CN115486497B

CN115486497B - 一种反刍动物用酵母培养物及其制备方法与应用

Info

Publication number: CN115486497B
Application number: CN202211420925.2A
Authority: CN
Inventors: 李阳; 王海燕; 张广民; 彭翔; 李爽; 李烨青; 蔡辉益
Original assignee: Tianjin Bofeide Science & Technology Co ltd; Beijing Challenge Agricultural Science & Technology Co ltd
Current assignee: Tianjin Bofeide Science & Technology Co ltd; Beijing Challenge Agricultural Science & Technology Co ltd
Priority date: 2022-11-15
Filing date: 2022-11-15
Publication date: 2023-05-02
Anticipated expiration: 2042-11-15
Also published as: CN115486497A

Abstract

本发明涉及一种反刍动物用酵母培养物及其制备方法与应用。所述反刍动物用酵母培养物是将基料与菌酶发酵剂按比例混合发酵后经低温干燥获得；所述基料的各组分所占的重量百分比为：酵母发酵液20%‑50%，玉米12%‑20%、豆粕12%‑20%、麸皮8%‑24%、DDGS 2%‑8%；所述菌酶发酵剂所占的重量百分比为2%‑20%。本发明的反刍动物用酵母培养物产品具有丰富的纤维素酶、木聚糖酶组分，甘露聚糖和小肽含量较高等特点，可以通过促进饲料发酵和降解，提高产气量，同时能够调节瘤胃微生物的活性，提高了总挥发性脂肪酸的生成量，可显著提高泌乳奶牛采食量和产奶量，对肉牛的生长性能具有显著促进作用。

Description

一种反刍动物用酵母培养物及其制备方法与应用

技术领域

本发明涉及生物饲料技术领域，具体涉及一种反刍动物用酵母培养物及其制备方法与应用。

背景技术

酵母细胞是一种单细胞的微生物真菌，其蛋白质以及氨基酸含量较为丰富，是一种很好的蛋白质饲料来源。目前的饲料生产和畜牧养殖过程中，用于饲料中的酵母细胞通常是活性干酵母的形式，但活性干酵母本身其实并不含代谢产物，而且活性酵母在进入动物胃肠道内后易受到胃肠道内其它微生物的攻击而失活，难以在胃肠道中产生代谢产物，因此活性干酵母用于饲料中，对动物机体的营养与保健作用难以有效的发挥出来。加之活性酵母的稳定性差，易受外界环境条件如温度、湿度、水分、加工处理方法等的影响，活性期较短，因此活性酵母的推广利用受到了极大的限制。与活性干酵母不同，酵母培养物是由酵母菌在特定的培养基上经过深度发酵后形成的纯天然微生态制品，不仅有效的保留了酵母细胞的活性，而且其中的消化酶、维生素以及酵母代谢终产物的含量也有了极大的提高。酵母培养物可以作为反刍动物瘤胃微生物的营养物质，促进瘤胃内微生物的生长，优化菌群结构，对动物的生长发育、机体免疫等具有促进作用。

利用酵母培养物替代活性干酵母是饲料和畜牧养殖的发展趋势，但不同的酵母培养物对改善动物生产性能的效果差别较大。酵母菌在不同的培养环境下会产生不同的发酵产物，制备生产酵母培养物时所使用的发酵剂、发酵底物和发酵工艺控制参数对其产品中代谢产物的组成、浓度及其生物利用率的稳定性有着至关重要的影响，因此酵母培养物的质量受菌种、发酵生产工艺等因素的深刻影响。

针对反刍动物而言，由于瘤胃存在的微生态系统，对不同的酵母培养物产品反应更为明显，因此，针对瘤胃菌群开发更适宜的酵母培养物，能有效促进反刍动物的健康水平和生产效率，增加养殖者的饲养效益。

发明内容

为了解决以上问题，本发明提出一种反刍动物用酵母培养物及其制备方法与应用。

本发明提出一种反刍动物用酵母培养物，所述酵母培养物是将基料与菌酶发酵剂按比例混合发酵后经低温干燥获得；所述基料的各组分所占的重量百分比为：酵母发酵液20%-50%，玉米12%-20%、豆粕12%-20%、麸皮8%-24%、DDGS 2%-8%；所述菌酶发酵剂所占的重量百分比为2%-20%；

其中酵母发酵液的制备：将酵母菌菌株接种于液体培养基酵母浸出粉胨葡萄糖培养基中，30℃、200 r/min摇床培养12 h，得种子液；然后按照体积比10%的添加量，将种子液添加到麦芽汁培养基中进行液体有氧发酵，30℃、200 r/min摇床发酵48h，得到湿重300-400g/L的酵母发酵液；

所述菌酶发酵剂各组分的重量百分比为：粪肠球菌8%-20%，布氏乳杆菌TZ-LB-0178-20%、蛋白酶20%-25%、木聚糖酶40%-45%、纤维素酶5%-15%；其中所述各益生菌和酶制剂的活性分别为：粪肠球菌1×10¹¹CFU/g，布氏乳杆菌TZ-LB-017 2×10¹⁰CFU/g，蛋白酶5×10⁴U/g，木聚糖酶1×10⁴U/g、纤维素酶3×10³ U/g；

其中所述布氏乳杆菌（ Lactobacillus buchneri）TZ-LB-017，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏时间为2021年3月23日，保藏编号为CGMCC No.22054；

粪肠球菌（Enterococcus faecalis）,规格为：1×10¹¹CFU/g，由天津博菲德科技有限公司提供，于2019年5月21日在广东省微生物菌株保藏中心购买，保藏地址为：广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，保藏编号为GDMCC 1.612。

优选地，所述基料所占的重量百分比为：酵母发酵液30%、玉米18%、豆粕15%、麸皮20%、DDGS 5%；所述菌酶发酵剂所占的重量百分比为12%；所述菌酶发酵剂各组分的重量百分比为：粪肠球菌15％，布氏乳杆菌TZ-LB-017 15％、蛋白酶22%、木聚糖酶40%、纤维素酶8%。本发明提供的反刍动物用酵母培养物的制备方法为：将所述基料的各组分混合均匀后，加入所述菌酶发酵剂，混合后搅拌均匀，于30℃-40℃下密闭发酵48小时后，再于65℃料温下低温干燥40分钟。

本发明提供的反刍动物用酵母培养物应用在反刍动物日粮中。

本发明的有益效果如下：

1、本发明筛选出蛋白酶、木聚糖酶、纤维素酶作为酵母培养物中菌酶发酵剂的酶制剂组分，在确定了酶制剂组分的情况下，筛选出当粪肠球菌和布氏乳杆菌TZ-LB-017组合使用时，对酵母培养物中的甘露聚糖含量的提升起到了较好的协同作用，而当粪肠球菌与其他益生菌组合使用对甘露聚糖含量的增加却未表现出明显的协同作用。

2、本发明的菌酶发酵剂协同深度发酵制备的反刍动物用酵母培养物产品具有丰富的纤维素酶、木聚糖酶组分，甘露聚糖和小肽含量较高等特点。

3、本发明的酵母培养物可以通过促进饲料发酵和降解，提高产气量，同时能够调节瘤胃微生物的活性，提高了总挥发性脂肪酸的生成量，说明本发明的酵母培养物可能改变了瘤胃微生物对饲料不同营养成分的利用效率。

4、本发明的酵母培养物可显著提高泌乳奶牛采食量，这可能是由于本发明的酵母培养物中富含芳香物质和增味物质，可促进唾液分泌、提高瘤胃微生物活性，从而提高养分消化率并产生饥饿感，促进泌乳奶牛采食量和产奶量的增加。泌乳牛日粮中添加本发明的酵母培养物后，可以显著提升奶牛的泌乳能力；并且与常规的酵母培养物相比，本发明的酵母培养物对奶牛日产奶量提升效果更显著，停喂后产奶量下降，说明停喂本发明酵母培养物后产奶量明显下降，即酵母培养物的作用效果明显，因此，本发明的酵母培养物比常规酵母培养物更能提高奶牛养殖者的经济效益。

5、在肉牛饲养中，与常规培养物组相比，本发明的酵母培养物在日增重、干物质采食量和料重比方面均表现出明显优势，料重比显著降低，说明本发明酵母培养物对肉牛的生长性能具有显著促进作用。

具体实施方式

以下结合实施例对本发明作进一步说明。

实施例1、不同酶制剂对基础原料干物质消化率的影响

将酵母菌粉、玉米、豆粕、麸皮和DDGS，按照重量比酵母：玉米：豆粕：麸皮：DDGS=15:18:15:20:5的比例混合均匀作为基础原料；

酵母菌粉制备方法：将酵母菌菌株接种于液体培养基YPD（酵母浸出粉胨葡萄糖培养基）中，30℃、200 r/min摇床培养12 h，得种子液；然后按照体积比10%的添加量，将种子液添加到麦芽汁培养基中进行液体有氧发酵，30℃、200 r/min摇床发酵48h，得到湿重300-400g/L的酵母发酵液；离心，弃上清，将酵母菌体烘干；

利用单位动物仿生消化系统（SDS-3），以上述基料为底物，以干物质消化率（%）为评价指标，分别对不同添加量的蛋白酶、木聚糖酶、葡聚糖酶、纤维素酶、果胶酶、β-甘露聚糖酶采用仿生消化法进行体外评估。每个样品5个重复，每个重复1根消化管。试验结果如表1所示：

由表1可见，蛋白酶、木聚糖酶、葡聚糖酶、纤维素酶、果胶酶、β-甘露聚糖酶后，对基料干物质消化率具有不同效果，在本试验条件下，对基料干物质消化率降解效果依次为：蛋白酶＞木聚糖酶＞纤维素酶＞葡聚糖酶＞果胶酶＞β-甘露聚糖酶。

蛋白酶、木聚糖酶、纤维素酶对基料干物质消化率具有显著的提升作用，而葡聚糖酶、果胶酶和β-甘露聚糖酶对酵母培养物的消化率效果不明显。其中，对基料消化效果最好的酶制剂为蛋白酶，当添加量达到100U/g时，平均消化率达到13.01%，添加量达到200U/g时，平均消化率达到13.34%；其次为木聚糖酶，当添加量达到200U/g时，平均消化率达到11.28%，添加量达到200U/g时，平均消化率达到12.77%；第三为纤维素酶，当添加量达到32U/g时，平均消化率达到11.96%。

通过本实施例，确定了选择蛋白酶、木聚糖酶、纤维素酶作为本发明的酵母培养物中菌酶发酵剂的酶制剂组分。

实施例2、不同益生菌对酵母培养物质量的影响

甘露聚糖是酵母细胞壁的重要组成成分，又称为甘露糖蛋白，其位于酵母细胞壁的外层。植物性原料中的甘露聚糖是NSP中β-甘露聚糖，与酵母中的甘露聚糖从来源、结构、功效上都存在差异。酵母中的甘露聚糖含量的增加有利于动物体内有益菌的繁殖同时抑制有害菌的繁殖，其次，酵母中的甘露聚糖还具有吸附霉菌毒素以及提高细胞和体液免疫的作用。因此，酵母中的甘露聚糖含量是评价酵母培养物质量的重要参考依据。

本实施例通过对常用的几种益生菌，即：凝结芽孢杆菌、粪肠球菌、屎肠球菌、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌、布氏乳杆菌TZ-LB-017与蛋白酶、木聚糖酶、纤维素酶分别制备菌酶发酵剂，再与基料发酵制备酵母培养物，检测不同益生菌制备的酵母培养物的甘露聚糖含量，从而筛选出发酵质量最好的益生菌组合。

首先将30Kg酵母发酵液、18Kg玉米、15Kg豆粕、20Kg麸皮和5KgDDGS混合均匀作为基料；加入菌酶发酵剂12Kg，混合后搅拌均匀，30℃-40℃下密闭发酵48小时后，再于65℃料温低温干燥40分钟；

其中酵母发酵液的制备：将酵母菌菌株接种于液体培养基YPD（酵母浸出粉胨葡萄糖培养基）中，30℃、200 r/min摇床培养12 h，得种子液；然后按照体积比10%的添加量，将种子液添加到麦芽汁培养基中进行液体有氧发酵，30℃、200 r/min摇床发酵48h，得到湿重300-400g/L的酵母发酵液。

所述菌酶发酵剂组分包括：益生菌30%、蛋白酶22%、木聚糖酶40%、纤维素酶8%；其中，酶制剂的活性分别为：蛋白酶5×10⁴U/g，木聚糖酶1×10⁴U/g、纤维素酶3×10³ U/g；

所述益生菌分别为凝结芽孢杆菌、粪肠球菌、屎肠球菌、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌、布氏乳杆菌TZ-LB-017，活性单位和来源分别为：

凝结芽孢杆菌（ Bacillus coagulans），活性单位为1×10¹⁰CFU/g，来源于天津博菲德科技有限公司；

粪肠球菌（ Enterococcus faecalis）, 活性单位为1×10¹¹CFU/g，由天津博菲德科技有限公司提供，于2019年5月21日在广东省微生物菌株保藏中心购买，保藏地址为：广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，保藏编号为GDMCC 1.612 ；

屎肠球菌（ Enterococcus Faecium），活性单位为 2×10¹⁰CFU/g，来源于天津博菲德科技有限公司，于2016年10月31日在中国微生物菌种保藏管理委员会农业微生物中心购买，保藏地址为：北京市海淀区中关村南大街12号中国农科院，保藏编号为ACCC 19896；

枯草芽孢杆菌（ Bacillus subtilis）, 活性单位为1×10¹¹CFU/g，由天津博菲德科技有限公司提供，于2019年5月21日在广东省微生物菌株保藏中心购买，保藏地址为：广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，保藏编号为 GDMCC 1.372；

植物乳杆菌（ Lactobacillus plantarum），活性单位为1×10¹¹CFU/g，来源于天津博菲德科技有限公司，于2016年10月31日在中国微生物菌种保藏管理委员会农业微生物中心购买，保藏地址为：北京市海淀区中关村南大街12号中国农科院，保藏编号为ACCC19855；

布氏乳杆菌（ Lactobacillus buchneri）TZ-LB-017，活性单位为2×10¹⁰CFU/g，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏时间为2021年3月23日，保藏编号为CGMCC No.22054。

益生菌的组合方式如表2所示。

采用高效液相色谱技术检测各组制备好的酵母培养物中甘露聚糖含量，结果如表2所示。

从表2可以看出，采用单一益生菌时，与凝结芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、屎肠球菌、布氏乳杆菌、植物乳杆菌相比，粪肠球菌作为发酵菌株时，酵母培养物中的甘露聚糖含量有显著提高，且效果最优，甘露聚糖含量1.24%；其次是布氏乳杆菌TZ-LB-017作为发酵菌株时，对酵母培养物中的甘露聚糖含量提升较为显著，含量达到了1.01%。

采用两种益生菌组合时，当粪肠球菌与布氏乳杆菌TZ-LB-017协同使用时，对酵母培养物中的甘露聚糖含量的提升起到了较好的协同作用，含量达到了1.49%-1.80%，特别是当粪肠球菌与布氏乳杆菌TZ-LB-017在发酵剂中的添加比例为15%和15%时，效果最好。而当粪肠球菌与其他益生菌组合使用对甘露聚糖含量的增加却未表现出明显的协同作用。

因此，选择粪肠球菌与布氏乳杆菌TZ-LB-017组合作为本发明的菌酶发酵剂中的益生菌组分。

实施例3、酵母培养物主要营养成分分析

酵母培养物A：将酵母发酵液30Kg（制备方法同实施例2），玉米18Kg、豆粕15Kg、麸皮20Kg、DDGS 4Kg混合均匀后，加入菌酶发酵剂10Kg，混合后搅拌均匀，30℃-40℃下密闭发酵48小时后65℃料温低温干燥40分钟；所述菌酶发酵剂组分包括：粪肠球菌15%，布氏乳杆菌TZ-LB-017 15%、蛋白酶20%、木聚糖酶33%、纤维素酶15%；其中，益生菌的活性分别为：粪肠球菌1×10¹¹CFU/g，布氏乳杆菌TZ-LB-017 2×10¹⁰CFU/g；酶制剂的活性分别为：蛋白酶5×10⁴U/g，木聚糖酶1×10⁴U/g、纤维素酶3×10³ U/g。

酵母培养物B：将酵母发酵液40Kg（制备方法同实施例2），玉米12Kg、豆粕13Kg、麸皮22Kg、DDGS 2Kg混合均匀后，加入菌酶发酵剂11Kg，混合后搅拌均匀，30℃-40℃下密闭发酵48小时后65℃低温干燥40分钟；所述菌酶发酵剂组分包括：粪肠球菌15%，布氏乳杆菌TZ-LB-017 15%、蛋白酶20%、木聚糖酶43%、纤维素酶5%；其中，益生菌和酶制剂的活性同上；

酵母培养物C：将酵母发酵液50Kg（制备方法同实施例2），玉米14Kg、豆粕12Kg、麸皮12Kg、DDGS 2Kg混合均匀后，加入菌酶发酵剂10Kg，混合后搅拌均匀，30℃-40℃下密闭发酵48小时后65℃低温干燥40分钟；所述菌酶发酵剂组分包括：粪肠球菌16%，布氏乳杆菌TZ-LB-017 16%、蛋白酶22%、木聚糖酶38%、纤维素酶8%；其中，益生菌和酶制剂的活性同上；

按照上述制备方法制备反刍用酵母培养物A、B、C，并分别对酵母培养物A、B、C进行各主要营养及活性成分含量检测。其中，纤维素酶、木聚糖酶的酶活测定分别参照NY/T912-2020、GB/T 23874-2009；粗蛋白含量测定参照GB/T6432—2018；粗灰分含量测定参照GB/T6438—2007；

水分含量测定参照GB/T6435—86；小肽含量测定参照NY/T 3801-2020。

由表3可知，通过本发明的菌酶发酵剂协同深度发酵制备的反刍动物用酵母培养物产品，粗蛋白含量≥ 18%，粗灰分含量≤ 9%，水分含量≤ 10%，甘露聚糖含量≥ 2.2%，小肽含量≥ 18.3%，纤维素酶活性≥ 150U/g，木聚糖酶活性≥ 500U/g。本发明的酵母培养物产品具有纤维素酶和木聚糖酶含量丰富的、甘露聚糖和小肽含量较高的特点。

实施例4、酵母培养物的体外瘤胃发酵试验

制备酵母培养物：将酵母发酵液30Kg（制备方法同实施例2中），玉米18Kg、豆粕15Kg、麸皮20Kg、DDGS 5Kg混合均匀后，加入菌酶发酵剂14Kg，混合后搅拌均匀，30℃-40℃下密闭发酵48小时后65℃料温低温干燥40分钟；菌酶发酵剂组分包括：粪肠球菌15%，布氏乳杆菌TZ-LB-017 15%、蛋白酶20%、木聚糖酶43%、纤维素酶5%；其中，益生菌的活性分别为：粪肠球菌1×10¹¹CFU/g，布氏乳杆菌TZ-LB-017 2×10¹⁰CFU/g；酶制剂的活性分别为：蛋白酶5×10⁴U/g，木聚糖酶1×10⁴U/g、纤维素酶3×10³ U/g。

采集4 头体况相近、安装有永久瘤胃瘘管的健康荷斯坦奶牛瘤胃液，经4 层纱布过滤后，等体积混匀，与缓冲液（pH=6.85）按1：2的比例配制成人工瘤胃培养液。体外发酵装置采用“AGRS-Ⅲ型微生物发酵微量产气全自动记录装置与软件系统”。对照组以市售高产奶牛基础日粮为培养底物，试验组在基础日粮中添加1%的酵母培养物，每组设6个重复。每个重复各称取400 mg发酵底物置于140 mL 厌氧发酵瓶中，各发酵瓶加入75 mL 人工瘤胃液。向发酵瓶通入氮气3~5 s 以排除空气，立即盖上胶塞，并旋紧亨氏旋盖。将发酵瓶逐一与产气装置的相应气路通道连接，置于39℃条件下连续培养48h后，收集样品，测定产气量和挥发性脂肪酸及铵态氮含量，结果见表4。

由表4可知，试验组的48 h累积产气量显著增加，总挥发性脂肪酸和乙酸/丙酸比值，显著高于对照组，并能显著降低消化液中氨态氮的浓度。瘤胃产气量与饲粮可发酵成分的组成密切相关，试验组的48 h累积产气量显著增加说明本发明的酵母培养物可能改变了瘤胃微生物对饲料不同营养成分的利用效率。本试验结果表明，本发明的酵母培养物可以通过促进饲料发酵和降解，提高产气量，同时能够调节瘤胃微生物的活性，提高了总挥发性脂肪酸的生成量。

实施例5、酵母培养物在泌乳牛饲养上的应用效果

动物试验设计：

采用单因素随机区组设计，选用体况良好、日均产奶量（31.15±1.08Kg）、胎次（1）和泌乳期（101.67±13.99天）相近的荷斯坦奶牛300头，随机分为2组，每组150头。对照组饲喂泌乳牛基础日粮（见表5），试验1组（正对照组）在基础日粮中添加常规酵母培养物50g/头/d，试验2组在基础日粮中添加本发明酵母培养物50 g/头/d。整个试验期60天，其中预试期10d，正试期50天。其中，采用添加了酵母培养物的日粮饲喂40天后，停用酵母培养物，再采用基础日粮饲喂10天。正式试验的1-40天分别记录或检测奶牛的采食量、产奶量和乳品质，停喂酵母培养物后的10天记录奶牛的产奶量数据（见表6和表7）。

其中：本发明酵母培养物的制备方法同实施例4；

常规酵母培养物的制备方法：将酵母菌菌株接种于液体培养基YPD（酵母浸出粉胨葡萄糖培养基）中，30℃、200 r/min摇床培养12 h，得种子液，然后按照体积比10%的添加量，将种子液添加到麦芽汁培养基中进行液体有氧发酵，30℃、200 r/min摇床发酵24 h。按10%的添加量将发酵液添加到由酵母、麸皮、面粉和豆粕组成的固体培养基中混匀，其中酵母、麸皮、面粉和豆粕的比例为1:1:1:1。密封瓶口，放于30℃静置发酵48 h，散于瓷盘中，放于室温，自然风干。

注：每千克预混料含有维生素 A 240000-450000 IU，维生素 D3 70000-130000IU，维生素E 1100 -2200 mg，Fe≥270 mg，Cu≥370 mg，Zn≥1900 mg，Mn≥1800 mg，I≥16mg，Co≥17 mg，Se≥11 mg。

由表6可以看出，当日粮中添加本发明的酵母培养物时，饲喂40天后，与对照组相比，试验2组即本发明酵母培养物组产奶量显著提高3.21升/头/天，比试验1组即常规酵母培养物的产奶量显著提高2.16升/头/天；当日粮中停止添加本发明的酵母培养物10d后，试验2组产奶量比对照组高0.53升/头/天，比试验1组提高0.13升/头/天；结果表明，日粮中添加本发明的酵母培养物后，可以显著提升奶牛的泌乳能力；并且与常规的酵母培养物相比，本发明的酵母培养物对奶牛日产奶量提升效果更显著，停喂后产奶量下降，说明停喂本发明酵母培养物后产奶量明显下降，即酵母培养物的作用效果明显。因此，本发明的酵母培养物比常规酵母培养物更能提高奶牛养殖者的经济效益。

表7的试验结果提示，与对照组和常规酵母培养物组相比，日粮中添加本发明酵母培养物，对乳脂率、乳蛋白率、体细胞数影响不显著。但是，与对照组相比，本发明的酵母培养物组的奶牛干物质采食量增加0.91kg；与常规酵母培养物组相比，本发明的酵母培养物组的奶牛干物质采食量增加0.16kg，说明本发明的酵母培养物可显著提高泌乳奶牛采食量，这可能是由于本发明的酵母培养物中富含芳香物质和增味物质，可促进唾液分泌、提高瘤胃微生物活性，从而提高养分消化率并产生饥饿感，促进泌乳奶牛采食量和产奶量的增加。

实施例6、酵母培养物在肉牛上的应用效果

试验采用单因素随机区组设计，选用体况良好、平均体重为(439.15±16.21 kg)的西门塔尔杂交阉牛120 头，随机分为2组，每组60头，对照组饲喂育肥牛基础日粮，试验组在基础日粮中分别添加本发明的酵母培养物（本发明酵母培养物制备方法同实施例4，常规酵母培养物同实施例5）60g/头/天。试验牛全部采用拴系饲养，试验预试期10 d，期间进行编号、驱虫、健胃、注射口蹄疫疫苗，每天06: 00和16: 00分2次饲喂，饲喂顺序为先精后粗，喂后自由饮水。精料的饲喂量为肉牛体重的1%，每20d 根据体重调整1次饲喂量；粗料为稻草和全株玉米青贮。正试期40d，每天称量试验牛只和日粮重量，计算试验牛只的平均日增重和干物质采食量，计算料重比。基础日粮按《肉牛营养需要和饲养标准》配制（见表8）。

注：每千克预混料含有维生素A 8000 IU，维生素 D3 1000 IU，维生素E 60 IU，Fe≥50 mg，Cu 10 mg，Zn 60 mg，Mn 40 mg，I 0.5 mg，Co 0.2 mg，Se 0.2 mg。

由表9中的结果可以看出，当日粮中本发明的酵母培养物添加量为60 g/头/d时，与对照组相比，肉牛的干物质采食量由8.76 kg/d提高至9.46 kg/d，提高了8%；平均日增重由0.85kg提高至0.99kg，提高了16%；料重比降低了0.75；与常规培养物组相比，本发明酵母培养物在日增重、干物质采食量和料重比方面均表现出明显优势，料重比显著降低了0.52。因此，本发明酵母培养物对肉牛的生长性能具有显著促进作用。

对于本领域技术人员而言，显然本发明不限于上述示范性实施例的细节，而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下，能够以其他的具体形式实现本发明。因此，无论从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。

此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。

Claims

1.一种反刍动物用酵母培养物，其特征在于，所述酵母培养物是将基料与菌酶发酵剂按比例混合发酵后经低温干燥获得；所述基料的各组分占所述酵母培养物总重量的重量百分比为：酵母发酵液20%-50%，玉米12%-20%、豆粕12%-20%、麸皮8%-24%、DDGS 2%-8%；所述菌酶发酵剂占所述酵母培养物总重量的重量百分比为2%-20%；

所述酵母发酵液的制备方法为：将酵母菌菌株接种于液体培养基酵母浸出粉胨葡萄糖培养基中，30℃、200 r/min摇床培养12 h，得种子液；然后按照体积比10%的添加量，将种子液添加到麦芽汁培养基中进行液体有氧发酵，30℃、200 r/min摇床发酵48h，得到湿重300-400g/L的酵母发酵液；

所述菌酶发酵剂按重量百分比计由以下组分组成：粪肠球菌8%-20%，布氏乳杆菌TZ-LB-017 8-20%、蛋白酶20%-25%、木聚糖酶40%-45%、纤维素酶5%-15%；其中所述各益生菌和酶制剂的活性分别为：粪肠球菌1×10¹¹CFU/g，布氏乳杆菌TZ-LB-017 2×10¹⁰CFU/g，蛋白酶5×10⁴U/g，木聚糖酶1×10⁴U/g、纤维素酶3×10³ U/g；

其中所述粪肠球菌（Enterococcus faecalis）,规格为：1×10¹¹CFU/g，购买自广东省微生物菌株保藏中心，保藏编号为GDMCC 1.612；

所述布氏乳杆菌（Lactobacillus buchneri）TZ-LB-017，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏时间为2021年3月23日，保藏编号为CGMCC No.22054。

2.根据权利要求1所述反刍动物用酵母培养物，其特征在于，所述基料占所述酵母培养物总重量的重量百分比为：酵母发酵液30%、玉米18%、豆粕15%、麸皮20%、DDGS 5%；所述菌酶发酵剂占所述酵母培养物总重量的重量百分比为12%；

所述菌酶发酵剂按重量百分比计由以下组分组成：粪肠球菌15％，布氏乳杆菌TZ-LB-017 15％、蛋白酶22%、木聚糖酶40%、纤维素酶8%。

3.根据权利要求1所述反刍动物用酵母培养物，其特征在于，所述酵母培养物的制备方法为：将所述基料的各组分混合均匀后，加入所述菌酶发酵剂，混合后搅拌均匀，于30℃-40℃下密闭发酵48小时后，再于65℃料温下低温干燥40分钟。

4.权利要求1-3任一所述反刍动物用酵母培养物在制备反刍动物日粮中的应用。