CN115920074B - 一种介孔硅纳米递送载体、载药复合物、制备方法及应用 - Google Patents

Abstract

一种介孔硅纳米递送载体、载药复合物、制备方法及应用。本发明提出了一种介孔硅纳米递送载体，先制备氨基化中空介孔硅纳米颗粒，再在颗粒表面进行羧基化修饰和活化，然后通过酰胺化缩合反应修饰多聚阳离子化合物。本发明所制备的纳米颗粒表面带有大量正电荷，被用于负载天然药物5‑去甲基川陈皮素(5‑DN)，有效克服了5‑DN水分散性差、生物利用度低的缺点，体内外实验证明所得载药复合物(MSNs@5‑DN)具有酸性pH和高活性氧自由基水平条件下的刺激响应型药物控制释放性能，显著增强了5‑DN对小鼠银屑病样炎症损伤的疗效。

Description

一种介孔硅纳米递送载体、载药复合物、制备方法及应用

技术领域

本发明属于生物技术领域，更具体地说是涉及介孔硅纳米递送载体、载药复合物、制备方法及应用。

背景技术

银屑病是一种自身免疫系统异常的慢性皮炎，常表现为皮肤散在性红肿斑块，表面覆盖有银色或白色鳞屑片层(俗称牛皮癣)，该病一般认为与角质细胞的异常增殖有关。目前银屑病尚无有效根治手段，传统疗法一般通过免疫抑制剂系统用药或糖皮质激素等外用药进行干预治疗。近年来先后出现一些靶向调节细胞因子(如肿瘤坏死因子TNF-α和白细胞介素IL-12、IL-17和IL-23等)的生物制剂新型疗法。通过靶向抑制病人相关炎症因子过度表达来改善病情，提高患者生活质量，取得了良好效果。

5-去甲基川陈皮素(5-DN)是一种主要存在于中药陈皮中的多甲氧基黄酮类天然活性化合物，因其具有抗炎症，抑制肿瘤细胞增殖、迁移和浸润，抗过敏，降血压等多种生理功效而在现代中医药领域有广泛应用前景。有研究发现，5-DN具有很好的细胞膜渗透性，能顺利跨入细胞内发挥其抗炎症、抗癌等生理活性。本实验室前期研究发现，5-DN对佛波酯(TPA)诱导的小鼠皮肤银屑病样损伤具有较好的预防作用；5-DN能够降低皮损组织白细胞介素(IL)-1β、IL-17、IL-4、IL-6等炎症因子、肿瘤坏死因子TNF-α和干扰素IFN-γ的表达水平，抑制丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)炎症信号通路，降低皮损组织中与细胞增殖相关转录因子Ki-67和PCNA的表达；经过5-DN处理后，小鼠皮损组织细胞过度增生情况显著降低，这表明5-DN具有预防细胞炎症发生的作用。但从前期包括组织病理和生理生化指标实验结果看，5-DN在缓解小鼠皮肤银屑病样损伤的效果不够理想。这与5-DN的水溶性较差，生物体利用率低有关。因此，寻找合适的纳米药物载体，改善5-DN的生物相容性，提高药物利用度，实现药物在机体的炎症部位响应性释放，具有现实应用意义。

通过新型纳米制剂来改善黄酮类药物的水分散性的报道逐渐增多，其中包括利用硅基纳米药物载体进行药物新剂型开发。介孔硅纳米颗粒(MSNs)因其极大的比表面积、良好的生物相容性，易于修饰的载体表面，表面孔径可调节等特点成为理想的药物递送载体。而聚乙烯亚胺(支链型，PEI)是一种多聚阳离子化合物，该化合物修饰在介孔硅表面后，在低pH条件下会发生水解，与纳米颗粒表面剥离，引发相关药物的条件性释放。近年来出现了利用PEI修饰的介孔硅制备pH响应型递药系统用于抗肿瘤治疗的应用案例。但尚无通过预先修饰的酰胺化缩合反应进行PEI修饰，实现低pH和高活性氧自由基水平条件下的双重刺激响应型药物控制释放特性的抗炎药物纳米制剂的相关报道。

发明内容

本发明公开了一种介孔硅纳米递送载体及载药复合物，通过设计制备PEI修饰的羧基化中空介孔硅纳米颗粒，利用酰氨反应，在羧基修饰的中空介孔硅纳米颗粒基础上进行多聚阳离子化合物聚乙烯亚胺的功能化接合；所制备的纳米颗粒表面带有大量正电荷，被用于负载天然药物(包括但不限于5-去甲基川陈皮素5-DN)，有效克服了药物水分散性差、生物利用度低的缺点，进而提高药物的治疗效果。

本发明是通过以下技术方案实现的：

本发明提供一种介孔硅纳米递送载体的制备方法，先制备氨基化中空介孔硅纳米颗粒，再在颗粒表面进行羧基化修饰和活化，然后通过酰胺化缩合反应修饰多聚阳离子化合物。

优选地，介孔硅的氨基化和羧基化修饰过程为：称取50mg的介孔硅纳米材料分散在50mL的乙醇中，随后加入100μL的APTES，78℃回流4h，水洗离心三次，最后将氨基化的MSNs在真空冷冻干燥仪中干燥得到MSNs-NH₂；称取400mg的MSNs-NH₂和600mg的琥珀酰酐，分散于40mL的无水乙醇中，室温搅拌24h后，先后用乙醇和水各离心洗涤3次，真空冷冻干燥后得到MSNs-COOH。

优选地，所述多聚阳离子化合物为带有正电荷的多聚胺类化合物。

优选地，所述多聚胺类化合物为支链型聚乙烯亚胺。

优选地，修饰多聚阳离子化合物的过程为：称取10mg的羧基化介孔硅粉末，分散于2.5mL的DMSO中，依次加入6mg的EDC(全称为：1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺)和18mg的NHS(全称为：N-羟基琥珀酰亚胺)，避光室温搅拌2h以活化羧基；将反应液在10000rpm×10min条件下离心后重悬浮于乙醇中，加入2.5mg的PEI继续室温避光搅拌3h后，10000rpm×10min条件下离心，依次用无水乙醇和蒸馏水各离心洗涤3次，将得到的沉淀进行真空干燥过夜，即得到PEI-MSNs。

另一方面，本发明还提供一种上述方法制备的介孔硅纳米递送载体。

另一方面，本发明还提供一种羧基化介孔硅纳米载药复合物，在纳米递送载体上负载多甲氧基黄酮类化合物。

优选地，所述多甲氧基黄酮类化合物为5-DN。

另一方面，本发明还提供一种羧基化介孔硅纳米载药复合物的制备方法，具体过程为：称取50mg的5-DN溶于40mL的无水乙醇，再加入50mg的PEI-MSNs，充分搅拌均匀，在摇床上以120rpm的转速室温反应2h后，将混合物置于12000rpm转速下离心10min，得到载药复合物沉淀；沉淀依次用乙醇和水离心洗涤3次，真空冷冻干燥，得到载药复合物备用。

另一方面，本发明还提出羧基化介孔硅纳米载药复合物在提高治疗银屑病效果中的应用。

本发明产生的有益效果为：该方法基于介孔硅纳米颗粒表面依次进行的氨基化和羧基化修饰为基础的新制剂，制备方法简单易行。通过羧基化中空介孔硅经多聚阳离子聚合物修饰后，该修饰的复合物可通过正负电荷相互作用，负载大量多甲氧基黄酮药物分子(包括但不限于5-去甲基川陈皮素5-DN)；且具有酸性pH和高活性氧自由基双重环境响应型药物释放特性。在模拟体液溶液环境中，pH＝4.5时，纳米颗粒对药物的释放率达到90％以上；H₂O₂浓度在10mM时，纳米颗粒对药物的最大释放率约为80％，进而提高药物治疗效果。

