CN115536733A - 一种尿鸟苷蛋白类似物盐及片剂的制备方法 - Google Patents
一种尿鸟苷蛋白类似物盐及片剂的制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN115536733A CN115536733A CN202211187368.4A CN202211187368A CN115536733A CN 115536733 A CN115536733 A CN 115536733A CN 202211187368 A CN202211187368 A CN 202211187368A CN 115536733 A CN115536733 A CN 115536733A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- mobile phase
- sodium salt
- solution
- washing
- procatide
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 31
- -1 uroguanylin analogue salt Chemical class 0.000 title claims abstract description 8
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 54
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims abstract description 39
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 claims abstract description 39
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 23
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims abstract description 21
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 claims abstract description 20
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 claims abstract description 11
- 239000003480 eluent Substances 0.000 claims abstract description 8
- 238000011068 loading method Methods 0.000 claims abstract description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 97
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical group OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 75
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical group CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 36
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims description 33
- 239000008213 purified water Substances 0.000 claims description 16
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 10
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 6
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 6
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 6
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 6
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 claims description 6
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 claims description 6
- 229920000168 Microcrystalline cellulose Polymers 0.000 claims description 5
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 claims description 5
- 235000019813 microcrystalline cellulose Nutrition 0.000 claims description 5
- 239000008108 microcrystalline cellulose Substances 0.000 claims description 5
- 229940016286 microcrystalline cellulose Drugs 0.000 claims description 5
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 4
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 3
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 3
- 229910000403 monosodium phosphate Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 235000019799 monosodium phosphate Nutrition 0.000 claims description 3
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 claims description 3
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 3
- AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M sodium dihydrogen phosphate Chemical compound [Na+].OP(O)([O-])=O AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 3
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 claims description 3
- 229960004919 procaine Drugs 0.000 claims description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims 2
- 239000012535 impurity Substances 0.000 abstract description 12
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 35
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 28
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 19
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 17
- YTJSFYQNRXLOIC-UHFFFAOYSA-N octadecylsilane Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC[SiH3] YTJSFYQNRXLOIC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 17
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 17
- 230000005526 G1 to G0 transition Effects 0.000 description 16
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 9
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 9
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 9
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 9
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 8
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 7
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 7
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 5
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 5
- 238000013112 stability test Methods 0.000 description 5
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 4
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 4
- 238000011160 research Methods 0.000 description 4
- 238000002390 rotary evaporation Methods 0.000 description 4
- NSPHQWLKCGGCQR-DLJDZFDSSA-N (2s)-2-[[(1r,4s,7s,10s,13s,16r,21r,27s,34r,37s,40s)-10-(2-amino-2-oxoethyl)-34-[[(2s)-4-carboxy-2-[[(2s)-3-carboxy-2-[[(2s)-2,4-diamino-4-oxobutanoyl]amino]propanoyl]amino]butanoyl]amino]-37-(2-carboxyethyl)-27-[(1r)-1-hydroxyethyl]-4-methyl-40-(2-methylp Chemical compound N1C(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O)CSSC[C@@H]2NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H]1CSSC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC2=O NSPHQWLKCGGCQR-DLJDZFDSSA-N 0.000 description 3
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-M Trifluoroacetate Chemical compound [O-]C(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 159000000007 calcium salts Chemical class 0.000 description 3
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 3
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 3
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 3
- 159000000003 magnesium salts Chemical class 0.000 description 3
- 108010018859 plecanatide Proteins 0.000 description 3
- 229950008515 plecanatide Drugs 0.000 description 3
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 3
- XAEFZNCEHLXOMS-UHFFFAOYSA-M potassium benzoate Chemical compound [K+].[O-]C(=O)C1=CC=CC=C1 XAEFZNCEHLXOMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 3
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 3
- USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N Ammonium acetate Chemical compound N.CC(O)=O USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000005695 Ammonium acetate Substances 0.000 description 2
- 102100034605 Atrial natriuretic peptide receptor 3 Human genes 0.000 description 2
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010010774 Constipation Diseases 0.000 description 2
- 101000924488 Homo sapiens Atrial natriuretic peptide receptor 3 Proteins 0.000 description 2
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102400000230 Uroguanylin Human genes 0.000 description 2
- 101800000255 Uroguanylin Proteins 0.000 description 2
- 159000000021 acetate salts Chemical class 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 229940043376 ammonium acetate Drugs 0.000 description 2
- 235000019257 ammonium acetate Nutrition 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 2
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 2
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 2
- 238000011031 large-scale manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 2
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 2
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000007363 ring formation reaction Methods 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- SJMPVWVIVWEWJK-AXEIBBKLSA-N uroguanylin Chemical compound SC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)CC)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O SJMPVWVIVWEWJK-AXEIBBKLSA-N 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 239000004254 Ammonium phosphate Substances 0.000 description 1
- 241001518005 Callisto Species 0.000 description 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Natural products CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 239000008186 active pharmaceutical agent Substances 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910000148 ammonium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019289 ammonium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- NKWPZUCBCARRDP-UHFFFAOYSA-L calcium bicarbonate Chemical compound [Ca+2].OC([O-])=O.OC([O-])=O NKWPZUCBCARRDP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000020 calcium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- MNNHAPBLZZVQHP-UHFFFAOYSA-N diammonium hydrogen phosphate Chemical compound [NH4+].[NH4+].OP([O-])([O-])=O MNNHAPBLZZVQHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940088679 drug related substance Drugs 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- QWDJLDTYWNBUKE-UHFFFAOYSA-L magnesium bicarbonate Chemical compound [Mg+2].OC([O-])=O.OC([O-])=O QWDJLDTYWNBUKE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000022 magnesium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000014824 magnesium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 239000002370 magnesium bicarbonate Substances 0.000 description 1
- 239000007935 oral tablet Substances 0.000 description 1
- 229940096978 oral tablet Drugs 0.000 description 1
- 230000008855 peristalsis Effects 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 230000012495 positive regulation of renal sodium excretion Effects 0.000 description 1
- 229910000028 potassium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000015497 potassium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 239000011736 potassium bicarbonate Substances 0.000 description 1
- TYJJADVDDVDEDZ-UHFFFAOYSA-M potassium hydrogencarbonate Chemical compound [K+].OC([O-])=O TYJJADVDDVDEDZ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- MFDFERRIHVXMIY-UHFFFAOYSA-N procaine Chemical compound CCN(CC)CCOC(=O)C1=CC=C(N)C=C1 MFDFERRIHVXMIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 239000000018 receptor agonist Substances 0.000 description 1
- 229940044601 receptor agonist Drugs 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000012430 stability testing Methods 0.000 description 1
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/08—Linear peptides containing only normal peptide links having 12 to 20 amino acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61J—CONTAINERS SPECIALLY ADAPTED FOR MEDICAL OR PHARMACEUTICAL PURPOSES; DEVICES OR METHODS SPECIALLY ADAPTED FOR BRINGING PHARMACEUTICAL PRODUCTS INTO PARTICULAR PHYSICAL OR ADMINISTERING FORMS; DEVICES FOR ADMINISTERING FOOD OR MEDICINES ORALLY; BABY COMFORTERS; DEVICES FOR RECEIVING SPITTLE
- A61J3/00—Devices or methods specially adapted for bringing pharmaceutical products into particular physical or administering forms
- A61J3/06—Devices or methods specially adapted for bringing pharmaceutical products into particular physical or administering forms into the form of pills, lozenges or dragees
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- A61K38/10—Peptides having 12 to 20 amino acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/20—Pills, tablets, discs, rods
- A61K9/2004—Excipients; Inactive ingredients
- A61K9/2013—Organic compounds, e.g. phospholipids, fats
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/20—Pills, tablets, discs, rods
- A61K9/2004—Excipients; Inactive ingredients
- A61K9/2022—Organic macromolecular compounds
- A61K9/205—Polysaccharides, e.g. alginate, gums; Cyclodextrin
- A61K9/2054—Cellulose; Cellulose derivatives, e.g. hydroxypropyl methylcellulose
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/20—Pills, tablets, discs, rods
- A61K9/2095—Tabletting processes; Dosage units made by direct compression of powders or specially processed granules, by eliminating solvents, by melt-extrusion, by injection molding, by 3D printing
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/10—Laxatives
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Immunology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
本专利提供一种尿鸟苷蛋白类似物盐及片剂的制备方法，该方法工艺简单、操作方便，所得产品杂质低、质量稳定，具体包括如下步骤：（1）将纯化后的普卡那肽溶液加载到制备级反相高效液相色谱系统的色谱柱上，先以含钠盐的流动相体系进行第一次冲洗，再以含水的流动相体系进行第二次冲洗，最后以含水的流动相体系进行第三次冲洗，收集洗脱液；（2）将步骤（1）中所得的洗脱液减压蒸馏浓缩后，经冷冻干燥后，即得普卡那肽钠盐精肽。
Description
技术领域
本发明涉及多肽领域，更具体地，本发明涉及提供一种尿鸟苷蛋白类似物盐及片剂的制备方法。
背景技术
普卡那肽(Plecanatide)是尿鸟苷蛋白 (uroguanylin，UGN)的类似物，含有双二硫键连接的16个氨基酸的环状多肽。该药最初由美国Callisto制药公司研制，转让给Synergy制药公司开发，于2017年1月19日获得美国食品药品管理局(FDA)批准上市，商品名为Trulance®。普卡那肽是含16个氨基酸的环状多肽，是促尿钠排泄的鸟苷酸环化酶C(guanylate cyclase-C,GC-C)受体激动药，能调节胃肠道中的酸碱离子，诱导液体转运进入胃肠道，增加胃肠道的蠕动，适用于治疗成人慢性特发性便秘(chronicidiopathicconstipation，CIC)。
目前市场上仅存在普卡那肽原研制剂，采用普通口服片剂，参照普卡那肽FDA说明书，普卡那肽原研制剂的存放温度为20-25℃。在普卡那肽的研究中，我们发现普卡那肽原料药在存放温度25℃的条件下，会有不同杂质的增长。
本发明将针对易于产生杂质的药物在存放过程中稳定杂质，采用制备普卡那肽钠盐精肽，增加药物存放稳定性。
发明内容
本发明的目的在于提供普卡那肽的一种新的制药学上可接受的盐，该盐具有改良的热稳定性，以解决普卡那肽存放过程稳定性差的问题。
本发明普卡那肽的合成和环化方法参考专利CN110981939A实施例5、8和实施例11，纯化方法参考专利CN110981939A实施例14，纯化洗脱，收集目标峰的洗脱液，旋转蒸发浓缩，冻干得到普利卡那肽精肽，检测纯度为99.7%，最大单杂0.11%。本发明将上述收集目标峰的普卡那肽洗脱液通过转盐方法（转盐方法详见实施例1，流动相A为50mM不同盐的水溶液）成相对应的不同盐（包括醋酸盐、无盐、铵盐、钾盐、钠盐、钙盐、镁盐等）的普卡那肽精肽溶液，研究发现不同盐的普卡那肽精肽溶液稳定性不同。其中，当醋酸盐和三氟乙酸盐普卡那肽精肽溶液时，发现拓扑异构体杂质在室温中随着时间的延长增长最快，而普卡那肽的钠盐精肽溶液时，发现拓扑异构体杂质相对较稳定。
进一步，将上述不同盐普卡那肽精肽溶液，旋转蒸发浓缩，冻干得到对应不同盐的普利卡那肽精肽，研究发现不同盐形式的普卡那肽精肽及其制剂，在25℃温度的存放过程中，稳定性存在明显差异。本发明意外的发现了普卡那肽钠盐精肽，能很好的提高稳定性，特别适合于用作原料药。
本发明技术方案包括如下步骤：
（1）将纯化后的普卡那肽溶液加载到制备级反相高效液相色谱系统的色谱柱上，先以含所需盐的流动相体系进行第一次冲洗，再以含水的流动相体系进行第二次冲洗，最后以含水的流动相体系进行第三次冲洗，收集洗脱液；
（2）将步骤（1）中所得的洗脱液减压蒸馏浓缩后，经冷冻干燥后，即得普卡那肽。
进一步，步骤（1）中，所述第一次冲洗流动相由流动相A和流动相B组成，第二次冲洗和第三次冲洗流动相由流动相B和流动相C组成，其中流动相A为所需盐的水溶液，如乙酸钠溶液、氯化钠溶液、碳酸氢钠溶液、碳酸钠溶液、磷酸二氢钠溶液、磷酸氢二钠溶液、硫酸钠溶液等一种或多种，流动相B为甲醇或乙腈，流动相C为纯化水。
其中，三次冲洗中，第一次冲洗所用流动相的总体积为1-20个柱体积，优选2-5个柱体积，流动相A的体积占流动相总体积的80-99%。第二次冲洗所用流动相的总体积为1-20个柱体积，优选1-3个柱体积，流动相C的体积占流动相总体积的80-99%。第三次冲洗所用流动相的总体积为1-20个柱体积，优选1-3个柱体积，流动相C的体积占流动相总体积的10-40%。
优选的，洗脱梯度如下：
| 时间（min） | 流动相A（%） | 流动相B（%） | 流动相C（%） |
| 0 | 98 | 2 | 0 |
| 24 | 98 | 2 | 0 |
| 25 | 0 | 2 | 98 |
| 41 | 0 | 2 | 98 |
| 42 | 0 | 80 | 20 |
| 112 | 0 | 80 | 20 |
步骤（1）中，所述流动相体系中流动相A的盐浓度为10-100mM，优选40-60mM。
步骤（1）中，所述的普卡那肽溶液为经制备级反相高效液相色谱系统纯化后的普卡那肽溶液，其HPLC纯度大于或等于95%。
步骤（1）中，所述的制备级反相高效液相色谱系统的色谱柱的填料为C4、C8和C18键合硅胶或高分子聚合物中的一种或多种。
步骤（1）中，两次冲洗时候所用的检测器为紫外检测器，检测波长为200-300nm。
本发明技术方案包括所述制备的普卡那肽钠盐精肽的片剂制备方法，其特征在于它包括如下步骤：普卡那肽钠盐精肽、微晶纤维素和硬脂酸镁直接混合，采用6.35mm冲模制成片剂。进一步，普卡那肽钠盐精肽3mg、微晶纤维素（pH-112）96.75mg和硬脂酸镁0.25mg直接混合，采用6.35mm冲模制成片剂。
本发明技术效果：
1、获得稳定的普卡那肽钠盐精肽溶液，拓扑异构体杂质稳定，易于大生产旋蒸及冻干操作；
2、本法制备所得普卡那肽钠盐收率高、纯度高、性质稳定；
3、纯化后的普卡那肽溶液杂质含量低；
4、工艺简单，易于大生产生产操作；
5、普卡那肽钠盐精肽能很好的提高稳定性，特别适合于用作原料药。
具体实施方式
本发明提供了普卡那肽的一种新的制药学上可接受的盐。
根据下述实施例，可以更好地理解本发明的方法及其核心思想。实施例所描述的具体工艺条件及其结果仅用于说明本说明，而不应当也不会限制权利求书中所详细描述的本发明。
本发明普卡那肽的合成和环化方法参考专利CN110981939A实施例5、8和实施例11，纯化方法参考专利CN110981939A实施例14。
采集数据所用的仪器：
HPLC：戴安U3000高效液相色谱仪。
制备HPLC：北京澳诺LC2000制备液相色谱仪。
对比实施例1 普卡那肽无盐的制备
以十八烷基硅烷键合硅胶填料为固定相的色谱柱，柱子直径和长度为：50*250mm。
将普卡那肽溶液0.46L(普卡那肽1.40g，浓度3.02mg/ml)加载到制备级反相高效液相色谱
系统的色谱柱上。检测波长为220nm，流速为60ml/min。以50mM醋酸溶液为流动相A，以甲醇
为流动相B，以纯化水为流动相C，以下表洗脱梯度进行洗脱：
| 时间（min） | 流动相A（%） | 流动相B（%） | 流动相C（%） |
| 0 | 98 | 2 | 0 |
| 24 | 98 | 2 | 0 |
| 25 | 0 | 2 | 98 |
| 41 | 0 | 2 | 98 |
| 42 | 0 | 80 | 20 |
| 112 | 0 | 80 | 20 |
收集馏分，用旋转蒸发仪水浴温度在25-30℃，真空度在-0.09Mpa以下除去甲醇和部分水，得到普卡那肽浓缩液。普卡那肽浓缩液经冷冻干燥得到普卡那肽1.24g，收率84.1%，纯度99.68%，测得成品中醋酸含量0.12%，铵盐含量0.05%。
对比实施例2普卡那肽铵盐的制备
以十八烷基硅烷键合硅胶填料为固定相的色谱柱，柱子直径和长度为：50*250mm。
将普卡那肽溶液0.46L (普卡那肽1.40g，浓度3.02mg/ml)加载到制备级反相高效液相色谱
系统的色谱柱上。检测波长为220nm，流速为60ml/min。以50mM乙酸铵溶液为流动相A，以甲
醇为流动相B，以纯化水为流动相C，以下表洗脱梯度进行洗脱：
| 时间（min） | 流动相A（%） | 流动相B（%） | 流动相C（%） |
| 0 | 98 | 2 | 0 |
| 24 | 98 | 2 | 0 |
| 25 | 0 | 2 | 98 |
| 41 | 0 | 2 | 98 |
| 42 | 0 | 80 | 20 |
| 112 | 0 | 80 | 20 |
收集馏分，用旋转蒸发仪水浴温度在25-30℃，真空度在-0.09Mpa以下除去甲醇和部分水，得到普卡那肽浓缩液。普卡那肽浓缩液经冷冻干燥得到普卡那肽1.38g，收率95.1%，纯度99.69%，测得成品中铵含量1.30%。
对比实施例3普卡那肽钾盐的制备
以十八烷基硅烷键合硅胶填料为固定相的色谱柱，柱子直径和长度为：50*250mm。
将普卡那肽溶液0.46L (普卡那肽1.40g，浓度3.02mg/ml)加载到制备级反相高效液相色谱
系统的色谱柱上。检测波长为220nm，流速为60ml/min。以50mM碳酸氢钾溶液为流动相A，以
甲醇为流动相B，以纯化水为流动相C，以下表洗脱梯度进行洗脱：
| 时间（min） | 流动相A（%） | 流动相B（%） | 流动相C（%） |
| 0 | 98 | 2 | 0 |
| 24 | 98 | 2 | 0 |
| 25 | 0 | 2 | 98 |
| 41 | 0 | 2 | 98 |
| 42 | 0 | 80 | 20 |
| 112 | 0 | 80 | 20 |
收集馏分，用旋转蒸发仪水浴温度在25-30℃，真空度在-0.09Mpa以下除去甲醇和部分水，得到普卡那肽浓缩液。普卡那肽浓缩液经冷冻干燥得到普卡那肽1.33g，收率91.7%，纯度99.70%，测得成品中钾含量3.70%。
对比实施例4普卡那肽钙盐的制备
以十八烷基硅烷键合硅胶填料为固定相的色谱柱，柱子直径和长度为：50*250mm。
将普卡那肽溶液0.46L (普卡那肽1.40g，浓度3.02mg/ml)加载到制备级反相高效液相色谱
系统的色谱柱上。检测波长为220nm，流速为60ml/min。以50mM碳酸氢钙溶液为流动相A，以
甲醇为流动相B，以纯化水为流动相C，以下表洗脱梯度进行洗脱：
| 时间（min） | 流动相A（%） | 流动相B（%） | 流动相C（%） |
| 0 | 98 | 2 | 0 |
| 24 | 98 | 2 | 0 |
| 25 | 0 | 2 | 98 |
| 41 | 0 | 2 | 98 |
| 42 | 0 | 80 | 20 |
| 112 | 0 | 80 | 20 |
收集馏分，用旋转蒸发仪水浴温度在25-30℃，真空度在-0.09Mpa以下除去甲醇和部分水，得到普卡那肽浓缩液。普卡那肽浓缩液经冷冻干燥得到普卡那肽1.35g，收率93.2%，纯度99.70%，测得成品中钙含量3.98%。
对比实施例5普卡那肽镁盐的制备
以十八烷基硅烷键合硅胶填料为固定相的色谱柱，柱子直径和长度为：50*250mm。
将普卡那肽溶液0.46L (普卡那肽1.40g，浓度3.02mg/ml)加载到制备级反相高效液相色谱
系统的色谱柱上。检测波长为220nm，流速为60ml/min。以50mM碳酸氢镁溶液为流动相A，以
甲醇为流动相B，以纯化水为流动相C，以下表洗脱梯度进行洗脱：
| 时间（min） | 流动相A（%） | 流动相B（%） | 流动相C（%） |
| 0 | 98 | 2 | 0 |
| 24 | 98 | 2 | 0 |
| 25 | 0 | 2 | 98 |
| 41 | 0 | 2 | 98 |
| 42 | 0 | 80 | 20 |
| 112 | 0 | 80 | 20 |
收集馏分，用旋转蒸发仪水浴温度在25-30℃，真空度在-0.09Mpa以下除去甲醇和部分水，得到普卡那肽浓缩液。普卡那肽浓缩液经冷冻干燥得到普卡那肽1.26g，收率86.8%，纯度99.72%，测得成品中镁含量4.14%。
对比实施例6普卡那肽醋酸盐的制备
以十八烷基硅烷键合硅胶填料为固定相的色谱柱，柱子直径和长度为：50*250mm。
将普卡那肽溶液0.43L(普卡那肽1.22g，浓度2.82mg/ml)加载到制备级反相高效液相色谱
系统的色谱柱上。检测波长为220nm，流速为60ml/min。以50mM乙酸铵溶液为流动相A，以乙
腈为流动相B，以50mM醋酸为流动相C，以下表洗脱梯度进行洗脱：
| 时间（min） | 流动相A（%） | 流动相B（%） | 流动相C（%） |
| 0 | 98 | 2 | 0 |
| 24 | 98 | 2 | 0 |
| 25 | 0 | 2 | 98 |
| 41 | 0 | 2 | 98 |
| 42 | 0 | 80 | 20 |
| 112 | 0 | 80 | 20 |
收集馏分，用旋转蒸发仪水浴温度在25-30℃，真空度在-0.09Mpa以下除去甲醇和部分水，得到普卡那肽浓缩液。普卡那肽浓缩液经冷冻干燥得到普卡那肽1.16g，收率91.9%，纯度99.68%，测得成品中醋酸含量3.66%。
对比实施例7普卡那肽TFA盐的制备
以十八烷基硅烷键合硅胶填料为固定相的色谱柱，柱子直径和长度为：50*250mm。
将普卡那肽溶液0.43L (普卡那肽1.22g，浓度2.82mg/ml)加载到制备级反相高效液相色谱
系统的色谱柱上。检测波长为220nm，流速为60ml/min。以50mM TFA溶液为流动相A，以甲醇
为流动相B，以下表洗脱梯度进行洗脱：
| 时间（min） | 流动相A（%） | 流动相B（%） |
| 0 | 98 | 2 |
| 24 | 98 | 2 |
| 25 | 0 | 80 |
| 85 | 0 | 80 |
收集馏分，用旋转蒸发仪水浴温度在25-30℃，真空度在-0.09Mpa以下除去甲醇和部分水，得到普卡那肽浓缩液。普卡那肽浓缩液经冷冻干燥得到普卡那肽1.10g，收率87.3%，纯度99.70%，测得成品中TFA含量4.55%。
实施例1普卡那肽钠盐的制备
以十八烷基硅烷键合硅胶填料为固定相的色谱柱，柱子直径和长度为：150*
250mm。将普卡那肽溶液1.892L(普卡那肽5.95g，浓度3.14mg/ml)加载到制备级反相高效液
相色谱系统的色谱柱上。检测波长为220nm，流速为450ml/min。以50mM乙酸钠溶液为流动相
A，以甲醇为流动相B，以纯化水为流动相C，以下表洗脱梯度进行洗脱：
| 时间（min） | 流动相A（%） | 流动相B（%） | 流动相C（%） |
| 0 | 98 | 2 | 0 |
| 30 | 98 | 2 | 0 |
| 31 | 0 | 2 | 98 |
| 51 | 0 | 2 | 98 |
| 52 | 0 | 80 | 20 |
| 122 | 0 | 80 | 20 |
收集馏分，用旋转蒸发仪水浴温度在25-30℃，真空度在-0.09Mpa以下除去甲醇和部分水，得到普卡那肽浓缩液。普卡那肽浓缩液经冷冻干燥得到普卡那肽5.82g，收率94.5%，纯度99.75%，测得成品中钠含量4.43%。
实施例2普卡那肽钠盐的制备
以十八烷基硅烷键合硅胶填料为固定相的色谱柱，柱子直径和长度为：150*
250mm。将普卡那肽溶液1.993L(普卡那肽6.06g，浓度3.04mg/ml)加载到制备级反相高效液
相色谱系统的色谱柱上。检测波长为220nm，流速为450ml/min。以40mM乙酸钠溶液为流动相
A，以乙腈为流动相B，以纯化水为流动相C，以下表洗脱梯度进行洗脱：
| 时间（min） | 流动相A（%） | 流动相B（%） | 流动相C（%） |
| 0 | 98 | 2 | 0 |
| 30 | 98 | 2 | 0 |
| 31 | 0 | 2 | 98 |
| 51 | 0 | 2 | 98 |
| 52 | 0 | 80 | 20 |
| 122 | 0 | 80 | 20 |
收集馏分，用旋转蒸发仪水浴温度在25-30℃，真空度在-0.09Mpa以下除去甲醇和部分水，得到普卡那肽浓缩液。普卡那肽浓缩液经冷冻干燥得到普卡那肽5.90g，收率94.4%，纯度99.70%，测得成品中钠含量4.16%。
实施例3普卡那肽钠盐的制备
以十八烷基硅烷键合硅胶填料为固定相的色谱柱，柱子直径和长度为：150*
250mm。将普卡那肽溶液2.052L(普卡那肽5.50g，浓度2.68mg/ml)加载到制备级反相高效液
相色谱系统的色谱柱上。检测波长为220nm，流速为450ml/min。以60mM乙酸钠溶液为流动相
A，以乙腈为流动相B，以纯化水为流动相C，以下表洗脱梯度进行洗脱：
| 时间（min） | 流动相A（%） | 流动相B（%） | 流动相C（%） |
| 0 | 98 | 2 | 0 |
| 30 | 98 | 2 | 0 |
| 31 | 0 | 2 | 98 |
| 51 | 0 | 2 | 98 |
| 52 | 0 | 80 | 20 |
| 122 | 0 | 80 | 20 |
收集馏分，用旋转蒸发仪水浴温度在25-30℃，真空度在-0.09Mpa以下除去甲醇和部分水，得到普卡那肽浓缩液。普卡那肽浓缩液经冷冻干燥得到普卡那肽5.43g，收率94.2%，纯度99.73%，测得成品中钠含量4.01%。
实施例4普卡那肽钠盐的制备
以十八烷基硅烷键合硅胶填料为固定相的色谱柱，柱子直径和长度为：150*
250mm。将普卡那肽溶液0.460L(普卡那肽1.56g，浓度3.26mg/ml)加载到制备级反相高效液
相色谱系统的色谱柱上。检测波长为220nm，流速为60ml/min。以50mM氯化钠溶液为流动相
A，以乙腈为流动相B，以纯化水为流动相C，以下表洗脱梯度进行洗脱：
| 时间（min） | 流动相A（%） | 流动相B（%） | 流动相C（%） |
| 0 | 98 | 2 | 0 |
| 30 | 98 | 2 | 0 |
| 31 | 0 | 2 | 98 |
| 51 | 0 | 2 | 98 |
| 52 | 0 | 80 | 20 |
| 122 | 0 | 80 | 20 |
收集馏分，用旋转蒸发仪水浴温度在25-30℃，真空度在-0.09Mpa以下除去甲醇和部分水，得到普卡那肽浓缩液。普卡那肽浓缩液经冷冻干燥得到普卡那肽1.46g，收率90.4%，纯度99.68%，测得成品中钠含量4.26%。
实施例5普卡那肽钠盐的制备
以十八烷基硅烷键合硅胶填料为固定相的色谱柱，柱子直径和长度为：150*
250mm。将普卡那肽溶液0.460L(普卡那肽1.56g，浓度3.26mg/ml)加载到制备级反相高效液
相色谱系统的色谱柱上。检测波长为220nm，流速为60ml/min。以50mM碳酸氢钠溶液为流动
相A，以乙腈为流动相B，以纯化水为流动相C，以下表洗脱梯度进行洗脱：
| 时间（min） | 流动相A（%） | 流动相B（%） | 流动相C（%） |
| 0 | 98 | 2 | 0 |
| 30 | 98 | 2 | 0 |
| 31 | 0 | 2 | 98 |
| 51 | 0 | 2 | 98 |
| 52 | 0 | 80 | 20 |
| 122 | 0 | 80 | 20 |
收集馏分，用旋转蒸发仪水浴温度在25-30℃，真空度在-0.09Mpa以下除去甲醇和部分水，得到普卡那肽浓缩液。普卡那肽浓缩液经冷冻干燥得到普卡那肽1.50g，收率92.1%，纯度99.70%，测得成品中钠含量4.21%。
实施例6普卡那肽钠盐的制备
以十八烷基硅烷键合硅胶填料为固定相的色谱柱，柱子直径和长度为：150*
250mm。将普卡那肽溶液0.460L(普卡那肽1.56g，浓度3.26mg/ml)加载到制备级反相高效液
相色谱系统的色谱柱上。检测波长为220nm，流速为60ml/min。以50mM碳酸钠溶液为流动相
A，以乙腈为流动相B，以纯化水为流动相C，以下表洗脱梯度进行洗脱：
| 时间（min） | 流动相A（%） | 流动相B（%） | 流动相C（%） |
| 0 | 98 | 2 | 0 |
| 30 | 98 | 2 | 0 |
| 31 | 0 | 2 | 98 |
| 51 | 0 | 2 | 98 |
| 52 | 0 | 80 | 20 |
| 122 | 0 | 80 | 20 |
收集馏分，用旋转蒸发仪水浴温度在25-30℃，真空度在-0.09Mpa以下除去甲醇和部分水，得到普卡那肽浓缩液。普卡那肽浓缩液经冷冻干燥得到普卡那肽1.51g，收率93.4%，纯度99.71%，测得成品中钠含量4.16%。
实施例7普卡那肽钠盐的制备
以十八烷基硅烷键合硅胶填料为固定相的色谱柱，柱子直径和长度为：150*
250mm。将普卡那肽溶液0.460L(普卡那肽1.56g，浓度3.26mg/ml)加载到制备级反相高效液
相色谱系统的色谱柱上。检测波长为220nm，流速为60ml/min。以50mM磷酸二氢钠溶液为流
动相A，以乙腈为流动相B，以纯化水为流动相C，以下表洗脱梯度进行洗脱：
| 时间（min） | 流动相A（%） | 流动相B（%） | 流动相C（%） |
| 0 | 98 | 2 | 0 |
| 30 | 98 | 2 | 0 |
| 31 | 0 | 2 | 98 |
| 51 | 0 | 2 | 98 |
| 52 | 0 | 80 | 20 |
| 122 | 0 | 80 | 20 |
收集馏分，用旋转蒸发仪水浴温度在25-30℃，真空度在-0.09Mpa以下除去甲醇和部分水，得到普卡那肽浓缩液。普卡那肽浓缩液经冷冻干燥得到普卡那肽1.48g，收率91.5%，纯度99.77%，测得成品中钠含量4.00%。
实施例8普卡那肽钠盐的制备
以十八烷基硅烷键合硅胶填料为固定相的色谱柱，柱子直径和长度为：150*
250mm。将普卡那肽溶液0.460L(普卡那肽1.56g，浓度3.26mg/ml)加载到制备级反相高效液
相色谱系统的色谱柱上。检测波长为220nm，流速为60ml/min。以50mM磷酸氢二钠溶液为流
动相A，以乙腈为流动相B，以纯化水为流动相C，以下表洗脱梯度进行洗脱：
| 时间（min） | 流动相A（%） | 流动相B（%） | 流动相C（%） |
| 0 | 98 | 2 | 0 |
| 30 | 98 | 2 | 0 |
| 31 | 0 | 2 | 98 |
| 51 | 0 | 2 | 98 |
| 52 | 0 | 80 | 20 |
| 122 | 0 | 80 | 20 |
收集馏分，用旋转蒸发仪水浴温度在25-30℃，真空度在-0.09Mpa以下除去甲醇和部分水，得到普卡那肽浓缩液。普卡那肽浓缩液经冷冻干燥得到普卡那肽1.55g，收率95.2%，纯度99.71%，测得成品中钠含量4.09%。
实施例9普卡那肽钠盐的制备
以十八烷基硅烷键合硅胶填料为固定相的色谱柱，柱子直径和长度为：150*
250mm。将普卡那肽溶液0.460L(普卡那肽1.56g，浓度3.26mg/ml)加载到制备级反相高效液
相色谱系统的色谱柱上。检测波长为220nm，流速为60ml/min。以50mM硫酸钠溶液为流动相
A，以乙腈为流动相B，以纯化水为流动相C，以下表洗脱梯度进行洗脱：
| 时间（min） | 流动相A（%） | 流动相B（%） | 流动相C（%） |
| 0 | 98 | 2 | 0 |
| 30 | 98 | 2 | 0 |
| 31 | 0 | 2 | 98 |
| 51 | 0 | 2 | 98 |
| 52 | 0 | 80 | 20 |
| 122 | 0 | 80 | 20 |
收集馏分，用旋转蒸发仪水浴温度在25-30℃，真空度在-0.09Mpa以下除去甲醇和部分水，得到普卡那肽浓缩液。普卡那肽浓缩液经冷冻干燥得到普卡那肽1.54g，收率93.6%，纯度99.78%，测得成品中钠含量4.14%。
实施例10普卡那肽片剂制备
将普卡那肽3mg、微晶纤维素（pH-112）96.75mg和硬脂酸镁0.25mg直接混合，采用6.35mm冲模制成片剂。
实施例11 普卡那肽钠盐的稳定性试验
含量检测方法如下：
色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶；流动相A相：50mM磷酸铵缓冲液（磷酸调pH至6.8），流动相B相：乙腈；梯度：5-45%（40min），45-70%（10min）；流速：1ml/min；波长：220nm；柱温：40℃。
1.加速稳定性试验
将参比制剂(TRULANCE)、本发明所述原料药和本发明所述制 剂置于40℃，75％RH的稳定性箱中，考察3个月稳定性，在加速10 天、1个月和3个月分别取样检测，加速稳定性试验结果如下表：
2.长期稳定性试验
将参比制剂、本发明所述原料药和本发明所述制剂置于25℃， 40％RH的稳定性箱中，考察12个月稳定性，在长期1个月、3个月 和6个月分别取样检测，长期稳定性试验结果如下表：
从上述表格数据对比可见，本发明钠盐及其制剂长期稳定性考察 结果较优。
实施例12不同盐普卡那肽盐溶液的稳定性试验
将上述收集目标峰的普卡那肽洗脱液通过转盐方法（转盐方法详见实施例1，流动
相A为50mM不同盐的水溶液）成相对应的不同盐（包括醋酸盐、无盐、铵盐、钾盐、钠盐、钙盐、
镁盐等）的普卡那肽精肽溶液，研究发现不同盐的普卡那肽精肽溶液稳定性不同。其中，当
醋酸盐和三氟乙酸盐普卡那肽精肽溶液时，发现拓扑异构体杂质在室温中随着时间的延长
增长最快，而普卡那肽的钠盐精肽溶液时，发现拓扑异构体杂质相对较稳定。25℃不同盐的
普卡那肽精肽溶液中拓扑异构体杂质含量的具体对比数据如下：
| 不同盐普卡那肽盐溶液 | 0小时 | 8小时 | 16小时 | 24小时 | 48小时 |
| 醋酸盐 | 0.05 | 1.05 | 5.25 | 15.23 | 32.56 |
| 三氟乙酸盐(CN110981939A实施例14收集目标峰的洗脱液) | 0.06 | 0.97 | 4.68 | 13.59 | 26.43 |
| 铵盐 | 0.04 | 0.26 | 0.71 | 1.87 | 2.56 |
| 钾盐 | 0.05 | 0.21 | 0.74 | 1.68 | 3.02 |
| 钠盐 | 0.04 | 0.16 | 0.61 | 1.05 | 1.67 |
| 钙盐 | 0.06 | 0.31 | 0.82 | 2.16 | 3.68 |
| 镁盐 | 0.05 | 0.34 | 0.96 | 2.98 | 5.45 |
将上述不同盐普卡那肽精肽溶液，旋转蒸发浓缩，冻干得到对应不同盐的普利卡那肽精肽，研究发现不同盐形式的普卡那肽精肽及其制剂，在25℃温度的存放过程中，稳定性存在明显差异。本发明意外的发现了普卡那肽钠盐精肽，能很好的提高稳定性，特别适合于用作原料药。
Claims (9)
1.一种普卡那肽钠盐精肽的制备方法，其特征在于它包括如下步骤：
（1）将纯化后的普卡那肽溶液加载到制备级反相高效液相色谱系统的色谱柱上，先以含钠盐的流动相体系进行第一次冲洗，再以含水的流动相体系进行第二次冲洗，最后以含水的流动相体系进行第三次冲洗，收集洗脱液；
（2）将步骤（1）中所得的洗脱液减压蒸馏浓缩后，经冷冻干燥后，即得普卡那肽钠盐精肽。
2.如权利要求1所述普卡那肽钠盐精肽的制备方法，其特征在于步骤（1）中所述第一次冲洗流动相由流动相A和流动相B组成，第二次冲洗和第三次冲洗由流动相B和流动相C组成，其中流动相A为所需钠盐的水溶液，如乙酸钠溶液、氯化钠溶液、碳酸氢钠溶液、碳酸钠溶液、磷酸二氢钠溶液、磷酸氢二钠溶液、硫酸钠溶液等一种或多种，流动相B为甲醇或乙腈；流动相C为纯化水。
3.如权利要求2所述普卡那肽钠盐精肽的制备方法，其特征在于所述流动相A的乙酸钠溶液浓度为10-100mM，优选40-60mM。
4.如权利要求1或2所述普卡那肽钠盐精肽的制备方法，其特征在于步骤（1）中所述第一次冲洗所用流动相的总体积为1-20个柱体积，优选2-5个柱体积，流动相A的体积占流动相总体积的80-99%。
5.如权利要求1或2所述普卡那肽钠盐精肽的制备方法，其特征在于步骤（1）中所述第二次冲洗所用流动相的总体积为1-20个柱体积，优选1-3个柱体积，流动相C的体积占流动相总体积的80-99%。
6.如权利要求1或2所述普卡那肽钠盐精肽的制备方法，其特征在于步骤（1）中所述第三次冲洗所用流动相的总体积为1-20个柱体积，优选1-3个柱体积，流动相C的体积占流动相总体积的10-40%。
7.如权利要求2所述普卡那肽钠盐精肽的制备方法，其特征在于洗脱梯度如下：
8.一种如权利要求1所述制备的普卡那肽钠盐精肽的片剂制备方法，其特征在于它包括如下步骤：普卡那肽钠盐精肽、微晶纤维素和硬脂酸镁直接混合，采用6.35mm冲模制成片剂。
9.如权利要求8所述的普卡那肽钠盐精肽的片剂制备方法，其特征在于它包括如下步骤：普卡那肽钠盐精肽3mg、微晶纤维素（pH-112）96.75mg和硬脂酸镁0.25mg直接混合，采用6.35mm冲模制成片剂。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202211187368.4A CN115536733A (zh) | 2022-09-28 | 2022-09-28 | 一种尿鸟苷蛋白类似物盐及片剂的制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202211187368.4A CN115536733A (zh) | 2022-09-28 | 2022-09-28 | 一种尿鸟苷蛋白类似物盐及片剂的制备方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN115536733A true CN115536733A (zh) | 2022-12-30 |
Family
ID=84728664
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202211187368.4A Pending CN115536733A (zh) | 2022-09-28 | 2022-09-28 | 一种尿鸟苷蛋白类似物盐及片剂的制备方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN115536733A (zh) |
-
2022
- 2022-09-28 CN CN202211187368.4A patent/CN115536733A/zh active Pending
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP3064214B1 (en) | Separation and purification method for vancomycin hydrochloride of high purity | |
| CN104043104A (zh) | 含盐酸万古霉素的喷雾干粉及其工业化制备方法 | |
| JP2013509365A (ja) | コリスチンの精製方法および精製コリスチン成分 | |
| CN101279979B (zh) | 头孢孟多酯钠的分离纯化方法及冻干粉针制剂的制备方法 | |
| CN109929010B (zh) | 一种加压素的精制方法 | |
| PT1261622E (pt) | Lh purificada | |
| CN112175068B (zh) | 一种司美格鲁肽的纯化方法 | |
| CN115536733A (zh) | 一种尿鸟苷蛋白类似物盐及片剂的制备方法 | |
| CN115093462B (zh) | 一种环肽类化合物及其制备方法和用途 | |
| JP2008523003A (ja) | 純粋なバンコマイシン塩酸塩 | |
| CN115304661B (zh) | 一种环肽类化合物和用途 | |
| CN104650112A (zh) | 他克莫司8-丙基类似物的制备方法 | |
| CN112285217B (zh) | 一种索玛鲁肽的超高效液相色谱分析方法 | |
| CN110016072B (zh) | 一种缩宫素的精制方法 | |
| WO2021017793A1 (zh) | 一种化学合成酸性多肽的制备方法 | |
| CN113845573A (zh) | 万古霉素杂质g的制备方法 | |
| CN114573662A (zh) | 一种普卡那肽铵盐的制备方法 | |
| CN113801201A (zh) | 一种醋酸卡泊芬净杂质b的制备方法 | |
| CN113801203A (zh) | 一种醋酸卡泊芬净杂质d的制备方法 | |
| CN104829695A (zh) | 一种纯化阿拉瑞林的方法 | |
| CN114805465B (zh) | 三萜类化合物及其制备方法和应用 | |
| CN115260293B (zh) | 一种醋酸加尼瑞克的纯化方法 | |
| CN109942678B (zh) | 一种奥曲肽的精制方法 | |
| CN116183752B (zh) | 一种多肽杂质的液相色谱检测方法 | |
| CN114452293B (zh) | 牡荆素木糖苷的降尿酸用途及其制备方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination |