CN115812778B - 新型鲜果清洁保鲜一体生产工艺 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了新型鲜果清洁保鲜一体生产工艺，属于果实保鲜技术领域，天然植物保鲜组合物包括以下重量份的原料组成：苹果酸3‑5份；宽叶苔草提取液1‑2份；白桦茸深层发酵液10‑12份；甘油2‑5份；脯氨酸1‑2份；纯净水120‑130份，本发明采用新型的天然植物保鲜组合物，能显著抑制车厘子表面病原菌的生长和抑制车厘子果实的呼吸作用，此外，本发明证实了白桦茸深层发酵液处理后能激活车厘子表层逆境刺激抵抗因子的表达，可以提高车厘子的保鲜水平和延长了车厘子的货架期，本发明使用的原料安全、绿色、环保、无污染，且加工工艺简单易操作，在车厘子保鲜加工中具有广泛的应用前景。
Description
技术领域
本发明属于果实保鲜技术领域，具体是指新型鲜果清洁保鲜一体生产工艺。
背景技术
车厘子果实可以作为水果食用，外表色泽鲜艳、晶莹美丽、红如玛瑙，黄如凝脂，果实富含糖、蛋白质、维生素及钙、铁、磷、钾等多种元素，近年来，车厘子因其果实较大、肉质柔软、皮薄多汁以及口感鲜美的特点，深受消费者的追捧，然而，由于车厘子细胞壁薄、糖分含量高、呼吸作用强的特性导致常温储运过程中极易被致病菌污染，出现腐烂变质的现象，国内外对车厘子通常使用化学抑制剂、物理降温、干燥等方式进行保鲜，但残留的试剂和不当的处理方法均会对车厘子的品质造成严重的影响，因此，需要开发出一种新型鲜果清洁保鲜一体生产工艺。
发明内容
针对上述情况，为克服现有技术的缺陷，本发明提供了新型鲜果清洁保鲜一体生产工艺，为了解决现有保鲜技术效果不理想的问题，本发明采用新型的天然植物保鲜组合物，能显著抑制了车厘子表面病原菌的生长，同时活性物质附着于车厘子的表层组织中，可以防止车厘子水分流失、抑制车厘子果实的呼吸作用，此外，本发明首次证实了白桦茸深层发酵液处理后能激活车厘子表层逆境刺激抵抗因子的表达，从而实现了对车厘子增强保鲜的技术效果，可以提高车厘子的保鲜水平和延长了车厘子的货架期，本发明使用的原料安全、绿色、环保、无污染，且加工工艺简单易操作，在车厘子保鲜加工中具有广泛的应用前景。
为了实现上述目的，本发明采取的技术方案如下：本发明提供了新型鲜果清洁保鲜一体生产工艺，所述生产工艺包括如下步骤：
（1）采收成熟度为85％-90％的车厘子果实，进行分拣处理，剔除掉裂果、病烂果、畸形果、刺伤果和僵果得到车厘子原材料；
（2）对所述步骤（1）得到的车厘子原材料使用清水冲洗后，使用天然植物保鲜组合物进行预浸泡，然后风干表皮水分；
（3）将经步骤（2）风干后的车厘子原材料在1-3℃下预冷处理25-30分钟，然后放入气调冷库内，将冷库温度降到零下1℃至1℃范围内，进行消毒杀菌处理；
（4）在经步骤（3）消毒杀菌处理后的车厘子原材料表面喷施天然植物保鲜剂，铺设纸膜后装框，放入气调冷库内保存。
进一步地，所述天然植物保鲜组合物包括以下重量份的原料：苹果酸3-5份；宽叶苔草提取液1-2份；白桦茸深层发酵液10-12份；甘油2-5份；脯氨酸1-2份；纯净水120-130份。
优选地，所述宽叶苔草提取液采用如下方法制备而成：将宽叶苔草烘干、粉碎，依次过80目筛和200目筛；置于体积比浓度为30%乙醇水溶液中，于38℃下震荡抽提1小时，再超声提取2小时，真空抽滤并收集滤液1和滤渣；将所述滤渣置于乙醇溶剂中，于38℃下超声提取2小时，真空抽滤并收集滤液2；合并所述滤液1和滤液2进行旋转蒸发浓缩，得到所述宽叶苔草提取液。
优选地，所述白桦茸深层发酵液的制备方法包括如下步骤：本发明中利用的白桦茸为自然产或人工培养的，首先在马铃薯葡萄糖琼脂培养基中接种白桦茸菌株，在30℃培养30天，获得白桦茸菌丝体，挑取白桦茸菌丝体接种于玉米秸秆和甘蔗渣混合后的固体层中，然后加入发酵培养基进行发酵，所述发酵培养基与所述固体层的装量体积比为0.1-0.2：1，所述发酵的温度为25-30℃，所述发酵的时间为6-10天，得到发酵产物，在所述发酵产物中加入10倍体积的体积比浓度为50％乙醇，在60℃下对流提取5小时后过滤，减压浓缩得到所述白桦茸深层发酵液。
优选地，所述发酵培养基包括以下体积比浓度的原料：3％的蛋白胨、3％的葡萄糖、2％的大豆粉、0.2％的酵母膏、0.02％的磷酸二氢钾、0.08％的硫酸镁、0.03‰的维生素B1和水，所述发酵培养基的pH值为5.0-5.2。
进一步地，所述天然植物保鲜剂包括如下重量份的原料：宽叶苔草提取液5-10份，白桦茸深层发酵液12-18份，辅助添加剂2-3份，甘油1-2份，纯净水120-130份。
进一步地，所述辅助添加剂选用柠檬酸、壳聚糖和海藻酸钠按照重量比为1：0.5：2混合制备而成。
进一步地，所述步骤（2）清水冲洗为采用清水对车厘子表面进行冲洗3-5分钟，所述清水的温度为4-8℃。
进一步地，所述步骤（2）中预浸泡的时间为15-20分钟，预浸泡的温度为15-20℃。
进一步地，所述步骤（4）中气调冷库的条件为：温度为0-1℃，相对湿度为85-90%，二氧化碳浓度为15-20%，氧气浓度为2-3%。
本发明取得的有益效果如下：
本发明提供的新型的天然植物保鲜组合物能显著抑制了车厘子表面病原菌的生长，同时活性物质附着于车厘子的表层组织中，可以防止车厘子水分流失、抑制车厘子果实的呼吸作用，尤其的，本发明首次证实了白桦茸深层发酵液处理后能激活车厘子表层逆境刺激抵抗因子的表达，降低果实表层碰撞后的软化进程，从而实现了对车厘子增强保鲜的技术效果，可以提高车厘子的保鲜水平和延长了车厘子的货架期；
通过使用天然植物保鲜组合物预处理浸泡的方式，有利于果实表层充分吸收活性物质，同时在车厘子表面喷施天然植物保鲜组合物制备的保鲜剂有利于附着于车厘子果实光滑的表面，提高了天然植物保鲜组合物的持续时间，从而减少了多次喷施天然保鲜剂，降低人工的操作复杂程度；
此外，宽叶苔草主要含有烷类、醇类、酸类等物质，对车厘子腐烂、发霉等致病菌具有良好的抑菌效果；白桦茸含有大量的抗癌、降血压、降血糖、复活免疫作用的植物纤维类多糖体，白桦茸经深层发酵后的活性物质分泌更多且可能被进行修饰和重组，不仅与宽叶苔草共同发挥抑菌效果而且还起到植物激素的作用，具有增强水果抗逆水平和调节果实可溶性固形物等作用；
本发明使用的原料安全、绿色、环保、无污染，且加工工艺简单易操作，在车厘子保鲜加工中具有广泛的应用前景。
附图说明
图1为本发明提供的天然植物保鲜组合物对车厘子果实灰霉病的抑制作用；
图2为使用本发明提供的新型鲜果清洁保鲜一体生产工艺的果实腐烂情况结果图；
图3为车厘子储藏期间果实可溶性固形物的含量测定结果图；
图4为胁迫响应因子的拮抗表达水平测定。
附图用来提供对本发明的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与本发明的实施例一起用于解释本发明，并不构成对本发明的限制。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例；基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
除非另行定义，文中所使用的所有专业与科学用语与本领域技术人员所熟悉的意义相同。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法及材料皆可应用于本发明中。文中所述的较佳实施方法与材料仅作示范之用，但不能限制本申请的内容。
下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法；下述实施例中所用的试验材料及试验菌株，如无特殊说明，均为从商业渠道购买得到的。
实施例1
一种新型鲜果清洁保鲜一体生产工艺
所述生产工艺包括如下步骤：
（1）采收成熟度为85％-90％的车厘子果实，进行分拣处理，剔除掉裂果、病烂果、畸形果、刺伤果和僵果得到车厘子原材料；
（2）对所述步骤（1）得到的车厘子原材料使用清水对车厘子表面进行冲洗3分钟，所述清水的温度为4-8℃，使用天然植物保鲜组合物进行预浸泡，预浸泡的时间为15分钟，预浸泡的温度为15-20℃，然后风干表皮水分；
（3）将经步骤（2）风干后的车厘子原材料在1-3℃下预冷处理25分钟，然后放入气调冷库内，将冷库温度降到零下1℃至1℃范围内，进行消毒杀菌处理；
（4）在经步骤（3）消毒杀菌处理后的车厘子原材料表面喷施天然植物保鲜剂，铺设纸膜后装框，放入气调冷库内保存，气调冷库的条件为：温度为0-1℃，相对湿度为85-90%，二氧化碳浓度为15-20%，氧气浓度为2-3%。
所述天然植物保鲜组合物包括以下重量份的原料：苹果酸3份；宽叶苔草提取液1-2份；白桦茸深层发酵液10份；甘油2份；脯氨酸1份；纯净水120份。
所述宽叶苔草提取液采用如下方法制备而成：将宽叶苔草烘干、粉碎，依次过80目筛和200目筛；置于体积比浓度为30%乙醇水溶液中，于38℃下震荡抽提1小时，再超声提取2小时，真空抽滤并收集滤液1和滤渣；将所述滤渣置于乙醇溶剂中，于38℃下超声提取2小时，真空抽滤并收集滤液2，合并所述滤液1和滤液2进行旋转蒸发浓缩，得到所述宽叶苔草提取液。
所述白桦茸深层发酵液的制备方法包括如下步骤：本发明中利用的白桦茸为自然产或人工培养的，首先在马铃薯葡萄糖琼脂培养基中接种白桦茸菌株，在30℃培养30天，获得白桦茸菌丝体，挑取白桦茸菌丝体接种于玉米秸秆和甘蔗渣混合后的固体层中，然后加入发酵培养基进行发酵，所述发酵培养基与所述固体层的装量体积比为0.1：1，所述发酵的温度为25-30℃，所述发酵的时间为6天，得到发酵产物，在所述发酵产物中加入10倍体积的体积比浓度为50％乙醇，在60℃下对流提取5小时后过滤，减压浓缩得到所述白桦茸深层发酵液，所述发酵培养基包括以下体积比浓度的原料：3％的蛋白胨、3％的葡萄糖、2％的大豆粉、0.2％的酵母膏、0.02％的磷酸二氢钾、0.08％的硫酸镁、0.03‰的维生素B1和水，所述发酵培养基的pH值为5.0-5.2。
所述天然植物保鲜剂包括如下重量份的原料：宽叶苔草提取液5份，白桦茸深层发酵液12份，辅助添加剂2份，甘油1份，纯净水120份。所述辅助添加剂选用柠檬酸、壳聚糖和海藻酸钠按照重量比为1：0.5：2混合制备而成。
实施例2
一种新型鲜果清洁保鲜一体生产工艺
所述生产工艺包括如下步骤：
（1）采收成熟度为85％-90％的车厘子果实，进行分拣处理，剔除掉裂果、病烂果、畸形果、刺伤果和僵果得到车厘子原材料；
（2）对所述步骤（1）得到的车厘子原材料使用清水对车厘子表面进行冲洗5分钟，所述清水的温度为4-8℃，使用天然植物保鲜组合物进行预浸泡，预浸泡的时间为20分钟，预浸泡的温度为15-20℃，然后风干表皮水分；
（3）将经步骤（2）风干后的车厘子原材料在1-3℃下预冷处理30分钟，然后放入气调冷库内，将冷库温度降到零下1℃至1℃范围内，进行消毒杀菌处理；
（4）在经步骤（3）消毒杀菌处理后的车厘子原材料表面喷施天然植物保鲜剂，铺设纸膜后装框，放入气调冷库内保存，气调冷库的条件为：温度为0-1℃，相对湿度为85-90%，二氧化碳浓度为15-20%，氧气浓度为2-3%。
所述天然植物保鲜组合物包括以下重量份的原料：苹果酸5份；宽叶苔草提取液2份；白桦茸深层发酵液12份；甘油5份；脯氨酸2份；纯净水130份。
所述宽叶苔草提取液采用如下方法制备而成：将宽叶苔草烘干、粉碎，依次过80目筛和200目筛；置于体积比浓度为30%乙醇水溶液中，于38℃下震荡抽提1小时，再超声提取2小时，真空抽滤并收集滤液1和滤渣；将所述滤渣置于乙醇溶剂中，于38℃下超声提取2小时，真空抽滤并收集滤液2，合并所述滤液1和滤液2进行旋转蒸发浓缩，得到所述宽叶苔草提取液。
所述白桦茸深层发酵液的制备方法包括如下步骤：本发明中利用的白桦茸为自然产或人工培养的，首先在马铃薯葡萄糖琼脂培养基中接种白桦茸菌株，在30℃培养30天，获得白桦茸菌丝体，挑取白桦茸菌丝体接种于玉米秸秆和甘蔗渣混合后的固体层中，然后加入发酵培养基进行发酵，所述发酵培养基与所述固体层的装量体积比为0.2：1，所述发酵的温度为25-30℃，所述发酵的时间为10天，得到发酵产物，在所述发酵产物中加入10倍体积的体积比浓度为50％乙醇，在60℃下对流提取5小时后过滤，减压浓缩得到所述白桦茸深层发酵液，所述发酵培养基包括以下体积比浓度的原料：3％的蛋白胨、3％的葡萄糖、2％的大豆粉、0.2％的酵母膏、0.02％的磷酸二氢钾、0.08％的硫酸镁、0.03‰的维生素B1和水，所述发酵培养基的pH值为5.0-5.2。
所述天然植物保鲜剂包括如下重量份的原料：宽叶苔草提取液10份，白桦茸深层发酵液18份，辅助添加剂3份，甘油2份，纯净水130份。所述辅助添加剂选用柠檬酸、壳聚糖和海藻酸钠按照重量比为1：0.5：2混合制备而成。
实施例3
一种新型鲜果清洁保鲜一体生产工艺
所述生产工艺包括如下步骤：
（1）采收成熟度为85％-90％的车厘子果实，进行分拣处理，剔除掉裂果、病烂果、畸形果、刺伤果和僵果得到车厘子原材料；
（2）对所述步骤（1）得到的车厘子原材料使用清水对车厘子表面进行冲洗5分钟，所述清水的温度为4-8℃，使用天然植物保鲜组合物进行预浸泡，预浸泡的时间为20分钟，预浸泡的温度为15-20℃，然后风干表皮水分；
（3）将经步骤（2）风干后的车厘子原材料在1-3℃下预冷处理30分钟，然后放入气调冷库内，将冷库温度降到零下1℃至1℃范围内，进行消毒杀菌处理；
（4）在经步骤（3）消毒杀菌处理后的车厘子原材料表面喷施天然植物保鲜剂，铺设纸膜后装框，放入气调冷库内保存，气调冷库的条件为：温度为0-1℃，相对湿度为85-90%，二氧化碳浓度为15-20%，氧气浓度为2-3%。
所述天然植物保鲜组合物包括以下重量份的原料：苹果酸5份；宽叶苔草提取液1份；白桦茸深层发酵液12份；甘油2份；脯氨酸2份；纯净水125份。
所述宽叶苔草提取液采用如下方法制备而成：将宽叶苔草烘干、粉碎，依次过80目筛和200目筛；置于体积比浓度为30%乙醇水溶液中，于38℃下震荡抽提1小时，再超声提取2小时，真空抽滤并收集滤液1和滤渣；将所述滤渣置于乙醇溶剂中，于38℃下超声提取2小时，真空抽滤并收集滤液2，合并所述滤液1和滤液2进行旋转蒸发浓缩，得到所述宽叶苔草提取液。
所述白桦茸深层发酵液的制备方法包括如下步骤：本发明中利用的白桦茸为自然产或人工培养的，首先在马铃薯葡萄糖琼脂培养基中接种白桦茸菌株，在30℃培养30天，获得白桦茸菌丝体，挑取白桦茸菌丝体接种于玉米秸秆和甘蔗渣混合后的固体层中，然后加入发酵培养基进行发酵，所述发酵培养基与所述固体层的装量体积比为0.1：1，所述发酵的温度为25-30℃，所述发酵的时间为8天，得到发酵产物，在所述发酵产物中加入10倍体积的体积比浓度为50％乙醇，在60℃下对流提取5小时后过滤，减压浓缩得到所述白桦茸深层发酵液，所述发酵培养基包括以下体积比浓度的原料：3％的蛋白胨、3％的葡萄糖、2％的大豆粉、0.2％的酵母膏、0.02％的磷酸二氢钾、0.08％的硫酸镁、0.03‰的维生素B1和水，所述发酵培养基的pH值为5.0-5.2。
所述天然植物保鲜剂包括如下重量份的原料：宽叶苔草提取液8份，白桦茸深层发酵液15份，辅助添加剂3份，甘油2份，纯净水125份。所述辅助添加剂选用柠檬酸、壳聚糖和海藻酸钠按照重量比为1：0.5：2混合制备而成。
对比例1
本对比例提供一种新型鲜果清洁保鲜一体生产工艺，其与实施例2的区别仅在于：所述天然植物保鲜组合物不含宽叶苔草提取液和白桦茸深层发酵液，所述天然植物保鲜剂不含宽叶苔草提取液和白桦茸深层发酵液，其余生产工艺与实施例2相同。
对比例2
本对比例提供一种新型鲜果清洁保鲜一体生产工艺，其与实施例2的区别仅在于：所述天然植物保鲜组合物不含宽叶苔草提取液，所述天然植物保鲜剂不含宽叶苔草提取液，其余生产工艺与实施例2相同。
对比例3
本对比例提供一种新型鲜果清洁保鲜一体生产工艺，其与实施例2的区别仅在于：所述天然植物保鲜组合物不含白桦茸深层发酵液，所述天然植物保鲜剂不含白桦茸深层发酵液，其余生产工艺与实施例2相同。
试验例1
天然植物保鲜组合物对致病菌的抑制作用
采用纸片法测定抑菌圈，具体为用加样枪移取30μL经活化的菌悬液于LB固体培养基上，用玻璃棒涂布均匀，向5mm药敏纸片上加5μL实施例2、对比例1、对比例2和对比例3的天然植物保鲜组合物，将药敏纸片贴于平板表面，以无菌水做阴性对照，以15%庆大霉素作为阳性对照，将涂布有大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的LB固体培养基平板置于37℃恒温培养箱中培养过夜，测定各抑菌圈的直径，计算平均值。
从表1中可以看出实施例2的天然植物保鲜组合物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌均有明显的抑制效果，此外，对比例1-3效果不佳，表明宽叶苔草提取液和白桦茸深层发酵液组合使用后的抑菌效果较单一成分更强的抑菌作用。
表1天然植物保鲜组合物对常见致病菌的抑制作用
试验例2
天然植物保鲜组合物对车厘子果实灰霉病的抑制作用
选择试验的车厘子果实为品种名为“玛瑙红”的车厘子果实，病原菌为灰葡萄孢(Botrytis cinerea)，将灰葡萄孢于25℃活化7天备用，试验具体操作方法为：选取外观整齐、色泽均匀、无病虫害、无机械损伤的车厘子果实，使用自来水清洗后，用浓度为0.1％的次氯酸钠溶液浸泡消毒3min，取出，随后用自来水冲洗去除果实表面残余次氯酸钠，晾干备用；用无菌打孔器在车厘子果实的表面制造一个直径为4-5mm深度为3-4mm的伤口；分别在伤口注入20μL实施例2、对比例1、对比例2、对比例3制备的天然植物保鲜组合物，同时加入20μL无菌水作为阴性对照，2小时后在每个伤口处加入20μL浓度为5×104CFU/mL灰葡萄孢的孢子悬浮液，在常温和90％湿度条件下贮藏，并用PE塑料膜密封作保湿处理，每个处理样本量为20个樱桃番茄果实，试验重复3次，第7天观察结果，计算发病率发病的果实数占果实总数的百分比。
如图1所示，较空白对照和对比例1相比，实施例2的发病率明显下降，而对比例2较对比例3的发病率更高，表明白桦茸深层发酵液可能具有较强抑制灰葡萄孢的作用。
试验例3
应用本发明制备的保鲜剂于车厘子的贮藏保鲜
选择试验的车厘子果实为品种名为“玛瑙红”的车厘子果实，分别采用实施例1、实施例2、实施例3和对比例1、对比例2和对比例3的加工工艺对新鲜的车厘子果实进行加工处理，空白对照为不使用天然植物保鲜组合物和天然植物保鲜剂处理，其余与实施例2相同；每组60个果实，然后放置于在环境温度8-10℃，湿度60-65％的条件下，观察车厘子情况并测定车厘子相关指标。
（1）腐烂情况统计
第5天统计腐烂果实与总果实的占比，并按照肉眼观察的腐烂情况将腐烂的果实的严重情况分为1-3级，其中1级为轻度腐烂，表现为有小斑点；2级为中度腐烂，表现为腐烂区域占果实面积为25-50%；3级为严重腐烂，表现为腐烂面积占果实面积的50%以上。
表2果实腐烂情况统计
如图2和表2所示，实施例1-实施例3的病果率明显较空白对照组对比例1下降，且病果严重程度更低，而相较于对比例2和对比例3，宽叶苔草提取液和白桦茸深层发酵液组合使用后的保鲜效果更好。
（2）果实可溶性固形物的含量测定
采用折射仪法分别测定2天、5天、10天车厘子果实中可溶性固形物的含量，如图3所示，实施例1-实施例3使用本发明中的加工工艺的车厘子果实可溶性固形物的含量下降较少，表明使用含宽叶苔草提取液和白桦茸深层发酵液的天然植物保鲜组合物和天然植物保鲜剂处理处理可以减少了车厘子自身的呼吸作用使车厘子的贮藏期延长。
试验例3
胁迫响应因子的拮抗表达水平测定
MAPK/MPKs(mitogen activatedprotein kinase)信号级联是车厘子果实进行抵抗逆境损伤的重要信号通路之一，它在外界环境刺激和细胞响应之间起着桥梁作用，将通过实施例2、对比例1、对比例2和对比例3加工后的车厘子果实，用无菌打孔器在车厘子果实的表面制造三个直径为4-5mm深度为3-4mm的伤口并注入20μL浓度为5×104CFU/mL灰葡萄孢的孢子悬浮液，5小时、12小时、24小时后分别使用清水冲洗车厘子果实并使用TRIzol试剂（购于赛默飞世尔科技（中国）有限公司）提取总RNA样品，使用逆转录试剂盒（购于赛默飞世尔科技（中国）有限公司）将mRNA逆转录为cDNA，使用SYBR Green PCR Master Mix试剂盒（购于南京诺唯赞生物科技股份有限公司）进行RT-qPCR分析，PCR循环如下：95℃预处理5min；93℃，15s，58℃，45s，进行45个循环；93℃，15s；67℃，1min；95℃，15s，进行1个循环；75℃延伸10min，其中PCR引物如下：MAPK3的正向引物为“GTACAAATAGATATAA”，反向引物为“TGGTGATCTCGAAGAG”，GAPDH的正向引物为“TGGCCTCCAAGGAGTAAGAAAC”，反向引物为GGCCTCTCTCTTGCTCTCAGTATC”，使用2-ΔΔCt法以GAPDH基因将MAPK3基因表达量进行标准化得到相对表达量。
如图4所示，图中纵坐标：“1”表示对比例1，“2”表示对比例2，“3”表示对比例3，“4”表示实施例2，图中横坐标：A组表示第5小时，B组表示第12小时，C组表示第24小时，图中颜色数值越大表明基因表达量越高，结果表明实施例4可以瞬时激活MAPK3的基因表达，而对比例1-对比例3效果不佳。
综上，本发明提供的加工工艺能显著抑制了车厘子表面病原菌的生长，同时活性物质附着于车厘子的表层组织中，可以防止车厘子水分流失、抑制车厘子果实的呼吸作用，本发明首次证实了白桦茸深层发酵液处理后能激活车厘子表层逆境刺激抵抗因子的分泌，降低果实表层碰撞后的软化程度。
尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。
以上对本发明及其实施方式进行了描述，这种描述没有限制性，附图中所示的也只是本发明的实施方式之一，实际的应用并不局限于此。总而言之如果本领域的普通技术人员受其启示，在不脱离本发明创造宗旨的情况下，不经创造性的设计出与该技术方案相似的方式及实施例，均应属于本发明的保护范围。
Claims (6)
1.白桦茸深层发酵液在鲜果清洁保鲜一体生产工艺用于激活车厘子表层逆境刺激抵抗因子MAPK3分泌的应用，其特征在于：
所述生产工艺包括如下步骤：
（1）采收成熟度为85％-90％的车厘子果实，进行分拣处理，剔除掉裂果、病烂果、畸形果、刺伤果和僵果得到车厘子原材料；
（2）对所述步骤（1）得到的车厘子原材料使用清水冲洗后，使用天然植物保鲜组合物进行预浸泡，然后风干水分；
（3）将经步骤（2）风干后的车厘子原材料在1-3℃条件下预冷处理25-30分钟，然后放入气调冷库内进行消毒杀菌处理；
（4）在经步骤（3）消毒杀菌处理后的车厘子原材料表面喷施天然植物保鲜剂，铺设纸膜后装框，放入气调冷库内保存；
所述天然植物保鲜组合物包括以下重量份的原料：苹果酸3-5份；宽叶苔草提取液1-2份；白桦茸深层发酵液10-12份；甘油2-5份；脯氨酸1-2份；纯净水120-130份；
所述天然植物保鲜剂包括如下重量份的原料：宽叶苔草提取液5-10份，白桦茸深层发酵液12-18份，辅助添加剂2-3份，甘油1-2份，纯净水120-130份，
所述宽叶苔草提取液采用如下方法制备而成：将宽叶苔草烘干、粉碎，依次过80目筛和200目筛；置于体积比浓度为30%乙醇水溶液中，于38℃下震荡抽提1小时，再超声提取2小时，真空抽滤并收集滤液1和滤渣；将所述滤渣置于乙醇溶剂中，于38℃下超声提取2小时，真空抽滤并收集滤液2；合并所述滤液1和滤液2，进行旋转蒸发浓缩，得到所述宽叶苔草提取液，
所述白桦茸深层发酵液的制备方法包括如下步骤：在马铃薯葡萄糖琼脂培养基中接种白桦茸菌株，30℃培养30天，获得白桦茸菌丝体；挑取白桦茸菌丝体接种于玉米秸秆和甘蔗渣混合后的固体层中，然后加入发酵培养基进行发酵，所述发酵培养基与所述固体层的装量体积比为0.1-0.2：1，所述发酵的温度为25-30℃，所述发酵的时间为6-10天，得到发酵产物；在所述发酵产物中加入10倍体积的体积比浓度为50％乙醇，在60℃下对流提取5小时后过滤，减压浓缩得到所述白桦茸深层发酵液。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述发酵培养基包括以下体积比浓度的原料：3％的蛋白胨、3％的葡萄糖、2％的大豆粉、0.2％的酵母膏、0.02％的磷酸二氢钾、0.08％的硫酸镁、0.03‰的维生素B1和水，所述发酵培养基的pH值为5.0-5.2。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述辅助添加剂选用柠檬酸、壳聚糖和海藻酸钠按照重量比为1：0.5：2混合制备而成。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：所述步骤（2）中清水冲洗为采用清水对车厘子表面进行冲洗3-5分钟，所述清水的温度为4-8℃。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：所述步骤（2）中预浸泡的时间为15-20分钟，所述预浸泡的温度为15-20℃。
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于：所述步骤（4）中气调冷库的条件为：温度为0-1℃，相对湿度为85-90%，二氧化碳浓度为15-20%，氧气浓度为2-3%。
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