CN116159006A

CN116159006A - 一种富含多种牡丹成分的组合物及其应用

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Publication number: CN116159006A
Application number: CN202310196718.1A
Authority: CN
Inventors: 戴成兰; 王邦超; 龚开配
Original assignee: Guangzhou Meixi Biotechnology Co ltd
Current assignee: Guangzhou Meixi Biotechnology Co ltd
Priority date: 2023-03-03
Filing date: 2023-03-03
Publication date: 2023-05-26
Anticipated expiration: 2043-03-03
Also published as: CN116159006B

Abstract

本发明公开了一种富含多种牡丹成分的组合物及其应用，属于梳妆用的配制品领域。包括组分水、丁二醇、1，2‑己二醇、对羟基苯乙酮、牡丹花水、发酵牡丹花水、牡丹枝/花/叶提取物、牡丹根提取物、牡丹籽壳提取物、牡丹籽油、木奶果提取物、雪莲花提取物、甘油硬脂酸酯柠檬酸酯。本发明提供的富含多种牡丹成分的组合物为天然植物来源，满足消费者对于天然的喜好。本发明通过牡丹的各部位综合提取，再复配雪莲花提取物和木奶果，具有明显的协同作用，对皮肤具有多种正面效果，在化妆品应用领域具有很大的应用潜力。

Description

一种富含多种牡丹成分的组合物及其应用

技术领域

本发明属于梳妆用的配制品领域，具体涉及一种富含多种牡丹成分的组合物及其应用。

背景技术

牡丹(PaeoniasuffruticosaAndr.)是芍药科(Paeoniaceae)、芍药属(PaeoniaL.)植物，为多年生落叶灌木。牡丹不仅是中国特有的木本名贵花卉，有数千年的自然生长和2000多年的人工栽培历史，且我国为芍药科植物的野生资源主要分布地，具有明显的先天优势。

在2011年，牡丹籽油被批准为国家新资源食品；而且现在在《已使用化妆品原料目录》中，牡丹根、花、叶、枝、籽的提取物均已有相关的使用记录。但目前针对牡丹的研究为食用方面牡丹籽最多；花、叶较少。对应的，牡丹籽加工产品较多，但产品形式单一(食用牡丹籽油)；牡丹花以初级加工产品为主，精深加工较为滞后。

对于牡丹的研究问题主要集中在活性物质不明确、专用加工技术缺乏和产品类型单一的问题。如CN112791126A公开了一种牡丹花蕊提取物及其制备方法与应用，提供了一种具有抑制脂肪酸合酶活性的提取物；但牡丹花蕊的产量稀少，难以实现工业化大规模应用。CN112791127A公开了牡丹花瓣提取物及其制备方法与应用，提供了一种具有抑制脂肪酸合酶活性的提取物；类似的存在花瓣的产量稀少的缺点。

发明内容

本发明提供了一种富含多种牡丹成分的组合物及其应用，对牡丹进行综合利用，并配合其他植物，制备出专门应用于化妆品的原料组合。

为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种富含多种牡丹成分的组合物，以质量份计算包括以下组分：

特别地，所述木奶果提取物的制备方法为：取木奶果的成熟果实，去皮去核，果肉粉碎后浸入乙醇水溶液中加热并电磁振荡提取，提取后取溶液，去除乙醇并浓缩。

进一步的，乙醇水为75vol％，乙醇水与果肉的质量比为8-10:1；

加热的温度为70-76℃，提取时间为2-3h；电磁振荡rpm500-3000，电磁振荡时间为提取时间的≤30％；

浓缩至提取后溶液原体积的≤20％。

特别地，所述发酵牡丹花水的制备方法为：将提取后的牡丹籽壳、牡丹根、牡丹枝/花/叶与牡丹花水、双歧杆菌进行发酵；发酵后灭菌、离心去上清液；

所述提取后的牡丹籽壳、牡丹根、牡丹枝/花/叶的总质量，与牡丹花水，双歧杆菌的质量比为15-25:100:2-4；

发酵初始温度36-37℃，发酵时间36-48h，发酵液初始pH为6-7。

特别地，所述牡丹籽壳提取物的制备方法为：新鲜牡丹籽的脱壳，取籽壳，洗净干燥后粉碎；酶解后灭菌后超临界提取。

进一步的，所述超临界提取中，夹带剂为80-95％vol的乙醇水溶液；CO₂的流量为15-28ml/min；萃取温度为40-55℃；压力为35-50Mpa；萃取时间为90-120min；夹带剂的加入量为粉末质量的8-12％。

进一步的，所述酶解中：为纤维素酶，用量为牡丹籽壳的2-5wt％；酶解时间为≥1h，初始温度为55±3℃。

本发明前述的富含多种牡丹成分的组合物在化妆品和/或护肤品中的应用。

甘油硬脂酸酯柠檬酸酯CAS:55840-13-6，是一种植物来源的乳化剂；具有致敏风险低的优点。

丁二醇、1,2-己二醇作为溶剂的同时还具有较强的抑菌功效，无需添加传统防腐剂。

牡丹全株中具有多种不同的活性物质，且在不同部位中各不相同；具体为：

单萜苷类：

芍药苷、氧化芍药苷、苯甲酰芍药苷、没食子酰芍药苷、苯甲酰氧化芍药苷等，主要分布在牡丹籽、根、花、叶中。

低聚茋类：

白藜芦醇、氧化白藜芦醇、反式白藜芦醇醇、葡萄素、葡萄素C等，主要分布在牡丹籽和籽壳中。

酚类：

丹皮酚、没食子酸、没食子酸甲酯、没食子酸乙酯、儿茶素、表儿茶素、原花青素B2、水杨酸等；主要分布在牡丹籽、根、花、叶中。

三萜类：

齐墩果酸、白桦脂酸、羟基白桦脂酸、常春藤皂苷元、角鲨烯等，主要分布在牡丹籽根中。

黄酮类：

芹菜素、槲皮素、木犀草素、芦丁、山奈酚、异鼠李素、金丝桃素、紫云英苷、花旗松素等；主要分布在针丹花、叶、籽中。

另外各部位中还特有：

牡丹花：蓓烯类、醇类、醋类、烷烃类、芳香化合物等挥发性成分。

牡丹籽油：脂肪酸，油酸、亚油酸和亚麻酸等不饱和脂肪酸；棕榈酸、硬脂酸等饱和脂肪酸；甾醇、VE。

牡丹花、叶：单宁类。

雪莲花提取物，为从雪莲花中提取的纯天然产物，能够清除体内自由基，有效延缓肌肤衰老，同时可以帮助肌肤吸收和锁住水分；本发明发现，雪莲花提取物与其他活性物质具有协同作用，对皮肤具有正面影响。

木奶果是原生于我国南方广东、海南等地的较高产量的水果，但是由于不耐运输，故只在原产地附近具有较小的知名度；本发明发现木奶果中具有挥发油、脂肪酸、倍半萜内酯类化合物；与牡丹提取物混用会使得抗氧效果提升。

与现有技术相比，本发明的有益效果为：

(1)本发明提供的富含多种牡丹成分的组合物为天然植物来源，满足消费者对于天然的喜好。

(2)本发明通过牡丹的各部位综合提取，再复配雪莲花提取物和木奶果，具有明显的协同作用，对皮肤具有多种正面效果，在化妆品应用领域具有很大的应用潜力。

具体实施方式

为了更好地理解本发明，下面结合具体实施例对本发明作进一步的描述，其中实施例中使用的术语是为了描述特定的具体实施方案，不构成对本发明保护范围的限制。

本发明中：

牡丹是指PAEONIASUFFRUTICOSA，毛茛科芍药属植物牡丹。

牡丹花水是指PAEONIASUFFRUTICOSAFLOWER WATER；CBNumber：CB79831431。

牡丹枝/花/叶提取物是指PAEONIASUFFRUTICOSAFLOWER/LEAF/ROOT EXTRACT；CBNumber：CB49831430。

牡丹籽油是指PAEONIASUFFRUTICOSASEED OIL(Peony seed oil)CBNumber：CB73373467。

牡丹根提取物是指PAEONIASUFFRUTICOSAROOT EXTRACT，CBNumber：CB5962684。

木奶果是指大戟科、木奶果属Baccaurea ramiflora Lour.。

雪莲花提取物是指SAUSSUREA INVOLUCRATAEXTRACT；CB1964392。

下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则百分比和份数按重量计算。

木奶果提取物的制备，包括以下步骤：

(1)取木奶果的成熟果实，洗净后去皮去核，取果肉并切碎；

(2)果肉浸泡在75vol％乙醇内，加热提取；并在提取的前段时间内电磁震荡；

(3)提取后分离不溶物取溶液；

(4)溶液分离去除乙醇，浓缩，得木奶果提取物，密封保存备用；具体技术参数如表1所示。

表1

技术参数/序号	1	2	3
				乙醇水/果肉质量比	8	9	10
加热温度，℃	76	70	70
				提取时间，min	120	180	180
电磁振荡，rpm	3000	500	1500
				电磁振荡时间，min	35	90	60
浓缩百分比，v/v％	20	20	20

牡丹籽壳提取物提取物的制备，包括以下步骤：

(1)取成熟的新鲜牡丹籽的脱壳，取籽壳；洗净干燥后粉碎；

(2)利用纤维素酶酶解，高温灭菌；

(3)CO₂超临界提取，夹带剂为乙醇水；得牡丹籽壳提取物，密封保存备用；具体技术参数如表2所示。

表2

发酵牡丹花水的制备，包括以下步骤：

(1)将提取后的牡丹籽壳、牡丹根、牡丹枝/花/叶(残余物)与牡丹花水混合；

(2)利用双歧杆菌进行发酵；

(3)发酵后灭菌、离心去上清液；得发酵牡丹花水，密封保存备用；具体技术参数如表3所示。

表3

技术参数/序号	1	2	3
				残余物质量份	15	20	25
牡丹花水质量份	100	100	100
				双歧杆菌质量份	2	3	4
发酵初始温度，℃	36	37	36
				发酵时间，h	36	42	48
发酵液初始，pH	6.5	6	7

富含多种牡丹成分的组合物的制备，按下表4将各原料混合。

表4

技术参数/实施例编号	1	2	3	4	5	6
							水	14	30	30	48	14	48
丁二醇	38	11	22	32	38	26
							1，2-己二醇	0.128	0.039	0.220	0.160	0.130	0.240
对羟基苯乙酮	0.08	0.125	0.195	0.195	0.140	0.140
							牡丹花水	60	42	40	24.8	60	28.5
发酵牡丹花水	12	24	20	12	20	12
							发酵牡丹花水序号	1	1	2	2	3	3
牡丹枝/花/叶提取物	2	3	2	1	3	2
							牡丹根提取物	1	0.5	1	1.5	0.5	1
牡丹籽壳提取物	1.8	1.8	1.5	1.2	1.2	1.8
							牡丹籽壳提取物序号	1	1	2	2	3	3
牡丹籽油	2.5	2.5	2.5	3	3	3
							木奶果提取物	6	7.2	8.8	6	7.2	8.8
木奶果提取物序号	1	1	2	2	3	3
							雪莲花提取物	0.8	0.8	1.2	0.8	0.8	1.2
甘油硬脂酸酯柠檬酸酯	0.4	0.4	0.2	0.4	0.4	0.2

表4中，未注明的技术参数的单位均为质量份。

样品稳定性测试

1、耐热测试：恒温培养箱调节到40℃，将前述制取的六个实施例，每个实施例取三支装于透明玻璃瓶中，装样量为20ml/瓶，封口后置于恒温培养箱内，三个月后取出，恢复至室温，观察外观变化。

2、耐寒测试：恒温培养箱调节到-10℃，将前述制取的六个实施例，每个实施例取三支装于透明玻璃瓶中，装样量为20ml/瓶，封口后置于恒温培养箱内，三个月后取出，恢复至室温，观察外观变化。

3、常温测试：将前述制取的六个实施例，每个实施例取三支装于透明玻璃瓶中，装样量为20ml/瓶，封口后常温下放置6个月后，观察外观变化。

耐热测试、耐寒测试、常温测试均未观察到析出、沉淀等现象，保持原来外观。

人体皮肤斑贴测试

将获得的6组富含多种牡丹成分的组合物参照《2022化妆品安全技术规范》中的人体皮肤斑贴实验。

分别于30min(待压痕消失后)、24h和48h按标准观察皮肤反应，并记录观察结果，见表5。

表5人体安全性测试结果

编号	30min	24h	48h
				实施例1	0级，30人	0级，30人	0级，30人
实施例2	0级，30人	0级，30人	0级，30人
				实施例3	0级，30人	0级，30人	0级，30人
实施例4	0级，30人	0级，30人	0级，30人
				实施例5	0级，30人	0级，30人	0级，30人
实施例6	0级，30人	0级，30人	0级，30人

MTT测试

利用MMT测试对样品进行细胞毒性检测。

测试方法：

(1)细胞接种：按2.2*10⁴个/孔的接种密度接种细胞至96孔板，放置培养箱孵育过夜(37℃、5％CO₂)。

(2)实验分组：实验设置空白对照组与实验组，另设3个无细胞的孔做调零孔，实验组中样品设置5个浓度梯度，每个梯度浓度下设置3个复孔；

实验组采用实施例1的样品；

(3)配液：按实验设计，用基础培养基配置不同浓度的受试物；如下表6表6 测试浓度设定表

(4)给药：24h后取出96孔板，废除旧培养基，空白对照组每孔加100μL培养液,样品组每孔加入100μL含有相应浓度样品的培养液；调零组无细胞接种，仅加入100μL细胞培养液。给药完成后放回培养箱继续培养。

(5)检测：细胞培养24h后，弃掉上清，加入MTT工作液。37℃避光孵育4h，孵育结束后，弃掉上清，每孔加100μL DMSO，在490nm处读取OD值。

(6)细胞相对活力计算：根据公式计算，结果如表7.

