CN115671196A - 一种可促进皮肤再生的修复乳液及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种可促进皮肤再生的修复乳液及其制备方法，该修复乳液包括重组类人胶原蛋白基质9‑15份、植物源性活性细胞外囊泡提取物2‑10份，乳化剂13‑27份、皮肤调理剂12‑23份、保湿剂6‑10份、化妆品基质15‑60份。采用本发明制得的修复乳液，通过添加常绿多肉质类草本植物，如仙人掌、芦荟等植物来源的活性细胞外囊泡为有效成分，通过涂敷、喷洒等途径，活性细胞外囊泡等有效成分有效参与组织再生生物过程，包括细胞间通讯和防御反应，负责多种生理和病理功能，其具有帮助伤口愈合和促进皮肤修复再生的功能，并且有效减少创面与敷料黏连，避免新生肉芽组织的再次机械性损伤，湿性环境下伤口愈合速度快、疼痛轻、瘢痕形成少。

Description

一种可促进皮肤再生的修复乳液及其制备方法

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，公开了一种可促进皮肤再生的修复乳液及其制备方法。

技术背景

随着生活水平的提高，人们越来越重视形象和追求美丽。整形及医美技术的发展促进了人们对身体形貌，面部、皮肤等的颜值的改善。医美，即医疗美容，它是通过使用药物试剂、手术治疗、专业仪器等方式，来修复皮肤或重塑面部或者其他部位。近年来，轻医美项目为广大女性消费者追捧的热点。轻医美在临床上可分为光电美容、微整形、微针这三大类，其中常见的项目有光子嫩肤、肉毒素瘦脸除皱、玻尿酸填充、水光针等。光电美容包括光子嫩肤、射频、激光等。光子嫩肤利用脉冲光刺激皮肤，临床上一般可用于淡斑、治疗红血丝和毛孔等。射频通过产生热刺激，可促进脂肪分解，达到消脂塑形、紧致皮肤的效果。热玛吉、超声刀通过光电射频，刺激皮肤胶原蛋白，可达到减皱、紧致皮肤的作用。微整形主要是指注射美容治疗，常用的注射材料或药物有肉毒素、玻尿酸、胶原蛋白等，微整形项目主要用于抗衰、祛皱纹、美白、提升塑型。微针项目则是利用实心微针，直接在皮肤屏障上形成通道，通过通道给药，或者是将药品投在微针上，使其在皮肤渗透吸收。

相较于传统医美手术治疗项目，轻医美具有创伤小、恢复快、疼痛轻等优点。但是做完轻医美项目后，如果术后早期的皮肤修复和护理不当，则会极大地影响手术效果，甚至会适得其反，形成疤痕、斑点、皱纹等。目前轻医美项目后，伤口处理方式通常采用酒精、碘伏消毒和纱布包扎等，利用的是传统干性愈合理论，即认为伤口愈合需要干燥环境和氧气，但干性愈合环境易使伤口脱水，不利于上皮细胞爬行，而且使生物活性物质丢失，造成愈合速度减缓。

基于此，本发明提出一种基于湿性环境愈合理论的可促进皮肤再生的修复乳液，其有效成分为植物来源的活性细胞囊泡，它们是来源于植物细胞的膜结构，参与了不同的生物过程，包括细胞间通讯和防御反应，负责多种生理和病理功能，具有帮助伤口愈合和促进皮肤修复再生的功能。

发明内容

基于上述不足，本发明公开了一种可促进皮肤再生的修复乳液，是通过如下技术手段实现的：

一种可促进皮肤再生的修复乳液，包括：

重组类人胶原蛋白基质9-15份，仙人掌活性细胞外囊泡提取物1-5份，芦荟活性细胞外囊泡提取物1-5份，乳化剂13-27份，皮肤调理剂12-23份，保湿剂6-10份，化妆品基质15-60份。

进一步的，所述乳化剂采用挥发油类、黄酮、西葫芦籽油、檀香油中的一种或者多种提取制造而成。

进一步的，所述皮肤调理剂采用黄酮及其苷类、三萜烯皂甙中的一种或者多种调和制造而成。

进一步的，所述保湿剂采用烃类油脂制作而成。

本发明还公开了一种上述任一可促进皮肤再生的修复乳液的制备方法，包括以下步骤：

(1)植物源性活性细胞外囊泡制备；

(2)材料准备：称取重组类人胶原蛋白基质9-15份，仙人掌活性细胞外囊泡提取物1-5份，芦荟活性细胞外囊泡提取物1-5份，化妆品基质15-60份。然后准备好搅拌器、计时器和经过杀菌后的存放瓶；将称取的材料依次加入到搅拌器中，以300-500r/min的转速搅拌20-40min后，制得基液A；

(3)乳化剂添加：称取乳化剂13-27份，加入到基液A中，以300-500r/min的转速搅拌20-40min后，制得基液B；

(4)皮肤调理剂添加：称取皮肤调理剂12-23份，加入到基液B中，以300-400r/min的转速搅拌30-45min后，制得基液C；

(5)保湿剂添加：称取保湿剂6-10份，加入到基液C中，以200-300r/min的转速搅拌30-45min后，制得成品D；

(6)装瓶存放：将成品D注入到经过杀菌后的存放瓶中，经过密封处理后，存放于阴凉干燥处，制得一种可促进皮肤再生的修复乳液。

进一步的，步骤(1)所述由如下方法制得：

①制样：将健康常绿多肉质类草本植物，如仙人掌、芦荟等采取得茎、叶、球样品浸入渗透缓冲液中，依次通过低速物理榨汁、离心滤汁两个工艺，收集离心后沉淀下层的植物物质混合液，为含有细胞外基质混合液。

②离心提纯：将细胞外基质提取混合液体用低速离心(<18000×g)30-120min，去除混合液体中的死细胞、细胞碎片和大颗粒；随后用高速离心(>80000×g)60-120min用于沉淀纳米尺寸的活性细胞外囊泡。重复高速离心1-2轮后，用蔗糖或碘克沙醇介质混合萃取精炼活性细胞外囊，随后用0.30-0.60μm孔径的过滤膜过滤，得到纳米尺寸的活性细胞外囊泡(50-600nm)。

③表征：植物来源的细胞外囊泡的活性(生物功能)由其形状、尺寸和表面电荷决定。经步骤②得到的活性细胞外囊泡尺寸分布在50-600nm之间，为具有脂质双层的球形或扁球状颗粒，一般情况下，囊泡都具有负表面电荷，活性细胞外囊泡主要由脂质、蛋白质、RNA和其他代谢物组成。细胞外囊泡材料学表征可用动态光散射仪(dynamic lightscattering，DLS)、纳米粒子示踪分析(nanoparticle tracking analysis，NTA)和透射电子显微镜(electron microscopy，TEM)(TEM)进行检测。

本发明还公开了一种根据上述任一制备方法制得的可促进皮肤再生的修复乳液。

本发明的有益效果在于：

1、本发明提出一种基于湿性环境愈合理论的可促进皮肤再生的修复乳液，理论指出湿性环境有利于坏死组织和纤维蛋白的溶解，促进毛细血管形成和多种生长因子释放，能有效减少创面与敷料黏连，避免新生肉芽组织的再次机械性损伤，湿性环境下伤口愈合速度快、疼痛轻、瘢痕形成少。

2、本发明提出的促进湿性环境愈合的皮肤再生的修复乳液，其有效成分为活性细胞囊泡，它们是来源于植物细胞的膜结构，可参与不同的生物过程，包括细胞间通讯和防御反应，负责多种生理和病理功能，其具有帮助伤口愈合和促进皮肤修复再生的功能。

3、本发明技术方案利用重组类人胶原蛋白基质材料，通过添加常绿多肉质类草本植物，如仙人掌、芦荟等植物来源的活性细胞外囊泡为有效成分，基于湿性环境愈合理论，通过涂敷、喷洒等途径，活性细胞外囊泡等有效成分有效参与组织再生生物过程，以达到帮助伤口愈合和促进皮肤修复再生的功能。

附图说明

图1为本发明工艺制作流程图。

具体实施方式

为了使本发明要解决的技术问题、技术方案及有益效果更加清楚明白，以下结合实施例与附图，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。

实施例1

一种可促进皮肤再生的修复乳液的制备方法，包括：

(1)制备植物源性活性细胞外囊泡混合液。称重测量好需要使用常绿多肉质类草本植物原材料，以及各种用于提取、分离、萃取的溶液，然后准备好搅拌器、计时器和经过杀菌后的存放瓶，具体制备步骤如下：

①制样：将健康多肉质类草本植物仙人掌3kg茎、叶、球样品浸入到4.5升柠檬酸-柠檬酸钠渗透缓冲液(0.1mol/L)中，经过24h浸泡渗透，采用低速物理榨汁，螺旋杆以每min80转的低速旋转，对仙人掌进行挤压、研磨，果汁透过滤网流出，果渣从排渣口排出，得到细胞外基质提取混合液体，沉淀48h，收集下层植物混合液。

②离心提纯：将细胞外基质提取混合液体用低速离心工艺(<10000×g)60min，采用304不锈钢200目-300目过滤膜依次过滤去除混合液体中的死细胞、细胞碎片和大颗粒；随后用高速离心(120000×g)60min，重复高速离心2次后，用碘克沙醇介质混合萃取精炼活性细胞外囊，随后用0.60μm孔径的过滤膜过滤，获得纳米尺寸的活性细胞外囊泡(～600nm)。用动态光散射仪(dynamic light scattering，DLS)、纳米粒子示踪分析(nanoparticle tracking analysis，NTA)和透射电子显微镜(electron microscopy，TEM)(TEM)进行检测表征，确认活性细胞外囊泡尺寸分布在50-600nm之间，具有脂质双层的球形或扁球状颗粒，观察可见明显的活性细胞外囊泡主要部件包括：脂质、蛋白质、RNA和其他代谢物组成。

(3)称重测量好需要使用的原材料：重组类人胶原蛋白基质10份、仙人掌活性细胞外囊泡提取物5份，化妆品基质45份。将称取的材料依次加入到搅拌器中，以300r/min的转速搅拌30min后，制得基液A；

(4)乳化剂添加：称取乳化剂15份，加入基液A中，以300r/min的转速搅拌30min后，制得基液B；

(5)皮肤调理剂添加：称取皮肤调理剂15份，加入基液B中，以300r/min的转速搅拌30min后，制得基液C；

(6)保湿剂添加：称取保湿剂10份，加入基液C中，以200r/min的转速搅拌30min后，制得成品D；

(7)装瓶存放：将成品D注入到经过杀菌后规格为150ml的存放瓶中，经过密封处理后，存放于阴凉干燥处，制得一种可促进皮肤再生的修复乳液。

由于本实施例选用仙人掌茎、叶、球作为植物源性细胞外囊泡原料，其提取的仙人掌细胞外囊泡活性物质，富含蒽醌甙或蒽的衍生物，能有效吸收紫外线，在应用中可防止皮肤红、褐斑产生。

实施例2

一种可促进皮肤再生的修复乳液的制备方法，包括：

选用芦荟茎叶作为植物源性活性细胞外囊泡原料。按照实施例1的方法，依次经过植物源性活性细胞外囊泡混合液制备、离心提纯及成分表征，再以附图1中的各种功能基液配置步骤，依次配置好A、B、C、D基液，其余参数选择及制备过程与实施例1相同，不同之处在于，选用芦荟茎叶作为植物源性活性细胞外囊泡原料。最终得到一种可促进皮肤再生的修复乳液。由于芦荟茎植物源性活性细胞外囊泡，包含有缓激肽酶，它与肌肤血管内包含的白介素等发生生物应激反应，可在应用中起到消炎效果。

对比例1

一种可促进皮肤再生的修复乳液的制备方法，包括：

选用仙人掌茎、叶、球作为植物源性活性细胞外囊泡原料。按照实施例1的方法，依次经过植物源性活性细胞外囊泡混合液制备、离心提纯及成分表征，再以附图1中的各种功能基液配置步骤，依次配置好A、B、C、D基液，其余参数选择及制备过程与实施例1相同，不同之处在于，步骤(2)中，将混合液体用低速离心工艺(<10000×g)60min，采用304不锈钢300目过滤膜依次过滤去除混合液体中的死细胞、细胞碎片和大颗粒；随后用高速离心(150000×g)60min，重复高速离心2次后，用碘克沙醇介质混合萃取精炼活性细胞外囊，随后用0.60μm孔径的过滤膜过滤，获得纳米尺寸的活性细胞外囊泡(～400nm)。由于本实施例采用了更改高速离心(150000×g)速度，重复高速离心次数更多，所获得的仙人掌植物源性活性细胞外囊泡直径更小，活性细胞外囊泡从约600nm变化为约400nm后，其包含的蒽醌甙或蒽的衍生物活性效果更佳，可提升紫外线吸收能力，更好起到防止红、褐斑产生，但是其活性细胞外囊泡收得率更低(下降～20％)。

对比例2

一种可促进皮肤再生的修复乳液的制备方法，包括：

选用仙人掌茎、叶、球作为植物源性活性细胞外囊泡原料。按照实施例1的方法，依次经过植物源性活性细胞外囊泡混合液制备、离心提纯及成分表征，再以附图1中的各种功能基液配置步骤，依次配置好A、B、C、D基液，其余参数选择及制备过程与实施例1相同，不同之处在于，步骤(2)中，将混合液体用低速离心工艺(<10000×g)60min，采用304不锈钢300目过滤膜依次过滤去除混合液体中的死细胞、细胞碎片和大颗粒；随后用高速离心(150000×g)60min，重复高速离心3次后，用碘克沙醇介质混合萃取精炼活性细胞外囊，随后用0.60μm孔径的过滤膜过滤，获得纳米尺寸的活性细胞外囊泡(～400nm)。由于本实施例采用了更改重复高速离心次数，重复高速离心3次后，所获得的仙人掌植物源性活性细胞外囊泡数量更少、直径更小，活性细胞外囊泡从约600nm变化为约300nm后，其包含的蒽醌甙或蒽的衍生物活性效果更佳，可提升紫外线吸收能力，更好起到防止红、褐斑产生，但是其活性细胞外囊泡收得率更低(下降～30％)。

对比例3

一种可促进皮肤再生的修复乳液的制备方法，包括：

选用仙人掌茎、叶、球作为植物源性活性细胞外囊泡原料。按照实施例1的方法，依次经过植物源性活性细胞外囊泡混合液制备、离心提纯及成分表征，再以附图1中的各种功能基液配置步骤，依次配置好A、B、C、D基液，其余参数选择及制备过程与实施例1相同，不同之处在于，步骤(2)中，将混合液体用低速离心工艺、高速离心(150000×g)各60min，重复离心2次后，用碘克沙醇介质混合萃取精炼活性细胞外囊，用0.50μm孔径的过滤膜过滤，获得纳米尺寸的活性细胞外囊泡(～500nm)。由于本实施例更改应用了0.50μm孔径的过滤膜过滤，所获得的仙人掌植物源性活性细胞外囊泡数量直径更小，活性细胞外囊泡从约600nm变化为约500nm后，其包含的蒽醌甙或蒽的衍生物活性效果更佳，可提升紫外线吸收能力，更好起到防止红、褐斑产生，但是其活性细胞外囊泡收得率更低(下降～15％)。

对比例4

一种可促进皮肤再生的修复乳液的制备方法，包括：

选用仙人掌茎、叶、球作为植物源性活性细胞外囊泡原料。按照实施例1的方法，依次经过植物源性活性细胞外囊泡混合液制备、离心提纯及成分表征，再以附图1中的各种功能基液配置步骤，依次配置好A、B、C、D基液，其余参数选择及制备过程与实施例1相同，不同之处在于，步骤(2)中，将混合液体用低速离心工艺、高速离心(150000×g)各60min，重复离心2次后，用碘克沙醇介质混合萃取精炼活性细胞外囊，用0.50μm孔径的过滤膜过滤，获得纳米尺寸的活性细胞外囊泡(～500nm)。由于本实施例更改应用了0.40μm孔径的过滤膜过滤，所获得的仙人掌植物源性活性细胞外囊泡数量直径更小，活性细胞外囊泡从约600nm变化为约400nm后，其包含的蒽醌甙或蒽的衍生物活性效果更佳，可提升紫外线吸收能力，更好起到防止红、褐斑产生，但是其活性细胞外囊泡收得率更低(下降～22％)。

对比例5

一种可促进皮肤再生的修复乳液的制备方法，包括：

选用仙人掌茎、叶、球作为植物源性活性细胞外囊泡原料。按照实施例1的方法，依次经过植物源性活性细胞外囊泡混合液制备、离心提纯及成分表征，再以附图1中的各种功能基液配置步骤，依次配置好A、B、C、D基液，其余参数选择及制备过程与实施例1相同，不同之处在于，步骤(2)中，将混合液体用低速离心工艺、高速离心(150000×g)各60min，重复离心2次后，用碘克沙醇介质混合萃取精炼活性细胞外囊，用0.50μm孔径的过滤膜过滤，获得纳米尺寸的活性细胞外囊泡(～500nm)。由于本实施例更改应用了0.30μm孔径的过滤膜过滤，所获得的仙人掌植物源性活性细胞外囊泡数量直径更小，活性细胞外囊泡从约600nm变化为约300nm后，其包含的蒽醌甙或蒽的衍生物活性效果更佳，可提升紫外线吸收能力，更好起到防止红、褐斑产生，但是其活性细胞外囊泡收得率更低(下降～33％)。

对比例6

一种可促进皮肤再生的修复乳液的制备方法，包括：

选用仙人掌茎、叶、球作为植物源性活性细胞外囊泡原料。按照实施例1的方法，依次经过植物源性活性细胞外囊泡混合液制备、离心提纯及成分表征，再以附图1中的各种功能基液配置步骤，依次配置好A、B、C、D基液，其余参数选择及制备过程与实施例1相同，不同之处在于，步骤(3)中，化妆品基质增加4份，称取49份；步骤(6)中，保湿剂添加减少4份，称取保湿剂为6份，加入到基液C中，以200r/min的转速搅拌30min后，制得成品D。本实施例由于采用了比实施例1更少的保湿剂，得到的修复乳液成品保湿效果略差。

对比例7

一种可促进皮肤再生的修复乳液的制备方法，包括：

选用仙人掌茎、叶、球，芦荟茎叶各1.5kg作为植物源性活性细胞外囊泡原料，按照实施例1的方法，依次经过植物源性活性细胞外囊泡混合液制备、离心提纯及成分表征，再以附图1中的各种功能基液配置步骤，依次配置好A、B、C、D基液，其余参数选择及制备过程与实施例1相同，不同之处在于，步骤(1)中，分别选择了仙人掌茎、叶、球，芦荟茎叶各1.5kg作为植物源性活性细胞外囊泡原料，本实施例最终获得的一种可促进皮肤再生的修复乳液，由于两种不同功能的活性细胞外囊泡活性成分，改善了修复乳液成品的防晒和消炎、免疫及再生效果。

对比例8

一种可促进皮肤再生的修复乳液的制备方法，包括：

选用仙人掌茎、叶、球，芦荟茎叶各1.5kg作为植物源性活性细胞外囊泡原料，按照实施例1的方法，依次经过植物源性活性细胞外囊泡混合液制备、离心提纯及成分表征，再以附图1中的各种功能基液配置步骤，依次配置好A、B、C、D基液，其余参数选择及制备过程与实施例1相同，不同之处在于，步骤(3)中，配置了更多的仙人掌、芦荟活性细胞外囊泡提取物增加5份，为10份；化妆品基质减少5份，配置为40份。本实施例最终获得的一种可促进皮肤再生的修复乳液，由于活性细胞外囊泡活性成分的提升，改善了修复乳液成品的防晒、杀菌、抗衰老、消炎免疫及再生等效果。

以上对本发明及其实施方式进行了描述，这种描述没有限制性，实际的技术方案并不局限于此。总而言如果本领域的普通技术人员受其启示，在不脱离本发明创造宗旨的情况下，不经创造性的设计出与该技术方案相似的方式及实施例，均应属于本发明的保护范围。

Claims (10)

1.一种可促进皮肤再生的修复乳液，包括：

重组类人胶原蛋白基质9-15份，植物源性活性细胞外囊泡提取物2-10份，乳化剂13-27份，皮肤调理剂12-23份，保湿剂6-10份，化妆品基质15-60份。

2.根据权利要求1所述的可促进皮肤再生的修复乳液，其中：

所述植物源性活性细胞外囊泡提取物包括：

仙人掌活性细胞外囊泡提取物1-5份，芦荟活性细胞外囊泡提取物1-5份。

3.根据权利要求1所述的可促进皮肤再生的修复乳液，其中：

所述乳化剂采用挥发油类、黄酮、西葫芦籽油、檀香油中的一种或者多种提取制成。

4.根据权利要求1所述的可促进皮肤再生的修复乳液，其中：

所述皮肤调理剂采用黄酮及其苷类、三萜烯皂甙中的一种或者多种制成。

5.根据权利要求1所述的可促进皮肤再生的修复乳液，其中：

所述保湿剂采用烃类油脂制作而成。

6.一种根据权利要求1～5任一所述可促进皮肤再生的修复乳液的制备方法，包括以下步骤：

(1)材料准备：称取重组类人胶原蛋白基质9-15份，植物源性活性细胞外囊泡提取物2-10份，化妆品基质15-60份，依次加入到搅拌器中，以300-500r/min的转速搅拌20-40min后，制得基液A；

(2)乳化剂添加：称取乳化剂13-27份，加入基液A中，以300-500r/min的转速搅拌20-40min后，制得基液B；

(3)皮肤调理剂添加：称取皮肤调理剂12-23份，加入基液B中，以300-400r/min的转速搅拌30-45min后，制得基液C；

(4)保湿剂添加：称取保湿剂6-10份，加入基液C中，以200-300r/min的转速搅拌30-45min后，制得成品D；

(5)装瓶存放：将成品D注入到经过杀菌后的存放瓶中，密封干燥保存，即得一种可促进皮肤再生的修复乳液。

7.根据权利要求6所述的制备方法，其中：

步骤(1)所述植物源性活性细胞外囊泡提取物由如下方法制得：

①制样：取多肉植物的茎、叶、球浸入渗透缓冲液中，依次经低速物理榨汁、离心滤汁处理，收集离心后沉淀下层的植物物质混合液，得到含有细胞外基质混合液；

②离心提纯：将细胞外基质提取混合液低速离心30-120min，再高速离心60-120min，重复高速离心1-2轮后，用蔗糖或碘克沙醇介质混合萃取精炼活性细胞外囊，随后滤膜过滤，得到植物源性活性细胞外囊泡提取物。

8.根据权利要求7所述的制备方法，其中：

步骤①所述多肉植物包括：仙人掌、芦荟。

9.根据权利要求7所述的制备方法，其中：

步骤②所述滤膜孔径为0.30-0.60μm。

10.一种根据权利要求5-9任一所述制备方法制得的可促进皮肤再生的修复乳液。

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