CN115887358A - 一种基于温敏型载药醇传递体的凝胶剂及其制法和应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种基于温敏型载药醇传递体的凝胶剂及其制法和应用，主要用于治疗皮炎、湿疹等皮肤疾病；采用了复合磷脂制备的温敏脂质体和具有强效透皮效果的醇传递体进行结合，包裹丹皮酚，形成含有丹皮酚的温敏型醇传递体，并添加凝胶基质，最终形成丹皮酚温敏型醇传递体凝胶。本发明所制备的丹皮酚温敏型醇传递体凝胶，相比普通含药凝胶，具有更高的稳定性和更好的经皮渗透效果，有着良好的渗透量和滞留量，同时在人体体表温度范围内快速释药，增加了药物在皮肤内的药物浓度，提高药物生物利用度；局部涂抹后，易于吸收，可缓解皮炎湿疹症状，促进恢复皮肤健康。

Description

一种基于温敏型载药醇传递体的凝胶剂及其制法和应用

技术领域

本发明属于药物制剂领域，具体涉及一种基于温敏型载药醇传递体的凝胶剂，还涉及上述胶凝剂的制备方法及其作为含药凝胶在治疗皮炎、湿疹等皮肤疾病方面的应用。

背景技术

湿疹是一种常见的皮肤疾病，具有慢性迁移性、易复发和伴剧烈瘙痒等特点。目前常见治疗手段有脱敏疗法、物理疗法以及非特异性药物治疗，如抗组胺药、糖皮质激素，但此类药物不良反应较大，且极易复发。丹皮酚具有多种药理活性，如抗菌、抗炎、抗氧化、抗过敏等，在皮肤病研究中，其外部制剂可用于各种皮肤病，如湿疹、皮炎、牛皮癣等症状。但由于丹皮酚在水中的溶解度很低且易升华,见光易氧化分解,影响其使用和疗效。透皮给药系统是治疗湿疹的重要途径之一，是指以皮肤为给药途径，将药物递送至局部组织或全身血液循环而发挥局部或全身作用的新方法。有效避免了首过效应，提高药物生物利用度的同时直接接触病灶，缩短药物传递过程。然而，角质层限制了药物经皮吸收，造成药物浪费和局部用药后临床疗效差等问题。

醇质体和传递体，具有良好的渗透性因此常作为载体包裹药物进行皮肤给药，提高药物透皮效果。醇传递体将醇质体和传递体有效结合，具有更高的渗透性能和稳定性，能够包裹药物有效透过皮肤发挥治疗效果。

温敏脂质体除了具备脂质体的优点，还通过可磷脂调节其相变温度(T_m)改变脂质体对不同温度的敏感程度。当环境温度高于T_m时，脂质体的磷脂双分子层会发生凝胶-液晶相转变，结构变为无序松散，通透性增加，继而药物得到释放。当调节其T_m在皮肤温度32～37℃时，则可以保证药物在存放时保持稳定，应用时会快速释放。将醇传递体与温敏脂质体结合，形成具有温敏型的醇传递体，进一步提高药物的透皮效率，提高药物生物利用度。

目前局部给药制剂多是普通凝胶或乳膏等类型，水溶性差的药物易出现析出、分层等现象，现多通过加入表面活性剂增加药物溶解性，但其存在透皮吸收效果较差，稳定性不佳，且刺激性较大，生物利用度较低等缺点；而将脂质体应用于局部给药制剂中，提高药物透皮吸收效果较为有限，也存在纳米载体本身稳定性不佳等问题；此外也有部分利用醇质体提高药物透皮吸收效率，但多为乙醇，存在对于皮肤患处有刺激性和易挥发致使载体不稳定等问题。因此现常见透皮给药制剂存在一定的渗透、稳定性或刺激性方面问题，不能有效地发挥药物治疗效果。

发明内容

发明目的：本发明目的在于克服现有技术存在的不足，提供一种基于温敏型载药醇传递体的凝胶剂及其制备方法，凝胶中有含丹皮酚的温敏型醇传递体，将醇传递体和温敏脂质体有效结合，在提高药物透皮效率的同时提高药物在应用于皮肤前的稳定性，提高药物生物利用度；此外选择丙二醇代替乙醇，避免了乙醇带来的刺激性和易挥发致使稳定性下降的问题，同时增加难溶性药物溶解度和提高药物渗透效果；制备成凝胶剂，不仅增加了药物在皮肤上的停留时间，其透气、清凉的特点为纳米载体保持其稳定和渗透提高有利环境；本发明可提高难溶性药物的溶解度，提高稳定性和经皮渗透效果，同时具有局部低刺激性的优点。

技术方案：本发明所述的基于温敏型载药醇传递体的凝胶剂，所述凝胶剂由温敏型载药醇传递体、成型剂、三乙醇胺、抑菌剂、保湿剂和水组成，其各组分重量百分比分别为：温敏型载药醇传递体10％～30％、成型剂0.5％～2％、三乙醇胺0.3％～0.7％、抑菌剂0.1％～1％、保湿剂5％～15％以及余量为纯化水。

其中，所述温敏型载药醇传递体所包裹的活性成分包括丹皮酚、姜黄素、雷公藤甲素或黄芩素中的至少一种，优选为丹皮酚。

其中，所述成型剂为卡波姆、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠或海藻酸钠中的至少一种，优选为卡波姆。

其中，所述抑菌剂为苯氧乙醇、苯甲酸钠或对羟基苯甲酸甲酯中的至少一种，优选为苯氧乙醇。

其中，所述保湿剂为甘油、透明质酸或山梨醇中的至少一种，优选为甘油。

其中，所述温敏型载药醇传递体由丹皮酚、磷脂、短链醇和边缘活化剂组成；其中，磷脂与丹皮酚的重量比为5：1～12.5：1，磷脂与边缘活化剂的重量比为1：0.025～1：0.2，短链醇的加入量为温敏型载药醇传递体重量的10％～25％。

其中，所述磷脂为大豆磷脂、氢化大豆磷脂、二棕榈酰磷脂酰胆碱和二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱中的至少两种的组合；所述边缘活化剂为吐温80、司盘80、胆酸钠或脱氧胆酸钠中的至少一种，优选为胆酸钠；所述短链醇为乙醇、丙二醇或乙醇和丙二醇混合物中的至少一种，优选为丙二醇。

其中，所述磷脂为大豆磷脂与氢化大豆磷脂的复合磷脂，复合磷脂中，大豆磷脂与氢化大豆磷脂的重量为6:4～8:2；复合磷脂的相变温度为32～37℃。

其中，温敏型载药醇传递体采用如下方法制备而成，具体包括如下步骤：

(1)将复合磷脂和药物活性成分溶于短链醇中，水浴超声下振荡充分溶解，形成油相；

(2)将边缘活化剂溶于水中，在水浴超声下振荡充分溶解形成水相；

(3)将油相、水相在持续搅拌下加热至45～60℃，待温度稳定后，将油相以滴速为每分钟滴入0.2～2mL逐滴滴入水相中，继续搅拌，再用冰水浴探头超声处理，得到温敏型醇传递体混悬液；

(4)将所得混悬液放置于不高于4℃下静置过夜，得到温敏型醇传递体混悬液。

上述基于温敏型载药醇传递体的凝胶剂的制备方法，包括如下步骤：

(1)将保湿剂、抑菌剂加入水中，水浴加热至30～40℃，搅拌溶解均匀，得到混合物A；

(2)将成型剂在搅拌下缓慢加入水中，水浴加热至50～70℃，等充分溶胀后，边搅拌边加入三乙醇胺，搅拌均匀后，放至室温，得到混合物B；

(3)将混合物B加入到混合物A中，搅拌均匀，再往其中加入温敏型醇传递体混悬液，加水至全量，搅拌后得到凝胶剂。

有益效果：与现有技术相比，本发明具有如下显著优点：(1)本发明的温敏型载药醇传递体，所含药物为丹皮酚，与常见治疗湿疹的非特异性药物相比，丹皮酚无明显副作用，具有抗炎、抗菌、抗过敏等多种药理活性，本发明温敏型载药醇传递体可有效提高难溶性药物的溶解度和稳定性，改善药物生物利用度。(2)本发明的温敏型载药醇传递体，具有温度敏感性，通过调节磷脂种类与比例将其相变温度限制在皮肤温度范围内，此时，脂质体的磷脂双分子层结果发生转变，形成无序状态，将包裹的药物快速释放出来，从而实现药物在病灶部分的快速聚集，提高药物治疗效果，而在低于相变温度时，纳米载体可保持有序紧密状态，提高药物稳定性和长期存放的可能。(3)本发明的温敏型载药醇传递体，具有强效透皮效果，醇传递体有效结合了醇质体和传递体，具有更好的渗透量与滞留量，能够通过两种渗透途径将药物传递至皮肤内；此外，用丙二醇代替醇质体常用的乙醇，不仅保持了纳米载体的渗透特性，还避免了乙醇的刺激性和易挥发致使载体具有不稳定性的问题；同时，丙二醇自身可作为促渗剂，进一步的提高了药物的渗透效率，还可提高药物溶解度，提高纳米载体包封率。(4)本发明的温敏型载药醇传递体凝胶剂，有效的提高了药物在皮肤上的附着时间，且凝胶具有透皮、清凉的特点为温敏型载药醇传递体提供了利于渗透的环境，进一步提高药物的治疗效果。

附图说明

图1为本发明的温敏型载药醇传递体的结构示意图；

图2为实施例1中空白温敏型载药醇传递体的DSC曲线图；

图3为实施例2中温敏型载药醇传递体混悬液的外观图；

图4为实施例2中温敏型载药醇传递体的粒径图；

图5为实施例2中温敏型载药醇传递体的透射电镜图；

图6为实施例3中基于温敏型载药醇传递体凝胶剂的外观图；

图7为实施例3中基于温敏型载药醇传递体凝胶剂的粒径图；

图8为实施例4稳定性实验中不同纳米粒和包封率变化图；

图9为实施例4稳定性实验中不同纳米粒混悬液外观变化图；

图10为实施例4温敏型载药醇传递体凝胶剂的离心稳定性实验图；

图11为实施例4温敏型载药醇传递体凝胶剂的温度稳定性实验图；

图12为实施例5不同纳米粒在25℃条件下释药测试数据图；

图13为实施例5不同纳米粒在37℃条件下释药测试数据图；

图14为实施例6不同凝胶的透皮吸收效果图；

图15为实施例7不同给药小鼠的外观观察和H&E切片图。

具体实施方式

图1为本发明温敏型载药醇传递体的结构示意图，如图1所示，1为丹皮酚；2和3分别为氢化大豆磷脂和大豆磷脂，二者形成磷脂双分子层的结构；4为边缘活化剂，胆酸钠；5为丙二醇。本发明纳米载体为磷脂双分子层结构，边缘活化剂和丙二醇可同时存在在亲水、亲油层中，同时水溶性较差的丹皮酚也因亲水层中含有边缘活化剂和丙二醇，也有部分被包裹在亲水层中。

实施例1

复合磷脂相变温度(T_m)检测：

将大豆磷脂和氢化大豆磷脂按质量比7:3比例进行混合，制备成空白温敏型醇传递体，采用差示扫描量热仪(DSC)分析纳米粒的T_m范围。结果如图2所示，此比例下的脂质体T_m在35.8℃，符合理想温度范围。载药醇传递体的相变温度为人体体表温度(35.8℃)，在低于相变温度时，纳米载体可保持有序的紧密状态，提高药物的稳定性和长期存放的可能性，当达到相变温度时，脂质体的磷脂双分子层发生转变，形成无序状态，将包裹的药物释放出来。

实施例2

(1)温敏型载药醇传递体的制备，具体为：将16mg复合磷脂和7mg丹皮酚溶于0.6mL丙二醇中，水浴超声下振荡充分溶解，形成油相；将1.3mg胆酸钠溶于4mL纯化水中，在水浴超声下振荡充分溶解形成水相；将油相、水相放置在转速为1000rpm/min的磁力搅拌器上，并于55℃下加热，待温度稳定后，将油相缓慢逐滴滴入水相中，滴速为0.5mL/min；在此条件下，继续磁力搅拌30min后，冰水浴探头超声(工作过程为：工作2s关闭2s，功率300w)处理5min，将所得混悬液放置4℃冰箱中静置过夜，得到温敏型载药醇传递体混悬液。

(2)温敏型载药醇传递体的性质研究

经外观观察，结果如图3所示，实施例2制得的温敏型载药醇传递体混悬液为略带蓝色乳光(图1中的红光是外界打进红光柱，为了验证混悬液有丁达尔效应)的混悬液，无粘附和聚集现象，且具有丁达尔效应；经动态光散射(DLS)检测其粒径，结果如图4所示，纳米粒径为(145.967±0.998)nm；通过透射电子显微镜(TEM)观察纳米粒形态，结果如图5所示，纳米粒形态分布较为均匀，粒径约为100nm左右，与水化粒径测定结果相近，说明成功制备出温敏型载药醇传递体。本发明温敏型的载药醇传递体一方面基于纳米载体强的变形能力，可较好地穿过角质层进入表皮和真皮，同时具备温敏特性，从而能够在皮肤内将药物释放出来，从而提高皮肤内的药物含量；另一方面丙二醇作为促渗剂，进一步提高了药物的渗透效率；并且丙二醇还能提高纳米载体的包封率。

实施例3

(1)温敏型载药醇传递体凝胶剂的制备，具体为：称取1.5g甘油和0.05g苯氧乙醇加入纯化水中，水浴加热至30℃，搅拌溶解均匀，得到混合物A；称取0.1g卡波姆，将卡波姆在搅拌下缓缓加入纯化水中，水浴加热至60℃，等充分溶胀后，边搅拌边加入0.03g三乙醇胺，搅拌均匀后，放至室温，得到混合物B；将混合物B加入到混合物A中，搅拌均匀，再往其中加入3mL含有丹皮酚的温敏型醇传递体混悬液，加水至整个溶液质量为10g后，搅拌至充分混合，得到凝胶剂。

(2)温敏型载药醇传递体凝胶剂的性质研究

经外观观察，结果如图6所示，实施例3得到的温敏型载药醇传递体凝胶剂外观为凝胶，略带乳白色、半透明、均匀细腻的半固体制剂；加纯化水稀释后，经动态光散射(DLS)检测其粒径，结果如图7所示，纳米粒径为(156.767±4.131)nm，与温敏型载药醇传递体结果相近，说明成功制备出温敏型载药醇传递体凝胶剂。

实施例4

温敏型载药醇传递体的体外稳定性考察：

(1)实施例2得到的温敏型载药醇传递体的稳定性考察

取适量载药普通脂质体、载药温敏脂质体和温敏型载药醇传递体混悬液，每份取3mL置于小瓶中并室温静置存放，在第0、1、3、7、15天时进行外观观察；另将三份样品各取2mL，在第0、1、3、7、15天时进行粒径、包封率的测定；结果如图8所示，温敏型载药醇传递体的粒径与包封无明显变化，但其他两类脂质体出现不同程度的变化，具体的变化为粒径变大，包封率变小，说明这两类脂质体稳定性不好，药物容易泄露。外观观察结果如图9所示，温敏型载药醇传递体始终保持稳定，无分层、沉淀现象。

(2)实施例3得到的温敏型载药醇传递体凝胶剂的稳定性考察

将温敏型载药醇传递体凝胶剂置于EP管中，在3000rpm/min条件下，离心30min，进行离心稳定性实验。结果如图10所示，离心后凝胶无分层，无变色；将温敏型载药醇传递体凝胶剂置于西林瓶中，分别在4、25、50℃下存放7天，进行温度稳定性实验。结果如图11所示，在不同温度下放置7天后凝胶无分层，无变色，说明其具有良好的稳定性。

实施例5

温敏型载药醇传递体对于温度敏感性考察：

分别精密吸取2mL载药普通脂质体、载药温敏脂质体和温敏型载药醇传递体混悬液置于透析袋中，放入25℃的生理盐水中进行释放，于1min、5min、10min、20min、40min、1h、1.5h、2h、3h、6h、12h、24h取出2mL透析介质，并补充相同体积透析介质，对取出的液体用紫外分光光度计测定丹皮酚的释放量。

分别精密吸取2mL载药普通脂质体、载药温敏脂质体和温敏型载药醇传递体混悬液置于透析袋中，放入37℃的生理盐水中进行释放，于1min、5min、10min、20min、40min、60min取出2mL透析介质，并补充相同体积透析介质，对取出的液体用紫外分光光度计测定丹皮酚的含量，并根据以下公式计算累计释放量。

其中Cn是每个时间段取出的生理盐水中药物浓度，V₀是生理盐水的总体积，C_i是前一时间段的生理盐水中的药物浓度，Vr是每个时间段取出的生理盐水的体积，M₀是载药纳米粒子中最初的药物质量。

结果如图12所示，在25℃时具有温度敏感性的纳米载体释放量较少，而载药普通脂质体在24h时，释放量为86.56％左右，与具有温敏性的脂质体之间，释放量差距较大。如图13所示，在37℃时，载药温敏脂质体和温敏型载药醇传递体药物释放量在1h内达到81.95％左右和74.15％左右，药物释放较为完全。说明当温度大于脂质体的Tm时，脂质体结构发生转变，药物能够从脂质体中释放出来。

实施例6

温敏型载药醇传递体凝胶剂体外经皮渗透考察：

将冷冻的鼠皮用生理盐水解冻，平铺于Franz立式扩散池上，角质层面向上，固定好，接收池内为生理盐水作为接收介质，接收液面与皮肤下方充分接触，无气泡。在供给池上加入载药凝胶、载药普通脂质体凝胶、载药温敏脂质体凝胶和温敏型载药醇传递体凝胶，将扩散池置于透皮扩散仪中，400rpm转速进行搅拌，分别于0.5、1、2、4、6、8、10、12和24h取2mL接收液，并立刻补加同等温度的2mL接收液，将接收液过0.22μm滤膜后进行药物单位经皮渗透量的检测。

结果如图14所示，温敏型载药醇传递体凝胶的渗透量最佳，是载药温敏脂质体的1.46倍，载药普通脂质体凝胶的2.03倍，载药凝胶的3.04倍。

实施例7

温敏型载药醇传递体凝胶剂对小鼠慢性湿疹抑制考察：

对BALB/c小鼠进行慢性湿疹造模，造模结束后分别进行生理盐水、载药凝胶、载药普通脂质体凝胶、载药温敏脂质体凝胶、温敏型载药醇传递体凝胶和阳性药物糠酸莫米松凝胶处理。给药周期结束后，观察皮损部位状况，给药结束24h后注射水合氯醛麻醉，处死。剪下背部皮损皮肤，进行H&E染色切片，显微镜下观察切片情况。

结果如图15所示，正常组小鼠表皮正常，H&E染色结果显示表皮层、真皮层结构完好，厚度正常。模型组小鼠皮肤表面出现明显破损，有红斑、结痂、渗出等典型湿疹样症状，病理切片出现角化过度，角质层破损，棘层和真皮浅层细胞空泡变性，真皮层中观察到大面积水肿、血管充血扩张伴炎症细胞并呈现弥漫性的浸润。药物凝胶组、载药普通脂质体凝胶组、载药温敏脂质体凝胶组小鼠病理切片显示，仍可见炎症细胞浸润，但相比于模型组的数量有所减少。温敏型载药醇传递体凝胶组小鼠切片结果显示，炎症细胞浸润明显减少，皮肤结构趋于正常。与阳性药物对照组皮肤结构相似。

实施例3得到的温敏型载药醇传递体凝胶剂具有良好的稳定性(应用于皮肤前的稳定性)和经皮渗透效果，一方面醇传递体具有强的变形能力，可携带药物较好地穿过角质层进入表皮和真皮，另一方面丙二醇本身也是促渗剂，具有良好的促渗效果，从而使药物在皮肤内具有良好的渗透量和滞留量，同时在人体体表温度范围内快速释药，增加了药物在皮肤内的药物浓度，提高药物生物利用度。

Claims (10)

1.一种基于温敏型载药醇传递体的凝胶剂，其特征在于，所述凝胶剂由温敏型载药醇传递体、成型剂、三乙醇胺、抑菌剂、保湿剂和水组成，其各组分重量百分比分别为：温敏型载药醇传递体10％～30％、成型剂0.5％～2％、三乙醇胺0.3％～0.7％、抑菌剂0.1％～1％、保湿剂5％～15％以及余量为纯化水。

2.根据权利要求1所述的基于温敏型载药醇传递体的凝胶剂，其特征在于：所述温敏型载药醇传递体所包裹的活性成分包括丹皮酚、姜黄素、雷公藤甲素或黄芩素中的至少一种。

3.根据权利要求1所述的基于温敏型载药醇传递体的凝胶剂，其特征在于：所述成型剂为卡波姆、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠或海藻酸钠中的至少一种。

4.根据权利要求1所述的基于温敏型载药醇传递体的凝胶剂，其特征在于：所述抑菌剂为苯氧乙醇、苯甲酸钠或对羟基苯甲酸甲酯中的至少一种。

5.根据权利要求1所述的基于温敏型载药醇传递体的凝胶剂，其特征在于：所述保湿剂为甘油、透明质酸或山梨醇中的至少一种。

6.根据权利要求1所述的基于温敏型载药醇传递体的凝胶剂，其特征在于：所述温敏型载药醇传递体由丹皮酚、磷脂、短链醇和边缘活化剂组成；其中，磷脂与丹皮酚的重量比为5：1～12.5：1，磷脂与边缘活化剂的重量比为1：0.025～1：0.2，短链醇的加入量为温敏型载药醇传递体重量的10％～25％。

7.根据权利要求6所述的基于温敏型载药醇传递体的凝胶剂，其特征在于：所述磷脂为大豆磷脂、氢化大豆磷脂、二棕榈酰磷脂酰胆碱和二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱中的至少两种的组合；所述边缘活化剂为吐温80、司盘80、胆酸钠或脱氧胆酸钠中的至少一种；所述短链醇为乙醇、丙二醇或乙醇和丙二醇混合物中的至少一种。

8.根据权利要求7所述的基于温敏型载药醇传递体的凝胶剂，其特征在于：所述磷脂为大豆磷脂与氢化大豆磷脂的复合磷脂，复合磷脂中，大豆磷脂与氢化大豆磷脂的重量为6:4～8:2；复合磷脂的相变温度为32～37℃。

9.根据权利要求7所述的基于温敏型载药醇传递体的凝胶剂，其特征在于：温敏型载药醇传递体采用如下方法制备而成，具体包括如下步骤：

(1)将复合磷脂和药物活性成分溶于短链醇中，水浴超声下振荡充分溶解，形成油相；

(2)将边缘活化剂溶于水中，在水浴超声下振荡充分溶解形成水相；

(3)将油相、水相在持续搅拌下加热至45～60℃，待温度稳定后，将油相以滴速为每分钟滴入0.2～2mL逐滴滴入水相中，继续搅拌，再用冰水浴探头超声处理，得到温敏型醇传递体混悬液；

(4)将所得混悬液放置于不高于4℃下静置过夜，得到温敏型醇传递体混悬液。

10.权利要求1所述的基于温敏型载药醇传递体的凝胶剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)将保湿剂、抑菌剂加入水中，水浴加热至30～40℃，搅拌溶解均匀，得到混合物A；

(2)将成型剂在搅拌下缓慢加入水中，水浴加热至50～70℃，等充分溶胀后，边搅拌边加入三乙醇胺，搅拌均匀后，放至室温，得到混合物B；

(3)将混合物B加入到混合物A中，搅拌均匀，再往其中加入温敏型醇传递体混悬液，加水至全量，搅拌后得到凝胶剂。

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