本发明所制备的纳米颗粒表面带有大量正电荷，被用于负载天然药物5-去甲基川陈皮素(5-DN)，有效克服了5-DN水分散性差、生物利用度低的缺点，体内外实验证明所得载药复合物(MSNs@5-DN)具有酸性pH和高活性氧自由基水平条件下的刺激响应型药物控制释放性能，显著增强了5-DN对小鼠银屑病样炎症损伤的疗效。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1为多甲氧基黄酮化合物的水分散性新剂型研制，其中：a:川陈皮素粉末和介孔硅纳米颗粒粉末外观；

b:单独的5-DN水分散性测试；

c:纳米载体MSNs及其递药复合物的液体分散性测试。

图2为川陈皮素载药复合物MSNs@5-DN研制的技术路线及表征，其中：A:MSNs@5-DN制备路线；

B:动态光散射(DLS粒径表征)；

C:透射电镜表征；

D:材料的Zeta电位表征；

E:材料的表面孔径大小表征；

F:红外光谱表征。

图3为体外生物性能评价，其中：

A～B:不同pH、氧化剂应激环境下MSNs@5-DN的药物释放时间动力学曲线；C～E:不同浓度5-DN(C)、MSNs(D)、MSNs@5-DN(E)在处理24h和48h后的细胞毒性评价。

图4为川陈皮素载药复合物MSNs@5-DN组织病理性评价，其中：

A:药物作用后的小鼠不同脏器病理切片染色结果；

B:药物注射后的小鼠耳内表皮组织病理染色结果。

图5为体内实验评价不同处理条件下的药物生物毒性评价，其中：

A:不同处理组中小鼠耳表皮外观图；

B:小鼠耳表皮水肿情况(耳厚度)；

C:小鼠血清生化指标水平评价；

D:不同处理组中小鼠体重变化图；

图6为炎症因子蛋白表达水平相对定量检测(western blot)：HaCaT细胞(A)和小鼠耳表皮(B和C)内炎症因子表达水平检测。

D:免疫组化相对定量检测小鼠表皮炎症因子表达水平。

具体实施方式

本发明例旨在建立体内外银屑病损伤及修复的细胞和动物模型，研究本发明所制备的介孔硅纳米颗粒介导的5-DN在银屑病样小鼠皮肤病变过程中的抗炎症活性；揭示5-DN调控上述疾病相关炎症因子表达丰度及信号通路调节规律，为更好地利用5-DN积极治疗和预防皮肤银屑状损伤提供基础理论支持。

为实现上述目的，以下结合具体实施例对本发明所述羧基化中空介孔硅纳米递药载体的制备方法、技术要点、性能参数及应用效果进行举例说明。以下实施例只是本发明的典型实施例，但不是全部实施例。如基于本发明的实施例描述，本领域的初级技术人员在没有进行创造性活动所获得的其他实施例方案描述，均属于本发明保护的范围。

实施例1

本实施例制备了中空介孔硅纳米颗粒，具体实施过程为：用十六烷基三甲基氯化铵(CTAC)模板法合成介孔硅纳米粒。

具体步骤如下：称取4g的CTAC和0.2g的TAE，溶于40mL超纯水中。升温至95℃，同时剧烈搅拌，1h后，将3mL的TEOS逐滴加入后，继续持续搅拌1h。将得到的产物用乙醇离心洗涤三次除去残余反应物。将剩余产物在质量分数为36％的浓盐酸和甲醇(二者体积比为1:10)的混合液中升温至78℃条件下回流12h后，再在NaCl质量分数为1％的甲醇溶液中室温搅拌萃取24h后离心洗涤，共重复萃取三次，直到产物经FTIR检测不到CTAC的特征峰为止。得到的固体沉淀置于真空冷冻干燥机过夜，即得到白色粉末状的介孔硅纳米材料。

