CN115774107A - 一种稳定、特异性强的肌钙蛋白i检测试剂盒 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种稳定、特异性强的肌钙蛋白I检测试剂盒，涉及到临床检测试剂技术领域。所述检测试剂盒包括试剂R1和试剂R2，其中所述试剂R1的成分如下：缓冲液、氯化钠、曲拉通、稳定剂、防腐剂；试剂R2的成分如下：缓冲液、羊抗人TnI抗体包被胶乳颗粒、稳定剂、抗坏血酸、柠檬酸钠、EDTA二钠。本发明具有特异性强、稳定性好的特点。

Description

一种稳定、特异性强的肌钙蛋白I检测试剂盒

技术领域

本发明涉及临床体外检测技术领域，具体涉及一种稳定、特异性强的肌钙蛋白I检测试剂盒。

背景技术

肌钙蛋白I(TnI)检查旨在检测人体血清或血浆中肌钙蛋白I的含量，肌钙蛋白I(Cardiac Troponin I，TnI)作为心肌损伤标志物，在临床上已应用了多年。由于其高度的心肌特异性，对于心肌损伤的高度敏感性及较长的窗口期，TnI已被临床医生及检验人员广泛接受，不仅成为判断心肌损伤，特别是诊断急性心梗的“金标准”。而且已成为判断冠脉综合征病人处于心肌损伤风险的最合适的标志物。肌钙蛋白的升高还作为有力的证据可支持临床医生及早做出抗血栓、抗血小板凝集及介入性治疗的决定。

肌钙蛋白复合物由三个亚单位组成，TnT、TnI、TnC。TnI是心肌细胞中的特有蛋白质。当心肌细胞受损时，TnI释放入血，在胸痛发生4-6小时后，血液中TnI含量超过正常上限，12-24小时达到高峰，可持续14天之久。因此，TnI目前已成为诊断心肌损伤的前提条件。由于TnI释放入血液中是心肌损伤的结果。临床上其它非AMI也可由TnI释放，如不稳定心绞痛、充血性心衰，冠状动脉分流术造成的缺血性损伤。临床中对于肌钙蛋白I检测的方法主要是免疫比浊法、胶体金法。

肌钙蛋白I检测试剂盒(胶乳免疫比浊法)是一种无需预处理样本、技术和设备要求不高而精密度和特异性更高的分析方法，由于该方法不需要昂贵的设备，可以实现自动化，且可测定大量标本，因此受到临床广泛推广。目前市场上心肌肌钙蛋白I诊断试剂盒，在其性能及价格方面都有了较大的改善，并有全自动生化分析仪，形成了完整的检测系统，提高了心肌损伤的早期诊断效率。但是仍然存在稳定性不强，低值灵敏度不够等问题。所以发明一种稳定、特异性强的试剂盒具有非常重要的临床意义。

发明内容

本发明提供一种稳定、特异性强的肌钙蛋白I检测试剂盒。

为解决上述技术问题，本发明提供技术方案如下：

本发明提供一种稳定、特异性强的肌钙蛋白I检测试剂盒，由试剂R1和试剂R2，其中：

所述试剂R1的成分和含量如下：

试剂R2的成分和含量如下：

进一步的，所述缓冲液为甘氨酸缓冲液、磷酸盐缓冲液、MES缓冲液、Tris缓冲液中的一种或多种，所述试剂R1和试剂R2中的缓冲液的温度为25℃，PH值为7.6。

进一步的，所述试剂R1：试剂R2的体积比为＝3：1。

进一步的，所述试剂R1的成分和含量如下：

所述试剂R2的成分和含量如下：

进一步的，所述试剂R1的成分和含量如下：

所述试剂R2的成分和含量如下：

进一步的，所述试剂R1的成分和含量如下：

所述试剂R2的成分和含量如下：

与现有技术相比，本发明具有以下良好效果：

本发明的肌钙蛋白I检测试剂盒的变异系数CV＜2％，具有较好的重复性；添加的防腐剂不会对试剂的准确度产生影响，试剂的准确度和稳定性良好，特异性强，使用方便，完全可以满足临床需要。

附图说明

图1为本发明的稳定、特异性强的肌钙蛋白I检测试剂盒中实施例1、实施例2、实施例3与对照组的重复性曲线图；

图2为本发明的稳定、特异性强的肌钙蛋白I检测试剂盒中实施例1与对照组的相关性曲线图；

图3为本发明的稳定、特异性强的肌钙蛋白I检测试剂盒中实施例2与对照组的相关性曲线图；

图4为本发明的稳定、特异性强的肌钙蛋白I检测试剂盒中实施例3与对照组的相关性曲线图；

图5为本发明的稳定、特异性强的肌钙蛋白I检测试剂盒中实施例1、实施例2、实施例3与对照组在2-8℃处理后的稳定性曲线图；

图6为本发明的稳定、特异性强的肌钙蛋白I检测试剂盒中实施例1、实施例2、实施例3与对照组在37℃处理后的稳定性曲线图。

具体实施方式

为使本发明要解决的技术问题、技术方案和优点更加清楚，下面将结合具体实施例和附图进行详细描述。

对照组采用市场上常见的国家食品药品监督管理局认可的肌钙蛋白I检测试剂盒。

实施例1：

本发明的稳定、特异性强的肌钙蛋白I检测试剂盒包括试剂R1和试剂R2，其中：

试剂R1的成分和含量如下：

所述试剂R2的成分和含量如下：

本实施例的检测方法：采用具有双试剂功能的全自动生化分析仪(如日立7180全自动分析仪、OLYMPUS AU640等)，利用胶乳增强免疫比浊法，将特异性抗体结合于胶乳颗粒表面，样本与胶乳颗粒在缓冲液中混合，样本中的TnI与胶乳颗粒表面的抗体结合，使相邻的胶乳颗粒彼此交联，在505nm波长下检测溶液浊度变化，变化程度与样本中的TnI含量成正比，具体操作如下：将试剂放置到对应的试剂位上，在样品盘的对应位置放置蒸馏水、校准品和样本，操作如表1：

表1实施例1试剂检测方法

计算：样本肌钙蛋白I含量(μg/L)＝(ΔA测定÷ΔA校准)×C校准。

实施例2：

本发明的稳定、特异性强的肌钙蛋白I检测试剂盒包括试剂R1和试剂R2，其中：

试剂R1的成分和含量如下：

所述试剂R2的成分和含量如下：

检测方法同实施例1的检测方法。

实施例3：

本发明的稳定、特异性强的肌钙蛋白I检测试剂盒包括试剂R1和试剂R2，其中：

试剂R1的成分和含量如下：

所述试剂R2的成分和含量如下：

检测方法同实施例1的检测方法。

重复性试验：

采用实施例1、实施例2、实施例3和对照试剂进行对照检测，分别检测质控品(靶值为0.5μg/L)，重复10次，并计算其变异系数，检测结果如表2所示：

表2试剂盒重复性检测结果

由表2可以看出，上述实施例1、2、3所得试剂重复性CV值均小于2％，实施例1试剂重复性CV值仅0.96％，远优于对照组试剂。

抗干扰性试验：

取新鲜混合血清，分成4等份，然后将每等份再分成5等份，加入不同的干扰物质，使其在血清中的浓度达到表3的要求。然后分别用实施例1、2、3和对照组的肌钙蛋白I检测试剂盒同时对比测定血清中肌钙蛋白I的含量，测定结果如表3所示：

相对偏差(％)＝(干扰样本的测定均值－对照样本的测定均值)/对照样本的测定均值×100％。

表3干扰性试验结果

由表3可以看出，实施例1、实施例2和实施例3试剂在甘油三酯≤800mg/dL、胆红素≤30mg/dL、血红蛋白≤200mg/dL存在时对测试结果没有明显干扰，这说明本发明的肌钙蛋白I检测试剂盒的抗干扰性能已达到现有市场肌钙蛋白I检测试剂盒的抗干扰性能。

