CN116098846A - 一种具有舒缓修护功效的龙胆组合物及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了一种具有舒缓修护功效的龙胆组合物及其制备方法，涉及化妆品制剂领域。该组合物由龙胆根和牡丹根组成，其重量比为1‑2:1‑4，该组合物还包括组分七叶一枝花和/或粉防己。制得的组合物经醇类溶剂提取后得到龙胆组合物提取物，该龙胆组合物和提取物具有良好的抗氧化、抑菌、舒缓效果，应用于制备具有抗氧化、抑菌、舒缓修护功效的化妆品中，可以有效解决皮肤暗沉氧化、细菌增长等问题，为其作为舒缓修护化妆品原料应用提供依据。

Description

一种具有舒缓修护功效的龙胆组合物及其制备方法
技术领域
本发明属于化妆品制剂领域，具体涉及一种具有舒缓修护功效的龙胆组合物及其制备方法。
背景技术
皮肤覆盖于人体表面，与外界环境直接接触，具有保护保护机体免受外界刺激、呼吸等作用。皮肤分表皮和真皮两层，真皮是致密结缔组织，富含弹力纤维和胶原纤维，使皮肤富有弹性和韧性。但是随着年龄的增长，胶原逐步降解，且由于胶原和水分等成分的流失，皮肤失去弹性；再加之外界环境对皮肤的刺激和氧化，最终导致衰老，失去光泽。
部分人的皮肤，由于天生敏感、或由于外界环境和刺激性化妆品的作用，清洁不到位等，导致皮肤屏障受损，严重者皮肤过敏，引发炎症。该类皮肤的主要特点为容易发红，受到刺激后即可产生瘙痒、脱屑甚至烧灼和刺痛等感觉，严重者可产生不良情绪或精神症状。气候变化、空气污染及化妆品种类与成分复杂化，提高了敏感皮肤出现及接受刺激的可能性。
化妆品直接接触皮肤，敏感肌肤人群在选择化妆品时应着重注意成分的舒缓和抗敏功效。龙胆，学名为GentianascabraBunge，其药疗用途历史悠久，龙胆具有多种药理作用和临床应用价值。龙单根提取物蕴含的龙胆苦甙，龙胆二糖和龙胆酸等有效成分，对特异性皮炎和过敏有作用，可抑制刺激，起到抗菌、抗炎的作用。蕴含的齐墩果酸、阿魏酸等成分，对芳香化酶的活化，具有抗衰老、抗氧化的作用；且对表皮细胞胆甾醇的分泌有促进作用，可改善油性粗糙皮肤的状态。
目前，已经有大量研究将龙胆或其提取物应用于化妆品的制备中。比如，中国发明专利CN108743511A公开了一种舒缓过敏皮肤、抗炎、抗刺激的护肤组合物，该组合物中含有龙胆提取物，还包括橙皮苷甲基查尔酮和竹提取物(青皮竹和奎尔帕特赤竹的混合提取物)。中国发明专利CN104622776A公开了一种含中药提取液的化妆品组合物，所述的中药提取物配方由龙胆、牡丹、木香、人参、当归、雪莲花、艾叶、三七、乳香、佩兰、太子参、仙鹤草、玉竹、鹿茸、辛荑、卷柏、芍药、积雪草、广藿香、川芎、茯苓、木香、春黄菊、枸杞多味中草药组成。将该中药提取物应用于中药化妆品中，多重中药协同配合，达到美化外肌与改善内理的双重功效，具有良好的美白祛斑效果。
然而，目前化妆品市场上，即便是声称具有抗过敏、舒缓、抗氧化、抑菌等功效的产品，也存在着效果不佳，或者由于成分复杂而导致的功效拮抗。部分产品即便添加了具有上述功效的成分，但由于有效成分复配作用弱或相互影响，降低了功效，不仅达不到舒缓的效果，范围使皮肤更加敏感脆弱。
本发明以抗氧化、抑菌和抗炎功效为指标，研究龙胆组方的制备工艺，提供一种具有显著舒缓修护功效的龙胆组合物，为其在化妆品中的应用提供依据。
发明内容
本发明针对现有技术存在的问题，提供了一种具有舒缓修护功效的龙胆组合物，采用龙单根与牡丹根复配，得到抗氧化、抑菌、舒缓修护效果最优的龙胆复配组合物，同时提供该组合物的制备方法，将该组合物应用于具有舒缓修护功效的化妆品中，解决皮肤暗沉氧化、细菌增长等问题。
为实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：
首先，一种具有舒缓修护功效的龙胆组合物，由以下成分组成：龙胆根和牡丹根。
优选地，所述龙胆组合物中龙胆根：牡丹根的重量份比例为1-2:1-4。
进一步优选地，所述龙胆组合物，由以下成分组成：龙胆根和牡丹根；组合物中龙胆根：牡丹根的重量份比例为1-2:1-2。
更进一步优选地，所述龙胆组合物，由以下成分组成：龙胆根和牡丹根；组合物中龙胆根：牡丹根的重量份比例为1-2:1。
更进一步优选地，所述龙胆组合物，由以下成分组成：龙胆根和牡丹根；组合物中龙胆根：牡丹根的重量份比例为1:1。
优选地，所述龙胆组合物，还包括组分七叶一枝花；七叶一枝花：组合物中龙胆根：牡丹根的重量份比例为2-4:1-2:1-4。
进一步优选地，所述龙胆组合物，还包括组分七叶一枝花；组合物中七叶一枝花：龙胆根：牡丹根的重量份比例为3-4:1-2:1-2。
更进一步优选地，所述龙胆组合物，还包括组分七叶一枝花；组合物中七叶一枝花：龙胆根：牡丹根的重量份比例为4:1:1。
优选地，所述龙胆组合物，还包括组分粉防己；组合物中粉防己：龙胆根：牡丹根的重量份比例为1-4:1-2:1-2。
进一步优选地，所述龙胆组合物，还包括组分粉防己；组合物中粉防己：龙胆根：牡丹根的重量份比例为2-4:1-2:1。
更进一步优选地，所述龙胆组合物，还包括组分粉防己；组合物中粉防己：龙胆根：牡丹根的重量份比例为4:1:1。
优选地，所述龙胆组合物，还包括组分七叶一枝花和粉防己；组合物中，七叶一枝花：粉防己：龙胆根：牡丹根的重量份比例为1-4:2-4:1-2:1-2。
进一步优选地，所述龙胆组合物，还包括组分七叶一枝花和粉防己；组合物中，七叶一枝花：粉防己：龙胆根：牡丹根的重量份比例为2-4:4:1-2:1-2。
更进一步优选地，所述龙胆组合物，还包括组分七叶一枝花和粉防己；组合物中，七叶一枝花：粉防己：龙胆根：牡丹根的重量份比例为4:4:1-2:1。
更进一步优选地，所述龙胆组合物，还包括组分七叶一枝花和粉防己；组合物中，七叶一枝花：粉防己：龙胆根：牡丹根的重量份比例为4:4:1:1。
然后，本发明提供上述龙胆组合物的提取物的制备方法，包括步骤：取龙胆组合物，按照料液比1:20-60与醇类溶剂混合，于70-95℃下提取1-3h，冷却后精滤，得到组合物提取物。
优选地，所述制备方法中，料液比为1:40-60。
优选地，所述制备方法中，醇类溶剂选自甲醇、乙醇、正丁醇、丁二醇中的至少一种。
进一步优选地，所述醇类溶剂选自乙醇、丁二醇中的至少一种。
更进一步优选地，所述醇类溶剂选自乙醇、1,3-丁二醇、1,2丁二醇中的至少一种。
更进一步优选地，所述醇类溶剂选自乙醇、1,3-丁二醇中的至少一种。
更进一步优选地，所述醇类溶剂为1,3-丁二醇。
优选地，所述制备方法中，所述醇类溶剂的浓度为20-50％。
进一步优选地，所述醇类溶剂的浓度为25-40％。
更进一步优选地，所述醇类溶剂的浓度为30％。
优选地，所述制备方法中，提取的温度为80-90℃，提取时间为1.5-2.5h。
进一步优选地，所述提取的温度为90℃，提取时间为2h。
最后，本发明提供上述龙胆组合物在制备具有抗氧化、抑菌、抗炎、调控抗菌肽或/和舒缓修护作用的化妆品、日化用品中的应用。
优选地，所述化妆品、日化用品包括修护霜、洗面奶、乳液、护肤精华、爽肤水、面霜、防晒霜、防晒喷雾、防晒乳、面膜、护手霜、护发素、身体乳、沐浴露。
相对于现有技术，本发明具有以下有益效果：
1、本发明将龙单根、牡丹根进行复配，制得组合物，组合物还包括七叶一枝花或/和粉防己，各组分搭配合理，组合物具有抗氧化、抑菌和舒缓修护皮肤刺激的作用。
2、本发明利用醇类溶剂对组合物的活性成分进行提取，在合适的加热条件下，使活性成分大量被提取出，且最大限度的保留抗氧化活性、抑菌活性，不刺激皮肤。
3、本发明首次将该复配的组合物应用于制备具有抗氧化、抑菌、调控抗菌肽和/或舒缓修护作用的化妆品、日化用品中，为化妆品、日化用品提供了一种高效的组合物原料。
附图说明
图1是本发明龙胆组合物提取物的HPLC检测图。
具体实施方式
以下非限制性实施例可以使本领域的普通技术人员更全面的理解本发明，但不以任何方式限制本发明。下述内容仅仅是对本申请要求保护的范围的示例性说明，本领域技术人员可以根据所公开的内容对本申请的发明做出多种改变和修饰，而其也应当属于本申请要求保护的范围之中。
下面以具体实施例的方式对本发明作进一步的说明。本发明实施例中所使用的各种化学试剂如无特殊说明均通过常规商业途径获得。
实施例1
按照七叶一枝花：粉防己：龙胆根：牡丹根皮＝4：2：1：1，分别称取药材共2g于三口烧瓶中，按照料液比组合物药材：30％的1,3-丁二醇＝1：50，加入30％的1,3-丁二醇(1,3-丁二醇：去离子水＝30％：70％)100g，90℃条件下热回流提取2h，冷却后精滤，得到组合物提取物1。
实施例2
按照七叶一枝花：粉防己：龙胆根：牡丹根皮＝4：0：1：1，分别称取药材共2g于三口烧瓶中，按照料液比组合物药材：30％的1,3-丁二醇＝1：50，加入30％的1,3-丁二醇(1，3-丁二醇：去离子水＝30％：70％)100g，90℃条件下热回流提取2h，冷却后精滤，得到组合物提取物2。
实施例3
按照七叶一枝花：粉防己：龙胆根：牡丹根皮＝4：4：1：1，分别称取药材共2g于三口烧瓶中，按照料液比组合物药材：30％的1,3-丁二醇＝1：50，加入30％的1,3-丁二醇(1,3-丁二醇：去离子水＝30％：70％)100g，90℃条件下热回流提取2h，冷却后精滤，得到组合物提取物3。
实施例4
按照七叶一枝花：粉防己：龙胆根：牡丹根皮＝4：2：1：2，分别称取药材共2g于三口烧瓶中，按照料液比组合物药材：30％的1,3-丁二醇＝1：50，加入30％的1,3-丁二醇(1,3-丁二醇：去离子水＝30％：70％)100g，90℃条件下热回流提取2h，冷却后精滤，得到组合物提取物4。
实施例5
按照七叶一枝花：粉防己：龙胆根：牡丹根皮＝0：0：1：1，分别称取药材共2g于三口烧瓶中，按照料液比组合物药材：30％的1,3-丁二醇＝1：50，加入30％的1,3-丁二醇(1,3-丁二醇：去离子水＝30％：70％)100g，90℃条件下热回流提取2h，冷却后精滤，得到组合物提取物5。
实施例6
按照七叶一枝花：粉防己：龙胆根：牡丹根皮＝0：0：2：1，分别称取药材共2g于三口烧瓶中，按照料液比组合物药材：30％的1,3-丁二醇＝1：50，加入30％的1,3-丁二醇(1,3-丁二醇：去离子水＝30％：70％)100g，90℃条件下热回流提取2h，冷却后精滤，得到组合物提取物6。
实施例7
按照七叶一枝花：粉防己：龙胆根：牡丹根皮＝0：0：2：1.5，分别称取药材共2g于三口烧瓶中，按照料液比组合物药材：30％的1,3-丁二醇＝1：50，加入30％的1,3-丁二醇(1,3-丁二醇：去离子水＝30％：70％)100g，90℃条件下热回流提取2h，冷却后精滤，得到组合物提取物7。
实施例8
按照七叶一枝花：粉防己：龙胆根：牡丹根皮＝4：0：2：1，分别称取药材共2g于三口烧瓶中，按照料液比组合物药材：30％的1,3-丁二醇＝1：50，加入30％的1,3-丁二醇(1,3-丁二醇：去离子水＝30％：70％)100g，90℃条件下热回流提取2h，冷却后精滤，得到组合物提取物8。
实施例9
按照七叶一枝花：粉防己：龙胆根：牡丹根皮＝0：4：2：1，分别称取药材共2g于三口烧瓶中，按照料液比组合物药材：30％的1,3-丁二醇＝1：50，加入30％的1,3-丁二醇(1,3-丁二醇：去离子水＝30％：70％)100g，90℃条件下热回流提取2h，冷却后精滤，得到组合物提取物9。
实施例10
按照七叶一枝花：粉防己：龙胆根：牡丹根皮＝1：4：1：2，分别称取药材共2g于三口烧瓶中，按照料液比组合物药材：30％的1,3-丁二醇＝1：50，加入30％的1,3-丁二醇(1,3-丁二醇：去离子水＝30％：70％)100g，90℃条件下热回流提取2h，冷却后精滤，得到组合物提取物10。
实施例11
与实施例5不同的是，提取方法中，所用的醇类溶剂为乙醇。
组合物成分和其余方法参数均与实施例5相同，得到组合物提取物11。
对比例1
按照七叶一枝花：粉防己：龙胆根：牡丹根皮＝4：2：1：0，分别称取药材共2g于三口烧瓶中，按照料液比组合物药材：30％的1,3-丁二醇＝1：50，加入30％的1,3-丁二醇(1,3-丁二醇：去离子水＝30％：70％)100g，90℃条件下热回流提取2h，冷却后精滤，得到组合物提取物12。
对比例2
按照七叶一枝花：粉防己：龙胆根：牡丹根皮＝2：1：0：0，分别称取药材共2g于三口烧瓶中，按照料液比组合物药材：30％的1,3-丁二醇＝1：50，加入30％的1,3-丁二醇(1,3-丁二醇：去离子水＝30％：70％)100g，90℃条件下热回流提取2h，冷却后精滤，得到组合物提取物13。
对比例3
与实施例5不同的是，提取方法的不同，提取溶剂为水。
组合物成分和其余方法参数均与实施例5相同，得到组合物提取物14。
试验1DPPH自由基抑制实验，检测组合物提取物的抗氧化功
(1)DPPH乙醇溶液的配置：
称取20mgDPPH，加入无水乙醇溶解并定容于250mL容量瓶中，DPPH浓度配制为2×10-4mol/L；0-4℃下避光保存，现配现用，4h内有效。阳性对照选用维生素C。
(2)待测液的配置：
取提取物1-14用无水乙醇配制得10％、5％、1％浓度的待测溶液。
(3)实验步骤：
按表1试剂配比表加入各试剂。
(3.1)取1mL的待测液与1mL的2×10-4mol/L的DPPH溶液混匀(A管)；
(3.2)取1mL的溶剂与1mL的2×10-4mol/L的DPPH溶液混匀(B管)；
(3.3)取1mL的溶剂与1mL的待测液混匀(C管)；
(3.4)避光反应30min后，在517nm下测A、B、C管吸光度值。
表1
编号 DPPH溶液 溶剂 待测液 总体积
A 1mL —— 1mL 2mL
B 1mL 1mL —— 2mL
C —— 1mL 1mL 2mL
(4)DPPH自由基抑制率计算公式：DPPH抑制率(％)＝(B+C-A)/B。
(5)DPPH自由基抑制率检测结果，表2为组合物提取物1-14对DPPH的抑制率。
表2
Figure BDA0004146817140000081
Figure BDA0004146817140000091
结果显示，组合物提取物能够显著抑制DPPH自由基，且组合物提取物5抑制作用最显著，具有显著抗氧化功效。
试验2COX-2体外抑制实验，检测组合物提取物的抗炎功效
将组合物提取物样品用DMSO稀释至待测浓度(3.0％、0.50％)。用COX-2试剂盒测试不同样品对COX-2的抑制率，具体操作根据厂家提供的使用说明。
计算每个样品孔和空白对照孔的平均荧光值，可分别记录为RFU空白对照、RFU100％酶活性对照、RFU阳性抑制剂对照和RFU样品。RFU，Relative Fluorescence Unit。计算每个样品的抑制百分率。计算公式如下：
抑制率(％)＝(RFU100％酶活性对照-RFU样品)/(RFU100％酶活性对照-RFU空白对照)×100％。组合物提取物对COX-2抑制率检测结果见表3。
表3
Figure BDA0004146817140000092
Figure BDA0004146817140000101
结果显示，组合物提取物对COX-2具有抑制作用，且组合物提取物5抑制作用最显著，具有显著抗炎功效。
试验3痤疮丙酸杆菌抑制实验，检测组合物提取物的抑菌功效
将痤疮丙酸杆菌(OD600＝0.5)用新鲜培养基稀释160倍。无菌96孔培养板中，试验孔中每孔加入100μL稀释的菌悬液，再加入100μL不同浓度的样品，100μL不同浓度的样品+100μLLB培养基作为对照组，以不加P.acnes的200μLLB肉汤培养基作为空白对照，100μL稀释的菌悬液+100μLLB肉汤培养基作为阴性对照，以100μL稀释的菌悬液+100μL，200μg/mL青霉素钠做阳性对照，各做3个复孔。将无菌96孔培养板置于37℃培养箱中。培养12h后，在600nm处，测其吸光度。
抑制率计算公式为：
阳性抑制率(％)＝[1-(阳性-空白)/(阴性-空白)]×100％；
样品抑制率(％)＝[1-(样品-对照)/(阴性-空白)]×100％。
组合物提取物对痤疮丙酸杆菌抑制率检测结果见表4。
表4
Figure BDA0004146817140000102
Figure BDA0004146817140000111
结果显示，组合物提取物对痤疮丙酸杆菌具有抑制作用，且组合物提取物5抑制作用最显著，具有显著抑菌功效。
试验4痤疮丙酸杆菌诱导HaCaT细胞模型，检测组合物提取物对IL-1β的影响，研究其抗炎作用
(1)配制样品培养基：根据CCK-8细胞毒性检测结果，将样品用无血清培养基稀释至5.0％，2.0％浓度。
(2)痤疮杆菌配制：用复苏3代后的新鲜痤疮杆菌，用离心机离心后，除去上清液，用PBS稀释痤疮杆菌，然后用酶标仪测OD600nm＝0.5(2×108CFU/mL)的菌浓度，现用现配。
(3)铺板：配制细胞浓度2×105cells/mL，96孔板每孔接入200μL细胞液，置于培养箱37℃，5％CO2环境中培养。
(4)当HaCaT细胞生长贴壁后，进行样品孵育和痤疮杆菌刺激(刺激剂量为20μL/孔)。设置空白组、模型组及样品组，按照以下分组：
空白组，不加样品，不加痤疮杆菌刺激。
模型组，不加样品，6h后加20μL的痤疮杆菌刺激。
样品组，加入样品孵育6h后，加20μL的痤疮杆菌刺激。
(5)将96孔板置于培养箱37℃，5％CO2环境中培养24h，收集细胞上清液，进行IL-1β及LL-37含量检测。
4.1组合物提取物对IL-1β含量检测结果见表5。
表5
Figure BDA0004146817140000121
结果显示，组合物提取物对IL-1β含量具有抑制作用，且组合物提取物5抑制作用最显著，具有显著抗炎功效。
4.2组合物提取物对调控抗菌肽LL-37的检测试验结果，见表6。
表6
Figure BDA0004146817140000122
Figure BDA0004146817140000131
结果显示，组合物提取物对抗菌肽LL-37含量具有调控作用，抑制炎症因子后，将抗菌肽调控至正常水平，且组合物提取物5调控作用最显著。
试验5活性成分的含量检测
对组合物提取物中的活性成分龙胆苦苷、丹皮酚的含量进行检测。具体检测条件如下：高效液相色谱定性分析，
色谱柱：ZORBAX SB-C18(4.6mm×250mm，5μm)；
进样量：5μL；
检测波长：254nm；
柱温：未控制；
流动相：A：0.2％乙酸-水溶液，B：甲醇，流动相设置条件如表7所示：
表7
时间min A％ B％ 流速mL/min
0 80 20 1.0
30 80 20 1.0
60 40 60 1.0
80 40 60 1.0
活性成分HPLC检测结果如表8所示：
表8
Figure BDA0004146817140000141
定性分析结果显示，实施例5提取物中龙胆苦苷及丹皮酚峰面积最大，含量最高。对比实施例11，实施例5中的龙胆苦苷提升至其1.82倍，丹皮酚提升至其4.70倍。实施例5显著提升了组合物中龙胆苦苷及丹皮酚的含量。
其中，实施例5的HPLC检测图谱图如图1所示，图1中，数字1代表龙胆苦苷、数字2代表丹皮酚。
以上结果表明，将龙胆根和牡丹根复配，并筛选其最优植物配比，在龙胆根：牡丹根＝1：1比例下，组合物提取物具有最显著抗氧化、抑菌及抗炎作用，具有舒缓功效。本专利首次提供了一种具有舒缓功效的龙胆组方，为其作为舒缓化妆品原料应用提供依据。
最后应当说明的是，以上内容仅用以说明本发明的技术方案，而非对本发明保护范围的限制，本领域的普通技术人员对本发明的技术方案进行的简单修改或者等同替换，均不脱离本发明技术方案的实质和范围。

Claims (10)

1.一种具有舒缓修护功效的龙胆组合物，其特征在于，由以下成分组成：龙胆根和牡丹根。
2.根据权利要求1所述的龙胆组合物，其特征在于，所述龙胆组合物中龙胆根：牡丹根的重量份比例为1-2:1-4。
3.根据权利要求2所述的龙胆组合物，其特征在于，所述龙胆组合物中龙胆根：牡丹根的重量份比例为1-2:1-2。
4.根据权利要求3所述的龙胆组合物，其特征在于，所述龙胆组合物中龙胆根：牡丹根的重量份比例为1:1。
5.根据权利要求1所述的龙胆组合物，其特征在于，所述龙胆组合物还包括组分七叶一枝花；七叶一枝花：龙胆组合物中龙胆根：牡丹根的重量份比例为2-4:1-2:1-4。
6.根据权利要求1所述的龙胆组合物，其特征在于，所述龙胆组合物还包括组分粉防己；龙胆组合物中粉防己：龙胆根：牡丹根的重量份比例为1-4:1-2:1-2。
7.根据权利要求1所述的龙胆组合物，其特征在于，所述龙胆组合物还包括组分七叶一枝花和粉防己；龙胆组合物中，七叶一枝花：粉防己：龙胆根：牡丹根的重量份比例为1-4:2-4:1-2:1-2。
8.权利要求1-7任一项所述的龙胆组合物的制备方法，其特征在于，包括步骤：取龙胆组合物，按照料液比1:20-60与醇类溶剂混合，于70-95℃下提取1-3h，冷却后精滤，得到组合物提取物。
9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于，所述醇类溶剂选自甲醇、乙醇、正丁醇、丁二醇中的至少一种；所述醇类溶剂的浓度为20-50％。
10.权利要求1-7任一项所述的龙胆组合物在制备具有抗氧化、抑菌、抗炎、调控抗菌肽或/和舒缓修护作用的化妆品、日化用品中的应用。
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