CN115216425B - 一株尼泊尔金黄杆菌及其在降解塑料中的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一株尼泊尔金黄杆菌及其在降解塑料中的应用，属于微生物技术领域。本发明首次从土壤中分离得到一株能够降解PVA和PLA的尼泊尔金黄杆菌(Chryseobacterium nepalense)AC3，其保藏编号为：CGMCC NO：24779。利用本发明的尼泊尔金黄杆菌(Chryseobacterium nepalense)AC3能够实现PVA和PLA塑料的无害化生物降解，对于塑料废弃物的处理而言具有十分重要的意义。

Description

一株尼泊尔金黄杆菌及其在降解塑料中的应用
技术领域
本发明涉及微生物技术领域，具体涉及一株尼泊尔金黄杆菌及其在降解塑料中的应用。
背景技术
塑料产品在为人类生活带来便利的同时，也给自然环境带来了严峻挑战。塑料的来源多种多样，不同塑料具有不同的性质和功能，其中：
聚乙烯醇(PVA)是一种水溶性合成聚合物，其分子式为(C2H4O)n。PVA及其衍生物广泛用于纸张、纺织品、粘合剂、涂料和薄膜的制造，此外其还被用作酶和生物医学应用的固定化载体。由于其广泛使用导致PVA塑料废弃物在环境中的积累已成为全球化的环境问题。由于PVA具有耐腐蚀、耐磨、耐酸碱等特性，导致PVA垃圾的降解利用十分困难。
当前PVA塑料废弃物的处理主要依靠填埋和焚烧，物理填埋对土壤和海洋环境造成了严重污染；而焚烧产生的二次污染物。PVA塑料污染修复可按处理方式不同，分为物理方法、化学方法和生物方法。物理和化学方法具有见效快的优点，但修复费用昂贵、生态效应不佳且具有次生污染的风险。而生物修复则可以将塑料组分转化为无害的无机化合物(水和二氧化碳)，具有费用低、效率高、生态友好的优点，被视为一项具有广阔前景的高新技术，近十几年来在国内外得到较好发展。
但因为PVA具有耐磨、疏水和持久的大分子结构，微生物对其的生物降解被认为非常困难。目前，国内外关于PVA生物降解的研究已报道的PVA降解菌株主要为假单胞菌属、芽孢杆菌属、青霉属、巴士微杆菌、Sphingopyxis sp.PVA3等种属，但这些降解菌的来源大多为污水、土壤、塑料废弃物、垃圾填埋场等，其本身所处生态环境较为复杂，使得这些降解菌的使用安全可能会存在风险。
聚乳酸(PLA)被认为是最具有潜力的替代现有塑料的新型生态材料之一而备受关注。但随着研究的不断深入，人们发现PLA虽然在许多物料化学和机械性能上要优于聚羟基丁酸酯(PHB)、聚己内酯(PCL)等材料，但其在自然界中的生物降解速率要比PHB和PCL缓慢的多，环境中能够降解PLA的微生物数量不到0.04％。
而且，目前对于PVA和PLA降解微生物的研究主要为混合菌和共生菌，但很少有纯菌株降解PVA和PLA的报道。
发明内容
针对上述现有技术，本发明的目的是提供一株尼泊尔金黄杆菌及其在降解塑料中的应用。本发明的尼泊尔金黄杆菌对PVA和PLA均具有降解能力；而且本发明的尼泊尔金黄杆菌分离自林地土壤，其使用安全性高。利用本发明的尼泊尔金黄杆菌能够实现对塑料的无害化生物降解。
为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
本发明的第一方面，提供一株尼泊尔金黄杆菌(Chryseobacterium nepalense)AC3，该菌株已于2022年4月26日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所)，其保藏编号为：CGMCC NO：24779。
所述尼泊尔金黄杆菌(Chryseobacterium nepalense)AC3分离自我国泰山南侧被塑料附着的土壤(地理坐标36.2056，117.1288)，其具有如下特征：
菌落为橙黄色不透明，圆形，湿润；在扫描电镜下观察，具有杆状细菌形态；革兰氏染色阴性。
含有上述尼泊尔金黄杆菌(Chryseobacterium nepalense)AC3的菌剂也属于本发明的保护范围。
上述菌剂中，所述尼泊尔金黄杆菌(Chryseobacterium nepalense)AC3可以以被培养的活菌或者活菌的发酵液形式存在。
优选的，所述发酵液由如下方法制备而成：
将尼泊尔金黄杆菌(Chryseobacterium nepalense)AC3的种子液接种至LB液体培养基中，28-37℃、160-200r/min的条件下进行发酵培养，培养至菌体浓度OD600＝0.8-1。
