CN115536656A - 作为hpk1抑制剂的杂环化合物 - Google Patents

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CN115536656A CN202210450170.4A CN202210450170A CN115536656A CN 115536656 A CN115536656 A CN 115536656A CN 202210450170 A CN202210450170 A CN 202210450170A CN 115536656 A CN115536656 A CN 115536656A
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Abstract

本发明提供了作为HPK1抑制剂的化合物，具体地，本发明提供了一种如下式(I)所示结构的化合物，或其光学异构体，药学上可接受的盐，前药，氘代衍生物，水合物，溶剂合物。所述的化合物可以用于治疗或预防与HPK1的活性或表达量相关的疾病或病症。

Description

作为HPK1抑制剂的杂环化合物
技术领域
本发明涉及药物化学领域；具体地说，本发明涉及一类新型含有三环杂芳基的衍生物，其合成方法及其作为一种HPK1抑制剂在制备药物用于治疗肿瘤等相关多种疾病中的应用。
背景技术
HPK1(Hematopoietic Protein Kinase 1)是T细胞等免疫细胞的负调控因子，主要在T细胞、B细胞、巨噬细胞、树突状细胞和肥大细胞等造血细胞中表达，也叫做MAP4K1(Mitogen Activated Protein Kinase Kinase Kinase Kinase 1)，属于Ste20丝苏氨酸激酶超家族成员。MAP4K家族包括MAP4K1/HPK1、MAP4K2/GCK、MAP4K3/GLK、MAP4K4/HGK、MAP4K5/KHS和MAP4K6/MINK。HPK1是MEKK/JNK/SAPK信号通路的组织特异性上游激活因子。
HPK1包括N端的激酶结构域、中部的脯氨酸富集结构域和N端的citron同源结构域。当T细胞受体(TCR)激活以后，细胞质中的HPK1被招募到细胞膜上，其Y381、S171和T165三个位点发生磷酸化，导致HPK1功能被彻底激活。激活的HPK1磷酸化下游接头蛋白SLP76的S376位点和Gads的T254位点，招募负调控因子14-3-3结合到磷酸化的SLP76和Gads上，最终破坏TCR信号复合体(Lat-Gads-SLP76)，影响下游T细胞激活和复制必需的MAPK信号通路。除了TCR信号通路以外，HPK1也可以通过负调控PKA依赖的PGE2(Prostaglandin E2)受体抑制T细胞信号通路。另外，HPK1的激酶活性还可以被B细胞受体(BCR)和转化生长因子受体等激活，从而抑制多种免疫细胞的功能。
HPK1敲除的小鼠，T细胞响应抗原刺激的活性增强，T细胞激活的阈值降低，树突状细胞抗原呈递功能增强。由于HPK1对T细胞、B细胞和树突状细胞等免疫细胞的抑制功能，抑制HPK1可以增强机体的免疫反应，HPK1因此成为一个非常重要的抗肿瘤和抗病毒靶点。
发明内容
本发明的目的是提供一类新型的HPK1抑制剂。
本发明的第一方面，提供一种如下式(I)所示结构的化合物，或其光学异构体，药学上可接受的盐，前药，氘代衍生物，水合物，溶剂合物：
Figure BDA0003616931970000021
式(I)中：
R选自芳基或杂芳基；所述的芳基或杂芳基任选地被一个或多个选自下组的基团取代：卤素、C1-4烷基、C1-4卤代烷基、羟基、C1-4烷氧基、C1-4卤代烷氧基、C2-4烯基、C2-4卤代烯基、C2-4炔基、C2-4卤代炔基、C3-8环烷基、3-至8-元杂环基、C3-8环烷基C1-4烷基、3-至8-元杂环基C1-4烷基、C3-8环烷基-O-、3-至8-元杂环基-O-、C3-8环烷基-S-、3-至8-元杂环基-S-、C3-8环烷基-NRa-、3-至8-元杂环基-NRa-、-(CRdRe)mNRbRc、或-CN；其中，Ra选自氢或C1-4烷基；Rb和Rc各自独立地选自氢、C1-4烷基、C3-6环烷基、3-至6-元杂环基；或Rb和Rc与其连接的氮原子一起形成3-至-8元杂环基，此杂环基含有1或2个N原子以及0或1个选自O、S的杂原子；各个Rd和Re各自独立地选自氢、C1-4烷基、卤素、C3-6环烷基；m选自0、1、2、或3；上面各个所述的环烷基或杂环基各自独立任选地被一个或多个选自下组的基团取代：卤素、C1-4烷基、C1-4卤代烷基、羟基、C1-4烷氧基、C1-4卤代烷氧基、C2-4烯基、C2-4炔基、CN、或＝M取代；其中M选自O或CRfRg；其中Rf和Rg各自独立地选自氢、氘、卤素、C1-4烷基、C3-6环烷基、或3-至8-元杂环基，所述烷基任选地被一个或多个选自下组的基团取代：卤素、ORh、SRh、CN、NRnRn、C3-6环烷基、或3-至8-元杂环基；上面所述取代在R上的炔基任选地被选自下组的基团取代：C1-4烷基、C3-6环烷基、4-至8-元杂环基、芳基、或杂芳基；所述取代在炔基上的烷基、环烷基、杂环基、芳基、或杂芳基任选地被一个或多个选自下组的基团取代：卤素、ORh、SRh、CN、NRnRn、C(O)Rt、S(O)2Rt、NRnC(O)Rt、NRnS(O)2Rt、C3-6环烷基、或4-至8-元杂环基；各个Rh各自独立地为氢、C1-4烷基、或C1-4卤代烷基；各个Rn各自独立地选自氢、或C1-4烷基；Rt选自C1-4烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、C3-8环烷基、4-至8-元杂环基、芳基、或杂芳基；
X选自化学键、-O-、-S-、-NRa-；Ra的定义如上所述；
Y选自N或CR1；
各个R1各自独立地选自氢、卤素、C1-4烷基、C3-6环烷基、C1-4烷氧基、C1-4卤代烷氧基、C2-4烯基、C2-4卤代烯基、C2-4炔基、CN；
R2选自芳基或杂芳基；其中杂芳基优选为5-至12-元杂芳基；所述的芳基或杂芳基任选地被一个或多个选自下组的基团取代：卤素、C1-4烷基、C1-4卤代烷基、羟基、C1-4烷氧基、C1-4卤代烷氧基、C2-4烯基、C2-4卤代烯基、C2-4炔基、C2-4卤代炔基、C3-6环烷基、3-至8-元杂环基、-(CRdRe)mNRbRc、或-CN；其中，Rb、Rc、Rd、Re、和m的定义如上所述；
R3和R4各自独立地选自氢、C1-4烷基、C3-6环烷基、C2-4炔基；或R3和R4与其相连接的同一个碳原子一起形成3-至6-元环状结构，此环状结构任选地地含有0、或1个选自N、O、S的杂原子；
或R选自式(IIa)或(IIb)：
Figure BDA0003616931970000031
式(IIa)或(IIb)中：
Figure BDA0003616931970000032
表示式(IIa)或(IIb)与式(I)中的X的连接位点；
“*”表示手性中心；
P和Q各自独立地选自N或CR5；
J和G各自独立地选自NRj、O、S或CRkRk；其中，Rj为氢、C1-4烷基、C1-4卤代烷基、C3-6环烷基、3-至8-元杂环基、芳基、杂芳基、C(O)Rt、S(O)2Rt；各个Rk各自独立地选自下组基团：氢、卤素、C1-4烷基、ORh、SRh、CN、-(CRdRe)mNRbRc；或两个Rk与其相连的碳原子共同形成羰基(C＝O)；或两个Rk与其连接的碳原子一起形成3-至6-元环状结构，此环状结构任选地含有0、或1个选自N、O、S的杂原子；其中，Rb、Rc、Rd、Re、Rh、Rt、和m的定义如上所述；
各个R5各自独立为氢、卤素、C1-4烷基、C1-4卤代烷基、C1-4烷氧基、C1-4卤代烷氧基、或CN；q为0、1、或2；
各个R6各自独立为氢、卤素、或C1-4烷基；当两个R6同时连接到同一个碳原子上时，这两个R6与其相连的碳原子可以任选共同形成羰基(C＝O)；n为0、1、2、或3；
其中，各个上述的烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基任选地且各自独立地被1-3个各自独立地选自下组的取代基取代：卤素、C1-4烷基、C1-4卤代烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、C3-8环烷基、3-至8-元杂环基、芳基、杂芳基、CN、NO2、ORh、SRh、NRhRh、C(O)Rt、C(O)ORh、C(O)NRhRh、NRhC(O)Rt、NRhS(O)2Rt、或S(O)2Rt，前提条件是所形成的化学结构是稳定的和有意义的；其中，Rt为C1-4烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、C3-8环烷基、4-至8-元杂环基、芳基、或杂芳基；各个Rh各自独立为氢、C1-4烷基、或C1-4卤代烷基；或两个Rh与其连接的氮原子一起形成3-至-8元杂环基，此杂环基含有1或2个N原子以及0或1个选自O、S的杂原子；
除非特别说明，上述的芳基为含有6-12个碳原子的芳香基团；杂芳基为5-至15-元(优选为5-至12-元)杂芳香基团；环状结构为饱和的或不饱和的、含杂原子或不含杂原子的环状基团。
在另一优选例中，式(I)为式(III)：
Figure BDA0003616931970000041
式(III)中：
Y选自N或CR1；R1选自氢、氘、氟；
R2选自下式：
Figure BDA0003616931970000042
“---”表示R2与式(III)中其它结构单元的连接位点；
R3和R4各自独立地选自氢、C1-4烷基；
R7选自下式：
Figure BDA0003616931970000043
Figure BDA0003616931970000044
表示R7与式(III)中其它结构单元的连接位点；
R8选自下式：
Figure BDA0003616931970000045
Figure BDA0003616931970000046
表示R8与式(III)中其它结构单元的连接位点；
Figure BDA0003616931970000047
表示可为单键或双键；
“*”表示手性中心；
Rf选自氢、氘、氟、C1-4烷基、C3-6环烷基、或3-至8-元杂环基；所述烷基任选地被一个或多个选自下组的基团取代：卤素、ORh、SRh、CN、NRnRn、C3-6环烷基、或3-至8-元杂环基；
Rg选自氢、氘、氟、C1-4烷基、C1-4卤代烷基、C3-6环烷基；
Rq选自氢、卤素、C1-4烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、C1-4卤代烷基、ORh、SRh、CN、NRnRn、C3-6环烷基；
R9选自氢、C1-4烷基、C3-6环烷基、4-至8-元杂环基、芳基、或杂芳基；所述烷基、环烷基、杂环基、芳基、或杂芳基任选地被一个或多个选自下组的基团取代：卤素、ORh、SRh、CN、NRnRn、C(O)Rt、S(O)2Rt、NRnC(O)Rt、NRnS(O)2Rt、C3-6环烷基、或4-至8-元杂环基；各个Rh各自独立地为氢、C1-4烷基、或C1-4卤代烷基；各个Rn各自独立地选自氢、或C1-4烷基；Rt选自C1-4烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、C3-8环烷基、4-至8-元杂环基、芳基、或杂芳基；
Z选自化学键、-O-、-S-、-NRa-；Ra选自氢或C1-4烷基；
f选自0、1、或2；
g选自0、1、或2；
h选自0、1、2、3、或4。
在另一优选例中，式(III)中R8选自下组基团：
Figure BDA0003616931970000051
Figure BDA0003616931970000052
表示式上述基团与式(III)中其它结构单元的连接位点；
Figure BDA0003616931970000053
表示可为单键或双键；
Rg、Rq、Z、f、g、h的定义如本发明第一方面所述。
在另一优选例中，式(I)为式(IVa)或(IVb)：
Figure BDA0003616931970000054
式(IVa)或(IVb)中：P选自N或CH；
R1、R2、R3、R4、R5、R6、Y、J、G、n、和q的定义如本发明第一方面所述。
在另一优选例中，式(I)为式(V)：
Figure BDA0003616931970000061
其中R、R2、R3、R4、和X的定义如本发明第一方面所述。
在另一优选例中，式(I)为式(VIa)或(VIb)：
Figure BDA0003616931970000062
Figure BDA0003616931970000063
表示可为单键或双键；
Y选自N或CH；
R2选自下式：
Figure BDA0003616931970000064
“---”表示R2与式(VIa)或(VIb)中其它结构单元的连接位点；
Rf、Rg、Rq、Z、f、g、h的定义如本发明第一方面所述。
在另一优选例中，式(I)为式(VII)：
Figure BDA0003616931970000065
式(VII)中：
Y选自N或CR1；
各个R1各自独立地选自氢、氘、氟；
R2选自下式：
Figure BDA0003616931970000066
“---”表示R2与式(VII)中其它结构单元的连接位点；
R3和R4各自独立地选自氢、C1-4烷基；
R7选自下式：
Figure BDA0003616931970000071
Figure BDA0003616931970000072
表示R7与式(VII)中其它结构单元的连接位点；
R9选自氢、C1-4烷基、C3-6环烷基、4-至8-元杂环基、芳基、或杂芳基；所述烷基、环烷基、杂环基、芳基、或杂芳基任选地被一个或多个选自下组的基团取代：卤素、ORh、SRh、CN、NRnRn、C(O)Rt、S(O)2Rt、NRnC(O)Rt、NRnS(O)2Rt、C3-6环烷基、或4-至8-元杂环基；
各个Rh各自独立地选自氢、C1-4烷基、或C1-4卤代烷基；各个Rn各自独立地选自氢、或C1-4烷基；Rt选自C1-4烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、C3-8环烷基、4-至8-元杂环基、芳基、或杂芳基；
在另一优选例中，式(I)为式(VIII)：
Figure BDA0003616931970000073
式(VIII)中：
R1、R2、R3、R4、R9、Y的定义如本发明第一方面所述。
在另一优选例中，所述的式(I)化合物选自下组：
Figure BDA0003616931970000074
Figure BDA0003616931970000081
Figure BDA0003616931970000091
“*”表示手性中心；
Rg选自氢、氟、或甲基；Rg1选自氟或甲基。
本发明的第二方面，提供了一种药物组合物，所述药物组合物包含本发明第一方面所述的化合物，或其光学异构体，药学上可接受的盐，前药，氘代衍生物，水合物，溶剂合物，以及药学上可接受的载体。
本发明的第三方面，提供了一种如本发明第一方面所述的化合物，或其光学异构体，药学上可接受的盐，前药，氘代衍生物，水合物，溶剂合物的用途，其用于制备治疗与HPK1活性或表达量相关的疾病，病症或病状的药物组合物。
在另一优选例中，所述疾病，病症或病状选自下组：乳腺癌、非小细胞肺癌、小细胞肺癌、肺腺癌、肺鳞癌、结肠癌、结直肠癌、甲状腺癌、胚胎性横纹肌肉瘤、皮肤颗粒细胞肿瘤、黑色素瘤、肝癌、直肠癌、膀胱癌、咽喉癌、胰腺癌、前列腺癌、神经胶质细胞瘤、卵巢癌、头颈部鳞癌、宫颈癌、食管癌、肾癌、皮肤癌、淋巴瘤、胃癌、间皮瘤、骨肉瘤、急性髓系白血病、骨髓纤维化、B细胞淋巴瘤、单核细胞白血病、脾大性红细胞增多、嗜酸性白细胞增多综合征、多发性骨髓瘤等各种实体瘤和血液瘤，以及艾滋病、孢疹病毒和流感病毒等各类DNA和RNA病毒感染。
具体实施方式
本发明人经过长期而深入的研究，意外地发现了一类结构新颖的HPK1抑制剂，以及它们的制备方法和应用。本发明化合物可以应用于与所述激酶的活性相关的各种疾病的治疗。基于上述发现，发明人完成了本发明。
术语
除特别说明之处，本文中提到的“或”具有与“和/或”相同的意义(指“或”以及“和”)。
除特别说明之处，本发明的所有化合物之中，各手性碳原子(手性中心)可以任选地为R构型或S构型，或R构型和S构型的混合物。
如本文所用，在单独或作为其他取代基一部分时，术语“烷基”指只含碳原子的直链(即，无支链)或支链饱和烃基，或直链和支链组合的基团。当烷基前具有碳原子数限定(如C1-10)时，指所述的烷基含有1-10个碳原子。例如，C1-8烷基指含有1-8个碳原子的烷基，包括甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、或类似基团。
如本文所用，在单独或作为其他取代基一部分时，术语“烯基”是指直链或支链，具有至少一个碳-碳双键的碳链基团。烯基可以是取代的或未取代的。当烯基前具有碳原子数限定(如C2-8)时，指所述的烯基含有2-8个碳原子。例如，C2-8烯基指含有2-8个碳原子烯基，包括乙烯基、丙烯基、1,2-丁烯基、2,3-丁烯基、丁二烯基、或类似基团。
如本文所用，在单独或作为其他取代基一部分时，术语“炔基”是指具有至少一个碳-碳三键的脂肪族碳氢基团。所述的炔基可以是直链或支链的，或其组合。当炔基前具有碳原子数限定(如C2-8炔基)时，指所述的炔基含有2-8个碳原子。例如，术语“C2-8炔基”指具有2-8个碳原子的直链或支链炔基，包括乙炔基、丙炔基、异丙炔基、丁炔基、异丁炔基、仲丁炔基、叔丁炔基、或类似基团。
如本文所用，在单独或作为其他取代基一部分时，术语“环烷基”指具有饱和的或部分饱和的单元环，二环或多环(稠环、桥环或螺环)环系基团。当某个环烷基前具有碳原子数限定(如C3-10)时，指所述的环烷基含有3-10个碳原子。在一些优选实施例中，术语“C3-8环烷基”指具有3-8个碳原子的饱和或部分不饱和的单环或二环烷基，包括环丙基、环丁基、环戊基、环庚基、或类似基团。“螺环烷基”指单环之间共用一个碳原子(称螺原子)的二环或多环基团，这些可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统。“稠环烷基”指系统中的每个环与体系中的其他环共享毗邻的一对碳原子的全碳二环或多环基团，其中一个或多个环可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统。“桥环烷基”指任意两个环共用两个不直接连接的碳原子的全碳多环基团，这些可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统。所述环烷基所含原子全部为碳原子。如下是环烷基的一些例子，本发明并不仅局限下述的环烷基。
Figure BDA0003616931970000111
除非有相反陈述，否则下列用在说明书和权利要求书中的术语具有下述含义。“芳基”指具有共轭的π电子体系的全碳单环或稠合多环(也就是共享毗邻碳原子对的环)基团，例如苯基和萘基。所述芳基环可以稠合于其它环状基团(包括饱和和不饱和环)，但不能含有杂原子如氮，氧，或硫，同时连接母体的点必须在具有共轭的π电子体系的环上的碳原子上。芳基可以是取代的或未取代的。如下是芳基的一些例子，本发明并不仅局限下述的芳基。
Figure BDA0003616931970000112
“杂芳基”指包含一个到多个杂原子(任选自氮、氧和硫)的具有芳香性的单环或多环基团，或者包含杂环基(含一个到多个杂原子任选自氮、氧和硫)与芳基稠合形成的多环基团，且连接位点位于芳基上。杂芳基可以是任选取代的或未取代的。如下是杂芳基的一些例子，本发明并不仅局限下述的杂芳基。
Figure BDA0003616931970000121
“杂环基”指饱和或部分不饱和单环或多环环状烃取代基，其中一个或多个环原子选自氮、氧或硫，其余环原子为碳。单环杂环基的非限制性实施例包含吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、硫代吗啉基、高哌嗪基。多环杂环基指包括螺环、稠环和桥环的杂环基。“螺环杂环基”指系统中的每个环与体系中的其他环之间共用一个原子(称螺原子)的多环杂环基团，其中一个或多个环原子选自氮、氧或硫，其余环原子为碳。“稠环杂环基”指系统中的每个环与体系中的其他环共享毗邻的一对原子的多环杂环基团，一个或多个环可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统，而且其中一个或多个环原子选自氮、氧或硫，其余环原子为碳。“桥环杂环基”指任意两个环共用两个不直接连接的原子的多环杂环基团，这些可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统，而且其中一个或多个环原子选自氮、氧或硫，其余环原子为碳。如果杂环基里同时有饱和环和芳环存在(比如说饱和环和芳环稠合在一起)，连接到母体的点一定是在饱和的环上。注：当连接到母体的点在芳环上时，称为杂芳基，不称为杂环基。如下是杂环基的一些例子，本发明并不仅局限下述的杂环基。
Figure BDA0003616931970000122
如本文所用，在单独或作为其他取代基一部分时，术语“卤素”指F、Cl、Br和I。
如本文所用，术语“取代”(在有或无“任意地”修饰时)指特定的基团上的一个或多个氢原子被特定的取代基所取代。特定的取代基为在前文中相应描述的取代基，或各实施例中所出现的取代基。除非特别说明，某个任意取代的基团可以在该基团的任何可取代的位点上具有一个选自特定组的取代基，所述的取代基在各个位置上可以是相同或不同的。环状取代基，例如杂环基，可以与另一个环相连，例如环烷基，从而形成螺二环系，即两个环具有一个共用碳原子。本领域技术人员应理解，本发明所预期的取代基的组合是那些稳定的或化学上可实现的组合。所述取代基例如(但并不限于)：C1-8烷基、C2-8烯基、C2-8炔基、C3-8环烷基、3-至12-元杂环基，芳基、杂芳基、卤素、羟基、羧基(-COOH)、C1-8醛基、C2-10酰基、C2-10酯基、氨基。
为了方便以及符合常规理解，术语“任意取代”或“任选取代”只适用于能够被取代基所取代的位点，而不包括那些化学上不能实现的取代。
如本文所用，除非特别说明，术语“药学上可接受的盐”指适合与对象(例如，人)的组织接触，而不会产生不适度的副作用的盐。在一些实施例中，本发明的某一化合物的药学上可接受的盐包括具有酸性基团的本发明的化合物的盐(例如，钾盐，钠盐，镁盐，钙盐)或具有碱性基团的本发明的化合物的盐(例如，硫酸盐，盐酸盐，磷酸盐，硝酸盐，碳酸盐)。
用途：
本发明提供了一类式(I)化合物，或它们的氘代衍生物、它们的盐、异构体(对映异构体或非对映异构体，如果存在的情况下)、水合物、可药用载体或赋形剂用于抑制HPK1的用途。
本发明化合物可用作一种HPK1抑制剂。
本发明是HPK1的抑制剂，通过调节HPK1的活性达到预防、缓解或治愈疾病的目的。所指疾病包括乳腺癌、非小细胞肺癌、小细胞肺癌、肺腺癌、肺鳞癌、结肠癌、结直肠癌、甲状腺癌、胚胎性横纹肌肉瘤、皮肤颗粒细胞肿瘤、黑色素瘤、肝癌、直肠癌、膀胱癌、咽喉癌、胰腺癌、前列腺癌、神经胶质细胞瘤、卵巢癌、头颈部鳞癌、宫颈癌、食管癌、肾癌、皮肤癌、淋巴瘤、胃癌、间皮瘤、骨肉瘤、急性髓系白血病、骨髓纤维化、B细胞淋巴瘤、单核细胞白血病、脾大性红细胞增多、嗜酸性白细胞增多综合征、多发性骨髓瘤等各种实体瘤和血液瘤，以及艾滋病、孢疹病毒和流感病毒等各类DNA和RNA病毒感染。
可将本发明化合物及其氘代衍生物，以及药学上可接受的盐或其异构体(如果存在的情况下)或其水合物和/或组合物与药学上可接受的赋形剂或载体配制在一起，得到的组合物可在体内给予哺乳动物，例如男人、妇女和动物，用于治疗病症、症状和疾病。组合物可以是：片剂、丸剂、混悬剂、溶液剂、乳剂、胶囊、气雾剂、无菌注射液。无菌粉末等。一些实施例中，药学上可接受的赋形剂包括微晶纤维素、乳糖、柠檬酸钠、碳酸钙、磷酸氢钙、甘露醇、羟丙基-β-环糊精、β-环糊精(增加)、甘氨酸、崩解剂(如淀粉、交联羧甲基纤维素钠、复合硅酸盐和高分子聚乙二醇)，造粒粘合剂(如聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖、明胶和阿拉伯胶)和润滑剂(如硬脂酸镁、甘油和滑石粉)。在优选的实施方式中，所述药物组合物是适于口服的剂型，包括但不限于片剂、溶液剂、混悬液、胶囊剂、颗粒剂、粉剂。向患者施用本发明化合物或药物组合物的量不固定，通常按药用有效量给药。同时，实际给予的化合物的量可由医师根据实际情况决定，包括治疗的病症、选择的给药途径、给予的实际化合物、患者的个体情况等。本发明化合物的剂量取决于治疗的具体用途、给药方式、患者状态、医师判断。本发明化合物在药物组合物中的比例或浓度取决于多种因素，包括剂量、理化性质、给药途径等。
应理解，在本发明范围内中，本发明的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。
药物组合物和施用方法
由于本发明化合物具有优异的对HPK1的抑制活性，因此本发明化合物及其各种晶型，药学上可接受的无机或有机盐，水合物或溶剂合物，以及含有本发明化合物为主要活性成分的药物组合物可用于治疗、预防以及缓解与HPK1活性或表达量相关的疾病。
本发明的药物组合物包含安全有效量范围内的本发明化合物或其药理上可接受的盐及药理上可以接受的赋形剂或载体。其中“安全有效量”指的是：化合物的量足以明显改善病情，而不至于产生严重的副作用。通常，药物组合物含有1-2000mg本发明化合物/剂，更佳地，含有5-200mg本发明化合物/剂。较佳地，所述的“一剂”为一个胶囊或药片。
“药学上可以接受的载体”指的是：一种或多种相容性固体或液体填料或凝胶物质，它们适合于人使用，而且必须有足够的纯度和足够低的毒性。“相容性”在此指的是组合物中各组份能和本发明的化合物以及它们之间相互掺和，而不明显降低化合物的药效。药学上可以接受的载体部分例子有纤维素及其衍生物(如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素钠、纤维素乙酸酯等)、明胶、滑石、固体润滑剂(如硬脂酸、硬脂酸镁)、硫酸钙、植物油(如豆油、芝麻油、花生油、橄榄油等)、多元醇(如丙二醇、甘油、甘露醇、山梨醇等)、乳化剂(如
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)、润湿剂(如十二烷基硫酸钠)、着色剂、调味剂、稳定剂、抗氧化剂、防腐剂、无热原水等。
本发明化合物或药物组合物的施用方式没有特别限制，代表性的施用方式包括(但并不限于)：口服、瘤内、直肠、肠胃外(静脉内、肌肉内或皮下)、和局部给药。
用于口服给药的固体剂型包括胶囊剂、片剂、丸剂、散剂和颗粒剂。在这些固体剂型中，活性化合物与至少一种常规惰性赋形剂(或载体)混合，如柠檬酸钠或磷酸二钙，或与下述成分混合：(a)填料或增容剂，例如，淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和硅酸；(b)粘合剂，例如，羟甲基纤维素、藻酸盐、明胶、聚乙烯基吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯胶；(c)保湿剂，例如，甘油；(d)崩解剂，例如，琼脂、碳酸钙、马铃薯淀粉或木薯淀粉、藻酸、某些复合硅酸盐、和碳酸钠；(e)缓溶剂，例如石蜡；(f)吸收加速剂，例如，季胺化合物；(g)润湿剂，例如鲸蜡醇和单硬脂酸甘油酯；(h)吸附剂，例如，高岭土；和(i)润滑剂，例如，滑石、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、十二烷基硫酸钠，或其混合物。胶囊剂、片剂和丸剂中，剂型也可包含缓冲剂。
固体剂型如片剂、糖丸、胶囊剂、丸剂和颗粒剂可采用包衣和壳材制备，如肠衣和其它本领域公知的材料。它们可包含不透明剂，并且，这种组合物中活性化合物或化合物的释放可以延迟的方式在消化道内的某一部分中释放。可采用的包埋组分的实例是聚合物质和蜡类物质。必要时，活性化合物也可与上述赋形剂中的一种或多种形成微胶囊形式。
用于口服给药的液体剂型包括药学上可接受的乳液、溶液、悬浮液、糖浆或酊剂。除了活性化合物外，液体剂型可包含本领域中常规采用的惰性稀释剂，如水或其它溶剂，增溶剂和乳化剂，例知，乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、丙二醇、1,3-丁二醇、二甲基甲酰胺以及油，特别是棉籽油、花生油、玉米胚油、橄榄油、蓖麻油和芝麻油或这些物质的混合物等。
除了这些惰性稀释剂外，组合物也可包含助剂，如润湿剂、乳化剂和悬浮剂、甜味剂、矫味剂和香料。
除了活性化合物外，悬浮液可包含悬浮剂，例如，乙氧基化异十八烷醇、聚氧乙烯山梨醇和脱水山梨醇酯、微晶纤维素、甲醇铝和琼脂或这些物质的混合物等。
用于肠胃外注射的组合物可包含生理上可接受的无菌含水或无水溶液、分散液、悬浮液或乳液，和用于重新溶解成无菌的可注射溶液或分散液的无菌粉末。适宜的含水和非水载体、稀释剂、溶剂或赋形剂包括水、乙醇、多元醇及其适宜的混合物。
用于局部给药的本发明化合物的剂型包括软膏剂、散剂、贴剂、喷射剂和吸入剂。活性成分在无菌条件下与生理上可接受的载体及任何防腐剂、缓冲剂，或必要时可能需要的推进剂一起混合。
本发明化合物可以单独给药，或者与其他药学上可接受的化合物联合给药。
使用药物组合物时，是将安全有效量的本发明化合物适用于需要治疗的哺乳动物(如人)，其中施用时剂量为药学上认为的有效给药剂量，对于60kg体重的人而言，日给药剂量通常为1～2000mg，优选5～500mg。当然，具体剂量还应考虑给药途径、病人健康状况等因素，这些都是熟练医师技能范围之内的。
本发明的主要优点包括：
1.提供了一种如式I所示的化合物。
2.提供了一种结构新颖的HPK1抑制剂，及其制备和应用，所述的抑制剂在极低浓度下即可抑制HPK1的活性。
3.提供了一类治疗与HPK1活性相关疾病的药物组合物。
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则百分比和份数按重量计算。
本发明的部分代表性化合物可以通过下面合成方法制备而得，下述各反应式中，各步骤的试剂和条件可以选用本领域进行该类制备方法常规的试剂或条件，在本发明的化合物结构公开后，上述选择可以由本领域技术人员根据本领域知识进行。
实施例1：化合物1的合成
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将化合物1a(100mg，0.48mmol；Boc:叔丁氧羰基)溶于四氢呋喃(THF，2mL)中，冰浴下加入钠氢(60％，20mg，0.48mmol)，保温搅拌0.5小时，再加入碘甲烷(MeI，205mg，1.45mmol)。反应混合物室温搅拌过夜，加入饱和氯化铵淬灭。混合液经乙酸乙酯萃取(3×10mL)。合并的有机相经饱和食盐水洗涤、无水硫酸钠干燥、过滤后减压浓缩。所得粗品经硅胶柱层析分离纯化得黄色油状化合物1b(88mg，收率82％)。
将化合物1b(88mg，0.40mmol)溶于二氯甲烷(1mL)和甲醇(1mL)中，再加入氯化氢的1,4-二氧六环(4M，0.5mL)。反应液50℃加热搅拌2小时。将反应液减压浓缩，所得粗品经乙腈洗涤，过滤得白色固体化合物1c(40mg，收率64％)。
将化合物1d(采用WO2021050964中的方法合成，245mg，0.51mmol)溶于二氯甲烷(1mL)中，滴加三氟乙酸(1mL)。反应液40℃加热搅拌2小时。将反应液减压浓缩，以二氯甲烷溶解，滴加饱和碳酸氢钠水溶液调节pH至8～10。混合液经二氯甲烷萃取(3×10mL)。合并的有机相经饱和食盐水洗涤、无水硫酸钠干燥、过滤后减压浓缩得黄色固体化合物1e(120mg，收率100％)，粗品直接用于下一步反应。
将化合物1e(120mg，0.65mmol)、化合物1f(采用WO2021050964中的方法合成，225mg，0.65mmol)、碳酸铯(634mg，1.95mmol)、4,5-双二苯基膦-9,9-二甲基氧杂蒽(75mg，0.13mmol)和三(二亚苄基丙酮)二钯(59mg，0.07mmol)溶于1,4-二氧六环(3mL)中。反应混合物于氮气氛围下90℃加热搅拌2小时。将反应混合物经硅藻土过滤，滤液减压浓缩，所得粗品经硅胶柱层析分离纯化得黄色油状化合物1g(206mg，收率69％)。
将化合物1g(206mg，0.45mmol)、双(频哪醇合)二硼(227mg，0.90mmol)乙酸钾(132mg，1.34mmol)和氯(2-二环己基膦基-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯基)[2-(2'-氨基-1,1'-联苯)]钯(II)(39mg，0.05mmol)溶于1,4-二氧六环(3mL)中。反应混合物于氮气氛围下90℃加热搅拌2小时。将反应混合物经硅藻土过滤，滤液减压浓缩，所得粗品经硅胶柱层析分离纯化得黄色油状化合物1h(85mg，收率34％)。
将化合物1i(40mg，0.15mmol)、化合物1h(85mg，0.15mmol)、磷酸钾(95mg，0.45mmol)、氯(2-二环己基膦基-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯基)[2-(2'-氨基-1,1'-联苯)]钯(II)(12mg，0.02mmol)和2-二环己基磷-2',4',6'-三异丙基联苯(4mg，0.01mmol)溶于1,4-二氧六环(2mL)和水(0.5mL)中。反应混合物于氮气氛围下100℃加热搅拌3小时。将反应混合物经硅藻土过滤，滤液减压浓缩，所得粗品经制备型薄层板分离纯化得黄色油状化合物1j(45mg，收率52％)。
将化合物1j(20mg，0.04mmol)溶于二氯甲烷(1mL)中，再依次滴加N,N-二异丙基乙胺(15mg，0.12mmol)和甲磺酰氯(MsCl，8mg，0.07mmol)。反应液室温搅拌2小时，加水。混合液经二氯甲烷萃取(3×10mL)。合并的有机相经饱和食盐水洗涤、无水硫酸钠干燥、过滤后减压浓缩得黄色油状化合物1k(11mg，收率48％)，粗品直接用于下一步反应。
将化合物1k(11mg，0.02mmol)溶于乙腈(0.5mL)中，再加入化合物1c(6mg，0.03mmol)、碳酸钾(8mg，0.06mmol)和碘化钠(0.3mg，0.002mmol)。反应混合物90℃加热搅拌过夜。将反应混合物过滤，滤液减压浓缩，所得粗品经制备型薄层板分离纯化得黄色油状化合物1l(5mg，收率44％)。
将化合物1l(5mg，0.007mmol)溶于二氯甲烷(0.5mL)中，滴加氯化氢的1,4二氧六环(0.2mL)。反应液40℃加热搅拌1小时。将反应液减压浓缩，所得粗品经制备型薄层板分离纯化得黄色固体化合物1(3mg，71％)。MS m/z 563.5[M+H]+。
实施例2：化合物2的合成
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Figure BDA0003616931970000181
将化合物1d(采用WO2021050964中的方法合成，300mg，0.76mmol)溶于二氯甲烷(4mL)中，加入N,N-二异丙基乙胺(294mg，2.28mmol)和甲磺酰氯(MsCl，130mg，1.14mmol)。反应液室温搅拌3小时，加水。混合液经二氯甲烷萃取(3×20mL)。合并的有机相经饱和食盐水洗涤、无水硫酸钠干燥、过滤后减压浓缩，得到粗品化合物2a直接用于下一步反应。
将化合物2a(360mg，0.76mmol)溶于乙腈(3mL)，再加入N,N-二异丙基乙胺(392mg，3.04mmol)和二甲胺盐酸盐(124mg，1.52mmol)。反应液于封管中90℃加热搅拌3小时。将反应液减压浓缩，所得粗品经硅胶柱层析分离纯化得黄色油状化合物2b(165mg，收率68％)。
将化合物2b(165mg，0.51mmol)溶于二氯甲烷(2mL)中，再滴加三氟乙酸(2mL)。反应液40℃加热搅拌2小时。将反应液减压浓缩，以二氯甲烷溶解，滴加饱和碳酸氢钠水溶液调节pH至8～10。混合液经二氯甲烷萃取(3×20mL)。合并的有机相经饱和食盐水洗涤、无水硫酸钠干燥、过滤后减压浓缩得黄色固体化合物2c(91mg，收率80％)，粗品直接用于下一步反应。
将化合物2d(140mg，0.77mmol)溶于四氢呋喃(3mL)中，加入1-氯甲基-4-氟-1,4-二氮杂双环[2.2.2]辛烷二(四氟硼酸)盐(Selectfluor，300mg，0.85mmol)。反应混合物于氮气氛围下室温搅拌4天。将反应液减压浓缩，经硅胶柱层析分离纯化得黄色固体化合物2e(23mg，收率15％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ8.58(s,1H),7.40(d,J＝11.4Hz,1H),6.11(s,2H),4.21(s,2H)。
将化合物2e(23mg，0.11mmol)溶于氢溴酸(47％，0.5mL)中。反应液冷却至-10℃，加入亚硝酸钠(16mg，0.23mmol)。反应混合物保温搅拌1小时，再加入溴化亚铜(25mg，0.17mmol)。反应混合物80℃加热搅拌1小时，加水，过滤。滤饼以水淋洗，减压干燥后得黄色固体化合物2f(22mg，收率72％)。
将化合物2f(22mg，0.08mmol)和二碳酸二叔丁酯(27mg，0.12mmol)溶于四氢呋喃(1mL)中，再加入4-二甲氨基吡啶(12mg，0.10mmol)。反应液室温搅拌2小时。将反应液减压浓缩，经制备型薄层板分离纯化得黄色固体化合物2g(25mg，收率82％)。
将化合物2g(25mg，0.07mmol)、化合物2c(15mg，0.07mmol)、碳酸铯(67mg，0.21mmol)、4,5-双二苯基膦-9,9-二甲基氧杂蒽(8g，0.01mmol)和三(二亚苄基丙酮)二钯(6mg，0.007mmol)溶于二氧六环(1mL)中。反应混合物于氮气氛围下90℃加热搅拌2小时。将反应液经硅藻土过滤，滤液减压浓缩，所得粗品经制备型薄层板分离纯化得黄色油状化合物2h(16mg，收率48％)。
将化合物2i(300mg)溶于二氯甲烷(5mL)中，再加入N-溴代丁二酰亚胺(NBS，431mg，2.42mmol)。反应液室温搅拌0.5小时，加入亚硫酸钠水溶液淬灭。混合液经二氯甲烷萃取(3×20mL)。合并的有机相经饱和食盐水洗涤、无水硫酸钠干燥、过滤后减压浓缩。所得粗品经硅胶柱层析分离纯化得白色固体化合物2j(359mg，收率76％)。
将化合物2j(100mg，0.47mmol)溶于四氢呋喃(2mL)中，再加入异丙醇频哪醇硼酸酯(260mg，1.40mmol)。反应液冰浴、氮气氛围下加入异丙基氯化镁-氯化锂(2M，0.47mL)。反应液冰浴搅拌2小时，加水。混合液经乙酸乙酯萃取(3×10mL)。合并的有机相经饱和食盐水洗涤、无水硫酸钠干燥、过滤后减压浓缩。所得粗品经硅胶柱层析分离纯化得黄色油状化合物2k(122mg，收率100％)。
将化合物2h(15mg，0.03mmol)、化合物2k(16mg，0.06mmol)、磷酸钾(19mg，0.09mmol)、氯(2-二环己基膦基-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯基)[2-(2'-氨基-1,1'-联苯)]钯(II)(6mg，0.008mmol)和2-二环己基磷-2',4',6'-三异丙基联苯(2mg，0.004mmol)溶于1,4-二氧六环(1mL)和水(3mL)中。反应混合物于氮气氛围下110℃加热搅拌3小时。将反应混合物经硅藻土过滤，滤液减压浓缩，所得粗品经制备型薄层板分离纯化得黄色油状化合物2l(6mg，收率33％)。
将化合物2l(6mg，0.01mmol)溶于二氯甲烷(1mL)中，再滴加氯化氢的1,4-二氧六环(0.2mL)。反应液40℃加热搅拌0.5小时。将反应液减压浓缩，经制备型薄层板分离纯化得黄色固体化合物2(3mg，60％)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.69(brs,1H),8.28-8.21(m,1H),7.60(t,J＝4.3Hz,2H),7.37(d,J＝12.1Hz,1H),7.27(dd,J＝9.2,2.3Hz,1H),6.85(dd,J＝8.6,2.0Hz,1H),6.78-6.73(m,1H),6.40(s,1H),4.28(s,2H),4.10-3.97(m,4H),3.87-3.81(m,1H),3.71-3.67(m,1H),3.67-3.61(m,1H),2.69(s,6H),2.43-2.35(m,1H),1.85-1.78(m,1H)。MS m/z 505.6[M+H]+。
实施例3:化合物3的制备
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Figure BDA0003616931970000201
在-50℃至-60℃下，向叔丁醇钾(1.7g，15.05mmol)的无水N,N-二甲基甲酰胺(15mL)混合物中滴加化合物3a(2g，10.03mmol)和化合物3b(1.63g，8.36mmol)的无水N,N-二甲基甲酰胺(10mL)溶液。然后该温度下继续搅拌30分钟。在-50℃下依次饱和碳酸氢钠水溶液(5mL)和盐酸(3M，13mL)，然后将反应液自然升至室温。加水(80mL)后用乙酸乙酯(150mL)萃取三次，合并的有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，得到无色油状化合物3c(1.75g，收率75％)。
在室温下向化合物3c(1g，4.28mmol)的二氯甲烷(10mL)溶液中加入氯化氢的1,4-二氧六环溶液(4M，3mL)。然后在室温下搅拌4小时。反应液减压浓缩，所得固体经二氯甲烷淋洗、干燥得到白色固体产品3d(520.8mg，收率90％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ9.32(br,2H),3.07(t,J＝5.5Hz,4H),2.38(t,J＝5.5Hz,4H)ppm。
将化合物3e(参照专利WO2021050964中的方法合成，600mg，2.12mmol)、双(频哪醇合)二硼(1.08g，4.24mmol)、氯(2-二环己基膦基-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯基)[2-(2'-氨基-1,1'-联苯)]钯(II)(165mg，0.21mmol)和乙酸钾(625mg，6.37mmol)依次溶于1,4-二氧六环(10mL)中。反应混合液经氮气置换3次，于90℃下搅拌2小时。待反应完毕后，反应混合液过滤并洗涤，滤液减压浓缩。所得粗品经硅胶柱层析分离纯化(石油醚:乙酸乙酯＝8:1)得到灰色固体产物3f(990mg，纯度85％，收率100％)。MS m/z 375.5[M+H]+。
将化合物3f(990mg，2.65mmol)、化合物3g(参照专利WO2021050964中的方法合成，555mg，2.12mmol)、氯(2-二环己基膦基-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯基)[2-(2'-氨基-1,1'-联苯)]钯(II)(165mg，0.21mmol)、2-二环己基膦-2',4',6'-三异丙基联苯(202mg，0.42mmol)和磷酸钾(1.68g，7.94mmol)加入反应瓶中，置换氮气3次。然后加入1,4-二氧六环(12mL)和水(3mL)。反应混合液在氮气保护下100℃搅拌2小时。待反应完毕，冷却至室温，乙酸乙酯稀释。混合液经乙酸乙酯萃取(3×30mL)。合并的有机相经饱和食盐水洗涤、无水硫酸钠干燥、过滤后减压浓缩。所得粗品经硅胶柱层析分离纯化(二氯甲烷:甲醇＝30:1)得到黄色固体产物3h(447mg，收率44％)。MS m/z 383.1[M+H]+。
将化合物3i(300mg，1.88mmol)、化合物3d(325mg，2.44mmol)和碳酸钾(780mg，5.64mmol)依次溶于N,N-二甲基甲酰胺(6mL)中，混合液在100℃下搅拌2小时。待反应完毕，加水稀释。混合液经乙酸乙酯萃取(3×15mL)。合并的有机相经饱和食盐水洗涤、无水硫酸钠干燥、过滤后减压浓缩。所得粗品经硅胶柱层析分离纯化(石油醚:乙酸乙酯＝6:1)得到黄色固体产物3j(323mg，收率63％)。MS m/z 273.1[M+H]+。
将化合物3j(150mg，0.55mmol)溶于二氯甲烷(4mL)中，然后依次加入乙酸(0.1mL)和二甲胺的四氢呋喃溶液3k(2M，0.82mL)。反应液在室温下搅拌2小时后，加入三乙酰氧基硼氢化钠(350mg，1.65mmol)。最后反应液在室温下搅拌1小时。反应混合液直接减压浓缩，粗品经硅胶柱层析分离纯化(二氯甲烷:甲醇＝15:1)得到黄色油状产物3l(250mg，纯度70％，收率100％)。MS m/z 302.1[M+H]+。
将化合物3l(15mg，0.05mmol)、化合物3h(28mg，0.07mmol)、甲烷磺酸(2-二环己基膦-3,6-二甲氧基-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯)(2'-甲胺基-1,1'-联苯-2-基)钯(II)(5mg，0.005mmol)、2-二环己基磷-2',6'-二异丙氧基-1,1'-联苯(5mg，0.01mmol)和碳酸铯(49mg，0.15mmol)溶于1,4-二氧六环(1mL)中，氮气鼓泡1分钟。反应混合液在100℃下搅拌过夜。待反应完毕，加水稀释。混合液经乙酸乙酯萃取(3×5mL)。合并的有机相经饱和食盐水洗涤、无水硫酸钠干燥、过滤后减压浓缩。所得粗品经硅胶柱层析分离纯化(二氯甲烷:甲醇＝25:1)得到黄色固体产物3m(20mg，收率62％)。MS m/z 648.3[M+H]+。
将化合物3m(20mg，0.03mmol)溶于二氯甲烷(2mL)中，加入三氟乙酸(0.5mL)后室温下搅拌30分钟。反应完毕后反应液减压浓缩，所得粗品溶于二氯甲烷中，滴加少量氨水调节pH至7左右。减压浓缩后粗品经硅胶柱层析分离纯化(二氯甲烷:甲醇＝25:1至15:1，2％氨水)得到米白色固体产物3(9.5mg，收率56％)。1H NMR(500MHz,CD3OD)δ8.69(d,J＝8.5Hz,1H),8.30(dd,J＝7.4,5.7Hz,1H),7.71-7.65(m,2H),7.63(d,J＝8.7Hz,1H),7.32(dd,J＝9.3,2.3Hz,1H),6.99(d,J＝8.7Hz,1H),6.96-6.89(m,1H),4.37(s,2H),4.02(s,2H),2.90(t,J＝5.3Hz,4H),2.61(s,6H),2.42-2.35(m,4H)ppm。MS m/z 548.3[M+H]+。
实施例4:化合物4的制备
Figure BDA0003616931970000221
冰水浴下，将化合物4a(2.88g，15.81mmol)溶于干燥四氢呋喃(40mL)中，再分批次加入氢化钠(60％，843mg)。混合液在冰水浴下搅拌30分钟。化合物3a(2.1g，10.54mmol)分批次加入后，反应液在室温下搅拌1小时。待反应完毕，加水淬灭。混合液经乙酸乙酯萃取(3×30mL)。合并的有机相经饱和食盐水洗涤、无水硫酸钠干燥、过滤后减压浓缩。所得粗品经硅胶柱层析分离纯化(石油醚:乙酸乙酯＝10:1)得到无色油状产物4b(2.2g，收率82％)。MSm/z 278.1[M+Na]+。
氮气氛围下，将化合物4b(1.5g，5.88mmol)溶于干燥四氢呋喃(40mL)中，置于-70℃下搅拌并缓慢滴加二异丁基氢化铝的甲苯溶液(DIBAL-H，1M，12mL)。反应液在-70℃下搅拌并缓慢升温至0℃约3小时。待反应完毕，乙酸乙酯稀释。冰水浴下依次缓慢滴加水(1.7mL)、10％NaOH溶液(1.7mL)和水(5.1mL)，然后加入无水硫酸钠干燥。过滤并洗涤滤饼，所得滤液减压浓缩后经硅胶柱层析分离纯化(石油醚:乙酸乙酯＝4:1)得到黄色油状产物4c(575mg，收率43％)。MS m/z 250.2[M+Na]+。
氮气氛围下，将化合物4c(150mg，0.66mmol)溶于干燥四氢呋喃(4mL)中，然后加入氢化钠(60％，34mg)。混合液于40℃下搅拌30分钟。加入碘甲烷(MeI，122mg，0.86mmol)后，反应液在40℃下搅拌过夜。待反应完毕，加水淬灭。混合液经乙酸乙酯萃取(3×15mL)。合并的有机相经饱和食盐水洗涤、无水硫酸钠干燥、过滤后减压浓缩。所得粗品经硅胶柱层析分离纯化(石油醚:乙酸乙酯＝4:1)得到无色油状产物4d(132mg，收率83％)。MS m/z 264.2[M+Na]+。
将化合物4d(120mg，0.50mmol)溶于二氯甲烷(4mL)中，加入氯化氢的1,4-二氧六环溶液(4M，0.5mL)后反应液在室温下搅拌1小时。反应完毕后反应液减压浓缩，所得粗品溶于二氯甲烷中，滴加少量氨水调节pH至7左右。减压浓缩后粗品经硅胶柱层析分离纯化(二氯甲烷:甲醇＝20:1，2％氨水)得到无色油状产物4e(54mg，收率77％)。MS m/z 142.1[M+H]+。
将化合物3i(59mg，0.37mmol)、化合物4e(52mg，0.37mmol)和碳酸钾(102mg，0.74mmol)依次溶于N,N-二甲基甲酰胺(2mL)中，混合液在100℃下搅拌2小时。待反应完毕，加水稀释。混合液经乙酸乙酯萃取(3×10mL)。合并的有机相经饱和食盐水洗涤、无水硫酸钠干燥、过滤后减压浓缩。所得粗品经硅胶柱层析分离纯化(石油醚:乙酸乙酯＝3:1)得到黄色油状产物4f(80mg，收率77％)。MS m/z 281.1[M+H]+。
将化合物4f(80mg，0.28mmol)溶于二氯甲烷(2mL)中，冰水浴下依次加入乙酸(17mg，0.28mmol)和二甲胺的四氢呋喃溶液(2M，0.7mL)。反应液在室温下搅拌1小时后，加入三乙酰氧基硼氢化钠(121mg，0.57mmol)。最后反应液在室温下搅拌1小时。待反应完毕，加入饱和碳酸氢钠溶液。混合液经二氯甲烷萃取(3×10mL)。合并的有机相经饱和食盐水洗涤、无水硫酸钠干燥、过滤后减压浓缩。所得粗品经硅胶柱层析分离纯化(二氯甲烷:甲醇＝20:1，2％氨水)得到黄色油状产物4g(72mg，收率82％)。MS m/z 310.2[M+H]+。
将化合物4g(20mg，0.06mmol)、化合物3h(37mg，0.10mmol)、甲烷磺酸(2-二环己基膦-3,6-二甲氧基-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯)(2'-甲胺基-1,1'-联苯-2-基)钯(II)(6mg，0.006mmol)、2-二环己基磷-2',6'-二异丙氧基-1,1'-联苯(6mg，0.012mmol)和碳酸铯(63mg，0.19mmol)溶于1,4-二氧六环(1mL)中，氮气鼓泡1分钟。反应混合液在100℃下搅拌过夜。待反应完毕，加水稀释。混合液经乙酸乙酯萃取(3×5mL)。合并的有机相经饱和食盐水洗涤、无水硫酸钠干燥、过滤后减压浓缩。所得粗品经硅胶柱层析分离纯化(二氯甲烷:甲醇＝15:1)得到黄色油状产物4h(26mg，收率61％)。MS m/z 656.3[M+H]+。
将化合物4h(26mg，0.04mmol)溶于二氯甲烷(2mL)中，加入三氟乙酸(0.5mL)后室温下搅拌30分钟。反应完毕后反应液减压浓缩，所得粗品溶于二氯甲烷中，滴加少量氨水调节pH至7左右。减压浓缩后粗品经硅胶柱层析分离纯化(二氯甲烷:甲醇＝20:1，2％氨水)得到白色固体产物4(14mg，收率64％)。1HNMR(500MHz,CDCl3)δ9.81(s,1H),8.92(d,J＝8.6Hz,1H),8.11-8.04(m,1H),7.61(s,1H),7.59(d,J＝8.7Hz,1H),7.39(d,J＝8.7Hz,1H),7.31(dd,J＝9.3,2.3Hz,1H),6.82(d,J＝8.6Hz,1H),6.77-6.68(m,1H),6.14(s,1H),5.45(t,J＝6.9Hz,1H),4.34(s,2H),3.98(d,J＝7.0Hz,2H),3.82(br,2H),3.36(s,3H),3.00-2.90(m,4H),2.51(s,6H),2.50-2.45(m,2H),2.43-2.38(m,2H)ppm。MS m/z 556.2[M+H]+。
实施例5:化合物5的制备
Figure BDA0003616931970000241
将化合物4c(100mg，0.44mmol)和N,N-二异丙基乙胺(114mg，0.88mmol)溶于二氯甲烷(3mL)中，冰水浴下缓慢滴加甲磺酰氯(MsCl，66mg，0.57mmol)的二氯甲烷(0.5mL)稀释液。反应液在室温下搅拌1小时。反应完毕后减压浓缩，所得粗品经硅胶柱层析分离纯化(石油醚：乙酸乙酯＝10:1)得到无色油状产物5a(108mg，收率80％)。
将化合物5a(108mg，0.35mmol)和N,N-二异丙基乙胺(91mg，0.71mmol)溶于二氯甲烷(3mL)中，冰水浴下缓慢滴加二甲胺的四氢呋喃溶液(2M，0.2mL)。反应液在室温下搅拌2小时。反应完毕后减压浓缩，所得粗品经硅胶柱层析分离纯化(二氯甲烷:甲醇＝20:1，2％氨水)得到白色固体产物5b(66mg，收率73％)。
将化合物5b(61mg，0.24mmol)溶于二氯甲烷(2mL)中，加入三氟乙酸(0.5mL)后室温下搅拌1小时。反应完毕后反应液减压浓缩得到白色固体产物5c直接进行下一步反应。
将化合物3i(76mg，0.48mmol)、化合物5c(理论产量37mg，0.24mmol)和碳酸钾(99mg，0.72mmol)依次溶于N,N-二甲基甲酰胺(2.5mL)中，混合液在100℃下搅拌1小时。待反应完毕，加水稀释。混合液经乙酸乙酯萃取(3×15mL)。合并的有机相经饱和食盐水洗涤、无水硫酸钠干燥、过滤后减压浓缩。所得粗品经硅胶柱层析分离纯化(二氯甲烷:甲醇＝20:1，2％氨水)得到黄色固体产物5d(74mg，收率100％)。MS m/z 294.2[M+H]+。
将化合物5d(70mg，0.24mmol)溶于二氯甲烷(2.5mL)中，冰水浴下依次加入乙酸(14mg，0.24mmol)和二甲胺的四氢呋喃溶液(2M，1.19mL)。反应液在室温下搅拌2小时后，加入三乙酰氧基硼氢化钠(151mg，0.71mmol)。最后反应液在室温下搅拌1小时。待反应完毕，加入饱和碳酸氢钠溶液。混合液经二氯甲烷萃取(3×10mL)。合并的有机相经饱和食盐水洗涤、无水硫酸钠干燥、过滤后减压浓缩。所得粗品经硅胶柱层析分离纯化(二氯甲烷:甲醇＝8:1，2％氨水)得到黄色油状产物5e(50mg，收率55％)。MS m/z 323.2[M+H]+。
将化合物5e(27mg，0.08mmol)、化合物3h(48mg，0.12mmol)、甲烷磺酸(2-二环己基膦-3,6-二甲氧基-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯)(2'-甲胺基-1,1'-联苯-2-基)钯(II)(8mg，0.008mmol)、2-二环己基磷-2',6'-二异丙氧基-1,1'-联苯(8mg，0.016mmol)和碳酸铯(82mg，0.25mmol)溶于1,4-二氧六环(1.5mL)中，氮气鼓泡1分钟。反应混合液在100℃下搅拌过夜。待反应完毕，加水稀释。混合液经乙酸乙酯萃取(3×5mL)。合并的有机相经饱和食盐水洗涤、无水硫酸钠干燥、过滤后减压浓缩。所得粗品经硅胶柱层析分离纯化(二氯甲烷：甲醇＝20:1，2％氨水)得到黄色油状产物5f(32mg，收率57％)。MS m/z 669.2[M+H]+。
将化合物5f(30mg，0.04mmol)溶于二氯甲烷(2mL)中，加入三氟乙酸(1mL)后室温下搅拌30分钟。反应完毕后反应液减压浓缩，所得粗品溶于二氯甲烷中，滴加少量氨水调节pH至7左右。减压浓缩后粗品经硅胶柱层析分离纯化(二氯甲烷:甲醇＝15:1，2％氨水)得到白色固体产物5(13.7mg，收率54％)。1H NMR(500MHz,CD3OD)δ8.77(d,J＝8.6Hz,1H),8.31(dd,J＝7.4,5.6Hz,1H),7.68(s,1H),7.66(d,J＝8.6Hz,1H),7.57(d,J＝8.7Hz,1H),7.31(dd,J＝9.4,2.4Hz,1H),6.95-6.89(m,2H),5.36(t,J＝7.3Hz,1H),4.36(s,2H),3.87(s,2H),3.08(d,J＝7.3Hz,2H),2.96-2.85(m,4H),2.52-2.49(m,2H),2.48(s,6H),2.46-2.40(m,2H),2.32(s,6H)ppm。MS m/z 569.2[M+H]+。
实施例6:化合物6的制备
Figure BDA0003616931970000251
化合物6的合成参考化合物5的合成方法，得到黄色固体产物6(8.5mg)。1H NMR(500MHz,CD3OD)δ8.73(d,J＝8.6Hz,1H),8.31(dd,J＝7.3,5.8Hz,1H),7.68(s,1H),7.67(d,J＝8.6Hz,1H),7.59(d,J＝8.7Hz,1H),7.32(dd,J＝9.3,2.3Hz,1H),6.96(d,J＝8.7Hz,1H),6.94-6.90(m,1H),5.24(t,J＝7.2Hz,1H),4.37(s,2H),3.97(s,2H),3.57(t,J＝7.4Hz,4H),3.39(d,J＝7.2Hz,2H),2.95-2.87(m,4H),2.56(s,6H),2.55-2.50(m,2H),2.45-2.39(m,2H),2.30-2.21(m,2H)ppm。MS m/z 581.3[M+H]+。
实施例7:化合物7的制备
Figure BDA0003616931970000261
将化合物5a(323mg，1.06mmol)和N,N-二异丙基乙胺(410mg，3.17mmol)溶于二氯甲烷(5mL)中，冰水浴下缓慢滴加吗啡啉7a(276mg，3.17mmol)。反应液在室温下搅拌1小时。反应完毕后减压浓缩，所得粗品经硅胶柱层析分离纯化(二氯甲烷:甲醇＝20:1，2％氨水)得到粗品黄色油状产物7b(363mg，纯度85％，收率98％)。MS m/z 297.2[M+H]+。
将化合物7b(363mg，1.22mmol)溶于二氯甲烷(4mL)中，加入三氟乙酸(1.5mL)后室温下搅拌30分钟。反应完毕后反应液减压浓缩，所得粗品溶于二氯甲烷中，滴加少量氨水调节pH至7左右。减压浓缩后粗品经硅胶柱层析分离纯化(二氯甲烷:甲醇＝16:1，2％氨水)得到黄色油状产物7c(158mg，收率66％)。MS m/z 197.2[M+H]+。
将化合物3i(134mg，0.84mmol)、化合物7c(150mg，0.76mmol)和碳酸钾(317mg，2.29mmol)依次溶于N,N-二甲基甲酰胺(4mL)中，混合液在100℃下搅拌2小时。待反应完毕，加水稀释。混合液经乙酸乙酯萃取(3×20mL)。合并的有机相经饱和食盐水洗涤、无水硫酸钠干燥、过滤后减压浓缩。所得粗品经硅胶柱层析分离纯化(二氯甲烷:甲醇＝25:1)得到黄色油状产物7d(95mg，收率37％)。MS m/z 336.1[M+H]+。
将化合物7d(93mg，0.28mmol)溶于二氯甲烷(3mL)中，冰水浴下依次加入乙酸(17mg，0.28mmol)和二甲胺的四氢呋喃溶液(2M，0.5mL)。反应液在室温下搅拌1小时后，加入三乙酰氧基硼氢化钠(176mg，0.83mmol)。最后反应液在室温下搅拌1小时。待反应完毕，加水淬灭。混合液经二氯甲烷萃取(3×10mL)。合并的有机相经饱和食盐水洗涤、无水硫酸钠干燥、过滤后减压浓缩。所得粗品经硅胶柱层析分离纯化(二氯甲烷:甲醇＝20:1，2％氨水)得到黄色油状产物7e(77mg，收率76％)。MS m/z 365.1[M+H]+。
将化合物7e(45mg，0.12mmol)、化合物3h(61mg，0.16mmol)、甲烷磺酸(2-二环己基膦-3,6-二甲氧基-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯)(2'-甲胺基-1,1'-联苯-2-基)钯(II)(11mg，0.01mmol)、2-二环己基磷-2',6'-二异丙氧基-1,1'-联苯(11mg，0.02mmol)和碳酸铯(121mg，0.37mmol)溶于1,4-二氧六环(2mL)中，氮气鼓泡1分钟。反应混合液在100℃下搅拌过夜。待反应完毕，加水稀释。混合液经乙酸乙酯萃取(3×10mL)。合并的有机相经饱和食盐水洗涤、无水硫酸钠干燥、过滤后减压浓缩。所得粗品经硅胶柱层析分离纯化(二氯甲烷:甲醇＝15:1，2％氨水)得到黄色固体产物7f(24mg，收率27％)。MS m/z 711.4[M+H]+。
将化合物7f(27mg，0.04mmol)溶于二氯甲烷(2mL)中，加入三氟乙酸(0.5mL)后室温下搅拌20分钟。反应完毕后反应液减压浓缩，所得粗品溶于二氯甲烷中，滴加少量氨水调节pH至7左右。减压浓缩后粗品经硅胶柱层析分离纯化(二氯甲烷:甲醇＝12:1，2％氨水)得到黄色固体产物7(23mg，收率99％)。1H NMR(500MHz,CD3OD)δ8.57(d,J＝8.5Hz,1H),8.31(dd,J＝7.4,5.6Hz,1H),7.69(s,1H),7.70-7.66(m,2H),7.33(dd,J＝9.4,2.4Hz,1H),7.06(d,J＝8.7Hz,1H),6.96-6.91(m,1H),5.37(t,J＝7.2Hz,1H),4.38(s,2H),4.29(s,2H),3.71(t,J＝4.4Hz,4H),3.09(d,J＝7.3Hz,2H),2.94-2.86(m,4H),2.79(s,6H),2.57-2.50(m,6H),2.50-2.41(m,2H)ppm。MS m/z 611.4[M+H]+。
实施例8:化合物8的制备
Figure BDA0003616931970000281
实施例9:化合物9的制备
Figure BDA0003616931970000282
将化合物9a(1.0g，4.44mmol)溶于二氯甲烷(10mL)中，加入三氟乙酸(TFA，2mL)、置于50mL单口瓶中室温反应2小时。反应混合物减压浓缩，得棕色油状物9b(1.0g，收率100％)。
将化合物3i(214mg，1.34mmol)、化合物9b(300mg，1.34mmol)和碳酸钾(743mg，5.37mmol)依次溶于N,N-二甲基甲酰胺(6mL)中，混合液在100℃下搅拌2小时。待反应完毕，加水稀释。混合液经乙酸乙酯萃取(3×15mL)。合并的有机相经饱和食盐水洗涤、无水硫酸钠干燥、过滤后减压浓缩。所得粗品经硅胶柱层析分离纯化(石油醚:乙酸乙酯＝6:1)得到黄色固体产物9c(300mg，收率86％)。MS m/z 265.1[M+H]+。
将化合物9c(115mg，0.43mmol)溶于二氯甲烷(4mL)中，然后依次加入乙酸(0.1mL)和二甲胺的四氢呋喃溶液(2M，0.82mL)。反应液在室温下搅拌2小时后，加入三乙酰氧基硼氢化钠(350mg，1.65mmol)。最后反应液在室温下搅拌1小时。反应混合液直接减压浓缩，粗品经硅胶柱层析分离纯化(二氯甲烷:甲醇＝15:1)得到黄色油状产物9d(100mg，收率78％)。MS m/z 294.1[M+H]+。
将化合物9d(55mg，0.19mmol)、化合物3h(88mg，0.23mmol)、甲烷磺酸(2-二环己基膦-3,6-二甲氧基-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯)(2'-甲胺基-1,1'-联苯-2-基)钯(II)(9mg，0.01mmol)、2-二环己基磷-2',6'-二异丙氧基-1,1'-联苯(9mg，0.02mmol)和碳酸铯(186mg，0.57mmol)溶于1,4-二氧六环(2mL)中，氮气鼓泡1分钟。反应混合液在100℃下搅拌过夜。待反应完毕，加水稀释。混合液经乙酸乙酯萃取(3×5mL)。合并的有机相经饱和食盐水洗涤、无水硫酸钠干燥、过滤后减压浓缩。所得粗品经硅胶柱层析分离纯化(二氯甲烷:甲醇＝25:1)得到黄色固体产物9e(70mg，收率58％)。MS m/z 640.3[M+H]+。
将化合物9e(40mg，0.06mmol)溶于二氯甲烷(2mL)中，加入三氟乙酸(0.5mL)后室温下搅拌30分钟。反应完毕后反应液减压浓缩，所得粗品溶于二氯甲烷中，滴加少量氨水调节pH至7左右。减压浓缩后粗品经硅胶柱层析分离纯化(二氯甲烷:甲醇＝25:1至15:1，2％氨水)得到黄色固体产物9(15mg，收率44％)。1H NMR(500MHz,CD3OD)δ8.76(d,J＝8.6Hz,1H),8.32(dd,J＝7.4,5.6Hz,1H),7.69(s,1H),7.67(d,J＝8.6Hz,1H),7.58(d,J＝8.6Hz,1H),7.32(dd,J＝9.4,2.3Hz,1H),6.93(m,2H),4.37(s,2H),3.92(s,2H),2.90-2.75(m,4H),2.51(s,6H),2.48-2.44(m,4H),1.72(s,6H).MS m/z 540.3[M+H]+。
实施例10:化合物10的制备
Figure BDA0003616931970000301
将化合物10a(895mg，4.02mmol)和活性二氧化锰(3.50g，40.23mmol)溶于三氯甲烷(10mL)中。反应液在回流温度下搅拌过夜。反应液冷却至室温后过滤，二氯甲烷洗涤。滤液减压浓缩后经硅胶柱层析分离纯化(石油醚:乙酸乙酯＝6:1)得到白色固体产物10b(785mg，收率89％)。
将化合物10c(1.0g，6.40mmol)溶于四氢呋喃(8mL)中，氮气保护下-78℃搅拌。再缓慢滴加双三甲基硅基胺基锂的四氢呋喃溶液(1M，7.7mL)，反应液在-78℃下搅拌1小时。随后加入化合物10d(2.74g，7.68mmol)的四氢呋喃溶液(4mL)，反应液在-78℃下搅拌30分钟，然后室温下搅拌1小时。反应完毕后加水淬灭。混合液经乙酸乙酯萃取(3×20mL)。合并的有机相经饱和食盐水洗涤、无水硫酸钠干燥、过滤后减压浓缩。所得粗品经硅胶柱层析分离纯化(石油醚:乙酸乙酯＝8:1)得到黄色油状产物10e(2.04g，纯度80％，收率88％)。1HNMR(500MHz,CDCl3)δ5.69-5.65(m,1H),4.02-3.97(m,4H),2.57-2.51(m,2H),2.43-2.39(m,2H),1.91(t,J＝6.6Hz,2H)ppm。
将化合物10e(1.88g，6.52mmol)、二三苯基膦二氯化钯(458mg，0.65mmol)、三苯基砷(400mg，1.30mmol)和三乙胺(1.98g，19.57mmol)溶于甲苯(10mL)中，氮气置换三次。加入化合物10f(1.25g，9.78mmol)后反应混合液在80℃下搅拌3小时。待反应完毕，加入乙酸乙酯稀释。混合液经乙酸乙酯萃取(3×20mL)。合并的有机相经饱和食盐水洗涤、无水硫酸钠干燥、过滤后减压浓缩。所得粗品经硅胶柱层析分离纯化(石油醚:乙酸乙酯＝15:1)得到黄色油状产物10g(818mg，收率47％)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ6.49-6.44(m,1H),3.98(s,4H),2.40-2.33(m,4H),1.73(t,J＝6.4Hz,2H),1.25(s,12H)ppm。
将化合物10b(300mg，1.36mmol)、化合物10g(435mg，1.63mmol)、[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯二氯甲烷络合物(110mg，0.14mmol)和碳酸钾(564mg，4.08mmol)溶于1,4-二氧六环(5mL)和水(1.25mL)混合溶液中，氮气置换三次。反应混合液在100℃下搅拌3小时。待反应完毕，加水稀释。混合液经乙酸乙酯萃取(3×15mL)。合并的有机相经饱和食盐水洗涤、无水硫酸钠干燥、过滤后减压浓缩。所得粗品经硅胶柱层析分离纯化(二氯甲烷:乙酸乙酯＝10:1)得到黄色油状产物10h(270mg，收率71％)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ10.07(s,1H),7.65(d,J＝8.1Hz,1H),7.47(d,J＝8.1Hz,1H),5.59-5.52(m,1H),4.03(d,J＝1.0Hz,4H),2.52-2.43(m,4H),1.97(t,J＝6.4Hz,2H)ppm。
将化合物10h(93mg，0.33mmol)和乙酸(20mg，0.33mmol)溶于二氯甲烷(3mL)中，再加入二甲胺的四氢呋喃溶液(2M，1.0mL)。反应液在室温下搅拌1小时后，加入三乙酰氧基硼氢化钠(211mg，1.0mmol)。最后反应液在室温下搅拌20分钟。待反应完毕，加水淬灭。混合液经二氯甲烷萃取(3×10mL)。合并的有机相经饱和食盐水洗涤、无水硫酸钠干燥、过滤后减压浓缩。所得粗品经硅胶柱层析分离纯化(二氯甲烷:甲醇＝20:1，2％氨水)得到无色油状产物10i(89mg，收率87％)。MS m/z 309.2[M+H]+。
将化合物10i(10mg，0.03mmol)溶于四氢呋喃(2mL)中，加入盐酸(3M,0.5mL)，反应液在室温下搅拌1小时。待反应完毕，反应液减压浓缩。所得粗品经硅胶柱层析分离纯化(二氯甲烷:甲醇＝12:1，2％氨水)得到黄色油状产物10j(6mg，收率70％)。MS m/z 265.2[M+H]+。
将化合物10j(6mg，0.02mmol)和化合物3b(5mg，0.03mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(2mL)中，氮气保护下-60℃搅拌。再缓慢滴加叔丁醇钾(5mg，0.04mmol)的四氢呋喃(0.4mL)溶液，反应液在-60℃搅拌1小时。加入饱和氯化铵溶液，-60℃下搅拌5分钟，再加入盐酸(3M)，所得混合液在室温下搅拌1小时。混合液经乙酸乙酯萃取(3×5mL)。合并的有机相经饱和食盐水洗涤、无水硫酸钠干燥、过滤后减压浓缩。所得粗品经硅胶柱层析分离纯化(二氯甲烷:甲醇＝15:1)得到黄色固体产物10k(2mg，收率30％)。MS m/z 299.1[M+H]+。
将化合物10k(2mg，0.007mmol)、化合物3h(3.4mg，0.009mmol)、甲烷磺酸(2-二环己基膦-3,6-二甲氧基-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯)(2'-甲胺基-1,1'-联苯-2-基)钯(II)(1mg，0.001mmol)、2-二环己基磷-2',6'-二异丙氧基-1,1'-联苯(1mg，0.002mmol)和碳酸铯(6.5mg，0.020mmol)溶于1,4-二氧六环(1mL)中，氮气鼓泡1分钟。反应混合液在100℃下搅拌过夜。待反应完毕，加水稀释。混合液经乙酸乙酯萃取(3×3mL)。合并的有机相经饱和食盐水洗涤、无水硫酸钠干燥、过滤后减压浓缩。所得粗品经薄层色谱分析分离纯化(二氯甲烷:甲醇＝10:1)得到黄色固体产物10l(2mg，收率46％)。MS m/z 645.1[M+H]+。
将化合物10l(2mg，0.003mmol)溶于二氯甲烷(1.5mL)中，加入三氟乙酸(0.2mL)后室温下搅拌30分钟。反应完毕后反应液减压浓缩，所得粗品溶于二氯甲烷中，滴加少量氨水调节pH至7左右。减压浓缩后粗品经薄层色谱分析分离纯化(二氯甲烷:甲醇＝16:1，2％氨水)得到黄色固体产物10(1mg，收率59％)。MS m/z 545.1[M+H]+。
实施例11:化合物11的制备
Figure BDA0003616931970000321
化合物11a参照专利WO2021050964中的方法合成。将化合物11a(50mg，0.14mmol)、氨基甲酸叔丁酯11b(19mg，0.16mmol)、三(二亚苄基丙酮)二钯(13mg，0.015mmol)、4,5-双二苯基膦-9,9-二甲基氧杂蒽(17mg，0.03mmol)和碳酸铯(94mg，0.29mmol)依次溶于1,4-二氧六环(2mL)中。反应混合液经氮气置换3次，于80℃下搅拌1小时。待反应完毕，冷却至室温，乙酸乙酯稀释。混合液经乙酸乙酯萃取(3×5mL)。合并的有机相经饱和食盐水洗涤、无水硫酸钠干燥、过滤后减压浓缩。所得粗品经硅胶柱层析分离纯化(石油醚:乙酸乙酯＝10:1)得到黄色固体产物11c(10mg，收率18％)。MS m/z 384.1[M+H]+。
化合物11d参照专利WO2021050964中的方法合成。将化合物11c(10mg，0.03mmol)、化合物11d(10mg，0.04mmol)、氯(2-二环己基膦基-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯基)[2-(2'-氨基-1,1'-联苯)]钯(II)(2mg，0.003mmol)和磷酸钾(17mg，0.08mmol)加入反应瓶中，置换氮气3次。然后加入1,4-二氧六环(1.5mL)和水(0.3mL)。反应混合液在氮气保护下110℃搅拌30分钟。待反应完毕，冷却至室温，乙酸乙酯稀释。混合液经乙酸乙酯萃取(3×5mL)。合并的有机相经饱和食盐水洗涤、无水硫酸钠干燥、过滤后减压浓缩。所得粗品经硅胶柱层析分离纯化(二氯甲烷:甲醇＝30:1)得到黄色固体产物11e(11mg，收率88％)。MS m/z480.3[M+H]+。
将化合物11e(11mg，0.02mmol)溶于二氯甲烷(2mL)中，加入三氟乙酸(0.2mL)后室温下搅拌1小时。反应完毕后反应液减压浓缩，所得粗品溶于二氯甲烷中，滴加少量氨水调节pH至7左右。减压浓缩后粗品经硅胶柱层析分离纯化(二氯甲烷：甲醇＝20:1，2％氨水)得到黄色固体产物11f(7mg，收率100％)。MS m/z 280.1[M+H]+。
将化合物3l(7mg，0.02mmol)、化合物11f(7mg，0.02mmol)、甲烷磺酸(2-二环己基膦-3,6-二甲氧基-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯)(2'-甲胺基-1,1'-联苯-2-基)钯(II)(2mg，0.002mmol)、2-二环己基磷-2',6'-二异丙氧基-1,1'-联苯(2mg，0.004mmol)和碳酸铯(15mg，0.05mmol)溶于1,4-二氧六环(1mL)中，氮气鼓泡1分钟。反应混合液在100℃下搅拌过夜。待反应完毕，加水稀释。混合液经乙酸乙酯萃取(3×5mL)。合并的有机相经饱和食盐水洗涤、无水硫酸钠干燥、过滤后减压浓缩。所得粗品经硅胶柱层析分离纯化(二氯甲烷:甲醇＝20:1，2％氨水)得到黄色固体产物11(1.72mg，收率14％)。1H NMR(500MHz,CD3OD)δ8.57(d,J＝8.9Hz,1H),8.44(d,J＝5.3Hz,1H),8.30(s,1H),7.83(d,J＝9.0Hz,1H),7.51(d,J＝5.3Hz,1H),7.49(d,J＝3.5Hz,1H),6.83(d,J＝2.9Hz,1H),5.36(s,2H),4.61(s,2H),3.95(s,2H),2.99(s,4H),2.91(t,J＝5.5Hz,3H),2.42(t,J＝5.2Hz,3H)ppm。MS m/z545.3[M+H]+。
实施例12:化合物12的制备
Figure BDA0003616931970000331
将3-(苄氧基)-1-环丁酮(8.00g，45.45mmol)、化合物12a(7.89g，40.9mmol)溶于DMF(100mL)中，氮气氛围下冷却至-60℃。滴加叔丁醇钾(7.65g，68.18mmol)的DMF(100mL)溶液。滴毕，将反应液升至0℃搅拌1小时。再加入浓盐酸(20mL)，室温搅拌1小时。反应液加水稀释，乙酸乙酯(200mL×3)萃取，有机层合并后经饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，所得粗品经硅胶柱层析分离纯化得黄色油状化合物12b(3.01g,32％)。
将化合物12b(3.01g，14.29mmol)溶于二氯甲烷(30mL)，冷却至-70℃，滴加三溴化硼(5.36g，21.44mmol)。反应液保温搅拌0.5小时。将反应液在冰浴下以碳酸氢钠水溶液淬灭，二氯甲烷(20mL×3)萃取，有机层合并后经饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，得化合物12c的二氯甲烷溶液，直接用于下一步反应。
将对甲苯磺酰氯(3.00g，15.72mmol)加入含化合物12c(1.71g，14.29mmol)的二氯甲烷溶液，冰浴下加入钠氢(60％，857mg，21.44mmol)。反应液冰浴搅拌1小时。将反应液以饱和氯化铵水溶液淬灭，二氯甲烷(30mL×3)萃取，有机层合并后经饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，所得粗品经硅胶柱层析分离纯化得白色固体化合物12d(1.90g,49％)。
将化合物12e(300mg，1.97mmol)溶于二氯甲烷(5mL)中，再加入N-溴代丁二酰亚胺(526mg，2.96mmol)。反应液室温搅拌0.5小时，将反应液减压浓缩，所得粗品经硅胶柱层析分离纯化得黄色油状化合物12f(180mg，收率40％)。MS m/z 231.3，233.3[M+H]+。
将化合物12f(100mg，0.43mmol)、化合物12d(142mg，0.52mmol)、碳酸铯(282mg，0.87mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(3mL)中。反应混合物90℃加热搅拌5小时。将反应混合物过滤，滤液减压浓缩，经硅胶柱层析分离纯化得黄色油状化合物12g(31mg，收率22％)。MSm/z 333.1&335.1[M+H]+。
将化合物12g(26mg，0.08mmol)、化合物12h(30mg，0.08mmol)、甲烷磺酸(2-二环己基膦-3,6-二甲氧基-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯)(2'-甲胺基-1,1'-联苯-2-基)钯(II)(9mg，0.01mmol)、2-二环己基磷-2',6'-二异丙氧基-1,1'-联苯(9mg，0.02mmol)、碳酸铯(78mg，0.24mmol)溶于1,4-二氧六环(3mL)中。反应混合物氮气氛围下100℃加热搅拌过夜。将反应混合物经硅藻土过滤，滤液减压浓缩，经制备型薄层板分离纯化得黄色固体化合物12i(30mg，收率61％)。MS m/z 635.2[M+H]+。
将化合物12i(30mg，0.05mmol)溶于二氯甲烷(2mL)中，滴加氯化氢的1,4-二氧六环(4M，0.5mL)。反应液室温搅拌1小时。将反应液减压浓缩，经制备型薄层板分离纯化得白色固体化合物12(12mg，收率47％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ9.94(s,1H),8.79(s,1H),8.62(d,J＝8.7Hz,1H),8.47-8.37(m,1H),7.81(s,1H),7.68(d,J＝8.7Hz,1H),7.51(dd,J＝10.1,2.2Hz,1H),7.35(d,J＝8.7Hz,1H),7.01-6.92(m,2H),4.93-4.83(m,1H),4.37(s,2H),3.60(s,2H),3.26-3.16(m,2H),2.86-2.76(m,2H),2.30(s,6H)。MS m/z 535.1[M+H]+。
实施例13:化合物13的制备
Figure BDA0003616931970000351
将化合物13a(100mg，0.45mmol)、环丙乙炔(90mg，1.36mmol)、双三苯基磷二氯化钯(16mg，0.02mmol)和碳酸铯(443mg，5.37mmol)依次溶于N,N-二甲基甲酰胺(2mL)中，混合液在60℃下搅拌2小时。待反应完毕，加水稀释。混合液经乙酸乙酯萃取(3×15mL)。合并的有机相经饱和食盐水洗涤、无水硫酸钠干燥、过滤后减压浓缩。所得粗品经硅胶柱层析分离纯化(石油醚:乙酸乙酯＝30:1)得到黄色固体产物13b(20mg，收率21％)。MS m/z 206.1[M+H]+。
将化合物13b(20mg，0.1mmol)溶于二氯甲烷(1mL)中，然后依次加入乙酸(0.05mL)和二甲胺的四氢呋喃溶液(2M，0.2mL)。反应液在室温下搅拌2小时后，加入三乙酰氧基硼氢化钠(62mg，0.29mmol)。最后反应液在室温下搅拌1小时。反应混合液直接减压浓缩，粗品经硅胶柱层析分离纯化(二氯甲烷:甲醇＝15:1)得到黄色油状产物13c(10mg，收率44％)。MSm/z 235.1[M+H]+。
将化合物13c(10mg，0.04mmol)、化合物3h(19mg，0.05mmol)、甲烷磺酸(2-二环己基膦-3,6-二甲氧基-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯)(2'-甲胺基-1,1'-联苯-2-基)钯(II)(3mg，0.003mmol)、2-二环己基磷-2',6'-二异丙氧基-1,1'-联苯(3mg，0.006mmol)和碳酸铯(42mg，0.13mmol)溶于1,4-二氧六环(1mL)中，氮气鼓泡1分钟。反应混合液在100℃下搅拌过夜。待反应完毕，加水稀释。混合液经乙酸乙酯萃取(3×5mL)。合并的有机相经饱和食盐水洗涤、无水硫酸钠干燥、过滤后减压浓缩。所得粗品经硅胶柱层析分离纯化(二氯甲烷:甲醇＝25:1)得到黄色固体产物13d(5mg，收率20％)。MS m/z 581.2[M+H]+。
将化合物13d(5mg，0.008mmol)溶于二氯甲烷(1mL)中，加入三氟乙酸(0.5mL)后室温下搅拌30分钟。反应完毕后反应液减压浓缩，所得粗品溶于二氯甲烷中，滴加少量氨水调节pH至7左右。减压浓缩后粗品经硅胶柱层析分离纯化(二氯甲烷:甲醇＝25:1至15:1，2％氨水)得到黄色固体产物13(2mg，收率49％)。MS m/z 481.1[M+H]+。
实施例14:化合物14的制备
Figure BDA0003616931970000361
将化合物13a(100mg，0.45mmol)、3-乙炔基氧杂环丁烷(75mg，0.91mmol)、双三苯基磷二氯化钯(16mg，0.02mmol)、碘化亚铜(4mg，0.02mmol)和三乙胺(0.6mL)依次溶于N,N-二甲基甲酰胺(3mL)中，混合液在60℃下搅拌1小时。待反应完毕，加水稀释。混合液经乙酸乙酯萃取(3×15mL)。合并的有机相经饱和食盐水洗涤、无水硫酸钠干燥、过滤后减压浓缩。所得粗品经硅胶柱层析分离纯化(石油醚:乙酸乙酯＝5:1)得到黄色固体产物14a(50mg，收率50％)。MS m/z 222.1[M+H]+。
将化合物14a(50mg，0.1mmol)溶于二氯甲烷(1mL)中，然后依次加入乙酸(0.1mL)和二甲胺的四氢呋喃溶液(2M，0.9mL)。反应液在室温下搅拌2小时后，加入三乙酰氧基硼氢化钠(143mg，0.67mmol)。最后反应液在室温下搅拌1小时。反应混合液直接减压浓缩，粗品经硅胶柱层析分离纯化(二氯甲烷:甲醇＝15:1)得到黄色油状产物14b(45mg，收率80％)。MS m/z 251.1[M+H]+。
将化合物14b(45mg，0.18mmol)、化合物3h(84mg，0.22mmol)、甲烷磺酸(2-二环己基膦-3,6-二甲氧基-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯)(2'-甲胺基-1,1'-联苯-2-基)钯(II)(12mg，0.013mmol)、2-二环己基磷-2',6'-二异丙氧基-1,1'-联苯(12mg，0.026mmol)和碳酸铯(176mg，0.54mmol)溶于1,4-二氧六环(2mL)中，氮气鼓泡1分钟。反应混合液在100℃下搅拌过夜。待反应完毕，加水稀释。混合液经乙酸乙酯萃取(3×5mL)。合并的有机相经饱和食盐水洗涤、无水硫酸钠干燥、过滤后减压浓缩。所得粗品经硅胶柱层析分离纯化(二氯甲烷:甲醇＝20:1)得到黄色固体产物14c(50mg，收率47％)。MS m/z 597.1[M+H]+。
将化合物14c(50mg，0.08mmol)溶于二氯甲烷(2mL)中，加入三氟乙酸(1mL)后室温下搅拌30分钟。反应完毕后反应液减压浓缩，所得粗品溶于二氯甲烷中，滴加少量氨水调节pH至7左右。减压浓缩后粗品经硅胶柱层析分离纯化(二氯甲烷:甲醇＝25:1至15:1，2％氨水)得到黄色固体产物14(26mg，收率63％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.27(s,1H),8.89(s,1H),8.79(d,J＝8.5Hz,1H),8.45(dd,J＝7.4,6.0Hz,1H),7.84(s,1H),7.76(d,J＝8.5Hz,1H),7.69(d,J＝8.5Hz,1H),7.53(dd,J＝10.0,2.5Hz,1H),7.00-6.95(m,1H),6.93(d,J＝8.5Hz,1H),4.84(dd,J＝8.4,5.4Hz,2H),4.64(dd,J＝7.0,5.4Hz,2H),4.41(s,2H),4.23-4.14(m,1H),3.69(s,2H),2.32(s,6H)。MS m/z 497.0[M+H]+。
实施例15:化合物15的制备
Figure BDA0003616931970000371
将化合物13a(110mg，0.50mmol)、化合物15a(91mg，0.50mmol)、双三苯基磷二氯化钯(16mg，0.02mmol)、碘化亚铜(4mg，0.02mmol)和三乙胺(0.6mL)依次溶于N,N-二甲基甲酰胺(3mL)中，混合液在60℃下搅拌1小时。待反应完毕，加水稀释。混合液经乙酸乙酯萃取(3×15mL)。合并的有机相经饱和食盐水洗涤、无水硫酸钠干燥、过滤后减压浓缩。所得粗品经硅胶柱层析分离纯化(石油醚:乙酸乙酯＝5:1)得到黄色固体产物15b(125mg，收率78％)。MS m/z 321.0[M+H]+。
将化合物15b(125mg，0.39mmol)溶于二氯甲烷(2mL)中，然后依次加入乙酸(0.1mL)和二甲胺的四氢呋喃溶液(2M，1.5mL)。反应液在室温下搅拌2小时后，加入三乙酰氧基硼氢化钠(248mg，1.17mmol)。最后反应液在室温下搅拌1小时。反应混合液直接减压浓缩，粗品经硅胶柱层析分离纯化(二氯甲烷:甲醇＝15:1)得到黄色油状产物15c(80mg，收率59％)。MS m/z 350.3[M+H]+。
将化合物15c(15mg，0.04mmol)、化合物3h(19mg，0.05mmol)、甲烷磺酸(2-二环己基膦-3,6-二甲氧基-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯)(2'-甲胺基-1,1'-联苯-2-基)钯(II)(3mg，0.003mmol)、2-二环己基磷-2',6'-二异丙氧基-1,1'-联苯(3mg，0.006mmol)和碳酸铯(39mg，0.12mmol)溶于1,4-二氧六环(2mL)中，氮气鼓泡1分钟。反应混合液在100℃下搅拌过夜。待反应完毕，加水稀释。混合液经乙酸乙酯萃取(3×5mL)。合并的有机相经饱和食盐水洗涤、无水硫酸钠干燥、过滤后减压浓缩。所得粗品经硅胶柱层析分离纯化(二氯甲烷:甲醇＝20:1)得到黄色固体产物15d(15mg，收率50％)。MS m/z 696.2[M+H]+。
将化合物15d(15mg，0.02mmol)溶于二氯甲烷(2mL)中，加入三氟乙酸(1mL)后室温下搅拌30分钟。反应完毕后反应液减压浓缩，所得粗品溶于二氯甲烷中，滴加少量氨水调节pH至7左右。减压浓缩后粗品经硅胶柱层析分离纯化(二氯甲烷:甲醇＝25:1至15:1，2％氨水)得到黄色固体产物15(8mg，收率75％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.25(s,1H),8.88(s,1H),8.80(d,J＝8.5Hz,1H),8.45(dd,J＝7.4,5.9Hz,1H),7.84(s,1H),7.75(d,J＝8.5Hz,1H),7.65(d,J＝8.5Hz,1H),7.52(dd,J＝10.0,2.5Hz,1H),7.00-6.95(m,1H),6.90(d,J＝8.5Hz,1H),4.41(s,2H),3.77-3.53(m,7H),2.29(s,6H).MS m/z 496.1[M+H]+。
实施例16:化合物16的制备
Figure BDA0003616931970000381
将化合物15(10mg，0.02mmol)和冰乙酸(12mg，0.20mmol)依次溶于吡啶(1mL)中，再加入1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(12mg，0.06mmol)。反应液在室温下搅拌2小时。待反应完毕，加水稀释。混合液经乙酸乙酯萃取(3×10mL)。合并的有机相经饱和食盐水洗涤、无水硫酸钠干燥、过滤后减压浓缩。所得粗品经硅胶柱层析分离纯化(二氯甲烷:甲醇＝25:1～15:1，2％氨水)得到淡黄色固体产物16(5mg，收率46％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.27(s,1H),8.89(s,1H),8.80(d,J＝8.6Hz,1H),8.46(dd,J＝7.4,6.0Hz,1H),7.84(s,1H),7.76(d,J＝8.6Hz,1H),7.69(d,J＝8.5Hz,1H),7.53(dd,J＝10.0,2.5Hz,1H),7.01-6.95(m,1H),6.92(d,J＝8.5Hz,1H),4.46(t,J＝8.3Hz,1H),4.41(s,2H),4.23-4.11(m,2H),3.87-3.80(m,1H),3.78-3.70(m,1H),3.65(s,2H),2.29(s,6H),1.78(s,3H)。MS m/z 538.1[M+H]+。
实施例17:化合物17的制备
Figure BDA0003616931970000382
将化合物15(15mg，0.03mmol)和三乙胺(9mg，0.09mmol)依次溶于吡啶(1mL)中，再加入甲磺酰氯(7mg，0.06mmol)。反应液在室温下搅拌2小时。待反应完毕，加水稀释。混合液经乙酸乙酯萃取(3×10mL)。合并的有机相经饱和食盐水洗涤、无水硫酸钠干燥、过滤后减压浓缩。所得粗品经硅胶柱层析分离纯化(二氯甲烷:甲醇＝25:1～15:1，2％氨水)得到淡黄色固体产物17(6mg，收率35％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.28(s,1H),8.90(s,1H),8.78(d,J＝8.5Hz,1H),8.45(dd,J＝7.5,6.0Hz,1H),7.84(s,1H),7.76(d,J＝8.5Hz,1H),7.71(d,J＝8.5Hz,1H),7.53(dd,J＝10.1,2.5Hz,1H),7.02-6.90(m,2H),4.41(s,2H),4.19(t,J＝8.2Hz,2H),3.93(t,J＝7.2Hz,2H),3.82-3.63(m,3H),3.07(s,3H),2.34(s,6H)。MSm/z 574.1[M+H]+。
实施例18:HPK1激酶活性抑制实验
方法一：使用Mobility shift assay的方法测试化合物的HPK1激酶抑制活性。将化合物用100％DMSO溶解，配置成10mM储存液，配制1×Kinase buffer。将受试化合物按照梯度稀释，使用分液器Echo 550向目的板384孔板转移250nL的100倍终浓度的化合物。用1×Kinase buffer配制2.5倍终浓度的激酶溶液。在化合物孔和阳性对照孔分别加10μL的2.5倍终浓度的激酶溶液；在阴性对照孔中加10μL的1×Kinase buffer。1000rpm离心30秒，反应板振荡混匀后室温孵育10分钟。用1×Kinase buffer配制5/3倍终浓度的ATP和Kinasesubstrate的混合溶液。加入15μL的5/3倍终浓度的ATP和底物的混合溶液，起始反应。将384孔板1000rpm离心30秒，振荡混匀后室温孵育120分钟。加入30μL终止检测液停止激酶反应，1000rpm离心30秒，振荡混匀。用Caliper EZ Reader读取转化率。％Inhibition＝(Conversion％_max-Conversion％_sample)/(Conversion％_max-Conversion％_min)×100，其中：Conversion％_sample是样品的转化率读数；Conversion％_min：阴性对照孔均值，代表没有酶活孔的转化率读数；Conversion％_max：阳性对照孔均值，代表没有化合物抑制孔的转化率读数。以浓度的log值作为X轴，百分比抑制率为Y轴，采用分析软件GraphPad Prism 5的log(inhibitor)vs.response-Variable slope拟合量效曲线，从而得出各个化合物对酶活性的IC50值。公式如下：Y＝Bottom+(Top-Bottom)/(1+10^((LogIC50-X)*HillSlope))。代表性化合物的IC50数值见表1。
方法二：使用ADP-glo Kinase Assay的方法测试化合物的HPK1激酶抑制活性。将化合物用100％DMSO溶解，配置成10mM储存液。在稀释板中用DMSO对化合物进行稀释，将化合物50倍稀释到1×激酶反应缓冲液中，在振荡器上震荡20分钟。用1×的酶反应缓冲液配制准备2×HPK1激酶。向反应板中每孔加入2μL HPK1激酶。向每孔加入1μL在缓冲液中稀释好的化合物，化合物最终检测浓度为5nM和0.5nM。用封板膜封住板子1000rpm离心30秒，25℃孵育10分钟。用1×的酶反应缓冲液配制4×ATP混合液，向反应板中加入1μL的4×ATP混合液。用封板膜封住板子1000rpm离心30秒，25℃孵育反应60分钟。转移4μL ADP-Glo到384反应板中1000rpm，离心1min，25℃孵育40min。转移8μL Detection溶液到384反应板中1000rpm,离心1min，25℃孵育40min。使用BMG酶标仪读取RLU(Relative luminescenceunit)信号，信号强度用于表征激酶的活性程度。抑制率计算如下：化合物抑制率(％inhibition)＝100％-(化合物孔-阳性对照孔)/(阴性对照孔-阳性对照孔)*100％。代表性化合物的抑制率数值见表1。
Figure BDA0003616931970000391
Figure BDA0003616931970000401
在本发明提及的所有文献都在本申请中引用作为参考，就如同每一篇文献被单独引用作为参考那样。此外应理解，在阅读了本发明的上述讲授内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。

Claims (12)

1.一种如下式(I)所示结构的化合物，或其光学异构体，药学上可接受的盐，前药，氘代衍生物，水合物，溶剂合物：
Figure FDA0003616931960000011
式(I)中：
R选自芳基或杂芳基；所述的芳基或杂芳基任选地被一个或多个选自下组的基团取代：卤素、C1-4烷基、C1-4卤代烷基、羟基、C1-4烷氧基、C1-4卤代烷氧基、C2-4烯基、C2-4卤代烯基、C2-4炔基、C2-4卤代炔基、C3-8环烷基、3-至8-元杂环基、C3-8环烷基C1-4烷基、3-至8-元杂环基C1-4烷基、C3-8环烷基-O-、3-至8-元杂环基-O-、C3-8环烷基-S-、3-至8-元杂环基-S-、C3-8环烷基-NRa-、3-至8-元杂环基-NRa-、-(CRdRe)mNRbRc、或-CN；其中，Ra选自氢或C1-4烷基；Rb和Rc各自独立地选自氢、C1-4烷基、C3-6环烷基、3-至6-元杂环基；或Rb和Rc与其连接的氮原子一起形成3-至-8元杂环基，此杂环基含有1或2个N原子以及0或1个选自O、S的杂原子；各个Rd和Re各自独立地选自氢、C1-4烷基、卤素、C3-6环烷基；m选自0、1、2、或3；上面各个所述的环烷基或杂环基各自独立任选地被一个或多个选自下组的基团取代：卤素、C1-4烷基、C1-4卤代烷基、羟基、C1-4烷氧基、C1-4卤代烷氧基、C2-4烯基、C2-4炔基、CN、或＝M取代；其中M选自O或CRfRg；其中Rf和Rg各自独立地选自氢、氘、卤素、C1-4烷基、C3-6环烷基、或3-至8-元杂环基，所述烷基任选地被一个或多个选自下组的基团取代：卤素、ORh、SRh、CN、NRnRn、C3-6环烷基、或3-至8-元杂环基；上面所述取代在R上的炔基任选地被选自下组的基团取代：C1-4烷基、C3-6环烷基、4-至8-元杂环基、芳基、或杂芳基；所述取代在炔基上的烷基、环烷基、杂环基、芳基、或杂芳基任选地被一个或多个选自下组的基团取代：卤素、ORh、SRh、CN、NRnRn、C(O)Rt、S(O)2Rt、NRnC(O)Rt、NRnS(O)2Rt、C3-6环烷基、或4-至8-元杂环基；各个Rh各自独立地为氢、C1-4烷基、或C1-4卤代烷基；各个Rn各自独立地选自氢、或C1-4烷基；Rt选自C1-4烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、C3-8环烷基、4-至8-元杂环基、芳基、或杂芳基；
X选自化学键、-O-、-S-、-NRa-；Ra的定义如上所述；
Y选自N或CR1；
各个R1各自独立地选自氢、卤素、C1-4烷基、C3-6环烷基、C1-4烷氧基、C1-4卤代烷氧基、C2-4烯基、C2-4卤代烯基、C2-4炔基、CN；
R2选自芳基或杂芳基；其中杂芳基优选为5-至12-元杂芳基；所述的芳基或杂芳基任选地被一个或多个选自下组的基团取代：卤素、C1-4烷基、C1-4卤代烷基、羟基、C1-4烷氧基、C1-4卤代烷氧基、C2-4烯基、C2-4卤代烯基、C2-4炔基、C2-4卤代炔基、C3-6环烷基、3-至8-元杂环基、-(CRdRe)mNRbRc、或-CN；其中，Rb、Rc、Rd、Re、和m的定义如上所述；
R3和R4各自独立地选自氢、C1-4烷基、C3-6环烷基、C2-4炔基；或R3和R4与其相连接的同一个碳原子一起形成3-至6-元环状结构，此环状结构任选地地含有0、或1个选自N、O、S的杂原子；
或R选自式(IIa)或(IIb)：
Figure FDA0003616931960000021
式(IIa)或(IIb)中：
Figure FDA0003616931960000022
表示式(IIa)或(IIb)与式(I)中的X的连接位点；
“*”表示手性中心；
P和Q各自独立地选自N或CR5；
J和G各自独立地选自NRj、O、S或CRkRk；其中，Rj为氢、C1-4烷基、C1-4卤代烷基、C3-6环烷基、3-至8-元杂环基、芳基、杂芳基、C(O)Rt、S(O)2Rt；各个Rk各自独立地选自下组基团：氢、卤素、C1-4烷基、ORh、SRh、CN、-(CRdRe)mNRbRc；或两个Rk与其相连的碳原子共同形成羰基(C＝O)；或两个Rk与其连接的碳原子一起形成3-至6-元环状结构，此环状结构任选地含有0、或1个选自N、O、S的杂原子；其中，Rb、Rc、Rd、Re、Rh、Rt、和m的定义如上所述；
各个R5各自独立为氢、卤素、C1-4烷基、C1-4卤代烷基、C1-4烷氧基、C1-4卤代烷氧基、或CN；q为0、1、或2；
各个R6各自独立为氢、卤素、或C1-4烷基；当两个R6同时连接到同一个碳原子上时，这两个R6与其相连的碳原子可以任选共同形成羰基(C＝O)；n为0、1、2、或3；
其中，各个上述的烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基任选地且各自独立地被1-3个各自独立地选自下组的取代基取代：卤素、C1-4烷基、C1-4卤代烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、C3-8环烷基、3-至8-元杂环基、芳基、杂芳基、CN、NO2、ORh、SRh、NRhRh、C(O)Rt、C(O)ORh、C(O)NRhRh、NRhC(O)Rt、NRhS(O)2Rt、或S(O)2Rt，前提条件是所形成的化学结构是稳定的和有意义的；其中，Rt为C1-4烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、C3-8环烷基、4-至8-元杂环基、芳基、或杂芳基；各个Rh各自独立为氢、C1-4烷基、或C1-4卤代烷基；或两个Rh与其连接的氮原子一起形成3-至-8元杂环基，此杂环基含有1或2个N原子以及0或1个选自O、S的杂原子；
除非特别说明，上述的芳基为含有6-12个碳原子的芳香基团；杂芳基为5-至15-元(优选为5-至12-元)杂芳香基团；环状结构为饱和的或不饱和的、含杂原子或不含杂原子的环状基团。
2.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，式(I)为式(III)：
Figure FDA0003616931960000031
式(III)中：
Y选自N或CR1；R1选自氢、氘、氟；
R2选自下式：
Figure FDA0003616931960000032
Figure FDA0003616931960000033
表示R2与式(III)中其它结构单元的连接位点；
R3和R4各自独立地选自氢、C1-4烷基；
R7选自下式：
Figure FDA0003616931960000034
Figure FDA0003616931960000035
表示R7与式(III)中其它结构单元的连接位点；
R8选自下式：
Figure FDA0003616931960000036
Figure FDA0003616931960000037
表示R8与式(III)中其它结构单元的连接位点；
Figure FDA0003616931960000038
表示可为单键或双键；
“*”表示手性中心；
Rf选自氢、氘、氟、C1-4烷基、C3-6环烷基、或3-至8-元杂环基；所述烷基任选地被一个或多个选自下组的基团取代：卤素、ORh、SRh、CN、NRnRn、C3-6环烷基、或3-至8-元杂环基；
Rg选自氢、氘、氟、C1-4烷基、C1-4卤代烷基、C3-6环烷基；
Rq选自氢、卤素、C1-4烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、C1-4卤代烷基、ORh、SRh、CN、NRnRn、C3-6环烷基；
R9选自氢、C1-4烷基、C3-6环烷基、4-至8-元杂环基、芳基、或杂芳基；所述烷基、环烷基、杂环基、芳基、或杂芳基任选地被一个或多个选自下组的基团取代：卤素、ORh、SRh、CN、NRnRn、C(O)Rt、S(O)2Rt、NRnC(O)Rt、NRnS(O)2Rt、C3-6环烷基、或4-至8-元杂环基；各个Rh各自独立地为氢、C1-4烷基、或C1-4卤代烷基；各个Rn各自独立地选自氢、或C1-4烷基；Rt选自C1-4烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、C3-8环烷基、4-至8-元杂环基、芳基、或杂芳基；
Z选自化学键、-O-、-S-、-NRa-；Ra选自氢或C1-4烷基；
f选自0、1、或2；
g选自0、1、或2；
h选自0、1、2、3、或4。
3.如权利要求2所述的化合物，其特征在于，式(III)中R8选自下组基团：
Figure FDA0003616931960000041
Figure FDA0003616931960000042
表示式上述基团与式(III)中其它结构单元的连接位点；
Figure FDA0003616931960000043
表示可为单键或双键；
Rg、Rq、Z、f、g、h的定义如权利要求2所述。
4.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，式(I)为式(IVa)或(IVb)：
Figure FDA0003616931960000044
式(IVa)或(IVb)中：P选自N或CH；
R1、R2、R3、R4、R5、R6、Y、J、G、n、和q的定义如权利要求1所述。
5.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，式(I)为式(V)：
Figure FDA0003616931960000051
其中R、R2、R3、R4、和X的定义如权利要求1所述。
6.如权利要求1-2任一所述的化合物，其特征在于，式(I)为式(VIa)或(VIb)：
Figure FDA0003616931960000052
Figure FDA0003616931960000053
表示可为单键或双键；
Y选自N或CH；
R2选自下式：
Figure FDA0003616931960000054
Figure FDA0003616931960000055
表示R2与式(VIa)或(VIb)中其它结构单元的连接位点；
Rf、Rg、Rq、Z、f、g、h的定义如权利要求2所述。
7.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，式(I)为式(VII)：
Figure FDA0003616931960000056
式(VII)中：
Y选自N或CR1；
各个R1各自独立地选自氢、氘、氟；
R2选自下式：
Figure FDA0003616931960000061
Figure FDA0003616931960000062
表示R2与式(VII)中其它结构单元的连接位点；
R3和R4各自独立地选自氢、C1-4烷基；
R7选自下式：
Figure FDA0003616931960000063
Figure FDA0003616931960000064
表示R7与式(VII)中其它结构单元的连接位点；
R9选自氢、C1-4烷基、C3-6环烷基、4-至8-元杂环基、芳基、或杂芳基；所述烷基、环烷基、杂环基、芳基、或杂芳基任选地被一个或多个选自下组的基团取代：卤素、ORh、SRh、CN、NRnRn、C(O)Rt、S(O)2Rt、NRnC(O)Rt、NRnS(O)2Rt、C3-6环烷基、或4-至8-元杂环基；
各个Rh各自独立地选自氢、C1-4烷基、或C1-4卤代烷基；各个Rn各自独立地选自氢、或C1-4烷基；Rt选自C1-4烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、C3-8环烷基、4-至8-元杂环基、芳基、或杂芳基。
8.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，式(I)为式(VIII)：
Figure FDA0003616931960000065
式(VIII)中：
R1、R2、R3、R4、R9、Y的定义如权利要求7所述。
9.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，所述的式(I)化合物选自下组：
Figure FDA0003616931960000071
Figure FDA0003616931960000081
Figure FDA0003616931960000091
“*”表示手性中心；
Rg选自氢、氟、或甲基；Rg1选自氟或甲基。
10.一种药物组合物，其特征在于，包含权利要求1至9中任一项所述的化合物，或其光学异构体，药学上可接受的盐，前药，氘代衍生物，水合物，溶剂合物，以及药学上可接受的载体。
11.一种权利要求1至9中任一项的化合物，或其光学异构体，药学上可接受的盐，前药，氘代衍生物，水合物，溶剂合物的用途，其特征在于，用于制备治疗与HPK1活性或表达量相关的疾病，病症或病状的药物组合物。
12.如权利要求11所述的用途，其特征在于，所述疾病，病症或病状选自下组：乳腺癌、非小细胞肺癌、小细胞肺癌、肺腺癌、肺鳞癌、结肠癌、结直肠癌、甲状腺癌、胚胎性横纹肌肉瘤、皮肤颗粒细胞肿瘤、黑色素瘤、肝癌、直肠癌、膀胱癌、咽喉癌、胰腺癌、前列腺癌、神经胶质细胞瘤、卵巢癌、头颈部鳞癌、宫颈癌、食管癌、肾癌、皮肤癌、淋巴瘤、胃癌、间皮瘤、骨肉瘤、急性髓系白血病、骨髓纤维化、B细胞淋巴瘤、单核细胞白血病、脾大性红细胞增多、嗜酸性白细胞增多综合征、多发性骨髓瘤等各种实体瘤和血液瘤，以及艾滋病、孢疹病毒和流感病毒等各类DNA和RNA病毒感染。
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WO2023160577A1 (zh) * 2022-02-23 2023-08-31 正大天晴药业集团股份有限公司 含有吡咯啉酮的稠合双环化合物
WO2023208127A1 (zh) * 2022-04-27 2023-11-02 南京明德新药研发有限公司 杂芳基取代的双环化合物及其应用
WO2024078448A1 (zh) * 2022-10-10 2024-04-18 珠海宇繁生物科技有限责任公司 一种hpk1激酶抑制剂及其制备方法和应用

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