CN115227751A - 一种佛手瓜提取物的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及食品、医药化工的生产工艺技术领域，提出了一种佛手瓜提取物的制备方法，包括以下步骤：S1、向佛手瓜粉中加入水，并加入预处理剂，得到预处理混合物；S2、预处理混合物中加入稳定剂和纤维素酶处理后离心，得到粗提物；S3、将粗提物、浓缩、纯化、干燥，得到佛手瓜提取物通过上述技术方案，解决了现有技术中的佛手瓜提取物中的黄酮含量低、稳定性差的问题。
Description
技术领域
本发明涉及食品、医药化工的生产工艺技术领域，具体的，涉及一种佛手瓜提取物的制备方法。
背景技术
佛手瓜是一种葫芦科佛手瓜属植物，原产于墨西哥、中美洲和西印度群岛，1915年传入中国，在中国江南一带都有种植，以云南、贵州、浙江、福建、广东、四川、台湾最多。佛手瓜含有丰富的微量元素，还含有黄酮、多糖、果胶胡萝卜素等天然功能性成分，是一种具有营养价值的药食两用保健蔬菜。
黄酮类化合物是植物花、叶、根中的多酚类物质，具有抗氧化、抗衰老、降血糖、降血脂和预防心血管病等生理功能，可作为食品添加剂和功能性食品的原料，具有广泛的应用前景。
目前，对佛手瓜中黄酮的提取主要是利用乙醇进行提取，如专利申请号CN201610888096.9佛手瓜提取物的制备过程中，采用乙醇进行超声提取，但是黄酮类主要存在于植物细胞内，而植物细胞主要而细胞壁主要由纤维素构成，因此要使黄酮类物质从细胞内溶出到溶剂主体，必须先破坏植物的细胞壁或使细胞壁分解，才能有利于黄酮类物质的溶出，而且黄酮在制备过程中不稳定易被氧化。
发明内容
本发明提出一种佛手瓜提取物的制备方法，解决了相关技术中的佛手瓜提取物中的黄酮含量低、稳定性差的问题。
本发明的技术方案如下：
一种佛手瓜提取物的制备方法，包括以下步骤：
S1、向佛手瓜粉中加入水，并加入预处理剂，得到预处理混合物；
S2、预处理混合物中加入稳定剂和纤维素酶处理后离心，得到粗提物；
S3、将粗提物、浓缩、纯化、干燥，得到佛手瓜提取物；
所述步骤S1中预处理剂为对叔辛基苯酚聚氧乙烯醚。
作为进一步技术方案，所述步骤S1中佛手瓜粉为将佛手瓜洗净、切片、烘干、粉碎，过80目筛得到。
作为进一步技术方案，所述步骤S1中水的添加量为佛手瓜粉质量的5-8倍。
作为进一步技术方案，所述对叔辛基苯酚聚氧乙烯醚的添加量为水质量的3-5％。
作为进一步技术方案，所述步骤S2中的稳定剂为熊果酸和阿魏酸。
作为进一步技术方案，所述熊果酸和阿魏酸经无水乙醇稀释后加入到预处理混合物中，使预处理混合物中熊果酸浓度为0.005-0.01mol/kg，阿魏酸浓度为0.05-0.01mol/kg。
作为进一步技术方案，所述步骤S2中纤维素酶的添加量为预处理混合物质量的1％，酶解温度50℃，酶解时间50min；酶解后于85℃，灭酶20min。
作为进一步技术方案，所述步骤S3浓缩为减压浓缩，浓缩温度为60℃，浓缩至相对密度为1.18g/cm3。
作为进一步技术方案，所述步骤S3中纯化为，将浓缩液通过大孔吸附树脂柱，先用5倍柱体积的蒸馏水洗脱，再用60％的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液。
本发明的工作原理及有益效果为：
1、本发明在纤维素酶酶解前添加了对叔辛基苯酚聚氧乙烯醚对佛手瓜粉进行预处理，能提高纤维素酶的稳定性和活性，减少纤维素酶对佛手瓜粉的无效吸附，进而提高纤维素酶的酶解的速率和效果。采用酶解法能够改变细胞壁的通透性，细胞壁从而变得破裂、膨胀、疏松，增大细胞壁的通透性，达到高提取率的目的。
2、黄酮类化合物极不稳定，容易被氧化，本发明采用熊果酸和阿魏酸为稳定剂，对黄酮类化合物进行保护，通过添加熊果酸和阿魏酸可以在酶解过程中提高黄酮类化合物的热稳定性，进而提高提取物中黄酮含量。本发明也提高了佛手瓜提取物放置过程中的稳定性。
3、本方案通过添加对叔辛基苯酚聚氧乙烯醚作为酶解助剂，添加熊果酸和阿魏酸为稳定剂，在提高佛手瓜提取物中黄酮提取率的同时，又可以提高提取过程及放置过程中黄酮的稳定性。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都涉及本发明保护的范围。
实施例1-3中佛手瓜粉的制备过程均为：将佛手瓜洗净，切片、于60℃烘箱中烘干，粉碎过80目筛所得。
实施例1
一种佛手瓜提取物的制备方法，包括以下步骤：
S1、向佛手瓜粉中加入水，并加入对叔辛基苯酚聚氧乙烯醚，得到预处理混合物；其中水的添加量为佛手瓜粉质量的5倍，对叔辛基苯酚聚氧乙烯醚的添加量为水质量的5％
S2、向预处理混合物中加入无水乙醇稀释后的熊果酸、阿魏酸，使预处理混合物中熊果酸浓度为0.01mol/kg，阿魏酸浓度为0.08mol/kg；加入为预处理混合物质量的1％的纤维素酶，于50℃下酶解50min后，于85℃，灭酶20min，离心后得到粗提物。
S3、将粗提物在60℃下进行减压浓缩，浓缩至相对密度为1.18g/cm3后，将浓缩液通过大孔吸附树脂柱，先用5倍柱体积的蒸馏水洗脱，再用60％的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，真空干燥，得到佛手瓜提取物。
实施例2
一种佛手瓜提取物的制备方法，包括以下步骤：
S1、向佛手瓜粉中加入水，并加入叔辛基苯酚聚氧乙烯醚，得到预处理混合物；其中水的添加量为佛手瓜粉质量的7倍，对叔辛基苯酚聚氧乙烯醚的添加量为水质量的4％
S2、向预处理混合物中加入无水乙醇稀释后的熊果酸、阿魏酸，使预处理混合物中熊果酸浓度为0.008mol/kg，阿魏酸浓度为0.01mol/kg；加入为预处理混合物质量的1％的纤维素酶，于50℃下酶解50min后，于85℃，灭酶20min，离心后得到粗提物。
S3、将粗提物在60℃下进行减压浓缩，浓缩至相对密度为1.18g/cm3后，将浓缩液通过大孔吸附树脂柱，先用5倍柱体积的蒸馏水洗脱，再用60％的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，真空干燥，得到佛手瓜提取物。
实施例3
一种佛手瓜提取物的制备方法，包括以下步骤：
S1、向佛手瓜粉中加入水，并加入对叔辛基苯酚聚氧乙烯醚，得到预处理混合物；其中水的添加量为佛手瓜粉质量的8倍，对叔辛基苯酚聚氧乙烯醚的添加量为水质量的3％
S2、向预处理混合物中加入无水乙醇稀释后的熊果酸、阿魏酸，使预处理混合物中熊果酸浓度为0.005mol/kg，阿魏酸浓度为0.05mol/kg；加入为预处理混合物质量的1％的纤维素酶，于50℃下酶解50min后，于85℃，灭酶20min，离心后得到粗提物。
S3、将粗提物在60℃下进行减压浓缩，浓缩至相对密度为1.18g/cm3后，将浓缩液通过大孔吸附树脂柱，先用5倍柱体积的蒸馏水洗脱，再用60％的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，真空干燥，得到佛手瓜提取物。
实施例4
与实施例3相比，实施例4将熊果酸替换为等量的阿魏酸，其他与实施例3相同。
实施例5
与实施例1相比，实施例5对叔辛基苯酚聚氧乙烯醚的添加量为水质量的6％，其他与实施例1相同。
实施例6
与实施例3相比，实施例6将使预处理混合物中熊果酸浓度为0.005mol/kg，阿魏酸浓度为0.05mol/kg替换为使预处理混合物中熊果酸浓度为0.05mol/kg，阿魏酸浓度为0.005mol/kg，其他与实施例3相同。
对比例1
与实施例3相比，对比例1将对叔辛基苯酚聚氧乙烯醚替换为等量的吐温-80，其他与实施例3相同。
对比例2
与实施例3相比，对比例2不添加对叔辛基苯酚聚氧乙烯醚，其他与实施例3相同。
对比例3
与实施例3相比，对比例3不添加熊果酸和阿魏酸，其他与实施例3相同。
实验例1
测定实施例1-6和对比例1-3中粗提液中黄酮的提取率。
(1)总黄酮标准曲线的绘制：利用硝酸铝-亚硝酸钠比色法，以芦丁为标准品，对总黄酮标准曲线进行绘制。将芦丁标准品置于105℃的干燥箱中干燥至恒重，准确称取芦丁10mg,用80％乙醇定容至100mL的容量瓶中，得到100mg/L芦丁标准溶液。分别量取0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL的芦丁标准溶液于10mL的容量瓶中，分别加入0.3mL5％NaNO2溶液，摇匀，放置6mim后加入0.3mL10％Al(NO3)3溶液，摇匀，放置6min后再加4mL4％NaOH溶液，摇匀，放置20min后用80％乙醇定容，放置30min后分别测定其在510mm波长处的吸光度，以吸光度y为纵坐标，芦丁浓度x为横坐标，绘制标准曲线，将结果进行线性回归，得方程为y＝0.0114x+0.0016，相关系数R2＝0.9972。
(2)佛手瓜粗提液中黄酮含量测定
取一定量的佛手瓜粗提液加入到10mL容量瓶中定容，按上述方法添加相应的试剂，同时以蒸馏水做空白。测定510nm处的吸光度，代入吸光度与浓度的回归方程得浓度，计算得到粗提液中黄酮含量。用下式进行换算得黄酮的提取率。
佛手瓜总黄酮提取率(％)＝(b×V)/(m×103)×100
式中：m为佛手瓜的质量/g；b为回归方程计算的黄酮质量浓度/(mg·L)；V为提取液体积L。
表1实施例1-6、对比例1-3黄酮的提取率
| 黄酮提取率(％) | |
| 实施例1 | 4.55 |
| 实施例2 | 4.43 |
| 实施例3 | 4.35 |
| 实施例4 | 4.21 |
| 实施例5 | 4.25 |
| 实施例6 | 4.20 |
| 对比例1 | 4.15 |
| 对比例2 | 3.95 |
| 对比例3 | 3.92 |
通过表1可知，实施例1为本发明的最佳实施例，佛手瓜粗提物中黄酮的提取率为4.55％。
与实施例3相比，对比例1将对叔辛基苯酚聚氧乙烯醚替换为等量的吐温-80；对比例2不添加对叔辛基苯酚聚氧乙烯醚；实施例4将熊果酸替换为等量的阿魏酸；对比例3不添加熊果酸和阿魏酸；实施例6将使预处理混合物中熊果酸浓度为0.005mol/kg，阿魏酸浓度为0.05mol/kg替换为使预处理混合物中熊果酸浓度为0.05mol/kg，阿魏酸浓度为0.005mol/kg，得到的佛手瓜粗提物中黄酮的含量均小于实施例3。
与实施例1相比，实施例5增大对叔辛基苯酚聚氧乙烯醚的添加量，制得的佛手瓜粗提液中黄酮提取率变小，可能是增大对叔辛基苯酚聚氧乙烯醚的添加量对纤维素酶产生了抑制作用。
以上仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (9)
1.一种佛手瓜提取物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、向佛手瓜粉中加入水，并加入预处理剂，得到预处理混合物；
S2、预处理混合物中加入稳定剂和纤维素酶处理后离心，得到粗提物；
S3、将粗提物、浓缩、纯化、干燥，得到佛手瓜提取物；
所述步骤S1中预处理剂为对叔辛基苯酚聚氧乙烯醚。
2.根据权利要求1所述的一种佛手瓜提取物的制备方法，其特征在于，所述步骤S1中佛手瓜粉为将佛手瓜洗净、切片、烘干、粉碎，过80目筛得到。
3.根据权利要求1所述的一种佛手瓜提取物的制备方法，其特征在于，所述步骤S1中水的添加量为佛手瓜粉质量的5-8倍。
4.根据权利要求1所述的一种佛手瓜提取物的制备方法，其特征在于，所述对叔辛基苯酚聚氧乙烯醚的添加量为水质量的3-5％。
5.根据权利要求1所述的一种佛手瓜提取物的制备方法，其特征在于，所述步骤S2中的稳定剂为熊果酸和阿魏酸。
6.根据权利要求5所述的一种佛手瓜提取物的制备方法，其特征在于，所述熊果酸和阿魏酸经无水乙醇稀释后加入到预处理混合物中，使预处理混合物中熊果酸浓度为0.005-0.01mol/kg，阿魏酸浓度为0.05-0.01mol/kg。
7.根据权利要求1所述的一种佛手瓜提取物的制备方法，其特征在于，所述步骤S2中纤维素酶的添加量为预处理混合物质量的1％，酶解温度50℃，酶解时间50min；酶解后于85℃，灭酶20min。
8.根据权利要求1所述的一种佛手瓜提取物的制备方法，其特征在于，所述步骤S3浓缩为减压浓缩，浓缩温度为60℃，浓缩至相对密度为1.18g/cm3。
9.根据权利要求1所述的一种佛手瓜提取物的制备方法，其特征在于，所述步骤S3中纯化为，将浓缩液通过大孔吸附树脂柱，先用5倍柱体积的蒸馏水洗脱，再用60％的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液。
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