表7积雪草提取物MTT检测结果

ROS(Reactive Oxygen Species)实验测试

以人表皮细胞为研究对象，用一定剂量的UVB照射，建立体外损伤模型。并基于该体外氧化损伤模型，通过样品抑制细胞活性氧的能力来评价待测样品清除自由基功效。

测试方法：

(1)细胞接种：按2.5*10⁵个/孔的接种密度接种至24孔板，培养箱中孵育过夜。

(2)UVB照射：PBS清洗细胞后，根据实验分组，对有UVB照射的组别进行12J/cm²的UVB辐照。

(3)药物诱导：根据表8实验分组，进行分组给药，每孔加样1mL，每组设置3个复孔。给药完成后将24孔板放置在37℃培养箱中避光孵育24h。

(4)ROS探针准备：探针装载前按照1:1000用无血清培养液稀释H₂DCFDA，使其终浓度为10μM。

(5)ROS探针装载：吸除处理药物，加入500μL稀释好的H2DCFDA工作液。37℃细胞培养箱内避光孵育30min。

(6)细胞清洗：用PBS清洗细胞3次，以充分去除未进入细胞内的H₂DCFDA。

(7)荧光显微镜照相：将清洗好的24孔板置于显微镜下观察。

(8)结果分析：对采集的照片，采用ImageJ软件进行图片荧光强度分析，结果如表9所示。

表8实验分组

表9ROS检测结果

注：与模型进行比较，“*”：P<0.05，表示有显著性差异，“**”：P<0.01、“***”：P<0.001，表示非常显著性差异。

人体测试

受试样品：实施例1-6，不稀释。

受试人群：年龄在25-50岁之间的70位女性；

皮肤状况：过敏测试无过敏，受试部位皮肤无异常、明显疤痕或损伤；

分组：分成7组，每组10人，各组人员均匀分配；

测试方法：受试者在测试前三天及整个测试期间，不涂抹除测试样品外的任何化妆品和外用试剂，测试前，受试者首先用无任何功效的洗面奶清洁脸部，使用皮肤水分测试仪Corneometer CM 825测量受试者皮肤含水量，然后取适量受试品均匀涂于一侧面部，另一侧面部不涂抹任何护肤品作为空白对照区域，在涂抹前(0h)、涂抹后分别于1小时、3小时、6小时使用皮肤水分测试仪Corneometer CM 825测量受试区域和空白对照区域的皮肤含水量，每位受试者面部取3个不同的位置进行测试后记平均值。测定结束后计算水分含量(MMV)均值，结果见下表10：

表10即时保湿性能结果

虽然以上描述了本发明的具体实施方式，但是本领域的技术人员应当理解，这仅是举例说明，本发明的保护范围是由所附权利要求书限定的。本领域的技术人员在不背离本发明的原理和实质的前提下，可以对这些实施方式做出多种变更或修改，但这些变更和修改均落入本发明的保护范围。

Claims

1.一种富含多种牡丹成分的组合物，其特征在于，以质量份计算包括以下组分：

2.根据权利要求1所述的富含多种牡丹成分的组合物，其特征在于，所述木奶果提取物的制备方法为：取木奶果的成熟果实，去皮去核，果肉粉碎后浸入乙醇水溶液中加热并电磁振荡提取，提取后取溶液，去除乙醇并浓缩。

3.根据权利要求2所述的富含多种牡丹成分的组合物，其特征在于，乙醇水为75vol％，乙醇水与果肉的质量比为8-10:1；

浓缩至提取后溶液原体积的≤20％。

4.根据权利要求1所述的富含多种牡丹成分的组合物，其特征在于，所述发酵牡丹花水的制备方法为：将提取后的牡丹籽壳、牡丹根、牡丹枝/花/叶与牡丹花水、双歧杆菌进行发酵；发酵后灭菌、离心去上清液；

发酵初始温度36-37℃，发酵时间36-48h，发酵液初始pH为6-7。

5.根据权利要求1所述的富含多种牡丹成分的组合物，其特征在于，所述牡丹籽壳提取物的制备方法为：新鲜牡丹籽的脱壳，取籽壳，洗净干燥后粉碎；酶解后灭菌后超临界提取。

6.根据权利要求5所述的富含多种牡丹成分的组合物，其特征在于，

所述超临界提取中，夹带剂为80-95％vol的乙醇水溶液；CO₂的流量为15-28ml/min；萃取温度为40-55℃；压力为35-50Mpa；萃取时间为90-120min；夹带剂的加入量为粉末质量的8-12％。

7.根据权利要求5所述的富含多种牡丹成分的组合物，其特征在于，所述酶解中：为纤维素酶，用量为牡丹籽壳的2-5wt％；酶解时间为≥1h，初始温度为55±3℃。

8.权利要求1-7任一所述的富含多种牡丹成分的组合物在化妆品和/或护肤品中的应用。