实施例2

本实施例制备了氨基化介孔硅纳米颗粒(MSNs-NH₂)和羧基化介孔硅纳米颗粒(MSNs-COOH)。

具体实施过程为：称取50mg的介孔硅分散在50mL的乙醇中，随后加入100μL的APTES，78℃回流4h，水洗离心三次，最后将氨基化的介孔硅在真空冷冻干燥仪中干燥，室温保存。

对介孔硅纳米颗粒进行羧基化修饰，称取400mg的MSNs-NH₂和600mg的琥珀酰酐，分散于40mL的无水乙醇中，室温搅拌24h后，先后用乙醇和水各离心洗涤3次，真空冷冻干燥后得到羧基化介孔硅粉末，粒径均一性好，外径大小分布在100～200nm范围，外层孔径大小在2～5nm。

实施例3

本实施例制备了多聚阳离子聚合物PEI修饰的介孔硅纳米颗粒(PEI-MSNs)。

具体实施过程为：称取10mg的羧基化修饰的介孔硅，分散于2.5mL的DMSO中，依次加入6mg的EDC和18mg的NHS，避光室温搅拌2h以活化羧基。将反应液在10000rpm×10min条件下离心后重悬浮于乙醇中。加入2.5mg的PEI继续室温避光搅拌3h后，10000rpm×10min条件下离心，依次用无水乙醇和蒸馏水各离心洗涤3次，将得到的沉淀进行真空干燥过夜，即得PEI-MSNs，且经多聚阳离子化合物PEI修饰前后，介孔硅表面的比表面积维持不变。

本实施例所选用的多聚阳离子化合物聚乙烯亚胺(PEI)只是实施例中的一种，其他利用在溶液中带有大量正电荷的多聚胺类化合物修饰本发明中的羧基化介孔硅，也同样在本发明专利保护范畴之内。

实施例4

本实施例制备了羧基化中空介孔硅纳米颗粒负载5-DN药后的载药复合物MSNs@5-DN。

具体实施过程为：采用水溶液反应法进行药物的负载。药物与纳米颗粒之间通过静电吸附和氢键作用力结合。具体过程为称取50mg的5-DN溶于40mL的无水乙醇，再加入50mg的MSNs-NH₂，充分搅拌均匀，在摇床上以120rpm的转速室温反应2h后，将混合物置于12000rpm转速下离心10min，得到载药复合物沉淀。收集上清液在348nm下测其紫外吸收值，以计算MSNs的载药量，紫外吸收峰为348nm，羧基化中空介孔硅纳米颗粒对多甲氧基黄酮化合物的负载量为0.188mg·mg^-1。然后沉淀依次用乙醇和水离心洗涤3次，真空冷冻干燥，得到载药复合物备用。

图1为多甲氧基黄酮化合物的水分散性新剂型研制，其中：a:川陈皮素粉末和介孔硅纳米颗粒粉末外观；b:单独的5-DN水分散性测试；c:纳米载体MSNs及其递药复合物的液体分散性测试；由图1可知，所制备的介孔硅纳米颗粒及其载药复合物具有良好的溶液分散性。

实施例5

对上述实施例所制备的介孔硅纳米颗粒及其载药复合物MSNs和MSNs@5-DN进行了性能表征测试，包括但不限于颗粒形态、粒径分布、表面电位、材料表面孔径大小、功能基团修饰情况、水分散性等性能测试数据。由图2可知，所制备的介孔硅纳米颗粒及其载药复合物粒径均一性好，外径大小分布在100～200nm范围；

需要特别强调的是，在测试所制备的介孔硅载药复合物的条件响应性药物释放特性时，本实施例开展了以下步骤一和步骤二试验操作：

步骤一：首先用PBS或其他离子型缓冲液配制一系列pH值的缓冲体系，包括但不限于pH＝4.5、5.5、7.4、8.0，分别取相同浓度和体积的载药复合物MSNs@5-DN与上述各pH值的溶液进行预混，室温摇床震荡48h，期间在不同时间点取部分溶液进行药物释放率检测和计算，从而绘制出不同时间点不同pH缓冲体系下载药复合物(MSNs@5-DN)对药物的释放动力学曲线(图3A)。

步骤二：用PBS缓冲液(pH约为7.4)配制一系列浓度梯度的H₂O₂，包括但不限于0,0.1,1.0,10.0mM，分别取相同浓度和体积的载药复合物MSNs@5-DN与上述各浓度的H₂O₂溶液进行预混，室温摇床震荡48h，期间在不同时间点取部分溶液进行药物释放率检测和计算，以在体外模拟不同氧自由基(氧化应激水平)浓度下，载药复合物MSNs@5-DN对客体分子5-DN的释放动力学曲线(图3B)。

因此，结合图3可以得出，经多聚阳离子化合物修饰后，具有酸性pH和高活性氧自由基双重环境响应型药物释放特性。具体表现为在模拟体液溶液中，pH＝4.5时，纳米颗粒对药物的释放率达到90％以上；H₂O₂浓度在10mM时，纳米颗粒对药物的最大释放率约为80％(见图3A和3B)。经文献对比分析得到如下信息：在相同或相近pH下，本发明所制得的载药复合物药物释放效率(大于90％)要显著优于典型文献报道(M Chen,et al.,ACS Appl MaterInterfaces.2022,14(1):57-68.doi:10.1021/acsami.1c14135)的释放效率(小于40％)；在相同或相近H₂O₂浓度下，本发明中纳米颗粒对药物的释放率要优于典型文献报道(Zuo W,ACS Appl Mater Interfaces.2022,14(4):5053-5065.doi:10.1021/acsami.1c22432)的释放率(小于70％)。

实施例6

本实施例对上述实施例所制备的介孔硅纳米颗粒及其载药复合物进行了体外细胞毒性测试。

具体实施过程为：贴壁培养人永生化角质形成细胞HaCaT。培养条件为DMEM高糖培养基，添加5％的FBS，添加链霉素(100μg/ml，青霉素(100U/ml)，37℃和含5％ CO₂培养。在细胞对数生长期且皿底生长汇合度在70％左右进行加药操作。进行体外细胞毒性试验(药物浓度优化)培养皿中HaCaT细胞增殖至总数约为1×10⁶个，设置5类细胞组别。分别为空白对照组(Con)、TPA药物处理组、药物空载对照组(MSNs)、实验组1(5-DN)、实验组2(MSNs@5-DN)。将提取制备的MSNs，5-DN和MSNs@5-DN进行梯度稀释至不同浓度，分别加至对数生长期的HaCat细胞培养液上清，加入梯度稀释的MSNs或MSNs@5-DN。每个处理条件设置处理时间为24h和48h两个时间段组别，采用CCK-8细胞活性检测试剂盒(450nm下测吸光度)检测细胞增殖情况。最终获得在不明显影响细胞活性(实验组细胞增殖活力不低于空白对照组Con的80％)的情况下5-DN药物单体的最大药物处理浓度用于细胞炎症模型的建立，将此浓度记为C₁。

结合图3可知，所制备的羧基化介孔硅纳米载体，具有良好的生物生物相容性，具体表现为：体外细胞毒性评价试验中，在浓度达到180μM时，相对于不加药的空白对照组，人角质化细胞HaCaT仍能维持90％以上的相对增值活力；所制备的羧基化介孔硅纳米载药复合物MSNs@5-DN，具有良好的生物生物相容性，具体表现为：体外细胞毒性评价试验中，在浓度达到230μM时，相对于不加药的空白对照组，人角质化细胞HaCaT仍能维持80％～90％的相对增值活力。因此，可以得出所制备的介孔硅纳米颗粒及其载药复合物具有良好的体外细胞生物相容性，毒副作用小，且具有酸性pH和高活性氧自由基双重刺激响应型药物控释性能。

实施例7

本实施例对上述实施例所制备的介孔硅纳米颗粒及其载药复合物进行了体内小鼠毒理试验评价。

具体实施过程为：将6-8周龄的小鼠随机分为5组，每组5只小鼠，共25只小鼠购到货后先在动物房适宜性培养一周，按表3方案每天给药2次(8:00和16:00)，每次加药前，先注射佛波酯(TPA)诱导银屑病样皮肤损伤。每天除空白对照组Con组每次进行耳皮内注射15μl乙醇外，其余4组小鼠第一次给药时先耳皮内注射体积为15μl含4.5nmol的TPA的诱导的小鼠皮肤银屑病样损伤，10min后注射对应药物。第二次给药时，注射TPA后间隔1h，再分别为空白对照组(Con)、阳性对照组(TPA)、材料组(MSNs)、实验组1(5-DN)、实验组2(MSNs@5-DN)组进行耳皮内注射给药。其中空白对照组加等体积乙醇为空白对照，其他组分别注射乙醇溶解的药品。给药实验持续4天后处死小鼠，所有小鼠均采集左右耳表皮组织，进行组织病理学染色，显微观察。并抽取血液，最终检测时每组随机选择5只小鼠的样本进行血液生化参数检测。

由图4-5可知，所制备的羧基化介孔硅纳米载体，具有良好的生物生物相容性。具体表现为：小鼠体内毒理试验中，按介孔硅纳米载体MSNs单次注射量0.412mg·kg^-1小鼠体重，每天注射2次的条件下，小鼠仍无明显体内毒性现象；所制备的羧基化介孔硅纳米载药复合物MSNs@5-DN，具有良好的生物生物相容性，具体表现为：小鼠体内毒理试验中，按介孔硅纳米载药复合物MSNs@5-DN单次注射量200μmol·kg^-1小鼠体重，每天注射2次的条件下，小鼠仍无明显体内毒性现象。因此，可以知晓所制备的介孔硅纳米颗粒及其载药复合物具有良好的体内生物相容性，无明显体内毒副作用。

实施例8

本实施例对上述实施例所制备的介孔硅纳米颗粒及其载药复合物进行了体外抗炎活性效果测试。

具体实施过程为：体外培养HaCaT细胞，通过在培养液中加入脂多糖(LPS)诱导产生炎症。添加脂多糖添加浓度：1～7.5μg/ml或10μM，处理4h(ELISA实验)，或4h(WB实验)以细胞培养时换液的形式加药。按上述安全浓度进行抗炎活性实验。5只直径100mm的培养皿分别编号1～5，对应空白对照组(Con)、阳性对照组(TPA)、材料组(MSNs)、实验组1(5-DN)、实验组2(MSNs@5-DN)组。待HaCaT细胞生长至对数期且汇合度在50％～70％，实验前添加LPS诱导炎症，再依次添加对应药物处理20h。分别收集细胞总RNA和蛋白进行qPCR实验检测细胞炎症和生长因子IL-6、IL-8、TNF-α、IFN-γ、TGF-β和miR-146a等mRNA转录水平，用WB实验检测促炎症因子TNF-α和抗炎症因子TGF-β两种蛋白表达水平。

实施例9

本实施例对上述实施例所制备的介孔硅纳米颗粒及其载药复合物进行了小鼠银屑病样皮肤损伤模型试验。

具体实施过程为：将6-8周龄的小鼠随机分为5组，每组5只小鼠，共25只小鼠购到货后先在动物房适宜性培养一周，按表3方案每天给药2次(8:00和16:00)，每次加药前，先注射佛波酯(TPA)诱导银屑病样皮肤损伤。每天除空白对照组Con组每次进行耳皮内注射15μl乙醇外，其余4组小鼠第一次给药时先耳皮内注射体积为15μl含4.5nmol的TPA的诱导的小鼠皮肤银屑病样损伤，10min后注射对应药物。第二次给药时，注射TPA后间隔1h，再分别为空白对照组(Con)、阳性对照组(TPA)、材料组(MSNs)、实验组1(5-DN)、实验组2(MSNs@5-DN)组进行耳皮内注射给药。其中空白对照组加等体积乙醇为空白对照，其他组分别注射乙醇溶解的药品。给药实验持续4天后处死小鼠，所有小鼠均采集左右耳表皮，并抽取血液，最终检测时每组随机选择5只小鼠的样本进行检测。分别取小鼠耳表皮组织进行HE染色观察病理形态，分别收集细胞总RNA和蛋白进行qPCR实验检测细胞炎症和生长因子IL-6、IL-1β、IFN-γ、TNF-α、TGF-β和miR-17-5p等mRNA转录水平，用WB实验检测TNF-α和TGF-β两种蛋白表达水平。

见图6可知，所制备的介孔硅纳米颗粒载药复合物具有显著的抑制炎症因子表达活性，对小鼠银屑样皮肤损伤有良好治疗效果。

Claims (5)

1.一种羧基化介孔硅纳米载药复合物的制备方法，其特征在于，先制备氨基化中空介孔硅纳米颗粒，再在颗粒表面进行羧基化修饰和活化，然后通过酰胺化缩合反应修饰多聚阳离子化合物，制备得到介孔硅纳米递送载体；再在介孔硅纳米递送载体上负载多甲氧基黄酮类化合物得到羧基化介孔硅纳米载药复合物；

所述介孔硅的氨基化和羧基化修饰过程为：称取50 mg的介孔硅纳米材料分散在50 mL的乙醇中，随后加入100 μL的APTES，78℃回流4 h，水洗离心三次，最后将氨基化的MSNs在真空冷冻干燥仪中干燥得到MSNs-NH₂；称取400 mg的MSNs-NH₂和600 mg的琥珀酰酐，分散于40 mL的无水乙醇中，室温搅拌24 h后，先后用乙醇和水各离心洗涤3次，真空冷冻干燥后得到MSNs-COOH；

所述多聚阳离子化合物为支链型聚乙烯亚胺；所述多甲氧基黄酮类化合物为5-DN。

2.如权利要求1所述的羧基化介孔硅纳米载药复合物的制备方法，其特征在于，修饰多聚阳离子化合物的过程为：称取10 mg的羧基化介孔硅粉末，分散于2.5 mL的DMSO中，依次加入6 mg的EDC和18 mg的NHS，避光室温搅拌2 h以活化羧基；将反应液在10000 rpm×10min条件下离心后重悬浮于乙醇中，加入2.5 mg的PEI继续室温避光搅拌3 h后，10000 rpm×10 min条件下离心，依次用无水乙醇和蒸馏水各离心洗涤3次，将得到的沉淀进行真空干燥过夜，即得到PEI-MSNs。

3.如权利要求2所述的羧基化介孔硅纳米载药复合物的制备方法，其特征在于，在介孔硅纳米递送载体上负载多甲氧基黄酮类化合物具体过程为：称取50 mg的5-DN溶于40 mL的无水乙醇，再加入50 mg的PEI-MSNs，充分搅拌均匀，在摇床上以120 rpm的转速室温反应2h后，将混合物置于12000 rpm转速下离心10 min，得到载药复合物沉淀；沉淀依次用乙醇和水离心洗涤3次，真空冷冻干燥，得到载药复合物备用。

4.一种如权利要求1-3任一项所述方法制备的羧基化介孔硅纳米载药复合物。

5.如权利要求4所述的羧基化介孔硅纳米载药复合物在制备提高治疗银屑病效果中的药物中的应用。