相关性试验：

利用实施例1、实施例2和实施例3配方配制试剂，与对照组同时检测了20个临床血清样本，检测结果如表4所示：

表4实施例1试剂与市场常见并得到认可的肌钙蛋白I检测试剂盒对比检测结果

相对偏差(％)＝(实施例的测定均值－对照组的测定均值)/对照组的测定均值×100％。

从表4可以看出，上述实施例1、实施例2和实施例3试剂与对照组相关系数分别为0.995、0.9948和0.995，说明了本发明的肌钙蛋白I检测试剂盒与现有市场上常见的国家食品药品监督管理局认可的肌钙蛋白I检测试剂盒具有极大的相关性，本发明的肌钙蛋白I检测试剂盒的准确性与现有市场上常见的国家食品药品监督管理局认可的肌钙蛋白I检测试剂盒的准确性没有明显差异，进一步表明了本发明的肌钙蛋白I检测试剂盒的抗体能够与抗原有效结合，试剂盒的特异性较强，能够满足临床需要。

稳定性检测：

对实施例1、实施例2和实施例3中的试剂，均匀分装13组；并且取13组市场常见的国家食品药品监督管理局认可的某公司的肌钙蛋白I试剂盒作对照。放置到2-8℃冰箱中和37℃水浴锅中，每天的同一时间取出一组试剂检测质控品(靶值为0.5μg/L)。实施例1、实施例2和实施例3试剂在2-8℃和37℃储存条件下比市场常见的肌钙蛋白I测定试剂盒更加稳定。通过验证，本试剂盒与同类检测试剂对比相关性好，临床检测样本结果一致，能够达到市场对产品的应用要求，并且抗干扰性能好，是一种更加稳定、良好的肌钙蛋白I检测试剂盒。

表5试剂盒放置在不同条件下处理后检测结果

综上所述，本发明的稳定、特异性强的肌钙蛋白I检测试剂盒具有较好的重复性、稳定性、特异性和抗干扰性。

以上所述是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明所述原理的前提下，还可以作出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (8)

1.一种稳定、特异性强的肌钙蛋白I检测试剂盒，其特征在于，包括试剂R1和试剂R2，其中：

所述试剂R1的成分和含量如下：

试剂R2的成分和含量如下：

。

2.根据权利要求1所述的稳定、特异性强的肌钙蛋白I检测试剂盒，其特征在于，所述缓冲液为甘氨酸缓冲液、磷酸盐缓冲液、MES缓冲液、Tris缓冲液中的一种或多种，温度为25℃，PH值为7.6。

3.根据权利要求1所述的稳定、特异性强的肌钙蛋白I检测试剂盒，其特征在于，所述试剂R1：试剂R2的体积比为＝3：1。

4.根据权利要求1所述的稳定、特异性强的肌钙蛋白I检测试剂盒，其特征在于，所述稳定剂为葡聚糖、木糖醇、甘露醇、蔗糖中的一种或多种。

5.根据权利要求1所述的稳定、特异性强的肌钙蛋白I检测试剂盒，其特征在于，所述防腐剂为山梨酸、叠氮钠中的一种或两种。

6.根据权利要求1-6中任一所述的稳定、特异性强的肌钙蛋白I检测试剂盒，其特征在于，所述试剂R1的成分和含量如下：

所述试剂R2的成分和含量如下：

。

7.根据权利要求1-6中任一所述的稳定、特异性强的肌钙蛋白I检测试剂盒，其特征在于，所述试剂R1的成分和含量如下：

所述试剂R2的成分和含量如下：

。

8.根据权利要求1-6中任一所述的稳定、特异性强的肌钙蛋白I检测试剂盒，其特征在于，所述试剂R1的成分和含量如下：

所述试剂R2的成分和含量如下：

。

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