CN115819525A - 一种靶向肿瘤的伤寒毒素b亚基模拟肽及其应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种靶向肿瘤的伤寒毒素B亚基模拟肽及其应用。伤寒毒素B亚基模拟肽选自YQPB‑1：COOH‑Thr‑Gly‑Ser‑Gly‑Asn‑Ala‑Asn‑Val‑NH₂等6条多肽中的任意一种。本发明所述的伤寒毒素B亚基模拟肽或其二聚体、多聚体在制备靶向肿瘤的的诊断试剂或肿瘤治疗药物中的应用。本发明开发了一系列新的模拟伤寒沙门菌分泌的伤寒毒素B亚基(PltB)的模拟肽，YQPB‑X系列的模拟肽能与神经节苷脂高表达的肿瘤细胞特异性结合，经活体光学成像和结果证实对神经母细胞瘤、非小细胞肺癌、黑色素瘤、乳腺癌和骨肉瘤等多种肿瘤具有优异的显像成果。

Description

一种靶向肿瘤的伤寒毒素B亚基模拟肽及其应用

技术领域

本发明属于生物医学工程领域，具体涉及一种靶向肿瘤的伤寒毒素B亚基模拟肽及其应用。

背景技术

癌症是全球性的公共卫生挑战，严重危害人类健康。GLOBOCAN 2021年12月发布的相关数据表明，2021年全球新发癌症1900万例，996万癌症患者死亡。近年来，恶性肿瘤已经成为我国城市居民死亡的第一原因。全人类与癌症的斗争已经进入了攻坚阶段。但目前医药水平难以攻克晚期恶性肿瘤，及早发现与治疗依然是目前治疗恶性肿瘤最有效的手段。因此肿瘤的早期诊断对于提高患者的生存率具有重大意义。目前用于肿瘤诊断的常规影像技术主要为X-CT、核磁共振、超声诊断等。其中，分子探针作为分析传感和光学成像的强大工具，可以直接在分子水平上对生物分析物进行可视化分析，并为复杂的生物结构和过程提供有用的信息。分子探针的基本成像原理是将制备好的荧光探针以注射等方式进入到活体组织中，使靶点与分子探针相互作用，再以合适的成像系统检测出分子探针发出的信息。借助靶向肿瘤的分子探针可以实现早期筛查和肿瘤的早期诊断。

手术治疗是肿瘤治疗的手段之一，病人经过手术切除后获得较好的预后，然而对肿瘤边界的精确定位一直是需要攻克的科研难题。为外科手术医生提供手术边界，使肿瘤完整切除，可降低病人术后复发可能。然而，现在被FDA批准用于临床上使用的手术导航显像剂灵敏度低和特异性弱，如用于肝癌手术导航的显像剂吲哚箐绿，难以满足临床需求。靶向肿瘤的分子探针具有特异性强和灵敏度高的优点，为肿瘤边界的请准定位提供希望。

沙门氏菌血清型伤寒(S.Typhi)是伤寒的病因，每年导致20多万人死亡。其他沙门氏菌血清通常会引起自限性肠胃炎，而伤寒沙门氏菌不同，它会引起一种全身性的、危及生命的疾病。伤寒沙门氏菌编码伤寒毒素，AB5毒素是由起催化作用的A亚基和起连接作用的五聚体B亚基，包括霍乱毒素、百日咳毒素、志贺毒素和大肠杆菌枯草酶细胞毒素。A2B5毒素是由两个起催化作用的A亚基(PltA和CdtB)和一个起连接作用的五聚体B亚基(PltB)。PltB可与癌细胞表面的神经节苷脂家族结合，神经节苷脂家族在多种癌症细胞上有表达。模拟伤寒毒素B亚基的模拟肽可以靶向癌细胞上的神经节苷脂，实现肿瘤的早期诊断以及术中导航。

发明内容

本发明的首要目的是在于提供靶向肿瘤的伤寒毒素的模拟肽及其序列，该系列多肽可结合神经节苷脂高表达的肿瘤细胞，实现靶向肿瘤病灶。

本发明的另一目的在于提供靶向肿瘤的伤寒毒素的模拟肽的荧光探针及其制备方法；

本发明的另一目的在于提供靶向肿瘤的伤寒毒素的模拟肽的放射性核素探针及其制备方法。

本发明的又一目的在于提供几种所述多肽和荧光和放射性核素探针的应用。

本发明的目的可通过以下技术方案实现：

靶向肿瘤的伤寒毒素B亚基模拟肽，选自下述任意一条多肽：

YQPB-1：COOH-Thr-Gly-Ser-Gly-Asn-Ala-Asn-Val-NH₂(SEQ ID NO.1)，

YQPB-2：COOH-Thr-Gly-Ser-Gly-Cys-Ala-Asn-Val-NH₂(SEQ ID NO.2)，

YQPB-3：COOH-Thr-Gly-Ser-Gly-Asn-His-Asn-Val-NH₂(SEQ ID NO.3)，

YQPB-4：COOH-Thr-Gly-Ser-Gly-Asn-Ala-Asn-Val-NH₂(SEQ ID NO.4)，

YQPB-5：COOH-Thr-Gly-Ser-Gly-Tyr-Ala-Asn-Val-NH₂(SEQ ID NO.5)，

YQPB-6：COOH-Thr-Gly-Ser-Gly-Phe-Ala-Asn-Val-NH₂(SEQ ID NO.6)。

本发明所述的伤寒毒素B亚基模拟肽在制备靶向肿瘤的的诊断试剂中的应用，优选在制备肿瘤诊断显像剂中的应用；进一步优选在制备肿瘤边界的精准定位或手术导航显像试剂或放射性核素显像试剂中的应用。所述的肿瘤为表达神经节苷脂的肿瘤，优选神经母细胞瘤、视网膜母细胞瘤、黑素瘤、肉瘤、脑瘤、乳腺癌、肝癌、非小细胞肺癌。

一种修饰的具有靶向肿瘤显像功能的多肽化合物，具备以下通式：

M-L-YQPB-X

其中，M表示光标记或放射性核素标记；L为连接集团；

YQPB-X为本发明所述的任意一条伤寒毒素B亚基模拟肽。

作为本发明的一种优选，本发明所述的光标记M选自有机发色团、有机荧光团、光吸收化合物、光反射化合物、光散射化合物或生物发光分子。

作为本发明的一种优选，所述的放射性核素标记M选自^99mTc、⁶⁸Ga，⁶⁴Cu，⁶⁷Ga，⁹⁰Y，¹¹¹In或¹⁷⁷Lu、¹²⁵I。

作为本发明的一种优选，所述的L选自6-氨基己酸、叠氮戊酸、丙炔酸、聚乙二醇、1,4,7-三氮杂环戊烷-1,4,7-三乙酸、7-[(4-羟基丙基)亚甲基]-1,4,7-三氮杂化壬烷-1、4-二乙酸、1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7,10-四乙酸、巯基乙酰三甘氨酸、MAG2、N3S、N2S2类配体、二乙基三胺五乙酸、1,4-丁二酸、5-氨基戊酸、聚乙烯亚胺、6-肼基吡啶-3-甲酸、溴甲酸苯甲基、N-(2-氨基己酸)马来酰亚胺、HYNIC-PEG4、HYNIC或它们的组合；优选6-氨基己酸、PEG 4、PEG 6、HYNIC-PEG4或HYNIC中的任意一种或多种。

一种近红外荧光成像探针，为近红外荧光染料标记的所述的靶向肿瘤的伤寒毒素B亚基模拟肽，所述的近红外荧光染料优选MPA、IRDye800、Cy7.5、Cy5.5。

一种放射性核素探针，为放射性核素标记的本发明所述的靶向肿瘤的伤寒毒素B亚基模拟肽。

作为本发明的一种优选，所述的放射性核素探针为放射性碘或氟标记的本发明所述的靶向肿瘤的伤寒毒素B亚基模拟肽中酪氨酸的酚羟基邻位上的氢。

作为本发明的一种优选，所述的放射性探针包括所述的靶向肿瘤的伤寒毒素B亚基模拟肽，连接基团，放射性核素配体，用于放射性核素标记的双功能螯合剂以及放射性核素。

作为本发明的一种优选，所述的用于放射性核素标记的双功能螯合剂选自HYNIC、DOTA、NOTA或DTPA。

本发明所述的近红外荧光成像探针、所述的放射性核素探针在制备肿瘤诊断和术中导航的显像剂中的应用；优选在制备肿瘤诊断或术中导航的显像剂中的应用，进一步优选在制备肿瘤边界的精准定位或手术导航显像试剂或放射性核素显像试剂中的应用。

所述的肿瘤为表达神经节苷脂的肿瘤，优选神经母细胞瘤、视网膜母细胞瘤、黑素瘤、肉瘤、脑瘤、乳腺癌、肝癌、非小细胞肺癌。

本发明所述的多肽高度模拟伤寒毒素B亚基(PltB)，具有良好的肿瘤靶向效果，进入体内能高效结合肿瘤细胞的细胞膜上神经节苷脂，在肿瘤部位有很好的聚集和滞留，具有较高的靶和非靶比值，适合用于制备成荧光显像剂，并用于肿瘤边界精准定位的光学显像剂及肿瘤手术的术中导航的显像剂。

本发明的有益效果为：

1.本发明开发了一系列新的模拟伤寒毒素B亚基(PltB)的高亲和力的模拟肽，可用于靶向神经节苷脂。利用神经节苷脂在神经母细胞瘤、视网膜母细胞瘤、黑素瘤、肉瘤、脑瘤、乳腺癌、肝癌、非小细胞肺癌等多种肿瘤细胞膜上均有高表达，基于YQPB-X(X＝1-6)多肽与神经节苷脂结合的原理，从而实现神经母细胞瘤、视网膜母细胞瘤、黑素瘤、肉瘤、脑瘤、乳腺癌、肝癌、非小细胞肺癌等多种肿瘤早期诊断以及术中导航。

2.YQPB-X系列的多肽均为低分子量多肽，该系列的短肽是由天然氨基酸组成，原料易得，合成成本廉价。通过延长多肽的半衰期来提高多肽在体内的循环时间，促进影像探针在肿瘤部位的聚集和滞留，进而获得更佳的肿瘤显像效果，有利于推广临床应用。

3.本发明中提供的多肽序列均为首次报道，合成方法简单，获取渠道方便。

4.YQPB-X系列的多肽对多种肿瘤具有优异的显像效果，包括神经母细胞瘤、视网膜母细胞瘤、黑素瘤、肉瘤、脑瘤、乳腺癌、肝癌和非小细胞肺癌等。

5.本发明利用的近红外荧光染料MPA穿透深度更深、背景组织自发荧光更弱的优点，在荧光成像和荧光指导手术中有良好的应用前景。

6.YQPB-X系列多肽制备成放射性药物可用于肿瘤的筛查和早期诊断，还可以实时无创在位监测早期恶性肿瘤以及治疗。

附图说明

图1为流式细胞术检测不同近红外荧光探针在神经母细胞瘤细胞SK-N-SH的亲和力。

图2为近红外荧光探针MPA-YQPB-1在神经母细胞瘤SK-N-SH荷瘤裸鼠体内的光学成像图。

图3为近红外荧光探针MPA-YQPB-2在乳腺癌MCF-7荷瘤裸鼠体内的光学成像图。

图4为近红外荧光探针MPA-YQPB-3在非小细胞肺癌A549荷瘤裸鼠体内的光学成像图。

图5为近红外荧光探针MPA-YQPB-4在肝癌HepG2荷瘤裸鼠体内的光学成像图。

图6为放射性核素探针^99mTc-HYNIC-Aca-YQPB-1在乳腺癌4T1荷瘤裸鼠体内的光学成像图。

具体实施方式

以下通过具体的实施例和应用例来进一步说明本发明：其中合成步骤中所使用的化学物质均为现有物质或市售商品。各实施例中所涉及的多肽均委托杭州固拓生物科技有限公司合成。

实施例1以多肽YQPB-1为例，包括以下步骤：

(1)树脂溶胀

在反应柱中加入一定量Rink Amide MBHA树脂，然后加入适量的二氯甲烷(DCM)，微微鼓吹氮气10-30分钟，使树脂充分溶胀开来。抽干二氯甲烷溶液，再用二甲基甲酰(DMF)洗涤3遍并抽干。

(2)脱除Fmoc

在反应柱中加入20％六氢吡啶的DMF溶液，去保护5分钟一次，8分钟一次。反应结束后，用DMF、DCM、DMF依次分别洗涤树脂3次。

(3)偶联

准确称取投料树脂摩尔数3倍的Fmoc-Thr-OH与O-苯并三氮唑-四甲基脲六氟磷酸酯(HBTU)，完全溶于DMF中，加N,N-二异丙基乙胺(DIPEA)使羧基活化后，将溶液加入反应柱中进行反应，反应30分钟后，用DMF、DCM、DMF依次分别洗涤3次，然后抽干溶剂，取少量树脂加入6％茚三酮/乙醇溶液和80％苯酚/乙醇溶液各一滴进行检测。若缩合已经完全，无游离氨基存在，则溶液呈无色或淡黄色；否则树脂或溶液将变为蓝色或者红褐色，说明反应不完全。反应结束后，用DCM、DCM、DMF一次分别洗涤3次。重复上述操作，依次偶联其他氨基酸，直至偶联完最后一次氨基酸Fmoc-Val-OH，用甲醇洗涤所得到的peptidyl resin，真空干燥箱里充分干燥。

(4)裂解A

取120mL的裂解液(87.5％三氟乙酸+5％苯甲硫醚+2.5％乙二硫醇+2.5％苯酚+2.5％水)加入树脂中，在低温条件下震荡2h，然后用砂芯漏斗将裂解液与树脂分离，保留滤液。将滤液缓慢滴加到冰无水乙醚中，滴加完毕后，自然沉降30min。然后离心得固体，用乙醚洗涤固体三遍，将所得沉淀烘干后，得到干粉粗品。

(5)纯化

采用高效液相色谱法进行纯化，纯化用色谱填料为10μm的C18制备柱，流动相系统为0.1％TFA/水溶液-0.1％TFA/乙腈溶液，采用梯度洗脱，循环进样纯化，取粗品溶液上样于色谱柱中，启动流动相洗脱，收集主峰蒸去乙腈后，得到目标多肽浓缩液，然后冻干得到目标多肽YQPB-1，最后测定质荷比，确定分子量[M-H]^-＝719。

实施例2制备多肽YQPB-X(X＝2-6)

按照实施例1的方法制备伤寒毒素模拟肽YQPB-2：COOH-Thr-Gly-Ser-Gly-Cys-Ala-Asn-Val-NH₂，质谱确证[M-H]^-＝708。伤寒毒素模拟肽YQPB-3，该序列为COOH-Thr-Gly-Ser-Gly-Asn-His-Asn-Val-NH₂，质谱确证[M-H]^-＝785。伤寒毒素模拟肽YQPB-4：COOH-Thr-Gly-Set-Gly-Asn-Ala-Asn-Val-NH₂，质谱确证[M-H]^-834。伤寒毒素模拟肽YQPB-5，该序列为：COOH-Thr-Gly-Ser-Gly-Tyr-Ala-Asn-Val-NH₂，质谱确证[M-H]^-＝768。伤寒毒素模拟肽YQPB-6，该序列为COOH-Thr-Gly-Ser-Gly-Phe-Ala-Ash-Val-NH₂，质谱确证[M-H]^-＝752。

实施例3制备荧光靶向化合物MPA-YQPB-1

(1)MPA来自我们课题组前期申请的一篇发明专利，授权专利号：

CN101440282

取0.02mmol MPA溶于200μL超干DMSO中，加入3.7mg 1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和2.2mg N-羟基琥珀酰亚胺(EDCI/NHS)(摩尔比MPA:EDCI:NHS＝1:1.5:1.5)，避光反应4h，进行羧基活化反应。

(2)取固相合成的多肽YQPB-1(X＝1-6)0.02mmol与0.1mmol三乙胺和200μL超干DMSO加入到5mL反应瓶中，氮气保护下反应10min；将上述反应(1)中溶液加入(2)的反应液中，室温搅拌反应12h。

(3)反应结束后，通过冻干浓缩反应液，然后加入蒸馏水稀释，用制备液相进行分离纯化，制备液相条件如下所示：使用了Agilent 1220InfinityⅡ系列HPLC系统配备Agilent ZORBAX SB-C18半制备柱(9.4×250mm,5μm)，梯度淋洗60分钟，流速2mL/min，其中流动相A为超纯水(0.01％TFA)，B为乙腈(0.01％TFA)。淋洗梯度设定为0-5分钟时，95％A和5％B；15分钟时，85％A和15％B；30分钟时，70％A和30％B；45分钟时，50％A和50％B。最后制得的绿色产物经分析型HPLC和ESI-MS质谱分析确认为预期产物MPA-YQPB-1。在上述制备过程中，以固相合成的YQPB-X(X＝1-6)多肽替代步骤中使用的YQPB-1多肽，即可得到其它多种具有肿瘤靶向光学成像功能的多肽化合物MPA-YQPB-1、MPA-YQPB-2、MPA-YQPB-3、MPA-YQPB-4、MPA-YQPB-5、MPA-YQPB-6。

实施例4制备放射性核素探针，以^99mTc-HYNIC-Aca-YQPB-1为例

将合成好并纯化的5mg中间体(PEG₄)₂E-HYNIC溶于0.3mL DMSO中，然后加入2.1mgEDCI和1.25mg NHS，室温反应5小时，用分析型高效液相检测反应进程，反应完成后加入模拟肽7.8mg YQPB-1，然后再加5.6mg DIPEA，室温反应3小时，反应完成后通过制备液相进行分离纯化，最后得到黄色固体6.5mg，通过质谱确证为目标产物。

分别配制浓度为100mg/mL的TPPTS(三苯基磷三间磺酸钠)溶液，浓度为130.0mg/mL的Tricine(三甲基甘氨酸)，浓度为102.4mg/mL丁二酸-丁二酸钠缓冲液(其中丁二酸77.0mg，丁二酸钠25.4mg)，分别取10.0μL TPPTS溶液，10.0μL Tricine溶液，10.0μL丁二酸-丁二酸钠缓冲液分别和10.0μL(1.0g/mL)所述(YQPB-1)₂-(PEG₄)₂E-HYNIC混合于西林瓶中，然后加入10mCi Na^99mTcO4于100℃金属浴加热20分钟，待反应结束后冷却至室温，制得放射性核素探针(YQPB-1)₂-(PEG₄)₂E-HYNIC-99mTc，产品经Agilent ZORBAX SB-Aq分析柱分析鉴定。使用的HPLC法为配备了放射性在线检测器(Flow-RAM)和Agilent ZORBAX SB-Aq分析柱(4.6×250mm，5um)的Agilent 1220Infinity II系列HPLC系统。梯度淋洗45分钟，流速1mL/min，其中流动相A为超纯水(0.01％TFA)，B为乙腈(0.01％TFA)。淋洗梯度设定为：0-5分钟时，95％A和5％B；15分钟时，70％A和30％B；20分钟时，65％A和35％B；25分钟时，45％A和55％B；45分钟，5％A和95％B。

实施例5制备的化合物MPA-YQPB-X(X＝1-6)对神经母细胞瘤细胞SK-N-SH的亲和力。

将培养好的人神经母细胞瘤细胞SK-N-SH从12孔板上洗脱后重悬于PBS溶液，分别与实施例制备的MPA-YQPB-X(X＝1-6)(10μmol/L)共孵育2小时，并通过流式细胞术检测其平均荧光强度，荧光强度越强则证明对细胞的亲和力越强。当探针与细胞上的受体亲和力强时，流式细胞仪检测出的细胞平均荧光强度值高，参见图1。体外亲和力实验结果显示浓度相同的MPA-YQPB-X(X＝1-6)的探针分别与神经节苷脂高表达的神经母细胞瘤细胞SK-N-SH孵育后，本发明的YQPB-1与SK-N-SH细胞的亲和力最强的亲和力强度最大。

实施例6制备的化合物MPA-YQPB-1在神经母细胞瘤SK-N-SH荷瘤鼠体内的光学成像图。

将实施例3制备的化合物MPA-YQPB-1配制成生理盐水溶液(1mg/mL)，通过尾静脉分别给3只神经母细胞瘤SK-N-SH荷瘤裸鼠(体重约20克)注射药物MPA-YQPB-1溶液15μL，并于给药后1h、2h、4h、6h、12h和24h进行光学信号采集。观察探针在小鼠体内的分布以及在肿瘤区域的富集。化合物MPA-YQPB-1在3只荷瘤裸鼠中的成像结果基本一致，从1h的成像图中可以看出探针已经在肿瘤中有明显聚集，肿瘤边缘轮廓较清晰，直至24h探针依然在肿瘤中有滞留。显像结果如图2所示。其中，2h时探针在肿瘤部位富集最多，而在其它背景器官的摄取清除较快，从膀胱的信息可以推断出此探针主要通过肾脏代谢。

实施例7制备的化合物MPA-YQPB-2在乳腺癌MCF-7荷瘤鼠体内的光学成像图。

将实施例3制备的化合物MPA-YQPB-2配制成生理盐水溶液(1mg/mL)，通过尾静脉分别给3只乳腺癌MCF-7荷瘤裸鼠(体重约20克)注射药物MPA-YQPB-2溶液15μL，并于给药后1h、2h、4h、6h、12h和24h进行光学信号采集。观察探针在小鼠体内的分布以及在肿瘤区域的富集。化合物MPA-YQPB-2在3只荷瘤裸鼠中的成像结果基本一致，从1h的成像图中可以看出探针已经在肿瘤中有明显聚集，肿瘤边缘轮廓较清晰，直至24h探针依然在肿瘤中有滞留。显像结果如图3所示。其中，2h时探针在肿瘤部位富集最多，而在其它背景器官的摄取清除较快，从膀胱的信息可以推断出此探针主要通过肾脏代谢。

实施例8制备的化合物MPA-YQPB-3在非小细胞肺癌A549荷瘤鼠体内的光学成像图。

将实施例3制备的化合物MPA-YQPB-3配制成生理盐水溶液(1mg/mL)，通过尾静脉分别给3只非小细胞肺癌A549荷瘤裸鼠(体重约20克)注射药物MPA-YQPB-3溶液15μL，并于给药后1h、2h、4h、6h、12h和24h进行光学信号采集。观察探针在小鼠体内的分布以及在肿瘤区域的富集。化合物MPA-YQPB-3在3只荷瘤裸鼠中的成像结果基本一致，从1h的成像图中可以看出探针已经在肿瘤中有明显聚集，肿瘤边缘轮廓较清晰，直至12h探针依然在肿瘤中有滞留。显像结果如图4所示。其中，2h时探针在肿瘤部位富集最多，而在其它背景器官的摄取清除较快，从膀胱的信息可以推断出此探针主要通过肾脏代谢。

实施例9制备的化合物MPA-YQPB-4在肝癌HepG2荷瘤鼠体内的光学成像图。

将实施例3制备的化合物MPA-YQPB-4配制成生理盐水溶液(1mg/mL)，通过尾静脉分别给3只肝癌HepG2荷瘤裸鼠(体重约20克)注射药物MPA-YQPB-4溶液15μL，并于给药后1h、2h、4h、6h、12h和24h进行光学信号采集。观察探针在小鼠体内的分布以及在肿瘤区域的富集。化合物MPA-YQPB-4在3只荷瘤裸鼠中的成像结果基本一致，从1h的成像图中可以看出探针已经在肿瘤中有明显聚集，肿瘤边缘轮廓较清晰，直至12h探针依然在肿瘤中有滞留。显像结果如图5所示。其中，2h时探针在肿瘤部位富集最多，而在其它背景器官的摄取清除较快，从膀胱的信息可以推断出此探针主要通过肾脏代谢。

实施例10制备的放射性核素探针^99mTc-HYNIC-Aca-YQPB-1在乳腺癌4T1荷瘤鼠体内SPECT-CT成像图。

将实施例4制备的^99mTc-HYNIC-Aca-YQPB-1配制成生理盐水溶液(1mg/mL)，通过尾静脉分别给3只乳腺癌4T1荷瘤裸鼠(体重约20克)注射药物^99mTc-HYNIC-Aca-YQPB-1 15μL，并于给药后进行SPECT信号采集。观察探针在小鼠体内的分布以及在肿瘤区域的富集。显像效果如图6所示，观察到放射性核素探针在小鼠体内分布以及在肿瘤区域富集。^99mTc-HYNIC-Aca-YQPB-1在肿瘤部分有明显的摄取，且主要通过肾脏代谢。

Claims (10)

1.靶向肿瘤的伤寒毒素B亚基模拟肽，其特征在于选自下述任意一条多肽：

YQPB-1：COOH-Thr-Gly-Ser-Gly-Asn-Ala-Asn-Val-NH₂，

YQPB-2：COOH-Thr-Gly-Ser-Gly-Cys-Ala-Asn-Val-NH₂，

YQPB-3：COOH-Thr-Gly-Ser-Gly-Asn-His-Asn-Val-NH₂，

YQPB-4：COOH-Thr-Gly-Ser-Gly-Asn-Ala-Asn-Val-NH₂，

YQPB-5：COOH-Thr-Gly-Ser-Gly-Tyr-Ala-Asn-Val-NH₂，

YQPB-6：COOH-Thr-Gly-Ser-Gly-Phe-Ala-Asn-Val-NH₂。

2.权利要求1所述的伤寒毒素B亚基模拟肽在制备靶向肿瘤的的诊断试剂中的应用，优选在制备肿瘤诊断显像剂中的应用；进一步优选在制备肿瘤边界的精准定位或手术导航显像试剂或放射性核素显像试剂中的应用。

3.一种修饰的具有靶向肿瘤显像功能的多肽化合物，其特征在于具备以下通式：

M-L-YQPB-X

其中，M表示光标记或放射性核素标记；L为连接集团；

YQPB-X为权利要求1所述的任意一条伤寒毒素B亚基模拟肽。

4.根据权利要求所述的3修饰的具有靶向肿瘤显像功能的多肽化合物，其特征在于所述的光标记M选自有机发色团、有机荧光团、光吸收化合物、光反射化合物、光散射化合物或生物发光分子。

5.根据权利要求3所述的修饰的具有靶向肿瘤显像功能的多肽化合物，其特征在于所述的放射性核素标记M选自^99mTc、⁶⁸Ga，⁶⁴Cu，⁶⁷Ga，⁹⁰Y，¹¹¹In或¹⁷⁷Lu、¹²⁵I。

6.根据权利要求4所述的修饰的具有靶向肿瘤显像功能的多肽化合物，其特征在于所述的L选自6-氨基己酸、叠氮戊酸、丙炔酸、聚乙二醇、1,4,7-三氮杂环戊烷-1,4,7-三乙酸、7-[(4-羟基丙基)亚甲基]-1,4,7-三氮杂化壬烷-1、4-二乙酸、1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7,10-四乙酸、巯基乙酰三甘氨酸、MAG2、N3S、N2S2类配体、二乙基三胺五乙酸、1,4-丁二酸、5-氨基戊酸、聚乙烯亚胺、6-肼基吡啶-3-甲酸、溴甲酸苯甲基、N-(2-氨基己酸)马来酰亚胺、HYNIC-PEG4、HYNIC或它们的组合；优选6-氨基己酸、PEG 4、PEG 6、HYNIC-PEG4或HYNIC中的任意一种或多种。

7.一种近红外荧光成像探针，其特征在于为近红外荧光染料标记的权利要求1所述的靶向肿瘤的伤寒毒素B亚基模拟肽，所述的近红外荧光染料优选MPA、IRDye800、Cy7.5、Cy5.5。

8.一种放射性核素探针，其特征在于为放射性核素标记的权利要求1所述的靶向肿瘤的伤寒毒素B亚基模拟肽；所述的放射性核素探针优选放射性碘或氟标记的权利要求1所述的靶向肿瘤的伤寒毒素B亚基模拟肽中酪氨酸的酚羟基邻位上的氢。

9.根据权利要求8所述的放射性核素探针，其特征在于所述的放射性探针包括权利要求1所述的靶向肿瘤的伤寒毒素B亚基模拟肽，连接基团，放射性核素配体，用于放射性核素标记的双功能螯合剂以及放射性核素；所述的用于放射性核素标记的双功能螯合剂优选自HYNIC、DOTA、NOTA或DTPA。

10.权利要求7所述的近红外荧光成像探针、权利要求8-9中任一项所述的放射性核素探针在制备肿瘤诊断和术中导航的显像剂中的应用；优选在制备肿瘤诊断或术中导航的显像剂中的应用，进一步优选在制备肿瘤边界的精准定位或手术导航显像试剂或放射性核素显像试剂中的应用。

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