CN116019965B - 一种胶原蛋白薄膜敷料及其制备方法 - Google Patents
一种胶原蛋白薄膜敷料及其制备方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明适用于敷料技术领域,提供了一种胶原蛋白薄膜敷料及其制备方法,包括原料:Ⅲ型重组人源化胶原蛋白、改性壳聚糖、油相载体、多元醇、防腐剂、改性大豆分离蛋白、芦荟发酵液、改性透明质酸、中药提取物、水,本发明所提供的胶原蛋白薄膜敷料通过加入Ⅲ型重组人源化胶原蛋白,具有良好生物功能,有助于促进人体创伤愈合、组织修复;通过加入改性壳聚糖,具有丰富的孔结构,比表面积大,与其他组分充分混合、交联,形成稳定的三维凝胶网络,能够提高薄膜敷料的力学性能以及黏附性能,通过加入改性分离蛋白,提高了大豆分离蛋白的溶解性、凝胶性和乳化性,与改性壳聚糖协同作用,进一步提高薄膜敷料的力学性能。
Description
技术领域
本发明属于敷料技术领域,尤其涉及一种胶原蛋白薄膜敷料及其制备方法。
背景技术
胶原蛋白是一种优良的天然高分子物质,是细胞外基质的主要成分,来源广泛,主要分布在皮肤、骨骼、肌腱、血管等多个部位,具有良好的生物相容性和生物可降解性。胶原蛋白具有独特的三螺旋结构,不仅对组织和器官起支撑和保护作用,而且还参与一系列的生物过程,包括细胞的粘附、迁移和分化以及组织再生;
敷料是一类用于各种创伤、创口表面进行临时覆盖的医用材料,可用于创面渗出液的吸收,具有止血、促进创面愈合的作用,使创口免遭细菌感染及其他外来因素的影响;
目前市场上大部分伤口敷料对于伤口的附着能力不佳,容易脱落,脱落后容易受到细菌的感染,导致宿主组织过度和长时间的炎症反应,影响伤口的愈合。
发明内容
本发明提供一种胶原蛋白薄膜敷料及其制备方法,旨在解决上述的问题。
本发明是这样实现的,一种胶原蛋白薄膜敷料,包括以下按照重量份的原料:Ⅲ型重组人源化胶原蛋白3-7份、改性壳聚糖1-3份、油相载体2-4份、多元醇1-3份、防腐剂0.1-0.3份、改性大豆分离蛋白2.5-4.5份、芦荟发酵液3-5份、改性透明质酸4-6份、中药提取物1.5-2.5份、水40-50份。
优选地,包括以下按照重量份的原料:Ⅲ型重组人源化胶原蛋白4-6份、改性壳聚糖1.5-2.5份、油相载体2.5-3.5份、多元醇1.5-2.5份、防腐剂0.15-0.25份、改性大豆分离蛋白3-4份、芦荟发酵液3.5-4.5份、改性透明质酸4.5-5.5份、中药提取物1.8-2.2份、水43-47份。
优选地,包括以下按照重量份的原料:Ⅲ型重组人源化胶原蛋白5份、改性壳聚糖2份、油相载体3份、多元醇2份、防腐剂0.2份、改性大豆分离蛋白3.5份、芦荟发酵液4份、改性透明质酸5份、中药提取物2份、水45份。
优选地,所述改性壳聚糖的制备方法如下:将8-15重量份壳聚糖、10-20重量份甲酸和180-220重量份水混合,加热并搅拌30-40min,然后加入30-50重量份醛,继续搅拌,反应结束后,加入20-30份多巴胺溶液以及10-20份硝酸铈铵,搅拌混合1-2h,然后用去离子水做透析液,用透析袋透析至透析液无色,再加入去离子水透析一段时间,得到改性壳聚糖;所述改性壳聚糖具有丰富的孔结构,比表面积大,与其他组分充分混合、交联,形成稳定的三维凝胶网络,能够提高薄膜敷料的力学性能以及对生物体组织如皮肤、器官具有很好的黏附性能;
优选地,所述油相载体为矿油、杏仁油、橄榄油、甘油、聚二甲基硅氧烷、氢化蓖麻油中的一种或多种混合,所述多元醇为丙三醇、丁二醇和聚乙二醇的一种或多种混合,所述防腐剂为苯氧乙醇。
优选地,所述改性大豆分离蛋白的制备方法如下:将大豆分离蛋白进行辐照处理,然后分散在pH值8-10的碱性蛋白酶溶液中,并在温度为40-50℃条件下酶解4-6小时,得大豆分离蛋白酶解液;对所述大豆蛋白酶解液进行离心分离,去除滤液,并对滤渣进行干燥后研磨,将研磨后的滤渣以100-120g/min的载量,通过20-30cm/min的传送带送入介质阻挡放电低温等离子体发生器内,然后向发生器内以8-10L/min的流速充入氮气,获得改性大豆分离蛋白,先通过辐照处理大豆分离蛋白,有助于大豆分离蛋白充分酶解,酶解后通过低温等离子体发生器进行处理,对大豆分离蛋白进行连续改性,提高了大豆分离蛋白的溶解性、凝胶性和乳化性,进一步充分与其他组分混合形成稳定的体系。
优选地,所述芦荟发酵液的制备方法如下:将芦荟粉碎,与寡糖、干酵母按10-16:1:2质量比混合,加入6-10倍重量的水,装入罐内,密封发酵20-30天,然后用超临界流体萃取分离技术进行加工提炼,即得芦荟发酵液,芦荟中含的多糖和多种维生素对人体皮肤有良好的营养、滋润、增白作用,芦荟素A、创伤激素和聚糖肽甘露具有抗病毒感染,促进伤口愈合复原的作用,有消炎杀菌、吸热消肿、软化皮肤、保持细胞活力的功能,凝胶多糖与愈伤酸联合还具有愈合创伤活性。
优选地,所述改性透明质酸的制备方法如下:称取40-50重量份的透明质酸纳溶于160-200重量份的去离子水中,搅拌条件下滴加1mol/L的盐酸水溶液至pH为3-5,继续搅拌1-3h;然后加入20-30份盐酸多巴胺,反应1-3h;接着加入6-10份氨基酸环氧单体以及4-8份海藻糖,搅拌均匀,反应2-3h,反应后的溶液在去离子水中透析,冷冻干燥得到改性透明质酸,改性透明质酸能够赋予薄膜敷料稳定的交联结构以及柔韧性,通过加入盐酸多巴胺,利用其氧化聚合时的粘附性,提高透明质酸吸附、粘附的能力,通过加入海藻糖,使透明质酸的羟基数大量增加,增强了吸水性能和保水性能。
优选地,所述中药提取物的制备方法如下:称取3-7份金银花、2-4份艾叶、5-9份蒲公英,放入炒制容器内,用文火加热,炒至有香气逸出时,然后放入-20~-30℃液氮冷冻,再次放入炒制容器内,用文火加热20-30min,取出晾凉,粉碎,投入至渗漉器中,采用10-16倍重量的乙醇水溶液进行渗漉提取,获得渗漉提取液和渗漉提取残渣,将渗漉提取残渣加入5-9倍重量的乙醇水溶液,浸泡2-3h,超声提取50-60min,过滤,获得超声提取液和超声提取残渣,将超声提取残渣加入4-8倍重量的水,投入至高压釜中,高压煎煮30-40min,过滤,获得高压提取液和高压提取残渣,将渗漉提取液、超声提取液和高压提取液合并,减压蒸发浓缩为原体积的10-20%,即得中药提取物;通过对重要进行炒制-冷冻-炒制的方式,有助于有效成分在后续渗漉、超声和高压中充分提取,所述金银花、艾叶和蒲公英均具有抗菌功能。
本发明还提供一种胶原蛋白薄膜敷料的制备方法,包括如下步骤:
按配比称取各原料;
将Ⅲ型重组人源化胶原蛋白、油相载体、多元醇、芦荟发酵液、改性透明质酸和水搅拌混合,得到混合物A;
向混合物A中加入改性壳聚糖、防腐剂、改性大豆分离蛋白和中药提取物,搅拌混合得到混合物B;
将混合物B在365nm波长下照12-16min,照射光光强为3-7mW/cm2,然后通过静电纺丝得到所需薄膜敷料,通过照射处理,促使物质分子之间发生交联反应和氧化反应,进一步有助于提高薄膜敷料的力学性能。
与现有技术相比,本申请实施例主要有以下有益效果:
本发明所提供的胶原蛋白薄膜敷料通过加入Ⅲ型重组人源化胶原蛋白,具有良好生物功能,有助于促进人体创伤愈合、组织修复;通过加入改性壳聚糖,一方面提高了抗菌的效果,另一方面,改性壳聚糖具有丰富的孔结构,比表面积大,与其他组分充分混合、交联,形成稳定的三维凝胶网络,能够提高薄膜敷料的力学性能以及对生物体组织如皮肤、器官具有很好的黏附性能,通过加入改性分离蛋白,提高了大豆分离蛋白的溶解性、凝胶性和乳化性,进一步充分与其他组分混合形成稳定的体系,而且与改性壳聚糖协同作用,进一步提高薄膜敷料的力学性能,通过加入芦荟发酵液,具有促进伤口愈合复原的作用,有消炎杀菌、吸热消肿、软化皮肤、保持细胞活力的功能。
附图说明
图1是本发明提供的一种胶原蛋白薄膜敷料的制备流程图。
具体实施方式
除非另有定义,本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本申请技术领域的技术人员通常理解的含义相同;本文中在申请的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的,不是旨在于限制本申请;本申请的说明书和权利要求书及上述附图说明中的术语“包括”和“具有”以及它们的任何变形,意图在于覆盖不排他的包含。本申请的说明书和权利要求书或上述附图中的术语“第一”、“第二”等是用于区别不同对象,而不是用于描述特定顺序。
在本文中提及“实施例”意味着,结合实施例描述的特定特征、结构或特性可以包含在本申请的至少一个实施例中。在说明书中的各个位置出现该短语并不一定均是指相同的实施例,也不是与其它实施例互斥的独立的或备选的实施例。本领域技术人员显式地和隐式地理解的是,本文所描述的实施例可以与其它实施例相结合。
实施例1
本发明实施例提供了一种胶原蛋白薄膜敷料,如图1所示,按配比称取以下按照重量份的原料:Ⅲ型重组人源化胶原蛋白3份、改性壳聚糖1份、油相载体2份、多元醇1份、防腐剂0.1份、改性大豆分离蛋白2.5份、芦荟发酵液3份、改性透明质酸4份、中药提取物1.5份、水40份;将Ⅲ型重组人源化胶原蛋白、油相载体、多元醇、芦荟发酵液、改性透明质酸和水搅拌混合,得到混合物A;向混合物A中加入改性壳聚糖、防腐剂、改性大豆分离蛋白和中药提取物,搅拌混合得到混合物B;将混合物B在365nm波长下照12min,照射光光强为3mW/cm2,然后通过静电纺丝得到所需薄膜敷料。
其中,所述改性壳聚糖的制备方法如下:将8重量份壳聚糖、10重量份甲酸和180重量份水混合,加热并搅拌30min,然后加入30重量份醛,继续搅拌,反应结束后,加入20份多巴胺溶液以及10份硝酸铈铵,搅拌混合1h,然后用去离子水做透析液,用透析袋透析至透析液无色,再加入去离子水透析一段时间,得到改性壳聚糖;
具体的,所述油相载体为矿油、杏仁油、橄榄油等比混合混合,所述多元醇为丙三醇,所述防腐剂为苯氧乙醇。
本实施例中,所述改性大豆分离蛋白的制备方法如下:将大豆分离蛋白进行辐照处理,然后分散在pH值8的碱性蛋白酶溶液中,并在温度为40℃条件下酶解4小时,得大豆分离蛋白酶解液;对所述大豆蛋白酶解液进行离心分离,去除滤液,并对滤渣进行干燥后研磨,将研磨后的滤渣以100g/min的载量,通过20cm/min的传送带送入介质阻挡放电低温等离子体发生器内,然后向发生器内以8L/min的流速充入氮气,获得改性大豆分离蛋白。
较佳的,所述芦荟发酵液的制备方法如下:将芦荟粉碎,与寡糖、干酵母按10:1:2质量比混合,加入6倍重量的水,装入罐内,密封发酵20天,然后用超临界流体萃取分离技术进行加工提炼,即得芦荟发酵液。
在具体实施中,所述改性透明质酸的制备方法如下:称取40重量份的透明质酸纳溶于160重量份的去离子水中,搅拌条件下滴加1mol/L的盐酸水溶液至pH为3,继续搅拌1h;然后加入20份盐酸多巴胺,反应1h;接着加入6份氨基酸环氧单体以及4份海藻糖,搅拌均匀,反应2h,反应后的溶液在去离子水中透析,冷冻干燥得到改性透明质酸。
本实施例中,所述中药提取物的制备方法如下:称取3份金银花、2份艾叶、5份蒲公英,放入炒制容器内,用文火加热,炒至有香气逸出时,然后放入-20℃液氮冷冻,再次放入炒制容器内,用文火加热20min,取出晾凉,粉碎,投入至渗漉器中,采用10倍重量的乙醇水溶液进行渗漉提取,获得渗漉提取液和渗漉提取残渣,将渗漉提取残渣加入5倍重量的乙醇水溶液,浸泡2h,超声提取50min,过滤,获得超声提取液和超声提取残渣,将超声提取残渣加入4倍重量的水,投入至高压釜中,高压煎煮30min,过滤,获得高压提取液和高压提取残渣,将渗漉提取液、超声提取液和高压提取液合并,减压蒸发浓缩为原体积的10%,即得中药提取物。
实施例2
本发明实施例提供了一种胶原蛋白薄膜敷料,如图1所示,按配比称取以下按照重量份的原料:Ⅲ型重组人源化胶原蛋白4份、改性壳聚糖1.5份、油相载体2.5份、多元醇1.5份、防腐剂0.15份、改性大豆分离蛋白3份、芦荟发酵液3.5份、改性透明质酸4.5份、中药提取物1.8份、水43份;将Ⅲ型重组人源化胶原蛋白、油相载体、多元醇、芦荟发酵液、改性透明质酸和水搅拌混合,得到混合物A;向混合物A中加入改性壳聚糖、防腐剂、改性大豆分离蛋白和中药提取物,搅拌混合得到混合物B;将混合物B在365nm波长下照12min,照射光光强为3mW/cm2,然后通过静电纺丝得到所需薄膜敷料。
其中,所述改性壳聚糖的制备方法如下:将8重量份壳聚糖、10重量份甲酸和180重量份水混合,加热并搅拌30min,然后加入30重量份醛,继续搅拌,反应结束后,加入20份多巴胺溶液以及10份硝酸铈铵,搅拌混合1h,然后用去离子水做透析液,用透析袋透析至透析液无色,再加入去离子水透析一段时间,得到改性壳聚糖;
具体的,所述油相载体为氢化蓖麻油,所述多元醇为聚乙二醇,所述防腐剂为苯氧乙醇。
本实施例中,所述改性大豆分离蛋白的制备方法如下:将大豆分离蛋白进行辐照处理,然后分散在pH值8的碱性蛋白酶溶液中,并在温度为40℃条件下酶解4小时,得大豆分离蛋白酶解液;对所述大豆蛋白酶解液进行离心分离,去除滤液,并对滤渣进行干燥后研磨,将研磨后的滤渣以100g/min的载量,通过20cm/min的传送带送入介质阻挡放电低温等离子体发生器内,然后向发生器内以8L/min的流速充入氮气,获得改性大豆分离蛋白。
较佳的,所述芦荟发酵液的制备方法如下:将芦荟粉碎,与寡糖、干酵母按10:1:2质量比混合,加入6倍重量的水,装入罐内,密封发酵20天,然后用超临界流体萃取分离技术进行加工提炼,即得芦荟发酵液。
在具体实施中,所述改性透明质酸的制备方法如下:称取40重量份的透明质酸纳溶于160重量份的去离子水中,搅拌条件下滴加1mol/L的盐酸水溶液至pH为3,继续搅拌1h;然后加入20份盐酸多巴胺,反应1h;接着加入6份氨基酸环氧单体以及4份海藻糖,搅拌均匀,反应2h,反应后的溶液在去离子水中透析,冷冻干燥得到改性透明质酸。
本实施例中,所述中药提取物的制备方法如下:称取3份金银花、2份艾叶、5份蒲公英,放入炒制容器内,用文火加热,炒至有香气逸出时,然后放入-20℃液氮冷冻,再次放入炒制容器内,用文火加热20min,取出晾凉,粉碎,投入至渗漉器中,采用10倍重量的乙醇水溶液进行渗漉提取,获得渗漉提取液和渗漉提取残渣,将渗漉提取残渣加入5倍重量的乙醇水溶液,浸泡2h,超声提取50min,过滤,获得超声提取液和超声提取残渣,将超声提取残渣加入4倍重量的水,投入至高压釜中,高压煎煮30min,过滤,获得高压提取液和高压提取残渣,将渗漉提取液、超声提取液和高压提取液合并,减压蒸发浓缩为原体积的10%,即得中药提取物。
实施例3
本发明实施例提供了一种胶原蛋白薄膜敷料,如图1所示,按配比称取以下按照重量份的原料:Ⅲ型重组人源化胶原蛋白5份、改性壳聚糖2份、油相载体3份、多元醇2份、防腐剂0.2份、改性大豆分离蛋白3.5份、芦荟发酵液4份、改性透明质酸5份、中药提取物2份、水45份;将Ⅲ型重组人源化胶原蛋白、油相载体、多元醇、芦荟发酵液、改性透明质酸和水搅拌混合,得到混合物A;向混合物A中加入改性壳聚糖、防腐剂、改性大豆分离蛋白和中药提取物,搅拌混合得到混合物B;将混合物B在365nm波长下照14min,照射光光强为5mW/cm2,然后通过静电纺丝得到所需薄膜敷料。
其中,所述改性壳聚糖的制备方法如下:将11.5重量份壳聚糖、15重量份甲酸和200重量份水混合,加热并搅拌35min,然后加入40重量份醛,继续搅拌,反应结束后,加入25份多巴胺溶液以及15份硝酸铈铵,搅拌混合1.5h,然后用去离子水做透析液,用透析袋透析至透析液无色,再加入去离子水透析一段时间,得到改性壳聚糖;
具体的,所述油相载体为矿油、杏仁油、橄榄油、甘油、聚二甲基硅氧烷、氢化蓖麻油等比混合,所述多元醇为丙三醇、丁二醇和聚乙二醇等比混合,所述防腐剂为苯氧乙醇。
本实施例中,所述改性大豆分离蛋白的制备方法如下:将大豆分离蛋白进行辐照处理,然后分散在pH值9的碱性蛋白酶溶液中,并在温度为45℃条件下酶解5小时,得大豆分离蛋白酶解液;对所述大豆蛋白酶解液进行离心分离,去除滤液,并对滤渣进行干燥后研磨,将研磨后的滤渣以110g/min的载量,通过25cm/min的传送带送入介质阻挡放电低温等离子体发生器内,然后向发生器内以9L/min的流速充入氮气,获得改性大豆分离蛋白。
较佳的,所述芦荟发酵液的制备方法如下:将芦荟粉碎,与寡糖、干酵母按13:1:2质量比混合,加入8倍重量的水,装入罐内,密封发酵25天,然后用超临界流体萃取分离技术进行加工提炼,即得芦荟发酵液。
在具体实施中,所述改性透明质酸的制备方法如下:称取45重量份的透明质酸纳溶于180重量份的去离子水中,搅拌条件下滴加1mol/L的盐酸水溶液至pH为4,继续搅拌2h;然后加入25份盐酸多巴胺,反应2h;接着加入8份氨基酸环氧单体以及6份海藻糖,搅拌均匀,反应2.5h,反应后的溶液在去离子水中透析,冷冻干燥得到改性透明质酸。
本实施例中,所述中药提取物的制备方法如下:称取5份金银花、3份艾叶、7份蒲公英,放入炒制容器内,用文火加热,炒至有香气逸出时,然后放入-25℃液氮冷冻,再次放入炒制容器内,用文火加热25min,取出晾凉,粉碎,投入至渗漉器中,采用13倍重量的乙醇水溶液进行渗漉提取,获得渗漉提取液和渗漉提取残渣,将渗漉提取残渣加入7倍重量的乙醇水溶液,浸泡2.5h,超声提取55min,过滤,获得超声提取液和超声提取残渣,将超声提取残渣加入6倍重量的水,投入至高压釜中,高压煎煮35min,过滤,获得高压提取液和高压提取残渣,将渗漉提取液、超声提取液和高压提取液合并,减压蒸发浓缩为原体积的15%,即得中药提取物。
实施例4
本发明实施例提供了一种胶原蛋白薄膜敷料,如图1所示,按配比称取以下按照重量份的原料:Ⅲ型重组人源化胶原蛋白6份、改性壳聚糖2.5份、油相载体3.5份、多元醇2.5份、防腐剂0.25份、改性大豆分离蛋白4份、芦荟发酵液4.5份、改性透明质酸5.5份、中药提取物2.2份、水47份;将Ⅲ型重组人源化胶原蛋白、油相载体、多元醇、芦荟发酵液、改性透明质酸和水搅拌混合,得到混合物A;向混合物A中加入改性壳聚糖、防腐剂、改性大豆分离蛋白和中药提取物,搅拌混合得到混合物B;将混合物B在365nm波长下照16min,照射光光强为7mW/cm2,然后通过静电纺丝得到所需薄膜敷料。
其中,所述改性壳聚糖的制备方法如下:将15重量份壳聚糖、20重量份甲酸和220重量份水混合,加热并搅拌40min,然后加入50重量份醛,继续搅拌,反应结束后,加入30份多巴胺溶液以及20份硝酸铈铵,搅拌混合2h,然后用去离子水做透析液,用透析袋透析至透析液无色,再加入去离子水透析一段时间,得到改性壳聚糖;
具体的,所述油相载体为甘油、聚二甲基硅氧烷、氢化蓖麻油等比混合,所述多元醇为丙三醇,所述防腐剂为苯氧乙醇。
本实施例中,所述改性大豆分离蛋白的制备方法如下:将大豆分离蛋白进行辐照处理,然后分散在pH值10的碱性蛋白酶溶液中,并在温度为50℃条件下酶解6小时,得大豆分离蛋白酶解液;对所述大豆蛋白酶解液进行离心分离,去除滤液,并对滤渣进行干燥后研磨,将研磨后的滤渣以120g/min的载量,通过30cm/min的传送带送入介质阻挡放电低温等离子体发生器内,然后向发生器内以10L/min的流速充入氮气,获得改性大豆分离蛋白。
较佳的,所述芦荟发酵液的制备方法如下:将芦荟粉碎,与寡糖、干酵母按16:1:2质量比混合,加入10倍重量的水,装入罐内,密封发酵30天,然后用超临界流体萃取分离技术进行加工提炼,即得芦荟发酵液。
在具体实施中,所述改性透明质酸的制备方法如下:称取50重量份的透明质酸纳溶于200重量份的去离子水中,搅拌条件下滴加1mol/L的盐酸水溶液至pH为5,继续搅拌3h;然后加入30份盐酸多巴胺,反应3h;接着加入10份氨基酸环氧单体以及8份海藻糖,搅拌均匀,反应3h,反应后的溶液在去离子水中透析,冷冻干燥得到改性透明质酸。
本实施例中,所述中药提取物的制备方法如下:称取7份金银花、4份艾叶、9份蒲公英,放入炒制容器内,用文火加热,炒至有香气逸出时,然后放入-30℃液氮冷冻,再次放入炒制容器内,用文火加热30min,取出晾凉,粉碎,投入至渗漉器中,采用16倍重量的乙醇水溶液进行渗漉提取,获得渗漉提取液和渗漉提取残渣,将渗漉提取残渣加入9倍重量的乙醇水溶液,浸泡3h,超声提取60min,过滤,获得超声提取液和超声提取残渣,将超声提取残渣加入8倍重量的水,投入至高压釜中,高压煎煮40min,过滤,获得高压提取液和高压提取残渣,将渗漉提取液、超声提取液和高压提取液合并,减压蒸发浓缩为原体积的20%,即得中药提取物。
实施例5
本发明实施例提供了一种胶原蛋白薄膜敷料,如图1所示,按配比称取以下按照重量份的原料:Ⅲ型重组人源化胶原蛋白7份、改性壳聚糖3份、油相载体4份、多元醇3份、防腐剂0.3份、改性大豆分离蛋白4.5份、芦荟发酵液5份、改性透明质酸6份、中药提取物2.5份、水50份;将Ⅲ型重组人源化胶原蛋白、油相载体、多元醇、芦荟发酵液、改性透明质酸和水搅拌混合,得到混合物A;向混合物A中加入改性壳聚糖、防腐剂、改性大豆分离蛋白和中药提取物,搅拌混合得到混合物B;将混合物B在365nm波长下照16min,照射光光强为7mW/cm2,然后通过静电纺丝得到所需薄膜敷料。
其中,所述改性壳聚糖的制备方法如下:将15重量份壳聚糖、20重量份甲酸和220重量份水混合,加热并搅拌40min,然后加入50重量份醛,继续搅拌,反应结束后,加入30份多巴胺溶液以及20份硝酸铈铵,搅拌混合2h,然后用去离子水做透析液,用透析袋透析至透析液无色,再加入去离子水透析一段时间,得到改性壳聚糖;
具体的,所述油相载体为矿油、杏仁油、橄榄油、甘油、聚二甲基硅氧烷、氢化蓖麻油中的一种或多种混合,所述多元醇为丙三醇、丁二醇和聚乙二醇的一种或多种混合,所述防腐剂为苯氧乙醇。
本实施例中,所述改性大豆分离蛋白的制备方法如下:将大豆分离蛋白进行辐照处理,然后分散在pH值10的碱性蛋白酶溶液中,并在温度为50℃条件下酶解6小时,得大豆分离蛋白酶解液;对所述大豆蛋白酶解液进行离心分离,去除滤液,并对滤渣进行干燥后研磨,将研磨后的滤渣以120g/min的载量,通过30cm/min的传送带送入介质阻挡放电低温等离子体发生器内,然后向发生器内以10L/min的流速充入氮气,获得改性大豆分离蛋白。
较佳的,所述芦荟发酵液的制备方法如下:将芦荟粉碎,与寡糖、干酵母按16:1:2质量比混合,加入10倍重量的水,装入罐内,密封发酵30天,然后用超临界流体萃取分离技术进行加工提炼,即得芦荟发酵液。
在具体实施中,所述改性透明质酸的制备方法如下:称取50重量份的透明质酸纳溶于200重量份的去离子水中,搅拌条件下滴加1mol/L的盐酸水溶液至pH为5,继续搅拌3h;然后加入30份盐酸多巴胺,反应3h;接着加入10份氨基酸环氧单体以及8份海藻糖,搅拌均匀,反应3h,反应后的溶液在去离子水中透析,冷冻干燥得到改性透明质酸。
本实施例中,所述中药提取物的制备方法如下:称取7份金银花、4份艾叶、9份蒲公英,放入炒制容器内,用文火加热,炒至有香气逸出时,然后放入-30℃液氮冷冻,再次放入炒制容器内,用文火加热30min,取出晾凉,粉碎,投入至渗漉器中,采用16倍重量的乙醇水溶液进行渗漉提取,获得渗漉提取液和渗漉提取残渣,将渗漉提取残渣加入9倍重量的乙醇水溶液,浸泡3h,超声提取60min,过滤,获得超声提取液和超声提取残渣,将超声提取残渣加入8倍重量的水,投入至高压釜中,高压煎煮40min,过滤,获得高压提取液和高压提取残渣,将渗漉提取液、超声提取液和高压提取液合并,减压蒸发浓缩为原体积的20%,即得中药提取物。
对比例1
与实施例3相比,将改性壳聚糖替换为普通壳聚糖;
对比例2
与实施例3相比,将改性大豆分离蛋白替换为普通大豆分离蛋白;
对比例3
与实施例3相比,将改性壳聚糖替换为普通壳聚糖并将改性大豆分离蛋白替换为普通大豆分离蛋白;
力学性能和粘性测试
通过测试薄膜敷料与光滑玻璃片(硫酸表面处理)间粘结后的剥离力来表征薄膜敷料的粘性,用拉力机测试180℃剥离薄膜敷料所需的力,剥离速率为50mm/min。
将薄膜敷料裁成尺寸为50 mm×10 mm的待测试样,在KJ-2091拉力试验机上测试;
从以上结果可以看出,本发明制备的胶原蛋白薄膜敷料具有良好的力学性能和粘性,通过改性壳聚糖和改性大豆分离蛋白配合,具有协同配合增效的作用,能够极大的提高薄膜敷料的力学性能和粘性;
对比例4
现有市场上的敷料;
分别吸取各菌种混悬液,用涂布器均匀涂抹在培养基平皿表面,用无菌镊子分别实施例1-5以及对比例4的敷料,贴在含菌平皿上,做好相应的标记。将平皿放入37℃培养箱内培养24h,取出后测量两组抑菌圈直径(mm)的大小,结果如下表;
从以上结果可以看出,本发明制备的敷料对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和白色念珠菌均有抑制作用,有良好的抗菌效果。
需要说明的是,对于前述的各实施例,为了简单描述,故将其都表述为一系列的动作组合,但是本领域技术人员应该知悉,本发明并不受所描述的动作顺序的限制,因为依据本发明,某些步骤可能采用其他顺序或者同时进行。其次,本领域技术人员也应该知悉,说明书中所描述的实施例均属于优选实施例,涉及的动作和模块并不一定是本发明所必须的。
以上实施例仅用以说明本发明的技术方案,而非对发明的保护范围进行限制。显然,所描述的实施例仅仅是本发明部分实施例,而不是全部实施例。基于这些实施例,本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明所要保护的范围。尽管参照上述实施例对本发明进行了详细的说明,本领域普通技术人员依然可以在不冲突的情况下,不作出创造性劳动对本发明各实施例中的特征根据情况相互组合、增删或作其他调整,从而得到不同的、本质未脱离本发明的构思的其他技术方案,这些技术方案也同样属于本发明所要保护的范围。
Claims (6)
1.一种胶原蛋白薄膜敷料,其特征在于,包括以下按照重量份的原料:Ⅲ型重组人源化胶原蛋白3-7份、改性壳聚糖1-3份、油相载体2-4份、多元醇1-3份、防腐剂0.1-0.3份、改性大豆分离蛋白2.5-4.5份、芦荟发酵液3-5份、改性透明质酸4-6份、中药提取物1.5-2.5份、水40-50份;
所述改性壳聚糖的制备方法如下:将8-15重量份壳聚糖、10-20重量份甲酸和180-220重量份水混合,加热并搅拌30-40min,然后加入30-50重量份醛,继续搅拌,反应结束后,加入20-30份多巴胺溶液以及10-20份硝酸铈铵,搅拌混合1-2h,然后用去离子水做透析液,用透析袋透析至透析液无色,再加入去离子水透析一段时间,得到改性壳聚糖;
所述改性大豆分离蛋白的制备方法如下:将大豆分离蛋白进行辐照处理,然后分散在pH值8-10的碱性蛋白酶溶液中,并在温度为40-50℃条件下酶解4-6小时,得大豆分离蛋白酶解液;对所述大豆蛋白酶解液进行离心分离,去除滤液,并对滤渣进行干燥后研磨,将研磨后的滤渣以100-120g/min的载量,通过20-30cm/min的传送带送入介质阻挡放电低温等离子体发生器内,然后向发生器内以8-10L/min的流速充入氮气,获得改性大豆分离蛋白;
所述改性透明质酸的制备方法如下:称取40-50重量份的透明质酸纳溶于160-200重量份的去离子水中,搅拌条件下滴加1mol/L的盐酸水溶液至pH为3-5,继续搅拌1-3h;然后加入20-30份盐酸多巴胺,反应1-3h;接着加入6-10份氨基酸环氧单体以及4-8份海藻糖,搅拌均匀,反应2-3h,反应后的溶液在去离子水中透析,冷冻干燥得到改性透明质酸;
所述中药提取物的制备方法如下:称取3-7份金银花、2-4份艾叶、5-9份蒲公英,放入炒制容器内,用文火加热,炒至有香气逸出时,然后放入-20~-30℃液氮冷冻,再次放入炒制容器内,用文火加热20-30min,取出晾凉,粉碎,投入至渗漉器中,采用10-16倍重量的乙醇水溶液进行渗漉提取,获得渗漉提取液和渗漉提取残渣,将渗漉提取残渣加入5-9倍重量的乙醇水溶液,浸泡2-3h,超声提取50-60min,过滤,获得超声提取液和超声提取残渣,将超声提取残渣加入4-8倍重量的水,投入至高压釜中,高压煎煮30-40min,过滤,获得高压提取液和高压提取残渣,将渗漉提取液、超声提取液和高压提取液合并,减压蒸发浓缩为原体积的10-20%,即得中药提取物。
2.如权利要求1所述的胶原蛋白薄膜敷料,其特征在于,包括以下按照重量份的原料:Ⅲ型重组人源化胶原蛋白4-6份、改性壳聚糖1.5-2.5份、油相载体2.5-3.5份、多元醇1.5-2.5份、防腐剂0.15-0.25份、改性大豆分离蛋白3-4份、芦荟发酵液3.5-4.5份、改性透明质酸4.5-5.5份、中药提取物1.8-2.2份、水43-47份。
3.如权利要求2所述的胶原蛋白薄膜敷料,其特征在于,包括以下按照重量份的原料:Ⅲ型重组人源化胶原蛋白5份、改性壳聚糖2份、油相载体3份、多元醇2份、防腐剂0.2份、改性大豆分离蛋白3.5份、芦荟发酵液4份、改性透明质酸5份、中药提取物2份、水45份。
4.如权利要求1所述的胶原蛋白薄膜敷料,其特征在于,所述油相载体为矿油、杏仁油、橄榄油、甘油、聚二甲基硅氧烷、氢化蓖麻油中的一种或多种混合,所述多元醇为丙三醇、丁二醇和聚乙二醇的一种或多种混合,所述防腐剂为苯氧乙醇。
5.如权利要求1所述的胶原蛋白薄膜敷料,其特征在于,所述芦荟发酵液的制备方法如下:将芦荟粉碎,与寡糖、干酵母按10-16:1:2质量比混合,加入6-10倍重量的水,装入罐内,密封发酵20-30天,然后用超临界流体萃取分离技术进行加工提炼,即得芦荟发酵液。
6.如权利要求1-5任一所述的胶原蛋白薄膜敷料的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
按配比称取各原料;
将Ⅲ型重组人源化胶原蛋白、油相载体、多元醇、芦荟发酵液、改性透明质酸和水搅拌混合,得到混合物A;
向混合物A中加入改性壳聚糖、防腐剂、改性大豆分离蛋白和中药提取物,搅拌混合得到混合物B;
将混合物B在365nm波长下照12-16min,照射光光强为3-7mW/cm2,然后通过静电纺丝得到所需薄膜敷料。
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