CN115212298A - 一种阴道温敏复合抗hpv凝胶及其制备方法与应用 - Google Patents
一种阴道温敏复合抗hpv凝胶及其制备方法与应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN115212298A CN115212298A CN202210818965.6A CN202210818965A CN115212298A CN 115212298 A CN115212298 A CN 115212298A CN 202210818965 A CN202210818965 A CN 202210818965A CN 115212298 A CN115212298 A CN 115212298A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- poloxamer
- percent
- hpv
- protein
- solution
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/43—Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
- A61K38/46—Hydrolases (3)
- A61K38/47—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2), e.g. cellulases, lactases
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/43—Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
- A61K38/46—Hydrolases (3)
- A61K38/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
- A61K38/4886—Metalloendopeptidases (3.4.24), e.g. collagenase
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
- A61K47/10—Alcohols; Phenols; Salts thereof, e.g. glycerol; Polyethylene glycols [PEG]; Poloxamers; PEG/POE alkyl ethers
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
- A61K47/42—Proteins; Polypeptides; Degradation products thereof; Derivatives thereof, e.g. albumin, gelatin or zein
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0034—Urogenital system, e.g. vagina, uterus, cervix, penis, scrotum, urethra, bladder; Personal lubricants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/06—Ointments; Bases therefor; Other semi-solid forms, e.g. creams, sticks, gels
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
- A61P15/02—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives for disorders of the vagina
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Y—ENZYMES
- C12Y302/00—Hydrolases acting on glycosyl compounds, i.e. glycosylases (3.2)
- C12Y302/01—Glycosidases, i.e. enzymes hydrolysing O- and S-glycosyl compounds (3.2.1)
- C12Y302/01017—Lysozyme (3.2.1.17)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Y—ENZYMES
- C12Y304/00—Hydrolases acting on peptide bonds, i.e. peptidases (3.4)
- C12Y304/24—Metalloendopeptidases (3.4.24)
- C12Y304/24075—Lysostaphin (3.4.24.75)
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Reproductive Health (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Gynecology & Obstetrics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Virology (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Oncology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
本发明公开了一种阴道温敏复合抗HPV凝胶及其制备方法。它由以下组分构成:泊洛沙姆407 15~20%,泊洛沙姆188 5~12%,III型人源重组蛋白0.1~0.2%,LK蛋白0.01‑0.1%,WS‑23 0.1~0.5%,蒸馏水,溶菌酶4‑6万活性单位和葡萄球菌酶6‑10单位。本发明提供的抗HPV凝胶不但能防止细菌浸入以及杀灭阴道HPV病毒,并且能隔离创面,调节组织细胞增殖、显著缩短创面修复时间。
Description
技术领域
本发明涉及一种阴道温敏复合抗HPV凝胶及其制备方法,属于医用高分子敷料领域。
背景技术
女性下生殖道为开放性腔道,当阴道的自然防御功能遭到破坏,则病原体易于侵入,使阴道微生态发生异常,导致阴道炎、宫颈炎、糜烂等,未采取积极治疗或治疗不当会引起不孕,病原菌逆行易感染泌尿生殖系统疾病,严重的阴道疾病甚至诱发癌症危及女性生命。
现有的抗菌素长期服用存在较大的不良反应,并且易导致耐药,和菌群失调,存在较大的负面影响。
因此,很有必要在现有技术基础上,研究一种无刺激性,无致敏性,并且具有很好的抗HPV作用的外用凝胶。
发明内容
发明目的:本发明的目的是为了克服现有技术的不足,研究一种无刺激性,无致敏性,并且具有很好的抗HPV作用的外用凝胶。本发明另外一个目的是提供其制备方法。
技术方案:为了实现以上目的,本发明采取的技术方案为:
一种阴道温敏复合抗HPV凝胶,它由A组份和B组份组成;
其中A组份由以下重量百分比的原料制成:
泊洛沙姆407 15~20%,泊洛沙姆188 5~12%,III型人源重组蛋白0.1~0.2%,LK蛋白0.01-0.1%,WS-23(清凉剂)0.1~0.5%和余量蒸馏水配置成100%;
B组份包括溶菌酶4-6万活性单位,葡萄球菌酶6-10单位。
作为优选方案,以上所述的一种阴道温敏复合抗HPV凝胶,其中A组份由以下重量百分比的原料制成:
泊洛沙姆407 10%,泊洛沙姆188 8%,III型人源重组蛋白0.1%,LK蛋白0.01%,WS-23 0.1%,和余量蒸馏水配置成100%;
B组份包括溶菌酶4万活性单位,葡萄球菌酶6单位。
作为优选方案,以上所述的一种阴道温敏复合抗HPV凝胶,其中A组份由以下重量百分比的原料制成:
有泊洛沙姆40715%,泊洛沙姆188 10%,III型人源重组蛋白0.1%,LK蛋白0.01%,WS-23 0.1%和余量蒸馏水配置成100%;
B组份包括溶菌酶4万活性单位,葡萄球菌酶6单位。
作为优选方案,以上所述的一种阴道温敏复合抗HPV凝胶,其中A组份由以下重量百分比的原料制成:
有泊洛沙姆407 15%,泊洛沙姆188 10%,III型人源重组蛋白0.2%,LK蛋白0.1%,WS-23 0.1%和蒸馏水;
B组份包括溶菌酶5万活性单位,葡萄球菌酶8单位。
本发明提供的阴道温敏复合抗HPV凝胶的制备方法,包括以下步骤:
步骤一、按质量百分比取泊洛沙姆407 15~20%浸泡于纯水中,静置,搅拌,充分溶解,得泊洛沙姆407溶液,备用;
步骤二、按质量百分比取泊洛沙姆188 5~12%浸泡于纯水中,静置,搅拌,充分溶解,得泊洛沙姆188溶液,备用;
步骤三、将步骤二得到的泊洛沙姆188溶液缓慢加入步骤一泊洛沙姆407溶液中,搅拌均匀;
步骤四、按质量百分比取III型人源重组蛋白0.1~0.2%,LK蛋白0.01-0.1%,浸泡于纯水中,搅拌,充分溶解,得III型人源重组蛋白和LK蛋白溶液,备用;
步骤五、按质量百分比取WS-23 0.1-0.5%,浸泡于纯水中,搅拌,充分溶解,得WS-23溶液,备用;
步骤六、将步骤四和步骤五得到溶液,按序缓慢加入到步骤三溶液中,最后加入溶菌酶4-6万活性单位,葡萄球菌酶6-10单位,搅拌均匀,定容,即得医用阴道温敏复合抗HPV凝胶。
