CN115364044A - 一种药物组合物及其制备方法和用途 - Google Patents

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赵春雨
段树民
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Abstract

为了解决上述技术问题，本发明的目的是提供一种治疗颈椎、腰椎和关节退行性疾病，包括其所诱发的疼痛的含有甾体类抗炎药物的药物组合物。该药物组合物使用交联型透明质酸水凝胶载药，因具有多孔状空间立体结构，可均匀包载药物，延缓透明质酸降解速率，从而实现抗炎药物的可控长效释放，提高镇痛疗效，减少用药次数和医疗费用，并避免因多次注射而产生的并发症。

Description

一种药物组合物及其制备方法和用途
技术领域
本发明涉及医学领域。具体而言，本发明涉及一种通过交联透明质酸负载二 丙酸倍他米松的水凝胶及其组合物治疗颈椎、腰椎和关节退行性疾病所诱发的 疼痛中的应用。
背景技术
疼痛是人体第五大生命体征。疼痛若持续不退，可发展为慢性疼痛，是人类 长期痛苦的主要原因之一，也是骨科患者就诊的首要原因。在各类疾病引发的疼 痛中，由老龄化所产生的的颈椎、腰椎和关节退行性疾病所诱发的疼痛尤为常见， 也是多种骨科疾患手术治疗的重要指征。如何缓解骨关节疾病患者疼痛，提高患 者生活质量，降低手术率，是骨科临床工作所面临的重点和难点。
椎间盘是维持腰椎功能的重要生理结构。在年龄、职业和遗传等各种因素的 综合作用下，椎间盘逐渐出现退变，多见于腰椎和颈椎。退变的椎间盘本身可诱 发椎间盘及其周围出现炎症，引起腰痛，称为盘源性腰痛；由于椎间盘退变，可 继发椎间盘突出、椎管狭窄、脊柱侧弯等多种脊柱退行性疾病，引起颈肩痛、腰 痛和上下肢放射痛。以最常见的椎间盘突出症为例：在一定条件下，退变变性的 髓核通过纤维环薄弱处或裂隙突出，引起肢体放射痛、无力或麻木等一系列症状， 称为椎间盘突出症，按突出的解剖部位可分为颈椎间盘突出症(CDH)和腰椎间 盘突出症(LDH)等，全球约9％的成年人曾为其所累。椎间盘突出所导致的外周 神经机械性压迫和炎症反应是诱发疼痛的两大关键因素。尽管机械压迫是产生 放射痛的重要原因之一，近年来越来越多的研究表明突出髓核引起的炎症反应 是引发肢体放射痛的重要原因。突出的髓核可诱发一系列的免疫反应，上调多种 炎症因子，如TNF-α、IL-1β、IL-6和前列腺素等，临床上抑制神经根及其周围 的炎症可有效缓解椎间盘突出诱发的放射痛，目前亦已明确炎症反应是引起椎 间盘突出诱发肢体放射痛的关键因素。
流行病学调查显示，60岁以上的老年患者中，15％伴随骨性关节炎方面的问 题，严重损害患者的生活质量和劳动能力，社会和医疗成本巨大而沉重。在创伤、 肥胖、肌肉功能异常、痛风、糖尿病、心血管疾病、关节内钙沉积等多种因素作 用下，导致关节内骨及软骨的承载能力下降，引发各类关节疾病，包括骨关节炎、 肩周炎等。研究提示，慢性炎症在骨关节炎发生发展中同样起到了重要作用。随 着关节退变的进展，外周神经纤维在炎症因子刺激下不断长入关节囊中；后者在 炎症因子等刺激下，兴奋性增高，产生疼痛。在骨关节炎、肩周炎等关节疾病中， 关节内的慢性炎症长时间刺激关节周围神经，产生持续性疼痛。临床实践中，关 节腔内注射透明质酸钠药物治疗骨关节炎已有近50年历史，可补充关节液、润 滑关节、保护关节软骨、抑制炎症等，联合甾体类药物和局麻药物可显著缓解骨 关节炎引起的关节疼痛。
