CN115850226A - 一种双酮类化合物八角莲双黄酮f、g的制备方法及其应用 - Google Patents
一种双酮类化合物八角莲双黄酮f、g的制备方法及其应用 Download PDFInfo
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Abstract
本发明涉及双酮类化合物八角莲双黄酮F、G的制备方法及其应用，可有效解决从八角莲中制备双黄酮类化合物八角莲双黄酮F、G，实现在制备抗阿尔茨海默症药物中的应用问题。该化合物是从八角莲药材中分离得到，本发明方法制备的化合物八角莲双黄酮F、八角莲双黄酮G对乙酰胆碱酯酶具有抑制活性，实现在制备抗阿尔茨海默症药物中的应用。本发明原料丰富，制备方法易操作，可有效用于制备抗阿尔茨海默症药物，开拓了八角莲药材的新用途，有显著的经济和社会效益。
Description
技术领域
本发明涉及医药领域，特别是一种双酮类化合物八角莲双黄酮F、G的制备方法及其应用。
背景技术
阿尔茨海默症是老年人群中发病率仅次于心脑血管疾病和癌症的常见疾病，以记忆、认知能力和生活自理能力渐行性下降为主要特征。随着中国人口老龄化进程的加快，神经退行性疾病患者人数激增，尤其是阿尔茨海默病和相关痴呆症。2019年，中国阿尔茨海默病和相关痴呆症患者数已超过1300万，占全球的四分之一。阿尔茨海默症的发病率和死亡率稳步上升，目前已成为中国城乡居民的第五大死因，并加重了个人、家庭和社会的经济负担。目前临床上治疗药物仍以乙酰胆碱酯酶抑制剂为主，且存在肝毒性、心血管不良反应、胃肠道反应等缺点。因此寻找结构新颖、高效低毒的乙酰胆碱酯酶抑制剂依然是药学科研工作者迫切解决的技术问题。
八角莲是小檗科八角莲(Dysosma versipellis)的干燥根茎。在我主要分布在浙江、广西、湖北、湖南、四川、贵州等地。具有清热解毒、化痰散结、祛痛消肿之效。临床上常用于治疗跌打损伤、半身不遂、关节酸痛、毒蛇咬伤、疮痈肿毒、尖锐湿疣、流行性出血热、乙型脑炎、淋巴结炎、腮腺炎、乳腺癌、食道癌及其他的炎症疾病等。八角莲中含有大量的芳基萘内酯型木脂素和黄酮类化合物(包括双黄酮类)，且天然来源的双黄酮类化合物具有抗癌、抗菌、抗病毒、抗炎、抗氧化、镇痛、抗凝血等药理作用。本发明所涉及的双黄酮类化合物制备方法及其生物活性，迄今为止未见有公开报道。
发明内容
针对上述情况，为克服现有技术之缺陷，本发明之目的就是提供一种双酮类化合物八角莲双黄酮F、G的制备方法及其应用，可有效解决从八角莲中制备双黄酮类化合物八角莲双黄酮F、G，实现在制备抗阿尔茨海默症药物中的应用问题。
本发明解决的技术方案是，一种双酮类化合物八角莲双黄酮F、G的制备方法，这两个化合物是从八角莲药材中分离得到，分子结构式为：
其制备方法是：
以八角莲药材20–40kg为原料，加入3–5倍原料重量、体积浓度为95％的乙醇加热回流提取3次，提取温度为92–95℃，每次提取时间为1–1.5小时，减压回收95％乙醇，得浸膏状95％乙醇提取物；药渣加入3–5倍药材原重量、体积浓度为50％的乙醇加热回流提取1次，提取温度为92–95℃，每次提取时间为1–1.5小时，减压回收50％乙醇，得浸膏状50％乙醇提取物；合并95％乙醇提取物和50％乙醇提取物，加入体积为提取物重量体积2倍的无水乙醇溶解，重量体积是指固体以kg计，液体以L计，再加入重量体积为提取物2倍的硅藻土吸附，回收溶剂后，将载有提取物的硅藻土装入玻璃柱，依次用重量体积为提取物3倍的二氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇洗脱，回收溶剂，得二氯甲烷洗脱部位、乙酸乙酯洗脱部位、甲醇洗脱部位；将甲醇洗脱部位经硅胶柱色谱分离，依次用体积比为100:0、100:1、100:3、100:5、100:7、100:10、100:30、100:50、0:100的二氯甲烷-甲醇混合溶剂进行梯度洗脱，每一梯度用30L–60L洗脱液，流速为50–70mL/min，每5L–10L为一流份，收集54个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，用GF254薄层板，分别以体积比4:5的石油醚-丙酮和体积比5:2的二氯甲烷-甲醇作为展开剂，以体积比10:90的硫酸-乙醇溶液作为显色剂，105℃加热3–5min，根据薄层色谱检测结果，分别合并流份1–12、流份13–24、流份25–30、流份31–36、流份37–38、流份39–42、流份43–44、流份45–48、流份49–54，得到组份Fr.1、Fr.2、Fr.3、Fr.4、Fr.5、Fr.6、Fr.7、Fr.8、Fr.9；
组份Fr.5经sephadex LH-20柱色谱分离，用2.5L–5L甲醇洗脱，流速为5–10mL/min，每100mL–200mL为一流份，收集25个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，分别合并流份1–3、流份4–5、流份6–7、流份8–10、流份11–13、流份14–17、流份19–21、流份22–25，得到亚组份M5–1～M5–8；亚组份M5–8经硅胶柱色谱分离，石油醚–丙酮混合溶剂梯度洗脱，体积比为100:10、100:20、100:30、100:40、100:50、100:70、1:1、1:2、1:3，每一梯度用1.5L–3L洗脱液，流速为15–25mL/min，每250mL–500mL为一流份，收集54个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，分别合并流份1–6、流份7–12、流份13–18、流份19–25、流份26–30、流份31–36、流份37–42、流份43–48、流份49–54，得到亚组份M5–8–1、M5–8–2、M5–8–3、M5–8–4、M5–8–5、M5–8–6、M5–8–7、M5–8–8、M5–8–9；亚组份M5–8–4经制备型高效液相色谱纯化，以体积比为60:40的甲醇-水混合溶剂洗脱，色谱柱为YMC-Pack ODS-A，流速为3mL/min，收集保留时间为47.2min的色谱峰，回收溶剂，得化合物1，即八角莲双黄酮F；
组份Fr.6经sephadex LH20柱色谱分离，3–6L甲醇洗脱，流速为5–10mL/min，每100mL–200mL为一流份，收集30个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，分别合并流份1–17、流份18–30，得到亚组份M6–1和M6–2；亚组份M6–2经硅胶柱色谱分离，以二氯甲烷-甲醇混合溶剂梯度洗脱，体积比为100:1、100:3、100:5、100:7、100:10、100:30，每一梯度用0.75L–1.5L洗脱液，流速为10–15mL/min，每150mL–300mL为一流份，收集30个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，分别合并流份1–5、流份6–10、流份11–15、流份16–20、流份21–25、流份26–30，得到亚组分M6–2–1～M6–2–6；亚组份M6–2–4经sephadex LH20柱色谱分离，再用50mL–100mL甲醇洗脱，流速为1–2mL/min，每2.5mL–5.0mL为一流份，收集20个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，分别合并流份1–3、流份4–6、流份7–8、流份9–13、流份14–16、流份17–20，得到亚组份M6–2–4–1～M6–2–4–6；亚组份M6–2–4–4经制备型高效液相色谱纯化，以体积比为60:40的甲醇-水混合溶剂洗脱，色谱柱为YMC-Pack ODS-A，流速为3mL/min，收集保留时间为24.1min的色谱峰，得到化合物2，即八角莲双黄酮G。
本发明方法制备的化合物八角莲双黄酮F、八角莲双黄酮G对乙酰胆碱酯酶具有抑制活性，实现在制备抗阿尔茨海默症药物中的应用。
本发明原料丰富，制备方法易操作，可有效从八角莲药材中制备八角莲双黄酮F、八角莲双黄酮G，这些化合物具有抑制乙酰胆碱酯酶活性，可有效用于制备抗阿尔茨海默症药物，开拓了八角莲药材的新用途，有显著的经济和社会效益。
附图说明
图1为本发明化合物八角莲双黄酮F、八角莲双黄酮G的分子结构式图。
图2为本发明八角莲双黄酮F的1HNMR谱图(500MHz)。
图3为本发明八角莲双黄酮F的13CNMR谱图(125MHz)。
图4为本发明八角莲双黄酮F的HSQC谱图。
图5为本发明八角莲双黄酮F的HMBC谱图。
图6为本发明八角莲双黄酮F的HR-ESI-MS谱图。
图7为本发明八角莲双黄酮F的IR谱图。
图8为本发明八角莲双黄酮F的UV谱图。
图9为本发明八角莲双黄酮G的1HNMR谱图(500MHz)。
图10为本发明八角莲双黄酮G的13CNMR谱图(125MHz)。
图11为本发明八角莲双黄酮G的HSQC谱图。
图12为本发明八角莲双黄酮G的HMBC谱图。
图13为本发明八角莲双黄酮G的HR-ESI-MS谱图。
图14为本发明八角莲双黄酮G的IR谱图。
图15为本发明八角莲双黄酮G的UV谱图。
具体实施方式
以下结合实施例对本发明的具体实施方式作详细说明。
本发明在具体实施中可由以下实施例给出。
实施例1
本发明一种双酮类化合物八角莲双黄酮F、G的制备方法，这两个化合物是从八角莲药材中分离得到，分子结构式为：
其制备方法是：
以八角莲药材40kg为原料，加入3倍原料重量、体积浓度为95％的乙醇加热回流提取3次，提取温度为95℃，每次提取时间为1小时，减压回收95％乙醇，得浸膏状95％乙醇提取物；药渣加入3倍药材原重量、体积浓度为50％的乙醇加热回流提取1次，提取温度为95℃，每次提取时间为1小时，减压回收50％乙醇，得浸膏状50％乙醇提取物；合并95％乙醇提取物和50％乙醇提取物(5.4kg)，加入无水乙醇10.8L溶解，再硅藻土10.8kg吸附，回收溶剂后，将载有提取物的硅藻土装入玻璃柱，依次加入16.2L的二氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇洗脱，回收溶剂，得二氯甲烷洗脱部位、乙酸乙酯洗脱部位、甲醇洗脱部位；将甲醇洗脱部位3.4kg经硅胶柱色谱分离，依次用体积比为100:0、100:1、100:3、100:5、100:7、100:10、100:30、100:50、0:100的二氯甲烷-甲醇混合溶剂进行梯度洗脱，每一梯度用60L洗脱液，流速为70mL/min，每10L为一流份，收集54个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，用GF254薄层板，分别以体积比4:5的石油醚-丙酮和体积比5:2的二氯甲烷-甲醇作为展开剂，以体积比10:90的硫酸-乙醇溶液作为显色剂，105℃加热4min，根据薄层色谱检测结果，分别合并流份1–12、流份13–24、流份25–30、流份31–36、流份37–38、流份39–42、流份43–44、流份45–48、流份49–54，得到组份Fr.1、Fr.2、Fr.3、Fr.4、Fr.5、Fr.6、Fr.7、Fr.8、Fr.9；
组份Fr.5(110.0g)经sephadex LH-20柱色谱分离，用5L甲醇洗脱，流速为10mL/min，每200mL为一流份，收集25个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，分别合并流份1–3、流份4–5、流份6–7、流份8–10、流份11–13、流份14–17、流份19–21、流份22–25，得到亚组份M5–1～M5–8；亚组份M5–8(42.5g)经硅胶柱色谱分离，石油醚–丙酮混合溶剂梯度洗脱，体积比为100:10、100:20、100:30、100:40、100:50、100:70、1:1、1:2、1:3，每一梯度用3L洗脱液，流速为25mL/min，每500mL为一流份，收集54个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，分别合并流份1–6、流份7–12、流份13–18、流份19–25、流份26–30、流份31–36、流份37–42、流份43–48、流份49–54，得到亚组份M5–8–1、M5–8–2、M5–8–3、M5–8–4、M5–8–5、M5–8–6、M5–8–7、M5–8–8、M5–8–9；亚组份M5–8–4(0.5g)经制备型高效液相色谱纯化，以体积比为60:40的甲醇-水混合溶剂洗脱，色谱柱为YMC-Pack ODS-A，流速为3mL/min，收集保留时间为47.2min的色谱峰，回收溶剂，得化合物1，即八角莲双黄酮F(6.0mg)；
组份Fr.6经sephadexLH20柱色谱分离，6L甲醇洗脱，流速为10mL/min，每200mL为一流份，收集30个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，分别合并流份1–17、流份18–30，得到亚组份M6–1和M6–2；亚组份M6–2(60.5g)经硅胶柱色谱分离，以二氯甲烷-甲醇混合溶剂梯度洗脱，体积比为100:1、100:3、100:5、100:7、100:10、100:30，每一梯度用1.5L洗脱液，流速为15mL/min，每300mL为一流份，收集30个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，分别合并流份1–5、流份6–10、流份11–15、流份16–20、流份21–25、流份26–30，得到亚组分M6–2–1～M6–2–6；亚组份M6–2–4(1.69g)经sephadex LH20柱色谱分离，再用100mL甲醇洗脱，流速为2mL/min，每5.0mL为一流份，收集20个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，分别合并流份1–3、流份4–6、流份7–8、流份9–13、流份14–16、流份17–20，得到亚组份M6–2–4–1～M6–2–4–6；亚组份M6–2–4–4(0.59g)经制备型高效液相色谱纯化，以体积比为60:40的甲醇-水混合溶剂洗脱，色谱柱为YMC-Pack ODS-A，流速为3mL/min，收集保留时间为24.1min的色谱峰，得到化合物2，即八角莲双黄酮G。
实施例2
本发明一种双酮类化合物八角莲双黄酮F、G的制备方法，包括以下步骤：
以八角莲药材20kg为原料，加入5倍原料重量、体积浓度为95％的乙醇加热回流提取3次，提取温度为92℃，每次提取时间为1.5小时，减压回收95％乙醇，得浸膏状95％乙醇提取物；药渣加入5倍药材原重量、体积浓度为50％的乙醇加热回流提取1次，提取温度为92℃，每次提取时间为1.5小时，减压回收50％乙醇，得浸膏状50％乙醇提取物；合并95％乙醇提取物和50％乙醇提取物(2.7kg)，加入无水乙醇5.4L溶解，再加入硅藻土5.4kg吸附，回收溶剂后，将载有提取物的硅藻土装入玻璃柱，依次用8.1L的二氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇洗脱，回收溶剂，得二氯甲烷洗脱部位、乙酸乙酯洗脱部位、甲醇洗脱部位；将甲醇洗脱部位(1.7kg)经硅胶柱色谱分离，依次用体积比为100:0、100:1、100:3、100:5、100:7、100:10、100:30、100:50、0:100的二氯甲烷-甲醇混合溶剂进行梯度洗脱，每一梯度用30L洗脱液，流速为50mL/min，每5L为一流份，收集54个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，用GF254薄层板，分别以体积比4:5的石油醚-丙酮和体积比5:2的二氯甲烷-甲醇作为展开剂，以体积比10:90的硫酸-乙醇溶液作为显色剂，105℃加热5min，根据薄层色谱检测结果，分别合并流份1–12、流份13–24、流份25–30、流份31–36、流份37–38、流份39–42、流份43–44、流份45–48、流份49–54，得到组份Fr.1、Fr.2、Fr.3、Fr.4、Fr.5、Fr.6、Fr.7、Fr.8、Fr.9；
组份Fr.5(55.0g)经sephadex LH-20柱色谱分离，用2.5L甲醇洗脱，流速为5mL/min，每100mL为一流份，收集25个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，分别合并流份1–3、流份4–5、流份6–7、流份8–10、流份11–13、流份14–17、流份19–21、流份22–25，得到亚组份M5–1～M5–8；亚组份M5–8(21.2g)经硅胶柱色谱分离，石油醚–丙酮混合溶剂梯度洗脱，体积比为100:10、100:20、100:30、100:40、100:50、100:70、1:1、1:2、1:3，每一梯度用1.5L洗脱液，流速为15mL/min，每250mL为一流份，收集54个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，分别合并流份1–6、流份7–12、流份13–18、流份19–25、流份26–30、流份31–36、流份37–42、流份43–48、流份49–54，得到亚组份M5–8–1、M5–8–2、M5–8–3、M5–8–4、M5–8–5、M5–8–6、M5–8–7、M5–8–8、M5–8–9；亚组份M5–8–4(0.25g)经制备型高效液相色谱纯化，以体积比为60:40的甲醇-水混合溶剂洗脱，色谱柱为YMC-Pack ODS-A，流速为3mL/min，收集保留时间为47.2min的色谱峰，回收溶剂，得化合物1，即八角莲双黄酮F(3.0mg)；
组份Fr.6(65.0g)经sephadex LH20柱色谱分离，3L甲醇洗脱，流速为5mL/min，每100mL为一流份，收集30个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，分别合并流份1–17、流份18–30，得到亚组份M6–1和M6–2；亚组份M6–2(32.5g)经硅胶柱色谱分离，以二氯甲烷-甲醇混合溶剂梯度洗脱，体积比为100:1、100:3、100:5、100:7、100:10、100:30，每一梯度用0.75L洗脱液，流速为10mL/min，每150mL为一流份，收集30个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，分别合并流份1–5、流份6–10、流份11–15、流份16–20、流份21–25、流份26–30，得到亚组分M6–2–1～M6–2–6；亚组份M6–2–4(0.82g)经sephadex LH20柱色谱分离，再用50mL甲醇洗脱，流速为1mL/min，每2.5mL为一流份，收集20个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，分别合并流份1–3、流份4–6、流份7–8、流份9–13、流份14–16、流份17–20，得到亚组份M6–2–4–1～M6–2–4–6；亚组份M6–2–4–4(0.3g)经制备型高效液相色谱纯化，以体积比为60:40的甲醇-水混合溶剂洗脱，色谱柱为YMC-Pack ODS-A，流速为3mL/min，收集保留时间为24.1min的色谱峰，得到化合物2，即八角莲双黄酮G(1.5mg)。
实施例3
本发明一种双酮类化合物八角莲双黄酮F、G的制备方法，包括以下步骤：
以八角莲药材30kg为原料，加入4倍原料重量、体积浓度为95％的乙醇加热回流提取3次，提取温度为93℃，每次提取时间为1.2小时，减压回收95％乙醇，得浸膏状95％乙醇提取物；药渣加入4倍药材原重量、体积浓度为50％的乙醇加热回流提取1次，提取温度为93℃，每次提取时间为1.2小时，减压回收50％乙醇，得浸膏状50％乙醇提取物；合并95％乙醇提取物和50％乙醇提取物(4.0kg)，加入无水乙醇8.0L溶解，再硅藻土8.0kg吸附，回收溶剂后，将载有提取物的硅藻土装入玻璃柱，依次用12L的二氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇洗脱，回收溶剂，得二氯甲烷洗脱部位、乙酸乙酯洗脱部位、甲醇洗脱部位；将甲醇洗脱部位(2.5kg)经硅胶柱色谱分离，依次用体积比为100:0、100:1、100:3、100:5、100:7、100:10、100:30、100:50、0:100的二氯甲烷-甲醇混合溶剂进行梯度洗脱，每一梯度用45L洗脱液，流速为60mL/min，每7.5L为一流份，收集54个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，用GF254薄层板，分别以体积比4:5的石油醚-丙酮和体积比5:2的二氯甲烷-甲醇作为展开剂，以体积比10:90的硫酸-乙醇溶液作为显色剂，105℃加热3min，根据薄层色谱检测结果，分别合并流份1–12、流份13–24、流份25–30、流份31–36、流份37–38、流份39–42、流份43–44、流份45–48、流份49–54，得到组份Fr.1、Fr.2、Fr.3、Fr.4、Fr.5、Fr.6、Fr.7、Fr.8、Fr.9；
组份Fr.5(82.5g)经sephadex LH-20柱色谱分离，用3.75L甲醇洗脱，流速为7mL/min，每150mL为一流份，收集25个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，分别合并流份1–3、流份4–5、流份6–7、流份8–10、流份11–13、流份14–17、流份19–21、流份22–25，得到亚组份M5–1～M5–8；亚组份M5–8(31.8g)经硅胶柱色谱分离，石油醚–丙酮混合溶剂梯度洗脱，体积比为100:10、100:20、100:30、100:40、100:50、100:70、1:1、1:2、1:3，每一梯度用2.25L洗脱液，流速为20mL/min，每375mL为一流份，收集54个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，分别合并流份1–6、流份7–12、流份13–18、流份19–25、流份26–30、流份31–36、流份37–42、流份43–48、流份49–54，得到亚组份M5–8–1、M5–8–2、M5–8–3、M5–8–4、M5–8–5、M5–8–6、M5–8–7、M5–8–8、M5–8–9；亚组份M5–8–4(0.37g)经制备型高效液相色谱纯化，以体积比为60:40的甲醇-水混合溶剂洗脱，色谱柱为YMC-Pack ODS-A，流速为3mL/min，收集保留时间为47.2min的色谱峰，回收溶剂，得化合物1，即八角莲双黄酮F(4.3mg)；
组份Fr.6(97.5g)经sephadex LH20柱色谱分离，4.5L甲醇洗脱，流速为10mL/min，每150mL为一流份，收集30个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，分别合并流份1–17、流份18–30，得到亚组份M6–1和M6–2；亚组份M6–2(45.3g)经硅胶柱色谱分离，以二氯甲烷-甲醇混合溶剂梯度洗脱，体积比为100:1、100:3、100:5、100:7、100:10、100:30，每一梯度用1125mL洗脱液，流速为12mL/min，每225mL为一流份，收集30个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，分别合并流份1–5、流份6–10、流份11–15、流份16–20、流份21–25、流份26–30，得到亚组分M6–2–1～M6–2–6；亚组份M6–2–4(1.26g)经sephadex LH20柱色谱分离，再用76mL甲醇洗脱，流速为1.5mL/min，每3.8mL为一流份，收集20个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，分别合并流份1–3、流份4–6、流份7–8、流份9–13、流份14–16、流份17–20，得到亚组份M6–2–4–1～M6–2–4–6；亚组份M6–2–4–4(0.44g)经制备型高效液相色谱纯化，以体积比为60:40的甲醇-水混合溶剂洗脱，色谱柱为YMC-Pack ODS-A，流速为3mL/min，收集保留时间为24.1min的色谱峰，得到化合物2，即八角莲双黄酮G(2.2mg)。
本发明实施例1-3所述方法制备的化合物经IR、UV、核磁共振光谱(1H-NMR、13C-NMR、HSQC、HMBC)、以及高分辨率质谱(HR-ESI-MS)等光谱学技术鉴定，为双黄酮类化合物八角莲双黄酮F、G，有关图谱见图2-15所示，实验表明，本发明方法稳定可靠，易操作，所得产物对乙酰胆碱酯酶具有抑制作用，可有效用于制备抗阿尔茨海默症药物，有关资料如下：
一、化合物的结构鉴定
化合物1为黄色无定形粉末。HR-ESI-MS给出准分子离子峰m/z:[M+H]+585.1023(计算值为585.1033)，确定其分子式为C31H20O12，不饱和度为12。红外光谱显示存在一个缔合羰基(1647cm-1)、羟基(3361cm-1)、苯环(1510cm-1)。紫外光谱给出黄酮醇的特征性最大吸收271nm、369nm。1HNMR谱(表1)给出两组芳环偶合系统，包括一个对位二取代苯基δH7.97(2H,d,J＝8.7Hz)、6.84(2H,d,J＝8.7Hz)，一个五取代苯基δH6.17(1H,s)，一个脂肪氢信号δH4.22(1H,s)。13C NMR与HSQC给出一个脂肪碳信号δC16.4，一个黄酮醇骨架(一个羰基碳信号δ176.2，两个苯环，两个连氧烯碳信号信号δC146.9、135.4。它的1H NMR光谱与山柰酚非常相似，不同之处在于化合物1中多了一个脂肪氢信号δH4.22(1H,s)，少了一个山柰酚中C-8位氢信号δH6.48(1H,br s)。根据高分辨质谱给出的分子式C31H20O12，确定两个山柰酚结构单元通过一个亚甲基在C-8位相连接。这也由亚甲基氢信号δH4.22与山柰酚结构单元中的C-7与C-7″(δC162.1)、C-8与C-8″(δC104.6)、C-9与C-9″(δC153.8)的HMBC远程相关所证实。根据HSQC和HMBC谱，对化合物1的NMR数据进行归属(具体见表1和2)。因此，化合物1的结构被鉴定为3,5,7,4′,3″,5″,7″,4″′-octahydroxyl-[8-CH2-8′]-biflavone，命名为八角莲双黄酮F(dysosdiflavonoid F)，分子结构式为：
化合物2为黄色无定形粉末。与化合物1相比，不同之处在于在化合物2中的一个1,3,4-三取代苯基δH7.82(1H,d,J＝2.0Hz)、6.80(1H,d,J＝8.5Hz)、7.54(1H,dd,J＝8.52.0Hz)代替了化合物1中的一个对位二取代苯基。这也被HR-ESI-MS和HMBC远程相关所证实。化合物2给出一个[M+Na]+准分子离子峰m/z 623.0799(calcd 623.0802)，比化合物1多了16个质量单位。由1,3,4-三取代苯基氢信号δH7.82(1H,d,J＝2.0Hz,H-2′)、7.54(1H,dd,J＝8.5,2.0Hz,H-6′)与烯碳C-2(δ146.7)的HMBC远程相关，一个1,2,3,4,5-五取代苯基δH6.12(1H,s)，以及两个连氧烯碳δC 146.7,135.4，确定化合物2中含有一个槲皮素结构单元。根据HSQC和HMBC谱，对化合物2的NMR数据进行归属(具体见表1和2)。因此，化合物2的结构被鉴定为3,5,7,3′,4′,3″,5″,7″,4″′-nonahydroxyl-[8-CH2-8′]-biflavone，命名为八角莲双黄酮G(dysosdiflavonoid G)，分子结构式为：
表1.化合物1–2的1H NMR数据
| NO. | 1 | 2 |
| 6 | 6.17,s | 6.12,s |
| 8 | ||
| 2′ | 7.97,d(8.7) | 7.82,d(2.0) |
| 3′ | 6.84,d(8.7) | |
| 5′ | 6.84,d(8.7) | 6.80,d(8.5) |
| 6′ | 7.97,d(8.7) | 7.54,dd(8.5,2.0) |
| 6″ | 6.17，S | 6.16,s |
| 8″ | ||
| 2″′ | 7.97,d(8.7) | 8.01,d(8.8) |
| 3″′ | 6.84,d(8.7) | 6.83,d(9.0) |
| 5″′ | 6.84,d(8.7) | 6.83,d(9.0) |
| 6″′ | 7.97,d(8.7) | 8.01,d(8.8) |
| 8-CH<sub>2</sub>-8″ | 4.22,s | 4.24,s |
| 5-OH | 12.53,s | 12.52,s |
| 5″-OH | 12.53,s |
表2.化合物1–2的13C NMR数据
二、乙酰胆碱酯酶抑制活性试验(以实施例3为例)
(一)实验方法
1.用磷酸盐缓冲液(每100mL磷酸盐缓冲液中含0.1M Na2HPO4溶液94.7mL；0.1MNaH2PO4溶液5.3mL，调pH至8.0)将AChE稀释成0.1U/mL工作液；
2.碘化硫代乙酰胆碱和DTNB用磷酸盐缓冲液配成6.25mM的溶液(工作液)；
3.化合物用DMSO稀释成浓度梯度。阳性对照药为他克林，用DMSO稀释成浓度梯度；阴性对照组(NC组)为2％ DMSO溶剂对照。
4.反应在96孔板中进行，铺板按200uL/体系，每个样品做3个重复；
(1)化合物和他克林浓度梯度的设定(用1％ DMSO稀释)：
| TA浓度梯度设定 | 测试化合物浓度梯度设定 |
| 2μM | 50μM |
| 1μM | 30μM |
| 0.5μM | 10μM |
| 0.2μM | 3μM |
| 0.04μM | 1μM |
| 0.008μM | 0.2μM |
| 0.0016μM | 0.05μM |
(2)铺板：200μL/体系，每孔内DMSO的终浓度均为0.1％，每个样本做3个复孔。
5.加入显色剂和底物后1小时内，每30秒钟检测一次405nm吸光值。
6.选择NC组吸光值平均值约为1时的样品吸光值，计算化合物吸光值平均值(化合物测定值-背景值)，并按照(NC-化合物吸光值平均值)/NC*100％来计算化合物AChE抑制率。
在对实施例3实验的同时，对其它实施例也作了相同的实验，均取得了相同或相近似的结果，这里不再一一列举。
(二)实验结果
化合物八角莲双黄酮F(1)、八角莲双黄酮G(2)对乙酰胆碱酯酶具有较强的抑制活性，IC50值分别为1.42μM、0.73μM。
本发明通过反复大量的实验证实，双黄酮类化合物由于母核及其所连接取代基的位置、数目、种类、以及黄酮结构单元连接方式的不同，其乙酰胆碱酯酶的抑制活性会存在很大的差异，本发明方法制备出的化合物1和2对乙酰胆碱酯酶具有较强的抑制活性，具有制备临床上抗阿尔茨海默症药物的前景，开拓了八角莲的药用价值，并为制备抗阿尔茨海默症药物提供了技术支持，是制备抗抗阿尔茨海默症药物上的一大创新，有显著的经济和社会效益。
Claims (5)
1.一种双酮类化合物八角莲双黄酮F、G的制备方法，其特征在于，两个化合物是从八角莲药材中分离得到，分子结构式为：
其制备方法是：
以八角莲药材20–40kg为原料，加入3–5倍原料重量、体积浓度为95％的乙醇加热回流提取3次，提取温度为92–95℃，每次提取时间为1–1.5小时，减压回收95％乙醇，得浸膏状95％乙醇提取物；药渣加入3–5倍药材原重量、体积浓度为50％的乙醇加热回流提取1次，提取温度为92–95℃，每次提取时间为1–1.5小时，减压回收50％乙醇，得浸膏状50％乙醇提取物；合并95％乙醇提取物和50％乙醇提取物，加入体积为提取物重量体积2倍的无水乙醇溶解，重量体积是指固体以kg计，液体以L计，再加入重量体积为提取物2倍的硅藻土吸附，回收溶剂后，将载有提取物的硅藻土装入玻璃柱，依次用重量体积为提取物3倍的二氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇洗脱，回收溶剂，得二氯甲烷洗脱部位、乙酸乙酯洗脱部位、甲醇洗脱部位；将甲醇洗脱部位经硅胶柱色谱分离，依次用体积比为100:0、100:1、100:3、100:5、100:7、100:10、100:30、100:50、0:100的二氯甲烷-甲醇混合溶剂进行梯度洗脱，每一梯度用30L–60L洗脱液，流速为50–70mL/min，每5L–10L为一流份，收集54个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，用GF254薄层板，分别以体积比4:5的石油醚-丙酮和体积比5:2的二氯甲烷-甲醇作为展开剂，以体积比10:90的硫酸-乙醇溶液作为显色剂，105℃加热3–5min，根据薄层色谱检测结果，分别合并流份1–12、流份13–24、流份25–30、流份31–36、流份37–38、流份39–42、流份43–44、流份45–48、流份49–54，得到组份Fr.1、Fr.2、Fr.3、Fr.4、Fr.5、Fr.6、Fr.7、Fr.8、Fr.9；
组份Fr.5经sephadex LH-20柱色谱分离，用2.5L–5L甲醇洗脱，流速为5–10mL/min，每100mL–200mL为一流份，收集25个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，分别合并流份1–3、流份4–5、流份6–7、流份8–10、流份11–13、流份14–17、流份19–21、流份22–25，得到亚组份M5–1～M5–8；亚组份M5–8经硅胶柱色谱分离，石油醚–丙酮混合溶剂梯度洗脱，体积比为100:10、100:20、100:30、100:40、100:50、100:70、1:1、1:2、1:3，每一梯度用1.5L–3L洗脱液，流速为15–25mL/min，每250mL–500mL为一流份，收集54个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，分别合并流份1–6、流份7–12、流份13–18、流份19–25、流份26–30、流份31–36、流份37–42、流份43–48、流份49–54，得到亚组份M5–8–1、M5–8–2、M5–8–3、M5–8–4、M5–8–5、M5–8–6、M5–8–7、M5–8–8、M5–8–9；亚组份M5–8–4经制备型高效液相色谱纯化，以体积比为60:40的甲醇-水混合溶剂洗脱，色谱柱为YMC-Pack ODS-A，流速为3mL/min，收集保留时间为47.2min的色谱峰，回收溶剂，得化合物1，即八角莲双黄酮F；
组份Fr.6经sephadex LH20柱色谱分离，3–6L甲醇洗脱，流速为5–10mL/min，每100mL–200mL为一流份，收集30个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，分别合并流份1–17、流份18–30，得到亚组份M6–1和M6–2；亚组份M6–2经硅胶柱色谱分离，以二氯甲烷-甲醇混合溶剂梯度洗脱，体积比为100:1、100:3、100:5、100:7、100:10、100:30，每一梯度用0.75L–1.5L洗脱液，流速为10–15mL/min，每150mL–300mL为一流份，收集30个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，分别合并流份1–5、流份6–10、流份11–15、流份16–20、流份21–25、流份26–30，得到亚组分M6–2–1～M6–2–6；亚组份M6–2–4经sephadex LH20柱色谱分离，再用50mL–100mL甲醇洗脱，流速为1–2mL/min，每2.5mL–5.0mL为一流份，收集20个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，分别合并流份1–3、流份4–6、流份7–8、流份9–13、流份14–16、流份17–20，得到亚组份M6–2–4–1～M6–2–4–6；亚组份M6–2–4–4经制备型高效液相色谱纯化，以体积比为60:40的甲醇-水混合溶剂洗脱，色谱柱为YMC-Pack ODS-A，流速为3mL/min，收集保留时间为24.1min的色谱峰，得到化合物2，即八角莲双黄酮G。
2.根据权利要求1所述的双酮类化合物八角莲双黄酮F、G的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
以八角莲药材40kg为原料，加入3倍原料重量、体积浓度为95％的乙醇加热回流提取3次，提取温度为95℃，每次提取时间为1小时，减压回收95％乙醇，得浸膏状95％乙醇提取物；药渣加入3倍药材原重量、体积浓度为50％的乙醇加热回流提取1次，提取温度为95℃，每次提取时间为1小时，减压回收50％乙醇，得浸膏状50％乙醇提取物；合并95％乙醇提取物和50％乙醇提取物5.4kg，加入无水乙醇10.8L溶解，再硅藻土10.8kg吸附，回收溶剂后，将载有提取物的硅藻土装入玻璃柱，依次加入16.2L的二氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇洗脱，回收溶剂，得二氯甲烷洗脱部位、乙酸乙酯洗脱部位、甲醇洗脱部位；将甲醇洗脱部位3.4kg经硅胶柱色谱分离，依次用体积比为100:0、100:1、100:3、100:5、100:7、100:10、100:30、100:50、0:100的二氯甲烷-甲醇混合溶剂进行梯度洗脱，每一梯度用60L洗脱液，流速为70mL/min，每10L为一流份，收集54个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，用GF254薄层板，分别以体积比4:5的石油醚-丙酮和体积比5:2的二氯甲烷-甲醇作为展开剂，以体积比10:90的硫酸-乙醇溶液作为显色剂，105℃加热4min，根据薄层色谱检测结果，分别合并流份1–12、流份13–24、流份25–30、流份31–36、流份37–38、流份39–42、流份43–44、流份45–48、流份49–54，得到组份Fr.1、Fr.2、Fr.3、Fr.4、Fr.5、Fr.6、Fr.7、Fr.8、Fr.9；
组份Fr.5 110.0g经sephadex LH-20柱色谱分离，用5L甲醇洗脱，流速为10mL/min，每200mL为一流份，收集25个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，分别合并流份1–3、流份4–5、流份6–7、流份8–10、流份11–13、流份14–17、流份19–21、流份22–25，得到亚组份M5–1～M5–8；亚组份M5–8经硅胶柱色谱分离，石油醚–丙酮混合溶剂梯度洗脱，体积比为100:10、100:20、100:30、100:40、100:50、100:70、1:1、1:2、1:3，每一梯度用3L洗脱液，流速为25mL/min，每500mL为一流份，收集54个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，分别合并流份1–6、流份7–12、流份13–18、流份19–25、流份26–30、流份31–36、流份37–42、流份43–48、流份49–54，得到亚组份M5–8–1、M5–8–2、M5–8–3、M5–8–4、M5–8–5、M5–8–6、M5–8–7、M5–8–8、M5–8–9；亚组份M5–8–4经制备型高效液相色谱纯化，以体积比为60:40的甲醇-水混合溶剂洗脱，色谱柱为YMC-Pack ODS-A，流速为3mL/min，收集保留时间为47.2min的色谱峰，回收溶剂，得化合物1，即八角莲双黄酮F；
组份Fr.6经sephadexLH20柱色谱分离，6L甲醇洗脱，流速为10mL/min，每200mL为一流份，收集30个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，分别合并流份1–17、流份18–30，得到亚组份M6–1和M6–2；亚组份M6–2经硅胶柱色谱分离，以二氯甲烷-甲醇混合溶剂梯度洗脱，体积比为100:1、100:3、100:5、100:7、100:10、100:30，每一梯度用1.5L洗脱液，流速为15mL/min，每300mL为一流份，收集30个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，分别合并流份1–5、流份6–10、流份11–15、流份16–20、流份21–25、流份26–30，得到亚组分M6–2–1～M6–2–6；亚组份M6–2–4经sephadex LH20柱色谱分离，再用100mL甲醇洗脱，流速为2mL/min，每5.0mL为一流份，收集20个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，分别合并流份1–3、流份4–6、流份7–8、流份9–13、流份14–16、流份17–20，得到亚组份M6–2–4–1～M6–2–4–6；亚组份M6–2–4–4经制备型高效液相色谱纯化，以体积比为60:40的甲醇-水混合溶剂洗脱，色谱柱为YMC-Pack ODS-A，流速为3mL/min，收集保留时间为24.1min的色谱峰，得到化合物2，即八角莲双黄酮G。
3.根据权利要求1所述的双酮类化合物八角莲双黄酮F、G的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
以八角莲药材20kg为原料，加入5倍原料重量、体积浓度为95％的乙醇加热回流提取3次，提取温度为92℃，每次提取时间为1.5小时，减压回收95％乙醇，得浸膏状95％乙醇提取物；药渣加入5倍药材原重量、体积浓度为50％的乙醇加热回流提取1次，提取温度为92℃，每次提取时间为1.5小时，减压回收50％乙醇，得浸膏状50％乙醇提取物；合并95％乙醇提取物和50％乙醇提取物2.7kg，加入无水乙醇5.4L溶解，再加入硅藻土5.4kg吸附，回收溶剂后，将载有提取物的硅藻土装入玻璃柱，依次用8.1L的二氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇洗脱，回收溶剂，得二氯甲烷洗脱部位、乙酸乙酯洗脱部位、甲醇洗脱部位；将甲醇洗脱部位经硅胶柱色谱分离，依次用体积比为100:0、100:1、100:3、100:5、100:7、100:10、100:30、100:50、0:100的二氯甲烷-甲醇混合溶剂进行梯度洗脱，每一梯度用30L洗脱液，流速为50mL/min，每5L为一流份，收集54个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，用GF254薄层板，分别以体积比4:5的石油醚-丙酮和体积比5:2的二氯甲烷-甲醇作为展开剂，以体积比10:90的硫酸-乙醇溶液作为显色剂，105℃加热5min，根据薄层色谱检测结果，分别合并流份1–12、流份13–24、流份25–30、流份31–36、流份37–38、流份39–42、流份43–44、流份45–48、流份49–54，得到组份Fr.1、Fr.2、Fr.3、Fr.4、Fr.5、Fr.6、Fr.7、Fr.8、Fr.9；
组份Fr.5 55.0g经sephadex LH-20柱色谱分离，用2.5L甲醇洗脱，流速为5mL/min，每100mL为一流份，收集25个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，分别合并流份1–3、流份4–5、流份6–7、流份8–10、流份11–13、流份14–17、流份19–21、流份22–25，得到亚组份M5–1～M5–8；亚组份M5–8经硅胶柱色谱分离，石油醚–丙酮混合溶剂梯度洗脱，体积比为100:10、100:20、100:30、100:40、100:50、100:70、1:1、1:2、1:3，每一梯度用1.5L洗脱液，流速为15mL/min，每250mL为一流份，收集54个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，分别合并流份1–6、流份7–12、流份13–18、流份19–25、流份26–30、流份31–36、流份37–42、流份43–48、流份49–54，得到亚组份M5–8–1、M5–8–2、M5–8–3、M5–8–4、M5–8–5、M5–8–6、M5–8–7、M5–8–8、M5–8–9；亚组份M5–8–4经制备型高效液相色谱纯化，以体积比为60:40的甲醇-水混合溶剂洗脱，色谱柱为YMC-Pack ODS-A，流速为3mL/min，收集保留时间为47.2min的色谱峰，回收溶剂，得化合物1，即八角莲双黄酮F；
组份Fr.6 65.0g经sephadex LH20柱色谱分离，3L甲醇洗脱，流速为5mL/min，每100mL为一流份，收集30个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，分别合并流份1–17、流份18–30，得到亚组份M6–1和M6–2；亚组份M6–2经硅胶柱色谱分离，以二氯甲烷-甲醇混合溶剂梯度洗脱，体积比为100:1、100:3、100:5、100:7、100:10、100:30，每一梯度用0.75L洗脱液，流速为10mL/min，每150mL为一流份，收集30个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，分别合并流份1–5、流份6–10、流份11–15、流份16–20、流份21–25、流份26–30，得到亚组分M6–2–1～M6–2–6；亚组份M6–2–4经sephadex LH20柱色谱分离，再用50mL甲醇洗脱，流速为1mL/min，每2.5mL为一流份，收集20个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，分别合并流份1–3、流份4–6、流份7–8、流份9–13、流份14–16、流份17–20，得到亚组份M6–2–4–1～M6–2–4–6；亚组份M6–2–4–4经制备型高效液相色谱纯化，以体积比为60:40的甲醇-水混合溶剂洗脱，色谱柱为YMC-Pack ODS-A，流速为3mL/min，收集保留时间为24.1min的色谱峰，得到化合物2，即八角莲双黄酮G。
4.根据权利要求1所述的双酮类化合物八角莲双黄酮F、G的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
以八角莲药材30kg为原料，加入4倍原料重量、体积浓度为95％的乙醇加热回流提取3次，提取温度为93℃，每次提取时间为1.2小时，减压回收95％乙醇，得浸膏状95％乙醇提取物；药渣加入4倍药材原重量、体积浓度为50％的乙醇加热回流提取1次，提取温度为93℃，每次提取时间为1.2小时，减压回收50％乙醇，得浸膏状50％乙醇提取物；合并95％乙醇提取物和50％乙醇提取物4.0kg，加入无水乙醇8.0L溶解，再硅藻土8.0kg吸附，回收溶剂后，将载有提取物的硅藻土装入玻璃柱，依次用12L的二氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇洗脱，回收溶剂，得二氯甲烷洗脱部位、乙酸乙酯洗脱部位、甲醇洗脱部位；将甲醇洗脱部位经硅胶柱色谱分离，依次用体积比为100:0、100:1、100:3、100:5、100:7、100:10、100:30、100:50、0:100的二氯甲烷-甲醇混合溶剂进行梯度洗脱，每一梯度用45L洗脱液，流速为60mL/min，每7.5L为一流份，收集54个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，用GF254薄层板，分别以体积比4:5的石油醚-丙酮和体积比5:2的二氯甲烷-甲醇作为展开剂，以体积比10:90的硫酸-乙醇溶液作为显色剂，105℃加热3min，根据薄层色谱检测结果，分别合并流份1–12、流份13–24、流份25–30、流份31–36、流份37–38、流份39–42、流份43–44、流份45–48、流份49–54，得到组份Fr.1、Fr.2、Fr.3、Fr.4、Fr.5、Fr.6、Fr.7、Fr.8、Fr.9；
组份Fr.5 82.5g经sephadex LH-20柱色谱分离，用3.75L甲醇洗脱，流速为7mL/min，每150mL为一流份，收集25个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，分别合并流份1–3、流份4–5、流份6–7、流份8–10、流份11–13、流份14–17、流份19–21、流份22–25，得到亚组份M5–1～M5–8；亚组份M5–8经硅胶柱色谱分离，石油醚–丙酮混合溶剂梯度洗脱，体积比为100:10、100:20、100:30、100:40、100:50、100:70、1:1、1:2、1:3，每一梯度用2.25L洗脱液，流速为20mL/min，每375mL为一流份，收集54个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，分别合并流份1–6、流份7–12、流份13–18、流份19–25、流份26–30、流份31–36、流份37–42、流份43–48、流份49–54，得到亚组份M5–8–1、M5–8–2、M5–8–3、M5–8–4、M5–8–5、M5–8–6、M5–8–7、M5–8–8、M5–8–9；亚组份M5–8–4经制备型高效液相色谱纯化，以体积比为60:40的甲醇-水混合溶剂洗脱，色谱柱为YMC-Pack ODS-A，流速为3mL/min，收集保留时间为47.2min的色谱峰，回收溶剂，得化合物1，即八角莲双黄酮F；
组份Fr.6 97.5g经sephadex LH20柱色谱分离，4.5L甲醇洗脱，流速为10mL/min，每150mL为一流份，收集30个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，分别合并流份1–17、流份18–30，得到亚组份M6–1和M6–2；亚组份M6–2经硅胶柱色谱分离，以二氯甲烷-甲醇混合溶剂梯度洗脱，体积比为100:1、100:3、100:5、100:7、100:10、100:30，每一梯度用1125mL洗脱液，流速为12mL/min，每225mL为一流份，收集30个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，分别合并流份1–5、流份6–10、流份11–15、流份16–20、流份21–25、流份26–30，得到亚组分M6–2–1～M6–2–6；亚组份M6–2–4经sephadex LH20柱色谱分离，再用76mL甲醇洗脱，流速为1.5mL/min，每3.8mL为一流份，收集20个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，分别合并流份1–3、流份4–6、流份7–8、流份9–13、流份14–16、流份17–20，得到亚组份M6–2–4–1～M6–2–4–6；亚组份M6–2–4–4经制备型高效液相色谱纯化，以体积比为60:40的甲醇-水混合溶剂洗脱，色谱柱为YMC-Pack ODS-A，流速为3mL/min，收集保留时间为24.1min的色谱峰，得到化合物2，即八角莲双黄酮G。
5.权利要求1-4任一项所述方法制备的八角莲双黄酮F、八角莲双黄酮G在制备抗阿尔茨海默症药物中的应用。
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Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101361733A (zh) * | 2008-09-17 | 2009-02-11 | 暨南大学 | 黄酮衍生物的用途及制备方法 |
| CN101711779A (zh) * | 2008-10-08 | 2010-05-26 | 中南大学 | 垫状卷柏提取物在制备抗阿尔茨海默病药物中的用途 |
| CN101712670A (zh) * | 2009-11-17 | 2010-05-26 | 中山大学 | 一种3’8”-双芹菜素型双黄酮类化合物的制备方法及应用 |
| CN109453162A (zh) * | 2019-01-07 | 2019-03-12 | 海南热带海洋学院 | 穗花杉双黄酮在制备保护和/或修复神经细胞药物中的应用、药物组合物及应用 |
| CN111233808A (zh) * | 2018-11-28 | 2020-06-05 | 中国科学院大连化学物理研究所 | 一种新双黄酮类化合物及其制备方法和用途 |
| CN111961022A (zh) * | 2020-08-28 | 2020-11-20 | 辽宁中医药大学 | 一种具有神经保护作用的双黄酮类化合物及其提取分离方法 |
-
2022
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Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101361733A (zh) * | 2008-09-17 | 2009-02-11 | 暨南大学 | 黄酮衍生物的用途及制备方法 |
| CN101711779A (zh) * | 2008-10-08 | 2010-05-26 | 中南大学 | 垫状卷柏提取物在制备抗阿尔茨海默病药物中的用途 |
| CN101712670A (zh) * | 2009-11-17 | 2010-05-26 | 中山大学 | 一种3’8”-双芹菜素型双黄酮类化合物的制备方法及应用 |
| CN111233808A (zh) * | 2018-11-28 | 2020-06-05 | 中国科学院大连化学物理研究所 | 一种新双黄酮类化合物及其制备方法和用途 |
| CN109453162A (zh) * | 2019-01-07 | 2019-03-12 | 海南热带海洋学院 | 穗花杉双黄酮在制备保护和/或修复神经细胞药物中的应用、药物组合物及应用 |
| CN111961022A (zh) * | 2020-08-28 | 2020-11-20 | 辽宁中医药大学 | 一种具有神经保护作用的双黄酮类化合物及其提取分离方法 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| 李宁等: "羽叶千里光中一个新的双黄酮", 《中国药科大学学报》, vol. 39, no. 1, pages 20 - 22 * |
| 缪刘萍等: "双黄酮类化合物药理作用研究", 《世界临床药物》, vol. 33, no. 6, pages 369 - 375 * |
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