脑粉原材料制备的PT试剂测试高值样本结果比实施例1冻干兔脑组织低，这也验证了用冻干兔脑组织制备的试剂敏感度比传统兔脑粉的试剂高。
2、随机取按照实施例1和对比例1生产出的某批次两种原材料得到的PT试剂，测试质控秒值如表4所示。
表4随机抽取样品测试结果
由上表数据可以看出两种原料的试剂水平1相近，而水平2和水平3数值差异较大，说明在每日质控表现中冻干兔脑组织试剂的敏感度优于传统兔脑粉。
测试四：储存稳定性测试
将储存的实施例1、实施例4、实施例5制备成PT冻干试剂，实施例4、实施例5比实施例1测试值偏高。按照成熟工艺调至测试值合格，然后放于37℃恒温培养箱中进行试剂稳定性考察。每天测试质控血浆SIEMENS1三次，求均值。测试数据均值如表5所示。
表5稳定性测试结果
由上表数据可以看出，第0天时三种试剂基础值水平相近，实施例4和实施例5均从第4天开始延长1s，后续天数中秒值有所升高。实施例1数据表现比较平稳，7天内数据变化不大，试剂的稳定性较好，说明改变冻干程序会对试剂的稳定性带来影响。
以上仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (5)

1.一种兔脑组织制备方法，其特征在于，对兔脑进行预处理后使用清洗液洗涤，然后水洗，最后进行冻干；
所述预处理具体为：将新鲜的兔脑剥去血管和脑膜，用生理盐水清洗后绞碎；
所述清洗液包括氯化钠0.01-2%、EDTA 0.001-0.1%、防腐剂0.01-0.1%，余量为水；
所述防腐剂为硫柳汞钠；
所述冻干程序具体为：
S1、将洗涤后的兔脑放入已经预冷的冻干机中；
S2、控制温度-20℃，冻干18-24h；
S3、升温至-10℃，冻干2-4h；
S4、升温至0℃，冻干1-2h；
S5、升温至10℃，冻干2-4h；
所述步骤S1中预冷为：控制温度-30℃，预冷5h。
2.根据权利要求1所述的一种兔脑组织制备方法，其特征在于，所述清洗液洗涤5-6次；所述水洗2-3次。
3.根据权利要求1所述的一种兔脑组织制备方法，其特征在于，冻干完成后分装并放入干燥剂然后充氮气-20℃保存。
4.一种兔脑组织提取组织因子的方法，其特征在于，包括以下步骤：
A1、向权利要求1的兔脑组织制备方法得到的冻干兔脑组织中加入提取液混合均匀；
A2、水浴摇床；
A3、离心；
A4、取上清液，过滤即得兔脑组织因子提取液；
所述提取液包括：柠檬酸三钠、氯化钠、硫柳汞钠。
5.一种凝血酶原时间检测试剂，其特征在于，包括权利要求4的方法制得的兔脑组织因子提取液与缓冲液；所述缓冲液包括：葡萄糖酸钙、甘露醇、硫柳汞钠、牛血清白蛋白/蛋白胨。
CN202310100076.0A 2023-02-11 2023-02-11 一种代替传统兔脑粉的兔脑组织制备方法 Active CN116165039B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202310100076.0A CN116165039B (zh) 2023-02-11 2023-02-11 一种代替传统兔脑粉的兔脑组织制备方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202310100076.0A CN116165039B (zh) 2023-02-11 2023-02-11 一种代替传统兔脑粉的兔脑组织制备方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN116165039A CN116165039A (zh) 2023-05-26
CN116165039B true CN116165039B (zh) 2023-09-22

Family

ID=86419534

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202310100076.0A Active CN116165039B (zh) 2023-02-11 2023-02-11 一种代替传统兔脑粉的兔脑组织制备方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN116165039B (zh)

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR1441469A (fr) * 1964-02-07 1966-06-10 Warner Lambert Pharmaceutical Composition lyophilisée pour la détermination des facteurs de coagulation du sang
US5254350A (en) * 1991-07-22 1993-10-19 Helena Laboratories Corporation Method of preparing a thromboplastin extract
US6733985B1 (en) * 1999-05-19 2004-05-11 International Technidyne Corporation Preparation of stable liquid and dried synthetic prothrombin time reagents
CN103852362A (zh) * 2014-03-13 2014-06-11 皖南医学院 兔脑组织因子冻干制剂的制备方法
CN110887970A (zh) * 2019-11-29 2020-03-17 北京赛科希德科技股份有限公司 抽提缓冲液、兔脑抽提液、pt检测试剂及pt检测试剂盒

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR1441469A (fr) * 1964-02-07 1966-06-10 Warner Lambert Pharmaceutical Composition lyophilisée pour la détermination des facteurs de coagulation du sang
US5254350A (en) * 1991-07-22 1993-10-19 Helena Laboratories Corporation Method of preparing a thromboplastin extract
US6733985B1 (en) * 1999-05-19 2004-05-11 International Technidyne Corporation Preparation of stable liquid and dried synthetic prothrombin time reagents
CN103852362A (zh) * 2014-03-13 2014-06-11 皖南医学院 兔脑组织因子冻干制剂的制备方法
CN110887970A (zh) * 2019-11-29 2020-03-17 北京赛科希德科技股份有限公司 抽提缓冲液、兔脑抽提液、pt检测试剂及pt检测试剂盒

Also Published As

Publication number Publication date
CN116165039A (zh) 2023-05-26

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Kooistra et al. Plasminogen activator inhibitor 1: biosynthesis and mRNA level are increased by insulin in cultured human hepatocytes
US5391380A (en) Thromboplastin extract, reagent, and preparation thereof
JPS6133384B2 (zh)
CN106771261B (zh) 糖化血红蛋白质控品的制备方法及其质控品
Poduslo et al. [54] Isolation of specific brain cells
CN107356768A (zh) 一种液体即用型凝血酶原时间检测试剂
Borsook et al. Studies on erythropoiesis II. A method of segregating immature from mature adult rabbit erythroblasts
CN116165039B (zh) 一种代替传统兔脑粉的兔脑组织制备方法
CN118240751B (zh) 一种促进体外人类精子发生的培养液及培养方法
Xia et al. Epidermal growth factor promotes mesenchymal stem cell-mediated wound healing and hair follicle regeneration
CN114250196A (zh) 一种外泌体扩增及保存方法
NO178578B (no) Fremgangsmåte for ekstraksjon av tromboplastiner samt anvendelse av det ekstraherte tromboplastin
CN114544983A (zh) 一种凝血与血小板功能分析仪用正常值质控品的制备方法
LaFond et al. Generation of an internal matrix in mature avian erythrocyte nuclei during reactivation in cytoplasts.
CN111330000A (zh) 一种树突状细胞负载legumain蛋白治疗肝癌的新方法
CN111621471B (zh) 一种软组织胞外囊泡的提取方法及应用
JP2006096673A (ja) ミミズ製品の製造方法
CN105079015A (zh) 曲克芦丁冻干粉针剂及其制备方法
CN115927187B (zh) 阿美替尼耐药细胞株nci-h1975-ar及其应用
US20090176306A1 (en) Method of inducing differentiation from visceral preadipocyte to visceral adipocyte
CN105343047A (zh) 一种肉桂酸肉桂酯的新用途
WO2015142902A1 (en) Human adipose tissue white and 'brown-on-white' progenitors for reconstructive and metabolic therapies
James et al. Histology of platelet-plasma clots from normal subjects and patients with abnormal coagulation
CN114369590B (zh) 一种甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶质控品的制备方法
CN105606412B (zh) 一种血液促凝剂的生产工艺

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant