CN115803427A - 线叶南洋参植物制剂用于治疗元素病的用途 - Google Patents

Abstract

要求保护的是线叶南洋参(Polyscias filicifolia)植物或其片段的一种或多种制剂用于治疗矿物质缺乏症的用途，及其对需要这种治疗的受试者的影响，其中矿物质缺乏是由于外部或内部因素导致的受试者的一种或多种内脏器官中缺乏至少一种必需元素，该必需元素选自下组：Ca、Cr、I、Mn，该治疗无需使用缺乏的必需元素的来源或螯合剂。

Description

线叶南洋参植物制剂用于治疗元素病的用途

技术领域

本发明涉及线叶南洋参(Polyscias filicifolia)植物或其片段制剂，包括通过生物技术方法获得的那些，用于治疗和预防有需要的受试者的元素病及其后果的用途。本发明还涉及一种医药产品，其包含线叶南洋参植物或其片段的制剂，用于治疗和预防元素病及其后果。特别是，这种元素病可以通过外来化合物渗透到受试者体内或通过感染性疾病诱导。

背景技术

维持内稳态(内部环境的恒定性)，包括维持生命所必要的必需(重要)元素的含量是身体的基本功能。元素病(elementoses)是必需元素的含量与正常生命必要的水平的偏差，导致大量疾病的发生[1]。

此元素病可以由内部原因(例如，遗传疾病或感染性疾病)和外部影响(例如，压力或外来化合物的渗透)引起。出于本说明书的目的，术语“由外部因素或内部因素诱导的元素病”或“诱导的元素病”将指的是一种或多种内脏器官中必需元素含量的偏差，这些偏差是由于外部因素或内部因素或它们的组合的时间限制和可确定的影响而发生，并导致一种或多种必需元素的含量与开始暴露于此类因素之前的给定生物体的特征水平的显著(统计显著)偏差。

诱导的元素病的负面影响特别在怀孕期间增加，并且决定女性的自身健康和未出生孩子的健康和发育[1，2，3]。元素病会增加早产、各种类型的宫内病变、甚至畸形的风险，并增加婴儿死亡率[4，5]。在妊娠期间，诱导的元素病的作用相当于甚至优于遗传因素的作用[6]。诱导的元素病对造血作用(包括免疫系统的细胞形成)有特别强烈的影响，其在许多必需元素(Fe、Mn、Ca、Mg、I、Cu、Zn)的参与下进行[7]。

此外，诱导的元素病的后果包括但不限于：菌群失调、贫血、疲劳、儿童身心发育障碍、代谢综合征；与胰岛素缺乏或胰岛素抵抗相关的疾病；糖尿病，包括2型糖尿病；葡萄糖不耐症；脂质代谢紊乱；动脉粥样硬化；动脉高血压；高血糖；肝病；免疫系统功能障碍；炎症性肠病，特别是肠易激综合征；心血管疾病；高胆固醇；甘油三酯升高；哮喘；骨关节炎；神经变性和癌症[1]。

同时，重要的是，诱导的元素病在体内表现为各种器官和组织中单个必需元素含量的多向变化[8，9]。这使得使用含有单个必需元素的化合物的制剂预防和治疗元素病变得复杂，因为体内重要元素过多与它们的缺乏一样危险[10，11]。

含有高浓度必需元素的多种制剂用于预防和治疗元素病，例如含有铜[12]、锌[13]、铁[14]、镁[15]或钙[16]的有机盐的制剂。

然而，试图通过简单地将含有一种或另一种元素的化合物添加到食物中来预防和治疗元素病，会导致副作用。例如，试图在患有贫血的女性中恢复铁的平衡，会导致氧化应激水平增加(脂质过氧化、患糖尿病和动脉粥样硬化的高风险)[17，18]。这种微量元素的消耗可以由于大脑中铁离子的积累而变得复杂，从而导致神经退行性后果[19]。在体内铁含量过高，肝脏起到保护作用，积累铁离子，疾病例如脂肪性肝炎、纤维化、肝硬化、肝细胞癌等均可发生[20]。此外，应考虑到含铁制剂的摄入与铜、尤其是锌的消耗减少的风险有关[11]，这可以导致许多疾病的发展。反过来，锌含量的增加会导致与生殖系统相关的疾病风险[21]。

还有各种药物(螯合剂)可以降低体内特定元素的水平，例如降低铁[22，23，24，25]或铜[26，27]的水平。然而，体内铁含量的减少会导致许多免疫疾病[28]。在体内铜含量的减少，导致血清全铜蓝蛋白合成减少和亚铁氧化酶活性减弱，这在某些情况下导致组织中铁的释放减少和贫血的发展[29]。身体的抗氧化剂缺乏也与铜含量低有关，这会导致对感染性疾病和胚胎发生障碍的易感性增加[30，31，32，33，34]。

有许多用于治疗和预防诱导的元素病的其他方法的实例。它们都有一定的缺点，限制了它们在医学上使用的可能性。

由于人体中必需元素的代谢途径和运输途径密切相关，需要这样一种方法来治疗元素病(由外部因素或内部因素诱导的，受试者的一种或多种内脏器官中多种必需元素含量的偏差)，该方法不要求含量受损的必需元素的来源或螯合剂的强制使用。

基于大量实验和临床观察的结果，本发明的技术结果是使用线叶南洋参植物或其片段的制剂用于治疗有需要的受试者的诱导的元素病的可能性，该治疗无需使用其含量受损的必需元素的来源或螯合剂，这使得它们可以被视为开发用于治疗元素病及其后果的安全药物的基础。特别地，此类制剂可以优选使用生物技术的植物细胞培养方法获得。

同时，线叶南洋参植物或其片段的制剂中必需元素和/或其螯合剂的含量低，可以不将此类制剂视为含量受损的必需元素的来源，或其螯合剂[35]。

发明内容

本发明涉及线叶南洋参(Polyscias filicifolia)植物的侧枝或叶或其片段的一种或多种制剂用于治疗有需要的受试者的元素病的用途，其中，元素病是受试者的一种或多种内脏器官中至少一种必需元素的含量偏差，该必需元素选自下组：Ca、Cr、I、Mn、Cu、Mg、Fe、Zn，所述元素病是由外来化合物渗透到受试者体内诱导的，该治疗无需使用其含量不正常(violated)的必需元素的来源或螯合剂。

在另一个一般方面，本发明涉及通过生物技术的植物细胞培养获得的线叶南洋参植物的侧枝或叶或其片段的一种或多种制剂用于治疗有需要的受试者的元素病的用途，其中，元素病是受试者的一种或多种内脏器官中至少一种必需元素的含量偏差，该必需元素选自下组：Ca、Cu、Mg、Fe、Zn，所述元素病是由外来化合物渗透和/或感染性疾病诱导的，该治疗无需使用其含量不正常的必需元素的来源或螯合剂。

在本发明的具体实施方式中，实施例1说明了线叶南洋参植物枝条的含水乙醇提取物形式的线叶南洋参制剂。

另一方面，本发明涉及线叶南洋参植物或其片段的制剂用于治疗前文列出的元素病及其后果的用途，其中，线叶南洋参植物的片段是通过植物细胞培养的生物技术方法获得的。

在本发明的一些实施方式中，提出线叶南洋参植物或其片段的制剂用于治疗前文列出的元素病及其后果的用途，其中，线叶南洋参植物的片段是基于品种BFT 01-95，编号58VKKK VR，通过植物细胞培养的生物技术方法获得的。

在本发明的具体实施方式中，实施例2说明了植物生物质的含水乙醇提取物形式的线叶南洋参制剂，该生物质基于从线叶南洋参植物(MOORE EX ROUNIER)AILEY BFT 01-95的叶子获得的品种，并且该植物于1995年6月5日保藏于俄罗斯高等植物细胞和器官保藏中心第58号，通过高等植物细胞的悬浮培养方法获得。

在本发明的一些实施方式中，线叶南洋参植物或其片段的制剂用于治疗前文列出的元素病及其后果的用途，其中，制剂是通过植物细胞培养的生物技术方法获得的、由益生菌微生物发酵的线叶南洋参植物的片段。

在本发明的具体实施方式中，实施例3说明了通过益生菌微生物发酵的植物生物质悬浮液形式的线叶南洋参制剂，该制剂基于从线叶南洋参植物(MOORE EX ROUNIER)AILEY BFT 01-95的叶子获得的品种，并且该植物品种于1995年6月5日保藏于俄罗斯高等植物细胞和器官保藏中心第58号，通过高等植物细胞的悬浮培养方法获得。

在另一方面，本发明涉及线叶南洋参植物或其片段的制剂用于治疗前文列出的元素病及其后果的用途，其中，该制剂用于药物组合物的组成，该药物组合物包含线叶南洋参植物或其片段的至少一种制剂与药学上可接受的赋形剂组合，该赋形剂选自由溶剂；pH调节剂；等渗剂；防腐剂；抗氧化剂；表面活性剂；增稠剂；吸收促进剂；或其组合组成的组。

在本发明的具体实施方式中，实施例4说明一种药物组合物，其包含线叶南洋参植物的制剂与药学上可接受的赋形剂组合，药学上可接受的赋形剂包含溶剂；pH调节剂；等渗剂；防腐剂；抗氧化剂；表面活性物质；增稠剂；吸收促进剂。

在本发明的一些实施方式中，提出了线叶南洋参植物或其片段的制剂用于治疗前文列出的元素病及其后果的用途，其中，元素病是由外来化合物草甘膦(N-(膦酰基甲基)-甘氨酸)渗透到受试者体内诱导的。

在本发明的具体实施方式中，给出了线叶南洋参植物或其片段的制剂用于治疗由外来化合物渗透(实施例5)和感染性疾病(实施例6)诱导的元素病及其后果的用途的实例。

在一些实施方式中，本发明提出了线叶南洋参植物或其片段的制剂用于治疗前文列出的元素病及其后果的用途，其中，元素病是在至少一种内脏器官中一种或多种必需元素含量的偏差，该器官选自下组：肝脏、脾脏、血液。

在本发明的具体实施方式中，给出了线叶南洋参植物或其片段的制剂用于治疗前文列出的元素病的用途的实例，其中，元素病是在至少一种内脏器官中一种或多种必需元素含量的偏差，该器官选自以下组中：肝脏、脾脏、血液(实施例5和6)。

在一些实施方式中，本发明涉及线叶南洋参植物或其片段的制剂用于治疗前文列出的元素病及其后果的用途，其中，该制剂经口或舌下给药。

在本发明的具体实施方式中，给出了线叶南洋参植物或其片段的制剂用于治疗前文列出的元素病及其后果的用途，其中，该制剂是经口(实施例5)或舌下(实施例6)使用的。

在另一个一般方面，提出了用于治疗前文列出的元素病及其后果的药物，该药物包含线叶南洋参植物或其片段的制剂作为药物组合物的一部分，其中，元素病的后果是菌群失调、贫血、疲劳、儿童身心发育障碍、代谢综合征；与胰岛素缺乏或胰岛素抵抗相关的疾病；糖尿病，包括2型糖尿病；葡萄糖不耐受；脂质代谢紊乱；动脉粥样硬化；动脉高血压；高血糖；肝病；免疫系统功能障碍；炎症性肠病，特别是肠易激综合征；心血管疾病；高胆固醇；甘油三酯升高；哮喘；骨关节炎；神经变性和癌症。

在本发明的具体实施方式中，实施例6说明了用于治疗前文列出的元素病及其后果的药剂，其在药物组合物的组成中包含线叶南洋参植物的制剂，其中，元素病的后果是免疫系统的功能障碍。

本发明的一个或多个实施方式的细节在下文描述中阐述。本发明的其他特征、目的和优点将从描述中显而易见。

附图说明

附图仅是示例性的，并非实施本文中公开的发明所必需的。

图1(a)至图1(d)-不同实验组动物肝脏中必需元素的含量相对于对照组中相应元素含量的平均值的变化百分比，其中：

图1(a)-K-对照，P1-草甘膦(150μg/kg×7天)，T1-(草甘膦(150μg/kg)+根据实施例1的线叶南洋参制剂(300μl/kg)×7天，*p≤0.05，**p≤0.01，***p≤0.001；

图1(b)-K-对照，P2-草甘膦(750μg/kg×7天)，T2-(草甘膦(750μg/kg)+根据实施例2的线叶南洋参制剂(900μl/kg)×7天，*p≤0.05，**p≤0.005，***p≤0.001；

图1(c)-K-对照，P1-草甘膦(150μg/kg x 7天)，T3-(草甘膦(150μg/kg)+根据实施例3的线叶南洋参制剂(3ml/kg)×7天，*p≤0.05，**p≤0.005，***p≤0.001；

图1(d)-K-对照，P1-草甘膦(150μg/kg×7天)，T4-(草甘膦(150μg/kg)+根据实施例4药物组合物(300μl/kg)×7天，*p≤0.05，**p≤0.005，***p≤0.001。

图2(a)至图2(c)-不同实验组动物的血凝块中必需元素的含量相对于对照组中相应元素含量的平均值的变化百分比，其中：

图2(a)-K-对照，P1-草甘膦(150μg/kg×7天)，T1-草甘膦(150μg/kg)+根据实施例1的线叶南洋参制剂(300μl/kg))×7天，*p≤0.05，**p≤0.005，***p≤0.001；

图2(b)-K-对照，P2-草甘膦(750μg/kg×7天)，T2-草甘膦(750μg/kg)+根据实施例2的线叶南洋参制剂(900μl/kg)×7天，*p≤0.05，**p≤0.005，***p≤0.001；

图2(c)-K-对照，P1-草甘膦(150μg/kg×7天)，T4-草甘膦(150μg/kg)+根据实施例4的药物组合物(300μl/kg))×7天，*p≤0.05，**p≤0.005，***p≤0.001。

图3(a)至图3(c)-不同实验组动物的脾脏中必需元素的含量相对于对照组中相应元素含量的平均值的变化百分比，其中：

图3(a)-K-对照，P1-草甘膦(150μg/kg×7天)，T1-草甘膦(150μg/kg)+根据实施例1的线叶南洋参制剂(300μl/kg))×7天，*p≤0.05，**p≤0.005，***p≤0.001；

图3(b)-K-对照，P2-草甘膦(750μg/kg×7天)，T2-草甘膦(750μg/kg)+根据实施例2的线叶南洋参制剂(900μl/kg))×7天，*p≤0.05，**p≤0.005，***p≤0.001；

图3(c)-K-对照，P1-草甘膦(150μg/kg×7天)，T4-草甘膦(150μg/kg)+根据实施例4的药物组合物(300μl/kg)×7天，*p≤0.05，**p≤0.005，***p≤0.001；

具体实施方式

应当理解，详细说明和具体实施例虽然表明本发明的实施方式，但仅以说明的方式给出，因为在本发明的精神和范围内的各种变化和修改对于本领域技术人员来说将是显而易见的。基于此处给出的定义，本领域技术人员可以充分利用本发明。以下具体实施方式将被解释为仅是说明性的并且决不限制本公开的其余部分。

除非另有说明，否则本文中使用的所有术语，包括技术和科学术语，具有本发明所属领域的技术人员通常理解的含义。

为了公开的目的，以下是用于描述本发明的各种术语的定义。除非另有说明，否则这些定义适用于说明书和所附权利要求书中使用的术语，单独地或作为更广泛的组的一部分。它们不应按字面解释。它们不是普遍定义，仅与本说明书相关。

如本文所使用，术语“或”普遍的按其含义使用，包含“和/或”，除非内容另有明确规定。

如本文所使用的术语“约”是指大约并且可以被解释为将值估计为指定值或范围的±10％。

如本文所使用，术语“治疗”是指预防(即，预防发作)、减少或减轻疾病、紊乱或病症的至少一种不良反应或症状。因此，该术语既指治疗性治疗又指预防性措施，其目标是预防或减缓(减少)目标病理状况或紊乱。

如本文所使用，“足以治疗的量”或“有效量”是指线叶南洋参植物或其片段的制剂，当给予受试者以治疗疾病、紊乱或其他不良病理状况时，足以对疾病、紊乱或状况提供有益作用而不引起显著的不良反应或副作用的量。

为了预防目的，可以在疾病或紊乱发作之前施用有效量。或者或另外，为了治疗效果，可以在疾病或紊乱发作后施用有效量。

本文所使用的术语“植物制剂或其片段”是指从整株植物及其部分获得的植物来源的物质或物质的混合物，该部分包括但不限于：叶、茎、枝、种子、果实、皮、根，以及植物部分的片段，直至单个植物细胞，包括通过生物技术方法获得的那些。如本文所使用，术语“植物细胞培养”是指生物技术过程，通过该过程植物片段：植物的各个细胞(或单个细胞)、组织或部分在受控条件下人工地生长。可以通过本领域技术人员熟知的方法制作植物或其片段的制剂，制剂包括但不限于浸剂、煎剂、酊剂、提取物、汁液、糖浆、悬浮液、粉末、软膏、糊剂、脂肪或精油的形式，包括益生菌微生物发酵的形式。

如本文所使用，术语“益生菌微生物”是指对受试者无致病性且有益的活微生物，其可以选自但不限于，青春双歧杆菌(Bifidobacterium adolescentis)、长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)、两歧双歧杆菌(Bifidobacterium bifidum)、动物双歧杆菌(Bifidobacterium animalis)、嗜热双歧杆菌(Bifidobacterium thermophilum)、短双歧杆菌(Bifidobacterium breve)；发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentu)、瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)、唾液乳杆菌(Lactobacillus salivarius)、干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)、短乳杆菌(Lactobacillus brevis)、德氏乳杆菌(Lactobacillusdelbrueckii)、植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、鼠李糖乳杆菌(Lactobacillusrhamnosus)、纤维二糖乳杆菌(Lactobacillus cellobiosus)、嗜酸乳杆菌(Lactobacillusacidophilus)、弯曲乳杆菌(Lactobacillus curvatus)、罗伊氏乳杆菌(Lactobacillusreuteri)；乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)；大肠杆菌(Escherichia coli)；粪肠球菌(Enterococcus faecalis)、屎肠球菌(Enterococcus faecium)；唾液链球菌(Streptococcus salivarius)、嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)；枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)、地衣芽孢杆菌(Bacilluslicheniformis)或其组合。

如本文所使用的术语“药物组合物”或“组合物”是指单次剂量或多次剂量的线叶南洋参植物或其片段的一种或多种制剂与药学上可接受的赋形剂组合，可以通过本发明一个或多个实施方式中描述的方法获得。

为了本发明的目的，优选将药物组合物置于合适的容器中。该容器也可以是对患者给药之前制备药物组合物的装置的一部分。

用于本发明目的的各种类型的药物组合物可以选自下组，包括但不限于：溶液、悬浮液、糖浆、液体、凝胶、水凝胶、乳液、脂质体、气溶胶、雾、膜、聚合物、植入物或延迟释放的组合物。

将本发明的药物组合物中的线叶南洋参植物或其片段的制剂给药于受试者的方法可以选自下组，包括但不限于：经口、舌下、颊、直肠、透皮、真皮、皮下、经鼻、吸入。

在一些发明实施方式中，将有效量的本发明的药物组合物中的线叶南洋参植物或其片段制剂以每天一次、每天两次、每天三次或更频繁地给药于受试者。在其他发明实施方式中，每隔一天或更短时间给药。

优选地，当将药物组合物给药于有需要的受试者时，本发明的药物组合物包含足以治疗元素病及其后果的量的线叶南洋参植物或其片段的制剂。

本文所使用的术语“受试者”是指动物，优选哺乳动物，最优选人。在本发明的上下文中，术语“受试者”与术语“患者”可互换使用。

在本发明的上下文中，短语“有需要的受试者”包括那些已经患有疾病或紊乱的人，以及那些易于患有疾病或紊乱的人，或那些要预防疾病或紊乱的人，并且对于他们可以适当地使用线叶南洋参植物或其片段的制剂或本发明的药物组合物。

本文所使用的术语“药学上可接受的”是指适用于正常的药物用途，即不会对患者造成副作用。

如本文所使用的术语“赋形剂”是指可与本发明的线叶南洋参植物或其片段的制剂一起给药于患者的药学上可接受的物质或物质组，它不会降低线叶南洋参植物或其片段的制剂的药理活性，并且为了稳定或赋予活性成分治疗性增强，或降低粘度或增加溶解度的目的，或出于本领域技术人员熟知的其他目的包含在药物组合物中。

为了本发明的目的，这样的药学上可接受的赋形剂选自由溶剂；pH调节剂；等渗剂；防腐剂；抗氧化剂；表面活性剂；增稠剂；吸收促进剂；或其组合组成的组。

如本文所使用的，术语“溶剂”是指选自下组的物质，包括但不限于：水、乙二醇、二甘醇、三甘醇、四甘醇、聚乙二醇、丙二醇、二丙二醇、三丙二醇、甲氧基丙二醇、聚环氧乙烷、甘油、乙醇、丙醇、异丙醇、苯甲醇、苯甲酸苄酯、糖原质、或其组合。

可以存在于本发明的药物组合物中的溶剂的优选量可以在约0.001至约90.0％(重量)的范围内。

如本文所使用的，术语“pH调节剂”是指调节药物组合物的pH至所需pH的物质。pH调节剂可以包含药学上可接受的酸、碱或缓冲剂。例如，酸可以包含但不限于一种或多种无机矿物质酸，例如柠檬酸、富马酸、葡糖酸、乳酸、苹果酸、偏酒石酸、酒石酸、抗坏血酸和苯磺酸等。碱可以是一种或多种无机碱或有机碱，包含但不限于碱金属碳酸盐、碱金属碳酸氢盐、碱土金属碳酸盐、碱金属氢氧化物、碱土金属氢氧化物或胺。例如，无机或有机碱可以是碱金属氢氧化物，例如氢氧化锂、氢氧化钾、氢氧化铯、氢氧化钠等；碱金属碳酸盐，例如碳酸钙、碳酸钠等；或碱金属碳酸氢盐，例如碳酸氢钠等；有机碱也可以是乙酸钠。缓冲剂可以是但不限于，氨基酸的碱金属盐、氢氧化铝、甘氨酸镁、醋酸钙、碳酸氢钙、硼酸钙、碳酸钙、柠檬酸钙、葡萄糖酸钙、甘油磷酸钙、氢氧化钙、乳酸钙、邻苯二甲酸钙、磷酸钙、琥珀酸钙、酒石酸钙、磷酸氢二钠、磷酸氢盐(dibasic hydrogen phosphate)、磷酸氢二钾。可以存在于本发明的药物组合物中的pH调节剂的优选量可以在约0.001至约2.0％(重量)的范围内。

本文所使用的术语“pH”是本领域常用的氢离子浓度的量度。通常，pH提供了溶液酸度或碱度的0至14的量度。在本发明的上下文中，药物组合物的pH是约2.0至约11.0。

如本文所使用的，术语“等渗剂”是指药物组合物中用于改变药物组合物的渗透压以使渗透压变得更接近人血浆的渗透压的物质。等渗剂的实例包括但不限于：氯化钠或氯化钾，或生理上可耐受的多元醇，例如糖醇，特别是山梨糖醇或甘油，其浓度为赋予等渗性所必需的。可以存在于本发明的药物组合物中的等渗剂的优选量可以在约0.001至约1.0％(重量)的范围内。

如本文所使用的，术语“防腐剂”是指添加到药物组合物中以防止或减缓微生物活动(生长和代谢)的物质。可以用于药物组合物的防腐剂的实例可以选自，但不限于，苯甲醇、苯扎氯铵、硫柳汞、苯甲醇、乙醇、苯乙醇、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯和对羟基苯甲酸丁酯或其组合。可以存在于本发明的药物组合物中的防腐剂的优选量可以在约0.001至约2.0％(重量)的范围内。

可用于本发明的药物组合物的合适的抗氧化剂的实例可以选自，但不限于，抗坏血酸、α-生育酚(维生素E)、叔丁基-4-羟基茴香醚、丁基化羟基甲苯、谷胱甘肽等。可以存在于本发明的药物组合物中的抗氧化剂的优选量可以为约0.001至约1.0％(重量)。

可用于本发明的药物组合物的合适的表面活性剂的实例可以选自，但不限于，聚山梨醇酯、通过山梨糖醇酯与环氧乙烷反应制备的它们的醚乙氧基化物、聚氧乙烯烷基酚、聚氧乙烯鲸蜡基醚、聚氧乙烯烷基芳基醚、聚氧乙烯单月桂酸酯、聚氧乙烯植物油、聚氧乙烯酯或混合的脂肪酸和树脂酸、聚氧乙烯山梨糖醇-羊毛脂衍生物、聚氧乙烯十三烷基醚酯、聚氧乙烯羊毛脂衍生物、油酸钠、季铵衍生物、油酸钾、十二烷基硫酸钠，或其混合物。可以存在于本发明的药物组合物中的表面活性剂的优选量可以为约0.001至约5.0％(重量)。

可用于本发明的药物组合物的合适的增稠剂的实例可以选自，但不限于，水不溶性聚合物、丙烯酸聚合物、聚氧乙烯-聚氧丙烯嵌段共聚物、黄原胶、黄芪胶、海藻酸盐、琼脂、明胶、山梨糖醇。可以存在于本发明的药物组合物中的增稠剂的优选量可以在约0.001至约2.0％(重量)的范围内。

可用于本发明的药物组合物的合适的吸收促进剂的实例可以选自，但不限于，依地酸二钠、苯甲醇、乙醇、硫胺素或其盐、癸酸或其盐、苹果酸或其盐、焦磷酸或其盐、柠檬酸或其盐、水杨酸或其盐、焦磷酸或其盐、或其组合。可以存在于本发明的药物组合物中的吸收促进剂的优选量可以在约0.001至约2.0％(重量)的范围内。

本发明通过以下实施例进一步说明，这些实施例作为本发明的实施例呈现并且不限制本发明的范围。尽管已经根据其具体实施方式描述了本发明，但是某些修改和等同物对于本领域技术人员来说将是显而易见的并且旨在包含在本发明的范围内。

实施例1.以线叶南洋参的侧枝为基础的制剂。

为了获得制剂，将收集的线叶南洋参植物的侧枝粉碎并在35±1℃的温度下在烘箱中干燥48小时。基于1:30至1:32的重量/体积比，通过渗滤法，使用40％的乙醇水溶液(GOST R 51786)提取干枝。为此，以20ml每1g干枝的比例将40％的乙醇水溶液倒入干枝中，并放置48小时。将所得溶液离心(3000rpm，5min)，将上清液倒入收集容器中，将沉淀物倒入40％乙醇水溶液的新部分中(10ml每1g干枝初始重量的比例)并放置48小时。将所得溶液离心(3000rpm，5min)，将第二部分上清液倒入同一收集容器中，并将所得混合物在冰箱中保存3天，使用Millipore 0.45μm*25mm过滤器喷嘴倾析和过滤。所得提取物通过HPLC表征。

实施例2.通过植物细胞培养的生物技术方法获得的线叶南洋参植物的生物质制剂。

按照专利RU 2 337 138“Polyscias filicifolia(MOORE EX ROUNIER)BAILEYcell culture strain for the production of drugs,dietary supplements andcosmetics”[36]中描述的方法，基于从线叶南洋参植物(MOORE EX ROUNIER)BAILEY BFT01-95的叶子获得的品种(该植物品种保藏于全俄植物细胞和高等植物器官保藏中心，第58号)，通过高等植物细胞悬浮培养的方法，使线叶南洋参的生物质在生物反应器中生长。生物质的干燥在45至50℃的热空气流中在烘箱中的托盘上进行12至18小时。基于1:10至1:12的重量/体积比，通过渗滤法，使用40％的乙醇水溶液(GOST R 51786)进行空气干燥的细胞生物质的提取。将生物质放入渗滤器中并加入40％的乙醇水溶液，使后者完全覆盖生物质(以5300ml每1kg生物质的比例)并放置过夜。第二天，将提取物通过下部水龙头倒入收集容器中，然后将生物质倒入40％乙醇水溶液的新部分(以3300-3400ml每1kg初始生物质的比例)，混合后，放置过夜。第三天，将提取物倒入同一个收集容器中，生物质再次用40％乙醇水溶液的新部分以以下的量填充，即结果获得10升提取物。次日早上将第三部分提取物倒入同一个收集容器中，合并全部三种提取物。将合并的提取物在冰箱中保存3天，倾析并过滤。根据TU 9154-001-89061833-2011对生物活性食品补充剂“Vitagmal”的更改No.1，SGRNo.RU 77.99.29.003.E.003414.02.15日期2015年02月12日的要求对所得药物进行了表征。

实施例3.由益生菌微生物发酵的线叶南洋参植物的生物质制剂。

根据专利RU 2 337 138[36]中描述的方法，通过高等植物的悬浮细胞培养方法，线叶南洋参植物的生物质在生物反应器中生长。然后将10g所得的线叶南洋参的空气干燥生物质和0.1g维生素C悬浮在100ml预灭菌牛奶中。向所得悬浮液中接种1ml(约10⁹CFU/ml)长双歧杆菌培养液，随后在37±1℃下在不断搅拌下发酵24小时。所得制剂通过HPLC表征。

实施例4.含有线叶南洋参植物制剂的药物组合物。

用于本发明目的的药物组合物的配制包括以下步骤：

(a)根据实施例1制备线叶南洋植物参制剂；

(b)在不断搅拌下向制剂中添加药学上可接受的赋形剂，该赋形剂包括溶剂；pH调节剂；等渗剂；防腐剂；抗氧化剂；表面活性物质；增稠剂；吸收促进剂；

(c)将药物组合物装填到无菌的25ml玻璃瓶中，然后将其封闭。

制备包含线叶南洋参植物制剂的药物组合物，其组成如表1所示：

表1

实施例5.线叶南洋参植物或其片段的制剂用于治疗由外来化合物渗透诱导的元素病的用途。

根据潜在药物临床前研究指南的建议，啮齿类动物是药理学研究的标准受试者[37，38，39]。

在线叶南洋参植物的制剂用于治疗元素病用途的研究中使用的动物数量是每个实验组中的最少可能，并且足以获得可靠的研究结果，并完成研究效果的统计显著性登记。

在实验中，使用60只特殊繁殖的白色远交系雄性Wistar大鼠，约两月龄，体重200至220g。

将动物保持在气温为20-26℃，相对湿度为30-70％，光照周期规则变化(12小时光照/12小时黑暗)、自由饮水和采食的受控条件下。所有动物在被送往繁育场之前都经过了30天的检疫期。到达后，这些动物在动物饲养箱中进行适应48小时。在适应期间，视觉上监测动物的临床健康体征(一般状况、活动能力、整洁、肥胖、食欲、无疾病症状)。在研究开始之前，将符合入选标准(体重、临床健康)的动物分成每组10只动物。进行分配以使同一物种的各组动物的平均重量相差不超过10％。每只动物都被分配唯一的编号。根据规则[40,41,42,43]，使用实验动物的实验是遵照对于实验中使用动物的人道待遇和道德标准进行的。

为了模拟动物中的元素病，决定使用草甘膦(N-膦酰基甲基甘氨酸)，它是包括铁、铜、锌和镁[44]的许多必需元素的螯合剂。以表2中所示的剂量，将制备的溶液口服给药，进行7天。

表2-不同实验组动物的研究设计

在第八天，从动物抽取体积为5ml的血液。将获得的样品分成血浆和血块并在-18℃下冷冻。肝脏和脾脏也被取出用于进一步研究，称重并冷冻在-18℃。运输冷冻样品用于微量元素的定量分析。根据MUK 4.1.1483，通过在Agilent7900ICP-MS电感耦合等离子体质谱仪上的原子发射光谱法，对样品中的必需元素含量进行分析。

在IBM SPSS Statistics 24程序中对获得的数据进行统计处理。为了描述具有均匀数据或具有分布接近正态的组，使用平均值(X)和标准偏差(S)，通过方差分析(F检验)进行组间比较，成对比较在比较组中同质方差(homogeneous variance)的情况下通过Scheffe后验检验进行，或在异质方差(heterogeneous variance)的情况下通过事后Tamhain检验进行。分布的正态性检验通过Shapiro-Wilk检验进行，方差齐性检验通过Levine检验进行。通过非参数Kruskal-Wallis方差分析(H检验)比较各组，并通过非参数Mann-Whitney检验进行成对比较。显著性差异的临界显著性水平为p≤0.05。

检查数据的正态分布表明，对于大多数指标而言，分布与正态分布不同，这意味着应使用非参数标准评估它们之间的差异。Kruskal-Wallis检验揭示了实验组之间在肝脏、脾脏和血液的形成元素的凝块中许多必需元素的含量存在显著差异。实验结果见表3(各实验组动物的器官中必需元素的含量(μg/g))和图1-3。

表3

实验结果表明，线叶南洋参植物或其片段制剂可以用于治疗有需要的受试者的元素病及其后果，其中元素病是受试者的一个或多个内脏器官中至少一种必需元素的含量的偏差，该必需元素选自下组：Ca、Cr、I、Mn、Cu、Mg、Fe、Zn，所述元素病是由外来化合物渗透到受试者体内诱导的，该治疗无需使用其含量不正常的必需元素的来源或螯合剂。

实施例6.线叶南洋参植物或其片段制剂用于治疗由感染性疾病诱导的元素病的用途。

感染性疾病，尤其是口腔感染性疾病，主要是牙周炎，是许多全身性疾病的病因，全身性疾病包括心血管疾病、细菌性肺炎、糖尿病、骨质疏松症、关节炎、认知障碍、血栓形成和其他疾病[45]。

通过植物细胞培养(实施例2)的生物技术方法获得的线叶南洋参植物生物质制剂的用途的临床研究，在圣彼得堡国立医科大学acad.I.P.Pavlova，牙科学院，内科副教授Dr.honey，Sciences I.A.Gorbacheva的指导下，以及市牙周中心和MSC No.18的治疗师和牙医的参与下，在St.acad.I.P.Pavlov(圣彼得堡)，牙科学院，内科的临床基地进行。

选择具有牙周炎并伴有多种内脏器官病变的临床表现的患者。共有27人接受了检查，包括22名女性和5名男性，年龄在20至50岁。治疗是根据以下方案进行的：每天早上饭前40分钟，舌下含服10-12滴的线叶南洋参植物的生物质制剂“Vitagmal”，持续30天。此外，患者在晚间口腔清洁后，使用Vitagmal处理牙龈。

实验室研究记录了实验组患者免疫参数的改善(p<0.001)：无菌性炎症病灶中单核吞噬细胞的移动由(52.1±0.7)％增加至(62.8±1.5)％(正常为(69.3±0.61)％)；血液中循环的单核祖细胞数从(0.35±0.08)至(0.58±0.09)·10⁹/l(比例为(0.6±0.05)·10⁹/l)；具有身体严重脱敏：淋巴细胞母细胞的转化水平由(5.9±0.9)％下降至(1.5±0.09)％；γ球蛋白的水平由(24.5±0.5)％至(20.0±0.6)％。

所有患者注意到超敏反应和牙龈出血的消失。患者血液中必需元素含量的实验室研究结果见表4(用线叶南洋参植物生物质制剂治疗前和治疗后，牙周炎患者的血液中必需元素含量的动态变化)。

表4

实验结果表明，线叶南洋参植物或其片段制剂可以用于治疗有需要的受试者的元素病及其后果，其中，元素病是受试者的一种或多种内脏器官中至少一种必需元素的含量的偏差，该元素选自下组：Ca、Cu、Mg、Fe、Zn，所述元素病是由受试者体内的感染性疾病诱导的，该治疗无需使用其含量不正常的必需元素的来源或螯合剂。

参考文献

1.Avtsyn A.P.,Zhavoronkov M.A.,Rish M.A.,Strochkova L.S.人微量元素病(Human microelementoses)//M.:Medicine,1991.-496p.

2.Butte N.,Cobb K.,Dwyer J.,Graney L.,Heird W.婴幼儿喂养指南(开始健康计划)(Feeding Guidelines for Infants and Toddlers(Start Healthy program))//Current Pediatrics.–2007.–V.6,–No.1.–p.115-129.

3.Cooke R.J.早产儿出院后营养：问题多于答案(Postdischarge nutrition ofpreterm infants:more questions than answers)//Nutrition support for infantsand children at risk.–Karger Publishers,2007.–Vol.59.–P.213-228.

4.Shitz,I.V.在萨哈-雅库特妊娠对女性元素状态的影响。报告一。民族、年龄和其他特征。(Influence of pregnancy on women's elemental status in Sakha-Yakutia.Report one.National,age and other features.)//Trace Elements inMedicine.2006.-№7.V.3.-P.23—29.

5.Secretariat W.H.O.,Andersson M.,De Benoist B.,Delange F.,Zupan J.孕妇、哺乳期妇女和小于2岁儿童中碘缺乏症的预防和控制：技术磋商会的结论和建议(Prevention and control of iodine deficiency in pregnant and lactating womenand in children less than 2-years-old:conclusions and recommendations of theTechnical Consultation)//Public health nutrition.–2007.–Vol.10.–№.12A.–P.1606-1611.

6.Suslikov VL疾病的地球化学生态学(Geochemical ecology of diseases)//V.2:Atomovites.-M.:Helios ARV,2000.-672p.

7.Oliveira D.C.,Nogueira-Pedro A.,Santos E.W.,Hastreiter A.,SilvaG.B.,Borelli P.,Fock R.A.影响造血过程的选定矿物质综述(A review of selectminerals influencing the haematopoietic process)//Nutrition researchreviews.–2018.–Vol.31.–No.2.–P.267-280.

8.Failla M.L.,Kiser R.A.实验性糖尿病中微量金属的组织含量和胞质溶胶分布变化(Altered tissue content and cytosol distribution of trace metals inexperimental diabetes)//The Journal of nutrition.–1981.–Vol.111.–№.11.–P.1900-1909.

9.Serdar M.A.,Bakir F.,

A.,

T.,Akin O.,Kenar L.,Aykut O,Yildirimkaya M.患有非胰岛素依赖型糖尿病、葡萄糖耐量受损和空腹血糖的非吸烟患者中微量元素和毒性元素模式(Trace and toxic element patterns in nonsmokerpatients with noninsulin-dependent diabetes mellitus,impaired glucosetolerance,and fasting glucose)//International journal of diabetes indeveloping countries.–2009.–Vol.29.–№.1.–P.35.

10.Rustembekova S.A.,Baraboshkina T.A.微量元素病和环境风险因素(Microelementoses and environmental risk factors)//M.:Universitetskaya kniga；Logos,2006.-112p.

11.Skalny A.V.,Rudakov I.I.医学中的生物元素(Bioelements inmedicine)//M.:Mir,2004.-216p.

12.US 4757059 A,1988.

13.WO 2008001110 A2,2008.

14.US 6779468 B1,2004.

15.US 6887492 B2,2005.

16.US 20070292493 A1,2007.

17.Martínez R.M.G.孕期补充剂：最新建议(Supplements in pregnancy:thelatest recommendations)//Nutricion hospitalaria.–2016.–Vol.33.–№.Suppl 4.–P.336-336.

18.Berggren K.L.,Chen J.,Fox J.,Miller J.,Dodds L.,Dugas B.,VargasL.,Lothian A.,McAllum E.,Volitakis I.,Roberts B.,Bush A.I.,Fox J.H.在亨廷顿病的R6/2小鼠模型中新生儿补铁加剧氧化应激、能量功能障碍和神经变性(Neonatal ironsupplementation potentiates oxidative stress,energetic dysfunction andneurodegeneration in the R6/2mouse model of Huntington's disease)//Redoxbiology.–2015.–Vol.4.–P.363-374.

19.Chen J.H.,Singh N.,Tay H.,Walczyk T.铁流入和流出的不平衡导致健康成年大鼠脑铁随时间积累(Imbalance of iron influx and efflux causes brain ironaccumulation over time in the healthy adult rat)//Metallomics.–2014.–Vol.6.–№.8.–P.1417-1426.

20.Anderson E.R.,Shah Y.M.肝脏中的铁稳态(Iron homeostasis in theliver)//Comprehensive Physiology.–2013.–Vol.3.–№.1.–P.315-330.

21.Turgut G.,Abban G.,Turgut S.,Take G.过量锌对小鼠睾丸的影响及其与精子数量和活力的关系(Effect of overdose zinc on mouse testis and its relationwith sperm count and motility)//Biological trace element research.–2003.–Vol.96.–No.1-3.–P.271-279.

22.WO 2006107626 A1,2006.

23.US 4613616 A,1986.

24.WO 2010033847 A1,2010.

25.US 6268336 B1,2001.

26.WO 2000021941 A1,2000.

27.US 6855340 B2,2005.

28.Alekseev N.A.贫血(Anemias).//St.Petersburg:Hippocrates,2004.-511p.

29.Sharp P.铜和铁相互作用的分子基础(The molecular basis of copper andiron interactions)//Proceedings of the Nutrition Society.–2004.–Vol.63.–№.4.–P.563-569.

30.Ho Y.S.,Gargano M.,Cao J.,Bronson R.T.,Heimler I.,Hutz R.J.缺乏铜锌超氧化物歧化酶的雌性小鼠的生育能力降低(Reduced fertility in female micelacking copper-zinc superoxide dismutase)//Journal of Biological Chemistry.–1998.–Vol.273.–No.13.–P.7765-7769.

31.Mieden G.D.,Keen C.L.,Hurley L.S.,Klein N.W.大鼠全胚培养对锌和铜缺乏大鼠血清的影响(Effects of whole rat embryos cultured on serum from zinc-andcopper-deficient rats)//The Journal of nutrition.–1986.–Vol.116.–No.12.–P.2424-2431.

32.Keen C.L,Uriu-Hare J.Y.,Hawk S.N.,Jankowski M.A.,Daston G.P.,Kwik-Uribe C.L.,Rucker R.B.铜缺乏对产前发育和妊娠结局的影响(Effect of copperdeficiency on prenatal development and pregnancy outcome)//The Americanjournal of clinical nutrition.–1998.–Vol.67.–No.5.–P.1003S-1011S.

33.Rucker R.B.,Kosonen T.,Clegg M.S.,Mitchell A.E.,Rucker B.R.,Uriu-Hare J.Y.,Keen C.L.铜、赖氨酰氧化酶和细胞外基质蛋白交联(Copper,lysyl oxidase,and extracellular matrix protein cross-linking)//The American journal ofclinical nutrition.–1998.–Vol.67.–No.5.–P.996S-1002S.

34.Danks D.M.人的铜缺乏(Copper deficiency in humans)//Annual reviewof nutrition.–1988.–Vol.8.–No.1.–P.235-257.

35.Spasenkov A.I.,Strelkova M.A.,Spasenkova O.M.,Slepyan L.I.,Kirillova N.V.,Davydov V.V.南洋参属组织培养的微量元素生物量结构(Microelementary biomass structrure of the polyscias tissue culture)//I.P.Pavlov Russian Medical Biological Herald.–2007.–No.2.

36.RU 2337138 C2,2006.

37.药物临床前研究指南(Guidelines for conducting preclinical studiesof drugs).Part one//Edited by A.N.Mironov.—M.:Grif and K,2012.–944p.

38.实验动物护理和使用指南(Guide for the Care and Use of LaboratoryAnimals).Eight Edition//Editor:Belozertseva I.V.,Blinov D.V.,KrasilschikovaM.S.–М.:IRBIS LLC,2017.–336p.

39.新药理物质实验(临床前)研究指南(Guidelines for the experimental(preclinical)study of new pharmacological substances)//Edited byR.U.Khabriev–М:《Medicine》,2005.–832p.

40.EU Directive N 2010/63/EU from 22September 2010有关用于科学目的的动物的保护(on the protection of animals used for scientific purposes).

41.用于实验和其他科学用途的脊椎动物保护欧洲公约(European conventionfor the protection of vertebrate animals used for experimental and otherscientific),2005.

42.实验动物的护理和使用指南(Guide for the care and use of laboratoryanimals)//National Academy press.–Washington,D.C.1996.

43.药品固定组合的非临床开发指南(Guideline on the non-clinicaldevelopment of fixed combinations of medicinal products)//London,January2008.

44.Samsel A.,Seneff S.草甘膦，通往现代疾病的途径II：口炎性腹泻和麸质不耐受(Glyphosate,pathways to modern diseases II:Celiac sprue and glutenintolerance)//Interdisciplinary toxicology 6.4,2013:159-184.

45.Robert J.Genco,Ray C.Williams.牙周病和全身健康(Periodontal Diseaseand Overall Health)//A Clinician’s Guide,2010。

Claims (10)

1.一种线叶南洋参(Polyscias filicifolia)植物的侧枝或叶或其片段的一种或多种制剂用于治疗有需要的受试者的元素病的用途，其中，元素病是受试者的一种或多种内脏器官中至少一种必需元素的含量的偏差，该必需元素选自下组：Ca、Cr、I、Mn、Cu、Mg、Fe、Zn，所述元素病是由外来化合物渗透到受试者体内诱导的，所述治疗无需使用含量不正常的必需元素的来源或螯合剂。

2.一种通过植物细胞培养的生物技术方法获得的线叶南洋参(Polysciasfilicifolia)植物的侧枝或叶或其片段的一种或多种制剂用于治疗有需要的受试者的元素病的用途，其中，元素病是受试者的一种或多种内脏器官中至少一种必需元素的含量的偏差，该必需元素选自下组：Ca、Cu、Mg、Fe、Zn，所述元素病是由外来化合物渗透和/或感染性疾病诱导的，所述治疗无需使用其含量不正常的必需元素的来源或螯合剂。

3.根据权利要求1所述的用途，其中，所述线叶南洋参植物的片段是通过植物细胞培养的生物技术方法获得的。

4.根据权利要求2或权利要求3所述的用途，其中，所述线叶南洋参植物的片段是基于品种BFT 01-95，编号58VKKK VR，通过植物细胞培养的生物技术方法获得的。

5.根据权利要求3所述的用途，其中，所述制剂为通过植物细胞培养的生物技术方法获得的、由益生菌微生物发酵的线叶南洋参植物的片段。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的用途，其中，所述制剂用作药物组合物的一部分，所述药物组合物包含线叶南洋参植物或其片段的至少一种制剂与药学上可接受的赋形剂组合，所述药学上可接受的赋形剂选自由溶剂；pH调节剂；等渗剂；防腐剂；抗氧化剂；表面活性剂；增稠剂；吸收促进剂；或其组合组成的组。

7.根据权利要求1所述的用途，其中，所述元素病是由外来化合物草甘膦(N-(膦酰基甲基)-甘氨酸)渗透到受试者体内诱导的。

8.根据权利要求1至7中任一项所述的用途，其中，所述元素病是在至少一种内脏器官中一种或多种必需元素的含量的偏差，所述内脏器官选自下组：肝脏、脾脏、血液。

9.根据权利要求1至8中任一项所述的用途，其中，所述制剂经口或舌下给药。

10.根据权利要求1至9中任一项所述的用途，其中，所述制剂是用于治疗元素病的医药产品的一部分。

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