目前临床治疗上，糖皮质激素类抗炎药物，如倍他米松，经椎间孔硬膜外注 射(即神经根封闭)可显著缓解LDH放射痛，椎间盘内注射可能缓解盘源性腰痛， 关节内注射显著缓解骨关节炎、肩周炎等引起的疼痛，临床疗效明确。然而，局 部注射的药物容易被机体吸收，仅能短期内改善疼痛症状，随后疗效丢失，再次 出现疼痛，因此临床经常需要多次重复注射(2-4次)以维持疗效。如何长期有效 地控制LDH神经根周围、椎间盘内和关节炎患者关节囊内的炎症，减少注射用 药次数，缓解患者疼痛症状并减轻经济负担，是临床亟需解决的一个关键问题。
使用透明质酸水凝胶包覆疏水的抗炎药物，通过透明质酸降解和药物分子 扩散以调控其释放速度，使之长期地、缓慢地释放，从而延长药物清除时间、维 持疗效，有望在提高药物疗效的同时降低硬膜外注射/关节腔内注射的频率和次 数，促进患者康复。目前国内及国际市场上，未见包覆消炎镇痛药物用于治疗下 肢放射痛的产品。一方面，常见的透明质酸水凝胶包载药物体系常使用具有一定 生物毒性的1，4丁二醇二缩水甘油基醚(BDDE)作为小分子交联剂，因此在水 凝胶终产物中不可避免地残留有害成分；另一方面，由于现有透明质酸水凝胶交 联密度不均匀，以及先交联后载药的模式，导致所载药物均一性差，药物缓释不 稳定，从而限制其临床应用。临床上关节内封闭往往序贯使用口服抑炎药物和关 节内透明质酸钠，但该方法并不能显著延长药物作用时间和镇痛效果。因此，使用完全生物安全的透明质酸水凝胶均匀稳定地包覆抗炎药物具有巨大的临床需 求和市场前景。
发明内容
为了解决上述技术问题，本发明的目的是提供一种治疗颈椎、腰椎和关节退 行性疾病，包括其所诱发的疼痛的含有甾体类抗炎药物的药物组合物。该药物组 合物使用交联型透明质酸水凝胶载药，因具有多孔状空间立体结构，可均匀包载 药物，延缓透明质酸降解速率，从而实现抗炎药物的可控长效释放，提高镇痛疗 效，减少用药次数和医疗费用，并避免因多次注射而产生的并发症。
针对上述目的，本发明的技术方案如下：
根据本发明的一个方面，本发明提供一种药物组合物，所述药物组合物包含 乙烯基官能化透明质酸或其钠盐和巯基官能化透明质酸或其钠盐交联形成的水 凝胶、分散在水凝胶中的甾体类药物、吐温80、以及缓冲盐或其水溶液。优选 地，本发明的药物组合物由上述组分组成。
优选地，所述甾体类药物为糖皮质激素类药物，最优选二丙酸倍他米松、倍 他米松、地塞米松或它们的可药用盐。
优选地，所述乙烯基官能化透明质酸选自如下A1、A2、A3或他们的混合 物。进一步优选，重均分子量为10-2000kDa，更进一步优选200-800kDa，更进 一步优选400-600kDa，更进一步优选400-500kDa，例如450kDa。
Figure BDA0003700769950000031
优选地，所述巯基官能化透明质酸选自如下B1、B2、B3或他们的混合物。 进一步优选，重均分子量为10-2000kDa，更进一步优选200-800kDa，更进一 步优选400-600kDa，更进一步优选400-500kDa，例如450kDa。
Figure BDA0003700769950000041
优选地，所述乙烯基官能化透明质酸或其钠盐和所述巯基官能化透明质酸 或其钠盐的质量比为10：1至1：10。
优选地，所述水凝胶与甾体类药物的质量比20：1至2：1，进一步为4： 1。
优选地，所述水凝胶与吐温80的质量比为20：1至20：3，进一步为10： 1。
在含水的药物组合物中，优选地，所述水凝胶的质量体积百分比为0.5％至 3％，进一步为2％。
在含水的药物组合物中，优选地，所述甾体类药物的质量体积百分比为0.1％ 至1％，进一步为0.5％。
在含水的药物组合物中，优选地，所述吐温80的质量体积百分比为0.05％ 至0.5％，进一步为0.1％。
优选地，缓冲盐为中性缓冲盐，最优选磷酸缓冲盐。
根据本发明的另一个方面，本发明提供一种药物组合物的制备方法，包括如 下步骤：
(1)将甾体类药物、吐温80分散于缓冲盐溶液中，形成乳液；
(2)分别将乙烯基官能化透明质酸或其钠盐和巯基官能化透明质酸或其钠 盐溶于步骤(1)所得乳液中形成胶束；
(3)将步骤(2)所得两种胶束混合，乙烯基官能化透明质酸或其钠盐与巯 基官能化透明质酸或其钠盐交联形成水凝胶，甾体类药物分散在水凝胶中。
优选地，进一步包括去除水的步骤。
优选地，所述甾体类药物为糖皮质激素类药物，最优选二丙酸倍他米松、倍 他米松、地塞米松或它们的可药用盐。
优选地，所述乙烯基官能化透明质酸选自A1、A2、A3或他们的混合物。进 一步优选，重均分子量为10-2000kDa，更进一步优选200-800kDa，更进一步 优选400-600kDa，更进一步优选400-500kDa，例如450kDa。
优选地，所述巯基官能化透明质酸选自如下B1、B2、B3或他们的混合物。 进一步优选，重均分子量为10-2000kDa，更进一步优选200-800kDa，更进一 步优选400-600kDa，更进一步优选400-500kDa，例如450kDa。
优选地，所述乙烯基官能化透明质酸或其钠盐和所述巯基官能化透明质酸 或其钠盐的质量比为10：1至1：10。
优选地，所述水凝胶与甾体类药物的质量比为20：1至2：1，进一步为4： 1。
优选地，所述水凝胶与吐温80的质量比为20：1至20：3，进一步为10： 1。
在含水的药物组合物中，优选地，所述水凝胶的质量体积百分比为0.5％至 3％，进一步为2％。
在含水的药物组合物中，优选地，所述甾体类药物的质量体积百分比为0.1％ 至1％，进一步为0.5％。
在含水的药物组合物中，优选地，所述吐温80的质量体积百分比为0.05％ 至0.5％，进一步为0.1％。
优选地，缓冲盐为中性缓冲盐，最优选磷酸缓冲盐。
根据本发明的另一个方面，本发明提供上述方法制备得到的药物组合物。
根据本发明的另一个方面，本发明提供上述药物组合物在制备治疗颈椎、腰 椎或关节退行性疾病中的用途。优选地，所述疾病为颈腰椎间盘突出症、盘源性 腰痛、退行性脊柱疾患、骨关节炎、和/或肩周炎等。
本领域技术人员可以理解，本发明提供的上述药物组合可以是冻干剂、注射 剂和软膏剂等。冻干剂可在临床使用前溶于溶媒后注射。注射剂和软膏剂可为预 制上述药物组合的凝胶，预填充于注射针中。
根据本发明的另一个方面，本发明提供一种治疗颈椎、腰椎或关节退行性疾 病的方法，其特征在于，给予有需要的人治疗有效剂量的上述药物组合物。优选 地，所述疾病为颈腰椎间盘突出症、盘源性腰痛、退行性脊柱疾患、骨关节炎、 和/或肩周炎等。
本发明的优点在于本产品具有较好的粘弹性、缓冲性以及生物相容性的特 点，并且具有甾体类药物的抗炎特性，能够在体内达到长效稳定缓释的效果，减 少患者因多次注射而带来的痛苦。
附图说明
图1为实施例1制备的水凝胶的流变仪检测结果，其中图1A为不同频率下 水凝胶储能模量(G’)和损耗模量(G”)的变化情况；图1B为不同振荡应变下 水凝胶储能模量(G’)和损耗模量(G”)的变化情况；
图2为实施例8扫描电镜图；
图3为实施例9细胞毒性检测结果；
图4为实施例10抑制NF-κB信号通路的活化结果，其中图4A中p-P65/P65 比值越高，表明NF-κB信号通路的活化越明显，图4B中IκBα蛋白水平越低， 表明NF-κB信号通路的活化越明显；
图5为实施例11动物实验结果，其中图5A为实验时间，图5B为von Frey 试验结果，图5C为Hargreaves试验结果。
具体实施方式
以下参照具体的实施例来说明本发明。本领域技术人员能够理解，这些实施 例仅用于说明本发明，其不以任何方式限制本发明的范围。
下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所 用的原料、试剂材料等，如无特殊说明，均为市售购买产品。
实施例1水凝胶的制备
乙烯基官能化透明质酸和巯基官能化透明质酸在pH中性的缓冲盐溶液中， 通过硫醇和C＝C双键间的迈克尔加成反应进行交联，形成水凝胶。具体来说， 将分子量均为450kDa的三种乙烯基官能化透明质酸A1、A2、A3及三种巯基官 能化透明质酸B1、B2、B3分别按质量体积浓度2％(w/v)称取并溶于磷酸缓冲 盐溶液中，然后将对应数字编号的官能化透明质酸按照1：1的比例混合制备水 凝胶，分别命名为R1、R2和R3。通过流变仪检测，图1展示了水凝胶在不同频 率和不同振荡应变情况下的储能模量(G’)和损耗模量(G”)的变化情况，由 图可以看出在频率为1Hz和振荡应变为1％的情况下，三种水凝胶的储能模量均 低于600Pa，符合硬膜外注射和关节内注射的标准(图1A和图1B)。
实施例2不同药物浓度的药物组合物的制备
将吐温80、二丙酸倍他米松(BD)共同分散于磷酸缓冲盐溶液中，形成BD 浓度分别为1mg/mL(BD1)、5mg/mL(BD2)、10mg/mL(BD3)，吐温80 浓度均为1mg/mL(T1)的乳液；随后分别使用上述乳液以2％(w/v)的浓度溶 解分子量均为450kDa的乙烯基官能化透明质酸A2及巯基官能化透明质酸B2， 然后将其按1：1的比例混合得到三组药物组合物水凝胶并分别命名为BD1-R2- T1、BD2-R2-T1和BD3-R2-T1。
实施例3不同药物组合物的制备
将二丙酸倍他米松(BD)、地塞米松(DX)分别与吐温80共同分散于磷 酸缓冲盐溶液中，形成BD或DX浓度为5mg/mL(BD2或DX2)，吐温80浓 度均为1mg/mL(T1)的乳液；随后分别使用前述乳液以2％(w/v)的浓度溶解 分子量均为450kDa的三种乙烯基官能化透明质酸A1、A2、A3及三种巯基官能 化透明质酸B1、B2、B3，将对应数字编号的官能化透明质酸按照1：1的比例混 合得到六组药物组合物水凝胶并分别命名为BD2-R1-T1、BD2-R2-T1、BD2-R3-T1、DX2-R1-T1、DX2-R2-T1和DX2-R3-T1。
实施例4不同吐温浓度的药物组合物的制备
将吐温80、二丙酸倍他米松(BD)共同分散于磷酸缓冲盐溶液中，形成吐 温浓度分别为1mg/mL(T1)、2mg/mL(T2)、3mg/mL(T3)、BD浓度均为 5mg/mL(BD2)的乳液；随后分别使用上述乳液以2％(w/v)的浓度溶解分子 量均为450kDa的乙烯基官能化透明质酸A2及巯基官能化透明质酸B2，然后将 其按1：1的比例混合得到三组药物组合物水凝胶并分别命名为BD2-R2-T1、BD2- R2-T2和BD2-R2-T3。
实施例5透明质酸钠药物组合物的制备
将吐温80、二丙酸倍他米松(BD)共同分散于磷酸缓冲盐溶液中，随后将 1mL质量体积浓度为2％，分子量分别为100kDa，450kDa和1000kDa的透明 质酸钠磷酸缓冲盐溶液与1mL前述乳液混合形成胶束，使其中BD浓度均为5 mg/mL(BD2)，吐温80浓度均为1mg/mL(T1)，对得到的三组药物组合物分别 命名为BD2-HA100-T1、BD2-HA450-T1和BD2-HA1000-T1。
实施例6药物组合物在体外磷酸缓冲盐溶液中的降解
实施例2、3、4、5制备的药物组合物去除表面水份后所得水凝胶及透明质 酸样品进行称重，记录初始重量(W0)，随后将其与磷酸缓冲盐溶液的质量体积 比为(0.2g:5mL)浸润在磷酸盐缓冲液中，于37℃恒温震荡孵育(150rpm)。 于预定时间点取出称重(Wt)，直至水凝胶完全降解(Wt-W0＝0)，并记录降解 周期(表1)。结果表明在磷酸缓冲盐的中性环境中，水凝胶逐步溶胀，表现为凝 胶质量随时间延长而增加。6-8周后，所有水凝胶在磷酸缓冲盐溶液中降解成小 颗粒，无固定形态。实施例4中的3个水凝胶的降解速度随加入吐温80浓度的 增加而变快，但降解时间也基本在6-7周左右。实施例5中的未交联透明质酸药 物组合物在刚开始达到近乎完全溶解，没有体现出缓释的效果，说明高中低分子 量未交联的HA溶液不适合用作药物缓释。
