CN115915958A - 无酒精啤酒风味饮料 - Google Patents
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Abstract
本发明的目的在于提供一种饱满度得到增强的饮料,尤其提供一种饱满度得到增强的无酒精啤酒风味饮料。本发明涉及一种无酒精啤酒风味饮料,其特征在于,2’‑脱氧腺苷的浓度为1ppm以上。
Description
技术领域
本发明涉及无酒精啤酒风味饮料。
背景技术
伴随近年来消费者嗜好的多样化,期待开发出具有各种各样的香味特征的无酒精啤酒风味饮料。
专利文献1中公开有,为了改善啤酒风味饮料的香味,而含有特定的分子量的肽。
专利文献
专利文献1:日本特开2016-149975号公报
发明内容
专利文献1中记载有,使用啤酒般的味道、丝滑流畅的口感、残留于口内的颗粒感等指标作为饮料的评价指标,通过含有规定浓度的10-20kDa的肽,可获得一种基于这些指标的感官评价分数较高的饮料。
在此,作为饮用啤酒风味饮料后即刻感知到的味觉,是一种难以通过5个基本味,即甜味、盐味、酸味、苦味及鲜味(umami)来表达的味觉,有时味的强度、延展性、浓厚度、味的持续性或味强度的均衡性等特征会受到青睐。在本说明书中,将这种特征称为“饱满度”。
专利文献1中所记载的饮料,从饱满度的角度来看,可以说是进一步具有改良余地的饮料,因此期望一种可增强饱满度的方法。
本发明的目的在于提供一种饱满度得到增强的饮料。尤其提供一种饱满度得到增强的无酒精啤酒风味饮料。无酒精啤酒风味饮料由于存在缺乏饱满度的倾向,因此是特别期待增强饱满度的饮料。
即,本发明涉及以下的无酒精啤酒风味饮料。
[1]一种无酒精啤酒风味饮料,其特征在于,2’-脱氧腺苷的浓度为1ppm以上。
[2]根据上述[1]所述的无酒精啤酒风味饮料,其特征在于,2’-脱氧腺苷的浓度为1~10ppm。
[3]根据上述[1]或[2]所述的无酒精啤酒风味饮料,其特征在于,进一步含有分子量35~50kDa的蛋白质,所述蛋白质的浓度为5ppm以上。
[4]根据上述[3]所述的无酒精啤酒风味饮料,其特征在于,所述蛋白质的浓度为30ppm以下。
根据本发明,可提供一种饱满度得到增强的无酒精啤酒风味饮料。
具体实施方式
本发明的无酒精啤酒风味饮料,可以是原料中含有麦芽的饮料,也可以是原料中不含麦芽的饮料(原料中的麦芽比率为0重量%)。
此处所谓的原料,是指水和啤酒花以外的谷物原料及糖类。
酸味剂、甜味剂、苦味剂、调味料、香料等可微量添加的成分不包含于原料中。
原料中含有麦芽的情况下,作为原料,除了麦芽以外,还可以含有米、玉米、高粱、马铃薯、淀粉、麦芽以外的麦。本发明的无酒精啤酒风味饮料的提取物成分的重量无特别限定,优选为0.01~20.0重量%。
所谓的“原料中不含麦芽”,是指麦芽在麦芽、米、玉米、高粱、马铃薯、淀粉、豆类等植物蛋白质、麦芽以外的麦以及糖类等水和啤酒花以外的原料中所占的重量的比率为0。
原料中不含麦芽的情况下,优选主要含有大豆蛋白分解物作为原料。
此外,原料中不含麦芽的情况下,后述的分子量35~50kDa的蛋白质即使是来自麦芽的蛋白质,其使用也得到许可。
本发明的无酒精啤酒风味饮料,优选为并非脱酒精啤酒风味饮料。所谓脱酒精啤酒风味饮料,是指从啤酒风味酒精饮料中去除酒精而制造的无酒精啤酒风味饮料。
所谓无酒精啤酒风味饮料,是酒精度数小于1%的啤酒风味饮料,优选实质上不含酒精。此外,酒精度数也可以为0%。
所谓啤酒风味饮料,是啤酒风味的碳酸饮料。
此处,实质上不含酒精的形式的饮料,并不排除含有无法检测出的程度的极微量的酒精的饮料。酒精度数通过四舍五入达到0.0%的饮料,其中,酒精度数通过四舍五入达到0.00%的饮料,也包含在无酒精啤酒风味饮料中。作为本发明的无酒精啤酒风味饮料的种类,例如包含无酒精的啤酒风味饮料、啤酒风味的清凉饮料等。另外,此处的“酒精度数(酒精含量)”是指乙醇的含量,并不包含乙醇以外的脂肪族醇的含量。
本发明涉及的无酒精啤酒风味饮料的酒精度数,是指饮料中的酒精成分的含量(v/v%),其可通过公知的任一种方法进行测定,例如,可通过振动式密度计进行测定。具体而言,可制备通过过滤或超声波处理而从饮料中除去二氧化碳的样本,然后对该样本进行直火蒸馏,测定所得馏出液在15℃下的密度,通过使用日本国税厅规定分析法(平19国税厅训令第6号,平成19年(2007年)6月22日修订)的附表“第2表酒精成分和密度(15℃)及比重(15/15℃)换算表”进行换算求取。酒精度数小于1.0%的情况下,可使用市售的酒精测定装置或气相色谱法。
本发明的无酒精啤酒风味饮料中含有2’-脱氧腺苷。2’-脱氧腺苷是脱氧核糖核苷的一种。本说明书中,有时将2’-脱氧腺苷表述为2’DA。
本发明的无酒精啤酒风味饮料中,2’-脱氧腺苷的浓度为1ppm以上。
2’-脱氧腺苷的浓度为1ppm以上时,可增强无酒精啤酒风味饮料中的饱满度。含有规定浓度以上的2’-脱氧腺苷与无酒精啤酒风味饮料中的饱满度相关这一事实,迄今为止并不知晓,是本发明者们发现的见解。
本发明的无酒精啤酒风味饮料中,2’-脱氧腺苷的浓度优选为10ppm以下。
在本发明的无酒精啤酒风味饮料中,2’-脱氧腺苷的浓度优选为2ppm以上,更优选为6ppm以上。
在一种方式中,无酒精啤酒风味饮料中的2’-脱氧腺苷的浓度优选1~10ppm,更优选2~10ppm,进一步优选6~10ppm。
此外,在本发明的无酒精啤酒风味饮料中,进一步包含分子量35~50kDa的蛋白质,上述蛋白质的浓度优选为5ppm以上。
分子量35~50kDa的蛋白质,是将无酒精啤酒风味饮料供于SDS-PAGE电泳时,在分子量35~50kDa的区域所观察到的蛋白质。将无酒精啤酒风味饮料供于SDS-PAGE电泳之前,例如作为预处理,可使用30kDa的截止膜对无酒精啤酒风味饮料进行超细过滤。
上述蛋白质,优选分子量为35~45kDa的蛋白质,更优选为约40kDa的蛋白质。在本说明书中,分子量35~50kDa的蛋白质也称作40kDa蛋白质。
40kDa蛋白质优选为来自谷类的蛋白质。
上述谷类优选为选自大麦、小麦、玉米、水稻及大豆中的至少1种。
此外,谷类为麦的情况下,可含有来自无酒精啤酒风味饮料的制造时所使用的公知的麦的蛋白质。作为这种麦,可列举:大麦、小麦、黑麦、野燕麦、燕麦等,优选为大麦。此外,可以为发芽麦、未发芽麦的任一种,优选为发芽麦的麦芽。这些可以单独含有,也可以组合含有2种以上。
此外,作为40kDa蛋白质,优选来自大麦(学名:Hordeum vulgare)的Serpin Z4(别名:BSZ4、HorvuZ4、Major endosperm albumin或Protein Z)、来自大麦的Serpin Z7(别名:BSZ7或HorvuZ7)。此外,在上述蛋白质中,可以是具有其氨基酸序列的部分氨基酸经缺失、取代、插入及/或附加的氨基酸序列的蛋白质。
除了2’-脱氧腺苷以外,通过进一步含有40kDa蛋白质,可进一步增强无酒精啤酒风味饮料中的饱满度。
此外,40kDa蛋白质的浓度优选为30ppm以下。
此外,同时含有2’-脱氧腺苷和40kDa蛋白质时,通过2’-脱氧腺苷与40kDa蛋白质的协同效应可有效增强无酒精啤酒风味饮料的饱满度。
以下示出一般无酒精啤酒风味饮料的制造工序。
因不具有基于酵母的发酵工序,故可容易地制造无酒精啤酒风味饮料。
在制造使用麦芽作为原料而制造的无酒精啤酒风味饮料时,首先,向含有除了麦芽等麦以外,根据需要含有其他谷物、淀粉、糖类、苦味剂或着色剂等原料及水的混合物中,根据需要添加淀粉酶等酶,通过进行糊化、糖化并过滤,而制成糖化液。根据需要将啤酒花或苦味剂等加入至糖化液中并煮沸,在澄清箱中去除凝固蛋白质等固体成分。作为该糖化液的代替,可以向已加入温水的麦芽提取物中加入啤酒花并煮沸。啤酒花可在煮沸开始至煮沸结束前的任意阶段进行混合。糖化工序、煮沸工序、固体成分去除工序等的条件,使用已知的条件即可。煮沸后,过滤所得的麦汁,向所得的过滤液中加入二氧化碳。然后,填充至容器中并经由杀菌工序得到目标无酒精啤酒风味饮料。
在制造不使用麦芽作为原料的无酒精啤酒风味饮料时,首先,将含有碳源的液糖、麦或麦芽以外的作为含有氨基酸材料的氮源、啤酒花、色素等,与温水一同混合,制成液糖溶液。将该液糖溶液煮沸。使用啤酒花作为原料时,啤酒花可不在煮沸开始前,而在煮沸过程中混合至该液糖溶液中。向煮沸后的液糖溶液中加入二氧化碳。然后,填充至容器中并经由杀菌工序而得到目标无酒精啤酒风味饮料。
从赋予本发明涉及的无酒精啤酒风味饮料以酒感的角度出发,可添加脂肪族醇。作为脂肪族醇,只要为公知的脂肪族醇则无特别限制,优选碳数4~5的脂肪族醇。在本发明中,作为优选的脂肪族醇,就碳数4的脂肪族醇而言,可列举:2-甲基-1-丙醇、1-丁醇等,就碳数5的脂肪族醇而言,可列举:3-甲基-1-丁醇、1-戊醇、2-戊醇等。这些可使用1种或将2种以上组合使用。
碳数4~5的脂肪族醇的含量优选为0.0002~0.0007质量%,更优选为0.0003~0.0006质量%。在本说明书中,脂肪族醇的含量可使用顶空气相色谱法进行测定。
对于本发明涉及的无酒精啤酒风味饮料而言,为了迎合近年来低热量的嗜好,期望其为低热量。因此,本发明涉及的无酒精啤酒风味饮料的热量值,优选小于5kcal/100mL,更优选小于4kcal/100mL,进一步优选小于3kcal/100mL。
本发明涉及的无酒精啤酒风味饮料中所含的热量值,基本依照日本健康增进法关联公布的“关于营养标示标准中的营养成分等的分析方法等”来计算。即,原则上,可通过所定量的各种营养成分的量,分别乘以各成分的能量换算系数(蛋白质:4kcal/g、脂质:9kcal/g、含糖物质:4kcal/g、食物纤维:2kcal/g、酒精:7kcal/g、有机酸:3kcal/g)的总和来计算。详细请参考“关于营养标示标准中的营养成分等的分析方法等”。
本发明涉及的无酒精啤酒风味饮料所含的各营养成分量的具体测定方法,依照日本健康增进法“关于营养标示标准中的营养成分等的分析方法等”中记载的各种分析法即可。或者通过委托财团法人日本食品分析中心,也可得知这种热量及/或各营养成分量。
本发明涉及的无酒精啤酒风味饮料中所含的含糖物质,是指基于食品的营养标示标准(平成15年(2003年)日本厚生劳动省告示第176号)的含糖物质。具体而言,含糖物质是指从食品中去除蛋白质、脂质、食物纤维、灰分、酒精成分及水分后的物质。此外,食品中的含糖物质的量通过从该食品的重量中扣除蛋白质、脂质、食物纤维、灰分及水分的量来计算。此时,蛋白质、脂质、食物纤维、灰分及水分的量根据营养标示标准揭示的方法来测定。具体而言,蛋白质的量通过氮定量换算法进行测定,脂质的量通过醚萃取法、氯仿及甲醇混液萃取法、盖勃氏法、酸分解法或罗兹-哥特里法(Rose-Gottlieb Method)进行测定,食物纤维的量通过高效液相色谱法或Prosky法进行测定,灰分的量通过乙酸镁添加灰化法、直接灰化法或硫酸添加灰化法进行测定,水分的量通过卡尔·费休法、干燥助剂法、减压加热干燥法、常压加热干燥法或塑料薄膜法进行测定。
本发明涉及的无酒精啤酒风味饮料,为了迎合近年来低糖物质的嗜好,可为低糖物质。因此,本发明涉及的无酒精啤酒风味饮料的含糖物质的含量可以小于2.5g/100mL,也可以小于0.5g/100mL。此外,不特别设定下限,通常为0.1g/100mL左右,例如可以为0.15g/100mL以上,也可以为0.2g/100mL以上。
本发明涉及的无酒精啤酒风味饮料可以含有酸味剂。作为酸味剂,优选使用选自柠檬酸、乳酸、磷酸及苹果酸中的1种以上的酸。此外,在本发明中,作为上述酸以外的酸,也可以使用琥珀酸、酒石酸、富马酸及冰醋酸等。这些只要是被批准可向食品中添加的物质即可,可无限制地使用。在本发明中,从适当赋予柔和的酸味的角度出发,优选使用与乳酸的组合,从适当赋予稍带刺激感的酸味的角度出发,优选使用与磷酸的组合。
在本发明涉及的无酒精啤酒风味饮料中,从赋予啤酒风味感的角度出发,酸味剂的含量以柠檬酸换算计,优选200ppm以上,更优选550ppm以上,进一步优选700ppm以上,此外,从酸味的角度出发,优选15000ppm以下,更优选5500ppm以下,进一步优选2000ppm以下。因此,在本发明中,酸味剂的含量,以柠檬酸换算计,可列举200ppm~15000ppm,优选为550ppm~5500ppm,更优选为700ppm~1500ppm等的合适范围。另外,在本说明书中,所谓柠檬酸换算量,是以柠檬酸的酸味度为标准由各酸味剂的酸味度换算的量,例如,与乳酸100ppm相当的柠檬酸换算量以120ppm,与磷酸100ppm相当的柠檬酸换算量以200ppm,与苹果酸100ppm相当的柠檬酸换算量以125ppm进行换算。
无酒精啤酒风味饮料中的酸味剂的含量,是指通过高效液相色谱法(HPLC)等进行分析所计算出的值。
在本发明涉及的无酒精啤酒风味饮料中,原料的一部分可使用啤酒花。
使用啤酒花时,可根据所期望的香味,适当选择啤酒等制造中所用的通常的颗粒啤酒花、粉末啤酒花、啤酒花提取物来使用。此外,也可使用异构化啤酒花、还原啤酒花等啤酒花加工品。本发明涉及的无酒精啤酒风味饮料所使用的啤酒花中包含这些物质。此外,啤酒花的添加量无特别限定,典型而言,相对于饮料总量为0.0001~1重量%左右。
本发明涉及的无酒精啤酒风味饮料,在不损害本发明的效果的范围内,根据需要也可使用其他原料。例如,在不损害本发明的效果的范围内,根据需要可使用甜味剂(包括高甜度甜味剂)、苦味剂、香料、酵母提取物、焦糖色素等着色剂,大豆皂苷或皂皮树皂苷等植物提取皂苷类物质,玉米或大豆等植物蛋白质及含肽物质,牛血清白蛋白等蛋白质类物质,食物纤维或氨基酸等调味料,抗坏血酸等抗氧化剂。
本发明涉及的无酒精啤酒风味饮料可制成容器装。容器的形态无任何限制,可填充至瓶、罐、桶或PET瓶等密封容器中,而制成容器装饮料。
本发明的无酒精啤酒风味饮料的制造方法无特别限定,可例示一种向无酒精啤酒风味饮料中,添加规定量的2’-脱氧腺苷的方法。
此外,优选向无酒精啤酒风味饮料中,添加40kDa蛋白质。
所添加的2’-脱氧腺苷及40kDa蛋白质的制备,例如可如后述实施例所记载的步骤进行。
此外,对于2’-脱氧腺苷及40kDa蛋白质而言,也可通过调整无酒精啤酒风味饮料的制造工序中的各条件,来使它们的含量增加。
实施例
以下示出实施例来具体说明本发明,但本发明不受下述实施例所限制。
(2’-脱氧腺苷的精制)
依据下述进行2’-脱氧腺苷(2’DA)的精制。
(1)基于HP20的啤酒的分级分离
使用10L的ダイヤイオン(注册商标,DIAION)HP20(三菱化学株式会社制)对60L的啤酒进行分级分离。HP20在使用前,用乙醇清洗3次,接着再用50%乙醇清洗3次。将清洗过的HP20填充至大量分级分离用色谱柱中,用水进行置换。向经脱气的60L的啤酒中混合相同量的蒸馏水,使用中压泵使其流向HP20色谱柱中。得到通过HP20色谱柱后的溶液,作为过柱组分。使用中压泵通入40L的蒸馏水,得到洗脱液作为水洗脱组分。同样地,通入各40L的含水乙醇(10%乙醇、30%乙醇及70%乙醇),得到洗脱液分别作为10%乙醇洗脱组分、30%乙醇洗脱组分及70%乙醇洗脱组分。各洗脱组分使用蒸发器及冷冻干燥机,作为干燥物进行冷藏保存。
(2)30%乙醇洗脱组分的LH-20分级分离
在HP20分级分离物中,针对30%乙醇洗脱组分,使用1.2kg的Sephadex(注册商标)LH-20进行分级分离。将用乙醇清洗的LH-20填充至大量分级分离用色谱柱中,用水进行置换。在由HP20分级分离而得的30%乙醇洗脱组分(87.9g)中,使17.6g溶解于蒸馏水中,并使用于LH-20色谱柱。使用中压泵通入13.5L的蒸馏水,得到水洗脱组分-1~6。接着,通入各7L的含水乙醇(35%乙醇、70%乙醇及100%乙醇),得到洗脱液分别作为35%乙醇洗脱组分、70%乙醇洗脱组分及100%乙醇洗脱组分。各洗脱组分使用蒸发器及冷冻干燥机,作为干燥物进行冷藏保存。
(3)2’DA的分离
对由LH-20分级分离而得的水洗脱组分-4(0.56g)中的86.4mg,使用HPLC(COSMOSIL 5C18-PAQ,20×250mm),通过10%乙醇进行洗脱。接着,对10min~13min的洗脱液进行浓缩,使用HPLC(COSMOSIL 5C18-PAQ,20×250mm),以乙醇-水(5:95→15:85)的浓度梯度的混合液进行洗脱,得到化合物(I)(0.5mg,tR=21min)。
化合物(I),根据MS、NMR的物理学数据的解析及与标品的对比,被鉴定为2’-脱氧腺苷。
所使用的分析机器如下所示。
LC-MS;Q Exactive,Thermo Fisher Scientific公司制
NMR;AVANCE400,Bruker公司制
(40kDa蛋白质的精制)
依据下述,从市售的啤酒(1L)中进行40kDa蛋白质的精制。
(1)基于阳离子交换树脂的分级分离
将阳离子交换树脂SP Sepharose 50mL放入空色谱柱中。使啤酒吸附于树脂。然后,将树脂转移至色谱柱,用20mM乙酸钠缓冲液(pH4.5)进行清洗。接着,用20mM乙酸钠(pH4.5)+0.5M-NaCl进行洗脱并收集组分。通过SDS-PAGE对所得的组分进行评价,收集包含40kDa的蛋白质的组分,将其作为阳离子交换树脂结合组分。
(2)超细过滤(缓冲液更换)
向用水清洗的超细过滤单元(Merck制Amicon Ultra-15 30K)中,分别添加10mL的由(1)所得的阳离子交换树脂结合组分,以3500rpm离心并进行超细过滤,得到浓缩液。
(3)硫酸铵分级分离
将20mM磷酸缓冲液(pH7.0)+2M硫酸铵放入烧杯中,向其中滴加由(2)所得的浓缩液,并进行搅拌。接着将悬浊液离心(2330g,10分钟,室温)。将上清液收集于另一容器中。收集的溶液使用超细过滤单元进行浓缩。将浓缩液加入20mM乙酸钠(pH4.5)中并离心(2330g,10分钟,室温),进行浓缩,得到40kDa蛋白质精制品(Bradford定量(牛血清白蛋白(BSA)换算),20.4mg/mL,2.21mL)。通过SDS-PAGE确认所得的40kDa蛋白质的纯度。
将40kDa蛋白质用酶进行消化后,通过由LC-MS/MS进行分析,尝试进行蛋白质的鉴定。
切取由SDS-PAGE分离的40kDa附近的条带,以二硫苏糖醇进行还原(56℃,1小时),并以碘乙酰胺进行脲甲基化(遮光下,室温,45分钟)。接着添加含有0.01%ProteaseMax的10ng/μL胰凝乳蛋白酶溶液(5mM氯化钙,50mM碳酸氢铵溶液)15μL、5mM氯化钙、50mM碳酸氢铵溶液15μL,孵育一晩后,回收酶消化液。将回收的溶液进行减压干燥,再使其溶解于0.1%甲酸溶液中。
将其用于LC-MS/MS分析。
(基于LC-MS/MS的测定)
LC-MS/MS的测定通过下述条件进行。
使用装置:Direct Flow nanoLC系统Easy-nLC 1000TM(Thermo Scientific)
捕获柱:Acclaim PepMap(注册商标)(Thermo Scientific)
分析色谱柱:NANO HPLC CAPILLARY COLUMN(Nikkyo Technos株式会社)
液相色谱质量分析仪:Q Exactive Plus(Thermo Scientific)
流动相:A液:0.1%甲酸/水、B液:0.1%甲酸/乙腈
流速:300nL/min
梯度:0-40%B/0-30min、40-60%B/30-35min、60-90%B/35-37min、90%B/37-45min
注入量:10μL
离子化模式:ESI Positive
测定范围:MS1(m/z 350-1750)
Data Dependent Scan模式
(4)蛋白质的解析
蛋白质鉴定通过下述条件进行。
检索软件:Proteome Discoverer 2.2.0.388(ThermoFisher制)
生物种类:大麦(Hordeum vulgare)、啤酒花(Humulus)、酵母(Saccharomycescerevisiae)
检索条件:消化酶:Chymotrypsin
前体离子质量误差范围:Monoisotopic、±10ppm
产物离子质量误差范围:±0.02Da
最大漏切位点数(missed-cleavages):5
置信水平(Percolator):High(3个等级的准确度中概率最高的水平)
数据库:SwissProt
其结果可知,40kDa蛋白质是来自大麦的Serpin Z4(序列覆盖率:77.2%)及来自大麦的Serpin Z7(序列覆盖率:72.8%)。
(向市售的无酒精啤酒风味饮料中添加2’DA时的感官评价)
向市售的无酒精啤酒风味饮料中添加2’-脱氧腺苷(2’DA),进行饱满度的感官评价。
该无酒精啤酒风味饮料是原料中含有麦芽的无酒精啤酒风味饮料。
原材料为麦芽、啤酒花、碳酸、香料、酸味剂、焦糖色素、维生素C、苦味剂、甜味剂,作为营养成分,每100ml中含有酒精成分0%、蛋白质0g、含糖物质0g、食物纤维0~0.1g、嘌呤体约0mg。
感官评价的基准分如下所示。
由5名专业评审以0.05分刻度通过下述基准进行打分,将该分数值进行平均。
饱满度强度为以下基准。
0分:完全感觉不到
1分:稍微感觉到
2分:明确感觉到
3分:强烈感觉到
就基准分而言,将与作为评价对象的上述市售的无酒精啤酒风味饮料不同的市售的啤酒风味酒精饮料,作为基准的啤酒风味酒精饮料(I),将其饱满度设为0.7分。此外,将另一市售的啤酒风味酒精饮料作为基准的啤酒风味酒精饮料(II),将其饱满度设为基准分1.5分。此外,以上述市售的啤酒风味酒精饮料(I)及(II)的饱满度为基准,将作为评价对象的上述市售的无酒精啤酒风味饮料的饱满度设为0.5分。
该基准的啤酒风味酒精饮料(I),是原料中的麦芽的比率超过0重量%,且小于50重量%的啤酒风味酒精饮料。
原材料为发泡酒、麦芽、啤酒花、糖类、食物纤维、烈性酒(小麦),作为营养成分,每100ml中含有酒精成分4%、蛋白质0~0.2g、含糖物质0.5~0.8g、嘌呤体约2.0mg。
该基准的啤酒风味酒精饮料(II),是原料中的麦芽的比率为50重量%以上的啤酒风味酒精饮料。
原材料为麦芽、啤酒花,作为营养成分,每100ml中含有酒精成分5.5%、蛋白质0.4~0.6g、含糖物质3.6g、嘌呤体约12.5mg。
感官评价的步骤如下所示。
(1)将无酒精啤酒风味饮料分别注入最终容量的1/10容量(v/v)小玻璃瓶中
(2)称量任意重量的2’DA并加入
(3)进行30秒超声处理
(4)于室温下静置30分钟
(5)将无酒精啤酒风味饮料填满至最终容量
(6)分别注入后进行饮用并评价
(市售的无酒精啤酒风味饮料的分析)
感官评价中所使用的市售的无酒精啤酒风味饮料中所含的2’DA的浓度,通过以下步骤由LC-MS进行定量。
(1)标品的制备及校准曲线的制作
将2’DA分别以达到下述浓度的方式进行稀释,使其通过0.22μm的过滤器后,以供测定。
最终浓度:0.001ppm,0.025ppm,0.050ppm,0.100ppm,0.200ppm,0.300ppm,0.500ppm,0.750ppm,1.000ppm
(1ppm=1μg/mL)
稀释液使用5%(v/v)的乙醇水溶液。
另外,在标品的分析结果中,采用测定值落入可保持校准曲线的直线性的范围(R2>0.99)的稀释倍率的测定值。
LC-MS的测定条件如下所示。
LC-MS:AB Sciex公司制X500R
分离色谱柱:Waters公司制HSST3 1.8μm,2.1×150mm
洗脱液:
A液:0.1%甲酸/水、B液:0.1%甲酸/乙腈
梯度:A液:B液=98:2→2:98(27min)
注入量:5μL
流速:0.2mL/min
柱温箱:40℃
(MS)
离子化模式:ESI Positive
测定范围:MS1(m/z 100-1000)
Data Independent Scan模式
离子源温度:350℃
(2)由市售的无酒精啤酒风味饮料制备测定用样本
将市售的无酒精啤酒风味饮料通过超声处理进行脱气,在气泡稳定后适当进行稀释,使其通过0.22μm的过滤器后,以供测定。
稀释液使用5%(v/v)的乙醇水溶液。
将市售的无酒精啤酒风味饮料中所含的2’DA的浓度设为对照组。
(实施例1:添加2’DA的评价)
市售的无酒精啤酒风味饮料(对照组)中所含的2’DA的浓度为0ppm。
向其中分别以2’DA浓度达到1ppm、6ppm、10ppm的方式添加2’DA并进行感官评价。此外,向市售的无酒精啤酒风味饮料中以2’DA浓度达到0.1ppm的方式添加2’DA并进行感官评价(对比样本1)。
感官评价的结果如表1所示。
[表1]
对照组 | 对比样本1 | 样本1 | 样本2 | 样本3 | |
2′DA浓度(ppm) | 0 | 0.1 | 1 | 6 | 10 |
专业评审A | 0.50 | 0.50 | 0.60 | 0.65 | 0.70 |
专业评审B | 0.50 | 0.50 | 0.55 | 0.60 | 0.65 |
专业评审C | 0.50 | 0.55 | 0.65 | 0.75 | 0.80 |
专业评审D | 0.50 | 0.50 | 0.55 | 0.65 | 0.70 |
专业评审E | 0.50 | 0.50 | 0.60 | 0.70 | 0.80 |
感官评价平均 | 0.50 | 0.51 | 0.59 | 0.67 | 0.73 |
由表1所示的结果可知,对于无酒精啤酒风味饮料而言,2’DA浓度为1ppm以上时,饱满度得到增强。
(实施例2:2’DA与40kDa蛋白质的协同效应的评价)
以向市售的无酒精啤酒风味饮料(对照组)中加入2’DA且2’DA的浓度达到1ppm的饮料为基准,通过进一步加入40kDa蛋白质来评价2’DA与40kDa蛋白质的协同效应。将40kDa蛋白质的浓度设为5ppm、10ppm。40kDa蛋白质使用由上述精制而得的物质。
此外,为了进行对比,也进行了向市售的无酒精啤酒风味饮料中仅添加40kDa蛋白质,且使40kDa蛋白质的浓度为5ppm的评价(对比样本2)。
感官评价的结果如表2所示。
[表2]
对照组 | 样本1 | 样本2 | 样本3 | 对比样本2 | |
2′DA浓度(ppm) | 0 | 1 | 1 | 1 | 0 |
40kDa蛋白质浓度(ppm) | 0 | 0 | 5 | 10 | 5 |
专业评审A | 0.50 | 0.60 | 0.65 | 0.75 | 0.50 |
专业评审B | 0.50 | 0.55 | 0.55 | 0.70 | 0.50 |
专业评审C | 0.50 | 0.65 | 0.70 | 0.75 | 0.50 |
专业评审D | 0.50 | 0.55 | 0.70 | 0.80 | 0.50 |
专业评审E | 0.50 | 0.60 | 0.65 | 0.75 | 0.55 |
感官评价平均 | 0.50 | 0.59 | 0.65 | 0.75 | 0.51 |
由表2所示的结果可知,通过向市售的无酒精啤酒风味饮料中加入2’DA并进一步加入40kDa蛋白质,可进一步增强饱满度。
由对比样本2的结果可知,即使只添加40kDa蛋白质也可增强饱满度。然而,对上述样本1中的感官评价相对于对照组的增加值(0.09)和对比样本2中的感官评价相对于对照组的增加值(0.01)进行求和,与由此而得的并用2’DA和40kDa蛋白质时所预想的相加效应(0.10)相比,样本2中的感官评价相对于对照组的增加值(0.15)更大。由此可以说,通过将2’DA和40kDa蛋白质并用,可发挥意料之外的协同效应。
工业实用性
根据本发明,可提供一种在无酒精啤酒风味饮料中,饱满度得到增强的饮料。
Claims (4)
1.一种无酒精啤酒风味饮料,其特征在于,2’-脱氧腺苷的浓度为1ppm以上。
2.根据权利要求1所述的无酒精啤酒风味饮料,其特征在于,2’-脱氧腺苷的浓度为1~10ppm。
3.根据权利要求1或2所述的无酒精啤酒风味饮料,其特征在于,进一步含有分子量35~50kDa的蛋白质,
所述蛋白质的浓度为5ppm以上。
4.根据权利要求3所述的无酒精啤酒风味饮料,其特征在于,所述蛋白质的浓度为30ppm以下。
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REG | Reference to a national code |
Ref country code: HK Ref legal event code: DE Ref document number: 40090890 Country of ref document: HK |
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GR01 | Patent grant | ||
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