CN116036080B - 吡喃并吡啶酮类化合物在制备治疗肝癌药物中的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明属于化药合成领域，具体涉及吡喃并吡啶酮类化合物在制备治疗肝癌药物中的应用。该吡喃并吡啶酮类化合物结构如式I或式II所示，由2，4‑二羟基‑6‑甲基吡啶与柠檬醛反应合成得到中间体，然后与2‑萘硼酸或4‑乙基苯硼酸反应制得。本发明提供了一种吡喃并吡啶酮类化合物，其针对肝癌细胞的IC50可达到8μM以下，为肝癌的药物研发提供了一种新的解决方案。同时，本发明针对性提出了一种硼酸参与的选择性N‑芳基化的Chan‑Lam偶联方法，克服了传统方法所存在的高温、需要使用强碱和昂贵等缺点。

Description

吡喃并吡啶酮类化合物在制备治疗肝癌药物中的应用
技术领域
本发明属于化药合成领域，具体涉及吡喃并吡啶酮类化合物在制备治疗肝癌药物中的应用。
背景技术
肝癌是最常见的恶性肿瘤性疾病，也是全球范围内发病率最高的恶性肿瘤之一。近年来，尽管肝癌的早期诊断技术和治疗水平不断提高，但患者的 5 年生存率仍不理想。因此开展化合物对肝癌 HepG2细胞的体外抑制作用研究，可为开发相关药物奠定研究基础。
发明内容
本发明的目的是解决现有技术的不足，提供一种吡喃并吡啶酮类化合物，其用于HepG2细胞抑制实验中的IC50（μM）可分别达到5.3（式I）和7.4（式II），为肝癌的药物治疗提供了一种新的解决方法，具体采用以下的技术方案：
一种吡喃并吡啶酮类化合物，其结构如式I或式II所示：
Figure SMS_1
式I；/>
Figure SMS_2
式II。
目前，并没有比较好的方法来制备在吡啶环上具有各种取代基的吡喃并吡啶酮类化合物/衍生物。发明人了解到过渡金属催化的C（芳基）-N键形成反应是有机合成中的重要方法，在过去的几年中，多种杂环N-芳基化反应已经得到发展，例如铜催化Ullmann反应，但是该反应存在需要化学计量的铜试剂、温度高、反应时间长、产率低等缺点。类似地，Pd催化的Buchwald-Hartwig偶联反应具有需要高温、强碱和昂贵Pd/配体组合的缺点。发明人针对性提出了一种芳基硼酸参与的选择性N-芳基化的Chan-Lam偶联方法，可以提供在吡啶环上具有多种取代基的吡喃吡啶酮衍生物，进而制备得到了本发明中的上述化合物，其制备方法具备包括以下步骤：
（1）将2，4-二羟基-6-甲基吡啶与柠檬醛进行反应，合成得到中间体2,7-二甲基-2-（4-甲基戊-3-烯-1-基）-2H-吡喃并[3,2-c]吡啶-5（6H）-酮；
（2）然后将所述中间体与2-萘硼酸或4-乙基苯硼酸进行反应，获得所述吡喃并吡啶酮类化合物。
Chan-Lam偶联方法是一类反应的总称，本发明根据吡啶-2（1H）-1酮的N-芳基化/O-芳基化反应的相对自由能的情况，发生了选择性N芳基化反应，如下所示：
Figure SMS_3
。
通过计算发现N-芳基化途径的△G为-0.82 kcal/mol，而O-芳基化途径相关的△G为4.73 kcal/mol。这种差异可能是在吡啶酮选择性N-芳基化的原因。显然，在N-芳基化步骤略微是一个放热过程，而O-芳基化是一个相对吸热过程。这一数据与实验事实相一致，即在研究过程中实施的任何反应中都没有观察到O-芳基化产物。
基于这些实验和其他的研究结果，进而提出了一种针对本发明化合物的制备方法，提出了铜催化N-芳基化与硼酸偶联的机制，如下所示：
Figure SMS_4
。
首先，CuI促进化合物2,7-二甲基-2-（4-甲基戊-3-烯-1-基）-2H-吡喃并[3,2-c]吡啶-5（6H）-酮与硼酸反应生成中间体I，中间体I可通过与碘离子络合转化为Cu（III）体系中间体Ⅱ。在该氧化加成过程之后，由于N原子与苯环之间的相互作用，有利于形成中间体Ⅲ。最后，进行还原消除以形成N-芳基键，催化循环结束。因此，本发明发展了一种高效的铜催化的选择性N-芳基化反应，实现在室温和无配体条件下进行的目的。
优选地，在上述制备方法中，2，4-二羟基-6-甲基吡啶与柠檬醛的摩尔比为1：（1-1.5）。更优选为1:1.2。当投料比小于1:1时，反应不完全，原材料2，4-二羟基-6-甲基吡啶有大量剩余，影响目标产物的分离纯化，当摩尔比大于1:1.5时，柠檬醛有大量剩余，副产物含量增加。
优选地，在上述制备方法中，步骤（1）的反应体系为：水作为溶剂，反应体系不加入催化剂；反应温度为100 ℃-110 ℃。当采用乙酸乙酯、甲醇、乙醇等有机溶剂时，反应产率均低于水作溶剂时反应产率。选择乙酸、甲酸等有机酸作催化剂时，副反应增多，不利于目标化合物的获得。
优选地，在上述制备方法中，步骤（2）的反应体系为：二甲基亚砜作为溶剂；反应温度为20 ℃-40 ℃，碘化亚铜做催化剂，在三乙胺碱性条件下反应。当反应温度低于20 ℃时，通过TLC监测反应速度慢，且目标化合物含量极低。当温度大于40 ℃时，TLC监测反应副反应增多，不利于目标化合物的合成。
优选地，步骤（1）的反应结束后，分别用乙酸乙酯进行三次萃取，合并有机相，采用体积比为5:1的石油醚和乙酸乙酯进行洗脱，获得所述中间体；步骤（2）的反应结束后，分别用乙酸乙酯进行三次萃取，合并有机相，采用体积比为5:1的石油醚和乙酸乙酯进行洗脱，获得所述吡喃并吡啶酮类化合物。
上述吡喃并吡啶酮类化合物应用在制备治疗肝癌药物中时，可以采用药物组合物的形式，除了包括上述吡喃并吡啶酮类化合物，还包括其它药学上可接受的辅剂。所述辅剂可以为溶剂或载体；例如水和油类（花生油、大豆油、矿物油等）。
本发明的有益效果为：本发明提供了一种吡喃并吡啶酮类化合物，其针对肝癌细胞的IC50可达到8 μM以下，为肝癌的药物研发提供了一种新的解决方案。同时，本发明针对性提出了一种芳基硼酸参与的选择性N-芳基化的Chan-Lam偶联方法，可以制备具有多种取代基的吡喃并吡啶酮类化合物，克服了传统方法所存在的高温、需要使用强碱和昂贵等缺点。
附图说明
图1所示为针对肝癌HepG2细胞的细胞周期统计分析结果图；
图2所示为针对肝癌HepG2细胞的Annexin V-EGFP/PI法检测结果的统计分析结果图；
图3所示为针对肝癌HepG2细胞的TUNEL法检测结果的统计分析结果图；
图4所示为针对肝癌HepG2细胞的实时荧光定量PCR检测凋亡相关基因的表达的结果图；
图5所示为针对肝癌HepG2细胞的免疫印迹检测凋亡相关蛋白免疫印迹的结果图；
图6所示为针对肝癌HepG2细胞的免疫印迹检测凋亡相关蛋白表达水平统计的结果图；
图7所示为针对肝癌HepG2细胞的免疫印迹检测凋亡相关基因的表达的结果图；
图8所示为针对肝癌HepG2细胞的免疫印迹检测凋亡相关基因表达水平统计的结果图；
图9所示为式I化合物的13C NMR图谱；
图10所示为式I化合物的1H NMR图谱；
图11所示为式II化合物的13C NMR图谱；
图12所示为式II化合物的1H NMR图谱。
具体实施方式
以下将结合实施例和附图对本发明的构思及产生的技术效果进行清楚、完整的描述，以充分地理解本发明的目的、方案和效果。
实施例1：
一种吡喃并吡啶酮类化合物，其结构如式I所示：
Figure SMS_5
式I。
其制备方法包括以下步骤：
（1）25 mL圆底烧瓶中以投料比1:1.2依次投入2，4-二羟基-6-甲基吡啶与柠檬醛，加入10 mL水作为溶剂，反应体系采用HJ-2A型磁力搅拌反应器充分搅拌；
（2）升温至100℃反应，使体系产生回流12 h，采用TLC监测反应情况，至反应结束后，终止反应；
（3）分别用乙酸乙酯进行三次萃取，合并有机相，采用RE-301型旋转蒸发仪旋干溶剂，20 mm×50mm层析柱过柱，采用石油醚：乙酸乙酯=5:1洗脱获得中间体2，7-二甲基-2-（4-甲基戊-3-烯-1-基）-2H-吡喃并[3,2-c]吡啶-5（6H）-酮；
（4）10 mL圆底烧瓶中以投料比1:1.2依次加入中间体与2-萘硼酸、20% mol 碘化亚铜和2 eqiv（当量）的三乙胺，再加入5 mL二甲基亚砜作溶剂，30 ℃下采用HJ-2A型磁力搅拌反应器充分搅拌反应12 h；TLC监测反应情况，至反应结束，加入水终止反应；
（5）分别用乙酸乙酯进行三次萃取，合并有机相，采用RE-301型旋转蒸发仪旋干溶剂，20 mm×50mm层析柱过柱，石油醚：乙酸乙酯=5:1柱层析分离，获得目标化合物。
采用Bruker-400Hz核磁共振仪和Thermo-QE 高分辨液质联用仪对化合物进行检测，其碳谱和氢谱分别如图9-图10所示，具体结果如下：黄色油状液体，产率70%;1HNMR(400 MHz, CDCl3) δ 7.95 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.92-7.87 (m, 1H), 7.86-7.80(m,1H), 7.68 (s, 1H), 7.56-7.48 (m, 2H), 7.27 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.65 (d, J=10.0 Hz, 1H), 5.85 (s, 1H), 5.33 (d, J = 10.0 Hz, 1H), 5.13 (t, J = 7.2 Hz,1H), 2.13 (q, J = 7.6 Hz, 2H), 1.93 (s, 3H), 1.85-1.76 (m, 1H), 1.69 (s, 3H),1.68-1.64 (m, 1H), 1.62 (s, 3H), 1.44 (s, 3H)。13C NMR (100MHz, CDCl3) δ 162.1,161.3, 146.0, 136.3, 133.6, 133.0, 131.9, 129.6, 128.1,127.8, 127.1, 126.8,126.6, 125.9, 123.9, 123.5, 118.2, 104.4, 100.5, 81.1,41.8, 27.3, 25.7, 22.7,21.7, 17.7。HRMS (ESI):m/z[M+H]+calcd for C25H26NO2:372.1958, found: 372.1954。
实施例2：
一种吡喃并吡啶酮类化合物，其结构如式II所示：
Figure SMS_6
式II。
其制备方法包括以下步骤：
（1）25 mL圆底烧瓶中以投料比1:1.2依次投入2，4-二羟基-6-甲基吡啶与柠檬醛，加入10 mL水作为溶剂，反应体系采用HJ-2A型磁力搅拌反应器充分搅拌；
（2）升温至100℃反应，使体系产生回流12 h，采用TLC监测反应情况，至反应结束后，终止反应；
（3）分别用乙酸乙酯进行三次萃取，合并有机相，采用RE-301型旋转蒸发仪旋干溶剂，20 mm×50mm层析柱过柱，采用石油醚：乙酸乙酯=5:1洗脱获得中间体2，7-二甲基-2-（4-甲基戊-3-烯-1-基）-2H-吡喃并[3,2-c]吡啶-5（6H）-酮；
（4）10 mL圆底烧瓶中以投料比1:1.2依次加入中间体与4-乙基苯硼酸、20% mol碘化亚铜和2 eqiv的三乙胺，再加入5 mL二甲基亚砜作溶剂，30 ℃下采用HJ-2A型磁力搅拌反应器充分搅拌反应12 h；TLC监测反应情况，至反应结束，加入水终止反应；
（5）分别用乙酸乙酯进行三次萃取，合并有机相，采用RE-301型旋转蒸发仪旋干溶剂，20 mm×50mm层析柱过柱，石油醚：乙酸乙酯=5:1柱层析分离，获得目标化合物。
采用Bruker-400Hz核磁共振仪和Thermo-QE 高分辨液质联用仪对化合物进行检测，其碳谱和氢谱分别如图11-图12所示，具体结果如下：黄色油状液体，产率75%；1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 7.32-7.27 (m, 2H), 7.12-7.04 (m,2H), 6.63 (d,J= 10.0 Hz,1H), 5.80 (s, 1H), 5.31 (d,J= 10.0Hz, 1H), 5.15-5.08 (m, 1H), 2.70 (q,J= 7.6Hz, 2H), 2.11 (q,J= 7.6 Hz, 2H), 1.91 (s, 3H), 1.82-1.74 (m, 1H), 1.68 (s,3H), 1.66-1.61 (m,1H), 1.60 (s, 3H), 1.42 (s, 3H), 1.27 (t,J= 7.6 Hz, 3H)。13CNMR (100 MHz, CDCl3) δ 162.1, 161.2, 146.1, 144.6,136.3, 131.8, 129.0, 128.0,123.9, 123.3, 118.3, 104.3, 100.2, 80.9, 41.8,28.5, 27.3, 25.7, 22.7, 21.7,17.7, 15.2。HRMS (ESI):m/z[M+H]+calcd for C23H28NO2:350.2115, found: 350.2111。
对比例1：
一种吡喃并吡啶酮类化合物，其结构如式III所示
Figure SMS_7
式Ⅲ。
其制备方法包括以下步骤：
（1）25 mL圆底烧瓶中以投料比1:1.2依次投入2，4-二羟基-6-甲基吡啶与柠檬醛，加入10 mL水作为溶剂，反应体系采用HJ-2A型磁力搅拌反应器充分搅拌；
（2）升温至100℃反应，使体系产生回流12 h，采用TLC监测反应情况，至反应结束后，终止反应；
（3）分别用乙酸乙酯进行三次萃取，合并有机相，采用RE-301型旋转蒸发仪旋干溶剂，20 mm×50mm层析柱过柱，采用石油醚：乙酸乙酯=5:1洗脱获得中间体2，7-二甲基-2-（4-甲基戊-3-烯-1-基）-2H-吡喃并[3,2-c]吡啶-5（6H）-酮；
（4）10 mL圆底烧瓶中以投料比1:1.2依次加入中间体与4-丁基苯硼酸、20% mol碘化亚铜和2 eqiv的三乙胺，再加入5 mL二甲基亚砜作溶剂，30 ℃下采用HJ-2A型磁力搅拌反应器充分搅拌反应12 h；TLC监测反应情况，至反应结束，加入水终止反应；
（5）分别用乙酸乙酯进行三次萃取，合并有机相，采用RE-301型旋转蒸发仪旋干溶剂，20 mm×50mm层析柱过柱，石油醚：乙酸乙酯=5:1柱层析分离，获得目标化合物。
采用Bruker-400Hz核磁共振仪和Thermo-QE 高分辨液质联用仪对化合物进行检测，化合物的表征结果：黄色油状液体，产率77%；1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ7.30-7.25(m, 2H), 7.09-7.03 (m, 2H), 6.63 (d,J= 10.0 Hz, 1H), 5.80(s, 1H), 5.31 (d,J=10.0 Hz, 1H), 5.11 (m, 1H), 2.69-2.61 (m, 2H),2.11 (q,J= 7.6 Hz, 2H), 1.90(s, 3H), 1.80-1.74 (m, 2H), 1.68 (s, 3H),1.65-1.63 (m, 2H), 1.60 (s, 3H),1.42 (s, 3H), 1.40-1.33 (m, 2H), 0.94 (t,J= 7.2 Hz, 3H)。13C NMR (100 MHz,CDCl3) δ 162.0, 161.2, 146.1, 143.3,136.3, 131.8, 129.5, 127.9, 123.9, 123.3,118.3, 104.3, 100.2, 80.9, 41.8,35.3, 33.3, 27.3, 25.7, 22.7, 22.4, 21.7,17.6, 13.9。HRMS (ESI): m/z [M+H]+calcd forC25H32NO2: 378.2428, found:378.2423。
对比例2：
一种吡喃并吡啶酮类化合物，其结构如式Ⅳ所示
Figure SMS_8
式Ⅳ。
其制备方法包括以下步骤：
（1）25 mL圆底烧瓶中以投料比1:1.2依次投入2，4-二羟基-6-甲基吡啶与柠檬醛，加入10 mL水作为溶剂，反应体系采用HJ-2A型磁力搅拌反应器充分搅拌；
（2）升温至100℃反应，使体系产生回流12 h，采用TLC监测反应情况，至反应结束后，终止反应；
（3）分别用乙酸乙酯进行三次萃取，合并有机相，采用RE-301型旋转蒸发仪旋干溶剂，20 mm×50mm层析柱过柱，采用石油醚：乙酸乙酯=5:1洗脱获得中间体2，7-二甲基-2-（4-甲基戊-3-烯-1-基）-2H-吡喃并[3,2-c]吡啶-5（6H）-酮；
（4）10 mL圆底烧瓶中以投料比1:1.2依次加入中间体与4-乙烯基苯硼酸、20% mol碘化亚铜和2 eqiv的三乙胺，再加入5 mL二甲基亚砜作溶剂，30 ℃下采用HJ-2A型磁力搅拌反应器充分搅拌反应12 h；TLC监测反应情况，至反应结束，加入水终止反应；
（5）分别用乙酸乙酯进行三次萃取，合并有机相，采用RE-301型旋转蒸发仪旋干溶剂，20 mm×50mm层析柱过柱，石油醚：乙酸乙酯=5:1柱层析分离，获得目标化合物。
采用Bruker-400Hz核磁共振仪和Thermo-QE 高分辨液质联用仪对化合物进行检测，化合物的表征结果：黄色油状液体，产率67%；1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ7.54-7.47(m, 2H), 7.16-7.11 (m, 2H), 6.80-6.69 (m, 1H), 6.62 (d,J=10.0 Hz, 1H), 5.84-5.75 (m, 2H), 5.32 (d,J= 10.0 Hz, 2H), 5.11 (t,J= 7.2 Hz, 1H), 2.11 (q,J= 7.6Hz, 2H), 1.92 (s, 3H), 1.82-1.74 (m,1H), 1.68 (s, 3H), 1.66-1.62 (m, 1H),1.60 (s, 3H), 1.42 (s, 3H)。13C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 162.0, 161.3, 145.8,138.1,138.0, 135.9, 131.9, 128.4, 127.3, 123.9, 123.5, 118.2, 115.2, 104.3,100.5,81.0, 41.8, 27.3, 25.7, 22.7, 21.6, 17.7。HRMS (ESI):m/z[M+H]+calcd forC23H26NO2:348.1958, found: 348.1955。
效果实验：
一、抑制率实验
将HepG2细胞悬液以每孔100 μL接种于96孔板中（1×104/孔），孵育过夜。测试化合物用，分别加入含有不同浓度（5μmol/L、10μmol/L、20 μmol/L）的溶液，对照组加入等体积的0.1%的DMSO。分别孵育24 h、48 h、72 h，孵育结束后加入20μL MTT溶液（5 mg/mL），在培养箱中孵育4h。实验结束后，吸弃上清液，加入150 μL DMSO，37℃条件下震荡10 min溶解沉淀。使用酶标仪测定570 nm 处的吸光度OD 值。
具体结果如表1所示。
表1
化合物 IC50（μM）
实施例1 5.3
实施例2 7.4
对比例1 34.2
对比例2 38.0
由表1可知，本发明的具有式I或式II结构的化合物对于HepG2细胞具有很好的抑制活性，而相似结构的化合物并不是都具备这种抑制活性。
二、机制/机理研究实验
（1）实施例1制得的化合物抑制肝癌HepG2细胞周期进程
采用不同浓度的实施例1制得的化合物（1 μmol/L、5 μmol/L和10μmol/L）处理肝癌细胞HepG2细胞系24h，细胞周期统计分析如图1所示。与对照相比，G0/G1期细胞比例随着实施例1制得的化合物浓度增加逐渐减少，而S期和G2期细胞比例却逐渐增加，并且实施例1制得的化合物浓度越大趋势越明显，表明细胞阻滞出现在S期。
（2）实施例1制得的化合物促进肝癌HepG2细胞凋亡
同样，不同浓度的实施例1制得的化合物（1 μmol/L、5 μmol/L和10μmol/L ）作用于人肝癌细胞HepG2细胞系24 h后，采用Annexin V-EGFP/PI法检测细胞凋亡率。检测了三次，细胞凋亡统计分析结果如图2所示。不同浓度的实施例1制得的化合物（1 μmol/L、5 μmol/L和10μmol/L）分别诱导了7.29%、15.64%和20.81%的HepG2细胞发生早期凋亡，均高于未给药对照组的3.38%，呈显著差异（P<0.001）。实施例1制得的化合物对HepG2细胞系的凋亡具有促进作用，并呈现出剂量效应。
为了进一步确定实施例1制得的化合物（1 μmol/L、5 μmol/L和10μmol/L）作用人肝癌细胞HepG2细胞系24 h 后导致的凋亡效果，又利用TUNEL法检测细胞凋亡。如图3显示，对照组的凋亡率为3.50%，当处理浓度为1 μmol/L时，细胞的凋亡率上升到7.63%，5 μmol/L处理浓度时细胞的凋亡率为15.37%，当处理浓度达到10 μmol/L时，凋亡率为20.90%。结果与Annexin V-EGFP/PI法总体一致，表明实施例1制得的化合物对肝癌HepG2细胞具有显著的促凋亡作用。
（3）实施例1制得的化合物抑制肝癌HepG2细胞增殖、促进细胞凋亡机制分析
以不同浓度的实施例1制得的化合物 (1 μmol/L、5 μmol/L和10 μmol/L )处理肝癌HepG2细胞系24h后，实时荧光定量PCR法检测BAX、BCL2、细胞色素c（cytC）mRNA表达水平的变化。如图4所示，当实施例1制得的化合物浓度为1 μmol/L、5 μmol/L和10μmol/L时，BAX的mRNA 相对表达水平分别为1.76，3.68和4.80，细胞色素c的mRNA 相对表达水平分别为1.78，3.62和5.48，均高于对照组，且上升趋势随浓度增加而增加。而BCL2的mRNA 相对表达水平分别为0.82，0.44和0.31，均低于对照组，且下降趋势随浓度增加而增加。
以不同浓度的实施例1制得的化合物 (1 μmol/L、5 μmol/L和10μmol/L )处理肝癌HepG2细胞系24 h后，通过免疫印迹法检测BAX、BCL2、和Cleaved-Caspase3的蛋白水平变化（图5和图6）。结果显示，处理后的HepG2细胞BAX蛋白表达水平分别为1.42，2.39和3.04，Cleavedcaspase-3蛋白表达水平分别为1.51，2.05和2.19，均呈现上升趋势。而BCL2的蛋白表达水平分别为0.57，0.43和0.22，呈现下降趋势，并且呈现明显的剂量依赖性。
通过免疫印迹分析不同浓度的实施例1制得的化合物(1 μmol/L、5 μmol/L和10 μmol/L)处理HepG2细胞24h后，分析MAPK和PI3K/AKT信号通路关键蛋白的变化情况（图7-图8）。与对照组相比，实施例1制得的化合物处理后的HepG2细胞，PI3K、AKT、ERK1/2的表达水平无显著性变化，p-PI3K、p-AKT和p-ERK表达水平呈降低的趋势，表明实施例1制得的化合物可能通过抑制MAPK和PI3K/AKT信号通路抑制细胞增殖。
以上所述，只是本发明的较佳实施例而已，本发明并不局限于上述实施方式，只要其以相同的手段达到本发明的技术效果，都应属于本发明的保护范围。在本发明的保护范围内其技术方案和/或实施方式可以有各种不同的修改和变化。

Claims (8)

1.吡喃并吡啶酮类化合物在制备治疗肝癌药物中的应用，其特征在于，所述吡喃并吡啶酮类化合物的结构如式I或式II所示：
Figure QLYQS_1
式I；/>
Figure QLYQS_2
式II。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述吡喃并吡啶酮类化合物的制备方法包括以下步骤：
（1）将2，4-二羟基-6-甲基吡啶与柠檬醛进行反应，合成得到中间体2,7-二甲基-2-（4-甲基戊-3-烯-1-基）-2H-吡喃并[3,2-c]吡啶-5（6H）-酮；
（2）然后将所述中间体与2-萘硼酸或4-乙基苯硼酸进行反应，获得所述吡喃并吡啶酮类化合物。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，2，4-二羟基-6-甲基吡啶与柠檬醛的摩尔比为1：（1-1.5）。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，2，4-二羟基-6-甲基吡啶与柠檬醛的摩尔比为1:1.2。
5.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，中间体与2-萘硼酸或4-乙基苯硼酸的摩尔比为1:（1-1.2）。
6.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，步骤（1）的反应体系为：水作为溶剂，反应温度为100 ℃-110 ℃。
7.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，步骤（2）的反应体系为：二甲基亚砜作为溶剂；反应温度为20 ℃-40 ℃，碘化亚铜作催化剂，在三乙胺碱性条件下反应。
8.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，步骤（1）的反应结束后，分别用乙酸乙酯进行三次萃取，合并有机相，采用体积比为5:1的石油醚和乙酸乙酯进行洗脱，获得所述中间体；步骤（2）的反应结束后，分别用乙酸乙酯进行三次萃取，合并有机相，采用体积比为5:1的石油醚和乙酸乙酯进行洗脱，获得所述吡喃并吡啶酮类化合物。
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