表1
Figure BDA0003700769950000081
Figure BDA0003700769950000091
实施例7药物组合物的释放速率检测
实施例2、3、4、5制备的药物组合物去除表面水份后所得水凝胶及透明质 酸样品按照样品与磷酸盐缓冲液溶液的质量体积比为0.2g:5mL，分别置于含 有磷酸盐缓冲液的离心管中，于37℃恒温震荡孵育(50rpm)。于预定时间点将 上清液取出，并替换等量新鲜的磷酸盐缓冲液，上清液过滤后使用HPLC检测 其中BD或DX的含量。结果表明，在磷酸盐缓冲液中，实施例2中BD的释放 随着其浓度增加而增多。实施例3水凝胶负载的BD或DX可实现长效且稳定 释放，42天的累计释放量约为总量的20％(表2)。实施例4中BD的释放随着 加吐温80浓度的减少而变慢。实施例5中的药物组合物在刚开始达到近乎完全 释放，没有体现出缓释的效果，并说明高中低分子量未交联的HA溶液均不适合 用作药物缓释。
表2
Figure BDA0003700769950000092
实施例8药物组合物在电镜下的结构
将实施例2中制备的药物组合物BD2-R2-T1去除水后所得样品沿矢状面切 成薄片(≤1mm)，置于SEM检测碳纤维膜上，使用液氮快速冷冻1分钟后冻 干处理24小时。冻干样品经喷金处理后于扫描电镜下观察水凝胶切片的内部结 构，可见颗粒状药物分散于水凝胶中。结果见图2。
实施例9药物组合物的细胞毒性检测
本实施例采用CCK-8试验方法对药物组合物的细胞毒性进行检测。CCK-8 是一种基于WST-8的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的检测试剂，WST-8(2- (2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐)在电子 载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯(1-Methoxy PMS)存在的情况下，被线 粒体中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的橙黄色甲瓒产物(formazan)。我们将 实施例2制备的BD1-R2-T1、BD2-R2-T1和BD3-R2-T1水凝胶与RAW264.7细胞系 分别共培养24、48和72小时，随后去除水凝胶，加入CCK-8试剂，孵育2小 时后用酶标仪测定在450nm处的吸光度。若细胞增殖越多越快，颜色越深；细胞毒性越大，则颜色越浅，颜色的深浅与活细胞的数量成正比，因此可利用这一 特性直接进行细胞增殖和毒性分析。二甲基亚砜(DMSO)具备一定细胞毒性， 培养基中加入10％DMSO促进细胞死亡作为阳性对照。实验结果表明，本发明 的水凝胶细胞存活比例与不加水凝胶的对照组无明显差异，相较于阳性对照 DMSO组细胞存活比例显著升高，表明其生物安全性良好，无细胞毒性(图3)。
实施例10药物组合物抑制NF-κB信号通路的活化
为验证药物组合物是否可以长效抑制与炎症反应密切相关的NF-κB信号通 路的活化，我们通过检测NF-κB信号通路的关键蛋白IκBα、p-P65和P65表达 水平表征该信号通路的活化情况。若IκBα蛋白水平越低、p-P65/P65比值越高， 则表明NF-κB信号通路的活化越明显。将实施例2制备的BD2-R2-T1水凝胶加 到无细胞培养基中，对照组为不加LPS和BD2-R2-T1水凝胶作为阴性对照，LPS 组仅加入LPS而不加BD2-R2-T1水凝胶作为阳性对照。为检测添加了BD2-R2-T1水凝胶的培养基是否可以抑制RAW264.7巨噬细胞系的炎症反应，分别在2小 时、24小时、3天和7天收集并替换培养基，将收集的培养基用于培养RAW264.7 细胞系，12小时后加入LPS刺激RAW264.7并继续培养6小时，收集培养的细 胞用western blot检测NF-κB信号通路的活化情况：在收集的细胞中，加入RIPA 裂解液后超声破碎细胞并离心，收集上清液。通过蛋白定量来确定收集到的上清 中每一个样品蛋白的浓度，用5x loadingbuffer调节蛋白含量一致，置于95℃金 属浴中5分钟使蛋白变性。随后将制备的蛋白样品加入至SDS-PAGE凝胶，通 过电泳、转膜、抗体孵育等一系列流程，使用蛋白电泳成像仪确定每一个条带的 灰度值，通过比较灰度值计算不同样品之间蛋白含量的差异。结果表明，相较于 LPS组，添加有BD2-R2-T1水凝胶的培养基可以在7天内抑制NF-κB信号通路 中关键蛋白p-P65水平，上调NF-κB抑制蛋白IκBα的表达水平(图4)，证实了 该水凝胶可以通过缓释BD抑制NF-κB信号通路的活化。
实施例11药物组合物硬膜外注射抑制LDH引起的下肢放射痛
为探究药物组合物硬膜外注射对LDH引起的下肢放射痛的影响，在构建 LDH模型的同时在DRG周围注射了药物组合物，在术后3周内检测该水凝胶 对下肢放射痛的影响。
实验动物：C57BL/6J小鼠，8-12周龄，8-10只/组。
分组：1.假手术组；2.LDH组；3.R2-T1组；BD2组；4.BD2-R2-T1组。
建模方法：腹腔注射0.1mg/g剂量戊巴比妥钠麻醉小鼠，并俯卧位固定于 手术台面，备皮并消毒，暴露腰椎区域。以腰4/5椎体为中心，取后正中切口， 长约1.5cm，钝性分离左侧椎旁肌，显露椎板，剪除内侧部分L4/5关节突及部 分椎板，显露L4神经根及硬膜囊；将取自供体的退变髓核组织填塞于L4 DRG 神经根和硬膜囊交界处的腋部，随后注射如下药物，注射完成后逐层缝合切口。 行为学检测采用von Frey和Hargreaves试验。
给药方法，在供体髓核组织填塞后，使用30G针头注射器分别注射如下药 物：1.假手术组，暴露神经根后注射20μL生理盐水；2.LDH组，造模后注射 20μL生理盐水；3.R2-T1组，造模后注射20μL含1mg/mL吐温80的R2水凝 胶；BD2组注射5mg/mL的BD溶液20μL；4.BD2-R2-T1组注射20μL含实施 例2制备的BD2-R2-T1。
von Frey试验：先将小鼠放在金属网上适应30min，利用一系列作用力从小 到大的von Frey细丝分别刺激小鼠足底，当小鼠出现明显缩足反应时，利用低 一档von Frey细丝继续刺激；当小鼠无明显反应时，利用高一档von Frey细丝 继续刺激。以此记录小鼠连续5次刺激后的反应，并根据Up and down方法计算 小鼠机械痛痛阈(Dixon WJ.The up-and-down Method for Small Samples.Journal of the American StatisticalAssociation.1965；60(312):967-978.)。实验时间及结果分 别见图5A和图5B。
Hargreaves试验：检测前将小鼠放在有机玻璃上适应30min，利用适当强度 的可见光辐照小鼠足底，当小鼠出现明显撤足反应时，立即停止辐照并记录给予 辐照的时间。实验时间及结果分别见图5A和图5C。
通过行为学检测，使用单因素方差分析和Bonferroni参数后检验比较分析 同一时间点各组内行为学数据结果。结果显示，单纯注射BD药物仅缓解了术后 第一天机械性痛觉超敏和热痛觉过敏，但是BD2-R2-T1显著缓解术后1周的机械 性痛觉超敏和热痛觉过敏，表明BD2-R2-T1显著缓解了LDH诱发的下肢放射痛， 有效时间显著长于单纯的药物注射(图5)。

Claims (10)

1.一种药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包含乙烯基官能化透明质酸或其钠盐和巯基官能化透明质酸或其钠盐交联形成的水凝胶、分散在水凝胶中的甾体类药物、吐温80、以及缓冲盐或其水溶液。
2.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述甾体类药物为糖皮质激素类药物。
优选地，所述甾体类药物为二丙酸倍他米松、倍他米松、地塞米松或它们的可药用盐。
优选地，所述缓冲盐为中性缓冲盐，最优选磷酸缓冲盐。
3.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述乙烯基官能化透明质酸选自如下A1、A2、A3或它们的混合物
Figure FDA0003700769940000011
优选地，重均分子量为10-2000kDa，进一步优选200-800kDa，更进一步优选400-600kDa，更进一步优选400-500kDa，例如450kDa。
4.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述巯基官能化透明质酸选自如下B1、B2、B3或它们的混合物
Figure FDA0003700769940000021
优选地，重均分子量为10-2000kDa，进一步优选200-800kDa，更进一步优选400-600kDa，更进一步优选400-500kDa，例如450kDa。
5.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述乙烯基官能化透明质酸或其钠盐和所述巯基官能化透明质酸或其钠盐的质量比为10：1至1：10。
优选地，所述水凝胶与甾体类药物的质量比20：1至2：1，进一步为4：1。
优选地，所述水凝胶与吐温80的质量比为20：1至20：3，进一步为10：1。
6.如权利要求5所述的药物组合物，其特征在于，在含水的药物组合物中，所述水凝胶的质量体积百分比为0.5％至3％，进一步为2％。
优选地，所述甾体类药物的质量体积百分比为0.1％至1％，进一步为0.5％。
优选地，所述吐温80的质量体积百分比为0.05％至0.5％，进一步为0.1％。
7.如权利要求1-6中任一项所述的药物组合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)将甾体类药物、吐温80分散于缓冲盐溶液中，形成乳液；
(2)分别将乙烯基官能化透明质酸或其钠盐和巯基官能化透明质酸或其钠盐溶于步骤(1)所得乳液中形成胶束；
(3)将步骤(2)所得两种胶束混合，乙烯基官能化透明质酸或其钠盐与巯基官能化透明质酸或其钠盐交联形成水凝胶，甾体类药物分散在水凝胶中。
优选地，进一步包括去除水的步骤。
8.如权利要求7所述的方法制备得到的药物组合物。
9.如权利要求1-6中任一项所述的药物组合物在制备治疗颈椎、腰椎或关节退行性疾病中的用途。
10.如权利要求9所述的用途，其特征在于，所述疾病为颈腰椎间盘突出症、盘源性腰痛、退行性脊柱疾患、骨关节炎、和/或肩周炎。
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