CN115381794A - 硼替佐米与青蒿琥酯的药物组合物、方法以及应用 - Google Patents
硼替佐米与青蒿琥酯的药物组合物、方法以及应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN115381794A CN115381794A CN202211268389.9A CN202211268389A CN115381794A CN 115381794 A CN115381794 A CN 115381794A CN 202211268389 A CN202211268389 A CN 202211268389A CN 115381794 A CN115381794 A CN 115381794A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- bortezomib
- artesunate
- liposome
- pharmaceutical composition
- platelet
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 229960001467 bortezomib Drugs 0.000 title claims abstract description 73
- GXJABQQUPOEUTA-RDJZCZTQSA-N bortezomib Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)B(O)O)NC(=O)C=1N=CC=NC=1)C1=CC=CC=C1 GXJABQQUPOEUTA-RDJZCZTQSA-N 0.000 title claims abstract description 44
- FIHJKUPKCHIPAT-AHIGJZGOSA-N artesunate Chemical compound C([C@](OO1)(C)O2)C[C@H]3[C@H](C)CC[C@@H]4[C@@]31[C@@H]2O[C@@H](OC(=O)CCC(O)=O)[C@@H]4C FIHJKUPKCHIPAT-AHIGJZGOSA-N 0.000 title claims abstract description 34
- 229960004991 artesunate Drugs 0.000 title claims abstract description 34
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 18
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title claims abstract description 17
- 239000002502 liposome Substances 0.000 claims abstract description 77
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 31
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 claims abstract description 20
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims abstract description 20
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 claims abstract description 12
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 10
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 claims abstract description 9
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 6
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 28
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 21
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 claims description 18
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims description 15
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 15
- 208000034578 Multiple myelomas Diseases 0.000 claims description 14
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 12
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 10
- JLPULHDHAOZNQI-ZTIMHPMXSA-N 1-hexadecanoyl-2-(9Z,12Z-octadecadienoyl)-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical class CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCC\C=C/C\C=C/CCCCC JLPULHDHAOZNQI-ZTIMHPMXSA-N 0.000 claims description 9
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 claims description 9
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 9
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 claims description 9
- 229940099578 hydrogenated soybean lecithin Drugs 0.000 claims description 9
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 claims description 9
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 claims description 8
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 claims description 7
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 claims description 7
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 claims description 7
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 claims description 7
- 239000008055 phosphate buffer solution Substances 0.000 claims description 7
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 7
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 claims description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 claims description 5
- 238000011068 loading method Methods 0.000 claims description 5
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 claims description 5
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 238000011534 incubation Methods 0.000 claims description 4
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 4
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 claims description 4
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 claims description 4
- 238000012377 drug delivery Methods 0.000 claims description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims description 2
- 230000001446 anti-myeloma Effects 0.000 claims 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 15
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 abstract description 7
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 abstract description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 abstract description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 abstract description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 10
- 239000002086 nanomaterial Substances 0.000 description 6
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 6
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 5
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- 229940044683 chemotherapy drug Drugs 0.000 description 3
- 238000005538 encapsulation Methods 0.000 description 3
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 3
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- IZTQOLKUZKXIRV-YRVFCXMDSA-N sincalide Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O)C1=CC=C(OS(O)(=O)=O)C=C1 IZTQOLKUZKXIRV-YRVFCXMDSA-N 0.000 description 3
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 3
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 3
- 101800005151 Cholecystokinin-8 Proteins 0.000 description 2
- 102400000888 Cholecystokinin-8 Human genes 0.000 description 2
- 206010059866 Drug resistance Diseases 0.000 description 2
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 2
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 2
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 2
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 2
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- 206010067484 Adverse reaction Diseases 0.000 description 1
- 208000030453 Drug-Related Side Effects and Adverse reaction Diseases 0.000 description 1
- 239000000232 Lipid Bilayer Substances 0.000 description 1
- 229940079156 Proteasome inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 108010087230 Sincalide Proteins 0.000 description 1
- 206010070863 Toxicity to various agents Diseases 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- XBJFCYDKBDVADW-UHFFFAOYSA-N acetonitrile;formic acid Chemical compound CC#N.OC=O XBJFCYDKBDVADW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000006838 adverse reaction Effects 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 238000010609 cell counting kit-8 assay Methods 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 239000000032 diagnostic agent Substances 0.000 description 1
- 229940039227 diagnostic agent Drugs 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 229960003444 immunosuppressant agent Drugs 0.000 description 1
- 239000003018 immunosuppressive agent Substances 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 231100000053 low toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000036210 malignancy Effects 0.000 description 1
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 238000010951 particle size reduction Methods 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 210000004180 plasmocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229920006289 polycarbonate film Polymers 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 239000003207 proteasome inhibitor Substances 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 238000011476 stem cell transplantation Methods 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 1
- 230000005909 tumor killing Effects 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
- A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
- A61K9/51—Nanocapsules; Nanoparticles
- A61K9/5107—Excipients; Inactive ingredients
- A61K9/5176—Compounds of unknown constitution, e.g. material from plants or animals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
- A61K31/357—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having two or more oxygen atoms in the same ring, e.g. crown ethers, guanadrel
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/69—Boron compounds
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/10—Dispersions; Emulsions
- A61K9/127—Liposomes
- A61K9/1277—Processes for preparing; Proliposomes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Botany (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Nanotechnology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Optics & Photonics (AREA)
- Dispersion Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
本发明属于医药技术领域，公开了硼替佐米与青蒿琥酯的药物组合物、方法以及应用，乙醇注入法制备得到的青蒿琥酯‑硼替佐米脂质体，用于多发性骨髓瘤治疗。本发明进行细胞实验，在细胞水平验证青蒿琥酯‑硼替佐米脂质体对U266骨髓瘤细胞株的增殖抑制作用。实现青蒿琥酯‑硼替佐米脂质体有效的抗肿瘤作用，使用过程中安全、高效，为临床肿瘤化疗提供新的思路。
Description
技术领域
本发明涉及医药技术领域，特别涉及硼替佐米与青蒿琥酯的药物组合物、方法以及应用。
背景技术
多发性骨髓瘤是一组发生于B淋巴细胞的的恶性浆细胞克隆性肿瘤，占血液系统恶性肿瘤的第二位，恶性程度高，侵袭性高。近年来，多发性骨髓瘤的治疗得到了迅速发展，蛋白酶体抑制剂、免疫抑制剂和自体干细胞移植等手段的加入使得MM患者的完全缓解率有所提高，但是其中80-90％的患者仍有复发并且产生严重的耐药，影响患者生存质量。目前对多发性骨髓瘤患者的治疗多为传统化疗手段，而化疗药物对肿瘤组织亲和力较差，靶向性低，常规治疗剂量即对其他正常组织器官产生显著的毒副作用。因此，提高化疗药物对多发性骨髓瘤的靶向性，增加其在靶向部位的蓄积，达到高效低毒的效果，是提高多发性骨髓瘤治疗疗效及降低耐药性的关键。近年来，随着药物科学、材料科学和生物医学等相关领域的进展，载药技术的研究取得了重大进展。
目前，以脂质体为纳米材料包裹药物到达内，以减轻药物本身的不良反应并增加药物治疗的靶向性为主的研究逐渐增多，而两个及以上药物结合并包裹进同一个脂质体中的研究并未受到相同的关注。但是，在两个药物本身协同作用下对其进行包裹可以促使肿瘤治疗更进一步的发展。
发明内容
第一方面，本发明目的是通过硼替佐米与青蒿琥酯的药物组合物，保留青蒿琥酯、硼替佐米本身的抗肿瘤效应外，借助两者的协同作用，以及脂质体纳米材料本身的靶向性增强抗肿瘤作用并减少全身反应。
技术方案：
硼替佐米与青蒿琥酯的药物组合物，所述药物组合物包含用于同时、依次或分别使用的青蒿琥酯-硼替佐米脂质体，青蒿琥酯-硼替佐米脂质体包括：血小板膜包裹硼替佐米与青蒿琥酯药物分子。
以纳米材料脂质体直接包裹青蒿琥酯及硼替佐米，无其他化合物粒子的中间作用，脂质体可作为包含于水相或脂质双层中的治疗和诊断剂的递送载体。以脂质体包封形式递送药物降低药物毒性、改变药代动力学或提高药物溶解度。
在一些公开中，所述血小板膜来源于生物体内的血小板细胞。
在一些公开中，上述药物组合物在治疗骨髓瘤的药物中的应用。
在一些公开中，上述药物组合物在促骨髓瘤细胞凋亡的药物中的应用。
在一些公开中，上述药物组合物在抗骨髓瘤增殖的药物中的应用。
第二方面，本发明目的是通过一种作用多发性骨髓瘤的方法，保留青蒿琥酯、硼替佐米本身的抗肿瘤效应外，借助两者的协同作用，以及脂质体纳米材料本身的靶向性增强抗肿瘤作用并减少全身反应。
一种作用多发性骨髓瘤的方法，所述方法用于非治疗作为目的，所述方法包括同时、依次或分别使用的青蒿琥酯-硼替佐米脂质体，青蒿琥酯-硼替佐米脂质体作用多发性骨髓瘤；青蒿琥酯-硼替佐米脂质体包括：血小板膜包裹硼替佐米药物分子。
第三方面，本发明目的是通过一种抗肿瘤的方法，保留青蒿琥酯、硼替佐米本身的抗肿瘤效应外，借助两者的协同作用，以及脂质体纳米材料本身的靶向性增强抗肿瘤作用并减少全身反应。
一种抗肿瘤的方法，所述方法用于非治疗作为目的，同时、依次或分别使用血小板载硼替佐米靶向载药，血小板载硼替佐米靶向载药包括：血小板膜包裹硼替佐米药物分子；青蒿琥酯-硼替佐米脂质体作用于肿瘤。
在一些公开中，所述肿瘤为多发性骨髓瘤。
在一些公开中，针对于第一方面的药物组合物中血小板膜包裹硼替佐米与青蒿琥酯药物分子的方法，包括：
以氢化大豆卵磷脂、胆固醇和二硬脂酸磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇为原料，制备脂质体，将脂质体溶于65℃的无水乙醇中，在65℃下制成10％(v/v)的混合物，将混合物注入65℃的水相，形成乳白色悬浮液的粗制脂质体制剂，水相为150mM醋酸和150mM甘露醇的混合体；将粗制脂质体制剂减小脂质体粒径后，去除乙醇、脂外乙酸和甘露醇，获得产物；氢化大豆卵磷脂、胆固醇和二硬脂酸磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇的摩尔比为55：40：5；
制备脂质体，包括：氢化大豆卵磷脂、胆固醇和二硬脂酸磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇加入乙醇中，充分搅拌至混合均匀得到混合液A；将混合液A注入已加热至45-55℃的磷酸盐缓冲溶液中，搅拌至乙醇除尽为止，得到脂质体；磷酸盐缓冲溶液中磷酸盐浓度为10mmol/L；
将粗制脂质体制剂减小脂质体粒径至100nm及其以下；
以去除乙醇、脂外乙酸和甘露醇，包括：用12kDa MWCO透析膜用10mM PBS，pH 7.0环境下，透析减小脂质体粒径后的粗制脂质体制剂。
所述脂质体制剂与青蒿琥酯、硼替佐米孵育，进行将青蒿琥酯和硼替佐米装载至脂质体制剂内；所述青蒿琥酯硼替佐米脂质体制剂与青蒿琥酯、硼替佐米孵育的摩尔比为：2:1:1。
有益效果：本发明保持青蒿琥酯、硼替佐米本身的抗肿瘤效应，同时构建青蒿琥酯-硼替佐米脂质体纳米材料，在体外细胞水平实现更强的抑制肿瘤增殖和促进凋亡的效果；本发明实现了：体外环境下青蒿琥酯-硼替佐米脂质体良好的抗多发性骨髓瘤治疗效应。
附图说明
图1是本发明青蒿琥酯-硼替佐米脂质体粒径检测结果；
图2是本发明青蒿琥酯-硼替佐米脂质体中硼替佐米含量测定曲线；
图3为不同时间点(24h、48h)不同处理组(青蒿琥酯脂质体组、硼替佐米脂质体组和青蒿琥酯-硼替佐米脂质体组)对U266细胞的增殖抑制率；
图4为不同处理组U266细胞的凋亡情况。
具体实施方式
实施例一：
本实施例的方法包括如下步骤：
(1)将脂质体制剂在圆底烧瓶中以所需量混合溶于乙醇；
(2)脂质体制剂包括：以氢化大豆卵磷脂、胆固醇和二硬脂酸磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇为原料，氢化大豆卵磷脂/胆固醇/二硬脂酸磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇(55：40：5)；
(3)然后将此溶剂经注射器缓缓注入已加热至50℃的磷酸盐缓冲溶液中，并不断磁力搅拌至乙醇除尽为止；
即氢化大豆卵磷脂、胆固醇和二硬脂酸磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇加入乙醇中，充分搅拌至混合均匀得到混合液A；将混合液A注入已加热至45-55℃的磷酸盐缓冲溶液中，搅拌至乙醇除尽为止，得到脂质体；磷酸盐缓冲溶液中磷酸盐浓度为10mmol/L。
(4)然后将脂质体通过100nm聚碳酸酯薄膜滤膜挤出，反复10次；
(5)用12kDa MWCO透析膜在25℃下用10mM PBS(pH 7.0)透析48h以去除乙醇、脂外乙酸和甘露醇；
(6)通过将脂质体制剂与青蒿琥酯20mg、硼替佐米2mg孵育过夜，将两者远程装载在脂质体中；
(7)然后，在室温下，用10mM PBS(pH 7.0)透析1次，用蔗糖/磷酸盐缓冲液(蔗糖9.5％，磷酸盐10mm；pH 7.0)透析3次，除去游离的硼替佐米；
(8)0.45μm滤膜过滤；生成包载有蒿琥酯和硼替佐米的复合物，即青蒿琥酯-硼替佐米脂质体。
实施例二：
Nano-ZS激光粒度仪用来测定青蒿琥酯-硼替佐米脂质体的平均粒径和粒径分布；本发明中的粒径大小为115.65nm，相比以往的大多数BTZ脂质体制剂的粒径范围163-179nm,明显较小。
实施例三：针对于青蒿琥酯-硼替佐米脂质体中硼替佐米的载药量
利用高效液相色谱(HPLC)用来测定硼替佐米的载药量，检测波长为237nm；
利用色谱柱为C18柱，流动相A)水：乙腈-甲酸(70：30：1v/v)，B)甲醇-甲酸(200：800：1v/v)，35℃，进样量20min，流速1ml/min。
硼替佐米包封率(％)＝(透析后硼替佐米浓度/透析前硼替佐米浓度)×100＝315.67ug/ml/400ug/ml*100％＝78.92％
实施例四：CCK8探究青蒿琥酯-硼替佐米脂质体的细胞毒性：
(1)将U266细胞接种于96孔板，每孔100μL；
(2)加入固定浓度的青蒿琥酯脂质体、硼替佐米脂质体和青蒿琥酯-硼替佐米脂质体，设置对照组，每孔10μL；
(3)置于37℃，5％CO2的细胞培养箱中，孵育24或48h后每孔中各加入10μL CCK8应液，置于细胞培养箱中继续孵育2～4h；
(4)酶标仪在450nm激发波长下，检测96孔板各孔的吸光度，根据OD值按公式计算细胞增殖抑制率，公式如下：
增殖抑制率(％)＝(1-细胞生存率)×100
图3为不同时间点(24h、48h)不同处理组(青蒿琥酯脂质体组、硼替佐米脂质体组和青蒿琥酯-硼替佐米脂质体组)对U266细胞的增殖抑制率，青蒿琥酯-硼替佐米脂质体组的增殖抑制作用更显著；
实施例五：流式细胞分析术研究细胞凋亡：
(1)将U266细胞接种于六孔板，每孔1mL；
(2)设置空白对照组和血小板对照组，每孔1mL；37℃，5％CO2细胞培养箱中孵育12h；
(3)收集各组细胞，20℃，1000rpm离心5min，弃上清；用预冷的PBS洗涤，4℃，1000rpm离心5min，弃上清；洗涤，4℃，3000rpm离心10min，弃上清，重悬于1mL 1×BindingBuffer。
(4)各组取100μL，加入5μLAnnexin V-FITC混匀，室温避光反应15min，再加入5μLPI混匀，室温避光反应5min。
(5)加入300μL PBS稀释体系，于1h内上FCM检测。
图4为不同处理组U266细胞的凋亡情况，青蒿琥酯-硼替佐米脂质体组诱导U266的凋亡效应高于单药脂质体组。
本发明中青蒿琥酯-硼替佐米脂质体组的肿瘤杀伤效果更强，CCK-8和流式实验证实青蒿琥酯-硼替佐米脂质体组抑制肿瘤生长和促进肿瘤细胞凋亡的效果更显著。在与对照组的比较中，青蒿琥酯-硼替佐米脂质体较单药脂质体对肿瘤细胞的增殖抑制作用和凋亡促进作用更显著，这得益于脂质体在包裹两个协同作用药物后对肿瘤细胞的作用的加大优势，使得药物在肿瘤细胞蓄积并有效释放。
青蒿琥酯-硼替佐米脂质体，保留青蒿琥酯、硼替佐米本身的抗肿瘤效应，靶向肿瘤细胞，减轻药物毒副作用从而增强硼替佐米的抗多发性骨髓瘤疗效，是一种可发展为实际临床应用的纳米技术。
Claims (9)
1.硼替佐米与青蒿琥酯的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包含用于同时、依次或分别使用的青蒿琥酯-硼替佐米脂质体，青蒿琥酯-硼替佐米脂质体包括：血小板膜包裹硼替佐米与青蒿琥酯药物分子。
2.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述血小板膜来源于生物体内的血小板细胞。
3.根据权利要求1或2所述的药物组合物在治疗骨髓瘤的药物中的应用。
4.根据权利要求1或2所述的药物组合物在促骨髓瘤细胞凋亡的药物中的应用。
5.根据权利要求1或2所述的药物组合物在抗骨髓瘤增殖的药物中的应用。
6.一种作用多发性骨髓瘤的方法，所述方法用于非治疗作为目的，其特征在于，所述方法包括同时、依次或分别使用的青蒿琥酯-硼替佐米脂质体，青蒿琥酯-硼替佐米脂质体作用多发性骨髓瘤；青蒿琥酯-硼替佐米脂质体包括：血小板膜包裹硼替佐米药物分子。
7.一种抗肿瘤的方法，所述方法用于非治疗作为目的，其特征在于，同时、依次或分别使用血小板载硼替佐米靶向载药，血小板载硼替佐米靶向载药包括：血小板膜包裹硼替佐米药物分子；青蒿琥酯-硼替佐米脂质体作用于肿瘤。
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述肿瘤为多发性骨髓瘤。
9.根据权利要求1或2任一所述的药物组合物中血小板膜包裹硼替佐米与青蒿琥酯药物分子的方法，其特征在于，包括：
以氢化大豆卵磷脂、胆固醇和二硬脂酸磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇为原料，制备脂质体，将脂质体溶于65℃的无水乙醇中，在65℃下制成10％(v/v)的混合物，将混合物注入65℃的水相，形成乳白色悬浮液的粗制脂质体制剂，水相为150mM醋酸和150mM甘露醇的混合体；将粗制脂质体制剂减小脂质体粒径后，去除乙醇、脂外乙酸和甘露醇，获得产物；氢化大豆卵磷脂、胆固醇和二硬脂酸磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇的摩尔比为55：40：5；
制备脂质体，包括：氢化大豆卵磷脂、胆固醇和二硬脂酸磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇加入乙醇中，充分搅拌至混合均匀得到混合液A；将混合液A注入已加热至45-55℃的磷酸盐缓冲溶液中，搅拌至乙醇除尽为止，得到脂质体；磷酸盐缓冲溶液中磷酸盐浓度为10mmol/L；
将粗制脂质体制剂减小脂质体粒径至100nm及其以下；
以去除乙醇、脂外乙酸和甘露醇，包括：用12kDa MWCO透析膜用10mM PBS，pH 7.0环境下，透析减小脂质体粒径后的粗制脂质体制剂；
所述脂质体制剂与青蒿琥酯、硼替佐米孵育，进行将青蒿琥酯和硼替佐米装载至脂质体制剂内；所述青蒿琥酯硼替佐米脂质体制剂与青蒿琥酯、硼替佐米孵育的摩尔比为：2:1:1。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202211268389.9A CN115381794A (zh) | 2022-10-17 | 2022-10-17 | 硼替佐米与青蒿琥酯的药物组合物、方法以及应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202211268389.9A CN115381794A (zh) | 2022-10-17 | 2022-10-17 | 硼替佐米与青蒿琥酯的药物组合物、方法以及应用 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN115381794A true CN115381794A (zh) | 2022-11-25 |
Family
ID=84128885
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202211268389.9A Pending CN115381794A (zh) | 2022-10-17 | 2022-10-17 | 硼替佐米与青蒿琥酯的药物组合物、方法以及应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN115381794A (zh) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN115737591A (zh) * | 2022-11-24 | 2023-03-07 | 东南大学 | 血小板载体、血小板包载硼替佐米的方法及应用 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN112915094A (zh) * | 2021-03-26 | 2021-06-08 | 东南大学 | 一种硼替佐米脂质体制剂的制备方法 |
| CN114887079A (zh) * | 2022-05-26 | 2022-08-12 | 东南大学 | 硼替佐米包封剂、制备方法、硼替佐米脂质体制剂及应用 |
-
2022
- 2022-10-17 CN CN202211268389.9A patent/CN115381794A/zh active Pending
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN112915094A (zh) * | 2021-03-26 | 2021-06-08 | 东南大学 | 一种硼替佐米脂质体制剂的制备方法 |
| CN114887079A (zh) * | 2022-05-26 | 2022-08-12 | 东南大学 | 硼替佐米包封剂、制备方法、硼替佐米脂质体制剂及应用 |
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| XENOFON PAPANIKOLAOU 等: "The Antimalarial Agent Artesunate Overcomes Bortezomib Resistance in Myeloma Cell Lines Through Non-Caspase Mediated Apoptosis", 《BLOOD》, vol. 120, no. 21, pages 4015, XP086661599, DOI: 10.1182/blood.V120.21.4015.4015 * |
| 欧瑞明等: "青蒿琥酯对硼替佐米耐药的骨髓瘤细胞株增殖与凋亡的影响", 中国临床药理学杂志, vol. 34, no. 10, pages 1183 - 1186 * |
| 欧瑞明等: "青蒿琥酯对硼替佐米耐药骨髓瘤细胞株的耐药逆转作用及机制", 《中国实验方剂学杂志》, vol. 23, no. 9, pages 139 - 145 * |
| 陈均法等: "青蒿琥酯联合硼替佐米对T细胞淋巴瘤细胞的抑制作用观察", 《浙江中医药大学学报》, vol. 36, no. 9, 30 September 2012 (2012-09-30), pages 974 * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN115737591A (zh) * | 2022-11-24 | 2023-03-07 | 东南大学 | 血小板载体、血小板包载硼替佐米的方法及应用 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN112451487B (zh) | 一种姜黄素主动载药脂质体及其制备方法 | |
| CN1840193B (zh) | 聚乙二醇化磷脂包载的蒽环类抗肿瘤抗生素的纳米胶束制剂 | |
| US9371364B2 (en) | Dual-targeted therapeutic peptide for nasopharyngeal carcinoma, nanoparticles carrying same and uses thereof | |
| EA011612B1 (ru) | Состав с иринотеканом | |
| CN107811971A (zh) | 用于药物输送的脂质体 | |
| CN108743970B (zh) | 一种透明质酸修饰的线粒体靶向脂质体及其制备方法 | |
| Meng et al. | A modular ROS-responsive platform co-delivered by 10-hydroxycamptothecin and dexamethasone for cancer treatment | |
| CN105288646A (zh) | 一种光敏剂磷脂化合物、其药物组合物及应用 | |
| CN112933052A (zh) | 改善肿瘤缺氧微环境并增强免疫治疗的纳米递药系统 | |
| CN109432432B (zh) | 靶向至细胞内质网纳米载药系统的构建与应用 | |
| CN104490786B (zh) | 一种靶向多功能双载药脂质体的制备方法和应用 | |
| CN115381794A (zh) | 硼替佐米与青蒿琥酯的药物组合物、方法以及应用 | |
| CN108888774B (zh) | 一种雷公藤红素-树状大分子缀合物及其制备方法与应用 | |
| CN110898231B (zh) | 一种功能化拉洛他赛脂质体及其制备方法与应用 | |
| CN106692059A (zh) | 一种低氧响应脂质体药物载体及其制备方法与应用 | |
| CN103830739A (zh) | 配体多肽ph1形成的药物输送系统及其用途 | |
| Hao et al. | In-vitro cytotoxicity, in-vivo biodistribution and anti-tumour effect of PEGylated liposomal topotecan | |
| CN116473940B (zh) | 一种caf靶向的载药脂质纳米粒及其制备方法 | |
| CN101322681B (zh) | 一种制备蒽环类抗肿瘤抗生素的纳米胶束制剂的方法 | |
| CN112107565A (zh) | 米托蒽醌和小檗碱组合物及其在制备抗肿瘤药物中的应用 | |
| CN108721643B (zh) | 一种用于免疫化疗的pH敏感脂质体 | |
| CN112957329B (zh) | 一种共载盐酸阿霉素-佛司可林的纳米脂质体及其制备方法和应用 | |
| CN112159527B (zh) | 一种含有透明质酸基团的聚甘油脂肪酸酯ha-pg及其合成方法和其在制备药物制剂中的应用 | |
| CN111773184B (zh) | 一种乏氧响应脂质体及在制备抗肿瘤药物中的应用 | |
| CN109568599B (zh) | 一种脂质体修饰的阿霉素及含阿霉素的纳米粒子 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination |