CN115746064A - 一种利用葡萄糖制备果糖的方法 - Google Patents
一种利用葡萄糖制备果糖的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN115746064A CN115746064A CN202211560027.7A CN202211560027A CN115746064A CN 115746064 A CN115746064 A CN 115746064A CN 202211560027 A CN202211560027 A CN 202211560027A CN 115746064 A CN115746064 A CN 115746064A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- fructose
- glucose
- calcium
- reaction
- preparing
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Images
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
Abstract
本发明属于生物质转化中葡萄糖异构化的技术领域,具体涉及一种利用葡萄糖制备果糖的方法。为解决葡萄糖异构化制备果糖存在:生物酶催化成本高、反应条件苛刻、易失活、转化率低、选择性不高、且会污染环境以及果糖易制备但难分离等的问题,本发明将葡萄糖、钙源、提供碱性的化合物于溶剂中混合,得到混合溶液,并对其加热,进行异构化反应,生成含果糖的混合液,分离纯化得到果糖。所使用的钙源作为一类常见的无机盐,绿色无污染,不会对环境造成不利影响,还能利用多种不同的碱性化合物,对反应进行调控。该催化分离耦合工艺不仅能高选择性地制备果糖,还能通过进一步处理分离纯化果糖,并且溶剂和催化剂能够实现循环利用。
Description
技术领域
本发明属于生物质转化中葡萄糖异构化的技术领域,具体涉及一种利用葡萄糖制备果糖的方法。
背景技术
果糖是一种常见的食品添加剂,可作为增味剂、甜味剂和显色剂,广泛应用于各类食品和碳酸饮料中。此外,果糖也是生产5-羟甲基糠醛(HMF)的重要来源,而HMF则是生产化工产品和液体燃料的通用平台化学品。果糖作用广泛,在生物质转化以及食品健康等方面都具有重大意义,但在自然界中果糖的储量不如葡萄糖丰富,更多是以葡萄糖为原料,经过异构化作用制备果糖。
在工业生产中,一般采用使用固载化葡萄糖异构酶催化的方法生产果糖,其得到的果葡糖浆的果糖含量高达42%。然而,生物酶催化异构化存在反应成本高、时间长、操作复杂、需要缓冲液以及酶活性寿命短等缺陷。科研工作者们也对常规的化学法催化异构制备果糖进行了系统研究,如碱、固体碱、金属盐以及分子筛等传统催化剂。但是部分酸性催化剂中的重金属离子与毒害作用,会危害环境;而在强碱性溶液中单糖不稳定,异构化效果往往较差;有机碱则具有较高的细胞毒性;固体碱催化剂活性相对较低,反应中生成的副产物可能吸附在催化剂表面造成催化剂失活。此外,使用这些催化剂会有繁多的副反应,并且还存在产物果糖难以分离的困难。
在目前以葡萄糖为原料合成果糖的化学合成工艺中,多以酶催化生产,但它们对反应环境非常敏感,反应环境需严格监控;而使用传统的化学催化剂,如路易斯酸、固体碱、金属盐以及分子筛等,受限于反应平衡常数,果糖产率较低,且难以提取分离。
发明内容
本发明是针对现有对葡萄糖异构化制备果糖所采用的方法:生物酶催化成本高、反应条件苛刻、易失活;传统化学催化剂如酸、碱催化等方法转化率低、选择性不高、且会污染环境等问题;以及果糖易制备但难分离的困扰提出了一种利用葡萄糖异构化制备果糖的方法。该新型催化分离耦合工艺不仅能高选择性地制备果糖,还能通过进一步处理分离纯化果糖,并且溶剂和催化剂能够实现循环利用,避免了废液的排放对环境造成影响,符合绿色催化的原则。
为了达到上述目的,本发明采用了下列技术方案:
一种利用葡萄糖制备果糖的方法,基于钙源在碱性条件下催化葡萄糖异构化,包括以下步骤:
步骤1,将葡萄糖、钙源、提供碱性的化合物于溶剂中混合,得到混合溶液;
步骤2,对步骤1得到的混合溶液加热,进行异构化反应,生成含果糖的混合液,分离纯化得到果糖。
本发明利用钙盐在碱性条件下催化葡萄糖异构化,钙盐为常见的无机盐,安全无毒,整个反应过程绿色环保,应用安全得以保证;此外,还充分利用了产物在体系中溶解度较低的特性对产物进行分离,并且对溶剂以及溶解的催化剂进行回收再利用。所有操作步骤简单易操作,反应条件温和易控制,能够实现循环利用,避免了废液排放,绿色环保。
进一步,所述步骤1中钙源为氯化钙、硝酸钙、醋酸钙、氢氧化钙、磷酸钙、磷酸氢钙、磷酸二氢钙、硫酸钙、碳酸钙中的一种或与氯化钠、氯化钾的混合物。这些钙源均能提供关键的钙离子,从而发挥作用,在碱性环境中催化葡萄糖异构化生成果糖。并且,钙盐作为一类常见的无机盐,绿色无污染,不会对环境造成不利影响。
进一步,所述步骤1中提供碱性的化合物为三乙胺、乙二胺、吡啶、吡嗪、氢氧化钙、氢氧化钠等有机碱或无机碱。不同的碱性化合物具有不同的活性、选择性,能够对反应进行调控。
进一步,所述步骤1中溶剂为水、甲醇、乙醇、异丙醇、γ-丁内酯中的一种或几种按任意比混合的混合溶剂。本发明能够适应不同的环境,在多种溶剂条件下进行,而不需要缓冲液;其中水、甲醇是常用的反应溶剂,而乙醇、异丙醇、γ-丁内酯以及这些溶剂相互混合后的混合溶剂都能够在本催化体系中为异构化反应提供良好的溶剂环境。
进一步,所述步骤1中混合溶液中葡萄糖的质量浓度为2~2000mg/mL。在此浓度下反应进行的更加充分;如果葡萄糖的质量浓度低于2mg/mL,则由于底物浓度太低,催化剂的性能不能有效的发挥,产物浓度过低而难以分离;如果葡萄糖的质量浓度高于2000mg/mL,则体系整体浓度过高,不利于反应。
进一步,所述步骤1中葡萄糖、钙源中钙离子和提供碱性的化合物的摩尔比为1:0.1~20:0.1~20。在此摩尔比范围内,钙离子能够有效地最大程度的转化葡萄糖为果糖;如果摩尔比低于1:0.1,则葡萄糖异构化不能在有效时间内达到反应平衡,降低了产率;如果摩尔比高于1:20,钙盐的催化性能不能有效的发挥。提供碱性的化合物则能够提供有效的碱性促进葡萄糖向果糖的转化;如果摩尔比低于1:0.1,碱性不足,无法有效的结合钙盐促进催化反应的进行;如果摩尔比高于1:20,则会促进副反应的进行,降低目标产物的产率和选择性。
进一步,所述步骤2中加热的温度为25~200℃,异构化反应的时间为5min~48h。当反应温度从25℃升高到100℃(水)或200℃(γ-丁内酯),反应时间从5min增加到或48h时,葡萄糖转化率逐渐增长,果糖的产率也在逐渐增加;而当反应温度、时间超过这个范围,目标产物果糖的产率未见进一步提高。因此本发明中最佳的反应温度和反应时间范围为25~200℃,5min~48h。此外,钙盐应用温度范围广,能够适应25~200℃的反应温度,并且能够在较短的时间内完成反应。
进一步,所述步骤2中分离纯化得到果糖的具体步骤为:
(1)将生成含果糖的混合液降温冷却,过滤洗涤得到固体样品,其中滤液和洗涤液回收再利用;
(2)将固体样品放入真空干燥箱中干燥;
(3)加入水溶解干燥后的样品,通入CO2生成沉淀并除去沉淀;
(4)对步骤(3)处理后的溶液进行旋蒸/冻干/结晶,得到固体样品即为高纯度的果糖。
由于产物果糖在本反应体系中溶解度相对较低,会逐渐以白色固体的形式沉淀,而底物以及一些副产物则仍溶解在体系中。降温冷却能够最大程度的获得沉淀,通过过滤的方式分离沉淀,洗涤则能将附着的可溶杂质除去;经过干燥蒸发溶剂以及部分催化剂。此时得到的固体仍含有钙盐,将其用水溶解,溶解度低的钙盐可直接除去;溶解度高的钙盐则通过通入CO2生成CaCO3沉淀除去。此时便得到了高纯度的果糖水溶液,对溶液进行旋蒸/冻干等操作除去溶剂或者通过结晶法使果糖结晶,就能得到高纯度的果糖。操作过程简单,分离得到的果糖纯度较高。
更进一步,所述滤液回收再利用的具体步骤为:
(1)将滤液通过活性炭处理脱色;
(2)通入CO2后生成沉淀,经过盐酸处理,得到的溶液经旋蒸后直接循环再利用。
此过程中过滤后的滤液在经过活性炭脱色处理后能够除去由美拉德反应生成的胡敏素等有色杂质,而残余的钙源、碱性物质以及未反应完全的葡萄糖、未分离的果糖、大量溶剂能够进一步再利用;而通入CO2后生成的沉淀在经过盐酸处理后转化为氯化钙,能够作为钙源再次投入使用。溶剂能够循环利用,钙源、碱性物质作为催化剂也能经过一系列处理,在损失少部分的情况下再次使用。整个循环过程避免了废液排放,安全无毒、绿色环保。
可通过定量核磁方法测量分析反应后的混合液,计算原料转化率和产率。
与现有技术相比本发明具有以下优点:
(1)提高了葡萄糖转化率,果糖转化率和选择性;
(2)能够将果糖从混合溶液中分离提纯,得到高产率、高纯度地果糖产物;
(3)反应体系简单,反应条件温和,可循环利用。
附图说明
图1是本发明产物果糖的13C NMR谱图;
图2是本发明实施例1中反应后混合物13C NMR谱图(图中进行标峰的信号是反应后生成的果糖,通过定量分析,能够得到果糖的产率为77.7%);
图3是本发明实施例1中得到的反应液照片;
图4是本发明实施例1中得到的经洗涤后的产物照片;
图5是本发明实施例1中分离提纯得到的高纯度果糖照片;
图6是本发明实施例1中分离提纯得到的高纯度果糖13C NMR谱图。
具体实施方式
实施例1
一种利用葡萄糖制备果糖的方法,基于氯化钙和三乙胺催化葡萄糖异构化,将葡萄糖、氯化钙、三乙胺于甲醇中混合,加热进行异构化反应,生成含果糖的混合液,分离纯化得到果糖,其中滤液等部分回收再利用,包括以下步骤:
步骤1,将葡萄糖、氯化钙和三乙胺以1:2:1的摩尔比混合,加入甲醇溶解,得到混合溶液,其中葡萄糖的浓度为200mg/mL;
步骤2,将步骤1得到的混合溶液装入反应容器,然后置于温度为65℃的环境中进行异构化反应,反应过程中不停搅拌,反应时间为1.5h。
步骤3,在异构化反应结束之后,生成含果糖的混合液,分离纯化得到果糖,具体步骤为:
(1)将装有含果糖的混合液的反应容器置于冰水中降温冷却;之后过滤反应液,洗涤得到的固体样品;
(2)将固体样品放入真空干燥箱中干燥;
(3)加入水溶解干燥后的样品,向该水溶液中通入CO2直至无沉淀生成,过滤除去沉淀;
(4)将得到的果糖水溶液进行旋蒸,得到固体样品即为高纯度的果糖。
其中反应液过滤后得到的滤液可循环利用,具体步骤为:通过活性炭吸附进行脱色处理,通入CO2生成沉淀,经过盐酸处理,得到氯化钙溶液,这两部分溶液可直接再次循环利。
实施例2
一种利用葡萄糖制备果糖的方法,包括以下步骤:
步骤1,将葡萄糖、硝酸钙和乙二胺以1:0.1:1的摩尔比混合,加入乙醇溶解,得到混合溶液,其中葡萄糖的浓度为100mg/mL;
步骤2,将步骤1得到的混合溶液装入反应容器,然后置于温度为80℃的环境中进行异构化反应,反应过程中不停搅拌,反应时间为3h。
步骤3,在异构化反应结束之后,生成含果糖的混合液,分离纯化得到果糖,具体步骤为:
(1)将装有含果糖的混合液的反应容器置于冰水中降温冷却;之后过滤反应液,洗涤得到的固体样品;
(2)将固体样品放入真空干燥箱中干燥;
(3)加入水溶解干燥后的样品,向该水溶液中通入CO2直至无沉淀生成,过滤除去沉淀;
(4)将得到的果糖水溶液进行旋蒸,得到固体样品即为高纯度的果糖。
其中反应液过滤后得到的滤液可循环利用,具体步骤为:通过活性炭吸附进行脱色处理,通入CO2生成沉淀,经过盐酸处理,得到氯化钙溶液,这两部分溶液可直接再次循环利。
实施例3
一种利用葡萄糖制备果的方法,包括以下步骤:
步骤1,将葡萄糖、氯化钙和三乙胺以1:20:1的摩尔比混合,加入γ-丁内酯溶解,得到混合溶液,其中葡萄糖的浓度为2mg/mL;
步骤2,将步骤1得到的混合溶液装入反应容器,然后置于温度为200℃的环境中进行异构化反应,反应过程中不停搅拌,反应时间为6h。
步骤3,在异构化反应结束之后,生成含果糖的混合液,分离纯化得到果糖,具体步骤为:
(1)将装有含果糖的混合液的反应容器置于冰水中降温冷却;之后过滤反应液,洗涤得到的固体样品;
(2)将固体样品放入真空干燥箱中干燥;
(3)加入水溶解干燥后的样品,向该水溶液中通入CO2直至无沉淀生成,过滤除去沉淀;
(4)将得到的果糖水溶液进行旋蒸,得到固体样品即为高纯度的果糖。
其中反应液过滤后得到的滤液可循环利用,具体步骤为:通过活性炭吸附进行脱色处理,通入CO2生成沉淀,经过盐酸处理,得到氯化钙溶液,这两部分溶液可直接再次循环利。
实施例4
一种利用葡萄糖制备果的方法,包括以下步骤:
步骤1,将葡萄糖、醋酸钙+氯化钠和氢氧化钠以1:1:20的摩尔比混合,加入水溶解,得到混合溶液,其中葡萄糖的浓度为10mg/mL;
步骤2,将步骤1得到的混合溶液装入反应容器,然后置于温度为25℃的环境中进行异构化反应,反应过程中不停搅拌,反应时间为48h。
步骤3,在异构化反应结束之后,生成含果糖的混合液,分离纯化得到果糖,具体步骤为:
(1)将装有含果糖的混合液的反应容器置于冰水中降温冷却;之后过滤反应液,洗涤得到的固体样品;
(2)将固体样品放入真空干燥箱中干燥;
(3)加入水溶解干燥后的样品,向该水溶液中通入CO2直至无沉淀生成,过滤除去沉淀;
(4)将得到的果糖水溶液进行旋蒸,得到固体样品即为高纯度的果糖。
其中反应液过滤后得到的滤液可循环利用,具体步骤为:通过活性炭吸附进行脱色处理,通入CO2生成沉淀,经过盐酸处理,得到氯化钙溶液,这两部分溶液可直接再次循环利。
实施例5
一种利用葡萄糖制备果的方法,包括以下步骤:
步骤1,将葡萄糖、氢氧化钙(同时作为钙源和提供碱性的物质)以1:0.1:0.1的摩尔比混合,加入水溶解,得到混合溶液,其中葡萄糖的浓度为2000mg/mL;
步骤2,将步骤1得到的混合溶液装入反应容器,然后置于温度为100℃的环境中进行异构化反应,反应过程中不停搅拌,反应时间为5min。
步骤3,在异构化反应结束之后,生成含果糖的混合液,分离纯化得到果糖,具体步骤为:
(1)将装有含果糖的混合液的反应容器置于冰水中降温冷却;之后过滤反应液,洗涤得到的固体样品;
(2)将固体样品放入真空干燥箱中干燥;
(3)加入水溶解干燥后的样品,向该水溶液中通入CO2直至无沉淀生成,过滤除去沉淀;
(4)将得到的果糖水溶液进行旋蒸,得到固体样品即为高纯度的的果糖。
其中反应液过滤后得到的滤液可循环利用,具体步骤为:通过活性炭吸附进行脱色处理,通入CO2生成沉淀,经过盐酸处理,得到氯化钙溶液,这两部分溶液可直接再次循环利。
实施例6
一种利用葡萄糖制备果的方法,包括以下步骤:
步骤1,将葡萄糖、氯化钙和吡啶以1:1:0.1的摩尔比混合,加入水和γ-丁内酯的混合溶剂溶解,得到混合溶液,其中葡萄糖的浓度为50mg/mL;
步骤2,将步骤1得到的混合溶液装入反应容器,然后置于温度为150℃的环境中进行异构化反应,反应过程中不停搅拌,反应时间为12h。
步骤3,在异构化反应结束之后,生成含果糖的混合液,分离纯化得到果糖,具体步骤为:
(1)将装有含果糖的混合液的反应容器置于冰水中降温冷却;之后过滤反应液,洗涤得到的固体样品;
(2)将固体样品放入真空干燥箱中干燥;
(3)加入水溶解干燥后的样品,向该水溶液中通入CO2直至无沉淀生成,过滤除去沉淀;
(4)将得到的果糖水溶液进行旋蒸,得到固体样品即为高纯度的果糖。
其中反应液过滤后得到的滤液可循环利用,具体步骤为:通过活性炭吸附进行脱色处理,通入CO2生成沉淀,经过盐酸处理,得到氯化钙溶液,这两部分溶液可直接再次循环利。
实施例1-6的葡萄糖转化率及果糖产率、选择性的结果如表1所示。
表1实施例1-6的葡萄糖转化率及果糖产率、选择性的结果
(例表示实施例;C为conversion,表示葡萄糖转化率;YFru表示果糖产率;SFru表示果糖选择性;比例为葡萄糖:钙源:提供碱性的物质(摩尔比);浓度为葡萄糖浓度)。
使用其它催化剂催化葡萄糖异构化制备果糖的参考数据如表2所示。
表2使用其它催化剂催化葡萄糖异构化制备果糖的参考数据
(C为conversion,表示葡萄糖转化率;YFru表示果糖产率;SFru表示果糖选择性;-表示数据缺失,但为最有产率下的反应条件)
通过表1、表2对比可知,本发明使用的基于钙源在碱性条件下催化葡萄糖异构化反应的葡萄糖转化率及果糖产率、选择性更高。并且通过图4-6可以得出本发明能够将产物果糖直接分离提纯,得到高纯度的果糖。
Claims (9)
1.一种利用葡萄糖制备果糖的方法,其特征在于,基于钙源在碱性条件下催化葡萄糖异构化,包括以下步骤:
步骤1,将葡萄糖、钙源、提供碱性的化合物于溶剂中混合,得到混合溶液;
步骤2,对步骤1得到的混合溶液加热,进行异构化反应,生成含果糖的混合液,分离纯化得到果糖。
2.根据权利要求1所述的一种利用葡萄糖制备果糖的方法,其特征在于,所述步骤1中钙源为氯化钙、硝酸钙、醋酸钙、氢氧化钙、磷酸钙、磷酸氢钙、磷酸二氢钙、硫酸钙、碳酸钙中的一种或与氯化钠、氯化钾的混合物。
3.根据权利要求1所述的一种利用葡萄糖制备果糖的方法,其特征在于,所述步骤1中提供碱性的化合物为有机碱或无机碱。
4.根据权利要求1所述的一种利用葡萄糖制备果糖的方法,其特征在于,所述步骤1中溶剂为水、甲醇、乙醇、异丙醇、γ-丁内酯中的一种或几种按任意比混合的混合溶剂。
5.根据权利要求1所述的一种利用葡萄糖制备果糖的方法,其特征在于,所述步骤1中混合溶液中葡萄糖的质量浓度为2~2000mg/mL。
6.根据权利要求1所述的一种利用葡萄糖制备果糖的方法,其特征在于,所述步骤1中葡萄糖、钙源中钙离子和提供碱性的化合物的摩尔比为1:0.1~20:0.1~20。
7.根据权利要求1所述的一种利用葡萄糖制备果糖的方法,其特征在于,所述步骤2中加热的温度为25~200℃,异构化反应的时间为5min~48h。
8.根据权利要求1所述的一种利用葡萄糖制备果糖的方法,其特征在于,所述步骤2中分离纯化得到果糖的具体步骤为:
(1)将生成含果糖的混合液降温冷却,过滤洗涤得到固体样品,其中滤液和洗涤液回收再利用;
(2)将固体样品放入真空干燥箱中干燥;
(3)加入水溶解干燥后的样品,通入CO2生成沉淀并除去沉淀;
(4)对步骤(3)处理后的溶液进行旋蒸/冻干/结晶,得到固体样品即为高纯度的果糖。
9.根据权利要求8所述的一种利用葡萄糖制备果糖的方法,其特征在于,所述滤液回收再利用的具体步骤为:
(1)将滤液通过活性炭处理脱色;
(2)通入CO2生成沉淀,经过盐酸处理,得到的溶液经旋蒸后直接循环再利用。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202211560027.7A CN115746064A (zh) | 2022-12-07 | 2022-12-07 | 一种利用葡萄糖制备果糖的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202211560027.7A CN115746064A (zh) | 2022-12-07 | 2022-12-07 | 一种利用葡萄糖制备果糖的方法 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN115746064A true CN115746064A (zh) | 2023-03-07 |
Family
ID=85344743
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN202211560027.7A Pending CN115746064A (zh) | 2022-12-07 | 2022-12-07 | 一种利用葡萄糖制备果糖的方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN115746064A (zh) |
-
2022
- 2022-12-07 CN CN202211560027.7A patent/CN115746064A/zh active Pending
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
EP2370586B1 (en) | Process for the preparation of a monovalent succinate salt | |
CN104450806A (zh) | 一种酶法制备葡萄糖酸钠的方法 | |
CN112522339B (zh) | 一种利用几丁质降解n-乙酰-d-氨基葡萄糖制备3-乙酰氨基-5-乙酰基呋喃的方法 | |
CN115947486A (zh) | 一种脱硫废液资源化处理工艺及系统 | |
EP0001070B1 (en) | Process for producing pyruvic acid | |
US4355158A (en) | Process for the preparation of riboflavin | |
CN1372537A (zh) | 回收有机酸的方法 | |
CN112724009B (zh) | 一种以顺酐废水生产富马酸的方法 | |
CN115746064A (zh) | 一种利用葡萄糖制备果糖的方法 | |
CN1958559A (zh) | 一种流动床合成氨基乙酸的环保清洁工艺方法 | |
JP2003183185A (ja) | カルボン酸のエステルの製造方法 | |
CN114231578A (zh) | 一种双酶法制备阿洛酮糖的方法 | |
US2918492A (en) | Method of preparing methyl 2-ketogluconate | |
KR100261015B1 (ko) | 가압조건 하에서 포도당 산화효소를 이용한 글루콘산 칼슘의 제조방법 | |
WO2006120813A1 (ja) | グルクロン酸及び/又はグルクロノラクトンの製造方法 | |
CN110028532B (zh) | 一种利用葡萄糖异构化制备果糖/甘露糖的方法 | |
CN108946752A (zh) | 一种高效回收利用乳果糖制备体系中的催化剂的方法 | |
CN112679373B (zh) | D,l-丙氨酸的环保清洁生产工艺 | |
SU452103A3 (ru) | Способ получени -дигидрокси -3-4-фенилаланина | |
CN110923276B (zh) | 一种生物酶催化合成天门冬氨酸钙的制备方法 | |
CN113087644B (zh) | 一种制备4-乙酰氨基苯亚磺酸的方法 | |
JP3776160B2 (ja) | D−パントテン酸カルシウムの製造法 | |
RU2269531C1 (ru) | Способ получения тетра-(4-трет.-бутил)-фталоцианина | |
CN117417394A (zh) | 一种5-羟甲基糠醛废水回收利用果糖的方法 | |
JPS5937959B2 (ja) | ブドウ糖濃度向上法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination |