CN115557962A

CN115557962A - 新型喜树碱类化合物及其制备方法和应用

Info

Publication number: CN115557962A
Application number: CN202210765898.6A
Authority: CN
Inventors: 温俏冬; 袁灿; 潘福君; 胡喜新; 李宁; 李英; 寇红艳; 高虎
Original assignee: Jushi Biopharmaceutical Co ltd
Current assignee: Jushi Biopharmaceutical Co ltd
Priority date: 2021-07-02
Filing date: 2022-07-01
Publication date: 2023-01-03

Abstract

本发明涉及一种式(I)所示的化合物及其立体异构体、几何异构体、互变异构体、药用盐、前药、水合物、溶剂合物或同位素标记的类似物，包含其的药物组合物，及其用于制备预防和/或治疗细胞增殖性疾病如癌症的用途，以及所述化合物的制备方法。

Description

新型喜树碱类化合物及其制备方法和应用

技术领域

本发明涉及医药技术领域，具体而言，涉及一类新的喜树碱(CPT)衍生物及其制备方法，包含其的药物组合物及所述化合物或药物组合物在制备药物中的用途。

背景技术

喜树碱为一种吡咯喹啉细胞毒性生物碱，是除紫杉醇之外，研究最多的天然抗肿瘤药物之一。主要来源于我国特有的植物珙桐科植物喜树(Camptotheca acuminateDecne)，1966年由Wall等人首次从我国引种的喜树杆中分离得到。1967-1970年，研究者发现该生物碱在体外对Hela细胞、L1210细胞及啮齿类动物显示出较强的抗肿瘤活性，引起人们的极大关注。研究表明其对胃癌、直肠癌和白血病等多种恶性肿瘤均有一定的疗效。但是由于该生物碱易产生恶心、呕吐、腹泻、脱发等副作用，并且其水溶性差，制成水溶性的钠盐后抗肿瘤活性降低等原因，使得喜树碱的临床研究于20世纪70年代中后期几乎停滞不前。直至1985年，Hsiang等人发现喜树碱及衍生物是以拓朴异构酶(topoⅠ)为作用靶点抑制DNA的合成而发挥抗癌作用的机理后，使喜树碱再次获得广泛的关注，许多衍生物应运而生，成为抗癌领域研究的新热点。

人们一直致力于寻找高效、低毒的喜树碱衍生物，至今，已经有一系列半合成和全合成的喜树碱衍生物出现并进入临床应用或临床试验阶段。

羟基喜树碱(HCPT)是上个世纪70年代我国科学家自主研制的抗肿瘤药物，因其可靠的临床疗效而受到人们广泛的关注。大量研究表明，HCPT对胰腺癌、前列腺癌、原发性肝癌、胃癌、膀胱癌、直肠癌、头颈部上皮癌、白血病等恶性肿瘤均有较好的疗效，具有抗瘤谱广且无交叉耐药性等优势。HCPT是一种黄色粉末或结晶性粉末，不溶于水，极微溶于甲醇和无水乙醇，易溶于稀碱溶液。

60年代末，我国研究者对喜树中的活性成分进行了较为全面的研究，发现10-羟基喜树碱(HCPT)抗癌活性高而毒性低。经过系统的药理、毒理和代谢研究后推荐临床应用，证明此药确是一种较好的抗癌药，国内自70年代开始生产，一直沿用到今天，对多种恶性肿瘤有效，目前除应用于消化道肿瘤、肺癌、生殖系统肿瘤外，对白血病等其他肿瘤也有良好治疗作用。目前美国、日本以及欧洲都有广泛的研究。

伊立替康(Irinotecan，CPT-11)是细胞毒类药物新家族成员，喜树碱类中上市的新药物之一。CPT-11由日本第一制药公司研制开发，1994年首先在日本上市，是一种前体药，经羧酸酶转化为SN38，即7-乙基-10-羟基喜树碱。

拓扑替康是由Smithkline Beecham开发上市的一种水溶性半合成喜树碱衍生物，在9位上有一个稳定的碱性侧链。于1996年在美国率先上市。在小细胞肺癌和非小细胞肺癌中拓扑替康对以前未经治疗的病人均有一定疗效，而对顺铂耐药的小细胞肺癌(SCLC)也有抗瘤作用。FDA已批准拓扑替康用于二线治疗小细胞肺癌(SCLC)和卵巢癌。

9-氨基喜树碱是由IDEC公司开发的一种水溶性的喜树碱衍生物，在喜树碱的9位上有一个氨基，现正处在Ⅲ期临床阶段

喜树碱类化合物研发过程，大多存在几大问题：首先是成药性差，喜树碱的特殊结构导致脂溶性和水溶性都很差，必须进行水溶性改造；喜树碱化合物具有一定毒性，水溶性改造太好也会导致血药浓度的瞬间上升从而引起毒副反应；喜树碱前药改造需要考虑释放效率与稳定性，这在合理前药设计上永远是一对矛盾体。

抗体偶联药物(antibody-drugconjugate，ADC)由三个不同的组件(抗体、接头和药物/净荷)组成。ADC技术是通过linker将单抗和药物分子偶联在一起，利用抗体的特异性靶向运输药物分子到靶组织发挥作用，降低药物的系统性毒副作用，提高药物治疗窗和拓展抗体治疗潜能。血液中循环的ADC与靶抗原结合后，通过网格蛋白介导的内吞作用被内化。内化的复合物随后进入内体-溶酶体途径，大多数情况下，先被转运至早期的内体，然后转运至溶酶体。酸性环境和蛋白水解酶会导致包含ADC的溶酶体降解，从而使细胞毒性药物释放到细胞质中。释放的细胞毒性药物随后流出到细胞质中，通过DNA插入或抑制微管合成等方式诱导细胞凋亡。

目前，有超过60种ADC正在开发中。ADC为新型癌症化疗创造了新的范例。凭借单克隆抗体的特异性和小分子药物的细胞毒性能力，ADC有望成为精密医学以及联合治疗的未来的重要组成部分。因此，持续需要提供其它ADC以及关于疾病的治疗和/或诊断的手段、方法和用途。

Enhertu和Sacituzumab govitecan两款药物的上市，使得喜树碱衍生物为弹头的ADC药物得到更加广泛的关注。

专利WO2020063673A1公开了抗B7H3的抗体或抗原与细胞毒素物质依喜替康类似物偶联的ADC药物。

专利WO2020219287A1公开了抗肿瘤的新型喜树碱衍生物。为了提供提高的溶解度，效力，内酯稳定性和生物利用度的治疗有效的喜树碱衍生物。

其中第一三共的ADC细胞毒性药物(payload)DXd，具有独特的作用机制，与常见化疗药物伊立替康(irinotecan)相比，活性提高10倍；具有很强的渗透细胞膜的能力，这使其在杀伤吞入ADC的癌细胞之后，能够杀死附近的癌细胞，产生“旁观者效应”(bystandereffect)；在血液中的半衰期显著缩短，有助于减少毒副作用的产生；连接子有着很高的稳定性，非肿瘤组织不会受到毒性药物的影响；能够特异性地被肿瘤中高度表达的溶酶体蛋白酶切割；可在一个抗体分子上偶联多个细胞毒性药物，提高药物抗体比例(DrugAntibody Ratio,DAR)。为ADC药物的开发提供了新的研究方向。

WO2020063673A1和WO2020063676A1公开了一些依喜替康类似物及其配体-药物偶联物，其中的小分子片段对SK-BR-3细胞和U87细胞具有增殖抑制活性。

ADC药物连接的毒素毒性强，形成ADC药物后，治疗窗口也较窄。由第一三共开发的依喜替康的ADC药物DS-8021，已成功上市。针对HER2靶点，DS-8021用单个抗体连接8个毒素的形式。但是，在后续针对Trop2靶点的临床试验中设计的药物，因为安全性的问题，降低了抗体药物比。但是偶联药物数目的减少，同时也会减少ADC药物的治疗效果。

前药和ADC，需要各种酶和靶点，这就造成了个体差异比较大，导致病人对前药的反应也参差不齐，同时易形成毒性。为了解决上述问题，开发高效低毒的喜树碱衍生物以增加治疗效果是我们研究的方向。

发明内容

本发明提供了用于制备ADC药物的前体药物毒素Dxd衍生物、其制备和用途。

本发明的一个方面提供一种如下式(I)所示的喜树碱衍生物及其立体异构体、几何异构体、互变异构体、药用盐、前药、水合物、溶剂合物或同位素标记的类似物：

式(Ⅰ)中，Z表示键或-C(O)-；

X选自C3-8环烷基，C3-8环烯基、C4-10桥环基，C5-11螺环基，3-8元杂环烷基、3-8元杂环烯基、C6-14芳基，5-12元杂芳基、C5-18的稠环基；Rx在每次出现时可独立地选自H、卤素、-OH、-NO2、-NH2、-CN、-SH、磺酸基、氨磺酰基、氨基甲酰基、取代或未取代的C1-6烷基、取代或未取代的C1-6烷氧基、取代或未取代的C1-6烷硫基、取代或未取代的C3-6环烷基、取代或未取代的C1-6烷基羰基、取代或未取代的C1-6烷氧基羰基、取代或未取代的羟基C1-6烷基、取代或未取代的羟基C1-6烷基羰基、取代或未取代的二(C1-6烷基)氨基C2-6烷氧基羰基、取代或未取代的C1-6烷基氨基、取代或未取代的二(C1-6烷基)氨基、取代或未取代的C1-6烷基氨基甲酰基、取代或未取代的二(C1-6烷基)氨基甲酰基、取代或未取代的二(C1-6烷基)氨基C2-6烷基氨基甲酰基、取代或未取代的C1-6烷基氨磺酰基、取代或未取代的二(C1-6烷基)氨磺酰基、取代或未取代的二(C1-6烷基)氨基C2-6烷基氨磺酰基、取代或未取代的C1-6烷基磺酰基、取代或未取代的C1-6烷基亚硫酰基、取代或未取代的二(C1-6烷基)膦酰基、取代或未取代的羟基羰基C1-6烷基、取代或未取代的C1-6烷基磺酰基C1-6烷基、取代或未取代的C1-6烷基亚硫酰基C1-6烷基、取代或未取代的二(C1-6烷基)膦酰基C1-6烷基、取代或未取代的羟基C2-6烷氧基、取代或未取代的氨基C1-6烷基、取代或未取代的C1-6烷基氨基C1-6烷基、取代或未取代的二(C1-6烷基)氨基C1-6烷基、取代或未取代的二(C1-6烷基)氨基乙酰基、取代或未取代的氨基C2-6烷氧基、取代或未取代的C1-6烷基氨基C2-6烷氧基、取代或未取代的二(C1-6烷基)氨基C2-6烷氧基、取代或未取代的羟基C2-6烷基氨基、取代或未取代的C1-6烷氧基C2-6烷基氨基、取代或未取代的氨基C2-6烷基氨基、取代或未取代的C1-6烷基氨基C2-6烷基氨基、取代或未取代的二(C1-6烷基)氨基C2-6烷基氨基、取代或未取代的C6-14芳基、取代或未取代的C5-10杂芳基；所述取代是指被取代基团上的一个或多个可取代位点上的氢被独立地选自卤素、羟基、氨基、硝基、巯基、氰基、C1-6烷基、卤素取代的C1-6烷基所取代；优选为被卤素、羟基、氨基、硝基、巯基、氰基、C1-3烷基、卤素取代的C1-3烷基所取代。

n选自1-5的整数；优选为1-4的整数；进一步优选为1-3的整数，更进一步优选为1或2；

其中，当Z为-C(O)-、Rx不为氢时，Z和Rx连接在X的不同的环原子上；

其中，当Z为-C(O)-，X为苯基时，Rx不为氢。

在本发明的一优选实施例中，式(I)化合物为下式(Ia)：

其中X，Rx，n的定义如上。

在本发明的一优选实施例中，式(I)化合物为下式(Ib)：

其中X，Rx，n的定义如上，-C(O)-和Rx连接在不同的环原子上。

在本发明的一优选实施例中，X选自C3-8环烷基、3-8元杂环烷基、C5-11螺环基、5-12元杂芳基、C8-18的稠环基；

在本发明的一优选实施例中，X选自C3-6环烷基、3-6元杂环烷基、C5-10螺环基、5-10元杂芳基、C8-10的稠环基；

在本发明的一优选实施例中，X选自C3-6环烷基、3-6元杂环烷基、C7-10螺环基、5-10元杂芳基、C8-10的稠环基；

在本发明的一优选实施例中，X选自C3-8环烷基，C4-10桥环基，C5-11螺环基，3-8元杂环烷基、C6-14芳基，5-12元杂芳基；

在本发明的一优选实施例中，X选自环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、双环[1.1.1]戊烷基、双环[2.2.2]辛烷基、双环[3,3,0]辛烷基、螺[3,3]庚烷基、螺[3,5]壬烷基、氮杂环丁烷基、2-氮杂螺[3.3]庚烷基、7-氮杂螺[3.5]壬烷基、7-氮杂双环[3.3.0]辛烷基、四氢吡咯基、哌啶基、苯基、吡咯基、噻吩基、呋喃基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪、噻唑基、喹啉基、苯并噻唑基、吡唑基、咪唑基，噁唑基、喹啉基、异喹啉基、吲唑基、吲哚基、苯并咪唑基

在本发明的一优选实施例中，X选自环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、双环[1.1.1]戊烷基、双环[2.2.2]辛烷基、双环[3,3,0]辛烷基、螺[3,3]庚烷基、螺[3,5]壬烷基、氮杂环丁烷基、2-氮杂螺[3.3]庚烷基、7-氮杂螺[3.5]壬烷基、7-氮杂双环[3.3.0]辛烷基、四氢吡咯基、哌啶基、苯基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、噻唑基、喹啉基、苯并噻唑基、吡唑基、咪唑基，噁唑基、喹啉基、吲唑基、苯并咪唑基；

在本发明的一优选实施例中，X选自：

在本发明的一优选实施例中，-Z-X选自：

在本发明的一优选实施例中，X选自环丁基、环戊基、环己基、氮杂环丁烷、螺[3,3]庚烷基、螺[3,5]壬烷基、四氢吡咯基、苯基、哌啶基、吡啶基、嘧啶基、噻唑基、2-氮杂螺[3.3]庚烷基、7-氮杂螺[3.5]壬烷基、顺式-7-氮杂双环[3.3.0]辛烷基、苯并噻唑基；

在本发明的一优选实施例中，X选自：

在本发明的一优选实施例中，X选自：

在本发明的一优选实施例中，式(Ib)为下式(Ib-I)：

其中p为0、1、2、3或4，q为1、2、3或4，Rx和n的定义如上。

在本发明的一优选实施例中，式(Ib)为下式(Ib-II)：

其中o为1、2或3，p为1、2或3，q为1、2或3，Rx和n的定义如上。

在本发明的一优选实施例中，X为：

在本发明的一优选实施例中，Rx在每次出现时可独立地选自H、卤素、-OH、-NO2、-NH2、-CN、-SH、磺酸基、氨磺酰基、卤代C1-6烷基、卤代C1-6烷氧基、卤代C3-6环烷基、C1-6烷基硫基、C1-6烷基羰基、C1-6烷氧基羰基、羟基C1-6烷基、羟基C1-6烷基羰基、二(C1-6烷基)氨基C2-6烷氧基羰基、C1-6烷基氨基、二(C1-6烷基)氨基、氨基甲酰基、C1-6烷基氨基甲酰基、二(C1-6烷基)氨基甲酰基、二(C1-6烷基)氨基C2-6烷基氨基甲酰基、C1-6烷基氨磺酰基、二(C1-6烷基)氨磺酰基、二(C1-6烷基)氨基C2-6烷基氨磺酰基、C1-6烷基磺酰基、C1-6烷基亚硫酰基、二(C1-6烷基)膦酰基、羟基羰基C1-6烷基、C1-6烷基磺酰基C1-6烷基、C1-6烷基亚硫酰基C1-6烷基、二(C1-6烷基)膦酰基C1-6烷基、羟基C2-6烷氧基、氨基C1-6烷基、C1-6烷基氨基C1-6烷基、二(C1-6烷基)氨基C1-6烷基、二(C1-6烷基)氨基乙酰基、氨基C2-6烷氧基、C1-6烷基氨基C2-6烷氧基、二(C1-6烷基)氨基C2-6烷氧基、羟基C2-6烷基氨基、C1-6烷氧基C2-6烷基氨基、氨基C2-6烷基氨基、C1-6烷基氨基C2-6烷基氨基、二(C1-6烷基)氨基C2-6烷基氨基、C6-14芳基、C5-10杂芳基。

在本发明的一优选实施例中，Rx在每次出现时可独立地选自H、卤素、-OH、-NO2、-NH2、-CN、-SH、氨磺酰基、磺酸基、氨基甲酰基、取代或未取代的C1-6烷基、取代或未取代的羟基C1-6烷基、取代或未取代的羟基羰基C1-6烷基、取代或未取代的氨基C1-6烷基、取代或未取代的C1-6烷基氨基C1-6烷基、取代或未取代的C1-6烷基磺酰基C1-6烷基、取代或未取代的C1-6烷基亚硫酰基C1-6烷基、取代或未取代的二(C1-6烷基)氨基C1-6烷基、取代或未取代的二(C1-6烷基)膦酰基C1-6烷基、取代或未取代的C1-6烷基氨基、取代或未取代的二(C1-6烷基)氨基、取代或未取代的羟基C2-6烷基氨基、取代或未取代的C1-6烷氧基C2-6烷基氨基、取代或未取代的氨基C2-6烷基氨基、取代或未取代的C1-6烷基氨基C2-6烷基氨基、取代或未取代的二(C1-6烷基)氨基C2-6烷基氨基、取代或未取代的C1-6烷氧基羰基、取代或未取代的羟基C1-6烷基羰基、取代或未取代的C1-6烷基硫基、取代或未取代的C1-6烷基羰基、取代或未取代的二(C1-6烷基)氨基C2-6烷氧基羰基、取代或未取代的C1-6烷基氨基甲酰基、取代或未取代的二(C1-6烷基)氨基甲酰基、取代或未取代的二(C1-6烷基)氨基C2-6烷基氨基甲酰基、取代或未取代的二(C1-6烷基)氨基乙酰基、取代或未取代的C1-6烷基羟基乙酰基、取代或未取代的C1-6烷基氨基乙酰酰基、取代或未取代的C3-6环烷基、取代或未取代的C5-10芳基、取代或未取代的C5-10杂芳基。所述取代是指被取代基团上的一个或多个可取代位点上的氢被独立地选自卤素、羟基、氨基、硝基、巯基、氰基、C1-6烷基、卤素取代的C1-6烷基所取代；优选为被卤素、羟基、氨基、硝基、巯基、氰基、C1-3烷基、卤素取代的C1-3烷基所取代。

在本发明的一优选实施例中，Rx在每次出现时可独立地选自H、卤素、-OH、-NO2、-NH2、-CN、-SH、取代或未取代的C1-6烷基、取代或未取代的羟基C1-6烷基、取代或未取代的羟基羰基C1-6烷基、取代或未取代的氨基C1-6烷基、取代或未取代的C1-6烷基氨基C1-6烷基、取代或未取代的二(C1-6烷基)氨基C1-6烷基、取代或未取代的C1-6烷基氨基、取代或未取代的二(C1-6烷基)氨基、取代或未取代的羟基C2-6烷基氨基、取代或未取代的C1-6烷氧基C2-6烷基氨基、取代或未取代的氨基C2-6烷基氨基、取代或未取代的C1-6烷基氨基C2-6烷基氨基、取代或未取代的二(C1-6烷基)氨基C2-6烷基氨基、取代或未取代的C1-6烷氧基羰基、取代或未取代的羟基C1-6烷基羰基、取代或未取代的C1-6烷基羰基、取代或未取代的二(C1-6烷基)氨基C2-6烷氧基羰基、取代或未取代的C1-6烷基氨基甲酰基、取代或未取代的二(C1-6烷基)氨基甲酰基、取代或未取代的二(C1-6烷基)氨基C2-6烷基氨基甲酰基、取代或未取代的二(C1-6烷基)氨基乙酰基、取代或未取代的C1-6烷基羟基乙酰酰基、取代或未取代的C1-6烷基氨基乙酰基。所述取代是指被取代基团上的一个或多个可取代位点上的氢被独立地选自卤素、羟基、氨基、硝基、巯基、氰基、C1-6烷基、卤素取代的C1-6烷基所取代；优选为被卤素、羟基、氨基、硝基、巯基、氰基、C1-3烷基、卤素取代的C1-3烷基所取代。

在本发明的一优选实施例中，Rx在每次出现时可独立地选自H、卤素、-OH、-NO2、-NH2、取代或未取代的C1-6烷基、取代或未取代的羟基C1-3烷基、取代或未取代的羟基羰基C1-3烷基、取代或未取代的氨基C1-3烷基、取代或未取代的C1-6烷基氨基、取代或未取代的C1-6烷氧基羰基、取代或未取代的C1-3烷基羰基、取代或未取代的C1-6烷基氨基甲酰基、取代或未取代的C1-6烷基羟基乙酰基、取代或未取代的C1-6烷基氨基乙酰基。所述取代是指被取代基团上的一个或多个可取代位点上的氢被独立地选自卤素、羟基、氨基、硝基、巯基、氰基、C1-6烷基、卤素取代的C1-6烷基所取代；优选为被卤素、羟基、氨基、硝基、巯基、氰基、C1-3烷基、卤素取代的C1-3烷基所取代。

在本发明的一优选实施例中，Rx在每次出现时可独立地选自选自H、卤素、-OH、-NO2、取代或未取代的C1-6烷基、取代或未取代的羟基C1-3烷基、取代或未取代的羟基羰基C1-3烷基、取代或未取代的C1-6烷氧基羰基、取代或未取代的C1-3烷基羰基、取代或未取代的C1-6烷基羟基乙酰基。所述取代是指被取代基团上的一个或多个可取代位点上的氢被独立地选自卤素、羟基、硝基、巯基、氰基、C1-6烷基、卤素取代的C1-6烷基所取代；优选为被卤素、羟基、硝基、巯基、氰基、C1-3烷基、卤素取代的C1-3烷基所取代；

在本发明的一优选实施例中，Rx在每次出现时可独立地选自H、卤素、-OH、-NO2、-NH2、-CN、巯基、磺酸基、取代或未取代的C1-6烷基、取代或未取代的C1-6烷氧基、取代或未取代的羟基C1-6烷基、取代或未取代的羟基羰基C1-6烷基、取代或未取代的氨基C1-6烷基、取代或未取代的C1-6烷基氨基、取代或未取代的C1-6烷氧基羰基、取代或未取代的C1-6烷基羰基、取代或未取代的C1-6烷基氨基甲酰基。其中所述取代指被取代基团上的一个或多个可取代位点上的氢被独立地选自羟基、氨基、巯基取代；

在本发明的一优选实施例中，Rx在每次出现时可独立地选自H、卤素、-OH、-NO2、-NH2、羟基C1-6烷基、C1-6烷氧基羰基、羟基C1-6烷基羰基、氨基C1-6烷基羰基；

在本发明的一优选实施例中，Rx在每次出现时可独立地选自H、卤素、-OH、-NO2、-NH2、羟基C1-6烷基；

在本发明的一优选实施例中，Rx在每次出现时可独立地选自OH、羟基甲基、羟基乙基、羟基正丙基、羟基异丙基、NH2、H、氯、叔丁氧羰基、NO2、羟甲基羰基、羟基乙基羰基、羟基正丙基羰基、羟基异丙基羰基、；

在本发明的一优选实施例中，Rx在每次出现时可独立地选自OH、羟基C1-6烷基、NH2、羟基C1-6烷基羰基；

在本发明的一优选实施例中，Rx在每次出现时可独立地选自OH、羟基C1-6烷基；

在本发明的一优选实施例中，Rx在每次出现时可独立地选自OH、羟基甲基、羟基乙基、羟基正丙基、羟基异丙基。

在本发明的一优选实施例中，X选自C3-8环烷基，Rx选自氢、羟基、羟基C1-6烷基；

在本发明的一优选实施例中，X选自C3-8环烷基，Rx选自氢、羟基、羟基甲基、羟基乙基、羟基正丙基、羟基异丙基；

在本发明的一优选实施例中，X选自C5-8桥环基，Rx选自羟基C1-6烷基，如羟基甲基、羟基乙基、羟基正丙基、羟基异丙基；

在本发明的一优选实施例中，X选自双环[1.1.1]戊烷基、双环[2.2.2]辛烷基，Rx选自羟基C1-6烷基，如羟基甲基、羟基乙基、羟基正丙基、羟基异丙基；

在本发明的一优选实施例中，X选自5-7元杂芳基，Rx选自氢、卤素、硝基、氨基；

在本发明的一优选实施例中，X选自吡啶基、嘧啶基或苯并噻唑基，Rx选自氢、卤素、硝基、氨基；

在本发明的一优选实施例中，X选自苯基，Rx选自羟基C1-6烷基；

在本发明的一优选实施例中，X选自苯基，Rx选自羟基、羟基甲基、羟基乙基、羟基正丙基、羟基异丙基；

在本发明的一优选实施例中X选自环己基，Rx选自羟基、羟甲基；

在本发明的一优选实施例中X选自环丁基，Rx选自羟基、羟甲基；

在本发明的一优选实施例中X选自环戊基，Rx选自氢、羟基；

在本发明的一优选实施例中X选自嘧啶基，Rx选自氯；

在本发明的一优选实施例中X选自吡啶基，Rx选自氢、硝基、氨基；

在本发明的一优选实施例中X选自

Rx选自氢；

在本发明的一优选实施例中X选自苯基，Rx选自羟甲基；

在本发明的一优选实施例中，X选自：

Rx选自羟基、羟基C1-6烷基，如羟基甲基、羟基乙基、羟基正丙基、羟基异丙基；

在本发明的一优选实施例中，式(Ⅰ)所示的化合物，及其立体异构体、几何异构体、互变异构体、药用盐、前药、水合物、溶剂合物或同位素标记的类似物选自如下化合物：

本发明的另一方面，提供了所述化合物及其立体异构体、几何异构体、互变异构体、药用盐、前药、水合物、溶剂合物或同位素标记的类似物在制造用于治疗增殖性疾病的药物中的用途。

所述增殖性疾病选自乳腺癌、卵巢癌、宫颈癌、子宫癌、前列腺癌、肾癌、尿道癌、膀胱癌、肝癌、胃癌、子宫内膜癌、唾液腺癌、食道癌、黑色素瘤、神经胶质瘤、神经母细胞瘤、肉瘤、肺癌、例如小细胞肺癌和非小细胞肺癌、结肠癌、直肠癌、结直肠癌、白血病、例如急性淋巴细胞白血病、急性髓细胞白血病、急性早幼粒细胞白血病、慢性髓细胞白血病、慢性淋巴细胞白血病、骨癌、皮肤癌、甲状腺癌、胰腺癌或淋巴瘤、例如霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤或复发性间变性大细胞淋巴瘤。

本发明的另一方面，提供了所述化合物及其立体异构体、几何异构体、互变异构体、药用盐、前药、水合物、溶剂合物或同位素标记的类似物在制造ADC药物中的用途。

本发明的另一方面，提供了包含所述化合物及其立体异构体、几何异构体、互变异构体、药用盐、前药、水合物、溶剂合物或同位素标记的类似物的药物组合物。所述药物组合物进一步包括药学上可接受的辅料和载体。

本发明的另一方面提供了所述化合物的制备方法。

所述化合物可通过使依喜替康或其盐(如甲磺酸盐)与相应的酮、芳基、杂芳基或羧酸化合物发生反应来制备。

所述制备方法进一步包括使由依喜替康或其盐(如甲磺酸盐)与相应的酮、芳基、杂芳基或羧酸化合物发生反应来制备得到的化合物发生还原反应或脱保护基的步骤。

在本发明的一优选实施例中，所述化合物通过通用步骤一来制备：

通用步骤一:

其中，

对应于通式(I)中的

在本发明的一优选实施例中，所述化合物通过通用步骤二来制备：

通用步骤二：

其中A_r ¹对应于通式(I)中的

Y代表卤素(如氟、氯、溴、碘)、硼、或铋；

在本发明的一优选实施例中，所述化合物通过通用步骤三来制备：

通用步骤三：

其中A_r ²对应于通式(I)中的

Y代表卤素(如氟、氯、溴、碘)、硼、或铋；

在本发明的一优选实施例中，所述化合物通过通用步骤四来制备：

通用步骤四：

其中R对应于通式(I)中的

本发明的化合物相比Dxd、依喜替康及其甲磺酸盐，以及现有技术已知的Dxd衍生物具有更好的抑制肿瘤细胞增殖的效果以及更优的“旁观者”效应，对肿瘤旁边抗原阴性的细胞有更好的杀伤作用

定义

除另有规定外，术语“烷基”指一价饱和脂肪族烃基团，包含1-20个碳原子的直链或支链基团，优选包含1-10个碳原子(即C1-10烷基)，进一步优选包含1-8个碳原子(C1-8烷基)，更优选包含1-6个碳原子(即C1-6烷基)，例如“C1-6烷基”指的是该基团为烷基，且碳链上的碳原子数量在1-6之间(具体地为1个、2个、3个、4个、5个或6个)。实例包括但不限于甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、新戊基、1,1-二甲基丙基、1,2-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、正庚基、正辛基等。

除另有规定外，术语“烯基”是指由碳原子和氢原子组成的直链或支链的具有至少一个双键的不饱和脂肪族烃基。烯基可以包含2-20个碳原子，优选包含2-10个碳原子(即C2-10烯基)，进一步优选包含2-8个碳原子(C2-8烯基)，更优选包含2-6个碳原子(即C2-6烯基)、2-5个碳原子(即C2-5烯基)、2-4个碳原子(即C2-4烯基)、2-3个碳原子(即C2-3烯基)、2个碳原子(即C2烯基)，例如“C2-6烯基”指的是该基团为烯基，且碳链上的碳原子数量在2-6之间(具体地为2个、3个、4个、5个或6个)。烯基的非限制性实例包括但不限于乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基、1-丁烯基、异丁烯基和1,3-丁二烯基等。

除另有规定外，术语“环烷基”指的是具有特定碳原子数的单环饱和脂烃基，优选地包含3-12个碳原子(即C3-12环烷基)，更优选包含3-10个碳原子(C3-10环烷基)，进一步优选3-7个碳原子(C3-7环烷基)、4-6个碳原子(C4-6环烷基)、5-6个碳原子(C5-6环烷基)。实例包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、甲基环丙基、2-乙基-环戊基、二甲基环丁基等。

除另有规定外，术语“桥环基”，是指两个碳环共用两个或两个以上碳原子的一类多环脂烃基，桥环基环包括4至20个碳原子，优选包含4至10个碳原子(包含4个、5个、6个、7、8、9个或10个碳原子)，桥环的非限制性实例包括下述：

除另有规定外，术语“螺环基”，是指分子中两个碳环共用一个碳原子的脂环烃基，螺环基环包含5至20个碳原子，优选包含5至11个碳原子(包含3个、4个、5个、6个、7、8、9、10个或11个碳原子)，螺环的非限制性实例包括下述：

除另有规定外，术语“烷氧基”指-O-烷基，所述烷基的定义同上，即包含1-20个碳原子，优选地，包含1-10个碳原子，较佳地1-8个碳原子，更佳地1～6个碳原子(具体地为1个、2个、3个、4个、5个或6个)。代表的例子包括但不限于甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基、1-甲基丙氧基、2-甲基丙氧基、叔丁氧基、戊氧基、1-甲基丁氧基、2-甲基丁氧基、3-甲基丁氧基、1,1-二甲基丙氧基、1,2-二甲基丙氧基、2,2-二甲基丙氧基、1-乙基丙氧基等。

除另有规定外，术语“烷胺基”指-NR′R″，R′和R″相同或不同，可为H或如上所定义的烷基，所述烷基的定义同上，即包含1-20个碳原子，优选地，包含1-10个碳原子，较佳地1-8个碳原子，更佳地1～6个碳原子(具体地为1个、2个、3个、4个、5个或6个)。代表的例子包括但不限于-NH(CH₃)、-N(CH₃)(CH₃)、-N(CH₂CH₃)(CH₃)、-N(CH₂CH₃)[CH(CH₃)₂]等。

除另有规定外，术语“卤素”或“卤代”是指F、Cl、Br、I。术语“卤代烷基”是指如上所定义的烷基中一个、两个或多个氢原子或全部氢原子被卤素取代。卤代烷基的代表性例子包括CCl₃、CF₃、CHCl₂、CH₂Cl、CH₂Br、CH₂I、CH₂CF₃、CF₂CF₃等。

除另有规定外，术语“杂环基”或“杂环”指具有环碳原子和1到4个环杂原子的饱和或部分不饱和单环或多环环状非芳香族取代基，包含3-20个环原子，其中1个、2个、3个或更多个环原子选自N、O或S，其余环原子为C。优选包含3-12个环原子(3-12元杂环基)，进一步优选包含3-10个环原子(3-10元杂环基)，或3-8个环原子(3-8元杂环基)，或3-6个环原子(3-6元杂环基)，或4-6个环原子(4-6元杂环基)，或5-6个环原子(5-6元杂环基)。杂原子优选1-4个，更优选1-3个(即1个、2个或3个)。单环杂环基的实例包括吡咯烷基、咪唑烷基、四氢呋喃基、二氢吡咯基、哌啶基、哌嗪基、吡喃基等。多环杂环基包括螺环、稠环和桥环的杂环基。“杂环基”可以是单环的(“单环杂环基”)或一种稠合的(“稠杂环基”或“杂稠环基”)、桥接的(“杂桥环基”或“桥环杂环基”)或螺接-稠合(“杂螺环基”或“螺环杂环基”)的环系统，如一个双环系统(“双环杂环基”)，并且可以是饱和的或可以是部分不饱和的。杂环基双环系统可以在一个或两个环中包括一个或多个杂原子。“杂环基”还包括其中如上所定义的该杂环基环被一个或多个碳环基基团稠合的环系统，其中附接点是在该碳环基或杂环基环上，或者“杂环基”还包括其中如上所定义的该杂环基环被一个或多个芳基或杂芳基基团稠合的环系统，或如上所定义的环烷基环被一个或多个杂芳基基团稠合的环系统，其中附接点是在该杂环基环或环烷基环上，并且在此类情况下，该杂环基环系统的元数为稠合后环系统原子数。在某些实施例中，杂环基的每个例子独立地是可任选取代的，例如，未取代的(一种“未取代的杂环基”)或被一个或多个取代基取代的(一种“取代的杂环基”)。含有1个杂原子的示例性3元杂环基基团包括，但不限于氮杂环丙烷基、氧杂环丙烷基(oxiranyl)和硫杂环丙烷基(thiorenyl)。含有1个杂原子的示例性4元杂环基基团包括，但不限于氮杂环丁烷基、氧杂环丁烷基和硫杂环丁烷基。含有1个杂原子的示例性5元杂环基基团包括，但不限于四氢呋喃基、二氢呋喃基、四氢苯硫基、二氢苯硫基、吡咯烷基、二氢吡咯基以及吡咯基-2,5-二酮。含有2个杂原子的示例性5元杂环基基团包括，但不限于二氧戊环基、氧杂硫杂环戊烷基、二硫杂环戊烷基以及噁唑烷-2-酮。含有3个杂原子的示例性5元杂环基基团包括，但不限于三唑啉基、噁二唑啉基和噻二唑啉基。含有1个杂原子的示例性6元杂环基基团包括，但不限于哌啶基、四氢吡喃基、二氢吡啶基以及硫杂环己烷基(thianyl)。含有2个杂原子的示例性6元杂环基基团包括，但不限于哌嗪基、吗啉基、二硫杂环己烷基以及二氧杂环己烷基。含有3个杂原子的示例性6元杂环基基团包括，但不限于三氮杂环己烷基、氧杂二嗪烷基、噻二嗪烷基、氧杂噻嗪烷基以及二氧杂氮杂环己烷基(dioxazinanyl)。含有1个杂原子的示例性7元杂环基基团包括，但不限于氮杂环庚烷基、氧杂环庚烷基和硫杂环庚烷基。含有1个杂原子的示例性8元杂环基基团包括，但不限于氮杂环辛烷基、氧杂环辛烷基和硫杂环辛烷基。稠合到一个C₆芳基环上的示例性5元杂环基基团(在此又称为一种5,6-双环杂环)包括，但不限于二氢吲哚基、异二氢吲哚基、二氢苯并呋喃基、二氢苯并噻吩基、苯并噁唑啉酮基等。稠合到一个芳基环上的示例性6元杂环基基团(在此又称为一种6,6-双环杂环)包括，但不限于四氢喹啉基、四氢异喹啉基等。

除另有规定外，“杂环烷基”是指单环、饱和的如上文定义的“杂环基”或“杂环”，环原子定义同上，即包含3-20个环原子(“3-20元杂环烷基”)，杂原子数量为1-4个(1个、2个、3个或4个)，优选1-3个(1个、2个或3个)，其中杂原子各自独立地选自N、O或S。优选包含3-12个环原子(“3-12元杂环烷基”)，进一步优选包含3-10个环原子(“3-10元杂环烷基”)，更进一步优选包含3-8个环原子(“3-8元杂环烷基”)，更进一步优选包含4-7个环原子(“4-7元杂环烷基”)，更进一步优选地包含5-10个环原子(“5-10元杂环烷基”)，更进一步优选包含5-6个环原子(“5-6元杂环烷基”)。在某些实施例中，杂环烷基的每个例子独立地是可任选取代的，例如，未取代的(一种“未取代的杂环烷基”)或被一个或多个取代基取代的(一种“取代的杂环烷基”)。上文“杂环基”或“杂环”部分已给出了部分示例性的“杂环烷基”，还包括，但不限于氮杂环丙烷基、氧杂环丙烷基、硫杂环丙烷基、氮杂环丁烷基、氧杂环丁烷基、硫杂环丁烷基、四氢呋喃基、氧杂环己烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、硫代吗啉基、氧杂硫杂环己基、噁唑烷基、二噁烷基、二硫杂环己基、噻唑烷基、吡咯烷基、吡唑烷基、咪唑啉啶等。

杂环烷基包括单环杂环烷基、螺环杂环烷基、桥环杂环烷基和稠环杂环烷基。螺环杂环烷基的非限制性实例包括：

稠环杂环烷基的非限制性实施例包括：

除另有规定外，术语“芳基”或“芳环基”表示含有6-16个碳原子，或6-14个碳原子，或6-12个碳原子，或6-10个碳原子的单环、双环和三环的芳香碳环体系，优选6-10个碳原子，术语“芳基”可以和术语“芳香环”交换使用。芳基基团的实例可以包括但不限于苯基、萘基、蒽基、菲基或芘基等。

除另有规定外，术语“杂芳基”或“杂芳环基”表示含有5-14元结构，或优选5-10元结构，或优选5-8元结构，更优选5-6元结构的芳香单环或者多环环状系统，其中1个、2个、3个或更多个环原子为杂原子且其余原子为碳，杂原子独立地选自O、N或S，杂原子数量优选为1个、2个或3个。杂芳基的实例包括但不限于呋喃基、噻吩基、噁唑基、噻唑基、异噁唑基、噁二唑基、噻二唑基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、三唑基、四唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、硫代二唑基、三嗪基、酞嗪基、喹啉基、异喹啉基、喋啶基、嘌呤基、吲哚基、异吲哚基、吲唑基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并吡啶基、苯并嘧啶基、苯并吡嗪基、苯并咪唑基、苯并酞嗪基、吡咯并[2,3-b]吡啶基、咪唑并[1,2-a]吡啶基、吡唑并[1,5-a]吡啶基、吡唑并[1,5-a]嘧啶基、咪唑并[1,2-b]哒嗪基、[1,2,4]三唑并[4,3-b]哒嗪基、[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶基、[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶基等。

除另有规定外，术语“药物上可接受的盐”或“可药用盐”是指在合理医学判断范围内适用于与哺乳动物特别是人的组织接触而无过度毒性、刺激、过敏反应等并与合理的效益/风险比相称的盐，比如胺、羧酸和其他类型化合物的医学上可接受的盐在所属领域中是被熟知的。可以在本发明化合物的最终分离和纯化期间原位制备所述盐，或单独通过将游离碱或游离酸与合适的试剂反应制备所述盐。

除另有规定外，术语“同位素衍生物”是指本发明的化合物可以以同位素示踪的或富集形式存在，含有一个或多个原子，这些原子的原子量或质量数不同于自然界中发现的最大量的原子的原子量或质量数。同位素可以是放射性或非放射性的同位素。通常用作同位素标记的同位素是：氢同位素，²H和³H；碳同位素：¹³C和¹⁴C；氯同位素：³⁵Cl和³⁷Cl；氟同位素：¹⁸F；碘同位素：¹²³I和¹²⁵I；氮同位素：¹³N和¹⁵N；氧同位素：¹⁵O,¹⁷O和¹⁸O和硫同位素³⁵S。这些同位素标记化合物可以用来研究药用分子在组织中的分布情况。尤其是²H和¹³C，由于它们容易标记且方便检测，运用更为广泛。某些重同位素，比如重氢(²H)，的取代能增强代谢的稳定性，延长半衰期从而达到减少剂量的目的而提供疗效优势的。同位素标记的化合物一般从已被标记的起始物开始，用已知的合成技术象合成非同位素标记的化合物一样来完成其合成。

除另有规定外，术语“溶剂合物”、“溶剂化物”意指本发明化合物与一个或多个溶剂分子(无论有机的还是无机的)的物理缔合。该物理缔合包括氢键。在某些情形中，例如当一个或多个溶剂分子纳入结晶固体的晶格中时，溶剂化物将能够被分离。溶剂化物中的溶剂分子可按规则排列和/或无序排列存在。溶剂合物可包含化学计量或非化学计量的溶剂分子。“溶剂合物”涵盖溶液相和可分离的溶剂合物。示例性溶剂合物包括但不限于水合物、乙醇合物、甲醇合物和异丙醇合物。溶剂化方法是本领域公知的。

除另有规定外，术语“立体异构体”是指具有相同化学构造，但原子或基团在空间上排列方式不同的化合物。立体异构体包括对映异构体、非对映异构体、构象异构体(旋转异构体)、几何异构体(顺/反)异构体、阻转异构体等。所得的任何立体异构体的混合物可以依据组分物理化学性质上的差异被分离成纯的或基本纯的几何异构体，对映异构体，非对映异构体，例如，通过色谱法和/或分步结晶法。

除另有规定外，术语“互变异构体”是指具有不同能量的可通过低能垒互相转化的结构异构体。若互变异构是可能的(如在溶液中)，则可以达到互变异构体的化学平衡。例如，质子互变异构体(也称为质子转移互变异构体)包括通过质子迁移来进行的互相转化，如酮-烯醇异构化和亚胺-烯胺异构化。价键互变异构体包括通过一些成键电子的重组来进行的互相转化。

除非其他方面表明，本发明所描述的结构式包括所有的同分异构形式(如对映异构，非对映异构，和几何异构(或构象异构))：例如含有不对称中心的R、S构型，双键的(Z)、(E)异构体，和(Z)、(E)的构象异构体。因此，本发明的化合物的单个立体化学异构体或其对映异构体，非对映异构体，或几何异构体(或构象异构体)的混合物都属于本发明的范围。

除另有规定外，术语“前药”是指在体内转化为母体药物的药物。前药通常是有用的，其可以改善一些确定的、不合需要的物理或生物学性质。物理性能通常是相关的溶解度(过高或不足的脂质或水溶性)或稳定性，而有问题的生物学特性包括代谢太快或生物利用率差，这本身可能与物理化学性质相关。例如，它们可以通过口服而被生物利用，而母体则不能。与母体药物相比，前药在药物组合物中的溶解度也有所提高。前药的一个例子，但不限于此，可以是任何本发明的化合物，其作为酯(“前药”)给药，以促进穿过细胞膜的传递，其中水溶性对迁移性有害，但一旦进入细胞内水溶性是有益的，其随后被代谢水解成羧酸，即活性实体。前药的另一个例子可以是与酸基团结合的短肽(聚氨基酸)，其中肽被代谢以显示活性部分。

具体实施方式

下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件或者按照制造厂商所建议的条件。除非另行定义，文中所使用的所有专业与科学用语与本领域专业人员所熟悉的意义相同。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法及材料皆可应用于本发明方法之中。文中所示的较佳实施方法与材料仅做示范之用。

本发明的化合物结构是通过核磁共振(NMR)或/和液质联用色谱(LC-MS)或/和液相色谱(HPLC)来确定的。NMR的测定使用的仪器是Wuhan Zhongke Niujin MagneticResonance Tecnology Co.,Ltd Quan tum-I，400MHz；LC-MS使用的仪器是Agilent，1290InfinityⅡ；HPLC使用的仪器是Thermo，ultimate 3000。

制备HPLC条件一(碳酸氢铵作为添加剂)：仪器:SHIMADZU泵:LC-20AP检测器:SPD-20A波长:214nm&254nm柱型号:SunFire C18,50*250mm,10um流动相:A:10mM NH₄HCO₃ B:Acetonitrile进样体积/浓度:3.5ml per injection in DMF,20mg/mL运行时间:30min流速:70mL/min。

制备HPLC条件二(醋酸铵作为添加剂):仪器:SHIMADZU泵:LC-20AP检测器:SPD-20A波长:214nm&254nm柱型号:Ultimate XB-C18,50*250mm,10um(PARP-05)流动相:A:10mMNH₄OAc B:Acetonitrile进样体积/浓度:4ml per injection in ACN and H₂O,10mg/mL运行时间:30min流速:70mL/min。

SFC分析和制备条件：

分析分离方法:仪器:Waters UPC2 analytical SFC(SFC-H)；柱型号:(S,S)WhelkO1,250×4.6mm I.D.,5μm；流动相:A for CO2 and B for Ethanol(0.05％DEA)；梯度:B50％；流速:2.0mL/min；背压:100bar；柱温:35℃；波长:220nm。

制备分离方法：仪器:MGⅡpreparative SFC(SFC-14)；柱型号:(S,S)Whelk O1,250×30mm I.D.,10μm；流动相:A for CO2 and B for Ethanol(0.1％NH3H2O)；梯度:B50％；流速:60mL/min；背压:100bar；柱温:38℃；波长:220nm；循环时间:～6min。

本发明实施例中的起始原料是已知的并且可以在市场上买到，或者可以采用或按照本领域已知的方法来合成。

实施例1和实施例2

(1S,9S)-9-乙基-5-氟-9-羟基-1-((反-4-羟基环己基)氨基)-4-甲基-1,2,3,9,12,15-六氢-10H,13H-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]中氮茚并[1,2-b]喹啉-10,13-二酮(化合物1)和(1S,9S)-9-乙基-5-氟-9-羟基-1-((顺-4-羟基环己基)氨基)-4-甲基-1,2,3,9,12,15-六氢-10H,13H-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]中氮茚并[1,2-b]喹啉-10,13-二酮(化合物2)

在50mL单口瓶中将依喜替康甲磺酸盐(70.0mg,0.132mmol)加入甲醇(5mL)的溶剂中，再加入4-羟基环己酮(75.2mg,0.658mmol)，氰基硼氢化钠(41.4mg,0.658mmol)。反应体系置换氩气后，在10℃下搅拌16小时得到白色悬浊液。直接将反应液浓缩，然后用DMF(N,N-二甲基甲酰胺)溶清样品，送制备HPLC(碳酸氢铵作为添加剂)纯化得到目标产物1和2。

标题化合物1或2(12.98mg,收率18.5％)，保留时间6.423分钟。LC-MS(ESI)[M+H]⁺＝534.3；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ7.75(d,J＝11.0Hz,1H),7.31(s,1H),6.55(s,1H),5.44(s,2H),5.38(d,J＝2.5Hz,2H),4.56(d,J＝4.2Hz,1H),4.38(s,1H),3.47–3.43(m,1H),3.26–3.18(m,1H),3.07–3.01(m,1H),2.75–2.68(m,1H),2.39(s,3H),2.22–2.14(m,2H),2.07–2.01(m,1H),1.92–1.83(m,5H),1.32(m,5H),0.89(t,J＝7.2Hz,3H).

标题化合物2或1(16.21mg,收率23.1％)，保留时间6.520分钟。LC-MS(ESI)[M+H]⁺＝534.3；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ7.76(d,J＝10.9Hz,1H),7.32(s,1H),6.55(s,1H),5.45(s,2H),5.41(s,2H),4.40(s,1H),4.36(d,J＝3.1Hz,1H),3.72(s,1H),3.30–3.17(m,1H),3.07–3.02(m,1H),2.89–2.78(m,1H),2.40(s,3H),2.24–2.17(m,1H),2.05–1.99(m,1H),1.91–1.50(m,11H),0.89(t,J＝7.2Hz,3H).

实施例3和实施例4

(1S,9S)-9-乙基-5-氟-9-羟基-1-((反-4-(羟甲基)环己基)氨基)-4-甲基-1,2,3,9,12,15-六氢-10H,13H-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]中氮茚并[1,2-b]喹啉-10,13-二酮(化合物3)和(1S,9S)-9-乙基-5-氟-9-羟基-1-((顺-4-(羟甲基)环己基)氨基)-4-甲基-1,2,3,9,12,15-六氢-10H,13H-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]中氮茚并[1,2-b]喹啉-10,13-二酮(化合物4)

在50mL单口瓶中依次加入依喜替康甲磺酸盐(60.0mg,0.113mmol)，甲醇(5mL)，4-羟甲基环己酮(72.3mg,0.564mmol)，氰基硼氢化钠(35.5mg,0.565mmol)。反应体系置换氩气后，在10℃下搅拌12小时。直接将反应液浓缩然后送制备HPLC(碳酸氢铵作为添加剂)纯化得到3和4。

标题化合物3或4(15.23mg,收率24.6％)，保留时间6.593分钟。LC-MS(ESI)[M+H]⁺＝548.3；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ7.76(d,J＝11.0Hz,1H),7.32(s,1H),6.55(s,1H),5.45(s,2H),5.40(s,2H),4.43(t,J＝5.2Hz,2H),3.30–3.20(m,3H),3.08–3.00(m,1H),2.71–2.65(m,1H),2.39(s,3H),2.27–2.17(m,2H),2.07–2.00(m,1H),1.93–1.77(m,6H),1.41–1.31(m,1H),1.14–0.96(m,4H),0.89(t,J＝7.2Hz,3H).

标题化合物4或3(11.45mg,收率18.5％)，保留时间13.740分钟。LC-MS(ESI)[M+H]⁺＝548.3；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ7.75(d,J＝11.0Hz,1H),7.32(s,1H),6.55(s,1H),5.45(s,2H),5.40(d,J＝2.6Hz,2H),4.37–4.32(m,2H),3.34–3.32(m,2H),3.28–3.20(m,1H),3.08–3.00(m,2H),2.39(s,3H),2.12–2.10(m,2H),1.94–1.75(m,4H),1.59–1.44(m,8H),0.89(t,J＝7.2Hz,3H).

实施例5

(1S,9S)-9-乙基-5-氟-9-羟基-1-((3-羟基环丁基)氨基)-4-甲基-1,2,3,9,12,15-六氢-10H,13H-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]中氮茚并[1,2-b]喹啉-10,13-二酮(化合物5)

在50mL单口瓶中将依喜替康甲磺酸盐(50.0mg,0.094mmol)加入甲醇(5mL)的溶剂中，再加入3-羟基环丁酮(40.42mg,0.470mmol)，氰基硼氢化钠(59.11mg,0.940mmol)。反应体系置换氩气后，在25℃下搅拌16小时得到黄色澄清液。直接将反应液浓缩然后DMF(N,N-二甲基甲酰胺)溶清样品，送制备HPLC(碳酸氢铵作为添加剂)纯化得到目标产物5(3.34mg,为顺反异构混合物，收率7.3％)。LC-MS(ESI)[M+H]⁺＝506.2；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ7.95–7.74(m,1H),7.50(s,0.33H),7.32(s,0.66H),6.55(s,1H),5.46–5.30(m,4H),4.69(s,1H),4.28(s,1H),3.22–3.14(m,1H),3.11–2.99(m,2H),2.95–2.86(m,1H),2.68–2.62(m,2H),2.40(s,3H),2.31–2.24(m,1H),2.17–2.10(m,4H),2.08–1.99(m,1H),1.93–1.85(m,1H),0.91–0.84(m,3H).

实施例6

(1S,9S)-1-((3-氨基环丁基)氨基)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-1,2,3,9,12,15-六氢-10H,13H-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]中氮茚并[1,2-b]喹啉-10,13-二酮(化合物6)

第一步：化合物6a的制备：在50mL单口瓶中将依喜替康甲磺酸盐(50mg,0.09mmol)加入甲醇(5mL)的溶剂中，再加入叔丁基(3-氧代环丁基)氨基甲酸酯(87.11mg,0.47mmol)，氰基硼氢化钠(29.56mg,0.47mmol)，反应体系置换氩气后，在25℃下搅拌16个小时得到白色悬浊液。直接在反应液中加入少量的二氯甲烷(1mL)使其变得澄清，然后加水(10mL)和二氯甲烷(10mL)使其分层，然后水相再用二氯甲烷(10mL x 3)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩拉干得到化合物6a(50mg,粗品)，为白色固体。

第二步：化合物6的制备：在50mL单口瓶中将化合物6a(50mg,0.08mmol)加入二氯甲烷(5mL)的溶剂中，再加入三氟乙酸(1mL)。反应体系无需置换氩气，在25℃下搅拌2小时得到黄色澄清液。LCMS显示主要是目标产物。直接将反应液浓缩然后用乙腈和水溶清样品，送制备HPLC(醋酸铵作为添加剂)纯化得到目标产物6(27.62mg,顺反异构混合物，两步收率60.5％)。LC-MS(ESI)[M+H]⁺＝505.3；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ7.75(d,J＝11.0Hz,1H),7.32(s,1H),5.45–5.31(m,4H),4.22–4.17(m,1H),3.62–3.53(m,3H),3.25–3.17(m,2H),3.03–2.97(m,3H),2.38(s,3H),2.25–2.18(m,1H),2.12–2.03(m,1H),1.99–1.94(m,1H),1.91–1.83(m,4H),1.57–1.44(m,1H),0.89(t,J＝7.2Hz,3H).

实施例7

(1S,9S)-9-乙基-5-氟-9-羟基-1-((3-(羟甲基)环丁基)氨基)-4-甲基-1,2,3,9,12,15-六氢-10H,13H-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]中氮茚并[1,2-b]喹啉-10,13-二酮(化合物7)

在25mL单口瓶中将依喜替康甲磺酸盐(60.0mg,0.113mmol)加入无水甲醇(5mL)的溶剂中，再加入3-(羟甲基)-环丁酮(56.5mg,0.565mmol)，氰基硼氢化钠(36.0mg,0.565mmol)。反应体系置换氩气后，在25℃下搅拌16小时得到白色悬浊液。直接将反应液浓缩然后用DMF溶清样品，过滤后送制备HPLC(碳酸氢铵作为添加剂)纯化得到目标产物7(21.15mg,顺反异构混合物，收率36％)。LC-MS(ESI)[M+H]⁺＝520.2；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ7.78–7.74(m,1H),7.52(s,0.5H),7.32(s,0.5H),7.22(s,0.5H),6.55(s,0.5H),5.47–5.26(m,3H),4.73–4.66(m,2H),4.26(s,1H),3.53–3.43(m,2H),3.25–3.15(m,2H),3.05–2.97(m,1H),2.38(s,3H),2.35–1.80(m,9H),1.55–1.45(m,1H),0.93–0.80(m,3H).

实施例8和实施例9

(1S,9S)-1-(((1R)-3-氨基环戊基)氨基)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-1,2,3,9,12,15-六氢-10H,13H-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]中氮茚并[1,2-b]喹啉-10,13-二酮(化合物8)和(1S,9S)-1-(((1S)-3-氨基环戊基)氨基)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-1,2,3,9,12,15-六氢-10H,13H-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]中氮茚并[1,2-b]喹啉-10,13-二酮(化合物9)

第一步：化合物8a的制备：取50ml单口瓶，加入依喜替康甲磺酸盐(70mg,0.132mmol)，加入无水甲醇(21mL)，再加入N-(3-氧代环戊基)氨基甲酸叔丁酯(128.1mg,0.643mmol)，再加入氰基硼氢化钠(32mg,0.804mmol)，置换氮气保护，在25℃下搅拌16小时得到白色悬浊液。TLC(DCM/MeOH＝10/1)点板显示有原料和产物点，比例为1/1，再添加硼氢化钠(50mg,0.7956mmol)，2.5小时后，TLC(DCM/MeOH＝10/1)显示还有原料。再添加N-(3-氧代环戊基)氨基甲酸叔丁酯(100mg,0.5mmol)，硼氢化钠(100mg,1.5912mmol)，过夜。溶液变澄清。加入水(20mL)，二氯甲烷(20mL)萃取。再用二氯甲烷萃取五次(50mL x 5)，加入饱和食盐水洗三次(20mL x 3)。无水硫酸钠干燥，旋蒸，油泵拉干得化合物8a。

第二步：化合物8和化合物9的制备：将第一步得到的固体放入25mL的单口瓶中，加入二氯甲烷(5mL)溶解产物，再加入三氟乙酸(1mL)，室温(15℃)搅拌2.5小时。反应结束后，将溶液旋干，残留物通过制备HPLC(碳酸氢铵作为添加剂)纯化得到目标产物8和9。

标题化合物8或9(1.71mg,两种构型混合物,两步收率2.5％)，保留时间9.060分钟。LC-MS(ESI)[M+H]⁺＝519.5；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ7.74(d,J＝11.2Hz,1H),7.30(s,1H),6.54(brs,1H),5.48–5.30(m,4H),4.28–4.20(m,1H),3.60–3.53(m,1H),3.50–3.40(m,2H),3.25–3.15(m,2H),3.07–2.98(m,1H),2.37(s,3H),2.25–2.15(m,1H),2.14–2.07(m,1H),2.06–1.97(m,2H),1.93–1.75(m,4H),1.73–1.68(m,1H),1.55–1.46(m,1H),1.36–1.20(m,1H),0.91–0.87(m,3H).

标题化合物9或8(10.13mg,两种构型混合物,两步收率14.8％)，保留时间9.097分钟。LC-MS(ESI)[M+H]⁺＝519.5；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ7.76(d,J＝11.2Hz,1H),7.32(s,1H),6.58(brs,1H),5.48–5.36(m,4H),4.30–4.24(m,1H),3.68–3.53(m,3H),3.23–3.15(m,2H),3.07–2.96(m,1H),2.39(s,3H),2.25–2.10(m,2H),2.08–1.96(m,1H),1.94–1.80(m,5H),1.77–1.68(m,1H),1.55–1.46(m,1H),1.26–1.20(m,1H),0.89(t,J＝7.2Hz,1H).

实施例10和实施例11

(1S,9S)-9-乙基-5-氟-9-羟基-1-((3-羟基环戊基)氨基)-4-甲基-1,2,3,9,12,15-六氢-10H,13H-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]中氮茚并[1,2-b]喹啉-10,13-二酮(化合物10)和(1S,9S)-1-(环戊基氨基)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-1,2,3,9,12,15-六氢-10H,13H-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]中氮茚并[1,2-b]喹啉-10,13-二酮(化合物11)

在50mL单口瓶中将依喜替康甲磺酸盐(50mg,0.09mmol)加入甲醇(5mL)的溶剂中，再加入3-羟基环戊酮(75.34mg,0.75mmol)，氰基硼氢化钠(35.47mg,0.56mmol)，反应体系置换氩气后，在25℃下搅拌4小时，LCMS显示原料还有很多剩余，有产物生成。然后补加3-羟甲基环戊酮(30mg,0.30mmol)，氰基硼氢化钠(20mg,0.32mmol)，在25℃下搅拌12小时。直接将反应液浓缩然后用DMF溶清送制备HPLC(醋酸铵作为添加剂)纯化得到目标产物10和11。

标题化合物10(2.74mg,混合物,收率10.6％)。LC-MS(ESI)[M+H]⁺＝520.4；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ7.76(d,J＝11.2Hz,1H),7.32(s,1H),6.55(s,1H),5.45–5.40(m,4H),4.36–4.27(m,1H),4.15–4.07(m,1H),3.31–3.28(m,1H),3.25–3.18(m,1H),3.07–2.98(m,1H),2.39(s,3H),2.28–2.23(m,1H),2.19–2.10(m,1H),2.06–1.98(m,1H),1.96–1.81(m,5H),1.78–1.72(m,1H),1.70–1.57(m,2H),1.46–1.33(m,1H),0.89(t,J＝7.2Hz,3H).

标题化合物11(2.30mg,收率5.1％)。LC-MS(ESI)[M+H]⁺＝504.5；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ7.73(d,J＝11.2Hz,1H),7.30(s,1H),6.54(s,1H),5.44–5.30(m,4H),4.25(t,J＝4.4Hz,1H),3.43–3.41(m,1H),3.25–3.20(m,1H),3.04-2.97(m,1H),2.38(s,3H),2.20–2.09(m,2H),1.95–1.68(m,7H),1.62–1.50(m,3H),1.46–1.38(m,1H),0.88(t,J＝7.2Hz,3H).

实施例12

(1S,9S)-1-((2,5-二氯嘧啶-4-基)氨基)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-1,2,3,9,12,15-六氢-10H,13H-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]中氮茚并[1,2-b]喹啉-10,13-二酮(化合物12)

取10mL单口瓶，加入甲磺酸伊喜替康(30mg,0.06mmol)，2,4,5-三氯嘧啶(15.53mg,0.08mmol)，异丙醇(2mL)和N,N-二异丙基乙胺(51.06mg,0.4mmol)，反应体系置换氩气三次后，加热至80℃搅拌16个小时,反应液呈红棕色澄清溶液。将反应液旋干，加入甲醇(2mL)溶清样品，送至制备(Prep-HPLC)分离纯化得到化合物12(2mg,收率5.4％)。LC-MS(ESI)[M+H]⁺＝582.3；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ8.55(d,J＝8.0Hz,1H),8.39(s,1H),7.84(d,J＝10.8Hz,1H),7.33(s,1H),6.56(s,1H),5.90(d,J＝6.4Hz,1H),5.45–5.38(m,2H),5.22–5.12(m,2H),3.32–3.25(m,1H),3.23–3.13(m,1H),2.43(s,3H),2.36–2.25(m,2H),1.93–1.78(m,2H),0.89(t,J＝7.2Hz,3H).

实施例13

(1S,9S)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-1-(吡啶-2-基氨基)-1,2,3,9,12,15-六氢-10H,13H-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]中氮茚并[1,2-b]喹啉-10,13-二酮(化合物13)

在25mL单口瓶中，将依喜替康甲磺酸盐(60.0mg,0.14mmol)，2-溴吡啶(130.62mg,0.83mmol)，碳酸铯(89.79mg,0.28mmol)，2-二环己基磷-2',6'-二异丙氧基-1,1'-联苯(32.7mg，0.07mmol)，加入到甲苯(8mL)的溶剂中，再加入甲磺酸(2-二环己基膦基-2',6'-二异丙氧基-1,1'-联苯基)(2-氨基-1,1'-联苯-2-基)钯(II)(28.5mg,0.035mmol)。反应体系置换氩气三次后，在85℃下搅拌6小时，TLC(DCM:MeOH＝10:1)监测有新点产生，且有原料剩余。反应液用硅藻土过滤，加10mL乙酸乙酯和10mL饱和食盐水萃取分液，无水硫酸钠干燥旋至剩3mL溶剂，制备板分离Pre-TLC(DCM:MeOH＝15:1)纯化得到粗产品产品，再用制备HPLC(醋酸铵作为添加剂)分离纯化得到化合物13(2mg,收率2.8％)，。LC-MS(ESI)[M+H]⁺＝513.2；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ8.10(d,J＝4.2Hz,1H),7.82(d,J＝11.2Hz,1H),7.50–7.46(m,1H),7.32(s,1H),7.12(d,J＝8.8Hz,1H),6.64–6.60(m,2H),6.55(s,1H),5.84–5.80(m,1H),5.40(s,2H),5.17(s,2H),3.28–3.15(m,2H),2.42(s,3H),2.28–2.20(m,2H),1.90–1.76(m,2H),0.88(t,J＝7.2Hz,3H).

实施例14和实施例15

(1S,9S)-1-((顺-4-氨基环己基)氨基)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-1,2,3,9,12,15-六氢-10H,13H-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]中氮茚并[1,2-b]喹啉-10,13-二酮(化合物14)和(1S,9S)-1-((反)-4-氨基环己基)氨基)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-1,2,3,9,12,15-六氢-10H,13H-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]中氮茚并[1,2-b]喹啉-10,13-二酮(化合物15)

第一步：在25mL单口瓶中将依喜替康甲磺酸盐(60.0mg,0.113mmol)溶于无水甲醇(5mL)的溶剂中，加入(4-氧代环己基)氨基甲酸叔丁酯(120mg,0.565mmol)，氰基硼氢化钠(36.0mg,0.565mmol)，反应体系置换氩气后，在35℃下搅拌16h得到白色悬浊液。TLC(DCM:MeOH＝10:1)显示有原料剩余，补加(4-氧代环己基)氨基甲酸叔丁酯(120mg,0.565mmol)，氰基硼氢化钠(36.0mg,0.565mmol)，35℃下搅拌8小时。TLC(DCM:MeOH＝10:1)和LCMS显示反应完全。在反应液中加入二氯甲烷(60mL)用饱和食盐水(20mL x 2)洗，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤浓缩得粗品化合物14a(60mg)。LCMS(ESI):[M+H]⁺＝633.4。

第二步：把粗品化合物14a(60mg)溶于无水二氯甲烷(10mL)，缓慢滴加三氟乙酸(1mL)，室温(10℃)反应1h。TLC(DCM:MeOH＝10:1)显示反应完全。将反应液浓缩后，油泵抽干，送Prep-HPLC(醋酸铵作为添加剂)纯化得到目标产物14和15。

标题化合物14或15(19.11mg,两步收率31.8％)，保留时间8.980分钟。LC-MS(ESI)[M+H]⁺＝533.3；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ7.74(d,J＝10.8Hz,1H),7.31(s,1H),6.67(s,1H),5.45–5.35(m,4H),4.38(s,1H),3.26–3.19(m,1H),3.06–2.96(m,1H),2.72-2.65(m,3H),2.38(s,3H),2.23–2.13(m,2H),2.07–2.01(m,1H),1.95–1.82(m,7H),1.25–1.10(m,4H),0.89(t,J＝7.2Hz,3H).

标题化合物15或14(16.02mg,两步收率26.6％)，保留时间10.077分钟。LC-MS(ESI)[M+H]⁺＝533.3；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ7.73(d,J＝10.8Hz,1H),7.32(s,1H),5.45–5.33(m,4H),4.30(s,1H),3.29–3.17(m,2H),3.05–2.95(m,2H),2.87–2.80(m,1H),2.37(s,3H),2.15–2.06(m,2H),1.92–1.78(m,4H),1.67–1.52(m,8H),0.88(t,J＝7.2Hz,3H).

实施例16

(1S,9S)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-1-(吡咯烷-3-基氨基)-1,2,3,9,12,15-六氢-10H,13H-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]中氮茚并[1,2-b]喹啉-10,13-二酮(化合物16)

第一步：取10mL单口瓶，将依喜替康甲磺酸盐(80mg,0.15mmol)，3-氧吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(139.38mg,0.75mmol)溶于甲醇(5mL)，最后加入氰基硼氢化钠(47.29mg,0.75mmol)，在氩气保护下25度反应16个小时。旋干，得到粗品化合物17(111mg)。

第二步：将得到粗品化合物17(111mg,0.18mmol)溶于二氯甲烷(5mL)中，再加入三氟乙酸(1mL)，室温反应1小时。TLC(DCM/MeOH＝5/1)，显示无原料。有一个极性大于原料的点出现。LCMS显示主峰为目标产物。旋干，送制备(醋酸铵作为添加剂)纯化得到16(12.89mg,两步收率17.1％)。LC-MS(ESI)[M+H]⁺＝505.2；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ7.77–7.21(m,1H),7.32(s,1H),5.45–5.32(m,4H),4.32–4.21(m,1H),3.56–3.46(m,2H),3.26–3.17(m,2H),3.07–2.98(m,2H),2.86–2.76(m,1H),2.66–2.58(m,1H),2.38(s,3H),2.26–1.57(m,8H),0.88(t,J＝7.2Hz,3H).

实施例17

(1S,9S)-N-Boc-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-1-(吡咯烷-3-基氨基)-1,2,3,9,12,15-六氢-10H,13H-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]中氮茚并[1,2-b]喹啉-10,13-二酮(化合物17)

化合物17的合成同实施例16。LC-MS(ESI)[M+H]⁺＝605.3；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ7.76(d,J＝11.2Hz,1H),7.32(s,1H),6.55(s,1H),5.47–5.33(m,4H),4.36–4.29(m,1H),3.65–3.58(m,1H),3.54–3.41(m,2H),3.35–3.22(m,2H),3.14–3.04(m,2H),2.39(s,3H),2.29–2.17(m,1H),2.14–2.01(m,2H),1.95–1.79(m,3H),1.46–1.38(m,10H),0.88(t,J＝7.2Hz,3H).

实施例18

(1S,9S)-N-Boc-1-((2-氮杂螺[3.3]庚烷-6-基)氨基)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-1,2,3,9,12,15-六氢-10H,13H-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]中氮茚并[1,2-b]喹啉-10,13-二酮(化合物18)

取50mL的单口瓶，加入依喜替康甲磺酸盐(40mg,0.08mmol)，6-氧代-2-氮杂螺环[3.3]庚烷-2-羧酸叔丁酯(79.49mg,0.38mmol)，氰基硼氢化钠(22.51mg,0.38mmol)和甲醇(5mL)，氮气保护下，25℃搅拌16小时得到棕色澄清溶液。加入水(5mL)，用乙酸乙酯萃取三遍(5mL x 3)，将有机相合并之后用食盐水(20mL x 2)反洗，无水硫酸钠干燥。随即拌样过柱(PE:EtOAc＝1:1)得到80mg粗产品，取40mg用甲醇(4mL)溶解之后送至制备(Prep-HPLC)分离纯化得到化合物18(2.95mg,收率5.2％)。LC-MS(ESI)[M+H]⁺＝631.6；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ7.72(d,J＝11.2Hz,1H),7.29(s,1H),6.53(s,1H),5.43(s,2H),5.40–5.25(m,2H),4.19(s,1H),3.90-3.60(m,4H),3.33-3.25(m,2H),3.23–3.13(m,1H),3.02–2.93(m,1H),2.46–2.40(m,2H),2.35(s,3H),2.20–2.09(m,1H),2.02–1.79(m,5H),1.36(s,9H),0.87(t,J＝7.2Hz,3H).

实施例19

(1S,9S)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-1-((5-硝基吡啶-2-基)氨基)-1,2,3,9,12,15-六氢-10H,13H-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]中氮茚并[1,2-b]喹啉-10,13-二酮(化合物19)

取10mL单口瓶，将依喜替康甲磺酸盐(40mg,0.08mmol)，溶于异丙醇(5mL)，再加入2-氟-5-硝基吡啶(42.77mg,0.3mmol)，N,N-二异丙基乙胺(77.8mg,0.6mmol)，置换氮气保护，油浴加热70度反应16个小时。溶液呈悬浊状。TLC(DCM:MeOH＝10:1)显示有原料和产物点。将反应液过滤，收集固体，在真空条件下旋干，在用油泵拉干。将拉干后的样品送制备HPLC纯化得到目标产物19(7mg，收率15.7％)。LC-MS(ESI)[M+H]⁺＝558.2；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ9.07(d,J＝2.8Hz,1H),8.64(d,J＝8.4Hz,1H),8.26(d,J＝9.2Hz,1H),7.86(d,J＝10.8Hz,1H),7.33(s,1H),6.75–6.68(m,1H),6.55(s,1H),6.00(br,1H),5.40(s,2H),5.26–5.08(m,2H),3.25–3.21(m,2H),2.44(s,3H),2.28–2.20(m,2H),1.92–1.83(m,2H),0.88(t,J＝7.2Hz,3H).

实施例20

(1S,9S)-1-((2-氯嘧啶-4-基)氨基)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-1,2,3,9,12,15-六氢-10H,13H-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]中氮茚并[1,2-b]喹啉-10,13-二酮(化合物20)

化合物20的合成同化合物12，用2,4-二氯嘧啶代替2,4,5-三氯嘧啶。LC-MS(ESI)[M+H]⁺＝548.2；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ8.69–8.65(m,1H),8.27–8.23(m,1H),8.03(d,J＝10.8Hz,1H),7.52(s,1H),6.78–6.72(m,2H),6.01(s,1H),5.61(s,2H),5.49–5.32(m,2H),3.44–3.38(m,2H),2.62(s,3H),2.56–2.41(m,2H),2.13–2.01(m,2H),1.08(t,J＝7.2Hz,3H).

实施例21

(1S,9S)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-1-((3-硝基吡啶-2-基)氨基)-1,2,3,9,12,15-六氢-10H,13H-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]中氮茚并[1,2-b]喹啉-10,13-二酮(化合物21)

化合物21的合成同化合物19，用2-氟-3-硝基吡啶代替2-氟-5-硝基吡啶。LC-MS(ESI)[M+H]⁺＝558.2；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ8.67(d,J＝8.4Hz,1H),8.62–8.55(m,2H),7.82(d,J＝10.8Hz,1H),7.31(s,1H),6.98–6.94(m,1H),6.54(s,1H),6.27–6.21(m,1H),5.42–5.32(m,2H),5.21–5.05(m,2H),3.31–3.18(m,2H),2.48–2.42(m,4H),2.36–2.31(m,1H),1.92–1.80(m,2H),0.87(t,J＝7.2Hz,3H).

实施例22

(1S,9S)-1-(苯并[d]噻唑-2-基氨基)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-1,2,3,9,12,15-六氢-10H,13H-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]中氮茚并[1,2-b]喹啉-10,13-二酮(化合物22)

取25mL单口瓶，加入依喜替康甲磺酸盐(40mg,0.08mmol)，异丙醇(2mL)，再加入2-氟苯并噻唑(34.58mg,0.23mmol)，N,N-二丙基乙胺(58.35mg,0.45mmol)，反应体系置换氩气后，在50℃下搅拌15个小时得到黄色悬浊液。抽滤，滤饼用N,N-二甲基甲酰胺(1.5mL)溶清，送制备HPLC(醋酸铵作为添加剂)纯化得到目标产物22(2.76mg，收率6.06％)。LC-MS(ESI)[M+H]⁺＝569.2；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ8.62(d,J＝8.8Hz,1H),7.85(d,J＝11.2Hz,1H),7.75(d,J＝7.6Hz,1H),7.50(d,J＝8.0Hz,1H),7.32–7.28(m,2H),7.10(t,J＝8.4Hz,1H),6.54(s,1H),5.84–5.78(m,1H),5.40(s,2H),5.34(s,2H),3.26–3.24(m,2H),2.44(s,3H),2.35–2.31(m,2H),1.90–1.82(m,2H),0.87(t,J＝7.6Hz,3H).

实施例23

(1S,9S)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-1-((5-硝基嘧啶-2-基)氨基)-1,2,3,9,12,15-六氢-10H,13H-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]中氮茚并[1,2-b]喹啉-10,13-二酮(化合物23)

取25mL单口瓶，加入依喜替康甲磺酸盐(40mg,0.08mmol)，异丙醇(3mL)，再加入2-氯-5-硝基嘧啶(36.01mg,0.23mmol)，N,N-二丙基乙胺(77.80mg,0.61mmol)，反应体系置换氩气后，在50℃下搅拌6个小时得到黄色悬浊液。旋干，残留物用DMF(N,N-二甲基甲酰胺，1.5mL)溶清，送制备HPLC(醋酸铵作为添加剂)纯化得到目标产物23(0.93mg,收率2.1％)。LC-MS(ESI)[M+H]⁺＝559.2；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ9.44(d,J＝8.8Hz,1H),9.23(dd,J＝14.4Hz,3.2Hz,2H),7.85(d,J＝10.8Hz,1H),7.34(s,1H),6.55(s,1H),5.93–5.88(m,1H),5.40(d,J＝4.0Hz,2H),5.17(s,2H),3.22–3.17(m,2H),2.42(s,3H),2.36–2.32(m,2H),1.88–1.84(m,2H),0.88(t,J＝7.2Hz,3H).

实施例24

(1S,9S)-1-((7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)氨基)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-1,2,3,9,12,15-六氢-10H,13H-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]中氮茚并[1,2-b]喹啉-10,13-二酮(化合物24)

化合物24的合成同化合物16。LC-MS(ESI)[M+H]⁺＝559.4；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ7.75(d,J＝11.2Hz,1H),7.32(s,1H),6.56(s,1H),5.45–5.33(m,4H),4.22–4.20(m,1H),3.24–3.18(m,2H),3.04–2.98(m,1H),2.71–2.67(m,2H),2.66–2.59(m,2H),2.39(s,3H),2.23–2.14(m,3H),1.98–1.85(m,5H),1.58–1.46(m,6H),0.89(t,J＝7.2Hz,3H).

实施例25

(1S,9S)-N-Boc-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-1-(哌啶-4-基氨基)-1,2,3,9,12,15-六氢-10H,13H-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]中氮茚并[1,2-b]喹啉-10,13-二酮(化合物25)

在50mL单口瓶中将依喜替康甲磺酸盐(30mg,0.06mmol)加入甲醇(5mL)的溶剂中，再加入N-叔丁氧羰基-4-哌啶酮(56.23mg,0.28mmol)，氰基硼氢化钠(17.73mg,0.28mmol)，反应体系置换氩气后，在25℃下搅拌16个小时得到白色悬浊液。LCMS显示还有一点原料剩余，然后补加N-叔丁氧羰基-4-哌啶酮(56.23mg,0.28mmol)，氰基硼氢化钠(17.73mg,0.28mmol)，再反应5小时后，TLC(DCM:MeOH＝10:1)发现原料基本反应完，主要是目标产物点。直接在反应液中加入少量的二氯甲烷(1mL)使其变得澄清，然后送制备HPLC(醋酸铵作为添加剂)纯化得到目标产物25(21.29mg,收率为57.4％)。LC-MS(ESI)[M+H]⁺＝619.3；¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆):δ7.75(d,J＝11.2Hz,1H),7.32(s,1H),6.55(s,1H),5.45–5.38(m,4H),4.42(s,1H),3.98–3.86(m,2H),3.28–3.21(m,1H),3.05–2.89(m,4H),2.39(s,3H),2.24–2.17(m,1H),2.11–2.00(m,3H),1.94–1.78(m,3H),1.42(s,9H),1.29–1.22(m,2H),0.88(t,J＝7.2Hz,3H).

实施例26

(1S,9S)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-1-(哌啶-4-基氨基)-1,2,3,9,12,15-六氢-10H,13H-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]中氮茚并[1,2-b]喹啉-10,13-二酮(化合物26)

在50mL单口瓶中将化合物25(70mg,0.11mmol)加入二氯甲烷/三氟乙酸(5mL/1mL)的溶剂中，反应体系置换氩气后，在25℃下搅拌2个小时得到淡黄色澄清液。将反应液浓缩拉干后得到黄色固体粗品，用乙腈(2mL)和水(3mL)将黄色固体粗品溶清，然后送制备HPLC(醋酸铵作为添加剂)纯化得到目标产物26(47.43mg,收率83.1％)。LC-MS(ESI)[M+H]⁺＝519.3；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ7.74(d,J＝11.2Hz,1H),7.31(s,1H),5.45–5.31(m,4H),4.40(s,1H),3.24–3.19(m,1H),3.10–3.01(m,3H),2.89–2.83(m,1H),2.65–2.58(m,2H),2.38(s,3H),2.20–2.14(m,3H),1.96–1.79(m,6H),1.34–1.25(m,2H),0.89(t,J＝7.2Hz,3H).

实施例27

(1S,9S)-9-乙基-5-氟-9-羟基-1-((1-(2-羟基乙基)哌啶-4-基)氨基)-4-甲基-1,2,3,9,12,15-六氢-10H,13H-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]中氮茚并[1,2-b]喹啉-10,13-二酮(化合物27)

在50mL单口瓶中将化合物26(20.0mg,0.04mmol)加入甲醇(1mL)的溶剂中，再加入1,4-二氧六环-2,5-二醇(23.16mg,0.19mmol)，氰基硼氢化钠(12.12mg,0.19mmol)。反应体系置换氩气后，在25℃下搅拌16小时得到无色澄清液体。直接将反应液送制备HPLC(醋酸铵作为添加剂)纯化得到目标产物27(7.5mg,收率34.2％)。LC-MS(ESI)[M+H]⁺＝563.3；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ7.75(d,J＝10.8Hz,1H),7.32(s,1H),6.55(s,1H),5.46–5.32(m,4H),4.42–4.37(m,1H),3.57–3.53(m,2H),3.24–3.19(m,1H),3.05–2.75(m,5H),2.39(s,3H),2.25–1.79(m,11H),1.49–1.39(m,2H),0.89(t,J＝7.2Hz,3H).

实施例28

(1S,9S)-1-((5-氨基吡啶-2-基)氨基)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-1,2,3,9,12,15-六氢-10H,13H-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]中氮茚并[1,2-b]喹啉-10,13-二酮(化合物28)

取25mL单口瓶，加入化合物19(32mg,0.05mmol)，溶于四氢呋喃(5mL)，再加入钯碳(25mg)，置换氢气，油浴加热40度反应2个小时。TLC(DCM:MeOH＝10:1)显示无原料，有新点生成。用硅藻土过滤钯碳，收集滤液，在真空条件下浓缩。将拉干后的样品送制备HPLC纯化得到目标产物28(4.46mg,收率14.4％)。LC-MS(ESI)[M+H]⁺＝528.2；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ7.80(d,J＝11.2Hz,1H),7.56(d,J＝2.8Hz,1H),7.31(s,1H),6.92(dd,J＝8.4Hz,J＝2.8Hz,1H),6.54(s,1H),6.46(d,J＝8.8Hz,1H),6.25(d,J＝8.8Hz,1H),5.63–5.58(m,1H),5.41(s,2H),5.26–5.13(m,2H),4.46(brs,2H),3.24–3.10(m,2H),2.41(s,3H),2.25–2.18(m,2H),1.91–1.81(m,2H),0.88(t,J＝7.2Hz,3H).

实施例29

(1S,9S)-N-Boc-1-((7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)氨基)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-1,2,3,9,12,15-六氢-10H,13H-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]中氮茚并[1,2-b]喹啉-10,13-二酮(化合物29)

化合物29的合成同化合物18。LC-MS(ESI)[M+H]⁺＝659.4；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ7.75(d,J＝11.2Hz,1H),7.32(s,1H),6.55(s,1H),5.45–5.35(m,4H),4.25–4.20(m,1H),3.47–3.43(m,1H),3.31–3.21(m,2H),3.24–3.17(m,3H),3.04–2.98(m,1H),2.39(s,3H),2.24–2.16(m,3H),2.03–1.77(m,4H),1.62–1.54(m,2H),1.50–1.40(m,13H),0.89(t,J＝7.2Hz,3H).

实施例30和实施例31

(1S,9S)-9-乙基-5-氟-9-羟基-1-((顺-3-(羟甲基)环丁基)氨基)-4-甲基-1,2,3,9,12,15-六氢-10H,13H-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]中氮茚并[1,2-b]喹啉-10,13-二酮(化合物30)和(1S,9S)-9-乙基-5-氟-9-羟基-1-((反-3-(羟甲基)环丁基)氨基)-4-甲基-1,2,3,9,12,15-六氢-10H,13H-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]中氮茚并[1,2-b]喹啉-10,13-二酮(化合物31)

化合物30和31由化合物7经SFC拆分(方法见前面)得到，顺反构型未确定。

化合物30或31，保留时间15.456分钟：LC-MS(ESI)[M+H]⁺＝520.2；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ7.75(d,J＝10.8Hz,1H),7.32(s,1H),6.55(s,1H),5.45–5.36(m,4H),4.47–4.42(m,1H),4.25–4.22(m,1H),3.29–3.17(m,4H),3.03–2.97(m,1H),2.38(s,3H),2.35–2.19(m,4H),2.03–1.84(m,4H),1.53–1.43(m,2H),0.89(t,J＝7.2Hz,3H).

化合物31或30，保留时间18.084分钟：LC-MS(ESI)[M+H]⁺＝520.3；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ7.93(d,J＝10.8Hz,1H),7.51(s,1H),6.74(s,1H),5.64–5.56(m,4H),4.73–4.69(m,1H),4.45–4.38(m,1H),3.73–3.61(m,3H),3.45–3.36(m,1H),3.22–3.16(m,1H),2.57(s,3H),2.55–2.01(m,10H),1.08(t,J＝7.2Hz,3H).

实施例32

(1S,9S)-1-((3-氨基吡啶-2-基)氨基)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-1,2,3,9,12,15-六氢-10H,13H-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]中氮茚并[1,2-b]喹啉-10,13-二酮(化合物32)

在25mL单口瓶中加入化合物21(25mg,0.045mmol)，用无水四氢呋喃(5mL)溶解，氮气换气后加入10％湿钯炭(5mg)，氢气置换三次，加氢气球，室温反应3小时，TLC(DCM:MeOH＝10:1)显示反应完全。反应液过滤后浓缩，用DMF(8mL)溶解送Prep-HPLC，纯化得目标产物32(14.92mg，收率62.9％)。LC-MS(ESI)[M+H]⁺＝528.2；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ7.82(d,J＝10.8Hz,1H),7.51–7.48(m,1H),7.32(s,1H),6.82–6.79(m,1H),6.55–6.49(m,2H),6.01–5.93(m,2H),5.40(s,2H),5.17(s,2H),4.82(s,2H),3.25–3.16(m,2H),2.43(s,3H),2.28–2.24(m,2H),1.92–1.82(m,2H),0.88(t,J＝7.2Hz,3H).

实施例33

(1S,9S)-9-乙基-5-氟-9-羟基-1-((1-(2-羟基乙酰基)哌啶-4-基)氨基)-4-甲基-1,2,3,9,12,15-六氢-10H,13H-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]中氮茚并[1,2-b]喹啉-10,13-二酮(化合物33)

在50mL单口瓶中将化合物26(20mg,0.04mmol)加入N,N-二甲基甲酰胺(4mL)的溶剂中，再加乙醇酸(11.73mg,0.15mmol)，1-羟基苯并三唑(20.84mg,0.15mmol)，1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(29.57mg,0.15mmol)，反应体系置换氩气后，在25℃下搅拌2个小时得到无色澄清液。将反应液用滤头过滤后直接送制备HPLC(醋酸铵作为添加剂)纯化得到目标产物33(11.40mg,收率49.4％)。LC-MS(ESI)[M+H]⁺＝577.3；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ7.76(d,J＝11.2Hz,1H),7.32(s,1H),6.53(s,1H),5.45–5.37(m,4H),4.51–4.48(m,1H),4.46–4.40(m,1H),4.28–4.19(m,1H),4.15–4.08(m,2H),3.77–3.64(m,1H),3.29–3.20(m,1H),3.13–3.02(m,3H),2.94–2.88(m,1H),2.40(s,3H),2.25–2.01(m,4H),1.94–1.82(m,3H),1.37–1.23(m,2H),0.88(t,J＝7.2Hz,3H).

实施例34

(1S,9S)-1-((2-氮杂螺[3.3]庚烷-6-基)氨基)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-1,2,3,9,12,15-六氢-10H,13H-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]中氮茚并[1,2-b]喹啉-10,13-二酮(化合物34)

化合物34(三氟乙酸盐)的合成同化合物16。LC-MS(ESI)[M+H]⁺＝531.5；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ9.50–9.20(m,1H),8.60(s,2H),7.88–7.86(m,1H),7.35(s,1H),6.57(s,1H),5.45(s,4H),4.98(brs,1H),4.03–3.86(m,5H),3.20–3.10(m,2H),2.60–2.55(m,2H),2.54–2.52(m,1H),2.46–2.44(m,1H),2.40(s,3H),2.24–2.22(m,2H),1.94–1.81(m,2H),0.88(t,J＝7.2Hz,3H).

实施例35

(1S,9S)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-1-((顺-八氢环戊二烯并[c]吡咯-5-基)氨基)-1,2,3,9,12,15-六氢-10H,13H-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]中氮茚并[1,2-b]喹啉-10,13-二酮(化合物35)

化合物35(三氟乙酸盐)的合成同化合物16。LC-MS(ESI)[M+H]⁺＝545.3；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ9.40–8.85(m,3H),7.92(d,J＝10.8Hz,1H),7.40–7.36(m,1H),6.61(s,1H),5.51–5.46(m,4H),5.08(s,1H),4.13–4.06(m,1H),4.00–3.90(m,1H),3.30–2.75(m,9H),2.47–2.43(m,4H),2.30–1.60(m,5H),0.88(t,J＝7.2Hz,3H).

实施例36

(1S,9S)-9-乙基-5-氟-9-羟基-1-((1-(2-羟基乙酰基)吖丁啶-3-基)氨基)-4-甲基-1,2,3,9,12,15-六氢-10H,13H-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]中氮茚并[1,2-b]喹啉-10,13-二酮(化合物36)

化合物36的合成同化合物33。LC-MS(ESI)[M+H]⁺＝549.3；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ7.78(d,J＝10.8Hz,1H),7.33(s,1H),6.55(s,1H),5.46–5.38(m,4H),4.90–4.87(m,1H),4.43–4.29(m,2H),4.18–4.01(m,1H),3.95–3.84(m,4H),3.59–3.52(m,1H),3.08–3.02(m,2H),2.40(s,3H),2.21–2.15(m,1H),2.03–1.88(m,4H),0.89(t,J＝7.2Hz,3H).

实施例37

(1S,9S)-9-乙基-5-氟-9-羟基-1-((1-(2-羟基乙酰基)吡咯烷-3-基)氨基)-4-甲基-1,2,3,9,12,15-六氢-10H,13H-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]中氮茚并[1,2-b]喹啉-10,13-二酮(化合物37)

化合物37的合成同化合物33。LC-MS(ESI)[M+H]⁺＝563.3；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ7.75(d,J＝12.0Hz,1H),7.32(s,1H),6.54(s,1H),5.46-5.35(m,4H),4.55-3.95(m,4H),3.70-3.40(m,5H),3.32-2.95(m,3H),2.40-2.35(m,4H),2.19-1.83(m,5H),0.89(t,J＝8.0Hz,3H).

实施例38

(1S,9S)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-1-(苯基氨基)-1,2,3,9,12,15-六氢-10H,13H-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]中氮茚并[1,2-b]喹啉-10,13-二酮(化合物38)

在25mL单口瓶中将依喜替康甲磺酸盐(20.0mg,0.038mmol)，三苯基铋(50mg，0.113mmol)溶于1,2-二氯乙烷(4mL)，依次加入三乙胺(11.4mg，0.113mmol)，醋酸铜(13.7mg，0.075mmol)。混合物在45℃反应16小时。TLC(DCM:MeOH＝10:1)显示有原料剩余，有产物生成。直接将反应液浓缩后，用N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶解过滤后送Prep-HPLC(醋酸铵作为添加剂)得到目标产物38(2.08mg,收率10.8％)。LC-MS(ESI)[M+H]⁺＝512.2；¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆):δ7.82(d,J＝8.0Hz,1H),7.34(s,1H),7.18(t,J＝8.0Hz,2H),6.84(d,J＝8.0Hz,2H),6.67(t,J＝8.0Hz,1H),6.54(s,1H),6.08(d,J＝8.0Hz,1H),5.41(s,2H),5.33-5.15(m,3H),3.23-3.15(m,2H),2.42(s,3H),2.23-2.19(m,2H),1.95-1.82(m,2H),0.89(t,J＝8.0Hz,3H).

实施例39

(1S,9S)-9-乙基-5-氟-9-羟基-1-((4-(羟甲基)苯基)氨基)-4-甲基-1,2,3,9,12,15-六氢-10H,13H-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]中氮茚并[1,2-b]喹啉-10,13-二酮(化合物39)

第一步：在250mL的单口瓶中将对溴苯甲醇(10.0g,53.5mmol)，吡啶(10mL)溶于甲苯(100mL)冰水浴至0℃，滴加三甲基氯硅烷(8.70g,80.2mmol)，室温反应16小时。TLC(PE:EA＝10:1)显示反应完全。反应液用乙酸乙酯(100mL)稀释后用水(150mL)洗，分液，用饱和食盐水(100mL)洗，有机相用无水硫酸钠干燥，浓缩后用油泵抽干，过柱纯化(PE:EA＝100:1)得到化合物39a(9.52g,收率：68.7％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ7.48(d,J＝8.0Hz,2H),7.23(d,J＝8.0Hz,2H),4.67(s,2H),0.19(s,9H).

第二步：把镁屑(100mg,4.25mmol)加入50mL三口瓶中，氮气置换，加入无水THF(10mL)，迅速加入碘单质一粒并搅拌，氮气置换，把反应液加热至50℃。把化合物39a(1g,3.88mmol)溶于无水THF(5mL)，加入反应液中，升温至80℃反应2小时，镁屑基本消失，把干燥后的三溴化铋(452mg,1.01mmol)溶于无水THF(5mL)滴加入反应液中，反应液变为黄色浑浊液，80℃反应2小时。TLC(PE:EA＝10:1)显示有产物生成。反应液冷却后过滤，用乙酸乙酯(30mL)稀释后饱和食盐水(50mL)洗，无水硫酸钠干燥，浓缩，Prep-TLC(PE:EA＝10:1)纯化，得到化合物39b(100mg,收率：13.3％)。

第三步：在25mL单口瓶中将依喜替康甲磺酸盐(20.0mg,0.038mmol)，化合物39b(100mg,0.134mmol)溶于1,2-二氯乙烷(4mL)，依次加入三乙胺(19.0mg,0.188mmol)，醋酸铜(13.7mg,0.075mmol)，40℃反应16小时。直接将反应液浓缩后Prep-TLC(DCM:MeOH＝10:1)纯化得标题化合物粗品10mg，用N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶解过滤后送Prep-HPLC(醋酸铵作为添加剂)得到目标化合物39(3.32mg,收率16.3％)。LC-MS(ESI)[M+H]⁺＝542.5；¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆):δ7.82(d,J＝8.0Hz,1H),7.33(s,1H),7.13(d,J＝8.0Hz,2H),6.79(d,J＝8.0Hz,2H),6.54(s,1H),6.03(d,J＝8.0Hz,1H),5.41(s,2H),5.33-5.13(m,3H),4.90(t,J＝4.0Hz,1H),4.37(d,J＝8.0Hz,2H),3.20-3.13(m,2H),2.42(s,3H),2.23-2.19(m,2H),1.91-1.83(m,2H),0.88(t,J＝8.0Hz,3H).

实施例40

(1S,9S)-9-乙基-5-氟-9-羟基-1-((3-(羟甲基)苯基)氨基)-4-甲基-1,2,3,9,12,15-六氢-10H,13H-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]中氮茚并[1,2-b]喹啉-10,13-二酮(化合物40)

化合物40的合成同化合物39。LC-MS(ESI)[M+H]⁺＝542.5；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ7.82(d,J＝8.8Hz,1H),7.34(s,1H),7.13(t,J＝8.0Hz,1H),6.83(s,1H),6.73-6.61(m,2H),6.53(s,1H),6.05(d,J＝8.8Hz,1H),5.41(s,2H),5.32-5.17(m,3H),5.11-5.08(m,1H),4.45(s,2H),3.22-3.15(m,2H),2.42(s,3H),2.25-2.20(m,2H),1.92-1.82(m,2H),0.89(t,J＝8.0Hz,3H).

实施例41

顺-N-((1S,9S)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二羰基-2,3,9,10,13,15-六氢-1H,12H-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]中氮茚并[1,2-b]喹啉-1-基)-3-羟基环丁烷-1-甲酰胺(化合物41)

在25mL单口瓶中将依喜替康甲磺酸盐(20.0mg,0.038mmol)，顺式-3-羟基环丁烷甲酸(17.5mg,0.151mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(3mL)，依次加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(29mg,0.151mmol)，1-羟基苯并三唑(20.4mg,0.151mmol)，二异丙基乙基胺(24.3mg,0.188mmol)，室温反应16小时。TLC(DCM:MeOH＝10:1)显示原料反应完毕。直接将反应液过滤后送Prep-HPLC(醋酸铵作为添加剂)得到化合物41(5.32mg,收率26.6％)。LC-MS(ESI)[M+H]⁺＝534.3；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ8.48(d,J＝8.0Hz,1H),7.83(d,J＝8.0Hz,1H),7.35(s,1H),6.59(s,1H),5.65-5.57(m,1H),5.48(s,2H),5.22-5.15(m,3H),4.05-3.95(m,1H),3.27–3.17(m,2H),2.50-2.42(m,4H),2.40–2.07(m,6H),1.99–1.86(m,2H),0.93(t,J＝8.0Hz,3H).

实施例42

反-N-((1S,9S)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二羰基-2,3,9,10,13,15-六氢-1H,12H-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]中氮茚并[1,2-b]喹啉-1-基)-3-羟基环丁烷-1-甲酰胺(化合物42)

化合物42的合成同化合物41。LC-MS(ESI)[M+H]⁺＝534.3；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ8.40(d,J＝8.8Hz,1H),7.80(d,J＝8.8Hz,1H),7.31(s,1H),6.54(s,1H),5.60-5.55(m,1H),5.49-5.39(m,2H),5.23-5.05(m,3H),4.42-4.35(m,1H),3.25-3.12(m,2H),2.96-2.89(m,1H),2.49-2.38(m,5H),2.20-2.00(m,4H),1.95-1.82(m,2H),0.89(t,J＝8.0Hz,3H).

实施例43

顺-N-((1S,9S)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二羰基-2,3,9,10,13,15-六氢-1H,12H-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]中氮茚并[1,2-b]喹啉-1-基)-4-羟基环己烷-1-甲酰胺(化合物43)

化合物43的合成同化合物41。LC-MS(ESI)[M+H]⁺＝562.5；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.35(d,J＝8.8Hz,1H),7.80(d,J＝11.2Hz,1H),7.32(s,1H),6.54(s,1H),5.60–5.54(m,1H),5.44(s,2H),5.24–5.10(m,2H),4.34(d,J＝3.2Hz,1H),3.79(s,1H),3.24–3.13(m,2H),2.41(s,3H),2.26–2.09(m,3H),1.90–1.85(m,4H),1.70–1.66(m,2H),1.56–1.34(m,4H),0.89(t,J＝7.2Hz,3H).

实施例44

反-N-((1S,9S)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二羰基-2,3,9,10,13,15-六氢-1H,12H-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]中氮茚并[1,2-b]喹啉-1-基)-4-羟基环己烷-1-甲酰胺(化合物44)

化合物44的合成同化合物41。LC-MS(ESI)[M+H]⁺＝562.3；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ8.40(d,J＝8.8Hz,1H),7.80(d,J＝11.2Hz,1H),7.32(s,1H),6.54(s,1H),5.58–5.52(m,1H),5.44(s,2H),5.22–5.09(m,2H),4.57(d,J＝4.4Hz,1H),3.43–3.37(m,1H),3.23–3.13(m,2H),2.41(s,3H),2.15–2.10(m,3H),1.93–1.77(m,6H),1.54–1.44(m,2H),1.16–1.04(m,2H),0.89(t,J＝7.2Hz,3H).

实施例45

N-((1S,9S)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二羰基-2,3,9,10,13,15-六氢-1H,12H-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]中氮茚并[1,2-b]喹啉-1-基)-3-(羟甲基)二环[1.1.1]戊烷-1-甲酰胺(化合物45)

第一步：取10mL的三口瓶，在化合物45a(100mg,0.59 0mmol)的无水四氢呋喃(2mL)溶液中，冰水浴下缓慢滴加硼烷四氢呋喃络合物(0.88mL,1M in THF)，撤去冰水浴，20℃下搅拌16小时。TLC(DCM/MeOH＝10/1，磷钼酸显色)发现一个新点。向反应液里边搅拌边缓慢滴加甲醇(10mL)淬灭反应，浓缩，得到粗品化合物45b(85.0mg,收率92.2％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ3.71(s,3H),3.65-3.64(m,3H),2.02(s,6H).¹³C NMR(400MHz,CDCl₃)δ170.7,62.4,51.6,50.2,47.2,40.1ppm.

第二步：取10mL的三口瓶，在化合物45b(45.0mg,0.29mmol)的甲醇(1mL)溶液中，冰水浴下缓慢滴加氢氧化钠(23.1mg,0.58mmol)的水溶液(1mL)，撤去冰水浴，20℃下搅拌16小时。TLC(DCM/MeOH＝10/1，磷钼酸显色)发现一个新点。浓缩，反应液里加入水(5mL)，乙酸乙酯萃取(2x 3mL)，水相用1M的盐酸水溶液(2mL)调pH值为3～4，然后水相用乙酸乙酯萃取(2x 5mL)，有机相用无水硫酸钠干燥，抽滤，浓缩，得到粗品化合物45c(20.0mg,收率48.8％)，。

第三步：在伊喜替康甲磺酸盐(20.0mg,0.04mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(1mL)溶液中，依次加入化合物45c(16.1mg,0.11mmol)，HATU(28.6mg,0.08mmol)和N,N-二异丙基乙胺(14.6mg,0.11mmol)，20℃搅拌反应3小时。LCMS显示原料消失，发现目标化合物。浓缩，残留物用N,N-二甲基甲酰胺(1.0mL)溶清，通过Prep-HPLC(醋酸铵作为添加剂)分离得到化合物45(9.84mg,收率43.8％)。LC-MS(ESI)[M+H]⁺＝560.3；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.47(d,J＝8.8Hz,1H),7.80(d,J＝10.8Hz,1H),7.32(s,1H),6.54(s,1H),5.59-5.53(m,1H),5.44(s,2H),5.22-5.04(m,2H),4.59(br,1H),3.42-3.41(m,1H),3.24-3.13(m,2H),2.52(s,3H),2.23-2.11(m,2H),1.93-1.90(m,9H),0.89(t,J＝7.6Hz,3H).

实施例46

N-((1S,9S)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二羰基-2,3,9,10,13,15-六氢-1H,12H-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]中氮茚并[1,2-b]喹啉-1-基)-4-(羟甲基)二环[2.2.2]辛烷-1-甲酰胺(化合物46)

第一步：在50mL单口瓶中将4-(甲氧羰基)双环[2.2.2]辛烷-1-羧酸(500mg,2.36mmol)，草酰氯(448mg,3.53mmol)和N,N-二甲基甲酰胺(8.61mg,0.12mmol)溶于二氯甲烷(5mL)中，室温下搅拌2小时后用旋转蒸发仪除去溶剂，加入乙腈(5mL)，并于0℃下加入硼氢化钠(891mg,23.56mmol)，搅拌2小时。TLC(石油醚：乙酸乙酯＝4:1)显示原料消失，有一个新点生成。向反应体系中加水(5mL)淬灭，二氯甲烷(5mL x3)萃取3次，合并有机相，饱和食盐水(5mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，用旋转蒸发仪除去溶剂，油泵抽干，得到化合物46b(370mg,收率79.1％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ3.65(s,3H),3.28(s,2H),1.90-1.70(m,6H),1.55-1.37(m,6H).

第二步：在50mL单口瓶中将化合物46b(370mg,1.87mmol)和氢氧化锂(223mg,9.33mmol)溶于四氢呋喃(20mL)和水(10mL)中，25℃下反应16小时。TLC(石油醚：乙酸乙酯＝4：1，磷钼酸)显示原料消失，有一个新点生成。分液，水相用乙酸乙酯(5mL x 3)萃取3次，水相用1M氢氧化钠溶液调节至pH＝3，乙酸乙酯(5mL x 3)萃取，合并有机相，饱和食盐水(5mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，用旋转蒸发仪除去溶剂，得到化合物46c(140mg,收率40.6％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ3.30(s,2H),1.90-1.77(m,6H),1.54-1.37(m,6H).

第三步：在50mL单口瓶中将依喜替康甲磺酸盐(30mg,0.06mmol)加入N，N-二甲基甲酰胺(4mL)的溶剂中，再加化合物46c(31.2mg,0.17mmol)，1-羟基苯并三唑(30.5mg,0.23mmol)，1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(43.3mg,0.23mmol)，N,N-二异丙基乙胺(29.2mg,0.23mmol)，反应体系置换氩气后，在25℃下搅拌1.5个小时得到无色澄清液。将反应液用滤头过滤后直接送制备Prep-HPLC(醋酸铵作为添加剂)得到化合物46(20.25mg,收率56.1％)。LC-MS(ESI)[M+H]⁺＝602.3；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ7.98(d,J＝8.4Hz,1H),7.80(d,J＝10.8Hz,1H),7.32(s,1H),6.55(s,1H),5.60-5.54(m,1H),5.44(s,2H),5.16-5.04(m,2H),4.37(t,J＝5.2Hz,1H),3.22–3.10(m,2H),3.05(d,J＝5.2Hz,2H),2.41(s,3H),2.15-2.08(m,2H),1.92-1.82(m,2H),1.79–1.74(m,6H),1.38–1.33(m,6H),0.89(t,J＝7.2Hz,3H).

实施例47

N-((1S,9S)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二羰基-2,3,9,10,13,15-六氢-1H,12H-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]中氮茚并[1,2-b]喹啉-1-基)-4-羟基二环[2.2.2]辛烷-1-甲酰胺(化合物47)

化合物47的合成同化合物41。LC-MS(ESI)[M+H]⁺＝588.5；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ7.96(d,J＝8.4Hz,1H),7.77(d,J＝11.2Hz,1H),7.29(s,1H),6.52(s,1H),5.54–5.50(m,1H),5.42(s,2H),5.13–5.00(m,2H),4.29(s,1H),3.13–3.10(m,2H),2.38(s,3H),2.14–2.03(m,2H),1.91–1.79(m,8H),1.54–1.47(m,6H),0.87(t,J＝7.2Hz,3H).

生物实施例1

1、实验目的：

本实验的目的是为了检测发明化合物，对SK-BR-3(ATCC/HTB-30)、MDA-MB-468(ATCC/HTB-132)、T47D肿瘤细胞体外增值的抑制活性，以不同浓度的化合物体外处理细胞，经3天培养后，然后加入Resazurin(刃天青)读ex550nm/em610nm的荧光值，四参数拟合处理数据得出IC50值，从而计算出化合物的生物活性。

2、实验材料与设备：

材料

产品名称	厂家/货号
		SK-BR-3细胞系	ATCC/HTB-30
MDA-MB-468	ATCC/HTB-132
		DMEM，高糖	Hyclone/SH30022.01
0.25％Trypsin-EDTA	Gibco/25200-072
		胎牛血清(FBS)	Gibco/16000-044
100×双抗	Gibco/15240-062
		黑壁，透明底的组织培养板	Corning/3603
刃天青钠	Sigma Aldrich/199303-25G

设备

名称	型号	厂家
			生物安全柜	1300系列A2型	Thermo Fisher Scientific
CO<sub>2</sub>培养箱	3111型	Thermo Fisher Scientific
			倒置显微镜	CKX31	奥林巴斯
酶标仪	Infinite M200	Tecan公司
			微量振荡器	MM-I型	上海亚荣生化仪器厂

3、实验操作方法：

3.1培养基：DMEM，10％FBS，1×双抗

3.2细胞培养：从液氮中取出一支冷冻的SK-BR-3/MDA-MB-468/T47D细胞，复苏至75cm²培养瓶中培养。生长到细胞的汇合度达到＞75％，并且已经进行至少3次传代。

3.2.1如果不进行细胞传代，每3～4天更换一次培养基。

3.2.2如果需要扩增细胞，将细胞传代接种到更大的培养瓶中，并且在测定使用之前使细胞的汇合度达到＞75％。

3.3收集细胞：培养瓶接近长满时收集SK-BR-3/MDA-MB-468/T47D细胞。

3.3.1弃除培养基，并用PBS清洗去除死细胞和残留培养基。

3.3.2加入2-3mL0.25％Trypsin-EDTA，轻轻摇晃培养瓶然后37℃孵育2-3分钟消化细胞。

3.3.3立即向培养瓶中加入5mL培养基，并用移液管轻轻上下吸打使细胞分散开。

3.3.4将细胞悬液转移到无菌离心管中200×g离心3分钟。

3.3.5弃除管中培养基，加入5～10mL新鲜培养基重悬细胞。

3.4细胞密度测定：显微镜下细胞计数板计数。

3.5分析板接种

3.5.1用培养基将细胞稀释至1×10⁵个细胞/mL，100μL/孔接种至分析板中(A和H行除外)。

3.5.2向A和H行中每孔加入120μL培养基作为空白对照。

3.5.3 37℃，5％CO₂孵育4-6h使细胞贴壁。

3.6准备稀释化合物样品

将化合物稀释至起始浓度为18μg/ml，再进行3倍稀释，共获得11个梯度溶液，第12列为空白对照。

3.7加药处理

3.7.1将稀释板中1～11列中的药物稀释液各取20μL分别加入到分析板中的1～11列中。

3.7.2第12列和第A、H行中各加入20μL新鲜培养基。

3.7.4在平板震荡器上轻轻震荡10-15秒钟，然后将培养板37℃孵育3天。

3.8分析

3.8.1孵育结束后，每孔加入0.03％刃天青(1×PBS稀释)20μL并轻轻震荡10～15秒。

3.8.2 37℃孵育3～4小时后酶标仪读数，参数设置如下：

激发光：550nm

发射光：610nm

积分时间：50

震荡：15秒，涡旋

读数：顶读

读次数/孔：1

增益：设置优化(应在35～42之间)

如果要读多块板，确保所有板子所用的增益设置一致。

3.8.3利用EXCEL数据作图拟合出参考标准品和样品的IC₅₀。

3.8.3.1使用模型201进行数据点绘图。

3.8.3.2对于Fit参数，请使用以下命令：

a.A：预配

b.B：预配

c.C：预配

d.D：预配

e.没有为所有约束

3.8.3.3输出参数C为IC₅₀，单位为ng/mL。

实验数据：

表1：本发明化合物及Dxd对SK-BR-3细胞的IC50值。

注：(1)由于测试方法所限，每次采用本发明的一个化合物与Dxd进行比对测试，但每批次测试的Dxd的IC50值不完全相同，因此表1中所列的Dxd的IC50值是这些比对测试所获得的IC50值的数值范围；(2)表中<1表示该化合物测试曲线不完整，但是活性比Dxd好。

表2：本发明化合物及Dxd对MDA-MB-468细胞的IC50值。

注：表中<1表示该化合物测试曲线不完整，但是活性比Dxd好。

表3：本发明化合物及Dxd对T47D细胞的IC50值。

编号	IC50值(ng/mL)
		Dxd	1.53
1或2	-
		2或1	-
Dxd	1.36
		3或4	-
4或3	0.37

注：表中-表示该化合物测试曲线不完整，但是活性比Dxd好。

表4：本发明化合物及Dxd以及化合物C对MDA-MB-468细胞的IC50值。

编号	IC50值(ng/mL)
		Dxd	11.4
化合物C	4.21
		44	1.15
45	2.92

化合物C结构如下：

从上述数据可以看出，本发明的化合物对不同的细胞，具有比Dxd以及化合物C更低的IC50值，表现出更好的抗细胞增殖效果。

以上，对本发明的实施方式进行了说明。但是，本发明不限定于上述实施方式。凡在本发明的精神和原则之内，所做的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims

1.一种如下式(I)所示的化合物及其立体异构体、几何异构体、互变异构体、药用盐、前药、水合物、溶剂合物或同位素标记的类似物：

其中：

Z表示键或-C(O)-；

其中，当Z为-C(O)-，X为苯基时，Rx不为氢。

2.如权利要求1所述的化合物，其中X选自环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、双环[1.1.1]戊烷基、双环[2.2.2]辛烷基、双环[3,3,0]辛烷基、螺[3,3]庚烷基、螺[3,5]壬烷基、氮杂环丁烷基、2-氮杂螺[3.3]庚烷基、7-氮杂螺[3.5]壬烷基、7-氮杂双环[3.3.0]辛烷基、四氢吡咯基、哌啶基、苯基、吡咯基、噻吩基、呋喃基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪、噻唑基、喹啉基、苯并噻唑基、吡唑基、咪唑基，噁唑基、喹啉基、异喹啉基、吲唑基、吲哚基、苯并咪唑基。

3.如权利要求1-2所述的化合物，其中Rx在每次出现时可独立地选自H、卤素、-OH、-NO2、-NH2、-CN、巯基、磺酸基、取代或未取代的C1-6烷基、取代或未取代的C1-6烷氧基、取代或未取代的羟基羰基C1-6烷基、取代或未取代的氨基C1-6烷基、取代或未取代的C1-6烷基氨基、取代或未取代的C1-6烷氧基羰基、取代或未取代的C1-6烷基羰基、取代或未取代的C1-6烷基氨基甲酰基。

4.如权利要求3所述，所述取代指被取代基团上的一个或多个可取代位点上的氢被独立地选自羟基、氨基、巯基取代。

5.如权利要求1-4所述的化合物，其中Rx在每次出现时可独立地选自H、卤素、-OH、-NO2、-NH2、羟基C1-6烷基、羟基C1-6烷氧基、C1-6烷氧基羰基、羟基C1-6烷基羰基、氨基C1-6烷基羰基。

6.如权利要求1-4所述的化合物，其中Rx在每次出现时可独立地选自H、氯、-OH、NH2、-NO2、羟甲基、羟乙基、羟基乙氧基、叔丁氧羰基、羟甲基羰基。

7.如权利要求1所述的化合物，

其中X选自C3-8环烷基，Rx选自氢、羟基、羟基C1-6烷基；或

X选自C5-8桥环基，Rx选自羟基C1-6烷基，如羟基甲基、羟基乙基、羟基正丙基、羟基异丙基；或

X选自5-7元杂芳基，Rx选自氢、卤素、硝基、氨基；或

X选自苯并噻唑基，Rx选自氢、卤素、硝基、氨基；或

X选自苯基，Rx选自羟基C1-6烷基；或

-Z-X选自：

Rx选自羟基、羟基C1-6烷基。

8.下式所示的化合物及其立体异构体、几何异构体、互变异构体、药用盐、前药、水合物、溶剂合物或同位素标记的类似物：

9.一种药物组合物，其包括权利要求1-8中任一项所述的化合物及其立体异构体、几何异构体、互变异构体、药用盐、前药、水合物、溶剂合物或同位素标记的类似物。

10.权利要求1-8中任一项所述的化合物及其立体异构体、几何异构体、互变异构体、药用盐、前药、水合物、溶剂合物或同位素标记的类似物，或权利要求9所述的药物组合物在制备用于预防和/或治疗用于治疗增殖性疾病的药物中的用途。

11.如权利要求10所述的用途，其特征在于：所述增殖性疾病选自选自乳腺癌、卵巢癌、宫颈癌、子宫癌、前列腺癌、肾癌、尿道癌、膀胱癌、肝癌、胃癌、子宫内膜癌、唾液腺癌、食道癌、黑色素瘤、神经胶质瘤、神经母细胞瘤、肉瘤、肺癌、例如小细胞肺癌和非小细胞肺癌、结肠癌、直肠癌、结直肠癌、白血病、例如急性淋巴细胞白血病、急性髓细胞白血病、急性早幼粒细胞白血病、慢性髓细胞白血病、慢性淋巴细胞白血病、骨癌、皮肤癌、甲状腺癌、胰腺癌或淋巴瘤、例如霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤或复发性间变性大细胞淋巴瘤。

12.如权利要求1-8任一所述化合物及其立体异构体、几何异构体、互变异构体、药用盐、前药、水合物、溶剂合物或同位素标记的类似物的制备方法，包括使依喜替康或其盐与相应的酮发生反应的步骤，或包括使依喜替康或其盐与相应的芳基或杂芳基发生反应的步骤，或包括使依喜替康或其盐与相应的羧酸发生反应的步骤。