上述菌剂中，还可以含有其他活性成分，本领域技术人员可根据菌剂的使用效果确定其他活性成分的组成。
上述菌剂中还可以包括载体。所述载体可以草炭、竹炭粉、高岭土、硅藻土、膨润土、海藻酸钠等。
所述菌剂的剂型可以为液剂、粉剂、颗粒剂等。
本发明的第二方面，提供上述尼泊尔金黄杆菌(Chryseobacterium nepalense)AC3或菌剂在降解塑料中的应用。
上述应用中，优选的，所述塑料为PVA和/或PLA。
本发明的第三方面，提供一种降解PVA溶液的方法，包括以下步骤：
将待降解的PVA溶液与尼泊尔金黄杆菌(Chryseobacterium nepalense)AC3或含有尼泊尔金黄杆菌(Chryseobacterium nepalense)AC3的菌剂混合接触。
优选的，所述PVA溶液的组成为：
PVA(产品型号PVA-1788)1g/L，(NH4)2SO4 1g/L，KH2PO4 0.2g，K2HPO4 1.6g/L，MgSO4·7H2O 0.10g/L，NaCl 0.02g/L，CaCl2 0.05g/L，FeSO4·2H2O 0.02g/L。
本发明的第四方面，提供一种降解PLA薄膜的方法，包括以下步骤：
将尼泊尔金黄杆菌(Chryseobacterium nepalense)AC3接种于添加有PLA薄膜的无机盐液体培养基中，28-37℃条件下进行培养。
本发明的有益效果：
本发明首次从土壤中分离得到一株能够降解PVA和PLA的尼泊尔金黄杆菌(Chryseobacterium nepalense)AC3。利用本发明的尼泊尔金黄杆菌(Chryseobacteriumnepalense)AC3能够实现PVA和PLA塑料的无害化生物降解，对于塑料废弃物的处理而言具有十分重要的意义。
附图说明
图1：(a)所示为金黄杆菌AC3在LB培养基上的菌落形态；(b)所示为金黄杆菌AC3在以PVA为唯一碳源的培养基上的菌落形态。
图2：金黄杆菌AC3在场发射电子扫描电镜下观察到的细菌形态特征图(2万倍)。
图3：基于16SrDNA基因构建的金黄杆菌AC3的系统发育树。
图4：菌株AC3以PVA为唯一碳源的无机盐液体培养基上的生长曲线。
图5：染色后菌株AC3降解PVA产生的透明圈。
图6：菌株AC3对无机盐液体培养基中PVA的降解效果。
图7：菌株AC3对PLA塑料薄膜的降解及定殖效果；图中，a：PLA薄膜未经处理后的扫描电镜观察(5000倍)；b：PLA薄膜未经处理后的扫描电镜观察(10000倍)；c：PLA薄膜培养9天后，AC3在PLA膜上定殖的扫描电镜观察(5000倍)；d：PLA薄膜培养9天后，AC3在PLA膜上定殖的扫描电镜观察(10000倍)。
具体实施方式
应该指出，以下详细说明都是例示性的，旨在对本申请提供进一步的说明。除非另有指明，本文使用的所有技术和科学术语具有与本申请所属技术领域的普通技术人员通常理解的相同含义。
如前所述，PVA和PLA由于分子结构特点导致其生物降解比较困难。现有报道的能够用于PVA和PLA降解的菌株相对较少，且来源大多为污水、土壤、塑料废弃物、垃圾填埋场等，其本身所处生态环境较为复杂，使得这些降解菌的使用安全可能会存在风险。
基于此，为实现PVA和PLA的无害化生物降解，本发明不断尝试分离新的降解菌株。最终从泰山风景区周边的林地土壤中分离得到一株尼泊尔金黄杆菌(Chryseobacteriumnepalense)AC3。
目前有关尼泊尔金黄杆菌(Chryseobacterium nepalense)的报道极少，尼泊尔金黄杆菌(Chryseobacterium nepalense)最早于2017年在尼泊尔一处被石油污染的土壤中分离得到，但并未对该菌的具体功能和作用模式进行检测。本发明是首次发现该菌具有降解PVA和PLA的能力。
此外，本发明还提供一种用于检测降解效果的PVA溶液配制方法，所述PVA溶液的组成为：
PVA(产品型号PVA-1788)1g/L，(NH4)2SO4 1g/L，KH2PO4 0.2g，K2HPO4 1.6g/L，MgSO4·7H2O 0.10g/L，NaCl 0.02g/L，CaCl2 0.05g/L，FeSO4·2H2O 0.02g/L。
由于PVA极易容易水，所以很难检测其降解效果，使用本发明配制的PVA溶液能清晰地展示PVA的降解速度和效果。
本发明发现所述尼泊尔金黄杆菌(Chryseobacterium nepalense)AC3菌株可在短时间的液体培养条件下(2周)即可对PVA有明显的降解，可以使PVA溶液浓度减少近7％；5周可使PVA溶液浓度减少约16％。该降解效果和速度均十分显著，是在尼泊尔金黄杆菌功能挖掘上的一大突破。此外，本发明还发现所述菌株还可用于PLA的降解。
因此，本发明的尼泊尔金黄杆菌(Chryseobacterium nepalense)AC3在塑料降解方面极具应用价值，由此提出了本发明。
为了使得本领域技术人员能够更加清楚地了解本申请的技术方案，以下将结合具体的实施例详细说明本申请的技术方案。如果实施例中未注明的实验具体条件，通常按照常规条件，或者按照试剂公司所推荐的条件；下述实施例中所用的试剂、耗材等，如无特殊说明，均可通过商业途径获得。
实施例1：菌株的分离、鉴定
1、菌株的分离：
从山东泰安泰山南侧区域采集被塑料附着的土壤，去除表层土壤后，用无菌器具收集含有塑料的5-15cm土层土样。取1g收集的土样加入9mL无菌生理盐水制备菌悬液，将制备的菌悬液按一定比例稀释，取50微升稀释后的菌悬液涂布于LB固体培养基，每12h观察一次，2d后对不同形态的单菌落进行划线培养，将纯化后的细菌分别培养于以PVA为唯一碳源的固体培养基中，培养基121℃灭菌15min处理，以PVA为唯一碳源的固体培养基的配方为：PVA(产品型号PVA-1788)1g/L，(NH4)2SO4 1g/L，NaCl 0.02g/L，MgSO4 7H2O 0.10g/L，CaCl20.05g/L，FeSO4 2H2O 0.02g/L，KH2PO4 0.2g/L，K2HPO4 1.6g/L，琼脂15g/L，pH 7.2。于37℃条件下在温箱培养，5d后进行观察，筛选出可以以PVA为唯一碳源生长的细菌，将这些PVA降解菌以菌液的方式滴于以PVA为唯一碳源的的固体培养基中，5d后进行观察并用碘-硼酸显色剂染色(KI-I2(25+12.7g/L):硼酸(40g/L)，为1:5(v/v/v))，进而得到降解效果最好的一株细菌AC3。将筛选得到的这一株纯化菌株于-20℃保存。
2、菌株的鉴定
(1)革兰氏染色及形态鉴定：
将上述纯化获得菌株AC3经革兰氏染色结果为阴性，该菌的菌落为橙黄色不透明，圆形，湿润(图1)。在扫描电镜下观察，能明显发现杆状细菌形态(图2)。
(2)分子鉴定：
为了确定菌株AC3的系统进化地位，对分离所得的菌株进行16S rDNA保守序列(如SEQ ID NO.1所示)进行分析，将所得的序列结果在美国国立生物信息中心(NCBI)进行BLAST检索比对发现，菌株AC3的保守序列与Chryseobacterium nepalense strainHMF5202似性最高，为99％。从而确定分离出来的菌株为Chryseobacterium nepalense，命名为AC3，其系统发育树见图3。
上述菌株Chryseobacterium nepalense AC3对PVA塑料降解能力强，能以PVA唯一碳源存活，其生长曲线见图4。Chryseobacterium nepalense AC3细菌活力强，未进行遗传改造。菌体本身源于自然环境，当其被释放入自然环境后，对人、动植物无害，不污染环境，并能有效降解土壤中的PVA类污染物。
所得尼泊尔金黄杆菌(Chryseobacterium nepalense)AC3的实验室保藏方式：
短期保藏方式为，将菌株接种至LB固体平板，LB培养基配方：胰蛋白胨10g/L，酵母提取物5g/L，NaCl 5g/L，pH至7.2，待菌株长好后保藏于4℃冰箱内，此保藏方式不超过1个月；长期保藏方式为：将金黄杆菌菌体加入终浓度为20％甘油中混匀并保藏至-80℃冰箱中，此保藏方式可达到10年以上。
实施例2：Chryseobacterium nepalense AC3的透明圈检测：
为了更直观地观察菌株对PVA的降解能力，本试验采用透明圈法，使用碘-硼酸作为显色剂。其原理为碘-硼酸显色剂内的I3-会与未被降解PVA分子螺旋结构域螯合显色。，经过染色可以明显观察到在Chryseobacterium nepalense AC3外部能形成与周围碘液差异显著的透明圈(图5)，说明其具有降解PVA的能力。
实施例3：Chryseobacterium nepalense AC3对PVA降解能力的测定
取-80℃保存的菌种划线于活化培养基平板(LB培养基)，37℃培养12-24h，挑取Chryseobacterium nepalense AC3菌株的单菌落接种到LB液体培养基(蛋白胨10g/L，酵母膏粉5g/L，氯化钠5g/L)中，32℃，180r/min摇床培养6-7h。将菌体浓度OD600＝0.8-1的发酵液作为接种剂，按5％(体积分数)的接种量将上述接种剂接种于1g/L初始PVA浓度的无机盐培养基((NH4)2SO4 1g/L，KH2PO4 0.2g/L，K2HPO4 1.6g/L，MgSO4·7H2O 0.10g/L，NaCl0.02g/L，CaCl2 0.05g/L，FeSO4·2H2O 0.02g/L)进行降解实验。32℃，180r/min摇床培养5周。每周定时对PVA的降解情况进行检测，采用碘-硼酸染色法(KI-I2(25+12.7g/L):硼酸(40g/L):样品，体积比为1:3:1(v/v/v))，黑暗中染色15min，在其最大吸光度630nm处检测OD值。
无机盐培养基中PVA的降解情况检测结果如图6所示，结果表明：Chryseobacterium nepalense AC3菌株对PVA有明显的降解，2周可以使PVA溶液浓度减少近7％；5周可使PVA溶液浓度减少约16％。
实施例4：Chryseobacterium nepalense AC3对PLA塑料薄膜降解的探究
按实施例2的方法对Chryseobacterium nepalense AC3菌株进行活化并制成接种剂。
AC3菌株降解PLA薄膜的培养条件：将AC3菌株按5％接种量接入装有50ml无机盐液体培养基((NH4)2SO4 1g/L，KH2PO4 0.2g/L，K2HPO4 1.6g/L，MgSO4·7H2O 0.10g/L，NaCl0.02g/L，CaCl2 0.05g/L，FeSO4·2H2O 0.02g/L)的100ml三角瓶中，培养基中添加PLA薄膜，在摇床180rpm，32℃进行培养；同时设置对照组，即无机盐液体培养基中只添加PLA薄膜，不添加AC3菌株。
培养9d即表现AC3菌株的生长，且AC3菌株定殖在PLA薄膜表面，在PLA薄膜表面形成生物膜，以场发射扫描电子显微镜图片(5000倍、10000倍)来呈现(图7)。结果表明：Chryseobacterium nepalense AC3菌株具有初步降解PLA的潜力，其能在PLA上定殖。
以上所述仅为本申请的优选实施例而已，并不用于限制本申请，对于本领域的技术人员来说，本申请可以有各种更改和变化。凡在本申请的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本申请的保护范围之内。
SEQUENCE LISTING
<110> 山东农业大学
<120> 一株尼泊尔金黄杆菌及其在降解塑料中的应用
<130> 2022
<160> 1
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 1377
<212> DNA
<213> 金黄杆菌（Chryseobacterium nepalense）
<400> 1
ccttttacgg tcaccgactt caggtacccc agacttccat ggcttgacgg gcggtgtgta 60
caaggcccgg gaacgtattc accgcgccat ggctgatgcg cgattactag cgattccagc 120
ttcatagagt cgagttgcag actccaatcc gaactgagac cggctttcga gatttgcatc 180
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ctagagtcct caacttaatg gtagcaacta gtaacagggg ttgcgctcgt tgcaggactt 360
aacctaacac ctcacggcac gagctgacga caaccatgca gcaccttgaa aattgcccga 420
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atcatcgaat taaaccacat aatccaccgc ttgtgcgggc ccccgtcaat tcctttgagt 540
ttcaaacttg cgttcgtact ccccaggtgg ctaacttatc actttcgctt agtctctgaa 600
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ctgttcgctc cccacgcttt cgtccatcag cgtcagttaa gacatagtga cctgccttcg 720
caattggtgt tctaagtaat atctatgcat ttcaccgcta cactacttat tccagccact 780
tctaccttac tcaagacctg cagtatcaat ggcagtttca cagttaagct gtgagatttc 840
accactgact tacagatccg cctacggacc ctttaaaccc aataaatccg gataacgctt 900
gcaccctccg tattaccgcg gctgctggca cggagttagc cggtgcttat tcgtacagta 960
ccttcagcta tttacacgta aataggttta tccctgtaca aaagaagttt acaacccata 1020
gggccgtcgt ccttcacgcg ggatggctgg atcaggcgct aacccattgt ccaatattcc 1080
tcactgctgc ctcccgtagg agtctggtcc gtgtctcagt accagtgtgg gggatcaccc 1140
tctcaggccc cctaaagatc atcgacttgg tgagccgtta cctcaccaac tatctaatct 1200
tgcgcgtgcc catctttatc cacctcagtt ttcaatataa agtgatgcca ctctatatat 1260
tatggggtat taatcttcct ttcgaaaggc tatccccctg ataaaggcag gttgcacacg 1320
tgttccgcac ccgtacgccg ctctcaagtc tccgaagata ctctaccgct cagctgc 1377

Claims (9)

1.一株尼泊尔金黄杆菌（Chryseobacterium nepalense）AC3，其保藏编号为：CGMCCNO：24779。
2. 含有权利要求1所述的尼泊尔金黄杆菌（Chryseobacterium nepalense）AC3的菌剂。
3. 根据权利要求2所述的菌剂，其特征在于，所述尼泊尔金黄杆菌（Chryseobacterium nepalense）AC3以被培养的活菌或者活菌的发酵液形式存在。
4.根据权利要求3所述的菌剂，其特征在于，所述发酵液由如下方法制备而成：
将尼泊尔金黄杆菌（Chryseobacterium nepalense）AC3的种子液接种至LB液体培养基中，28-37℃、160-200 r/min的条件下进行发酵培养，培养至菌体浓度OD600=0.8-1。
5.根据权利要求2-4任一项所述的菌剂，其特征在于，所述菌剂的剂型为液剂。
6. 权利要求1所述的尼泊尔金黄杆菌（Chryseobacterium nepalense）AC3或者权利要求2-4任一项所述的含有尼泊尔金黄杆菌（Chryseobacterium nepalense）AC3的菌剂在降解塑料中的应用。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述塑料为PVA和/或PLA。
8.一种降解PVA溶液的方法，其特征在于，包括以下步骤：
将待降解的PVA溶液与尼泊尔金黄杆菌（Chryseobacterium nepalense）AC3或含有尼泊尔金黄杆菌（Chryseobacterium nepalense）AC3的菌剂混合接触；
所述尼泊尔金黄杆菌（Chryseobacterium nepalense）AC3的保藏编号为：CGMCC NO：24779。
9.一种降解PLA薄膜的方法，其特征在于，包括以下步骤：
将权利要求1所述的尼泊尔金黄杆菌（Chryseobacterium nepalense）AC3接种于添加有PLA薄膜的无机盐液体培养基中，28-37℃条件下进行培养。
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CN105087538B (zh) * 2015-07-29 2018-05-29 浙江大学 一种石油降解菌剂及其制备方法和用途
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