CN115737506B - 一种含有胶原蛋白的面膜及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种含有胶原蛋白的面膜及其制备方法，面膜包括脂质体封装的重组人源III型胶原蛋白，以及改性透明质酸凝胶基底；所述改性透明质酸凝胶基底为经大分子交联剂交联的透明质酸；所述大分子交联剂为含有聚醚嵌段和二硫键的化合物。本发明提供的含有胶原蛋白的面膜为免洗型敷贴式面膜，面膜完全解离后有效成分经皮或在皮肤表面成膜，所有解离后的组分均亲肤无毒，皮肤零负担，使用方便，对皮炎具有良好的疗效。

Description

一种含有胶原蛋白的面膜及其制备方法

技术领域

本发明属于合成生物医学材料技术领域，具体涉及一种含有胶原蛋白的面膜及其制备方法。

技术背景

重组人源III型胶原蛋白是利用基因工程技术以人胶原III型原始基因序列经过优化重组表达得到的，与人体天然胶原氨基酸序列高度一致。已有研究显示健康女性使用重组人源胶原蛋白敷料后皮肤水分增加、皮肤质地改善；也有报道称胶原蛋白敷料对皮炎、痤疮有较好的治疗作用。对于引起皮炎的疾病，多伴有表皮细胞的破坏，皮肤屏障功能受损，皮肤的免疫力下降，胶原蛋白原液含有丰富的胶原和细胞代谢的所需的多种氨基酸，对细胞的生长具有趋化作用，引导上皮细胞移行至缺损区的能力，促进结缔组织修复，促进皮肤新陈代谢，从而恢复皮肤正常的生理功能。但目前市售的用于治疗面部皮炎的胶原蛋白面膜，通常为以蚕丝等为面膜纸的贴敷式面膜，该类面膜一般只能敷15分钟，超过时间面膜液几乎完全干掉，敷的时间越长过敏率越高；而且这种普通的贴敷式使用后必须清洗，否则易发生毛孔堵塞现象，使用中还会出现刺痛、发红、闷痘，在清洗后水干了感觉没做过护理一样；另外胶原蛋白是一个生物大分子，透皮效率较低，皮肤难以吸收，最多起到保湿作用，难以发挥治疗作用。

发明内容

针对现有技术中，用于治疗皮炎贴敷式面膜的不足，本发明提供一种含有胶原蛋白的面膜，该面膜为免洗的敷贴式睡眠面膜，具有长效的保湿性，对皮炎具有良好的疗效。

本发明所述的一种含有胶原蛋白的面膜包括脂质体封装的重组人源III型胶原蛋白，以及改性透明质酸凝胶基底；

进一步的，本发明所述的一种含有胶原蛋白的面膜还包括以下一种或多种的草本提取物：马齿苋提取物、洋甘菊提取物、樱花提取物。

进一步的，本发明所述的一种含有胶原蛋白的面膜还包括以下一种或多种的小分子保湿剂：甘油、丙二醇、丁二醇、山梨醇。

进一步的，本发明所述的一种含有胶原蛋白的面膜还包括以下一种或多种增稠剂：黄原胶、羟乙基纤维素。

进一步的，本发明所述的一种含有胶原蛋白的面膜还包括防腐剂氯苯甘醚、葡聚糖。

所述脂质体封装的重组人源III型胶原蛋白按以下方法制备得到：称取蛋黄卵磷脂和胆固醇，溶于无水乙醇中，于茄形瓶中旋转蒸发，待乙醇完全挥发形成均匀的脂质薄膜，静置冷却；往上述瓶中加入胶原蛋白原液、10%的吐温80（V/V）和蒸馏水的混合溶液；将茄形瓶置于40℃的水浴锅中水化30min，溶液过0.22μm滤嘴，得到脂质体封装的重组人源III型胶原蛋白混悬液。

所述改性透明质酸凝胶具体为经大分子交联剂交联的透明质酸；所述大分子交联剂具有如下分子结构：

式中，m的取值为2~130，n的取值为15~65。

进一步的，所述大分子交联剂按以下方法制备：（1）以2,2'-二硫代二甘醇酸为起始剂，加入MAO（Mg/Al摩尔比3:1)催化剂，反应釜密封后用氮气置换3次，升温至140℃，启动真空泵抽真空，升温至170℃停止抽真空，用氮气将环氧丙烷送入反应釜中，控制反应温度140~180℃，压力<0 .15MPa，反应5小时。降温，出料，得到2,2'-二硫代二甘醇酸聚氧丙烯醚。（2）2,2'-二硫代二甘醇酸聚氧丙烯醚与催化剂甲醇钠在反应釜中混合后，用氮气置换3次，升温至130℃，抽真空，升温至160℃停止抽真空，用氮气将环氧乙烷送入反应釜中，控制反应温度130~170℃，压力<0 .15MPa，反应6小时。降温，出料，得到2,2'-二硫代二甘醇酸聚氧丙烯/聚氧乙烯嵌段共聚物。（3）2,2'-二硫代二甘醇酸聚氧丙烯/聚氧乙烯嵌段共聚物与过量二乙烯三胺在酸性条件下，加入EDC进行酰化反应，反应体系经对水透析2 天、冷冻干燥后得到白色粉末，即为大分子交联剂。

所述改性透明质酸凝胶的制备方法如下：在水溶液中，透明质酸与大分子交联剂在弱酸性条件下，经1-(3-二甲氨基丙基 )-3-乙基碳二亚胺盐酸盐（EDC）与 N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）催化体系催化进行酰胺化反应，反应溶液加入模具中，经真空脱气泡后避光室温反应 24h~48h后脱模、透析，得到改性透明质酸水凝胶。

一种含有胶原蛋白的面膜，按质量百分比计算，包括以下组分：

改性透明质酸凝胶基质，15~25%；

脂质体封装的重组人源III型胶原蛋白，3~5%；

草本提取物3~10%；

保湿剂5~10%；

增稠剂1~5%；。

氯苯甘醚0.5~2%

葡聚糖0.1~1%

余量为水。

一种含有胶原蛋白的面膜的制备方法，包括如下步骤：

混合保湿剂、增稠剂于脂质体封装的重组人源III型胶原蛋白混悬液中，加热至50℃，保温搅拌30min，后加入氯苯甘醚、葡聚糖，继续保温搅拌30min，降温至常温后，加入草本提取物，得到面膜液；

将改性透明质酸水凝胶加入至上述面膜液中进行溶胀，溶胀温度控制在30~40℃，时间为1~3天。

本发明提供的改性透明质酸水凝胶通过特殊的大分子交联剂进行交联，该大分子交联剂含有二硫键，可被其特异性还原剂还原而实现水凝胶的解离（凝胶态转为液态），还原剂包括如半胱氨酸、N-乙酰半胱氨酸、谷胱甘肽等氨基酸，是存在于皮肤角质层中的天然保湿因子，通过皮肤表面与面膜的液体循环交换，可使得靠近皮肤侧的凝胶逐渐降解，由凝胶态转变为液态为皮肤提供有效成分；而远离皮肤侧的凝胶由于还保持交联状态而呈凝胶态，具有优良的锁水能力；由此面膜随着使用时长逐渐变薄，最后有效成分经皮或在皮肤表面成膜，从而起到长效作用而免洗的效果。

同时，大分子交联剂带有具有温度响应性的聚醚链段，在特定的重复单元数量时，该大分子交联剂在35~38℃之间可实现凝胶态转变。该转变温度与皮表温度相近，作为凝胶面膜的相变调节单元，可以避免面膜解离过快导致水分挥发或面膜靠近空气的一侧发生流动。

有益效果：

（1）本发明提供的含有胶原蛋白的面膜能够在皮肤表面实现从凝胶态到液态的转变，从而实现有效物质的释放；靠近空气的面膜呈现凝胶态，对水分及有效物质进行锁定，从而实现长效保湿的作用。

（2）本发明提供的含有胶原蛋白的面膜为免洗型敷贴式面膜，面膜完全解离后有效成分经皮或在皮肤表面成膜，所有解离后的组分均亲肤无毒，皮肤零负担。

（3）该面膜可长效作用于面部皮肤，使用方便，对皮炎具有良好的疗效。

附图说明

图1为大分子交联剂PO-1的¹H-NMR。

图2为HA-1~3改性透明质酸凝胶基质及二乙烯三胺交联透明质酸凝胶基质（制备方法如对比例2）的温度扫描曲线。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明做进一步详细说明，但实施例并不对本发明做任何形式的限定。除非特别说明，本发明采用的试剂、方法和设备为本技术领域常规试剂、方法和设备。

实施例1

脂质体封装的重组人源III型胶原蛋白的制备。

称取100mg蛋黄卵磷脂和20mg胆固醇，溶于5mL无水乙醇中，于茄形瓶中旋转蒸发，待乙醇完全挥发形成均匀的脂质薄膜，静置冷却；往上述瓶中加入1mL胶原蛋白原液、0.5mL1%的吐温80（V/V）和3.5mL蒸馏水的混合溶液；将茄形瓶置于40℃的水浴锅中水化30min，溶液过0.22μm滤嘴，得到脂质体封装的重组人源III型胶原蛋白混悬液。

重组人源III型胶原蛋白原液购于华北生物制药有限公司。

对脂质体的包封率进行测定：取3份5 mL 封装了胶原蛋白的脂质体，分别放入透析袋内，将透析袋放入透析介质（pH7.4 PBS）中透析8 h，取透析液用0.22μm的微孔滤膜过滤后，用BCA法测定其吸光度，并通过标准曲线计算游离药物浓度W_游。另取0.5 mL封装了胶原蛋白的脂质体混悬液置于10 mL容量瓶中加入5 %曲拉通水溶液超声，用流动相定容至10mL，用0.22μm的微孔滤膜过滤后，取续滤液测定其浓度，计算 5 mL 脂质体混悬液中总的药物浓度W_总。

测的包封率为65.8%。

实施例2

制备大分子交联剂。

（1）称取 2,2'-二硫代二甘醇酸和MAO（Mg/Al摩尔比3:1)投入反应釜中，将反应釜密封好，用氮气置换3次。开启搅拌，升温至140℃，启动真空泵抽真空，升温至170℃停止抽真空。打开进料阀，用氮气将储罐内的环氧丙烷送入反应釜中，控制反应温度150~160℃，压力<0 .15MPa，反应5h。降温，出料，得到2,2'-二硫代二甘醇酸聚氧丙烯醚。所述MAO的投料量为环氧丙烷质量的1%。

（2）称取 2,2'-二硫代二甘醇酸聚氧丙烯醚和甲醇钠投入反应釜中，将反应釜密封好，用氮气置换3次。开启搅拌，升温至130℃，启动真空泵抽真空，升温至160℃停止抽真空。打开进料阀，用氮气将储罐内的环氧乙烷送入反应釜中，控制反应温度160~170℃，压力<0 .15MPa，反应6h。降温，出料，得产物2,2'-二硫代二甘醇酸聚氧丙烯/聚氧乙烯环氧乙烷嵌段共聚物。所述甲醇钠的投料量为为环氧乙烷质量的1%。

（3）2,2'-二硫代二甘醇酸聚氧丙烯/聚氧乙烯嵌段共聚物与二乙烯三胺按摩尔比1:15混合并溶于高纯水中，用盐酸调节 pH 值为5，再加入羧基摩尔数 3倍的 EDC，室温反应 48h，反应液在水溶液中透析2d，每12h更换一次介质，最后冷冻干燥后得到白色粉末，即为大分子交联剂。

上述步骤（1）和（2）的投料量及产物分子量列于表1。

表1

分子量Mn¹（2,2'-二硫代二甘醇酸聚氧丙烯醚的数均分子量）和Mn²（2,2'-二硫代二甘醇酸聚氧丙烯/聚氧乙烯环氧乙烷嵌段共聚物的数均分子量）由GPC测的，测试条件：Waters 515-2414型凝胶渗透色谱仪，流动相为氯仿，流速为 1 mL/min，检测器温度为35℃，柱温为 40℃，标样为窄分布的聚苯乙烯（PS）。

对大分子交联剂进行核磁氢谱检测，PO-1的¹H-NMR参阅附图1。

实施例3

将实施例2制备的大分子交联剂进行温度响应性测试。

胶凝温度的测定：将实施例2制得的大分子交联剂单独或按一定比例混合溶于水中，形成一定质量浓度的凝胶溶液，置于4℃的水中保温溶解/溶胀48h，然后将装有凝胶的烧杯，放入装有冰块的水浴锅中，以0.5℃·min^-1 升高温度，时刻观察凝胶的流动状态，至倾斜时凝胶完全不流动的状态为胶凝温度。

组分及凝胶温度结果列于表2。

表2

组别	PO-1,%	PO-2,%	PO-3,%	凝胶温度，℃
					1	-	-	18	38.4
2	-	-	20	35.6
					3	-	-	22	33.7
4	-	2	20	36.4
					5	-	4	20	37.7
6	2	-	20	36.0
					7	2	2	20	36.8

实施例4

改性透明质酸凝胶的制备。

将透明质酸溶于高纯水中，配制成质量浓度为 4% 的透明质酸溶液；往溶液中加入透明质酸质量 40%大分子交联剂搅拌溶解后，用盐酸溶液调节 pH 值为4 ；往溶液中继续加入计量比的EDC和NHS，搅拌均匀后将溶液加入模具中，经真空脱气泡后避光室温反应48 h后脱模，得到的凝胶置于高纯水中浸泡24h，每6h更换一次介质，最后得到改性透明质酸凝胶。

EDC与NHS的摩尔比为1:1；

EDC 与大分子交联剂的摩尔比为 5:1；

透明质酸的分子量为10-20万，购于上海麦克林生化科技股份有限公司。

改性透明质酸凝胶基质的投料比例及编号列于表3。

表3

实施例5

对实施例4制备的改性透明质酸凝胶的性质进行测试。

（1）粘弹性测试（流变）

流变测试是将制备好的圆形片状凝胶在应力控制型 AR-G2（TA）流变仪上进行，所用夹具为 40 mm 的平板夹具，测试温度使用 Peltier 控温台进行控制。固定好凝胶后在夹具边缘周围涂覆上硅油，以防止测试过程中凝胶水分挥发。

HA-1~3改性透明质酸凝胶基质及二乙烯三胺交联透明质酸凝胶基质（制备方法如对比例2）的温度扫描曲线参阅附图2。

在使用温度范围内，凝胶均表现为弹性态（G’＞G”），且相比于二乙烯三胺交联透明质酸凝胶基质，HA1~3随着温度升高，模量变化较少，这是由于聚醚链段的反向热凝胶效应导致的。

（2）降解速率

称取一定质量的干凝胶置于25℃的装有pH=7.4的PBS溶液的离心管中充分溶胀，置于36±0.1℃的恒温振荡器，加入干凝胶质量1%的谷胱甘肽，开始计时，每间隔2min观察凝胶是否完全溶解，至明显观察不到固态凝胶为计时结束。

HA-1~3改性透明质酸凝胶的降解速度分别为：22min、16min、14min。

实施例6

一种含有胶原蛋白的面膜，按质量分数计算，包括以下组分：

改性透明质酸凝胶基质HA-3 15%；脂质体封装的重组人源III型胶原蛋白3%；马齿苋提取物2%；洋甘菊提取物1%；樱花提取物1%；甘油5%；丙二醇2%；羟乙基纤维素5%；氯苯甘醚2%；葡聚糖0.6%；余量为水。

草本提取物均购于兰州沃特莱斯生物科技有限公司。

羟乙基纤维素购于上海麦克林生化科技股份有限公司，3400～5000 mpa.s,25℃。

实施例7

一种含有胶原蛋白的面膜，按质量分数计算，包括以下组分：

改性透明质酸凝胶基质HA-3 20%；脂质体封装的重组人源III型胶原蛋白5%；马齿苋提取物2%；洋甘菊提取物1%；樱花提取物1%；甘油3%；丙二醇2%；羟乙基纤维素4%；氯苯甘醚2%；葡聚糖0.6%；余量为水。

实施例8

一种含有胶原蛋白的面膜，按质量分数计算，包括以下组分：

改性透明质酸凝胶基质HA-3 25%；脂质体封装的重组人源III型胶原蛋白5%；马齿苋提取物2%；洋甘菊提取物1%；樱花提取物1%；甘油3%；丙二醇2%；羟乙基纤维素2%；氯苯甘醚2%；葡聚糖0.6%；余量为水。

对比例1

一种含有胶原蛋白的面膜，按质量分数计算，包括以下组分：

二乙烯三胺交联透明质酸凝胶基质20%；脂质体封装的重组人源III型胶原蛋白5%；马齿苋提取物2%；洋甘菊提取物1%；樱花提取物1%；甘油3%；丙二醇2%；羟乙基纤维素4%；氯苯甘醚2%；葡聚糖0.6%；余量为水。

所述二乙烯三胺交联透明质酸制备方法：将透明质酸溶于高纯水中，配制成质量浓度为 4% 的透明质酸溶液；往溶液中加入透明质酸质量 2%的二乙烯三胺搅拌溶解后，用盐酸溶液调节 pH 值为5；往溶液中继续加入计量比的EDC和NHS，搅拌均匀后将溶液加入模具中，经真空脱气泡后避光室温反应 48 h后脱模，得到的凝胶置于高纯水中浸泡24h，每6h更换一次介质，最后得到改性透明质酸凝胶。EDC与NHS的摩尔比为1:1；EDC 与二乙烯三胺的摩尔比为 1:1。

对比例2

一种含有胶原蛋白的面膜，由蚕丝面膜纸浸泡以下面膜液制备而成，按质量百分比计算，所述面膜液组分包括：透明质酸20%；脂质体封装的重组人源III型胶原蛋白5%；马齿苋提取物2%；洋甘菊提取物1%；樱花提取物1%；甘油3%；丙二醇2%；羟乙基纤维素4%；氯苯甘醚2%；葡聚糖0.6%；余量为水。

实施例9

对实施例6~8进行抑菌活性测试：以大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、痤疮丙酸杆菌为测试菌种，菌液为用PBS缓冲溶液分别稀释到1.4×10⁴CFU/mL。取等量凝胶面膜加入到75mL细菌溶液中，于恒温振荡器中振荡接触12h，然后取出适量菌液涂板培养，根据生长的菌落个数计算菌液浓度并计算抑菌率，抑菌率计算公式如下：

其中W_t是空白对照组菌液的浓度；Q_t是样品与菌液接触之后菌液的浓度。

表4

抑菌率，%	实施例6	实施例7	实施例8
				大肠杆菌	89.2	90.5	91.7
金黄色葡萄球菌	77.6	77.9	76.3
				痤疮丙酸杆菌	69.4	68.5	69.8

实施例10

保湿性能测试：受测试者在恒温恒湿室内静坐30 min，取手臂内侧部位的皮肤(4cm×4 cm)，使用SOFT5.5皮肤性质检测仪，测试未敷被测试的样品的皮肤的水分并记作T₀；贴服实施例6~8和对比例1~2的面膜（用纱布进行固定），贴服30 min、1h、2h、4h、8h，取下面膜或采用润湿的棉柔巾擦净，等待30 min让样品在皮肤上自然晾干，测试皮肤水分T_n，皮肤水分结果如表5所示。

表5

贴服时间	实施例6	实施例7	实施例8	对比例1	对比例2
						0	45.23	46.08	45.58	45.69	45.14
30min	79.54	78.53	80.22	76.64	73.66
						1h	88.04	88.62	88.57	78.33	68.56
2h	84.15	87.34	90.97	74.67	60.53
						4h	88.39	93.45	94.54	60.33	55.42
8h	92.97	96.37	95.60	55.09	55.08

对实施例7和对比例1敷贴8h后皮肤水分流失率进行测试，水分流失率=（T_n-T₀）/T₀×100%，结果列于表6。

表6

静止时间	实施例7	对比例1
			30min	96.33	85.65
1h	89.54	80.51
			2h	86.22	78.17
4h	80.58	69.65

实施例11

对实施例7和对比例1~2进行皮肤刺激性实验：按GB/T16886.10-2005 6.4人体皮肤刺激试验规定的方法进行检测，志愿者人数为每组30人（年龄为20~30岁，男女各半），测试时间为30min、2h、24h、48h、72h，敷贴位置选择上臂侧面，敷贴面积为4×4cm，采用纱布对面膜位置固定，对志愿者敷贴面膜后皮肤状态进行评分，平均分结果列于表7。

表7

平均分	实施例7	对比例1	对比例2
				30min	0	0	0
2h	0	0	0.07
				24h	0.03	0.07	0.17
48h	0.1	0.07	0.27
				72h	0.1	0.17	0.33

个人评分标准：

0分-无反应

1分-轻微红斑和（或）接触区大面积干燥

2分-明显红斑或干燥，可能超出接触区

3分-重度及扩散性红斑伴水肿和（或）焦痂形成

实施例12

对实施例6~8和对比例1进行消炎作用测试：

试验对象：180名皮肤过敏受试者，年龄为18-60岁之间，随机分成6组(每组30名受试者)。

治疗方法：晚上敷贴实施例6~8和对比例1~2制备的面膜，敷贴时间为8h，涂抹前清洁皮肤过敏区。使用1天后第一次复诊，连续使用3天后第二次复诊，连续使用7天后第三次复诊。

测试结果列于表8。

表8

判断标准：

(1)显效：皮肤红肿、瘙痒、皮损等过敏现象消失。

(2)有效：皮肤红肿、瘙痒、皮损等过敏现象减轻。

(3)无效：皮肤红肿、瘙痒、皮损等过敏现象无明显变化。

(4)加重：皮肤红肿、瘙痒、皮损等过敏现象恶化。

实施例13

体外透皮渗透量测定：首先采用BCA法建立胶原蛋白含量标准曲线（PBS pH7.4）。采用TPY-2透皮扩散仪进行测试，实验材料为完整的大鼠离体皮肤，接收液为PBS pH7.4，温度为36±0.5℃，转速为300rpm。

具体做法：将实施例7制备的凝胶面膜敷贴在完整的大鼠皮肤上并排除气泡，接触面积为2×2cm，于预设时间点（2、4、6、8、12h）取出0.5mL接收液待测，并补充同体积接收液。取出的样品采用BCA法测定其吸光度，扣除空白脂质体的吸光度后，根据标准曲线方程计算胶原蛋白浓度，并计算累积透皮渗透量。

累积透皮渗透量（μg）=

式中，Cn为第n次取样时胶原蛋白的浓度，V为接收池体积，Ci为第i次取样时胶原蛋白的浓度，Vi为取样体积。

结果列于表9。

表9

时间，h	2	4	6	8	12
						累积透皮渗透量（μg）	3.67	9.69	17.31	26.02	54.66

上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。

Claims (7)

1.一种含有胶原蛋白的面膜，其特征在于，所述面膜包括凝胶基底和脂质体封装的重组人源III型胶原蛋白；所述凝胶基底为改性透明质酸凝胶基底；所述改性透明质酸凝胶基底系由透明质酸与大分子交联剂进行酰胺化反应制备得到；所述大分子交联剂具有如下分子结构：

式中，m的取值为2~130，n的取值为15~65；

所述大分子交联剂按以下方法制备：

以2,2'-二硫代二甘醇酸为起始剂，加入MAO（Mg/Al摩尔比3:1)催化剂，反应釜密封后用氮气置换3次，升温至140℃，启动真空泵抽真空，升温至170℃停止抽真空，用氮气将环氧丙烷送入反应釜中，控制反应温度140~180℃，压力<0 .15MPa，反应5小时；降温，出料，得到2,2'-二硫代二甘醇酸聚氧丙烯醚；

2,2'-二硫代二甘醇酸聚氧丙烯醚与催化剂甲醇钠在反应釜中混合后，用氮气置换3次，升温至130℃，抽真空，升温至160℃停止抽真空，用氮气将环氧乙烷送入反应釜中，控制反应温度130~170℃，压力<0 .15MPa，反应6小时；降温，出料，得到2,2'-二硫代二甘醇酸聚氧丙烯/聚氧乙烯嵌段共聚物；

2,2'-二硫代二甘醇酸聚氧丙烯/聚氧乙烯嵌段共聚物与过量二乙烯三胺在酸性条件下，加入EDC进行酰化反应，反应体系经对水透析2 天、冷冻干燥后得到白色粉末，即为大分子交联剂；

所述改性透明质酸凝胶的制备方法如下：在水溶液中，透明质酸与大分子交联剂在弱酸性条件下，经1-(3-二甲氨基丙基 )-3-乙基碳二亚胺盐酸盐（EDC）与 N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）催化体系催化进行酰胺化反应，反应溶液加入模具中，经真空脱气泡后避光室温反应24h~48h后脱模、透析，得到改性透明质酸水凝胶；

所述脂质体封装的重组人源III型胶原蛋白，具体制备方法如下：称取蛋黄卵磷脂和胆固醇，溶于无水乙醇中，于茄形瓶中旋转蒸发，待乙醇完全挥发形成均匀的脂质薄膜，静置冷却；往上述瓶中加入胶原蛋白原液、10%的吐温80（V/V）和蒸馏水的混合溶液；将茄形瓶置于40℃的水浴锅中水化30min，溶液过0.22μm滤嘴，得到脂质体封装的重组人源III型胶原蛋白混悬液。

2.根据权利要求1所述的一种含有胶原蛋白的面膜，其特征在于，所述面膜还包括以下一种或多种的草本提取物：马齿苋提取物、洋甘菊提取物、樱花提取物。

3.根据权利要求1所述的一种含有胶原蛋白的面膜，其特征在于，所述面膜还包括以下一种或多种的小分子保湿剂：甘油、丙二醇、丁二醇、山梨醇。

4.根据权利要求1所述的一种含有胶原蛋白的面膜，其特征在于，所述面膜包括以下一种或多种增稠剂：黄原胶、羟乙基纤维素。

5.根据权利要求1所述的一种含有胶原蛋白的面膜，其特征在于，所述面膜还包括防腐剂氯苯甘醚、葡聚糖。

6.根据权利要求1~5任一项所述的的一种含有胶原蛋白的面膜，其特征在于，所述面膜，按质量百分比计算，包括以下组分：

改性透明质酸凝胶基质，15~25%；

脂质体封装的重组人源III型胶原蛋白，3~5%；

草本提取物3~10%；

保湿剂5~10%；

增稠剂1~5%；

氯苯甘醚0.5~2%

葡聚糖0.1~1%

余量为水。

7.根据权利要求6所述的的一种含有胶原蛋白的面膜的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：混合保湿剂、增稠剂于脂质体封装的重组人源III型胶原蛋白混悬液中，加热至50℃，保温搅拌30min，后加入氯苯甘醚、葡聚糖，继续保温搅拌30min，降温至常温后，加入草本提取物，得到面膜液；

将改性透明质酸水凝胶加入至上述面膜液中进行溶胀，溶胀温度控制在30~40℃，时间为1~3天。