CN115232195A - 寡肽二维纳米材料及其应用 - Google Patents

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CN115232195A CN202210879524.7A CN202210879524A CN115232195A CN 115232195 A CN115232195 A CN 115232195A CN 202210879524 A CN202210879524 A CN 202210879524A CN 115232195 A CN115232195 A CN 115232195A
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李宇欣
王晴
江玉莲
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Abstract

本发明公开了一种寡肽二维纳米材料，寡肽中加入多价交联剂PO4 3‑自组装形成的二维纳米块即为所述材料；所述寡肽的结构式如式1‑式4所示。本发明的二维纳米材料作为载药材料具有载药效率高、生物相容性高的优点。本发明的二维纳米材料实现对药物的高效包裹后，可以通过胞吞的方式将药物运输到细胞内。

Description

寡肽二维纳米材料及其应用
技术领域
本申请涉及生物医药领域，具体而言，涉及一种寡肽二维纳米材料及其应用。
背景技术
目前大多数药物，尤其是不溶性(或微溶)抗肿瘤药物，如姜黄素、阿霉素、米托蒽醌、紫杉醇、喜树碱等，在肿瘤治疗过程中多采用静脉注射法，这是由于它们在水溶性或生理环境中的溶解度较小，远达不到治疗肿瘤所需最低浓度；若采用口服途径，这些药物的生物利用率较低，通常不足2％。然而，水溶性抗肿瘤药物的开发仍然非常贫瘠，且利用现有技术增强抗肿瘤药物水溶性的效果仍不能达到理想状态，这极大限制了上述抗肿瘤药物的实际应用。
研发水溶性载药体来克服药物不溶性和低利用率是实现高效抗肿瘤的有效途径之一。据报道纳米载体已被证明是抗肿瘤药物递送到胞内的有效策略(Cao Yu，et.al.“Self-Synthesizing Nanorods from Dynamic Combinatorial Libraries against DrugResistant Cancer”，Angew.Chem.Int.Ed.2021,60,3062.)。然而，目前报道的纳米药物载体大多数是高分子聚合物和蛋白聚集体(Liu Chong,et.al.“Synthesis of CopolymersPolyethyleneimine-co-Polyphenylalanine as Gene and Drug Codelivery Carrier”Macromol.Biosci.2021,21,2100033；Luo Han,et.al.“Non-covalent assembly ofalbumin nanoparticles by hydroxyl radical:A possible mechanism of the nabtechnology and a one-step green method to produce protein nanocarriers”Chem.Eng.J.2021,404,126362.)，虽然可以实现药物载送的目的，但仍然存在一定的缺点，例如高分子聚集体的生物相容性差、释放药物后不易降解等；蛋白分子的制备复杂，成本高，存在免疫原性等，仍无法达到理想的治疗效果。因此，亟待开发一种合成简单、载药率高、生物相容性好、易降解的纳米载药体。
寡肽是一种具有残基可调、序列多异、可批量合成等优点的生物小分子，是开发纳米功能材料的理想之选。寡肽分子的链长较短，空间结构简单，具有合成成本低的优点。其次，相较于高分子与蛋白体系，寡肽序列还具有组成多样性，序列可调，组装形态丰富，生物相容性良好、可降解，生物活性高等优点，以寡肽为构筑基元制备生物纳米载药体具有明显的优势。然而，目前寡肽自组装形成的纳米载药体较少，载药效率不高，且未出现二维结构载药体，因此提供一种能够高效载药且毒性风险低的肽基纳米载体及其制备方法是本技术领域亟待解决的问题。
发明内容
本发明提供了一种寡肽二维纳米材料，寡肽中加入多价交联剂PO4 3-自组装形成的二维纳米块即为所述材料；
所述寡肽的基本结构是由弱疏水性氨基酸(如缬氨酸V，亮氨酸L，异亮氨酸I)，亲水性氨基酸(如天冬酰胺N，谷氨酰胺Q，苏氨酸T，半胱氨酸C，丝氨酸S)和碱性氨基酸(如赖氨酸K、精氨酸R)构成。其中，所有的碱性氨基酸位于寡肽链的一端，所有疏水氨基酸位于寡肽链的一侧(用R1表示)，中心位置氨基酸为丝氨酸或半胱氨酸，其它亲水氨基酸位于寡肽链的另一侧(用R2表示)，其结构式如下式1-式4中任一项或多项所示：
Figure BDA0003763712880000031
式中，R1代表弱疏水残基，选自缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸残基中的任意一种或几种；R2代表亲水残基，选自天冬酰胺、谷酰氨酸、苏氨酸、半胱氨酸、丝氨酸残基中的任意一种或几种。
二维纳米材料的制备方法包括：控制寡肽溶液(将寡肽粉末溶于二次蒸馏水中获得浓度为2～5mM的澄清溶液)中的碱性氨基酸与多价PO4 3-的摩尔数比例为1:2～4:1，室温震荡条件下将多价PO4 3-水溶液加入到寡肽水溶液中，控制寡肽最终浓度为0.5～1.5mM，pH值为5.6～7.6，上述溶液在25～37℃下静置6～24h，寡肽分子借助自身间的疏水作用和氢键作用、侧链亲水残基间氢键作用以及与多价PO4 3-间的静电相互作用自组装形成长宽在纳米尺度的二维块状聚集体，即为所述寡肽二维纳米材料；
其中，所述碱性氨基酸为赖氨酸或精氨酸；所述多价PO4 3-水溶液为H3PO4、Na3PO4或K3PO4溶液。
根据所设计的寡肽的结构式，采用微波辅助固相法合成所述寡肽。
具体的，以酰胺树脂为固相载体，9-芴甲氧羰基(Fmoc)保护的氨基酸为原料，超干的N,N-二甲基甲酰胺(DMF,99.5％)为反应溶剂，苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(HBTU,99.3％)和N,N-二异丙基乙胺(DIPEA，98％)分别为氨基酸缩合偶联反应的偶联试剂和活化剂，偶联后选干燥的哌啶切掉保护基团；依据寡肽链序列交替缩合偶联9-芴甲氧羰基保护的氨基酸与切除保护基团。待偶联反应结束后，再加入到三氟乙酸、苯甲醚、蒸馏水、三异丙基硅烷(体积比：80：8：8：4)的混合溶液(4mL)。室温搅拌5h，然后在10mL冰乙醚中沉淀，收集沉淀即为寡肽粗产物。然后通过高效液相色谱(C18反向柱)进行梯度洗脱，结合基质辅助激光电离飞行时间质谱进行检测，所得滤液冻干后即为寡肽粉末。
所述9-芴甲氧羰基保护的氨基酸选自Fmoc-叔丁基氧羰基-精氨酸、Fmoc-缬氨酸、Fmoc-异亮氨酸、Fmoc-[S-(4-甲基苯基)二苯基甲基]-半胱氨酸、Fmoc-N-三苯甲基-谷酰氨酸、Fmoc-O-叔丁基-丝氨酸、Fmoc-O-叔丁基-苏氨酸、Fmoc-N-三苯甲基-天冬酰胺、Fmoc-亮氨酸、Fmoc-叔丁基氧羰基-赖氨酸。
所述寡肽的序列按照从N端到C端的顺序为如下任选一种或多种：KKQVNCQVNVT-NH2；KKQLNCQLNLT-NH2；KKQINCQINIT-NH2；KKQVNSQVNVT-NH2；KKQLNSQLNLT-NH2；KKQINSQINIT-NH2；KKQVQCQVQVT-NH2；KKQLQCQLQLT-NH2；KKQIQCQIQIT-NH2；KKNVNCNVNVT-NH2；KKNLNCNLNLT-NH2；KKNINCNINIT-NH2；RRQVNCQVNVT-NH2；RRQLNCQLNLT-NH2；RRQINCQINIT-NH2；RRQVNSQVNVT-NH2；RRQLNSQLNLT-NH2；RRQINSQINIT-NH2；RRQVQCQVQVT-NH2；RRQLQCQLQLT-NH2；RRQIQCQIQIT-NH2；RRNVNCNVNVT-NH2；RRNLNCNLNLT-NH2；RRNINCNINIT-NH2；其中，K代表赖氨酸，R代表精氨酸，V代表缬氨酸，L代表亮氨酸，I代表异亮氨酸，N代表天冬酰胺，Q代表谷酰氨酸，T代表苏氨酸，C代表半胱氨酸，S代表丝氨酸。
本发明还提供一种前述的寡肽二维纳米材料作为药物载体的应用。
具体的，所述药物为抗肿瘤药物；可选自姜黄素、阿霉素、米托蒽醌、紫杉醇、喜树碱。
所述寡肽二维纳米材料与药物的摩尔比为2:1-4:1；优选的，所述寡肽二维纳米材料与药物的摩尔比为4:1。
本发明的有益效果包括：
本发明所涉及的寡肽能够在磷酸根的诱导下形成二维纳米材料，这是由于寡肽链的主链间氢键、亲水残基间的氢键、碱性氨基酸残基与磷酸根之间的静电作用、以及弱疏水残基间的疏水作用促使寡肽分子自组装形成二维纳米块，寡肽主链间的氢键作用和寡肽一侧的弱疏水残基的堆积促使寡肽朝x轴方向生长；寡肽另一侧的亲水残基也会形成大量氢键，促使寡肽朝y轴方向生长；末端的碱性氨基酸与磷酸根通过静电作用交联促使寡肽朝z轴方向生长，从而形成厚约37nm，长宽约110nm的二维纳米块，并且二维纳米块中含有大量的疏水区，不溶性或微溶性的药物分子可以被包裹在大量的疏水区中，因此本发明的二维纳米材料作为载药材料具有载药效率高、生物相容性高的优点，本发明的二维纳米材料实现对药物的高效包裹后，可以通过胞吞的方式将药物运输到细胞内。
附图说明
图1为本发明实施例1中KKQVNCQVNVT-NH2的基质辅助激光解析飞行时间质谱图；
图2为本发明实施例1中寡肽(KKQVNCQVNVT-NH2)与PO4 3-自组装前后寡肽的圆二色谱图；
图3为本发明实施例1中寡肽(Pep)与PO4 3-自组装前后的TEM图以及组装体Pep-PO4 3-的SEM(c)和AFM(d)图；其中图a为组装前的TEM图，图b为组装后的TEM图，图c为组装体Pep-PO4 3-的SEM图，图d为组装体Pep-PO4 3-的AFM图；
图4为本发明实施例1中染料Tht滴定单独寡肽、二维纳米组装体Pep-PO4 3-的荧光谱图；
图5为本发明实施例1中二维纳米组装体Pep-PO4 3-的粒径分布图；
图6为本发明实施例1中寡肽无规则纳米球和二维纳米组装体Pep-PO4 3-培养小鼠成纤维细胞7天后的激光共聚焦显微镜图；
图7为本发明实施例1中寡肽无规则纳米球和二维纳米组装体Pep-PO4 3-的细胞存活率；
图8为本发明实施例1中单独寡肽与二维纳米组装体Pep-PO4 3-负载姜黄素的载药率图；
图9为本发明实施例1中单独寡肽与二维纳米组装体Pep-PO4 3-负载不同药物的载药率图；其中，(a)为负载阿霉素；(b)为负载米托蒽醌；(c)为负载紫杉醇；(d)为负载喜树碱；
图10为实施例3中单独寡肽和二维纳米组装体Pep-PO4 3-负载姜黄素后进入酿酒酵母细胞的激光共聚焦显微镜图；其中，a为单独寡肽载药后进酿酒酵母细胞的激光共聚焦显微镜的暗场(左)和亮场(右)图；b为二维纳米组装体Pep-PO4 3-载药(姜黄素)后进酿酒酵母细胞的激光共聚焦显微镜的暗场(左)和亮场(右)图；
图11为实施例3中单独寡肽和二维纳米组装体Pep-PO4 3-负载阿霉素后进入海拉细胞的激光共聚焦显微镜图；其中，a为寡肽载药阿霉素后进入海拉细胞的激光共聚焦显微镜图及其局部放大图；b为二维纳米组装体Pep-PO4 3-载药阿霉素后进入海拉细胞的激光共聚焦显微镜图及其局部放大图；
图12为不同寡肽与PO3 4-共组装形成二维纳米结构的SEM图。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明进行进一步说明和描述，但所描述的实施例仅仅是本发明的一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明和实施例中，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他发明和实施例，都属于本发明保护的范围。
下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。
下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
实施例1、寡肽KKQVNCQVNVT-NH2二维纳米材料的制备
制备方法包括：
(1)采用微波辅助固相法合成寡肽KKQVNCQVNVT-NH2：
活化树脂：用5mL二氯甲烷溶胀150mg固相载体(酰胺树脂)，5h后抽滤掉二氯甲烷，然后加入1.5mL超干的DMF(含1/5体积的哌啶)搅拌100s，通过脱掉Fmoc基团使树脂活化，抽滤，再次加入1.5mL超干的DMF(含1/5体积的哌啶)搅拌100s进行活化树脂，用DMF和二氯甲烷依次洗涤三次。
氨基酸偶联：加入90mg Fmoc-叔丁基氧羰基-赖氨酸、90mg HBTU和70μL DIPEA，在1.5ml的超干DMF溶液中偶联5min，抽滤，用DMF和二氯甲烷洗涤三次。再次加入等量的Fmoc-叔丁基氧羰基-赖氨酸、HBTU和DIPEA在超干DMF溶液中偶联5min，抽滤，用DMF和二氯甲烷洗涤三次。
Fmoc脱保护：向上述偶联了赖氨酸的树脂加入1.5mL超干的DMF(含1/5体积的哌啶)搅拌100s进行Fmoc脱保护，抽滤，再加入1.5mL超干的DMF(含1/5体积的哌啶)搅拌100s进行二次Fmoc脱保护，然后用DMF和二氯甲烷依次洗涤三次。
根据寡肽链的序列，依次进行偶联Fmoc-叔丁基氧羰基-赖氨酸，Fmoc脱保护，Fmoc-N-三苯甲基-谷酰氨酸，Fmoc脱保护，Fmoc-缬氨酸，Fmoc脱保护，Fmoc-N-三苯甲基-天冬酰胺，Fmoc脱保护，Fmoc-[S-(4-甲基苯基)二苯基甲基]-半胱氨酸，Fmoc脱保护，Fmoc-N-三苯甲基-谷酰氨酸，Fmoc脱保护，Fmoc-缬氨酸，Fmoc脱保护，Fmoc-N-三苯甲基-天冬酰胺，Fmoc脱保护，Fmoc-缬氨酸，Fmoc脱保护，Fmoc-O-叔丁基-苏氨酸、Fmoc脱保护后用DMF和二氯甲烷依次洗涤三次。
然后加入含有三氟乙酸、苯甲醚、蒸馏水、三异丙基硅烷(体积比：80：8：8：4)的混合溶液(4mL)。室温搅拌5h，然后在10mL冰乙醚中沉淀，收集沉淀即为寡肽粗产物。
然后通过高效液相色谱(C18反向柱)进行梯度洗脱，再用基质辅助激光电离飞行时间质谱进行检测，所得滤液冻干后即为寡肽粉末。结果如图1所示。图1数据表明我们采微波辅助固相法成功合成了阳离子寡肽KKQVNCQVNVT-NH2。
(2)将3mg寡肽(KKQVNCQVNVT-NH2)粉末溶于二次蒸馏水中获得浓度为3mM的澄清溶液，控制寡肽溶液中碱性氨基酸与多价PO4 3-的摩尔数比例为4:1，室温震荡下将多价PO4 3-水溶液逐滴缓慢加入到寡肽水溶液中，控制寡肽最终浓度为0.6mM，pH值为6.8，上述溶液在37℃下静置12h，寡肽分子借助自身间的疏水作用、氢键作用以及与多价PO4 3-间的静电相互作用自组装形成长宽在纳米尺度的二维块状聚集体，即组装体Pep-PO4 3-(寡肽-磷酸根)。
阳离子寡肽(KKQVNCQVNVT-NH2)与PO4 3-自组装前后寡肽的圆二色谱如图2所示.图2数据表明单独寡肽分子在水溶液中的二级结构为无规则构象，自组装形成无规则纳米小球(如图3中a所示)；当加入多价交联剂PO4 3-自组装后，寡肽分子在水溶液中的二级结构为β-sheet构象，自组装形成二维纳米块(如图中3b,c,d所示)。图3中，a图表明单独的寡肽以无规则构象存在于水溶液中，呈无规则的纳米球(～25nm)，b图表明与多价交联剂PO4 3-共组装后，寡肽以β-sheet构象在水溶液中的组装结构为长宽都是纳米级的二维纳米块(长宽为～120nm，厚为～37nm)。c图用SEM进一步证实Pep-PO4 3-自组装体为长宽约～120nm的二维纳米块；d图用AFM证明纳米块的厚为～37nm。从图5中也可以看出，水溶液中形成的二维纳米块Pep-PO4 3-的平均尺寸～120nm。
采用硫黄素T(Tht)染料滴定单独寡肽、组装体Pep-PO4 3-，结果如图4所示，表明染料Tht与Pep-PO4 3-结合后，在484nm处观察到明显的荧光增强现象，进一步表明PO4 3-促使寡肽以β-sheet构象存在。
实施例2、寡肽KKQVNCQVNVT-NH2二维纳米材料的生物相容性
先用含血清和青霉素的DMEM培养基孵育小鼠成纤维细胞，取100μL上述小鼠细胞接种到无菌孔板上，在含5％CO2的湿环境中(37℃)培养20小时。分别取100μL实施例1制备的寡肽溶液和寡肽二维块状聚集体添加到无菌试验板中，其浓度控制在1.0mM。分别培养24小时、48小时、72小时后取出部分溶液再加入100μL的MTT(3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴盐)溶液继续在37℃下培养5小时。去除多余的培养基后再用二甲基亚砜(DMSO)溶解晶体。最后用酶标仪检测溶液在570nm处的吸光度来计算活细胞数目。结果如图7所示，从图7中可以看出，小鼠成纤维细胞存活率为95％以上：表明二维纳米组装体Pep-PO4 3-具有较好的生物相容性。
将小鼠成纤维细胞接种于不同的孔板中，在37℃下孵育24小时后加入受试试剂(单独寡肽溶液、寡肽二维组装体)，继续培养7天时用荧光显微镜进行活细胞检测，检测前需要用缓冲溶液(PBS)洗涤细胞至少3次，再加入100μL Calcie-AM(钙黄绿素)/PI细胞双染试剂继续孵育40分钟。洗涤后用激光共聚焦倒置显微镜观察活细胞，结果如图6所示。从图6可以看出，单独寡肽、寡肽-磷酸根二维纳米组装体与小鼠成纤维细胞共培养7天后仍具有良好的生物相容性。
实施例3寡肽KKQVNCQVNVT-NH2二维纳米材料的载药率
将实施例1制备的单独寡肽溶液或寡肽二维块状组装体(0.6mM)与溶于二甲基亚砜的抗肿瘤药物(本实施例中采用的是姜黄素，100μM)分别按照1:2、1:1、2:1、3:1、4:1的摩尔比充分混匀3小时，再通过透析袋(分子量为500)除去未被包裹的药物，通过测量紫外吸光度进而求得载药率(二维组装体中药物质量/药物初始质量×100％)。
结果如图8所示，从图8中可以发现单独寡肽的载姜黄素率不足10％，而寡肽二维纳米组装体与姜黄素的摩尔比为4:1时，其载药率高达95％。可见本发明寡肽的二维纳米块结构能够有效提高其作为抗肿瘤药物载体的载药率。
采用相同的方法求得单独寡肽与二维纳米组装体Pep-PO4 3-分别负载、阿霉素、米托蒽醌、紫杉醇和喜树碱的载药率，结果如图9所示。从图9中可以发现当寡肽二维纳米组装体与药物的摩尔比为4:1时，其载药率同样高达95％左右。
实施例4寡肽KKQVNCQVNVT-NH2二维纳米材料的药物运输
将事先在培养基中孵育到对数期的酿酒酵母细胞和海拉细胞离心后再用PBS溶液洗涤三次，收集细胞再溶于培养基进行悬浮，随后取0.5mL细胞悬浮液加入到实施例3中单独寡肽和二维纳米组装体Pep-PO4 3-(3mL,0.6mM)载药后的溶液中，在37℃下继续培养5小时。最后将孵育后的载药细胞用PBS缓冲液洗涤三次。将洗涤后的细胞滴加到干净的无菌载玻片上用激光共聚焦倒置显微镜观察，结果如图10和图11所示。
图10为实施例3中单独寡肽和二维纳米组装体Pep-PO4 3-载药姜黄素后进入酿酒酵母细胞的激光共聚焦显微镜图，从图中可以看出，将姜黄素药物负载到二维纳米组装体中，其能够进入酵母菌细胞中(图10中b的暗场(左图)能看到酵母菌细胞说明姜黄素被载体送入酵母菌细胞内)，可以观察到明显的荧光，而未形成二维纳米组装体的单独寡肽负载姜黄素后未在胞内观察到荧光(图10中a的暗场(左图)中看不到酵母菌细胞说明姜黄素没有进入细胞内)，表明没有姜黄素药物进入细胞内，单独寡肽不能实现载药。)
图11为实施例3中单独寡肽和二维纳米组装体Pep-PO4 3-负载阿霉素后进入海拉细胞的激光共聚焦显微镜图；从图中可以看出，当阿霉素药物负载到二维纳米组装体(Pep-PO4 3-)中，胞内可观察到明显的荧光(图11b)，表明二维材料能够载药进入肿瘤细胞内，实现了药物运输，而未形成二维纳米组装体的单独寡肽负载阿霉素药物后未在胞内观察到荧光(图11a)，表明没有药物进入海拉细胞，单独寡肽不能实现载药。
实施例5不同寡肽与PO3 4-共组装形成二维纳米结构
采用与实施例1相同的微波辅助固相法合成(a)KKQVNCQVNVT-NH2、(b)KKQINCQINIT-NH2、(C)RRQVNCQVNVT-NH2、(b)RRQINCQINIT-NH2四种寡肽，得到寡肽粉末。
其中，所需天然氨基酸包括：Fmoc-叔丁基氧羰基-精氨酸、Fmoc-缬氨酸、Fmoc-异亮氨酸、、Fmoc-N-三苯甲基-谷酰氨酸、Fmoc-O-叔丁基-丝氨酸、Fmoc-O-叔丁基-苏氨酸、Fmoc-N-三苯甲基-天冬酰胺、Fmoc-叔丁基氧羰基-赖氨酸。
将寡肽粉末溶于二次蒸馏水中获得浓度为2～5mM的澄清溶液，控制寡肽溶液中碱性氨基酸与多价PO4 3-(H3PO4,Na3PO4,K3PO4)的摩尔数比例为1:2～4:1，室温震荡下将多价PO4 3-水溶液逐滴缓慢加入到寡肽水溶液中，控制寡肽最终浓度为0.5～1.5mM，pH值为5.6～7.6，上述溶液在25～37℃下静置6～24h，寡肽分子借助自身间的疏水作用、氢键作用以及与多价PO4 3-间的静电相互作用自组装形成长宽在纳米尺度的二维块状聚集体，即组装体Pep-PO4 3-(寡肽-磷酸根)。
图12为不同寡肽与PO3 4-共组装形成二维纳米结构的SEM图。从图中可以看出，不同寡肽皆能与磷酸根共组装形成二维纳米块。

Claims (10)

1.一种寡肽二维纳米材料，其特征在于，寡肽中加入多价交联剂PO4 3-自组装形成的二维纳米块即为所述材料；
所述寡肽的结构式如下式1-式4中任一项或多项所示：
Figure FDA0003763712870000011
式中，R1代表弱疏水残基，选自缬氨酸，亮氨酸，异亮氨酸中的任意一种或几种；R2代表亲水残基，选自天冬酰胺，谷酰氨酸，苏氨酸，半胱氨酸，丝氨酸残基中的任意一种或几种。
2.根据权利要求1所述的材料，其特征在于，控制寡肽溶液中的碱性氨基酸与多价PO4 3-的摩尔数比例为1:2～4:1，室温震荡条件下将多价PO4 3-水溶液加入到寡肽水溶液中，控制寡肽最终浓度为0.5～1.5mM，pH值为5.6～7.6，上述溶液在25～37℃下静置6～24h获得所述寡肽二维纳米材料；
其中，所述碱性氨基酸为赖氨酸或精氨酸。
3.根据权利要求2所述的材料，其特征在于，所述多价PO4 3-水溶液为H3PO4、Na3PO4或K3PO4溶液。
4.根据权利要求1所述的材料，其特征在于，根据所设计的寡肽的结构式，采用微波辅助固相法合成所述寡肽。
5.根据权利要求4所述的材料，其特征在于，以酰胺树脂为固相载体，9-芴甲氧羰基保护的氨基酸为原料，超干的N,N-二甲基甲酰胺为反应溶剂，苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐和N,N-二异丙基乙胺分别为氨基酸缩合偶联反应的偶联试剂和活化剂，偶联后选干燥的哌啶切掉保护基团；依据寡肽链序列交替缩合偶联9-芴甲氧羰基保护的氨基酸与切除保护基团；待偶联反应结束后，再加入到三氟乙酸、苯甲醚、蒸馏水、三异丙基硅烷的混合溶液搅拌，然后在冰乙醚中沉淀，收集沉淀即为寡肽粗产物；寡肽粗产物通过高效液相色谱进行梯度洗脱，所得洗脱液冻干后即为寡肽粉末。
6.根据权利要求5所述的材料，其特征在于，所述9-芴甲氧羰基(Fmoc)保护的氨基酸选自Fmoc-叔丁基氧羰基-精氨酸、Fmoc-缬氨酸、Fmoc-异亮氨酸、Fmoc-[S-(4-甲基苯基)二苯基甲基]-半胱氨酸、Fmoc-N-三苯甲基-谷酰氨酸、Fmoc-O-叔丁基-丝氨酸、Fmoc-O-叔丁基-苏氨酸、Fmoc-N-三苯甲基-天冬酰胺、Fmoc-亮氨酸、Fmoc-叔丁基氧羰基-赖氨酸。
7.根据权利要求1所述的材料，其特征在于，所述寡肽的序列按照从N端到C端的顺序为如下任选一种或多种：
KKQVNCQVNVT-NH2；KKQLNCQLNLT-NH2；KKQINCQINIT-NH2；KKQVNSQVNVT-NH2；KKQLNSQLNLT-NH2；KKQINSQINIT-NH2；KKQVQCQVQVT-NH2；KKQLQCQLQLT-NH2；KKQIQCQIQIT-NH2；KKNVNCNVNVT-NH2；KKNLNCNLNLT-NH2；KKNINCNINIT-NH2；RRQVNCQVNVT-NH2；RRQLNCQLNLT-NH2；RRQINCQINIT-NH2；RRQVNSQVNVT-NH2；RRQLNSQLNLT-NH2；RRQINSQINIT-NH2；RRQVQCQVQVT-NH2；RRQLQCQLQLT-NH2；RRQIQCQIQIT-NH2；RRNVNCNVNVT-NH2；RRNLNCNLNLT-NH2；RRNINCNINIT-NH2；其中，K代表赖氨酸，R代表精氨酸，V代表缬氨酸，L代表亮氨酸，I代表异亮氨酸，N代表天冬酰胺，Q代表谷酰氨酸，T代表苏氨酸，C代表半胱氨酸，S代表丝氨酸。
8.权利要求1-7任一项所述的寡肽二维纳米材料作为药物载体的应用。
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述药物为抗肿瘤药物；
具体的，所述药物为姜黄素、阿霉素、米托蒽醌、紫杉醇、喜树碱。
10.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述寡肽二维纳米材料与药物的摩尔比为2:1-4:1；
优选的，所述寡肽二维纳米材料与药物的摩尔比为4:1。
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