CN115463213A - P53通路抑制剂在拮抗毛发衰老与白化中的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及P53通路抑制剂在拮抗毛发衰老与白化中的应用。具体地，本发明提供一种P53通路抑制剂的用途，用于制备组合物或制剂，所述的组合物或制剂用于(i)预防或治疗毛发衰老；和/或预防或治疗毛发白化。

Description

P53通路抑制剂在拮抗毛发衰老与白化中的应用
技术领域
本发明涉及分子医学领域，具体地涉及P53通路抑制剂在拮抗毛发衰老与白化中的应用。
背景技术
毛发白化是人类衰老最显著的外观特征之一。随着社会老龄化程度不断提高，市场上对拮抗毛发白化的护发产品有巨大的需求。但目前我们对人类毛发白化的分子机制少有了解，也缺乏可靠的靶向治疗途径。
毛囊的主体结构包括毛发均由属于皮肤上皮组织的毛囊干细胞及其子代细胞构成。由毛囊干细胞衍生的过渡扩展细胞(TAC)集中在毛发根部的毛球部中。这些TAC细胞通过高速增殖并不断分化来产生毛发并推动其向上生长。黑色素细胞是毛发颜色的来源但并不属于皮肤上皮细胞。黑色素干细胞夹杂于毛囊干细胞之间，而其衍生产生的成熟黑色素细胞夹杂于毛球部的TAC细胞之间。这些成熟黑色素细胞生产黑色素并将其注入分化过程中的TAC细胞中，进而实现对毛发的上色。因此，毛球部是毛囊中负责毛发生长和染色的核心部分。
黑色素细胞枯竭是毛发白化的一个主要原因。但这种枯竭的生物学原理并不完全清楚。研究发现虽然黑色素细胞和黑色素干细胞并不属于皮肤上皮组织，但它们的存活和功能高度依赖于毛囊中的皮肤上皮细胞。例如，毛囊干细胞为黑色素干细胞的存活提供了必须的微环境，同时还可以通过分泌性因子来指导黑色素干细胞的分化。而毛囊干细胞的功能损害可直接导致毛发白化。这些结果说明毛囊中皮肤上皮细胞的功能紊乱可能是毛发白化的重要起源。在人类中，白发的生长速率和发质往往与黑发有显著差异，提示人类毛发的衰老白化不仅是一个褪色现象，同时也存在毛囊皮肤上皮细胞的功能紊乱。但这种功能紊乱的具体机制目前尚不清楚。
因此，本领域需要开发一种有效防止或延缓毛发衰老和毛发白化的物质。
发明内容
本发明的目在于提供这一种P53通路抑制剂在有效预防或治疗毛发衰老和毛白化中的应用。
本发明第一方面，提供一种P53通路抑制剂的用途，用于制备组合物或制剂，所述的组合物或制剂用于(i)预防或治疗毛发衰老；和/或(ii)预防或治疗毛发白化。
在另一优选例中，所述的组合物或制剂用于选自下组的一种或多种应用：
(a)降低毛发白化比率或减少白化毛发的产生；和
(b)改善或提高黑色素细胞数量。
在另一优选例中，所述的黑色素细胞包括毛囊的的黑色素细胞。
在另一优选例中，所述的黑色素细胞包括毛囊的毛球部中的黑色素细胞。
在另一优选例中，所述的毛发衰老具有选自下组的一个或多个指标：
(A)毛发白化；和
(B)毛发再生能力下降。
在另一优选例中，所述的毛发衰老还包括：一种或多种代表性的衰老细胞标记物或标志的增多，和/或一种多种代表性的年轻细胞标记物或标志的减少。
在另一优选例中，所述的代表性的衰老细胞标记物或标志包括(但并不限于)：毛囊的毛球部中的P53靶基因P21。
在另一优选例中，所述的代表性的年轻细胞标记物或标志包括(但并不限于)：毛囊的毛球部中的黑色素细胞标记基因TRP1。
在另一优选例中，所述的毛发衰老和/或毛发白化包括由选自下组的诱导因素诱导的：电离辐射、γ射线辐照、x射线辐照、紫外线、放射治疗、过度暴晒、化学诱变剂、年龄、遗传性白发，或其组合。
在另一优选例中，所述的P53通路抑制剂选自下组：小分子化合物抑制剂、基因抑制剂、结合蛋白抑制剂，或其组合。
在另一优选例中，所述的抑制剂包括特异性抑制剂或非特异性抑制剂。
在另一优选例中，所述的小分子化合物抑制剂选自下组：Pifithrin-α(CAS：63208-82-2)、Cyclic Pifithrin-αhydrobromide(CAS：511296-88-1)、Pifithrin-μ(CAS:64984-31-2)，或其组合。
在另一优选例中，所述的基因抑制剂选自下组：siRNA、shRNA、miRNA、sgRNA。
所述的结合蛋白抑制剂包括MDM2或多肽类P53抑制剂。
在另一优选例中，所述的组合物包括药物组合物、日用化学品组合物。
在另一优选例中，所述的组合物的剂型为外用制剂、口服制剂或注射制剂。
在另一优选例中，所述的组合物的剂型为固体制剂、液体制剂或半固体制剂。
在另一优选例中，所述的组合物的剂型为皮肤涂抹用制剂。
在另一优选例中，所述的组合物的剂型为霜剂。
在另一优选例中，所述的日用化学品组合物包括洗发水、洗发乳、沐浴露、护肤品、护发产品、和/或化妆品。
在另一优选例中，所述的组合物或制剂还包括药学上、日用化学品上可接受的载体。
本发明第二方面提供一种体外筛选用于(i)预防或治疗毛发衰老；和/或(ii)预防或治疗毛发白化潜在物质的方法，包括步骤：
(1)提供测试组和对照组，其中，在测试组中向检测体系中加入测试物，在对照组中向检测体系中加入对照物,所述对照物包括阴性对照物；
(2)分别检测测试组和对照组中P53的表达水平；如果阴性组相比，测试组的P53的表达水平显著降低，则表示所述测试物是(i)预防或治疗毛发衰老；和/或(ii)预防或治疗毛发白的潜在物质。
在另一优选例中，除了添加的测试物和对照物不同之外，所述的测试组和对照组的实验条件是相同的或基本相同的。
在另一优选例中，所述的步骤(1)之后还包括步骤：
(1.1)分别将测试组和对照组的检测体系暴露于含有衰老诱导因素环境下，从而诱导毛发衰老和/或白化。
在另一优选例中，所述的诱导因素选自下组：电离辐射、γ射线辐照、x射线辐照、紫外线、放射治疗、过度暴晒、化学诱变剂，或其组合。
在另一优选例中，所述的检测体系为动物体系。
在另一优选例中，所述的动物体系包括动物皮肤毛囊的毛球部。
在另一优选例中，所述方法还包括步骤：
(3)对潜在物质应用于衰老和白化的毛发，检测潜在物质的(i)预防或治疗毛发衰老；和/或(ii)预防或治疗毛发白化效果。
在另一优选例中，所述步骤(2)中，所述的显著降低是指与阴性组的P53的表达水平(A0)相比，测试组的P53的表达水平(A1)显著降低，A1/A0≤0.8，较佳地A1/A0≤0.7，更佳地A1/A0≤0.5，更佳地A1/A0≤0.3，更佳地A1/A0≤0.1，更佳地A1/A0≤0.05。
本发明第三方面，提供一种P53或及其检测试剂的用途，用于制备用于评估毛发衰老和/或毛发白化检测试剂或检测试剂盒。
在另一优选例中，所述的试剂盒还含有说明书，所述的说明书中记载了本发明第五方面中所述的方法。
本发明第四方面，提供一种诊断/检测毛发衰老和/或毛发白化的方法，包括步骤：
(a)提供一待测样本，所述待测样本为皮肤毛囊的毛球部；
(b)检测所述待测样本中P53的表达水平L1，并与参考值L0进行相比，如果待测样本的P53的表达水平显著高于参考值，则提示所述待测样本的毛发衰老和/或毛发白化程度高，其中所述参考值L0是正常衰老的毛发中P53的表达水平。
在另一优选例中，所述的“显著高于”是指：与阴性对照样本相比，相应P53的表达水平的提高幅度(即(L1-L0)/L0的比值)≥10％，较佳地≥20％，较佳地≥50％，较佳地≥100％，更佳地≥150％，最佳地≥200％。
本发明第五方面，提供一种(i)预防或治疗毛发衰老；和/或预防或治疗毛发白化的方法，其特征在于，向需要的对象施用P53通路抑制剂，从而i)预防或治疗毛发衰老；和/或预防或治疗毛发白化。
在另一优选例中，所述需要的对象为哺乳动物，较佳地，为人或非人哺乳动物(例如小鼠、或大鼠)。
应理解，在本发明范围内中，本发明的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅，在此不再一一累述。
附图说明
图1为P53通路抑制剂对毛发衰老和毛发白化的治疗效果，其中，图1A-E如下：
1A.从中年年花白头发的健康女性头皮样本中分离得到的黑发与白发毛囊的代表性解剖镜照片。比例尺：500μm。
1B.左图：同一个体人类黑发和白发毛囊样本毛球部的代表性切片免疫荧光染色照片。比例尺：100μm。蓝色为DAPI染色。箭头为白发毛囊中的P21阳性细胞。右图：对左图中的P21阳性或TRP1阳性细胞比例进行统计。*：P<0.05,双尾t-test，n＝5每组。
1C.局部电离辐照诱导的小鼠皮肤局部早衰模型(LIR，localized Irradiation)的实验流程示意图。黄色为辐照区域。小鼠在7周龄(P50)左右小鼠接受局部辐照并进行PFTα处理(+PFTα)或溶剂(+Sol)涂抹处理。辐照五天后进行蜡脱毛(Wax)以诱导毛发再生。之后4周左右观测其毛发再生完成后的皮肤表型。noRad：未辐照区；Rad：辐照区；+PFTα:PFTα处理；+Sol:溶剂处理，下同。
1D.左图：上述PFTα或Sol(溶剂)处理的局部皮肤早衰小鼠的背皮毛发代表性照片，拍摄时间为蜡去毛四周后。LIR+Sol局部辐照小鼠涂抹溶剂组，LIR+PFTα局部辐照小鼠涂抹PFTα组。比例尺1cm。右图：对左图中小鼠的白色毛发比例进行统计。*：P<0.05,n＝5,双尾t-test。
1E.左图：上述PFTα或Sol处理的局部皮肤早衰小鼠皮肤的毛囊毛球部的代表性切片免疫荧光照片。蓝色为DAPI。下方为毛囊底部。箭头为PFTα处理的辐照皮肤中保留的c-KIT阳性黑色素细胞，采样时间为Wax后2周，比例尺50μm。右图：对左图所代表小鼠毛囊毛球c-KIT阳性黑色素细胞比例的相对变化倍数进行统计。*：P<0.05,双尾t-test，n＝5每组。
具体实施方式
本发明人经过广泛而深入的研究，通过大量筛选，首次发毛发衰老和白化与毛囊毛球部的P53通路激活密切相关，并首次证实了P53通路抑制剂能够显著拮抗毛发衰老和白化。抑制P53通路成为防治毛发衰老与白化的有效新技术，能够被用于开发拮抗毛发衰老与白化的新型护发产品，具有重大的实用价值。在此基础上，发明人完成了本发明。
术语
除非另有定义，否则本文中所用的所有技术和科学术语的含义与本发明所属领域普通技术人员普遍理解的含义相同。
如本文所用，术语“包括”、“包含”与“含有”可互换使用，不仅包括开放式定义，还包括半封闭式、和封闭式定义。换言之，所述术语包括了“由……构成”、“基本上由……构成”。
在本发明中，术语“预防”表示预防疾病和/或它的附随症状的发作或者保护对象免于获得疾病的方法。本文中使用的"预防"还包括延迟疾病和/或它的附随症状的发作和降低对象的得病的风险。
本发明所述的“治疗”包括延缓和终止疾病的进展，或消除疾病，并不需要100％抑制、消灭和逆转。在一些实施方案中，与不存在本发明所述P53通路抑制剂时观察到的水平相比，本发明所述P53通路抑制剂对毛发衰老和毛发白化减轻、抑制和/或逆转了例如至少约10％、至少约30％、至少约50％、或至少约80％。
P53通路
P53(又名TP53，NCBI Entrez Gene:7157)是一个被广泛研究的具有抑癌作用的转录因子。其激活一般认为具有抑制细胞生长和促进细胞凋亡的作用。P53的一个主要靶基因是P21(又名CDKN1A)，它的表达上调是反映P53通路激活的一个经典标志。
P53通路抑制剂
在本发明中，P53通路抑制剂对P53通路具有抑制作用，该抑制作用可以是特异性或非特异性的。
本发明所述的P53通路抑制剂并没有特别的限制，只要对P53通路具有抑制作用即可。
代表性地，所述的P53通路抑制剂选自下组：小分子化合物抑制剂、基因抑制剂、结合蛋白抑制剂，或其组合。
优选地，所述的小分子化合物抑制剂选自下组：Pifithrin-α(CAS：63208-82-2)、Cyclic Pifithrin-αhydrobromide(CAS：511296-88-1)、Pifithrin-μ(CAS:64984-31-2)，或其组合。
优选地，所述的基因抑制剂选自下组：siRNA、shRNA、miRNA、sgRNA，或其组合。
优选地，所述的结合蛋白抑制剂包括MDM2或多肽类P53抑制剂。
组合物或制剂
本发明提供了一种组合物或制剂，本发明所述的组合物包括药物组合物、日用化学品组合物。
本发明所述的组合物或制剂还包括药学上、日用化学品上可接受的载体。
如本文所用，术语“药学上、日用化学品上可接受的”的成分是适用于人和/或哺乳动物而无过度不良副反应(如毒性、刺激和变态反应)的，即具有合理的效益/风险比的物质。术语“药学上、日用化学品上可接受的载体”指用于治疗剂给药的载体，包括各种赋形剂和稀释剂。
术语“药学上、日用化学品上可接受的载体”指用于活性成分的载体，包括：水、盐水、脂质体、脂质、蛋白、蛋白-抗体缀合物、肽类物质、纤维素、纳米凝胶、纤维素及其衍生物(如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素钠、纤维素乙酸酯等)、明胶、滑石、固体润滑剂(如硬脂酸、硬脂酸镁)、硫酸钙、植物油(如豆油、芝麻油、花生油、橄榄油等)、多元醇(如丙二醇、甘油、甘露醇、山梨醇等)、乳化剂
Figure BDA0003113659910000071
润湿剂(如十二烷基硫酸钠)、着色剂、调味剂、稳定剂、抗氧化剂、防腐剂、无热原水或其组合。载体的选择应与给药方式相匹配，这些都是本领域的普通技术人员所熟知的。
本发明的药物组合物含有安全有效量的P53通路抑制剂，P53通路抑制剂的安全有效量可随给药的模式和待治疗的疾病的严重程度等而变化。优选的有效量的选择可以由本领域普通技术人员根据各种因素来确定(例如通过临床试验)。所述的因素包括但不限于：所述的活性成分的药代动力学参数例如生物利用率、代谢、半衰期等；患者所要治疗的疾病的严重程度、患者的体重、患者的免疫状况、给药的途径等。通常，当本发明的活性成分每天以约0.00001mg-50mg/kg动物体重(较佳的0.0001mg-10mg/kg动物体重)的剂量给予，能得到令人满意的效果。例如，由治疗状况的迫切要求，可每天给予若干次分开的剂量，或将剂量按比例地减少。
在本发明中，另一类组合物或产品是含有本发明P53通路抑制剂的化妆品或日化用品。
在本发明中，所述的组合物或制剂还优选地含有透皮促进剂。
在另一优选例中，所述的组合物或制剂的剂型为外用(topical)剂型。
在本发明中，所述的化妆品组合物或制剂的剂型包括(但并不限于)：固体制剂、液体制剂、凝胶制剂、半固体制剂。一些优选的剂型膏剂、乳霜、贴剂、涂剂、喷剂、微针剂、溶液剂、洗发等。
在本发明中，代表性的产品(或日化用品)包括(但并不限于)：洗发水、沐浴露、护肤品、护发产品、面膜。
在另一优选例中，所述的组合物或制剂的施用方式选自下组：局部施用、透皮施用和经皮施用。
用途
本发明提供一种P53通路抑制剂的用途，用于制备组合物或制剂，所述的组合物或制剂用于(i)预防或治疗毛发衰老；和/或预防或治疗毛发白化。
在本发明一个优选例中，所述的组合物或制剂用于选自下组的一种或多种应用：
(a)降低毛发白化比率或减少白化毛发的产生；
(b)提高黑色素细胞数量；
在本发明一个优选例中，所述的黑色素细胞包括毛囊的毛球部中的黑色素细胞。
在本发明一个优选例中，所述的毛发衰老具有选自下组的一个或多个指标：
(A)毛发白化；和
(B)毛发再生能力下降.
在本发明一个优选例中，所述的毛发衰老还包括：一种或多种代表性的衰老细胞标记物或标志的增多，和/或一种多种代表性的年轻细胞标记物或标志的减少。
代表性地，所述的代表性的衰老细胞标记物或标志包括(但并不限于)：毛囊的毛球部中的P53靶基因P21。
代表性地，所述的代表性的年轻细胞标记物或标志包括(但并不限于)：毛囊的毛球部中的黑色素细胞标记基因TRP1。
在本发明一个优选例中，所述的毛发衰老和/或毛发白化包括由选自下组的诱导因素诱导的：电离辐射、γ射线辐照、x射线辐照、紫外线、放射治疗、过度暴晒、化学诱变剂，或其组合。
本发明的主要优点包括
1.本发明首次意外的发现P53通路抑制剂能够用于预防或治疗毛发衰老和白化，抑制P53通路成为防治毛发衰老与白化的有效新技术，能够被用于开发拮抗毛发衰老与白化的新型护发产品，具有重大的实用价值。
2.P53通路抑制剂可直接作用于皮肤，因此施用简便，且安全性高。
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则百分比和份数按重量计算。
实施例1
1.材料和方法
1)临床样本收集与处理
收集的人类头皮毛囊样本取自经书面知情同意的医学美容手术中的废弃物。该程序经上海市第九人民医院伦理审查委员会和中国科学院上海营养与健康研究所伦理委员会批准，并符合建立于1975年、修订于1983年的赫尔辛基宣言。头皮样本于4mg/mlDispaseII(Sigma Aldrich)中消化过夜并于第二天用镊子将毛囊拔出。
2)动物模型
使用7周龄C57BL/6野生型小鼠作为实验小鼠来制作局部辐照诱导皮肤早衰的动物模型。所有C57BL/6野生型小鼠购买自上海斯莱克实验动物有限责任公司。
3)x射线局部辐照
x射线辐照在中国科学院上海营养与健康研究所按标准实验步骤操作。进行局部辐照时，将麻醉后的小鼠置于铅盒中，铅盒垂直于放射源，铅盒正面留有直径3厘米的小孔，将小鼠上半部置于小孔中，铅板覆盖小鼠头部和下半身，用胶带适当固定小鼠四肢后进行辐照。辐照剂量10Gy。所有辐照实验均利用7周龄C57BL/6野生型小鼠。
4)PFTα药物处理
PFTα(CAS:63208-82-2)，购买自Selleck(S2929)化学式C16H19BrN2OS。在小鼠实验中，将Trametinib粉末溶解于DMSO中，制成20mg/ml储备液，口服时按照1：50稀释比稀释于含有50％乙醇、30％水和20％丙二醇的涂抹配方中，每只小鼠按照2μg/cm2剂量涂抹，每三天一次，共计五次。对照组涂抹同等溶剂。
5)蜡去毛激活小鼠毛发再生
用蜡去毛的方法完全移除现有毛发，以此激活毛发再生，并追踪拍照观测其再生过程。毛发再生过程中分别用相机(Canon)拍照记录。
6)毛发颜色统计
用镊子将小鼠辐照区与未辐照区中心位置5mm x 5mm区域内的毛发拔下来，置于载玻片上并在体式显微镜下(Nikon,SMZ745T)拍照计算白色毛发所占百分比。
7)切片免疫荧光分析
首先将切片置于4％PFA中固定10分钟，再将切片置于封闭液(2.5％normaldonkey serum，2.5％normal goat serum，1％BSA，0.3％Triton X-100)中进行封闭/通透。然后将一抗稀释于封闭液中、滴加到切片上并进行4℃过夜孵育。第二天进行偶联荧光基团的二抗孵育，并用Fluoromount-G mounting media(Invitrogen)封片剂(含DAPI)封片。切片照片于Zeiss Axio Imager A2(Zeiss)显微镜下拍摄。免疫荧光染色中的抗体稀释比例：P21(rabbit，1:1000，CST),TRP1(mouse，1:500，Santa Cruz),KRT14(rabbit，1:1000，本实验室)；c-Kit(rat，1:200，Biolegend)，AE15(mouse,Santa Cruz,1:500)。
8)统计分析
用Excel软件进行双尾t检验检测两组数据的显著性。本研究中的统计图均以平均值(Average)±标准误(Standard Error)表示。P值以95％或99％的置信区间计算。P<0.05认为有显著的统计学差异。*：p<0.05。
2.实验结果
收集了参加整形外科手术的头发花白的健康中老年女性的废弃头皮样本。并从中分别提取了黑发和白发毛囊(图1A)。在显微镜下，可见这些来自同一人的白发和黑发毛囊长度相似，但毛球部形态有肉眼可见的差异(图1A)。毛球部是毛发生长和染色的核心区域，对它们的毛球部进行了切片免疫荧光染色。发现白发毛囊的毛球部中人黑色素细胞的标记基因TRP1的表达明显缺失(图1B)，说明这些白发毛囊已经丢失了黑色素细胞。同时，发现P53靶基因P21的表达在白发毛囊中相对于黑发毛囊明显上调(图1B)，说明P53通路激活与人类毛发的衰老白化有相关性。
在一项前期发明专利申请中(专利申请号：201911175875.4)，建立了一套小鼠皮肤局部衰老白发模型(LIR)。该模型的制备原理是通过对小鼠局部皮肤施加电离辐射(IR)刺激和蜡去毛刺激(Wax)来显著加速目标区域皮肤的衰老速度，诱发衰老白发现象，同时不影响小鼠整体健康和其它区域皮肤状态(图1C)。
为了验证抑制P53通路是否能够抑制毛发的衰老白化，对上述小鼠皮肤局部衰老白发模型(LIR)进行了P53小分子抑制剂Pifithrin-α(简称PFTα，CAS:63208-82-2，化学式C16H19BrN2OS，分子量：367.3)处理。具体地，对辐照后的小鼠皮肤进行了每3天一次共5次的PFTα溶液或溶剂对照涂抹处理，并追踪分析了随后的毛发衰老白化表型进展(图1C)。与溶剂对照组(Sol)相比，PFTα处理组中辐照区域毛发的衰老白化现象被显著抑制了(图1D)。通过进一步的切片并免疫荧光染色分析小鼠黑色素细胞标记物c-KIT的表达情况，发现PFTα处理组与溶剂对照组相比，其辐照区皮肤毛囊的毛球部中保留了显著更多的黑色素细胞(图1E)。因此，研究结果证实了靶向抑制P53通路是防治人类毛发衰老与白化的有效新技术。同时，还证实了在皮肤表面涂抹P53抑制剂即可达到抑制毛发衰老白化的疗效，有效规避了全身性抑制P53通路可能带来的副作用，为开发拮抗人类毛发衰老白化的新型护发产品和治疗方法提供了切实可行的手段。
关于P53抑制手段的附注：
P53小分子抑制剂主要包括：Pifithrin-α(又名PFTα或HBr，CAS：63208-82-2)，Cyclic Pifithrin-αhydrobromide(CAS：511296-88-1)，Pifithrin-μ(CAS:64984-31-2)。
可以通过靶向P53的siRNA或shRNA或miRNA或sgRNA等手段抑制P53表达。
可以利用特定蛋白质来结合并抑制P53。其中，MDM2是一个体内天然存在的P53抑制蛋白。它可以跟P53蛋白直接结合并抑制P53活性。因此过表达MDM2蛋白或用小分子药物激活MDM2或阻断其降解均可实现抑制P53的效果。此外，能以类似方式结合并抑制P53的人工设计的多肽类抑制剂也可以实现类似效果。
在本发明提及的所有文献都在本申请中引用作为参考，就如同每一篇文献被单独引用作为参考那样。此外应理解，在阅读了本发明的上述讲授内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。

Claims (10)

1.一种P53通路抑制剂的用途，其特征在于，用于制备组合物或制剂，所述的组合物或制剂用于(i)预防或治疗毛发衰老；和/或(ii)预防或治疗毛发白化。
2.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的组合物或制剂用于选自下组的一种或多种应用：
(a)降低毛发白化比率或减少白化毛发的产生；和
(b)改善或提高黑色素细胞数量。
3.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的毛发衰老和/或毛发白化包括由选自下组的诱导因素诱导的：电离辐射、γ射线辐照、x射线辐照、紫外线、放射治疗、过度暴晒、化学诱变剂、年龄、遗传性白发，或其组合。
4.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的P53通路抑制剂选自下组：小分子化合物抑制剂、基因抑制剂、结合蛋白抑制剂，或其组合。
5.如权利要求4所述的用途，其特征在于，所述的小分子化合物抑制剂选自下组：Pifithrin-α(CAS：63208-82-2)、Cyclic Pifithrin-αhydrobromide(CAS：511296-88-1)、Pifithrin-μ(CAS:64984-31-2)，或其组合；
所述的基因抑制剂选自下组：siRNA、shRNA、miRNA、sgRNA，或其组合；和/或
所述的结合蛋白抑制剂包括MDM2或多肽类P53抑制剂。
6.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的组合物包括药物组合物、日用化学品组合物。
7.一种体外筛选用于(i)预防或治疗毛发衰老；和/或(ii)预防或治疗毛发白化潜在物质的方法，包括步骤：
(1)提供测试组和对照组，其中，在测试组中向检测体系中加入测试物，在对照组中向检测体系中加入对照物,所述对照物包括阴性对照物；
(2)分别检测测试组和对照组中P53的表达水平；如果阴性组相比，测试组的P53的表达水平显著降低，则表示所述测试物是(i)预防或治疗毛发衰老；和/或(ii)预防或治疗毛发白的潜在物质。
8.一种P53或及其检测试剂的用途，用于制备用于评估毛发衰老和/或毛发白化检测试剂或检测试剂盒。
9.一种诊断/检测毛发衰老和/或毛发白化的方法，包括步骤：
(a)提供一待测样本，所述待测样本为皮肤毛囊的毛球部；
(b)检测所述待测样本中P53的表达水平L1，并与参考值L0进行相比，如果待测样本的P53的表达水平显著高于参考值，则提示所述待测样本的毛发衰老和/或毛发白化程度高，其中所述参考值L0是正常衰老的毛发中P53的表达水平。
10.一种(i)预防或治疗毛发衰老；和/或预防或治疗毛发白化的方法，其特征在于，向需要的对象施用P53通路抑制剂，从而i)预防或治疗毛发衰老；和/或预防或治疗毛发白化。
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CN103533945A (zh) * 2011-02-23 2014-01-22 传世健康护理有限公司 预防化疗和放疗诱发的脱发（cria）、降低cria影响和改善cria后毛发再生表象的组合物的新用途
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