CN115557953A - N-苯基苯甲酰氨基吡唑并嘧啶类化合物及其制备和应用 - Google Patents
N-苯基苯甲酰氨基吡唑并嘧啶类化合物及其制备和应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN115557953A CN115557953A CN202211298264.0A CN202211298264A CN115557953A CN 115557953 A CN115557953 A CN 115557953A CN 202211298264 A CN202211298264 A CN 202211298264A CN 115557953 A CN115557953 A CN 115557953A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- human
- compound
- cells
- acid
- formula
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- -1 N-phenyl benzoyl amino pyrazolopyrimidine compound Chemical class 0.000 title claims abstract description 32
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 23
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 47
- 102220497176 Small vasohibin-binding protein_T47D_mutation Human genes 0.000 claims abstract description 21
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 20
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 claims abstract description 17
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 17
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims abstract description 11
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 10
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 claims abstract description 9
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 claims abstract description 9
- 208000005718 Stomach Neoplasms Diseases 0.000 claims abstract description 9
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 9
- 208000035250 cutaneous malignant susceptibility to 1 melanoma Diseases 0.000 claims abstract description 9
- 206010017758 gastric cancer Diseases 0.000 claims abstract description 9
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 claims abstract description 9
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 9
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 claims abstract description 9
- 201000011549 stomach cancer Diseases 0.000 claims abstract description 9
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 8
- 125000002023 trifluoromethyl group Chemical group FC(F)(F)* 0.000 claims abstract description 4
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 81
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 49
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 41
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 36
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims description 21
- YMXQUFUYCADCFL-UHFFFAOYSA-N 4-chloro-1h-pyrazolo[3,4-d]pyrimidine Chemical compound ClC1=NC=NC2=C1C=NN2 YMXQUFUYCADCFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- 238000010992 reflux Methods 0.000 claims description 12
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 11
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 8
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims description 4
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 2
- 206010073071 hepatocellular carcinoma Diseases 0.000 claims 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims 1
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 abstract description 9
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 abstract description 9
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 abstract description 3
- 230000009982 effect on human Effects 0.000 abstract 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 67
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 66
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 44
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 23
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 description 21
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 19
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 19
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 16
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 14
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 13
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 12
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 10
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000012065 filter cake Substances 0.000 description 9
- 238000003760 magnetic stirring Methods 0.000 description 9
- CZPWVGJYEJSRLH-UHFFFAOYSA-N Pyrimidine Chemical compound C1=CN=CN=C1 CZPWVGJYEJSRLH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 7
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 7
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 6
- 238000002330 electrospray ionisation mass spectrometry Methods 0.000 description 6
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 6
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 6
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 6
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 5
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 5
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 5
- QUKPALAWEPMWOS-UHFFFAOYSA-N 1h-pyrazolo[3,4-d]pyrimidine Chemical class C1=NC=C2C=NNC2=N1 QUKPALAWEPMWOS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 4
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N Malonic acid Chemical compound OC(=O)CC(O)=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N Oxalic acid Chemical compound OC(=O)C(O)=O MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010019160 Pancreatin Proteins 0.000 description 3
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 3
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 3
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 3
- 238000010009 beating Methods 0.000 description 3
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 3
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000005138 cryopreservation Methods 0.000 description 3
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 3
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 3
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 3
- 229940055695 pancreatin Drugs 0.000 description 3
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- XMIIGOLPHOKFCH-UHFFFAOYSA-N 3-phenylpropionic acid Chemical compound OC(=O)CCC1=CC=CC=C1 XMIIGOLPHOKFCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N Butyric acid Chemical compound CCCC(O)=O FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N Fumaric acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 2
- AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N Methanesulfonic acid Chemical compound CS(O)(=O)=O AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N Niacin Chemical compound OC(=O)C1=CC=CN=C1 PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BELBBZDIHDAJOR-UHFFFAOYSA-N Phenolsulfonephthalein Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1C1(C=2C=CC(O)=CC=2)C2=CC=CC=C2S(=O)(=O)O1 BELBBZDIHDAJOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-N Pyruvic acid Chemical compound CC(=O)C(O)=O LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WNLRTRBMVRJNCN-UHFFFAOYSA-N adipic acid Chemical compound OC(=O)CCCCC(O)=O WNLRTRBMVRJNCN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 2
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 2
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N dimethylselenoniopropionate Natural products CCC(O)=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-N dodecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCC(O)=O POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- FUZZWVXGSFPDMH-UHFFFAOYSA-N hexanoic acid Chemical compound CCCCCC(O)=O FUZZWVXGSFPDMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 2
- SUMDYPCJJOFFON-UHFFFAOYSA-N isethionic acid Chemical compound OCCS(O)(=O)=O SUMDYPCJJOFFON-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N n'-amino-n-iminomethanimidamide Chemical compound N\N=C\N=N VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N 0.000 description 2
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 2
- 229960003531 phenolsulfonphthalein Drugs 0.000 description 2
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 2
- BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N renifolin D Natural products CC(=C)[C@@H]1Cc2c(O)c(O)ccc2[C@H]1CC(=O)c3ccc(O)cc3O BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N 0.000 description 2
- YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-N salicylic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1O YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N toluene-4-sulfonic acid Chemical compound CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 231100000167 toxic agent Toxicity 0.000 description 2
- 239000003440 toxic substance Substances 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZDPHROOEEOARMN-UHFFFAOYSA-N undecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCC(O)=O ZDPHROOEEOARMN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 2
- QBYIENPQHBMVBV-HFEGYEGKSA-N (2R)-2-hydroxy-2-phenylacetic acid Chemical compound O[C@@H](C(O)=O)c1ccccc1.O[C@@H](C(O)=O)c1ccccc1 QBYIENPQHBMVBV-HFEGYEGKSA-N 0.000 description 1
- MIOPJNTWMNEORI-GMSGAONNSA-N (S)-camphorsulfonic acid Chemical compound C1C[C@@]2(CS(O)(=O)=O)C(=O)C[C@@H]1C2(C)C MIOPJNTWMNEORI-GMSGAONNSA-N 0.000 description 1
- BJEPYKJPYRNKOW-REOHCLBHSA-N (S)-malic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- WBYWAXJHAXSJNI-VOTSOKGWSA-M .beta-Phenylacrylic acid Natural products [O-]C(=O)\C=C\C1=CC=CC=C1 WBYWAXJHAXSJNI-VOTSOKGWSA-M 0.000 description 1
- JAHNSTQSQJOJLO-UHFFFAOYSA-N 2-(3-fluorophenyl)-1h-imidazole Chemical compound FC1=CC=CC(C=2NC=CN=2)=C1 JAHNSTQSQJOJLO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YGTUPRIZNBMOFV-UHFFFAOYSA-N 2-(4-hydroxybenzoyl)benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1C(=O)C1=CC=C(O)C=C1 YGTUPRIZNBMOFV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WXHLLJAMBQLULT-UHFFFAOYSA-N 2-[[6-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]-2-methylpyrimidin-4-yl]amino]-n-(2-methyl-6-sulfanylphenyl)-1,3-thiazole-5-carboxamide;hydrate Chemical compound O.C=1C(N2CCN(CCO)CC2)=NC(C)=NC=1NC(S1)=NC=C1C(=O)NC1=C(C)C=CC=C1S WXHLLJAMBQLULT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ALKYHXVLJMQRLQ-UHFFFAOYSA-N 3-Hydroxy-2-naphthoate Chemical compound C1=CC=C2C=C(O)C(C(=O)O)=CC2=C1 ALKYHXVLJMQRLQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 3-azaniumyl-2-hydroxypropanoate Chemical compound NCC(O)C(O)=O BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZRPLANDPDWYOMZ-UHFFFAOYSA-N 3-cyclopentylpropionic acid Chemical compound OC(=O)CCC1CCCC1 ZRPLANDPDWYOMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AWQSAIIDOMEEOD-UHFFFAOYSA-N 5,5-Dimethyl-4-(3-oxobutyl)dihydro-2(3H)-furanone Chemical compound CC(=O)CCC1CC(=O)OC1(C)C AWQSAIIDOMEEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LHCPRYRLDOSKHK-UHFFFAOYSA-N 7-deaza-8-aza-adenine Chemical class NC1=NC=NC2=C1C=NN2 LHCPRYRLDOSKHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WDJHALXBUFZDSR-UHFFFAOYSA-N Acetoacetic acid Natural products CC(=O)CC(O)=O WDJHALXBUFZDSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MLDQJTXFUGDVEO-UHFFFAOYSA-N BAY-43-9006 Chemical compound C1=NC(C(=O)NC)=CC(OC=2C=CC(NC(=O)NC=3C=C(C(Cl)=CC=3)C(F)(F)F)=CC=2)=C1 MLDQJTXFUGDVEO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005711 Benzoic acid Substances 0.000 description 1
- LSPHULWDVZXLIL-UHFFFAOYSA-N Camphoric acid Natural products CC1(C)C(C(O)=O)CCC1(C)C(O)=O LSPHULWDVZXLIL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WBYWAXJHAXSJNI-SREVYHEPSA-N Cinnamic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C1=CC=CC=C1 WBYWAXJHAXSJNI-SREVYHEPSA-N 0.000 description 1
- RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-N D-gluconic acid Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-N 0.000 description 1
- RGHNJXZEOKUKBD-UHFFFAOYSA-N D-gluconic acid Natural products OCC(O)C(O)C(O)C(O)C(O)=O RGHNJXZEOKUKBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- 239000005511 L01XE05 - Sorafenib Substances 0.000 description 1
- 239000005639 Lauric acid Substances 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N Nitric acid Chemical compound O[N+]([O-])=O GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IWYDHOAUDWTVEP-UHFFFAOYSA-N R-2-phenyl-2-hydroxyacetic acid Natural products OC(=O)C(O)C1=CC=CC=C1 IWYDHOAUDWTVEP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000630329 Scomberesox saurus saurus Species 0.000 description 1
- 235000021355 Stearic acid Nutrition 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N Succinic acid Natural products OC(=O)CCC(O)=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N Tartaric acid Natural products [H+].[H+].[O-]C(=O)C(O)C(O)C([O-])=O FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000001015 abdomen Anatomy 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 239000001361 adipic acid Substances 0.000 description 1
- 235000011037 adipic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960000250 adipic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000000783 alginic acid Substances 0.000 description 1
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 1
- 229960001126 alginic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000004781 alginic acids Chemical class 0.000 description 1
- AWUCVROLDVIAJX-UHFFFAOYSA-N alpha-glycerophosphate Natural products OCC(O)COP(O)(O)=O AWUCVROLDVIAJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N alpha-hydroxysuccinic acid Natural products OC(=O)C(O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000002365 anti-tubercular Effects 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- SRSXLGNVWSONIS-UHFFFAOYSA-N benzenesulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)C1=CC=CC=C1 SRSXLGNVWSONIS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940092714 benzenesulfonic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000010233 benzoic acid Nutrition 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 238000007664 blowing Methods 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-NUQCWPJISA-N butanedioic acid Chemical compound O[14C](=O)CC[14C](O)=O KDYFGRWQOYBRFD-NUQCWPJISA-N 0.000 description 1
- LSPHULWDVZXLIL-QUBYGPBYSA-N camphoric acid Chemical compound CC1(C)[C@H](C(O)=O)CC[C@]1(C)C(O)=O LSPHULWDVZXLIL-QUBYGPBYSA-N 0.000 description 1
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 description 1
- 239000012295 chemical reaction liquid Substances 0.000 description 1
- 235000013985 cinnamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229930016911 cinnamic acid Natural products 0.000 description 1
- 235000015165 citric acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- WOWBFOBYOAGEEA-UHFFFAOYSA-N diafenthiuron Chemical compound CC(C)C1=C(NC(=S)NC(C)(C)C)C(C(C)C)=CC(OC=2C=CC=CC=2)=C1 WOWBFOBYOAGEEA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- MOTZDAYCYVMXPC-UHFFFAOYSA-N dodecyl hydrogen sulfate Chemical compound CCCCCCCCCCCCOS(O)(=O)=O MOTZDAYCYVMXPC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CCIVGXIOQKPBKL-UHFFFAOYSA-M ethanesulfonate Chemical compound CCS([O-])(=O)=O CCIVGXIOQKPBKL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 1
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 239000001530 fumaric acid Substances 0.000 description 1
- 229960002598 fumaric acid Drugs 0.000 description 1
- 235000012208 gluconic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229950006191 gluconic acid Drugs 0.000 description 1
- 229940093915 gynecological organic acid Drugs 0.000 description 1
- XMBWDFGMSWQBCA-UHFFFAOYSA-N hydrogen iodide Chemical compound I XMBWDFGMSWQBCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940071870 hydroiodic acid Drugs 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 1
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 1
- 231100000518 lethal Toxicity 0.000 description 1
- 230000001665 lethal effect Effects 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 1
- 239000011976 maleic acid Substances 0.000 description 1
- 229940098895 maleic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000001630 malic acid Substances 0.000 description 1
- 235000011090 malic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229940099690 malic acid Drugs 0.000 description 1
- 229960002510 mandelic acid Drugs 0.000 description 1
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 1
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 1
- 229940098779 methanesulfonic acid Drugs 0.000 description 1
- WBYWAXJHAXSJNI-UHFFFAOYSA-N methyl p-hydroxycinnamate Natural products OC(=O)C=CC1=CC=CC=C1 WBYWAXJHAXSJNI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LVHBHZANLOWSRM-UHFFFAOYSA-N methylenebutanedioic acid Natural products OC(=O)CC(=C)C(O)=O LVHBHZANLOWSRM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LNOPIUAQISRISI-UHFFFAOYSA-N n'-hydroxy-2-propan-2-ylsulfonylethanimidamide Chemical compound CC(C)S(=O)(=O)CC(N)=NO LNOPIUAQISRISI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YZMHQCWXYHARLS-UHFFFAOYSA-N naphthalene-1,2-disulfonic acid Chemical compound C1=CC=CC2=C(S(O)(=O)=O)C(S(=O)(=O)O)=CC=C21 YZMHQCWXYHARLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KVBGVZZKJNLNJU-UHFFFAOYSA-N naphthalene-2-sulfonic acid Chemical compound C1=CC=CC2=CC(S(=O)(=O)O)=CC=C21 KVBGVZZKJNLNJU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000001968 nicotinic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960003512 nicotinic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000011664 nicotinic acid Substances 0.000 description 1
- 229910017604 nitric acid Inorganic materials 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Natural products CCCCCCCC(C)CCCCCCCCC(O)=O OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 235000006408 oxalic acid Nutrition 0.000 description 1
- WLJNZVDCPSBLRP-UHFFFAOYSA-N pamoic acid Chemical compound C1=CC=C2C(CC=3C4=CC=CC=C4C=C(C=3O)C(=O)O)=C(O)C(C(O)=O)=CC2=C1 WLJNZVDCPSBLRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N papa-hydroxy-benzoic acid Natural products OC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920003175 pectinic acid Polymers 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- OXNIZHLAWKMVMX-UHFFFAOYSA-N picric acid Chemical compound OC1=C([N+]([O-])=O)C=C([N+]([O-])=O)C=C1[N+]([O-])=O OXNIZHLAWKMVMX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IUGYQRQAERSCNH-UHFFFAOYSA-N pivalic acid Chemical compound CC(C)(C)C(O)=O IUGYQRQAERSCNH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- WSHYKIAQCMIPTB-UHFFFAOYSA-M potassium;2-oxo-3-(3-oxo-1-phenylbutyl)chromen-4-olate Chemical compound [K+].[O-]C=1C2=CC=CC=C2OC(=O)C=1C(CC(=O)C)C1=CC=CC=C1 WSHYKIAQCMIPTB-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 235000019260 propionic acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 150000003212 purines Chemical class 0.000 description 1
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940107700 pyruvic acid Drugs 0.000 description 1
- IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N quinbolone Chemical compound O([C@H]1CC[C@H]2[C@H]3[C@@H]([C@]4(C=CC(=O)C=C4CC3)C)CC[C@@]21C)C1=CCCC1 IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 238000011946 reduction process Methods 0.000 description 1
- 229960004889 salicylic acid Drugs 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- AWUCVROLDVIAJX-GSVOUGTGSA-N sn-glycerol 3-phosphate Chemical compound OC[C@@H](O)COP(O)(O)=O AWUCVROLDVIAJX-GSVOUGTGSA-N 0.000 description 1
- 239000012265 solid product Substances 0.000 description 1
- 229960003787 sorafenib Drugs 0.000 description 1
- 238000005507 spraying Methods 0.000 description 1
- 239000008117 stearic acid Substances 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 238000012414 sterilization procedure Methods 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000011975 tartaric acid Substances 0.000 description 1
- 235000002906 tartaric acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- 125000003831 tetrazolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- ITMCEJHCFYSIIV-UHFFFAOYSA-N triflic acid Chemical compound OS(=O)(=O)C(F)(F)F ITMCEJHCFYSIIV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
- C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
- C07D487/04—Ortho-condensed systems
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
Abstract
本发明公开了N‑苯基苯甲酰氨基吡唑并嘧啶类化合物及其制备和应用。所述N‑苯基苯甲酰氨基吡唑并嘧啶类化合物具有下列结构式(Ⅰ)，其中R为4‑Cl或3,5‑二(三氟甲基)。本发明提供了所述N‑苯基苯甲酰氨基吡唑并嘧啶类化合物或其药学上可接受的盐在制备治疗或预防癌症的药物中的应用，所述的癌症为人恶性黑素瘤、人肺癌、人肝癌、人胃癌、人乳腺癌或人结肠癌，结果显示，该类化合物对于人恶性黑素瘤细胞A375、人肺癌细胞A549、人肝癌细胞HepG2、人胃癌细胞AGS、人乳腺癌细胞T47D、人乳腺癌细胞MDA‑MB‑231、人结肠癌细胞SW620具有良好的抑制作用。
Description
技术领域
本发明涉及N-苯基苯甲酰氨基吡唑并嘧啶类化合物及其制备方法，以及所述化合物在制备治疗或预防癌症的药物中的应用。
背景技术
吡唑并[3,4-d]嘧啶作为一种重要的药物骨架，与嘌呤的结构相似，吡唑并[3,4-d]嘧啶类化合物在许多药理活性中起着重要作用，例如抗炎活性、抗菌活性、抗病毒活性和抗结核活性等。1955年，Skipper等人首先对吡唑并[3,4-d]嘧啶化合物进行了抗肿瘤活性探究，发现4-氨基吡唑并[3,4-d]嘧啶类化合物对实验性肿瘤具有杀伤性，从此，对吡唑并[3,4-d]嘧啶类化合物的研究引起了研究者的广泛兴趣。因此，吡唑并[3,4-d]嘧啶类化合物具有广阔的发展前景。
发明内容
本发明的第一个目的在于提供了一种具有良好抗癌活性的新型N-苯基苯甲酰氨基吡唑并嘧啶类化合物。
本发明的第二个目的是提供所述N-苯基苯甲酰氨基吡唑并嘧啶类化合物的制备方法，该制备方法简便，易于操作，原料易得，且生产成本较低，适于工业化应用。
本发明的第三个目的是提供所述N-苯基苯甲酰氨基吡唑并嘧啶类化合物或其药学上可接受的盐在制备治疗或预防癌症的药物中的应用，所述的癌症为人恶性黑素瘤、人肺癌、人肝癌、人胃癌、人乳腺癌或人结肠癌，所述的癌症的癌细胞为人恶性黑素瘤细胞A375、人肺癌细胞A549、人肝癌细胞HepG2、人胃癌细胞AGS、人乳腺癌细胞T47D、人乳腺癌细胞MDA-MB-231、人结肠癌细胞SW620。
下面对本发明所采用的技术方案做具体说明。
第一方面，本发明提供了一种N-苯基苯甲酰氨基吡唑并嘧啶类化合物，其具有下列结构式(Ⅰ)：
式(Ⅰ)中，R为4-Cl或3,5-二(三氟甲基)。
本发明特别优选所述的N-苯基苯甲酰氨基吡唑并嘧啶类化合物选自下列之一：
第二方面，本发明提供了一种式(I)所示的N-苯基苯甲酰氨基吡唑并嘧啶类化合物的制备方法，所述制备方法为：将4-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(Ⅱ)加入有机溶剂A中，在-10～40℃搅拌条件下，滴加盐酸，反应5～50分钟，再滴加含有化合物(Ⅲ)的有机溶剂A溶液，滴加完毕，升温至回流温度搅拌反应0.5～5小时，所得反应液经分离纯化得到式(Ⅰ)所示的N-苯基苯甲酰氨基吡唑并嘧啶类化合物；
式(III)中，R的定义同式(I)。
进一步，所述的4-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(Ⅱ)与盐酸、化合物(Ⅲ)的投料物质的量之比为1﹕0.1～1﹕0.8～1.2，优选为所述的4-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(Ⅱ)与盐酸、化合物(Ⅲ)的的投料物质的量之比为1﹕0.1～0.5﹕0.9～1.2。
进一步，所述有机溶剂A选自下列之一：甲醇、乙醇或异丙醇。所述有机溶剂A的用量以能够溶解4-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(Ⅱ)、化合物(Ⅲ)即可。优选有机溶剂A总体积用量以4-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(Ⅱ)的物质的量计为10～50mL/mmol，其中溶解4-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(Ⅱ)所用有机溶剂A体积用量以4-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(Ⅱ)的物质的量计为5～25mL/mmol，溶解化合物(Ⅲ)所用有机溶剂A体积用量以4-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(Ⅱ)的物质的量计为5～25mL/mmol。
进一步，在0～30℃搅拌条件下，滴加盐酸。
进一步，在0～30℃搅拌条件下，滴加含有化合物(Ⅲ)的有机溶剂A溶液。
进一步，反应过程用TLC跟踪检测(展开剂为体积比1～30:1的二氯甲烷和甲醇混合溶液)，以确定反应终点，一般回流反应时间在0.5～5小时。
进一步，所述分离纯化采用如下步骤：反应结束后，反应液冷却至室温，过滤，水洗，滤饼干燥后柱层析得到式(Ⅰ)所示的N-苯基苯甲酰氨基吡唑并嘧啶类化合物。
更进一步，所述柱层析的操作步骤具体如下：取滤饼于单口瓶中，加入有机溶剂B将其溶解，获得溶解液，然后向溶解液中加入滤饼质量1～2倍量的柱层析硅胶(优选300～400目粗孔(zcx.II)型柱层析硅胶)，混匀后，蒸除溶剂，得干燥的滤饼与硅胶的混合物，将混合物装柱上样，然后以体积比1～30:1的二氯甲烷和甲醇混合溶液为洗脱剂，进行洗脱，TLC跟踪检测(展开剂为体积比1～30:1的二氯甲烷和甲醇混合溶液)，根据TLC检测收集含式(Ⅰ)所示化合物的洗脱液，将洗脱液浓缩干燥，获得式(Ⅰ)所示化合物；所述有机溶剂B为下列之一：石油醚、二氯甲烷、甲醇或乙酸乙酯；所述有机溶剂B用量以能够溶解滤饼即可。
本发明所述的有机溶剂A、有机溶剂B，所表示的都是指用于反应或柱层析的有机溶剂，这里的字母并没有特指某一些有机溶剂的含义，字母只是为了便于表达清楚，用来区分这些出现在不同的步骤中的有机溶剂。上述有机溶剂A或B可以为同一溶剂，也可为不同种溶剂。.
第三方面，本发明提供了式(Ⅰ)所示的N-苯基苯甲酰氨基吡唑并嘧啶类化合物或其药学上可接受的盐在制备治疗或预防癌症的药物中的应用，所述的癌症的癌细胞为人恶性黑素瘤细胞A375、人肺癌细胞A549、人肝癌细胞HepG2、人胃癌细胞AGS、人乳腺癌细胞T47D、人乳腺癌细胞MDA-MB-231、人结肠癌细胞SW620。
作为优选，所述癌细胞为HepG2、AGS或T47D细胞，所述式(Ⅰ)所示的N-苯基苯甲酰氨基吡唑并嘧啶类化合物(Ⅰd)。
作为优选，所述癌细胞为A549、HepG2或T47D细胞，所述式(Ⅰ)所示的N-苯基苯甲酰氨基吡唑并嘧啶类化合物(Ⅰf)。
术语"药学上可接受的"在本申请中是指：化合物在化学上和/或在毒理学上与构成制剂的其它成分和/或与用其预防或治疗疾病或病症的人类或哺乳动物相容。
术语"药学上可接受的盐"是指本发明化合物的相对无毒、无机酸或有机酸加成盐。例如，参见S.M.Berge等人"PharmaceuticalSalts"，J.Pharm.Sci.1977，66，1-19。其中，无机酸例如盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硫酸、磷酸或硝酸等；有机酸例如甲酸、乙酸、乙酰乙酸、丙酮酸、三氟乙酸、丙酸、丁酸、己酸、庚酸、十一酸、月桂酸、苯甲酸、水杨酸、2-(4-羟基苯甲酰基)-苯甲酸、樟脑酸、肉桂酸、环戊烷丙酸、二葡萄糖酸、3-羟基-2-萘甲酸、烟酸、巴莫酸、果胶酯酸、3-苯基丙酸、苦味酸、特戊酸、2-羟基乙磺酸、衣康酸、胺基磺酸、三氟甲磺酸、十二烷基硫酸、乙磺酸、苯磺酸、对-甲苯磺酸、甲磺酸、2-萘磺酸、萘二磺酸、樟脑磺酸、柠檬酸、酒石酸、硬脂酸、乳酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、苹果酸、己二酸、海藻酸、马来酸、富马酸、D-葡萄糖酸、扁桃酸、抗坏血酸、葡庚糖酸、甘油磷酸、天冬胺酸、磺基水杨酸等。
与现有技术相比，本发明的有益效果主要体现在：(1)提供了一种新型的、具有良好的抗癌(尤其是人肝癌或人乳腺癌)活性的N-苯基苯甲酰氨基吡唑并嘧啶类化合物；(2)提供了该N-苯基苯甲酰氨基吡唑并嘧啶类化合物的制备方法，该制备方法简单，易于操作，原料易得且生产成本较低，适于实用，有望应用于制备预防或治疗肿瘤疾病的药物中；(3)提供了一类新型N-苯基苯甲酰氨基吡唑并嘧啶类化合物或其药学上可接受的盐在制备治疗或预防癌症的药物中的应用，结果显示，该类化合物对于人恶性黑素瘤细胞A375、人肺癌细胞A549、人肝癌细胞HepG2、人胃癌细胞AGS、人乳腺癌细胞T47D、人乳腺癌细胞MDA-MB-231、人结肠癌细胞SW620具有良好的抑制作用。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将进一步通过实施例对技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
4-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(Ⅱ)的制备参照文献(OrganicLetters,2013,15(8),1882-1885)的方法制备得到。
下列化合物(Ⅲa)～(Ⅲf)的制备参照文献(JournalofMedicinalChemistry,2008,51(8),2400-2411；Asian JournalofOrganicChemistry,2021,10(11),2892-2894；Med.Chem.Comm,2019,10(2),294-299)的方法制备得到。
实施例制备的化合物(Ia)～(If)的结构式如下：
实施例1：化合物(Ⅰa)的制备
用25.0mL的乙醇溶解0.155g(1.0mmol)4-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(Ⅱ)，-10℃磁力搅拌条件下，滴加1.0mL盐酸(1.0mol/L)，反应5分钟，再滴加含有0.191g(0.9mmol)化合物(Ⅲa)的25.0mL的乙醇溶液，滴完后反应液升温，回流反应0.5小时(反应过程采用TLC跟踪检测，展开剂为体积比1：1的二氯甲烷和甲醇混合溶液)，反应液冷却至室温，反应液过滤，滤饼用(10mL×3)水洗涤后，80℃干燥，干燥后的滤饼加入5.0mL石油醚溶剂将其溶解，获得溶解液，然后向溶解液中加入0.5克硅胶(300～400目粗孔(zcx.II)型柱层析硅胶)，混匀后，蒸除溶剂，得干燥的残留物与硅胶的混合物，将混合物装柱，然后以体积比1：1的二氯甲烷和甲醇混合溶液为洗脱剂，洗脱，TLC跟踪检测(展开剂为体积比1：1的二氯甲烷和甲醇混合溶液)，根据TLC检测收集含式(Ⅰa)所示的化合物的洗脱液，收集的洗脱液蒸除溶剂，干燥得到白色固体产物，即化合物(Ⅰa)，收率41％(以化合物(Ⅲa)物质的量计)，熔点271～274℃。1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ13.69(s,1H),10.25(s,1H),10.11(s,1H),8.43(s,1H),8.34(s,1H),8.04-8.01(m,2H),7.97-7.94(m,2H),7.73(dd,J＝8.6,1.1Hz,2H),7.29(dd,J＝8.4,7.5Hz,2H),7.05-7.01(m,1H).13CNMR(125MHz,DMSO-d6)δ165.05,155.12,154.93,154.07,142.56,139.37,132.33,128.99,128.61,128.55,123.52,120.41,119.85,101.00.ESI-MS:(m/z)calcdforC18H14N6O[M+H]+331.1；found331.0。
实施例2：化合物(Ⅰa)的制备
用5.0mL的甲醇溶解0.155g(1.0mmol)4-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(Ⅱ)，40℃磁力搅拌条件下，滴加0.1mL盐酸(1.0mol/L)，反应50分钟，再滴加含有0.254g(1.2mmol)化合物(Ⅲa)的5.0mL的甲醇溶液，滴完后反应液升温，回流反应5小时(反应过程采用TLC跟踪检测，展开剂为体积比30：1的二氯甲烷和甲醇混合溶液)，反应液冷却至室温，反应液过滤，滤饼用(10mL×3)水洗涤后，80℃干燥，干燥后的滤饼加入5.0mL二氯甲烷溶剂将其溶解，获得溶解液，然后向溶解液中加入0.5克硅胶(300～400目粗孔(zcx.II)型柱层析硅胶)，混匀后，蒸除溶剂，得干燥的残留物与硅胶的混合物，将混合物装柱，然后以体积比30：1的二氯甲烷和甲醇混合溶液为洗脱剂，洗脱，TLC跟踪检测(展开剂为体积比30：1的二氯甲烷和甲醇混合溶液)，根据TLC检测收集含式(Ⅰa)所示的化合物的洗脱液，收集的洗脱液蒸除溶剂，干燥得到白色固体产物，即化合物(Ⅰa)，收率49％(以化合物(Ⅱ)物质的量计)，熔点271～274℃。1HNMR，13CNMR和MS同实施例1。
实施例3：化合物(Ⅰa)的制备
用10.0mL的异丙醇溶解0.155g(1.0mmol)4-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(Ⅱ)，30℃磁力搅拌条件下，滴加0.5mL盐酸(1.0mol/L)，反应30分钟，再滴加含有0.170g(0.8mmol)化合物(Ⅲa)的10.0mL的异丙醇溶液，滴完后反应液升温，回流反应1小时(反应过程采用TLC跟踪检测，展开剂为体积比15：1的二氯甲烷和甲醇混合溶液)，反应液冷却至室温，反应液过滤，滤饼用(10mL×3)水洗涤后，80℃干燥，干燥后的滤饼加入5.0mL乙酸乙酯溶剂将其溶解，获得溶解液，然后向溶解液中加入0.5克硅胶(300～400目粗孔(zcx.II)型柱层析硅胶)，混匀后，蒸除溶剂，得干燥的残留物与硅胶的混合物，将混合物装柱，然后以体积比15：1的二氯甲烷和甲醇混合溶液为洗脱剂，洗脱，TLC跟踪检测(展开剂为体积比15：1的二氯甲烷和甲醇混合溶液)，根据TLC检测收集含式(Ⅰa)所示的化合物的洗脱液，收集的洗脱液蒸除溶剂，干燥得到白色固体产物，即化合物(Ⅰa)，收率45％(以化合物(Ⅲa)物质的量计)，熔点271～274℃。1HNMR，13CNMR和MS同实施例1。
实施例4：化合物(Ⅰa)的制备
用20.0mL的乙醇溶解0.155g(1.0mmol)4-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(Ⅱ)，0℃磁力搅拌条件下，滴加0.2mL盐酸(1.0mol/L)，反应20分钟，再滴加含有0.212g(1.0mmol)化合物(Ⅲa)的20.0mL的乙醇溶液，滴完后反应液升温，回流反应3小时(反应过程采用TLC跟踪检测，展开剂为体积比10：1的二氯甲烷和甲醇混合溶液)，反应液冷却至室温，反应液过滤，滤饼用(10mL×3)水洗涤后，80℃干燥，干燥后的滤饼加入5.0mL甲醇溶剂将其溶解，获得溶解液，然后向溶解液中加入0.5克硅胶(300～400目粗孔(zcx.II)型柱层析硅胶)，混匀后，蒸除溶剂，得干燥的残留物与硅胶的混合物，将混合物装柱，然后以体积比10：1的二氯甲烷和甲醇混合溶液为洗脱剂，洗脱，TLC跟踪检测(展开剂为体积比10：1的二氯甲烷和甲醇混合溶液)，根据TLC检测收集含式(Ⅰa)所示的化合物的洗脱液，收集的洗脱液蒸除溶剂，干燥得到白色固体产物，即化合物(Ⅰa)，收率47％(以化合物(Ⅱ)物质的量计)，熔点271～274℃。1HNMR，13CNMR和MS同实施例1。
实施例5：化合物(Ⅰb)的制备
用20.0mL的乙醇溶解0.155g(1.0mmol)4-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(Ⅱ)，0℃磁力搅拌条件下，滴加0.2mL盐酸(1.0mol/L)，反应20分钟，再滴加含有0.226g(1.0mmol)化合物(Ⅲb)的20.0mL的乙醇溶液，滴完后反应液升温，回流反应2.5小时(反应过程采用TLC跟踪检测，展开剂为体积比10：1的二氯甲烷和甲醇混合溶液)，反应液冷却至室温，反应液过滤，滤饼用(10mL×3)水洗涤后，80℃干燥，干燥后的滤饼加入5.0mL甲醇溶剂将其溶解，获得溶解液，然后向溶解液中加入0.5克硅胶(300～400目粗孔(zcx.II)型柱层析硅胶)，混匀后，蒸除溶剂，得干燥的残留物与硅胶的混合物，将混合物装柱，然后以体积比10：1的二氯甲烷和甲醇混合溶液为洗脱剂，洗脱，TLC跟踪检测(展开剂为体积比10：1的二氯甲烷和甲醇混合溶液)，根据TLC检测收集含式(Ⅰb)所示的化合物的洗脱液，收集的洗脱液蒸除溶剂，干燥得到白色固体产物，即化合物(Ⅰb)，收率31％(以化合物(Ⅱ)物质的量计)，熔点368～370℃。1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ13.69(s,1H),10.23(s,1H),9.75(s,1H),8.44(s,1H),8.33(s,1H),8.06-7.94(m,4H),7.31(d,J＝7.5Hz,1H),7.23(d,J＝7.3Hz,1H),7.18(t,J＝7.1Hz,1H),7.14-7.10(m,1H),2.21(s,3H).13CNMR(125MHz,DMSO-d6)δ164.86,155.19,154.84,154.06,142.51,136.66,133.74,132.51,130.37,128.67,128.55,126.64,126.06,125.93,119.91,100.99,18.03.ESI-MS:(m/z)calcdforC19H16N6O[M+H]+345.1；found345.2。
实施例6：化合物(Ⅰc)的制备
用20.0mL的乙醇溶解0.155g(1.0mmol)4-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(Ⅱ)，0℃磁力搅拌条件下，滴加0.2mL盐酸(1.0mol/L)，反应20分钟，再滴加含有0.226g(1.0mmol)化合物(Ⅲc)的20.0mL的乙醇溶液，滴完后反应液升温，回流反应3.5小时(反应过程采用TLC跟踪检测，展开剂为体积比10：1的二氯甲烷和甲醇混合溶液)，反应液冷却至室温，反应液过滤，滤饼用(10mL×3)水洗涤后，80℃干燥，干燥后的滤饼加入5.0mL甲醇溶剂将其溶解，获得溶解液，然后向溶解液中加入0.5克硅胶(300～400目粗孔(zcx.II)型柱层析硅胶)，混匀后，蒸除溶剂，得干燥的残留物与硅胶的混合物，将混合物装柱，然后以体积比10：1的二氯甲烷和甲醇混合溶液为洗脱剂，洗脱，TLC跟踪检测(展开剂为体积比10：1的二氯甲烷和甲醇混合溶液)，根据TLC检测收集含式(Ⅰc)所示的化合物的洗脱液，收集的洗脱液蒸除溶剂，干燥得到白色固体产物，即化合物(Ⅰc)，收率35％(以化合物(Ⅱ)物质的量计)，熔点325～329℃。1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ13.69(s,1H),10.22(s,1H),10.03(s,1H),8.44(s,1H),8.33(s,1H),8.01(d,J＝8.7Hz,2H),7.95(d,J＝8.7Hz,2H),7.61(d,J＝8.3Hz,2H),7.11(d,J＝8.3Hz,2H),2.23(s,3H).13CNMR(125MHz,DMSO-d6)δ164.88,155.19,154.84,154.05,142.47,136.86,132.51,129.11,129.06,128.53,120.46,119.86,100.99,20.58.ESI-MS:(m/z)calcdforC19H16N6O[M+H]+345.1；found345.2。
实施例7：化合物(Ⅰd)的制备
用20.0mL的乙醇溶解0.155g(1.0mmol)4-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(Ⅱ)，0℃磁力搅拌条件下，滴加0.2mL盐酸(1.0mol/L)，反应20分钟，再滴加含有0.247g(1.0mmol)化合物(Ⅲd)的20.0mL的乙醇溶液，滴完后反应液升温，回流反应4小时(反应过程采用TLC跟踪检测，展开剂为体积比10：1的二氯甲烷和甲醇混合溶液)，反应液冷却至室温，反应液过滤，滤饼用(10mL×3)水洗涤后，80℃干燥，干燥后的滤饼加入5.0mL甲醇溶剂将其溶解，获得溶解液，然后向溶解液中加入0.5克硅胶(300～400目粗孔(zcx.II)型柱层析硅胶)，混匀后，蒸除溶剂，得干燥的残留物与硅胶的混合物，将混合物装柱，然后以体积比10：1的二氯甲烷和甲醇混合溶液为洗脱剂，洗脱，TLC跟踪检测(展开剂为体积比10：1的二氯甲烷和甲醇混合溶液)，根据TLC检测收集含式(Ⅰd)所示的化合物的洗脱液，收集的洗脱液蒸除溶剂，干燥得到白色固体产物，即化合物(Ⅰd)，收率52％(以化合物(Ⅱ)物质的量计)，熔点298～300℃。1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ13.71(s,1H),10.28(s,1H),10.26(s,1H),8.46(s,1H),8.35(s,1H),8.05(d,J＝8.8Hz,2H),7.99-7.94(m,3H),7.70-7.67(m,1H),7.35(t,J＝8.1Hz,1H),7.12(ddd,J＝8.0,2.0,0.8Hz,1H).13CNMR(125MHz,DMSO-d6)δ165.31,142.57,140.94,133.04,130.37,128.75,123.24,120.19,119.76,118.67,101.09.ESI-MS:(m/z)calcdforC18H13ClN6O[M+H]+365.1；found365.2。
实施例8：化合物(Ⅰe)的制备
用20.0mL的乙醇溶解0.155g(1.0mmol)4-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(Ⅱ)，0℃磁力搅拌条件下，滴加0.2mL盐酸(1.0mol/L)，反应20分钟，再滴加含有0.248g(1.0mmol)化合物(Ⅲe)的20.0mL的乙醇溶液，滴完后反应液升温，回流反应4小时(反应过程采用TLC跟踪检测，展开剂为体积比10：1的二氯甲烷和甲醇混合溶液)，反应液冷却至室温，反应液过滤，滤饼用(10mL×3)水洗涤后，80℃干燥，干燥后的滤饼加入5.0mL甲醇溶剂将其溶解，获得溶解液，然后向溶解液中加入0.5克硅胶(300～400目粗孔(zcx.II)型柱层析硅胶)，混匀后，蒸除溶剂，得干燥的残留物与硅胶的混合物，将混合物装柱，然后以体积比10：1的二氯甲烷和甲醇混合溶液为洗脱剂，洗脱，TLC跟踪检测(展开剂为体积比10：1的二氯甲烷和甲醇混合溶液)，根据TLC检测收集含式(Ⅰe)所示的化合物的洗脱液，收集的洗脱液蒸除溶剂，干燥得到白色固体产物，即化合物(Ⅰe)，收率16％(以化合物(Ⅱ)物质的量计)，熔点313～315℃。1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ13.70(s,1H),10.24(s,1H),9.99(s,1H),8.44(s,1H),8.33(s,1H),8.03(d,J＝8.8Hz,2H),7.97(d,J＝8.8Hz,2H),7.54(td,J＝8.9,6.3Hz,1H),7.31(ddd,J＝10.5,9.2,2.8Hz,1H),7.10-7.05(m,1H).13CNMR(125MHz,DMSO-d6)δ165.03,155.16,154.85,154.02,142.87,132.51,128.72,128.57,127.74,119.81,111.31,111.14,104.61,104.41,104.20,101.03.ESI-MS:(m/z)calcdforC18H12F2N6O367.1[M+H]+；found367.0。
实施例9：化合物(Ⅰf)的制备
用20.0mL的乙醇溶解0.155g(1.0mmol)4-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(Ⅱ)，0℃磁力搅拌条件下，滴加0.2mL盐酸(1.0mol/L)，反应20分钟，再滴加含有0.348g(1.0mmol)化合物(Ⅲf)的20.0mL的乙醇溶液，滴完后反应液升温，回流反应4.5小时(反应过程采用TLC跟踪检测，展开剂为体积比10：1的二氯甲烷和甲醇混合溶液)，反应液冷却至室温，反应液过滤，滤饼用(10mL×3)水洗涤后，80℃干燥，干燥后的滤饼加入5.0mL甲醇溶剂将其溶解，获得溶解液，然后向溶解液中加入0.8克硅胶(300～400目粗孔(zcx.II)型柱层析硅胶)，混匀后，蒸除溶剂，得干燥的残留物与硅胶的混合物，将混合物装柱，然后以体积比10：1的二氯甲烷和甲醇混合溶液为洗脱剂，洗脱，TLC跟踪检测(展开剂为体积比10：1的二氯甲烷和甲醇混合溶液)，根据TLC检测收集含式(Ⅰf)所示的化合物的洗脱液，收集的洗脱液蒸除溶剂，干燥得到白色固体产物，即化合物(Ⅰf)，收率56％(以化合物(Ⅱ)物质的量计)，熔点302～303℃。1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ13.74(s,1H),10.72(s,1H),10.30(s,1H),8.49(d,J＝21.1Hz,3H),8.37(s,1H),8.09(d,J＝8.8Hz,2H),8.03(d,J＝8.8Hz,2H),7.76(s,1H).13CNMR(125MHz,DMSO-d6)δ165.73,155.15,154.03,143.32,141.42,131.12,130.85,130.60,130.33,128.85,127.68,126.67,124.50,122.33,119.84,101.09.ESI-MS:(m/z)calcdforC20H12F6N6O[M+H]+467.1；found467.2。
实施例10：抗癌活性体外测试
将制得的化合物(Ⅰa)～(Ⅰf)分别进行了人恶性黑素瘤细胞A375、人肺癌细胞A549、人肝癌细胞HepG2、人胃癌细胞AGS、人乳腺癌细胞T47D、人乳腺癌细胞MDA-MB-231、人结肠癌细胞SW620生物活性测试，其中化合物(Ⅰa)由实施例4方法制备得到。
测试方法：四氮唑盐还原法(MTT法)。
细胞株：人恶性黑素瘤细胞A375、人肺癌细胞A549、人肝癌细胞HepG2、人胃癌细胞AGS、人乳腺癌细胞T47D、人乳腺癌细胞MDA-MB-231、人结肠癌细胞SW620。上述细胞株购自中国科学院上海生命科学院细胞库。
实验步骤如下：
(1)肿瘤细胞的培养
实验所用的细胞代数均在5代以内。细胞培养所用的耗材和试剂均经过严格的灭菌操作，并且所有实验操作均在无菌操作台内进行。
(a)肿瘤细胞的复苏
实验开始前先把要使用的物品，如培养瓶、离心管、移液枪、枪头、废液桶等放入超净台打开紫外灯灭菌，并将细胞培养所用的试剂放入37℃恒温水浴锅内预热。一切准备工作就绪后关掉紫外灯，开启超净台日光灯及通风扇。从-80℃冰箱内取出冻存的肿瘤细胞，在37℃水浴中振摇快速解冻，保证冻存管内冻存液仍有少部分未解冻的情况下，喷酒精放入超净台，然后立即将冻存管内的细胞全部转移至已加入含10％FBS的DMEM培养液(A375、Hepg2、T47D、MDA-MB-231)或含10％FBS的1640培养液(A549、AGS、SW620)的15mL离心管中，用移液枪轻轻吹打混匀。将离心管置于离心机中，转速1000rpm离心5min，在超净台内吸掉上清液。用移液枪吸取2mL含10％FBS的DMEM培养液(A375、Hepg2、T47D、MDA-MB-231)或含10％FBS的1640培养液(A549、AGS、SW620)至含有细胞沉淀的离心管中制成细胞悬液，并将细胞悬液吹打混匀转移到瓶底面积为25cm2的透气培养瓶中，再补加含10％FBS的DMEM培养液(A375、Hepg2、T47D、MDA-MB-231)或含10％FBS的1640培养液(A549、AGS、SW620)4mL，轻轻摇晃培养瓶混匀细胞，将培养瓶放至5％CO2、37℃恒温培养箱中培养2～3天。
(b)肿瘤细胞的传代
当细胞生长状态良好并且铺满培养瓶瓶底70％～80％时，即可进行传代。传代操作步骤均在超净台内完成，将准备工作做好后即可开始传代。首先将培养瓶中的原有培养液用移液枪吸掉打进废液桶内，加2mL的PBS反复洗涤几次吸掉，然后加入600～700μL左右的胰蛋白酶(含0.02％EDTA、酚红和0.25％胰酶)，保证瓶底完全被胰蛋白酶覆住，轻轻摇动培养瓶，放入37℃恒温培养箱中孵育1～2min，在显微镜下观察细胞脱落情况，如有少量细胞仍贴在壁上，可以用指肚轻轻敲打甁壁，直至细胞大部分能从瓶底脱落。加入2mL的含10％FBS的DMEM培养液(A375、Hepg2、T47D、MDA-MB-231)或含10％FBS的1640培养液(A549、AGS、SW620)终止消化后用移液枪轻轻吹打细胞，将细胞从瓶底全部吹落，并将细胞悬液转移至15mL离心管中，1000rpm,离心5min。吸掉上清液，用含10％FBS的DMEM培养液(A375、Hepg2、T47D、MDA-MB-231)或含10％FBS的1640培养液(A549、AGS、SW620)稀释吹打均匀后平均分配到2～3个培养瓶中继续在5％CO2、37℃恒温培养箱内培养2～3天。
(c)肿瘤细胞的冻存
预先按照FBS(胎牛血清):DMSO＝9:1的体积比例配置好细胞冻存液，置于4℃冰箱备用。冻存操作步骤均在超净台内完成，将准备工作做好后即可开始冻存。首先将培养瓶中的原有培养液吸掉，加2mL的PBS缓冲液反复洗涤几次倒掉，然后加入600～700μL左右的胰蛋白酶(含0.02％EDTA、酚红和0.25％胰酶)，轻轻摇动培养瓶，保证胰酶能够把培养瓶瓶底覆盖，放入37℃恒温培养箱中孵育1～2min，在显微镜下观察细胞脱落情况，如有少量细胞仍贴在壁上，可以用指肚轻轻敲打甁壁，直至细胞能大部分从瓶底脱落。加入2mL的含10％FBS的DMEM培养液(A375、Hepg2、T47D、MDA-MB-231)或含10％FBS的1640培养液(A549、AGS、SW620)终止消化后用移液枪轻轻吹打细胞，将细胞从瓶底全部吹落，并将细胞悬液转移至15mL离心管中，1000rpm,离心5min。倒掉上清液。加入1mL刚从4℃冰箱取出的冻存液，并吹打均匀形成细胞悬液，转移至冻存管内。在标记好细胞种类、细胞代数、冻存日期后放入4℃中静置30min,-20℃中静置1小时后放入-80℃超低温冰箱内保存。
(2)MTT实验方法
(a)细胞计数：将培养瓶中生长状态良好的肿瘤细胞经消化、离心后，用4mL含10％FBS的DMEM培养液(A375、Hepg2、T47D、MDA-MB-231)或含10％FBS的1640培养液(A549、AGS、SW620)重悬，取10μL细胞悬液至细胞计数板，计数后，细胞稀释到5×104个/mL。
(b)铺板：取96孔板，实验孔加入100μL稀释过的细胞悬液，空白孔加入100μL含10％FBS的DMEM培养液(A375、Hepg2、T47D、MDA-MB-231)或含10％FBS的1640培养液(A549、AGS、SW620)，周围补加100μLPBS缓冲液，在CO2恒温培养箱中培养24h。
(c)配制化合物加药：用含10％FBS的DMEM培养液(A375、Hepg2、T47D、MDA-MB-231)或含10％FBS的1640培养液(A549、AGS、SW620)将DMSO配置的10μmol/mL化合物以及阳性对照药索拉菲尼稀释到指定浓度，分别为20μM、10μM、5μM、2.5μM、1.25μM，采用换液法进行上药。将原有培养液弃去，向实验孔中加入100μL含化合物或者阳性对照药的含10％FBS的DMEM培养液(A375、Hepg2、T47D、MDA-MB-231)或含10％FBS的1640培养液(A549、AGS、SW620)，向对照组以及空白孔中加入100μL含10％FBS的DMEM培养液(A375、Hepg2、T47D、MDA-MB-231)或含10％FBS的1640培养液(A549、AGS、SW620)，加药后把96孔板放入5％CO2、37℃恒温培养箱内继续培养。
(d)加MTT：48小时后，取出96孔板放入超净台内，避光条件下每孔加入10μL，5mg/mL的MTT溶液，之后放入5％CO2、37℃恒温培养箱内继续培养。
(e)检测：加入MTT的96孔板在培养箱中孵育3.5～4h取出，将每孔中的溶液小心地吸出，每孔加入150μL的DMSO溶解生成的甲臜，然后放至平板振荡器上震荡10min，使用酶标仪检测490nm下的吸光度值。
(f)实验数据处理：按照以下公式计算细胞存活率，细胞存活率50％的值即为IC50。
细胞存活率(％)＝[(As-Ab)/(Ac-Ab)]×100％
As:实验孔(含有细胞的培养液、MTT、毒性物质)
Ac:对照孔(含有细胞的培养液、MTT、没有毒性物质)
Ab:空白孔(含MTT、不含细胞和毒性物质的培养液)。
测试的结果如表1所示：
表1.化合物(Ⅰ)对癌细胞生长的抑制作用
以上所述仅为本申请的实施例而已，并不用于限制本申请的保护范围，对于本领域的技术人员来说，本申请可以有各种更改和变化。凡在本申请的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本申请的保护范围之内。
Claims (10)
1.一种N-苯基苯甲酰氨基吡唑并嘧啶类化合物，其具有下列结构式(Ⅰ)：
式(Ⅰ)中，R为4-Cl或3,5-二(三氟甲基)。
2.一种如权利要求1所述的N-苯基苯甲酰氨基吡唑并嘧啶类化合物的制备方法，所述制备方法为：将4-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(Ⅱ)加入有机溶剂A中，在-10～40℃搅拌条件下，滴加盐酸，反应5～50分钟，再滴加含有化合物(Ⅲ)的有机溶剂A溶液，滴加完毕，升温至回流温度搅拌反应0.5～5小时，所得反应液经分离纯化得到式(Ⅰ)所示的N-苯基苯甲酰氨基吡唑并嘧啶类化合物；
式(III)中，R的定义同式(I)。
3.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于：所述的4-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(Ⅱ)与盐酸、化合物(Ⅲ)的投料物质的量之比为1﹕0.1～1﹕0.8～1.2。
4.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于：所述的4-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(Ⅱ)与盐酸、化合物(Ⅲ)的的投料物质的量之比为1﹕0.1～0.5﹕0.9～1.2。
5.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于：所述有机溶剂A选自下列之一：甲醇、乙醇或异丙醇。
6.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于：在0～30℃搅拌条件下，滴加盐酸。
7.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于：在0～30℃搅拌条件下，滴加含有化合物(Ⅲ)的有机溶剂A溶液。
8.如权利要求1所述的N-苯基苯甲酰氨基吡唑并嘧啶类化合物或其药学上可接受的盐在制备治疗或预防癌症的药物中的应用，所述的癌症的癌细胞为人恶性黑素瘤细胞A375、人肺癌细胞A549、人肝癌细胞HepG2、人胃癌细胞AGS、人乳腺癌细胞T47D、人乳腺癌细胞MDA-MB-231或人结肠癌细胞SW620。
9.如权利要求8所述的应用，其特征在于：所述癌细胞为HepG2、AGS或T47D细胞，所述式(I)所示的N-苯基苯甲酰氨基吡唑并嘧啶类化合物中，R为4-Cl。
10.如权利要求8所述的应用，其特征在于：所述癌细胞为A549、SW620或MDA-MB-231细胞，所述式(I)所示的N-苯基苯甲酰氨基吡唑并嘧啶类化合物中，R为3,5-二(三氟甲基)。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202211298264.0A CN115557953A (zh) | 2022-10-22 | 2022-10-22 | N-苯基苯甲酰氨基吡唑并嘧啶类化合物及其制备和应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202211298264.0A CN115557953A (zh) | 2022-10-22 | 2022-10-22 | N-苯基苯甲酰氨基吡唑并嘧啶类化合物及其制备和应用 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN115557953A true CN115557953A (zh) | 2023-01-03 |
Family
ID=84746035
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202211298264.0A Pending CN115557953A (zh) | 2022-10-22 | 2022-10-22 | N-苯基苯甲酰氨基吡唑并嘧啶类化合物及其制备和应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN115557953A (zh) |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103570723A (zh) * | 2012-07-27 | 2014-02-12 | 四川大学 | 吡唑并嘧啶衍生物及其制备方法和在药物制备中的用途 |
| CN108084162A (zh) * | 2018-01-24 | 2018-05-29 | 浙江工业大学 | 二甲氧基苯氨基乙酰氨基苯并[d]氮杂*基喹唑啉类化合物及制备和应用 |
-
2022
- 2022-10-22 CN CN202211298264.0A patent/CN115557953A/zh active Pending
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103570723A (zh) * | 2012-07-27 | 2014-02-12 | 四川大学 | 吡唑并嘧啶衍生物及其制备方法和在药物制备中的用途 |
| CN108084162A (zh) * | 2018-01-24 | 2018-05-29 | 浙江工业大学 | 二甲氧基苯氨基乙酰氨基苯并[d]氮杂*基喹唑啉类化合物及制备和应用 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| MAI ADEL: "Identification of new pyrrolo[2, 3-d]pyrimidines as potent VEGFR-2 tyrosine kinase inhibitors: Design, synthesis, biological evaluation and molecular modeling", 《BIOORGANIC CHEMISTRY》, vol. 81, pages 612 - 629 * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN114133390B (zh) | 一种去氢骆驼蓬碱衍生物及其制备方法和应用 | |
| CN104558094B (zh) | 皂苷苷元衍生物、其制备方法及在制备抗肿瘤药物中的应用 | |
| CN111479809A (zh) | 一种TGF-βRI抑制剂的晶型、盐型及其制备方法 | |
| CN115557953A (zh) | N-苯基苯甲酰氨基吡唑并嘧啶类化合物及其制备和应用 | |
| CN115650986A (zh) | 肉桂酰氨基吡唑并[3,4-d]嘧啶类化合物及其制备和应用 | |
| CN108727397B (zh) | 菲啶衍生物 | |
| CN109438437A (zh) | 一类含噻唑环的抗癌化合物 | |
| CN115322163B (zh) | 作为vegfr-2抑制剂的双甲酰氨基均四嗪类化合物及其制备和应用 | |
| CN115286589B (zh) | 肉桂酰基四嗪类化合物及其制备和应用 | |
| CN117800925A (zh) | 苯基脲基喹唑啉类化合物及制备和在制备预防或治疗肝癌药物中的应用 | |
| CN117756733A (zh) | 脲基四嗪类化合物及其制备和应用 | |
| CN115260113A (zh) | 取代苯基二甲基四嗪甲酰胺类化合物及其制备和应用 | |
| CN117486809A (zh) | 2-氯喹唑啉类化合物及制备和在制备预防或治疗乳腺癌药物中的应用 | |
| CN108324717B (zh) | 特戊酰氨基氯代苯并[d]氮杂*基喹唑啉类化合物在制备治疗宫颈癌药物中的应用 | |
| CN117752661A (zh) | 二甲基四嗪甲酰胺类化合物在制备治疗或预防宫颈癌药物中的应用 | |
| CN117756734A (zh) | 二甲基四嗪甲酰胺类化合物及其制备和应用 | |
| CN111423441A (zh) | 一类具有抗肿瘤活性的卤代吲哚苦参碱衍生物及制备方法和应用 | |
| CN108822054A (zh) | 盐酸奥达特罗晶型c及其制备方法 | |
| CN117752653A (zh) | 四嗪类化合物在制备治疗或预防食管癌药物中的应用 | |
| CN109400595A (zh) | 一类含噻吩环的抗癌化合物 | |
| CN108014115B (zh) | 特戊酰氨基甲氧苯基苯并[d]氮杂*基喹唑啉类化合物在制备治疗肺癌药物中的应用 | |
| CN114886896B (zh) | 2-氯喹唑啉类衍生物或其药学上可接受的盐在制备预防或治疗宫颈癌药物中的应用 | |
| WO2024109936A1 (zh) | 一种喹啉胺类化合物晶型及其制备方法 | |
| WO2024109937A1 (zh) | 一种喹啉胺类化合物的可药用盐、晶型及其制备方法 | |
| CN110872307B (zh) | 一种医院妇科所用噻唑类药物分子及其制备方法和应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination |