CN116139234A - 一种治疗肺癌的中药组合物及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种治疗肺癌的中药组合物及其制备方法，以质量份数计包括以下原料：灵芝20～30份、北沙参10～20份、紫河车10～15份、丹参8～12份、夏枯草16～24份、蒲公英20～30份、桔梗10～14份、制杏仁10～14份、鱼腥草15～20份、人工牛黄3～8份、水蛭7～13份、炙鳖甲12～18份、虻虫6～10份、百部10～14份、半枝莲10～15份以及甘草3～7份。本发明提供的治疗肺癌的中药组合物及其制备方法，其通过合理的药方搭配，以及优化中药组合物制备工艺，减少了药材在干燥、粉碎过程中的成分损失，提高了药效，从而获得明显的治疗肺癌效果。
Description
技术领域
本发明涉及中药技术领域，尤其是一种治疗肺癌的中药组合物及其制备方法。
背景技术
原发性支气管肺癌简称肺癌，英文名lung cancer，是指原发于气管、支气管和肺的恶性肿瘤。肺癌的发病率和死亡率正在迅速上升，而且是世界性的趋势。肺癌的发病机制迄今未完全明确，但有证据表明肺癌的发生与吸烟、空气污染、职业致癌因子、饮食、遗传等因素有关。总的来说，遗传因素及环境因素共同参与其发病。
多数肺癌患者就诊时已为晚期，咳嗽为最常见症状。肺癌早期采用手术治疗，预后尚佳，但是对于晚期患者，绝大多数采用放疗及化疗，其缓解期短，毒副作用较大，不能明显延长生存期，预后较差。因此强调早期发现、早期治疗，中晚期主张多学科多方法综合治疗，以提高疗效，延长生存期及提高生存质量。中医药配合放化疗还可以起到减毒增效的作用，配合免疫治疗可以迅速提高机体免疫功能、增强抗病能力。近年来，随着中医药治疗肺癌研究的不断深入，中医药对肺癌的诊治也取得了一定优势。
肺癌多属于中医学的肺积、痞廯、咳嗽、咳血、胸痛等范畴。肺癌的发生与正气虚损和邪毒入侵关系密切，正气内虚，脏腑阴阳失调是该病的主要基础。目前，随着中药的进一步发展，很多中药组合物应用于治疗肺癌中。
但是现有的很多药方存在不够全面和规范，且在中药组合物制备过程中，药材有效成分损失较多，造成浪费和药效不足。比如在我们常用的中药材中，解表药、行气活血药、芳香化湿药等都会含有挥发油，这些挥发油具有显著疗效。但是在中药制剂的研制和生产中，挥发油成分的提取和保留存在很多问题，致使挥发油大量损失，严重影响了药物的疗效。
综上所述，如何设计一种治疗肺癌的中药组合物及其制备方法，不仅药方搭配合理，而且药效明显，抗肺癌效果显著，是目前急需解决的问题。
发明内容
本发明的目的在于提供一种治疗肺癌的中药组合物及其制备方法，其通过合理的药方搭配，以及优化中药组合物制备工艺，减少了药材在干燥、粉碎过程中的成分损失，提高了药效，从而获得明显的治疗肺癌效果。
本发明的目的是这样实现的：
一种治疗肺癌的中药组合物，以质量份数计包括以下原料：灵芝20～30份、北沙参10～20份、紫河车10～15份、丹参8～12份、夏枯草16～24份、蒲公英20～30份、桔梗10～14份、制杏仁10～14份、鱼腥草15～20份、人工牛黄3～8份、（制）水蛭7～13份、炙鳖甲12～18份、（制）虻虫6～10份、百部10～14份、半枝莲10～15份以及甘草3～7份。
北沙参：为伞形科珊瑚菜属植物北沙参Glehnia littoralis F. Schmidtex Miq.的根。具有养阴润肺，益胃生津的功效。主治肺热燥咳，痰少咽干，热病伤津，口燥咽干，烦热口渴等。本品含挥发油、三萜酸、豆甾醇、β-谷甾醇、多糖、生物碱及多种香豆素类化合物。
鱼腥草：为三白草科蕺菜属植物蕺菜Houttuynia cordata thunb.的干燥地上部分。具有清热解毒，消痈排脓，利尿通淋的功效。主治肺痈吐脓，肺热咳嗽，热毒疮痈，湿热淋证，湿热泻痢。本品含鱼腥草素、挥发油、蕺来碱、槲皮苷、氯化钾等。
本发明还提供了所述治疗肺癌的中药组合物的制备方法，具体包括如下步骤：将所有药材洗净，然后将含挥发油的药材（北沙参、鱼腥草）和其他药材分开干燥，含挥发油的药材的干燥温度为60～70℃，其他药材的干燥温度为70～90℃，其他药材粉碎、过筛（40～60目）后，与干燥后的含挥发油的药材一起回流提取。
本发明还提供了一种用于所述的治疗肺癌的中药组合物的制备方法中的多孔淀粉，所述多孔淀粉在含挥发油的药材干燥时加入，其加入量为含挥发油的药材质量的4～6%，所述多孔淀粉的制备方法包括以下步骤：
S1、将烯丙基磺酸钠与5～10倍量甲苯、引发剂混合均匀，在干燥、60～70℃下滴入丙烯酸酐，滴完后反应3～5h，得聚合物；
S2、将淀粉与步骤S1得到的聚合物置于混合机中混匀，通过干法酯化淀粉，反应温度为70～75℃，反应时间为2～4h，搅拌速度为800～1000r/min，得酯化淀粉；
S3、将多孔陶瓷粉置于阴离子表面活性剂水溶液中浸渍1～2h，挥干水分后抽真空，然后置于α-淀粉酶与糖化酶的混合酶中分散1～2h，得载酶陶瓷粉；
S4、将步骤S2得到的酯化淀粉与5～10倍量水混合，调PH至6，然后加入载酶陶瓷粉，混匀后在50～60℃酶解反应1～2h，加入氢氧化钠溶液（质量分数4%）终止反应，然后过滤除去多孔陶瓷粉，滤液离心分离，得沉淀；
S5、将步骤S4得到的沉淀中继续加入氢氧化钠溶液（质量分数30%～40%），在70～90℃搅拌反应20～40min，然后过滤、干燥，即得多孔淀粉。
进一步地，步骤S1中，烯丙基磺酸钠与丙烯酸酐的摩尔比为1：（1～1.4），引发剂为过氧化苯甲酰/N，N-二甲基苯胺、异丙苯过氧化氢/四乙烯亚胺或者偶氮二异庚腈，引发剂加入量为反应原料质量的0.2～0.4%；步骤S2中，聚合物与淀粉的质量比为（0.04～0.1）：1。
进一步地，步骤S3中，多孔陶瓷粉（0.05～0.1mm）、阴离子表面活性剂与混合酶的质量比为1：（0.05～0.1）：（0.1～0.3），阴离子表面活性剂为磺酸盐（木质素磺酸钠）、或者羧酸盐（月桂酸钠），混合酶的用量为酯化淀粉质量的1～2%，α-淀粉酶与糖化酶的质量比为1：（0.5～1）。
进一步地，步骤S4中，氢氧化钠溶液的加入量为混合酶质量的4～8倍，步骤S5中，氢氧化钠溶液的加入量为沉淀质量的20～40%。
本发明还提供了一种用于所述的治疗肺癌的中药组合物的制备方法中的吸附微球，所述吸附微球在其他药材粉碎后加入并混合，所述吸附微球的加入量占其他药材质量的3～6%，所述吸附微球的制备方法包括以下步骤：
A、将葡萄糖与去离子水混合均匀制成葡萄糖溶液，将葡萄糖溶液置于密封反应釜中，加入蒙脱石粉（10～20µm），用氮气排除反应釜内空气后，升温至180～200℃，保温反应3～5h，反应结束后过滤反应产物，使用丙酮和去离子水反复冲洗，干燥即得蒙脱石复合炭微球；
B、将海藻酸钠、聚乙二醇、交联羧甲基纤维素钠与水混合配成膜材料液，然后将膜材料液喷涂到蒙脱石复合炭微球表面，喷涂后的蒙脱石复合炭微球浸入氯化钙溶液（2～3%质量分数）中，待微球表面成膜后，过滤除去溶液，得到的产品依次用无水乙醇、清水洗涤，烘干，即得吸附微球。
进一步地，步骤A中，制得的葡萄糖溶液的浓度为6～12g/100mL，多孔蒙脱石粉的加入量为葡萄糖质量的2～4倍。
进一步地，所述海藻酸钠、聚乙二醇、交联羧甲基纤维素钠与水的质量比为1：（0.08～0.14）：（0.04～0.08）：（4～6），所述膜材料液的喷涂量为蒙脱石复合炭微球质量的4～8%。
所述治疗肺癌的中药组合物的制备方法中，回流提取方法具体包括以下步骤：
（1）将粉碎过筛后的药材中加入8～20倍质量乙醇水溶液（体积浓度60～80%），在70～80℃回流提取2～3次，每次2～4h，过滤，得到的滤渣一备用，合并滤液，减压蒸馏除乙醇，得醇提产物一；
（2）往步骤（1）得到的滤渣一中再加入10～30倍质量水煎煮1～2次，每次1～2h，过滤，得到的滤渣二备用，合并滤液，即得水提产物；
（3）往步骤（2）得到的滤渣二中再加入8～20倍质量乙醇水溶液（体积浓度60～80%），在70～80℃回流提取1～2h，过滤，滤液减压蒸馏除乙醇，得醇提产物二；
（4）将醇提产物一、二和水提产物合并，微滤膜（0.1～1µm）过滤，然后减压浓缩至相对密度为1.08～1.15，即得所述中药组合物。
本发明的具有以下有益效果：
（1）本发明的中药组合物，其药方搭配合理，以灵芝、人工牛黄、炙鳖甲和水蛭为君药，以北沙参、紫河车、虻虫、半枝莲为臣药，以丹参、百部、桔梗、杏仁为佐药，以夏枯草、蒲公英、鱼腥草以及甘草为使药，共奏抗肺癌之功效，治疗肺癌效果明显。
（2）由于本发明部分的药材（北沙参、鱼腥草）中含挥发油，其在干燥过程中容易造成挥发组分损失，因此本申请在药材干燥过程中，加入多孔淀粉来吸附挥发组分，回收损失药效成分。
（3）本发明的多孔淀粉采用酶解反应制成，在酶解过程中将混合酶导入多孔陶瓷粉中形成载酶陶瓷粉，使得混合酶的释放得到缓释，使得酶解反应稳定缓慢进行产生均匀的孔隙，促进了多孔淀粉的吸附效果；另外本发明还将淀粉酯化导入阴离子磺酸盐，且将多孔陶瓷粉采用阴离子表面活性剂处理，使得酯化淀粉与载酶陶瓷粉能够分散均匀，进一步促进酶解反应的稳定进行。
（4）为了不影响淀粉原有的性质，本发明还在酶解反应后加入碱液将酯化淀粉进行水解，脱去表面的聚合物基团。
