CN115584333A - 罗伊氏乳杆菌及其应用 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及微生物技术领域,尤其涉及罗伊氏乳杆菌及其应用。本发明提供了保藏编号为CCTCC NO:M 20221225的罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)及其应用。实验表明,本发明提供的罗伊氏乳杆菌能够促进细胞增殖、修护皮肤屏障,在皮肤保湿和抗衰老等方面具有优异效果,适用于制备改善皮肤相关功能的食品、药品、化妆品等。

Description

罗伊氏乳杆菌及其应用
技术领域
本发明涉及微生物技术领域,尤其涉及罗伊氏乳杆菌及其应用。
背景技术
皮肤屏障功能通过防止水分、营养物质等的丢失,来保持皮肤生理功能的正常运行,同时也保证机体内器官组织免受外界有害物质的侵袭,对机体内环境稳态的维持起着重要作用。皮肤除了屏障保护作用外,还具有感觉作用、体温调节、分泌排泄以及吸收作用等其它生理作用。
随着年龄的增长,皮肤老化导致皮肤的弹性、厚度、含水量等一系列的改变,导致皱纹、松弛、老年斑等临床症状的出现。目前对皮肤衰老的研究主要是对皮肤成纤维细胞和角质形成细胞衰老的研究。在衰老机制的研究中发现,减少细胞凋亡,降低细胞炎症,增加细胞外基质的合成以及减少其降解,提升细胞的抗氧化能力等都已被证实能够减缓皮肤细胞衰老。
皮肤是一个复杂而动态的生态系统,居住着细菌、古细菌、真菌和病毒。这些微生物统称为皮肤微生物群,是皮肤生理和免疫的基础。微生物群还通过统称为定植抗性的机制将病原体排除在其皮肤生态位之外。这些机制包括对营养物的竞争、抗菌肽(AMP)的直接抑制和/或刺激皮肤免疫反应,微生物维持皮肤屏障完整性对体内平衡和疾病预防至关重要。因此,提供一种利用微生物技术开发的皮肤微生态相关产品,在改善皮肤状态方面具有广大的应用价值。
发明内容
有鉴于此,本发明要解决的技术问题在于提供一种罗伊氏乳杆菌及其在修护皮肤屏障、延缓皮肤衰老的产品中的应用。
本发明提供了保藏编号为CCTCC NO:M 20221225的罗伊氏乳杆菌(Lactobacillusreuteri)。
所述的罗伊氏乳杆菌为筛选自七岁健康男童粪便的革兰式阳性菌株,实验结果表明,所述的罗伊氏乳杆菌能够促进皮肤细胞增殖、修护皮肤屏障,在皮肤保湿和抗衰老等方面效果优异。
进一步的,本发明还提供了所述的罗伊氏乳杆菌在制备改善皮肤状况的产品中的应用。
更进一步的,所述改善皮肤状况为促进皮肤细胞增殖、修复皮肤屏障、保湿和/或抗衰老。
本发明中,所述的促进皮肤细胞增殖包括促进皮肤角质细胞和/或成纤维细胞的增殖。
在一些具体实施例中,本发明以HaCaT角质细胞为受试对象,对所述的罗伊氏乳杆菌的促进细胞增殖效果进行研究。结果表明,所述的罗伊氏乳杆菌可促进可修复SDS引起的HaCaT角质细胞损伤,提高细胞增殖率,促进增殖率为22.10%~23.96%。
在一些具体实施例中,本发明以HFF成纤维细胞为受试对象,对所述的罗伊氏乳杆菌的促进细胞增殖效果进行研究。结果表明,所述的罗伊氏乳杆菌可促进HFF细胞,促进增殖率为9.20%~33.33%。
本发明中,所述的修复皮肤屏障包括恢复细胞活力和/或上调屏障修护相关基因的表达;所述屏障修护相关基因包括FLG、IVL、OVOL1和OCLN中的至少一种。
在一些具体实施例中,本发明以HaCaT细胞为受试对象,对所述的罗伊氏乳杆菌的SDS损伤修复及皮肤屏障修护能力进行了研究,结果表明,所述的罗伊氏乳杆菌可修复SDS引起的细胞损伤,提高细胞增殖率,并上调非损伤细胞的屏障修护相关基因的表达。
本发明中,所述的保湿包括但不限于上调保湿相关基因的表达,所述的保湿相关基因包括但不限于GBA。
在一些具体实施例中,本发明以HaCaT细胞为受试对象,研究所述的罗伊氏乳杆菌的对皮肤的保湿效果,结果显示,所述的罗伊氏乳杆菌可上调保湿相关基因GBA的表达,促进皮肤细胞保湿。
本发明中,所述的抗衰老包括以下至少一项:
(1)、上调细胞外基质相关基因的表达,所述细胞外基质相关基因包括SPTSSA、SMAD3、LN、MKX、COL1A1和COL13A1中的至少一种;
(2)、上调抗氧化相关基因表达,所述抗氧化相关基因包括NRF2和PTEN中的至少一种;
(3)、上调抑制细胞凋亡相关基因BCL-2的表达;
(4)、上调细胞自噬相关基因LC3B的表达;
(5)、上调细胞生长因子相关基因FGF1的表达;
(6)、下调降解细胞外基质相关基因MMP10的表达。
为了探究所述的罗伊氏乳杆菌的抗衰老效果,本发明对由紫外线辐照导致的皮肤光老化的相关指标进行了测定,所述的指标包括细胞外基质合成、细胞外基质降解、细胞抗氧化、细胞生长、细胞凋亡及细胞自噬中的至少一个。
在一些具体实施例中,本发明以HaCaT角质细胞为受试对象,研究所述的罗伊氏乳杆菌对HaCaT角质细胞的细胞外基质合成相关基因和降解相关基因的影响。结果表明,所述的罗伊氏乳杆菌可上调细胞外基质合成相关基因COL1A1的表达,促进细胞外基质的合成。
在一些具体实施例中,本发明以HFF成纤维细胞为受试对象,研究所述的罗伊氏乳杆菌对HFF细胞的细胞外基质合成相关基因和降解相关基因的影响。结果表明,所述的罗伊氏乳杆菌可上调细胞外基质合成相关基因SPTSSA、SMAD3、LN、MKX和COL13A1的表达,促进细胞外基质的合成,下调降解细胞外基质相关基因MMP10的表达,抑制细胞外基质的降解。
在一些具体实施例中,本发明以HaCaT角质细胞为受试对象,研究所述的罗伊氏乳杆菌对HaCaT角质细胞抗氧化相关基因的表达的影响。结果表明,所述的罗伊氏乳杆菌可上调抗氧化相关基因NRF2的表达,增强细胞的抗氧化能力。
在一些具体实施例中,本发明以HFF成纤维细胞为受试对象,研究所述的罗伊氏乳杆菌对HFF角质细胞抗氧化相关基因的表达的影响。结果表明,所述的罗伊氏乳杆菌可上调抗氧化相关基因PTEN的表达,增强细胞的抗氧化能力。
在一些具体实施例中,本发明以HFF成纤维细胞为受试对象,研究所述的罗伊氏乳杆菌对HFF抑制细胞凋亡的影响。结果表明,所述的罗伊氏乳杆菌可上调抑制细胞凋亡相关基因BCL-2的表达,抑制细胞凋亡。
在一些具体实施例中,本发明以HaCaT角质细胞为受试对象,研究所述的罗伊氏乳杆菌对HaCaT角质细胞细胞自噬的影响。结果表明,所述的罗伊氏乳杆菌可上调细胞自噬相关基因LC3B的表达,促进细胞自噬以清除老化细胞。
在一些具体实施例中,本发明以HFF成纤维细胞为受试对象,研究所述的罗伊氏乳杆菌对HFF细胞生长因子相关基因的表达的影响。结果表明,所述的罗伊氏乳杆菌可上调细胞生长因子相关基因FGF1的表达,增强细胞生长能力。
本发明还提供了改善皮肤状况的产品,其原料包括所述的罗伊氏乳杆菌。
进一步的,所述的产品包括以下至少一项:
ⅰ、所述的罗伊氏乳杆菌的灭活菌和/或灭活上清液;
ⅱ、所述的罗伊氏乳杆菌的培养物、外泌体、裂解物和/或提取物。
更进一步的,本发明所述的产品的剂型包括但不限于膏霜类、乳液类、油剂类、水剂类、凝胶类、粉剂类、冻干类中的至少一种,本发明对此不做限定。
本发明还提供了改善皮肤状况的方法,包括:使用本发明所述的产品。所述的产品的使用方法包括内服或外用,所述外用包括涂抹、外敷、熏蒸或注射,本发明对此不做限定。
本发明提供了保藏编号为CCTCC NO:M 20221225的罗伊氏乳杆菌。本发明提供的罗伊氏乳杆菌能够促进细胞增殖、修护皮肤屏障,在皮肤保湿和抗衰老等方面具有优异效果,适用于制备改善皮肤相关功能的食品、药品、化妆品等。
生物保藏说明
罗伊氏乳杆菌ProfMIC-227(Lactobacillus reuteri ProfMIC-227),于2022年8月3日保藏在中国典型培养物保藏中心,地址:中国.武汉.武汉大学,保藏编号为CCTCC NO:M 20221225。
具体实施方式
本发明提供了罗伊氏乳杆菌及其应用。本领域技术人员可以借鉴本文内容,适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是,所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的,它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述,相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文的方法和应用进行改动或适当变更与组合,来实现和应用本发明技术。
本发明的罗伊氏乳杆菌菌株ProfMIC-227,来源于七岁健康男童粪便,经16S rDNA鉴定为罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)。该菌株革兰氏阳性,显微镜下呈杆状;在MRS平板上生长,可形成表面光滑不透明的圆形菌落,白色,边缘整齐;在MRS液体培养基中呈均匀浑浊生长,久置菌体呈白色沉淀,最适生长温度37℃。
罗伊氏乳杆菌ProfMIC-227(Lactobacillus reuteri ProfMIC-227),保藏单位:中国典型培养物保藏中心,地址:湖北省武汉市武昌区八一路299号武汉大学校内,保藏日期:2022年8月3日,保藏编号为CCTCC NO:M 20221225。
进一步,本发明提供的罗伊氏乳杆菌ProfMIC-227在本发明所述的应用或产品中,存在形式是活的或死的或经间歇灭菌的,或为裂解物和/或提取物的形式,或为细菌产物的形式或为上清液形式或衍生物形式,所述衍生物形式优选地选自:代谢产物、代谢生物产物、外泌体、益生素、细胞壁及其成分、胞外多糖,和含有免疫原性成分的化合物,优选地选自:上清液、灭活菌体。
本发明采用的试材皆为普通市售品,均可市售购买得到,下面结合实施例,进一步阐述本发明:
实施例1ProfMIC-227的分离
于七岁健康男童粪便中采样。将样品适当处理后于生理盐水中震荡混匀,取上清划线于MRS固体平板,37℃恒温培养48h后,挑取白色菌落反复接种筛选,直至得到均匀的单个菌落,命名为ProfMIC-227。
革兰氏染色镜检:菌株ProfMIC-227为革兰氏染色阳性,显微镜下呈杆状;在MRS平板上生长,可形成白色、表面光滑圆润不透明圆形小菌落,边缘整齐;在MRS液体培养基中呈均匀浑浊生长,久置菌体呈白色沉淀。
实施例2ProfMIC-227的核酸鉴定
1、16S rDNA基因序列分析:
挑取单菌落置MRS液体培养基中,37℃培养过夜后,12000转离心1min收集菌体,按照DNA提取试剂盒步骤进行操作。引物采用细菌通用引物27F,1492R,PCR扩增体系为50μL体系,95℃预变性5min;94℃ 15s,57℃ 15s,72℃ 40s,35个循环;72℃延伸10min。
2、结果
PCR产物测序结果与GenBank中已发表的标准序列进行同源性比较(BLASTN)后得出ProfMIC-227菌株为罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)。
实施例3ProfMIC-227促进SDS诱导的人永生化角质形成细胞HaCaT损伤修复实验
1、ProfMIC-227上清液制备:
挑取罗伊氏乳杆菌PROFMIC-227单菌落于MRS液体培养基,37℃培养箱静置培养16~18h,酶标仪检测并以PBS稀释调整OD600=0.2,121℃,30min高压灭活,12000转离心2min,经0.22μm滤膜过滤为上清液。
2、促进HaCaT细胞修复实验
接种HaCaT细胞(5×104cells/孔)至96孔板,过夜培养至细胞贴壁。配制50μg/mlSDS,每孔加入100μl,5%二氧化碳培养箱37℃培养8h。各孔添加5%上清液(对照组分别以等体积PBS替代上清液)培养24h。向每孔加入10μl的CCK-8溶液,培养4h,检测450nm处吸亮度A。
细胞增殖率计算公式及结果见表1。
表1 ProfMIC-227上清液促进HaCaT细胞增殖
Figure BDA0003897616730000061
上表结果可知,ProfMIC-227上清液可促进可修复SDS引起的HaCaT角质细胞损伤,提高细胞增殖率,促进增殖率为22.10%~23.96%
实施例4ProfMIC-227促进HaCaT屏障修护相关基因表达实验
1、ProfMIC-227灭活菌体制备:
挑取罗伊氏乳杆菌ProfMIC-227单菌落于MRS液体培养基,37℃培养箱静置培养16~18h,酶标仪检测并以PBS稀释调整OD600=0.2,121℃,30min高压灭活,12000转离心2min,离心沉淀以适量PBS重悬,稀释调整OD600=0.2,为灭活菌体。
2、促进HaCaT屏障修护相关基因表达实验
接种人永生化角质形成细胞HaCaT(2ml/孔,内含5×105细胞)至6孔板,5%二氧化碳培养箱37℃过夜培养至细胞贴壁。加入灭活菌体10%(V/V)(对照组分别以等体积PBS替代灭活菌体),培养24h后,加入裂解液,提取细胞总RNA,检测RNA浓度及纯度后反转录为cDNA,以GAPDH为内参基因,采用实时qPCR检测FLG、IVL、OVOL1和OCLN基因的表达。分别以添加等体积PBS处理组为对照(基因相对表达倍数F=1),利用2-ΔΔCT法计算各样品F值。
公式:F=2-ΔΔCT,其中:
△CT实验=CT实验-CT内参(实验)
△CT对照=CT对照-CT内参(对照)
△△CT=△CT实验-△CT对照
结果见表2。
表2 ProfMIC-227灭活菌体上调修复相关基因的表达
Figure BDA0003897616730000071
体外细胞实验表明,本发明的罗伊氏乳杆菌ProfMIC-227灭活菌体具有上调皮肤屏障修护相关因子丝聚合蛋白基因FLG、外皮蛋白基因IVL、OVO样转录因子1基因OVOL1和紧密连接蛋白基因OCLN表达的作用,基因表达量上调1.12~2.85倍。表明PROFMIC-227具有促进皮肤屏障修护的作用。
实施例5ProfMIC-227上调HaCaT保湿相关基因表达实验
1、ProfMIC-227灭活菌体制备:
制备方法参照实施例4。
2、上调HaCaT保湿相关基因表达实验
接种人永生化角质形成细胞HaCaT(2ml/孔,内含5×105细胞)至6孔板,5%二氧化碳培养箱37℃过夜培养至细胞贴壁。加入灭活菌体10%(V/V)(对照组以等体积PBS替代),培养24h后,加入裂解液,提取细胞总RNA,检测RNA浓度及纯度后反转录为cDNA,以GAPDH为内参基因,采用实时qPCR检测GBA基因的表达。以等体积PBS处理组为对照(基因相对表达倍数F=1),利用2-ΔΔCT法计算各样品F值。结果见表3:
表3 ProfMIC-227灭活菌体上调保湿相关基因的表达
Figure BDA0003897616730000081
体外细胞实验表明,本发明的罗伊氏乳杆菌ProfMIC-227具有上调保湿相关葡萄糖脑苷脂酶基因GBA表达的作用,基因表达量上调1.54~1.75倍。表明ProfMIC-227具有促进皮肤保湿的作用。
实施例6:ProfMIC-227调节光老化HaCaT细胞外基质/细胞自噬/抗氧化相关基因表达实验
1、ProfMIC-227灭活菌体制备:
制备方法参照实施例4。
2、HaCaT细胞制备及紫外线损伤
将HaCaT细胞消化后以0.5ml/孔(内含2×105细胞)接种至24孔板,5%二氧化碳培养箱37℃培养过夜。对孔内细胞进行总剂量为2J/cm2的紫外线UVB照射损伤。
3、ProfMIC-227添加
将灭活菌体10%(V/V)分别加入刺激过的HaCaT细胞(对照组分别以等体积PBS替代灭活菌体)。每组3平行,37℃培养过夜。
4、qPCR法检测细胞外基质/细胞自噬/抗氧化相关基因相对表达倍数
将上述细胞弃去培养基后,加入裂解液,提取细胞总RNA,检测RNA浓度及纯度后反转录为cDNA,以GAPDH为内参基因,采用实时qPCR检测细胞外基质相关基因COL1A1,抗氧化相关基因NRF2,细胞自噬相关基因LC3B的表达。以对照组基因相对表达倍数F=1,利用2-ΔΔCT法计算各样品F值。
灭活菌体上调细胞外基质基因COL1A1;抗氧化基因NRF2,细胞自噬基因LC3B。结果见表4。
表4 ProfMIC-227灭活菌体调节细胞外基质/细胞自噬/抗氧化相关基因的表达
Figure BDA0003897616730000091
体外细胞实验表明,本发明的罗伊氏乳杆菌ProfMIC-227具有上调HaCaT细胞外基质相关的I型胶原α1链基因COL1A1,抗氧化相关的核因子E2相关因子2基因NRF2,细胞自噬相关的微管相关蛋白1轻链3β基因LC3B基因表达的作用,基因相对表达倍数1.24~2.13。
实施例7:ProfMIC-227促进人成纤维细胞HFF的增殖
1、ProfMIC-227上清液及灭活菌体制备:
挑取罗伊氏乳杆菌ProfMIC-227单菌落于MRS液体培养基,37℃培养箱静置培养16~18h,酶标仪检测并以PBS稀释调整OD600=0.2,121℃,30min高压灭活,12000转离心2min,经0.22μm滤膜过滤为上清液。离心沉淀以适量PBS重悬,稀释调整OD600=0.2,为灭活菌体。
2、HFF细胞制备及ProfMIC-227添加
接种以DMEM培养的HFF细胞,以100ul/孔(每孔含3×104细胞)转接至96孔板,过夜培养至细胞贴壁。配制200μM H2O2,每孔加入100μl,5%二氧化碳培养箱37℃培养1h。弃掉原培养基,PBS清洗两次,加入100μl新培养基,各孔分别添加上清液5%(V/V)、灭活菌体10%(V/V),(对照组分别以等体积PBS替代上清液/灭活菌体)。培养24h。向每孔加入10μl的CCK-8溶液,培养4h,检测450nm处吸亮度A。计算公式及结果见表5
表5 ProfMIC-227促进HFF细胞增殖
Figure BDA0003897616730000092
Figure BDA0003897616730000101
体外细胞实验表明,本发明的罗伊氏乳杆菌ProfMIC-227具有促进人成纤维细胞HFF增殖的作用,增殖率9.20%~33.33%。
实施例8:ProfMIC-227调节氧化损伤HFF细胞外基质/细胞凋亡/抗氧化/细胞生长因子相关基因表达实验
1、ProfMIC-227上清液及灭活菌体制备:
制备方法参照实施例7。
2、HFF细胞制备及H2O2诱导氧化损伤
将DMEM培养的HFF细胞消化后以0.5ml/孔(内含2×105细胞)接种至24孔板,5%二氧化碳培养箱37℃培养过夜。每孔加入终浓度为200μM的H2O2进行刺激,37℃静置1h。
3、ProfMIC-227添加
将上清液5%(V/V)、灭活菌体10%(V/V)分别加入刺激过的HFF细胞(对照组分别以等体积PBS替代上清液/灭活菌体)。每组3平行,37℃培养过夜。
4、qPCR法检测细胞外基质/细胞凋亡/抗氧化/免疫调节因子/炎症因子相关基因相对表达倍数
将上述细胞弃去培养基后,加入裂解液,提取细胞总RNA,检测RNA浓度及纯度后反转录为cDNA,以GAPDH为内参基因,采用实时qPCR检测细胞外基质相关基因LN、MKX、SMAD3、SPTSSA和COL13A1,抑制细胞凋亡相关基因BCL-2,抗氧化相关基因PTEN,细胞生长因子相关基因FGF-1;以及降解细胞外基质相关基因MMP10的表达。以对照组基因相对表达倍数F=1,利用2-ΔΔCT法计算各样品F值。
上清液上调细胞外基质相关基因LN、MKX和SMAD3,抑制细胞凋亡基因BCL-2;下调降解细胞外基质相关基因MMP10,结果见表6。
表6 ProfMIC-227上清液调节细胞外基质/细胞凋亡相关基因的表达
Figure BDA0003897616730000102
Figure BDA0003897616730000111
灭活菌体上调抑制细胞外基质相关基因MKX、SMAD3、SPTSSA和COL13A1,抗氧化相关基因PTEN,抑制细胞凋亡基因BCL-2,细胞生长因子基因FGF1;下调降解细胞外基质相关基因MMP10。结果见表7。
体外细胞实验表明,本发明的罗伊氏乳杆菌ProfMIC-227具有上调HFF细胞外基质相关的层粘连蛋白LN、莫霍克蛋白基因MKX、丝氨酸棕榈酰转移酶基因SPTSSA、信号转导蛋白基因SMAD3和XIII型胶原α1链基因COL13A1,抗氧化相关的10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源物基因PTEN,抑制细胞凋亡相关的B淋巴细胞瘤-2基因BCL-2,以及细胞生长因子相关基因FGF-1表达的作用,基因相对表达倍数1.23~3.12倍;具有下调降解细胞外基质相关的基质金属蛋白酶家族基因MMP10表达的作用,基因相对表达倍数0.25~0.67。
表7 ProfMIC-227灭活菌体调节降解细胞外基质/抗氧化/细胞凋亡/细胞生长因子相关基因的表达
Figure BDA0003897616730000112
综上实验表明,ProfMIC-227具有促进细胞增殖、修护皮肤屏障、保湿、抗衰老的功能,可用于制备食品、药品、化妆品等。
实施例9:罗伊氏乳杆菌ProfMIC-227上清液冲剂制备例
ProfMIC-227上清液冲剂的制备,组方如表8所示。
表8 ProfMIC-227上清液冲剂配料表
原料 质量比例(%)
ProfMIC-227发酵粉 40.0
薏米粉 35.0
南瓜粉 24.6
二氧化硅 0.4
制备工艺:取实施例3制备的ProfMIC-227上清液,喷雾干燥后制成ProfMIC-227发酵粉,加入薏米粉、南瓜粉、二氧化硅,搅拌分散均匀即完成冲剂。所得ProfMIC-冲剂携带方便,冲剂以水冲泡后味道天然,适口性佳,可做为皮肤保养的口服饮品。
实施例10:罗伊氏乳杆菌ProfMIC-227灭活菌体精华水制备例
ProfMIC-227灭活菌体精华水的制备,组方如表9所示。
表9 ProfMIC-227灭活菌体精华水配料表
原料 质量比例(%)
ProfMIC-227灭活菌体液 75
甘油 14.5
1,3-丁二醇 10
苯氧乙醇 0.4
香兰素 0.1
制备工艺:取实施例3制备的ProfMIC-227灭活菌体液,加热至50℃,加入甘油、1,3-丁二醇、苯氧乙醇、香兰素,搅拌分散均匀直至清澈,冷却至35℃即完成。所得ProfMIC-227灭活菌体精华水气味清新,使用前摇晃以重悬菌体,涂抹肤感润滑不粘腻感。
以上仅是本发明的优选实施方式,应当指出,对于本技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明原理的前提下,还可以做出若干改进和润饰,这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (10)

1.保藏编号为CCTCC NO:M 20221225的罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)。
2.权利要求1所述的罗伊氏乳杆菌在制备改善皮肤状况的产品中的应用。
3.如权利要求2所述的应用,其特征在于,所述改善皮肤状况为促进皮肤细胞增殖、修复皮肤屏障、保湿和/或抗衰老。
4.如权利要求3所述的应用,其特征在于,所述促进皮肤细胞增殖包括促进皮肤角质细胞和/或成纤维细胞的增殖。
5.如权利要求3所述的应用,其特征在于,所述修复皮肤屏障包括恢复细胞活力和/或上调屏障修护相关基因的表达;所述屏障修护相关基因包括FLG、IVL、OVOL1和OCLN中的至少一种。
6.如权利要求3所述的应用,其特征在于,所述保湿包括上调保湿相关基因GBA的表达。
7.如权利要求3所述的应用,其特征在于,所述抗衰老包括以下至少一项:
(1)、上调细胞外基质相关基因的表达,所述细胞外基质相关基因包括SPTSSA、SMAD3、LN、MKX、COL1A1和COL13A1中的至少一种;
(2)、上调抗氧化相关基因表达,所述抗氧化相关基因包括NRF2和PTEN中的至少一种;
(3)、上调抑制细胞凋亡相关基因BCL-2的表达;
(4)、上调细胞自噬相关基因LC3B的表达;
(5)、上调细胞生长因子相关基因FGF1的表达;
(6)、下调降解细胞外基质相关基因MMP10的表达。
8.改善皮肤状况的产品,其特征在于,其原料包括权利要求1所述的罗伊氏乳杆菌。
9.如权利要求8所述的产品,其特征在于,包括以下至少一项:
ⅰ、权利要求1所述的罗伊氏乳杆菌的灭活菌和/或灭活上清液;
ⅱ、权利要求1所述的罗伊氏乳杆菌的培养物、外泌体、裂解物和/或提取物。
10.如权利要求8或9所述的产品,其特征在于,所述产品的剂型包括膏霜类、乳液类、油剂类、水剂类、凝胶类、粉剂类、冻干类中的至少一种。
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