CN110302174A

CN110302174A - 一种基于对香豆酸聚合物的纳米递药体系及其制备方法和应用

Info

Publication number: CN110302174A
Application number: CN201910516849.7A
Authority: CN
Inventors: 吴钧; 王丽英; 游欣如; 黄丽萍
Original assignee: Sun Yat Sen University
Current assignee: Sun Yat Sen University
Priority date: 2019-06-14
Filing date: 2019-06-14
Publication date: 2019-10-08

Abstract

本发明公开了一种基于对香豆酸聚合物的纳米递药体系及其制备方法和应用。本发明以天然酚酸对香豆酸作为单体，通过溶液缩聚法合成了生物相容性良好、生物可降解的聚合物PCA；基于聚合物PCA，通过纳米沉淀法制备了PCA纳米递药体系，该体系尺寸均一，性质稳定，可有效负载疏水性抗癌药物并提高其生物利用度，显著增强体内外的抗肿瘤治疗效果，同时减少药物的毒副作用。此外，聚合物载体本身也展示出一定的抗肿瘤活性，可辅助增强抗癌药物的疗效，开辟了对香豆酸在抗肿瘤应用领域的新途径。本发明所涉及的聚合物及其纳米递药体系的制备方法均具有反应操作易、反应步骤少、反应周期短、重复性高等优势。

Description

一种基于对香豆酸聚合物的纳米递药体系及其制备方法和应用

技术领域

本发明属于生物医用材料技术领域。更具体地，涉及一种基于对香豆酸聚合物的纳米递药体系及其制备方法和应用。

背景技术

癌症已经成为全球范围内主要的死亡原因之一。据预测，2030年将新增2100万癌症病例，死亡人数高达1320万。目前，化疗仍然是癌症的主要治疗手段之一。然而，化疗药物普遍存在毒副作用大、多药耐药性、生物利用度低等缺陷，严重影响了患者的生活质量，极大地限制了临床应用。造成化疗药物生物利用度低的原因主要是大部分化疗药物是疏水性药物，难以制备成合适的剂型，往往需要借助潜溶媒、助溶剂等各种辅料来提高溶解度。而很多常用的辅料如吐温80、聚氧乙烯蓖麻油等大都缺乏足够的生物安全性，容易对人体造成额外的不良反应，导致患者顺应性低、药物疗效差。因此，如何提高化疗药物的生物利用度并减轻其毒副作用是一个亟待解决的问题。

近年来纳米递送体系的高速发展为化疗药物面临的困境提供了新的解决思路。基于纳米递药体系的抗癌药物可以被动或主动地靶向至肿瘤细胞，延长体内循环时间，提高药物在肿瘤部位的有效浓度，从而提高药物的生物利用度并降低其不良反应。目前，FDA已经批准多种纳米抗癌药物进入临床试验或临床使用，如BIND-014、Abraxane等。构建纳米递送体系的关键之一是选择生物相容性良好、生物可降解、性质可调控的载体材料。目前广大科研工作者还在不断探索合适的药物载体，包括脂质体、蛋白质、聚合物和无机物等。其中聚合物载体凭借其良好的生物相容性、生物可降解性及可控的理化性质等优势成为当今的研究热点。申请号为CN201410851243.6的中国发明专利，公开了一种药物缓控释型聚酯载药纳米粒及其制备方法，采用脂肪族二元醇和脂肪族二元酸或酸酐制得不饱和聚酯，通过辐射交联实现药物包封，制得的纳米粒粒径为50～1000nm，可以定时定量释放药物，药物被包埋在聚酯纳米粒子内使药物的稳定性高，但该载药纳米粒粒径分布广，不利于导向靶细胞，影响药物的定量释放以及药物的靶向治疗。

对香豆酸是一种天然存在的酚酸类物质，广泛存在于蔬菜、水果、谷物及多种中药中。研究表明，对香豆酸具有多种药理活性，包括抗氧化、抗炎、免疫调节、抗溃疡、抗血小板甚至抗肿瘤活性等。然而由于对香豆酸具有活性高、易氧化、光敏感、在消化道中易被氧化失去原有活性的特点，在食品和保健品的加工、贮藏、销售等过程中容易降解，从而原有的活性功能，大大限制了其在食品和保健品中的添加和应用。中国专利文献CN109699999A公开了一种直链淀粉包埋对香豆酸以提高其稳定性和肠道中释放量的方法，通过酯化反应将对香豆酸与十六烷醇连接形成对香豆酸十六酯，从而实现了直链淀粉包埋对香豆酸，所形成的包埋物经过紫外光直接照射72h后，保留率高达89％；而不包埋的对香豆酸经同条件处理后保留率仅43％。该包埋方法显著提高了对香豆酸的光稳定性，在食品加工、贮藏和销售过程中能起到有效保护作用，且能提高其在肠道中的释放，有利于在人体中的消化吸收和利用。目前，越来越多的研究聚焦于对香豆酸的抗肿瘤作用，但是关于对香豆酸作为纳米载体的研究还未见诸报道，有待挖掘。

发明内容

本发明要解决的技术问题是克服上述现有技术的缺陷和不足，提供一种基于对香豆酸聚合物的纳米药物递送体系。本发明以天然物质对香豆酸为单体，通过溶液缩聚法合成了一种对香豆酸聚合物PCA；通过纳米沉淀法以聚合物PCA作为载体构建了疏水抗癌药物的纳米递药体系。该纳米递药体系实现了对抗癌药物的有效负载，提高了药物的生物利用度，显示出良好的体内外抗肿瘤活性，而且纳米载体本身也具有一定的抗肿瘤活性，拓展了对香豆酸在肿瘤治疗方面的应用。

本发明的第一个目的是提供一种基于天然酚酸对香豆酸的聚合物PCA。

本发明的第二个目的是提供上述聚合物PCA的制备方法。

本发明的第三个目的是提供一种基于上述聚合物PCA的纳米递药体系。

本发明的第四个目的是提供上述纳米递药体系的制备方法。

本发明的第五个目的是提供上述纳米递药体系在制备抗肿瘤药物中的应用。

本发明上述目的通过以下技术方案实现：

一种以天然酚酸对香豆酸作为单体的聚合物PCA，所述聚合物PCA的结构式如下式(I)所示：

其中，n＝2～30。

本发明聚合物PCA属于聚酯类材料，可在体内酯酶的作用下发生酶降解或在肿瘤部位的偏酸性环境下发生酸降解，降解产物为安全无毒的对香豆酸，是一种生物可降解性和生物相容性优良的载体材料。

本发明还提供了所述聚合物PCA的制备方法，以氯化亚砜(SOCl₂)作为催化剂，将对香豆酸溶于有机溶剂中，通过溶液缩聚反应，制备得到聚合物PCA。

合成路径如下：

优选地，所述对香豆酸和SOCl₂的摩尔比为1：1～5。

更优选地，对香豆酸和SOCl₂的摩尔比是1：2。

优选地，所述有机溶剂选自丙酮、甲醇、三乙胺、四氢呋喃、吡啶或二甲基甲酰胺中的一种或多种。

更优选地，所述有机溶剂为吡啶或三乙胺。如果所用有机溶剂为吡啶，可加入适量稀盐酸进行超声洗涤沉淀，有助于更彻底地除去残留吡啶。

优选地，SOCl₂与有机溶剂的体积比为0.2～0.8：10。

更优选地，SOCl₂与有机溶剂的体积比为0.2～0.4：10。

优选地，所述聚合物PCA的制备方法，包括以下步骤：将有机溶剂置于冰浴中预冷，然后逐滴加入氯化亚砜(SOCl₂)，搅拌后加入对香豆酸粉末，待粉末溶解后撤掉冰浴，在常温下反应；反应结束后，将混合溶液逐滴加入搅拌的超纯水中沉淀析出，抽滤后再用超纯水反复洗涤多次后冻干，得到聚合物产物。

优选地，所述冰浴条件为0～4℃的冰浴。

优选地，有机溶剂的预冷时间为5～10min，SOCl₂加入后至对香豆酸粉末加入前的搅拌时间为10～15min。

优选地，搅拌速度为300～600rpm。

优选地，室温下反应0.5～4h。

优选地，室温下反应1～2h。

优选地，所述室温为23～27℃。

优选地，所用有机溶剂为吡啶；抽滤后再用超纯水和稀盐酸超声洗涤2～3次。如果所用有机溶剂为吡啶，加入适量稀盐酸进行超声洗涤沉淀，有助于更彻底地除去残留吡啶。

更优选地，所用稀盐酸浓度为0.01M，超声时间为15～30min。超声时间不宜过长，否则容易导致聚合物发生酸降解。

优选地，控制聚合物PCA的分子量为2000～5000。

本发明还提供了所述聚合物PCA在制备纳米递药体系中的应用。

用本发明聚合物PCA装载药物的纳米递药体系有良好的稳定性，载药纳米粒的粒径在200nm以下，该纳米尺寸可促进载药纳米粒在肿瘤部位的被动靶向、渗透和富集，进一步增强抗癌药物疗效的同时有效减轻药物对正常细胞的毒副作用。

本发明还提供了一种基于所述聚合物PCA的纳米递药体系的制备方法，包括以下步骤：将聚合物PCA、药物、稳定剂分别溶解于溶剂中配成相同浓度的溶液，然后将聚合物PCA溶液与药物溶液按体积比5～19：1混合，得到混合液；所述混合液与稳定剂溶液再按1：0.25～1的体积比混合得到油相；将油相滴加到水相中，搅拌混合，超滤离心，得到装载有药物的纳米粒，即为所述纳米递药体系。

优选地，所述水相选自去离子水、蒸馏水或超纯水。

优选地，所用超滤管的截留分子量为100000，超滤次数为2～3次，超滤转速为2500～3000rpm，超滤时间为12～20min。

优选地，所述纳米粒的粒径为80～200nm。

更优选地，所述纳米粒的粒径为83nm。

优选地，所述溶剂为二甲基甲酰胺、丙酮、乙腈或二甲基亚砜中的一种或多种。

更优选地，所述溶剂为二甲基亚砜。

优选地，所述药物为疏水性抗肿瘤药物。

更优选地，所述药物为紫杉醇、多西他赛、喜树碱、阿霉素或甲氨喋呤等疏水性抗肿瘤药物中的一种或多种。

优选地，所述稳定剂为不同分子量的二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇(DSPE-PEG，其中PEG的分子量为1000～5000)。

更优选地，所述稳定剂DSPE-PEG 2k或DSPE-PEG 3k。

优选地，聚合物PCA、药物以及稳定剂的浓度均为5～20mg/mL。

更优选地，聚合物PCA、药物以及稳定剂的浓度均为10mg/mL。

优选地，聚合物PCA溶液与药物溶液的体积比为4～19：1。

更优选地，聚合物PCA溶液与药物溶液的体积比5：1。

优选地，稳定剂的含量为聚合物PCA与药物总量的25％～100％(优选50％)。

优选地，有机相与水相的比例为1：10～20(优选1：10)。

优选地，所述搅拌速度为800～1400rpm。

优选地，滴加完有机相后继续搅拌30s～1min。

相应地，采用上述制备方法制得的基于聚合物PCA的纳米递药体系，及其在制备治疗癌症药物中的应用，也在本发明的保护范围之内。

优选地，所述癌症包括乳腺癌、前列腺癌、结直肠癌、肺癌、卵巢癌、胃癌、肝癌、甲状腺癌、头颈部鳞癌或睾丸癌中的一种或多种。

优选地，所述纳米递药体系的给药方式为尾静脉注射给药。

与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

(1)本发明以天然酚酸对香豆酸作为单体，利用溶液缩聚法使得对香豆酸本身的酚羟基和羧基发生酯化反应得到新型聚合物PCA，制备过程简单方便、重现性高、成本低廉，具有反应操作易、反应步骤少、反应周期短、重复性高等优势。

(2)本发明所制备的聚合物PCA属于聚酯类材料，可在体内酯酶的作用下发生酶降解或在肿瘤部位的偏酸性环境下发生酸降解，降解产物为安全无毒的对香豆酸，是一种生物可降解性和生物相容性优良的载体材料。

(3)本发明基于聚合物PCA，利用纳米沉淀法成功制备了载药纳米粒，该法操作简单、重现性好；所制备的纳米粒有效负载疏水性抗癌药物，并提高了疏水性抗癌药物的溶解度；载药纳米粒尺寸均一，稳定性好；参与纳米粒构成的DSPE-PEG有助于纳米粒逃离网状内皮系统的清除，延长其体内循环时间，而且纳米尺寸的优势可促进载药纳米粒在肿瘤部位的被动靶向、渗透和富集，进一步增强抗癌药物疗效的同时有效减轻药物对正常细胞的毒副作用。

(4)本发明所制备的聚合物PCA作为纳米载体材料，继承了对香豆酸单体本身的抗肿瘤活性，表现出肿瘤生长抑制作用，与抗癌药物联用具有更好的治疗效果，开辟了对香豆酸在抗肿瘤应用方面的新途径，为癌症治疗提供了一种新的选择。

附图说明

图1为本发明实施例中原料单体CA及合成聚合物PCA的核磁氢谱图。

图2是发明实施例中原料单体CA及合成聚合物PCA的红外吸收光谱图

图3是本发明实施例中制备的载药纳米粒DTX@PCA NPs的透射电镜图。

图4是本发明实施例中制备的PCA空白纳米粒及载药纳米粒DTX@PCANPs在PBS中的稳定性表征。

图5是本发明实施例中制备的载药纳米粒DTX@PCA NPs对小鼠结直肠癌的体外抗肿瘤活性。

图6是本发明实施例中制备的载药纳米粒DTX@PCA NPs体内抗肿瘤效果评价。

具体实施方式

以下结合说明书附图和具体实施例来进一步说明本发明，但实施例并不对本发明做任何形式的限定。除非特别说明，本发明采用的试剂、方法和设备为本技术领域常规试剂、方法和设备。

除非特别说明，以下实施例所用试剂和材料均为市购。

实施例1 聚合物PCA的制备

1、聚合物PCA的制备方法，包括以下步骤：

将10mL有机溶剂吡啶加入50mL圆底烧瓶并置于0℃冰浴中预冷5min，然后逐滴加入0.4mL(6mmol)的SOCl₂，300rpm搅拌10min后加入3mmol对香豆酸粉末，待粉末溶解后撤掉冰浴，在常温下继续反应1h；反应结束后，将混合溶液逐滴加入搅拌的超纯水中沉淀析出，抽滤后重悬于0.01M稀盐酸中超声15min，然后再用超纯水反复洗涤多次后冻干，得到红褐色的聚合物产物，即为聚合物PCA；聚合物PCA的分子量为2000～5000。

制备原料中的有机溶剂吡啶可以用其它有机溶剂，如丙酮、甲醇、三乙胺、四氢呋喃或二甲基甲酰胺等所代替，其中采用碱性有机溶剂吡啶或三乙胺制备得到的聚合物PCA较好。

2、结果

图1是对香豆酸CA及其聚合物PCA的核磁氢谱图。经核磁分析，单体对香豆酸CA的酚羟基和羧基的质子吸收峰位移分别在10.02ppm和12.18ppm处，而在聚合物PCA的谱图中并未观察到这两种吸收峰，说明酚羟基和羧基成功发生了酯化反应。

图2是对香豆酸CA及其聚合物PCA的红外吸收光谱图。经红外分析，单体对香豆酸CA谱图上3378cm^-1和1677cm^-1处的特征吸收峰分别为酚羟基和羧基的特征吸收峰，而在聚合物PCA的谱图上，酚羟基特征吸收峰消失，羧基的特征吸收峰转化为1723cm^-1处的酯键特征吸收峰，进一步证明了聚合物PCA的成功合成。

实施例2 一种基于聚合物PCA的DTX@PCA NPs纳米递药体系的制备

1、DTX@PCA NPs纳米递药体系的制备，包括以下步骤：

(1)将聚合物PCA、疏水性抗肿瘤药物——多西他赛(DTX)及DSPE-PEG(PEG分子量为2000～3000)分别溶于溶剂二甲基亚砜(DMSO)中，配成10mg/mL的溶液，然后按5：1：3体积比混合，控制DSPE-PEG含量为聚合物PCA和DTX总含量的50％；得到有机相；

(2)将0.6mL有机相逐滴加入6mL处于搅拌状态的超纯水中，搅拌速度为1000rpm；滴加完继续搅拌30s，然后将纳米粒溶液转移至截留分子量为100000的超滤管中，3000rpm下离心15min，重复两次，得到装载有药物DTX的纳米粒(DTX@PCA NPs)，即为所述纳米递药体系。

制备原料中的溶剂二甲基亚砜可以用其它有机溶剂，如二甲基甲酰胺、丙酮、乙腈等所代替，亦得到相同的结果。

2、结果

(1)利用透射电镜表征所制备纳米粒的形态，结果如图3所示：载药纳米粒DTX@PCANPs呈均一、分散的球形结构，粒径范围为100～120nm。

(2)利用动态光散射表征纳米粒的稳定性，结果如图4所示，空白纳米粒PCA NPs及载药纳米粒DTX@PCA NPs在PBS中均能保持长时间(7天)的稳定性。

实施例3 纳米递药体系(DTX@PCA NPs)的体外抗肿瘤活性

利用MTT法测试，实施例2制备得到的纳米递药体系DTX@PCA NPs的体外抗肿瘤活性。

1、方法

按5000个/孔的密度将小鼠结直肠癌细胞(CT26细胞)接种于96孔板中，培养过夜后弃去培养基并加入含不同浓度载药纳米粒(DTX@PCA NPs)的新鲜培养基，24h后加入MTT孵育4h，然后弃去培养基并加入DMSO充分溶解结晶，最后利用酶标仪测量每孔在490nm处的吸光度并计算细胞活力。

2、结果

图5是不同浓度的普通多西他赛(DTX)、载药纳米粒DTX@PCA NPs培养24h后的癌细胞活性。由图5中可看出，随着药物浓度的升高，癌细胞活力随之降低，而且相比于游离的药物多西他赛(DTX)，载药纳米粒DTX@PCA NPs对癌细胞增殖具有更强的抑制作用，说明纳米递药体系DTX@PCA NPs可以有效提高疏水性抗肿瘤药物的体外抗肿瘤活性。

实施例4 纳米递药体系(DTX@PCA NPs)的体内抗肿瘤活性

利用荷瘤小鼠评价纳米递药体系DTX@PCA NPs的体内抗肿瘤活性。

1、方法

将CT26细胞悬液注射至小鼠皮下，构建皮下移植瘤模型。待小鼠肿瘤体积达到100mm³左右随机分成四组，分别通过尾静脉注射以下药物：0.9％生理盐水、空白纳米粒PCANPs、DTX注射液、载药纳米粒DTX@PCA NPs，其中药物剂量为5mg/kg，每三天给一次药，每两天测量一次小鼠肿瘤体积。

2、结果

图6是各组小鼠的肿瘤体积增长曲线图。由图6中可看出，注射生理盐水的对照组肿瘤体积以指数形式快速增长，游离的DTX和载药纳米粒DTX@PCANPs均可有效抑制住肿瘤的迅速增长。而且，与游离的DTX相比，载药纳米粒DTX@PCA NPs具有显著的抑制效果和更小的毒副作用。此外，空白纳米粒PCANPs本身在一定程度上也抑制了肿瘤的生长。因此，本发明制备的纳米递药体系DTX@PCA NPs具有显著的抗肿瘤活性，在肿瘤治疗领域具有相当的应用潜力。

实施例5 聚合物PCA的制备

其他条件与实施例1相同，唯一不同之处在于，SOCl₂的投入量为0.6mL。

实施例6 聚合物PCA的制备

其他条件与实施例1相同，唯一不同之处在于：将3mmol氯化亚砜与3mmol对香豆酸粉末投入圆底烧瓶进行反应。

实施例7 聚合物PCA的制备

其他条件与实施例1相同，唯一不同之处在于：加入对香豆酸粉末后，继续在常温下反应2h。

实施例8 纳米递药体系DTX@PCA NPs的制备

其他条件同实施例2，唯一不同之处在于：聚合物PCA、DTX及DSPE-PEG分别溶于DMSO溶液后配成15mg/mL的溶液。

实施例9 纳米递药体系DTX@PCA NPs的制备

其他条件与实施例2相同，唯一不同之处在于：聚合物PCA、DTX和DSPE-PEG溶液按照9：1：5的体积比混合后，再逐滴加入超纯水中。

实施例10 纳米递药体系DTX@PCA NPs的制备

其他条件与实施例2相同，唯一不同之处在于：DSPE-PEG含量为聚合物PCA和DTX总含量的75％。

实施例11 纳米递药体系DTX@PCA NPs的制备

其他条件与实施例2相同，唯一不同之处在于：DSPE-PEG含量为聚合物PCA和DTX总含量的25％。

实施例12 对香豆酸与氯化亚砜的摩尔比对聚合物PCA产率及分子量的影响

考察对香豆酸与氯化亚砜的不同摩尔比对聚合物产率及分子量的影响，结果如表1所示。

表1对香豆酸与氯化亚砜的摩尔比对聚合物产率及分子量的影响

PDI：Polymer dispersity index，是聚合物分散性指数，用于描述聚合物分子量分布。

由表1可知，随着氯化亚砜投入比例的增加，所制备的聚合物PCA产率、分子量及分子量多分散性指数(PDI)都是先增加然后减少；在对香豆酸与氯化亚砜的摩尔比为1:2时，产率最高，聚合物分子量最大，PDI虽然最大但也处于一个相对集中的分布水平。

实施例13 载药比对DTX@PCA NPs的粒径及载药量的影响

考察载药比，即聚合物PCA与药物的质量比，对DTX@PCA NPs的粒径及载药量的影响，结果如表2所示。

表2载药比对DTX@PCANPs的粒径及载药量的影响

PDI：Polydispersity index，是多分散性指数，用于描述纳米粒粒径分布的均一性。

由表2可知，随着载药比的增大，即载体材料比例的增大，DTX@PCANPs的载药量随之减少，在载药比为5：1的条件下，DTX@PCANPs具有最高的载药量及最优的粒径，这可能是因为大比例的药物投入有助于形成更加紧密的疏水核心结构，从而提高药物的负载率并减小载药纳米粒的粒径。

上述实施例中，所述疏水性抗肿瘤药物除可以选择多西他赛外，也可以选择紫杉醇、喜树碱、阿霉素或甲氨喋呤等疏水性抗肿瘤药物，亦得到相同的结果。对乳腺癌、前列腺癌、结直肠癌、肺癌、卵巢癌、胃癌、肝癌、甲状腺癌、头颈部鳞癌或睾丸癌等多种癌症均有较好的治疗效果，实际应用中，可根据具体病症选择相应的抗癌药物与聚合物PCA按照本发明的方法合成纳米递药体系，增强癌症的治疗效果。

申请人声明，以上具体实施方式为便于理解本发明而说明的较佳实施例，但本发明并不局限于上述实施例，即不意味着本发明必须依赖上述实施例才能实施。所属技术领域的技术人员应该明了，对本发明的任何改进，对本发明所选用原料的等效替换及辅助成分的添加、具体方式的选择等，均落在本发明的保护范围和公开范围之内。

Claims

1.一种以对香豆酸作为单体的聚合物PCA，其特征在于，所述聚合物PCA的结构式如下式(I)所示：

其中，n＝2～30。

2.权利要求1所述聚合物PCA的制备方法，其特征在于，以氯化亚砜(SOCl₂)作为催化剂，将对香豆酸溶于有机溶剂中，通过溶液缩聚反应，制备得到聚合物PCA。

3.根据权利要求2所述聚合物PCA的制备方法，其特征在于，所述对香豆酸和SOCl₂的摩尔比为1：1～5；所述有机溶剂选自丙酮、甲醇、三乙胺、四氢呋喃、吡啶或二甲基甲酰胺中的一种或多种；SOCl₂与有机溶剂的体积比为0.2～0.8：10。

4.根据权利要求3所述聚合物PCA的制备方法，其特征在于，反应条件为：搅拌速度为300～600rpm，室温下反应0.5～4h。

5.根据权利要求4所述聚合物PCA的制备方法，其特征在于，控制聚合物PCA的分子量为2000～5000。

6.权利要求1所述聚合物PCA在制备纳米递药体系中的应用。

7.一种基于权利要求1所述聚合物PCA的纳米递药体系的制备方法，其特征在于，将聚合物PCA、药物、稳定剂分别溶解于溶剂中配成相同浓度的溶液，然后将聚合物PCA溶液与药物溶液按体积比5～19：1混合，得到混合液；所述混合液与稳定剂溶液再按1：0.25～1的体积比混合得到油相；将油相滴加到水相中，搅拌混合，超滤离心，得到装载有药物的纳米粒，即为所述纳米递药体系。

8.根据权利要求7所述纳米递药体系的制备方法，其特征在于，所述水相选自去离子水、蒸馏水或超纯水；聚合物PCA、药物以及稳定剂的浓度均为5～20mg/mL；所用超滤管的截留分子量为100000，超滤次数为2～3次，超滤转速为2500～3000rpm，超滤时间为12～20min；所述纳米粒的粒径为80～200nm。

9.采用权利要求7或8所述制备方法制得的基于聚合物PCA的纳米递药体系。

10.权利要求9所述的载药纳米粒在制备治疗癌症药物中的应用。