（5）由于中药材的很多药效成分在粉碎过程中容易流失，因此本发明在粉碎药材后，还加入吸附微球，本发明的吸附微球由蒙脱石复合炭微球表面包覆海藻酸钠膜制成，能够回收损失的药效成分。
（6）本发明的吸附微球中，蒙脱石粉吸附能力强，加入葡萄糖溶液中经水热反应在其表面形成高活性的炭微球，因此蒙脱石复合炭微球具有很强的吸附活性成分的能力，能够吸附粉碎过程中的药材效成分，为了增加吸附容量和吸附稳定性，本发明还在蒙脱石复合炭微球表面包覆海藻酸钠膜。
（7）本发明的海藻酸钠复合膜通过聚乙二醇形成多孔膜，使得吸附微球形成内外双层多孔性的吸附微球，更加增强了吸附效果。
（8）本发明的多孔淀粉和吸附微球均与药材一起参与回流提取，依次经过醇提、水提和再醇提。在第一次醇提阶段吸附微球和多孔淀粉可以促进药材化学成分的溶出，提高提取率；然后在水提阶段，多孔淀粉和吸附微球表面的海藻酸钠膜会解体释放药效成分，使得药效成分得以回收利用；最后在第二次醇提阶段进一步收集药效成分。
实施方式
下面结合实施例对本发明进行进一步的说明。显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
本实施例提供了一种治疗肺癌的中药组合物，包括以下原料：灵芝20克、北沙参10克、紫河车10克、丹参8克、夏枯草16克、蒲公英20克、桔梗10克、制杏仁10克、鱼腥草15克、人工牛黄3克、（制）水蛭7克、炙鳖甲12克、（制）虻虫6克、百部10克、半枝莲10克以及甘草3克。
所述中药组合物的制备方法包括如下步骤：将所有药材洗净、干燥、粉碎、过筛（40～60目）后，加入水煎煮2h，过滤得水煎液，然后减压浓缩至相对密度为1.08～1.15，即得中药组合物。
实施例2
本实施例与实施例1的中药组合物的组成相同，并提供了另外一种中药组合物的制备方法，具体包括如下步骤：将所有药材洗净，然后将含挥发油的药材（北沙参、鱼腥草）和其他药材分开干燥，含挥发油的药材的干燥温度为60℃，其他药材的干燥温度为70℃，其他药材粉碎、过筛（40～60目）后，与干燥后的含挥发油的药材一起回流提取。
回流提取方法具体包括以下步骤：
（1）将粉碎过筛后的药材中加入8倍质量的乙醇水溶液（体积浓度60%），在70℃回流提取2次，每次4h，过滤，得到的滤渣一备用，合并滤液，减压蒸馏除乙醇，得醇提产物一；
（2）往步骤（1）得到的滤渣一中再加入10倍质量的水煎煮2次，每次1h，过滤，得到的滤渣二备用，合并滤液，即得水提产物；
（3）往步骤（2）得到的滤渣二中再加入8倍质量的乙醇水溶液（体积浓度60%），在70℃回流提取2h，过滤，滤液减压蒸馏除乙醇，得醇提产物二；
（4）将醇提产物一、二和水提产物合并，微滤膜（0.1～1µm）过滤，然后减压浓缩至相对密度为1.08～1.15，即得所述中药组合物。
实施例3
在实施例2的基础上，本实施例提供了一种治疗肺癌的中药组合物的制备方法，同时提供了一种多孔淀粉，其在含挥发油的药材干燥时加入，其加入量为含挥发油的药材质量的4%，多孔淀粉的制备方法包括以下步骤：
S1、将烯丙基磺酸钠与5倍量甲苯、引发剂（过氧化苯甲酰/N，N-二甲基苯胺，引发剂加入量为反应原料质量的0.2%）混合均匀，在干燥、60℃下滴入丙烯酸酐，滴完后反应5h，除溶剂得聚合物，其中烯丙基磺酸钠与丙烯酸酐的摩尔比为1：1；
S2、按质量比1：0.07将淀粉与步骤S1得到的聚合物置于混合机中混匀，通过干法酯化淀粉，反应温度为70℃，反应时间为2h，搅拌速度为800r/min，得酯化淀粉；
S3、将多孔陶瓷粉（0.05mm）置于阴离子表面活性剂（木质素磺酸钠）水溶液中浸渍1h，挥干水分后抽真空，然后置于质量比为1：0.5的α-淀粉酶与糖化酶的混合酶中分散1h，得载酶陶瓷粉，其中，多孔陶瓷粉、阴离子表面活性剂与混合酶的质量比为1：0.05：0.1，混合酶的用量为酯化淀粉质量的1%；
S4、将步骤S2得到的酯化淀粉与5倍量水混合，调PH至6，然后加入载酶陶瓷粉，混匀后在50℃酶解反应1h，加入混合酶质量4倍的氢氧化钠溶液（质量分数4%）终止反应，然后过滤除去多孔陶瓷粉，滤液离心分离，得沉淀；
S5、将步骤S4得到的沉淀中继续加入氢氧化钠溶液（质量分数30%，加入量为沉淀质量的20%），在70℃搅拌反应20min，然后过滤、干燥，即得多孔淀粉。
其余与实施例2相同。
实施例4
在实施例2的基础上，本实施例提供了一种治疗肺癌的中药组合物的制备方法，同时提供了一种吸附微球，所述吸附微球在其他药材粉碎后加入并混合，吸附微球的加入量占其他药材质量的3%，吸附微球的制备方法包括以下步骤：
A、将葡萄糖与去离子水混合均匀制成葡萄糖溶液（浓度为6g/100mL），将葡萄糖溶液置于密封反应釜中，加入葡萄糖质量2倍的蒙脱石粉（10µm），用氮气排除反应釜内空气后，升温至180℃，保温反应3h，反应结束后过滤反应产物，使用丙酮和去离子水反复冲洗，干燥即得蒙脱石复合炭微球；
B、按质量比为1：0.08：0.04：4，将海藻酸钠、聚乙二醇、交联羧甲基纤维素钠与水混合配成膜材料液，然后将膜材料液喷涂（喷涂量为蒙脱石复合炭微球质量的4%）到蒙脱石复合炭微球表面，喷涂后的蒙脱石复合炭微球浸入氯化钙溶液（2%质量分数）中，待微球表面成膜后，过滤除去溶液，得到的产品依次用无水乙醇、清水洗涤，烘干，即得吸附微球。
其余与实施例2相同。
实施例5
本实施例提供了一种治疗肺癌的中药组合物的制备方法，其为实施例3与4的结合。
实施例6
本实施例提供了一种治疗肺癌的中药组合物，包括以下原料：灵芝25克、北沙参15克、紫河车12克、丹参10克、夏枯草20克、蒲公英25克、桔梗12克、制杏仁12克、鱼腥草18克、人工牛黄6克、（制）水蛭10克、炙鳖甲15克、（制）虻虫8克、百部12克、半枝莲13克以及甘草5克。
本发明还提供了所述治疗肺癌的中药组合物的制备方法，具体包括如下步骤：将所有药材洗净，然后将含挥发油的药材（北沙参、鱼腥草）和其他药材分开干燥，含挥发油的药材的干燥温度为65℃，其他药材的干燥温度为80℃，其他药材粉碎、过筛（40～60目）后，与干燥后的含挥发油的药材一起回流提取。
本实施例还提供了一种多孔淀粉，其在含挥发油的药材干燥时加入，其加入量为含挥发油的药材质量的5%，多孔淀粉的制备方法包括以下步骤：
S1、将烯丙基磺酸钠与8倍量甲苯、引发剂（偶氮二异庚腈，引发剂加入量为反应原料质量的0.3%）混合均匀，在干燥、65℃下滴入丙烯酸酐，滴完后反应4h，得聚合物，其中烯丙基磺酸钠与丙烯酸酐的摩尔比为1：1.2；
S2、按质量比1：0.07将淀粉与步骤S1得到的聚合物置于混合机中混匀，通过干法酯化淀粉，反应温度为72℃，反应时间为3h，搅拌速度为900r/min，得酯化淀粉；
S3、将多孔陶瓷粉（0.08mm）置于阴离子表面活性剂（月桂酸钠）水溶液中浸渍1.5h，挥干水分后抽真空，然后置于质量比为1：0.8的α-淀粉酶与糖化酶的混合酶中分散1.5h，得载酶陶瓷粉，其中，多孔陶瓷粉、阴离子表面活性剂与混合酶的质量比为1：0.08：0.2，混合酶的用量为酯化淀粉质量的1.5%；
S4、将步骤S2得到的酯化淀粉与8倍量水混合，调PH至6，然后加入载酶陶瓷粉，混匀后在55℃酶解反应1.5h，加入混合酶质量6倍的氢氧化钠溶液（质量分数4%）终止反应，然后过滤除去多孔陶瓷粉，滤液离心分离，得沉淀；
S5、将步骤S4得到的沉淀中继续加入氢氧化钠溶液（质量分数35%，加入量为沉淀质量的30%），在80℃搅拌反应30min，然后过滤、干燥，即得多孔淀粉。
本实施例还提供了一种吸附微球，所述吸附微球在其他药材粉碎后加入并混合，吸附微球的加入量占其他药材质量的4.5%，吸附微球的制备方法包括以下步骤：
A、将葡萄糖与去离子水混合均匀制成葡萄糖溶液（浓度为9g/100mL），将葡萄糖溶液置于密封反应釜中，加入葡萄糖质量3倍的蒙脱石粉（15µm），用氮气排除反应釜内空气后，升温至190℃，保温反应4h，反应结束后过滤反应产物，使用丙酮和去离子水反复冲洗，干燥即得蒙脱石复合炭微球；
B、按质量比为1：0.11：0.06：5，将海藻酸钠、聚乙二醇、交联羧甲基纤维素钠与水混合配成膜材料液，然后将膜材料液喷涂（喷涂量为蒙脱石复合炭微球质量的6%）到蒙脱石复合炭微球表面，喷涂后的蒙脱石复合炭微球浸入氯化钙溶液（2.5%质量分数）中，待微球表面成膜后，过滤除去溶液，得到的产品依次用无水乙醇、清水洗涤，烘干，即得吸附微球。
回流提取方法具体包括以下步骤：
（1）将粉碎过筛后的药材中加入14倍质量的乙醇水溶液（体积浓度70%），在75℃回流提取3次，每次3h，过滤，得到的滤渣一备用，合并滤液，减压蒸馏除乙醇，得醇提产物一；
（2）往步骤（1）得到的滤渣一中再加入20倍质量的水煎煮2次，每次1.5h，过滤，得到的滤渣二备用，合并滤液，即得水提产物；
（3）往步骤（2）得到的滤渣二中再加入14倍质量的乙醇水溶液（体积浓度70%），在75℃回流提取1.5h，过滤，滤液减压蒸馏除乙醇，得醇提产物二；
（4）将醇提产物一、二和水提产物合并，微滤膜（0.1～1µm）过滤，然后减压浓缩至相对密度为1.08～1.15，即得所述中药组合物。
其余与实施例5相同。
实施例7
本实施例提供了一种本实施例提供了一种治疗肺癌的中药组合物，包括以下原料：灵芝30克、北沙参20克、紫河车15克、丹参12克、夏枯草24克、蒲公英30克、桔梗14克、制杏仁14克、鱼腥草20克、人工牛黄8克、（制）水蛭13克、炙鳖甲18克、（制）虻虫10克、百部14克、半枝莲15克以及甘草7克。
本发明还提供了所述治疗肺癌的中药组合物的制备方法，具体包括如下步骤：将所有药材洗净，然后将含挥发油的药材（北沙参、鱼腥草）和其他药材分开干燥，含挥发油的药材的干燥温度为70℃，其他药材的干燥温度为90℃，其他药材粉碎、过筛（40～60目）后，与干燥后的含挥发油的药材一起回流提取。
本实施例还提供了一种多孔淀粉，其在含挥发油的药材干燥时加入，其加入量为含挥发油的药材质量的6%，多孔淀粉的制备方法包括以下步骤：
S1、将烯丙基磺酸钠与10倍量甲苯、引发剂（偶氮二异庚腈，引发剂加入量为反应原料质量的0.4%）混合均匀，在干燥、70℃下滴入丙烯酸酐，滴完后反应3h，得聚合物，其中烯丙基磺酸钠与丙烯酸酐的摩尔比为1：1.4；
S2、按质量比1：0.1将淀粉与步骤S1得到的聚合物置于混合机中混匀，通过干法酯化淀粉，反应温度为75℃，反应时间为4h，搅拌速度为1000r/min，得酯化淀粉；
S3、将多孔陶瓷粉（0.1mm）置于阴离子表面活性剂（木质素磺酸钠）水溶液中浸渍2h，挥干水分后抽真空，然后置于质量比为1：1的α-淀粉酶与糖化酶的混合酶中分散2h，得载酶陶瓷粉，其中，多孔陶瓷粉、阴离子表面活性剂与混合酶的质量比为1：0.1：0.3，混合酶的用量为酯化淀粉质量的2%；
S4、将步骤S2得到的酯化淀粉与10倍量水混合，调PH至6，然后加入载酶陶瓷粉，混匀后在60℃酶解反应2h，加入混合酶质量8倍的氢氧化钠溶液（质量分数4%）终止反应，然后过滤除去多孔陶瓷粉，滤液离心分离，得沉淀；
S5、将步骤S4得到的沉淀中继续加入氢氧化钠溶液（质量分数40%，加入量为沉淀质量的40%），在90℃搅拌反应40min，然后过滤、干燥，即得多孔淀粉。
本实施例还提供了一种吸附微球，所述吸附微球在其他药材粉碎后加入并混合，吸附微球的加入量占其他药材质量的6%，吸附微球的制备方法包括以下步骤：
A、将葡萄糖与去离子水混合均匀制成葡萄糖溶液（浓度为12g/100mL），将葡萄糖溶液置于密封反应釜中，加入葡萄糖质量4倍的蒙脱石粉（20µm），用氮气排除反应釜内空气后，升温至200℃，保温反应5h，反应结束后过滤反应产物，使用丙酮和去离子水反复冲洗，干燥即得蒙脱石复合炭微球；
B、按质量比为1：0.14：0.08：6，将海藻酸钠、聚乙二醇、交联羧甲基纤维素钠与水混合配成膜材料液，然后将膜材料液喷涂（喷涂量为蒙脱石复合炭微球质量的8%）到蒙脱石复合炭微球表面，喷涂后的蒙脱石复合炭微球浸入氯化钙溶液（3%质量分数）中，待微球表面成膜后，过滤除去溶液，得到的产品依次用无水乙醇、清水洗涤，烘干，即得吸附微球。
回流提取方法具体包括以下步骤：
（1）将粉碎过筛后的药材中加入20倍质量的乙醇水溶液（体积浓度80%），在80℃回流提取3次，每次2h，过滤，得到的滤渣一备用，合并滤液，减压蒸馏除乙醇，得醇提产物一；
（2）往步骤（1）得到的滤渣一中再加入30倍质量的水煎煮1h，过滤，得到的滤渣二备用，合并滤液，即得水提产物；
（3）往步骤（2）得到的滤渣二中再加入20倍质量的乙醇水溶液（体积浓度80%），在80℃回流提取1h，过滤，滤液减压蒸馏除乙醇，得醇提产物二；
（4）将醇提产物一、二和水提产物合并，微滤膜（0.1～1µm）过滤，然后减压浓缩至相对密度为1.08～1.15，即得所述中药组合物。
其余与实施例5相同。
对比例1
本对比例与实施例5的区别在于，中药组合物中不包括灵芝。
对比例2
本对比例与实施例5的区别在于，中药组合物中不包括北沙参。
对比例3
本对比例与实施例5的区别在于，中药组合物中不包括紫河车。
对比例4
本对比例与实施例5的区别在于，中药组合物的制备方法中，回流提取方法只包括步骤（1）。
对比例5
本对比例与实施例5的区别在于，中药组合物的制备方法中，回流提取方法只包括步骤（2）。
对比例6
本对比例与实施例5的区别在于，中药组合物的制备方法中，回流提取方法只包括步骤（1）、（2）。
对比例7
本对比例与实施例5的区别在于，中药组合物的制备方法中，回流提取方法只包括步骤（2）、（3）。
对比例8
本对比例与实施例6的区别在于，多孔淀粉的制备方法不包括步骤S1，步骤S2直接采用丙烯酸酐干法酯化淀粉。
对比例9
本对比例与实施例6的区别在于，直接采用淀粉原料酶解制备多孔淀粉，不对淀粉进行酯化，此时多孔淀粉的制备方法不包括步骤S1和S2。
对比例10
本对比例与实施例6的区别在于，多孔淀粉的制备方法不包括步骤S3，此时步骤S4为：将步骤S2得到的酯化淀粉与水混合，调PH至6，然后加入α-淀粉酶与糖化酶的混合酶，混匀后在55℃酶解反应1.5h，加入混合酶质量6倍的氢氧化钠溶液终止反应，然后过滤除去多孔陶瓷粉，滤液离心分离，得沉淀。
对比例11
本对比例与实施例6的区别在于，多孔淀粉的制备方法步骤S3中的多孔陶瓷粉不采用表面活性剂水溶液浸渍，此时步骤S3为：将多孔陶瓷粉置于质量比为1：0.8的α-淀粉酶与糖化酶的混合酶中分散1.5h，得载酶陶瓷粉。
对比例12
本对比例与实施例7的区别在于，吸附微球的制备方法不包括步骤B。
对比例13
本对比例与实施例7的区别在于，吸附微球的制备方法步骤B中不加入蒙脱石粉。
对比例14
本对比例与实施例7的区别在于，吸附微球的制备方法不包括步骤A，此时步骤B中将膜材料液喷涂到蒙脱石粉表面。
对比例15
本对比例与实施例7的区别在于，吸附微球的制备方法步骤B中，膜材料液不包括交联羧甲基纤维素钠。
一、本发明中药组合物的抗肺癌效果实验
1、体外细胞活性试验
细胞株：A549肺癌细胞。
药品：实施例1～7以及对比例1～7制得的中药组合物。
取对数生长期A549细胞，用含10% 胎牛血清的RPMI-1640 培养液配成5×104个/mL的单细胞悬液，然后每孔100 μL接种于96 孔板中。设置给药组14组以及阴性对照组1组。24h后给药组中加RPMI-1640 培养液和药品（实施例1～7以及对比例1～7制得的中药组合物），按照生药浓度为5mg/mL设置，阴性对照组加入不含药品的RPMI-1640 培养液，每组设5个平行孔，置于37℃、5% CO2培养箱中培养36 h，每孔加入MTT 液10 μL，培养3 h，弃去每孔中的液体，每孔加DMSO 100 μL，振荡10 min 后置于570 nm（检测波长）酶联免疫检测仪测定OD 值，计算细胞生长抑制率：细胞生长抑制率=（阴性对照组OD 均值 - 给药组OD 均值）/ 阴性对照组OD 均值×100%。每组的生长抑制率取5个平行组的平均值，结果见下表1。
表1
| 试验分组 | 生长抑制率，% |
| 阴性对照组 | — |
| 实施例1 | 70.6 |
| 实施例2 | 73.8 |
| 实施例3 | 78.3 |
| 实施例4 | 79.4 |
| 实施例5 | 84.5 |
| 实施例6 | 85.1 |
| 实施例7 | 84.7 |
| 对比例1 | 74.8 |
| 对比例2 | 76.5 |
| 对比例3 | 78.3 |
| 对比例4 | 71.3 |
| 对比例5 | 78.6 |
| 对比例6 | 80.1 |
| 对比例7 | 79.4 |
2、体内抗肿瘤试验
瘤株：Lewis 小鼠肺癌细胞。
动物：C57BL/6 小鼠，雄性，鼠龄5～7周，20～24g。
药品：实施例1～7以及对比例1～7制得的中药组合物。
将体外培养的Lewis 小鼠肺癌细胞，消化重悬成单细胞悬液，用灭菌PBS 制备成细胞悬液调节细胞密度至8×106 个/mL。迅速接种0.2 mL 细胞悬液于每只C57BL/6 小鼠右腋部皮下。次日给接种Lewis 细胞后的C57BL/6 小鼠称重（剔除体重过轻或过重小鼠），随机分为生理盐水阴性对照组和14个给药组（实施例1～7以及对比例1～7制得的中药组合物），每组5只小鼠。
按10g 生药/kg/d剂量分别连续给药14d，阴性对照组灌胃给予生理盐水，每日0.4mL/ 次。次日小鼠称体重后处死，剥离瘤块，称量，按下式计算抑瘤率：抑瘤率(% ) =（阴性对照组平均瘤重量- 给药组平均瘤重量）/阴性对照组平均瘤重量×100%。每组的抑瘤率取5个平行组的平均值，结果见下表2。
表2
| 试验分组 | 抑瘤率，% |
| 生理盐水阴性对照组 | — |
| 实施例1 | 54.3 |
| 实施例2 | 56.1 |
| 实施例3 | 58.2 |
| 实施例4 | 59.4 |
| 实施例5 | 64.2 |
| 实施例6 | 65.0 |
| 实施例7 | 64.5 |
| 对比例1 | 57.7 |
| 对比例2 | 58.3 |
| 对比例3 | 58.8 |
| 对比例4 | 55.1 |
| 对比例5 | 58.7 |
| 对比例6 | 60.8 |
| 对比例7 | 59.5 |
由表1、2结果可知，本发明实施例1～7对A549肺癌细胞的体外生长抑制率均达到70%以上，对Lewis 小鼠肺癌细胞的体内抑瘤率均达到70%以上，说明本发明的中药组合物具有良好的治疗肺癌效果。
其中，在实施例1的基础上，实施例2对药材依次进行醇提、水提和再醇提，提高了有效成分的提取，从而提高了药效，治疗肺癌效果提升。在实施例2的基础上，实施例3在含挥发油药材干燥时加入多孔淀粉吸收挥发组分，实施例4在其他药材粉碎时加入吸附微球吸收游离有效成分，两者均降低了药效损失，因此治疗肺癌效果显著提升。
与实施例5相比，对比例1、2、3分别不加灵芝、北沙参和紫河车，结果治疗肺癌效果明显下降。对比例4～7分别改变了回流提取工艺，影响了有效成分的提取，结果治疗肺癌效果也下降。
二、本发明的多孔淀粉的吸附性能及对中药提取得率的影响
以吸油率作为吸附性能指标，测试本发明实施例5～7和对比例8～11制得的多孔淀粉的吸附性能，同时测定其对中药提取得率的影响，结果见下表3。
（1）吸油率测定
称取质量M1的多孔淀粉于容器中，加入充足的菜籽油，于35℃下电磁搅拌3h，置于质量M0的漏斗中抽滤，直至没有油滴滴出，称取漏斗和淀粉总质量M2，按下式计算吸油率：吸油率（%）=（M2- M1- M0）/ M1×100%。
（2）中药提取得率
按下式计算得率：得率（%）=提取物质量/生药材总质量×100%，其中提取物质量即为本发明得到的中药组合物的质量。
表3
| 试验分组 | 吸油率，% | 得率，% |
| 实施例5 | 88.1 | 16.3 |
| 实施例6 | 88.4 | 16.8 |
| 实施例7 | 88.2 | 16.5 |
| 对比例8 | 82.5 | 14.6 |
| 对比例9 | 80.8 | 13.7 |
| 对比例10 | 77.6 | 12.3 |
| 对比例11 | 82.9 | 14.8 |
由表3结果可知，本发明实施例5～7制得的多孔淀粉的吸油率在88%左右，吸附性能较好，能够较好地吸收药材干燥工艺中的挥发组分，因此最终的中药提取率达到16%左右，提高了药效。
与实施例6相比，对比例8～11分别改变了多孔淀粉的制备工艺，结果多孔淀粉的吸油率和中药提取得率均下降。
三、本发明的吸附微球的吸附性能及对中药提取得率的影响
以吸油率作为吸附性能指标，测试本发明实施例5～7和对比例12～15制得的吸附微球的吸附性能，同时测定其对中药提取得率的影响，测试方法同上述第二项，结果见下表4。
表4
| 试验分组 | 吸油率，% | 得率，% |
| 实施例5 | 93.0 | 16.3 |
| 实施例6 | 92.9 | 16.8 |
| 实施例7 | 92.6 | 16.5 |
| 实施例12 | 80.5 | 12.5 |
| 对比例13 | 84.3 | 13.6 |
| 对比例14 | 85.6 | 14.2 |
| 对比例15 | 89.9 | 15.6 |
由表4结果可知，本发明实施例5～7制得的吸附微球的吸油率在92%以上，吸附性能优秀，能够较好地吸收药材粉碎工艺中的药效组分，减少药效损失。
与实施例7相比，对比例12～15分别改变了吸附微球的制备工艺，结果吸附微球的吸油率和中药提取得率均下降。
本发明提供的治疗肺癌的中药组合物，其通过合理的药方搭配，并在含挥发油药材干燥、其他药材粉碎工艺中分别加入多孔淀粉和吸附微球，减少了制备工艺中的成分损失，提高了药效，从而获得明显的治疗肺癌效果
值得说明的是，以上所述仅为本发明的具体实施例而已，并不用于限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所做的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (10)
1.一种治疗肺癌的中药组合物，其特征在于：以质量份数计包括以下原料：灵芝20～30份、北沙参10～20份、紫河车10～15份、丹参8～12份、夏枯草16～24份、蒲公英20～30份、桔梗10～14份、制杏仁10～14份、鱼腥草15～20份、人工牛黄3～8份、水蛭7～13份、炙鳖甲12～18份、虻虫6～10份、百部10～14份、半枝莲10～15份以及甘草3～7份。
2.一种根据权利要求1所述的治疗肺癌的中药组合物的制备方法，其特征在于：具体包括如下步骤：将所有药材洗净，然后将含挥发油的药材北沙参、鱼腥草，和其他药材分开干燥，其他药材粉碎后，与干燥后的含挥发油的药材一起回流提取。
3.一种用于权利要求2所述的治疗肺癌的中药组合物的制备方法中的多孔淀粉，其特征在于：所述多孔淀粉在含挥发油的药材干燥时加入，其加入量为含挥发油的药材质量的4～6%，所述多孔淀粉的制备方法包括以下步骤：
S1、将烯丙基磺酸钠与甲苯、引发剂混合均匀，在干燥、60～70℃下滴入丙烯酸酐，滴完后反应3～5h，得聚合物；
S2、将淀粉与步骤S1得到的聚合物置于混合机中混匀，通过干法酯化淀粉，反应温度为70～75℃，反应时间为2～4h，搅拌速度为800～1000r/min，得酯化淀粉；
S3、将多孔陶瓷粉置于阴离子表面活性剂水溶液中浸渍1～2h，挥干水分后抽真空，然后置于α-淀粉酶与糖化酶的混合酶中分散1～2h，得载酶陶瓷粉；
S4、将步骤S2得到的酯化淀粉与水混合，调PH至6，然后加入载酶陶瓷粉，混匀后在50～60℃酶解反应1～2h，加入氢氧化钠溶液终止反应，然后过滤除去多孔陶瓷粉，滤液离心分离，得沉淀；
S5、将步骤S4得到的沉淀中继续加入氢氧化钠溶液，在70～90℃搅拌反应20～40min，然后过滤、干燥，即得多孔淀粉。
4.根据权利要求3所述的用于治疗肺癌的中药组合物的制备方法中的多孔淀粉，其特征在于：步骤S1中，烯丙基磺酸钠与丙烯酸酐的摩尔比为1：（1～1.4），引发剂为过氧化苯甲酰/N，N-二甲基苯胺、异丙苯过氧化氢/四乙烯亚胺或者偶氮二异庚腈，引发剂加入量为反应原料质量的0.2～0.4%；步骤S2中，聚合物与淀粉的质量比为（0.04～0.1）：1。
5.根据权利要求3所述的用于治疗肺癌的中药组合物的制备方法中的多孔淀粉，其特征在于：步骤S3中，多孔陶瓷粉、阴离子表面活性剂与混合酶的质量比为1：（0.05～0.1）：（0.1～0.3），阴离子表面活性剂为磺酸盐或者羧酸盐，混合酶的用量为酯化淀粉质量的1～2%，α-淀粉酶与糖化酶的质量比为1：（0.5～1）。
6.根据权利要求3所述的用于治疗肺癌的中药组合物的制备方法中的多孔淀粉，其特征在于：步骤S4中，氢氧化钠溶液的加入量为混合酶质量的4～8倍，步骤S5中，氢氧化钠溶液的加入量为沉淀质量的20～40%。
7.一种用于权利要求2所述的治疗肺癌的中药组合物的制备方法中的吸附微球，其特征在于：所述吸附微球在其他药材粉碎后加入并混合，所述吸附微球的加入量占其他药材质量的3～6%，所述吸附微球的制备方法包括以下步骤：
A、将葡萄糖与去离子水混合均匀制成葡萄糖溶液，将葡萄糖溶液置于密封反应釜中，加入蒙脱石粉，用氮气排除反应釜内空气后，升温至180～200℃，保温反应3～5h，反应结束后过滤反应产物，干燥即得蒙脱石复合炭微球；
B、将海藻酸钠、聚乙二醇、交联羧甲基纤维素钠与水混合配成膜材料液，然后将膜材料液喷涂到蒙脱石复合炭微球表面，喷涂后的蒙脱石复合炭微球浸入氯化钙溶液中，待微球表面成膜后，过滤除去溶液，得到的产品依次用无水乙醇、清水洗涤，烘干，即得吸附微球。
8.根据权利要求7所述的用于治疗肺癌的中药组合物的制备方法中的吸附微球，其特征在于：步骤A中，制得的葡萄糖溶液的浓度为6～12g/100mL，多孔蒙脱石粉的加入量为葡萄糖质量的2～4倍。
9.根据权利要求7所述的用于治疗肺癌的中药组合物的制备方法中的吸附微球，其特征在于：所述海藻酸钠、聚乙二醇、交联羧甲基纤维素钠与水的质量比为1：（0.08～0.14）：（0.04～0.08）：（4～6），所述膜材料液的喷涂量为蒙脱石复合炭微球质量的4～8%。
10.一种根据权利要求1～9任一所述的治疗肺癌的中药组合物的制备方法中的回流提取方法，其特征在于：具体包括以下步骤：
（1）将粉碎过筛后的药材中加入乙醇水溶液，回流提取2～3次，每次2～4h，过滤，得到的滤渣一备用，合并滤液，减压蒸馏除乙醇，得醇提产物一；
（2）往步骤（1）得到的滤渣一中再加入水煎煮1～2次，每次1～2h，过滤，得到的滤渣二备用，合并滤液，即得水提产物；
（3）往步骤（2）得到的滤渣二中再加入乙醇水溶液，回流提取1～2h，过滤，滤液减压蒸馏除乙醇，得醇提产物二；
（4）将醇提产物一、二和水提产物合并，微滤膜过滤，然后减压浓缩至相对密度为1.08～1.15，即得所述中药组合物。
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| CN1628709A (zh) * | 2003-12-18 | 2005-06-22 | 于志朋 | 益肺散结饮制作的方法 |
| CN103070321A (zh) * | 2013-02-04 | 2013-05-01 | 高健 | 一种微囊化缓释复合尿素饲料的制备方法 |
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Non-Patent Citations (1)
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|---|
| 安洪欣;: "多孔淀粉的研究和应用", 佳木斯大学学报(自然科学版), no. 02, pages 262 - 264 * |
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