作为优选方案,以上所述的阴道温敏复合抗HPV凝胶的制备方法,包括以下步骤:
步骤一、按质量百分比取泊洛沙姆407 15~20%浸泡于纯水中,静置24小时,搅拌,充分溶解,得泊洛沙姆407溶液,备用;
步骤二、按质量百分比取泊洛沙姆188 5~12%浸泡于1/10纯水中,静置24小时,搅拌,充分溶解,得泊洛沙姆188溶液,备用;
步骤三、将步骤二得到的泊洛沙姆188溶液缓慢加入步骤一泊洛沙姆407溶液中,搅拌均匀;
步骤四、按质量百分比取III型人源重组蛋白0.1~0.2%,LK蛋白0.01-0.1%,浸泡于纯水10ml中,搅拌,充分溶解,得III型人源重组蛋白和LK蛋白溶液,备用;
步骤五、按质量百分比取WS-23 0.1-0.5%,浸泡于10ml纯水中,搅拌,充分溶解,得WS-23溶液,备用;
步骤六、将步骤四和步骤五得到溶液,按序缓慢加入到步骤三溶液中,最后加入溶菌酶4-6万活性单位,葡萄球菌酶6-10单位,搅拌均匀,定容,即医用阴道温敏复合抗HPV凝胶。
本发明所述的阴道温敏复合抗HPV凝胶可达到创面隔离、抗HPV的效果,且安全无毒。
本发明的有益效果为:
本发明优选出泊洛沙姆407、泊洛沙姆188作为乳化剂和稳定剂,它们不但可以增强溶菌酶,葡萄球菌酶的杀菌作用,并且可以隔离屏障、延长凝胶在作用部位的停留时间。并且添加一定量的III型人源重组蛋白和LK蛋白不但可有效的对创面隔离,对阴道上皮以及宫颈上皮细胞进行修复,调节组织细胞增殖,并且还具有抗HPV功效。并且无刺激、无致敏性,安全性好。
附图说明
图1为LK与S2对假病毒感染的影响。图中A是对PsV16的感染抑制作用;B是对PsV18的感染抑制作用。
具体实施方式
实施例1
1、一种阴道温敏复合抗HPV凝胶,它由A组份和B组份组成;
其中A组份由以下重量百分比的原料制成:
泊洛沙姆40710%,泊洛沙姆1888%,III型人源重组蛋白0.1%,LK蛋白0.01%,WS-23 0.1%和余量蒸馏水配置成100%;
B组份包括溶菌酶4万活性单位,葡萄球菌酶6单位。
2、阴道温敏复合抗HPV凝胶的制备方法,包括以下步骤:
步骤一、按质量百分比取泊洛沙姆407 10%浸泡于所述纯水的中,静置24小时,搅拌,充分溶解,得泊洛沙姆407溶液,备用;
步骤二、按质量百分比取泊洛沙姆188 8%浸泡于所述纯水的中,静置24小时,搅拌,充分溶解,得泊洛沙姆188溶液,备用;
步骤三、将步骤二得到的泊洛沙姆188溶液缓慢加入步骤一泊洛沙姆407溶液中,搅拌均匀;
步骤四、按重量份取III型人源重组蛋白0.1%,LK蛋白0.01%浸泡于所述纯水10ml中,搅拌,充分溶解,得III型人源重组蛋白和LK蛋白溶液,备用;
步骤五、按重量份取WS-23 0.1%浸泡于所述纯水10ml中,搅拌,充分溶解,得WS-23溶液,备用;
步骤六、将步骤四和步骤五得到溶液,按序缓慢加入步骤三溶液中,最后加入溶菌酶4万活性单位,葡萄球菌酶6单位,搅拌均匀,定容,即医用阴道温敏复合抗HPV凝胶。
实施例2
1、一种阴道温敏复合抗HPV凝胶,它由A组份和B组份组成;
其中A组份由以下重量百分比的原料制成:
泊洛沙姆407 15%,泊洛沙姆18810%,III型人源重组蛋白0.1%,LK蛋白0.01%WS-23 0.1%和和余量蒸馏水配置成100%;
B组份包括溶菌酶5万活性单位,葡萄球菌酶8单位。
2、阴道温敏复合抗HPV凝胶的制备方法包括以下步骤:
步骤一、按质量百分比取泊洛沙姆407 15%浸泡于纯水的中,静置24小时,搅拌,充分溶解,得泊洛沙姆407溶液,备用;
步骤二、按质量百分比取泊洛沙姆18810%浸泡于纯水的中,静置24小时,搅拌,充分溶解,得泊洛沙姆188溶液,备用;
步骤三、将步骤二得到的泊洛沙姆188溶液缓慢加入步骤一泊洛沙姆407溶液中,搅拌均匀;
步骤四、按质量百分比取III型人源重组蛋白0.1%,LK蛋白0.05%浸泡于所述纯水10ml中,搅拌,充分溶解,得III型人源重组蛋白和LK蛋白溶液,备用;
步骤五、按重量份取WS-23 0.2%浸泡于所述纯水10ml中,搅拌,充分溶解,得WS-23溶液,备用;
步骤六、将步骤四和步骤五得到溶液,按序缓慢加入步骤三溶液中,最后加入溶菌酶5万活性单位,葡萄球菌酶8单位,搅拌均匀,定容,即医用阴道温敏复合抗HPV凝胶。
实施例3
1、一种阴道温敏复合抗HPV凝胶,它由A组份和B组份组成;
其中A组份由以下重量百分比的原料制成:
泊洛沙姆407 15%,泊洛沙姆18810%,III型人源重组蛋白0.2%,LK蛋白0.1%,WS-23 0.1%和蒸馏水。
B组份包括溶菌酶5万活性单位,葡萄球菌酶8单位。
2、所述的阴道温敏复合抗HPV凝胶的制备方法包括以下步骤:
步骤一、按质量百分比取泊洛沙姆40715%浸泡于纯水的1/10中,静置24小时,搅拌,充分溶解,得泊洛沙姆407溶液,备用;
步骤二、按质量百分比取泊洛沙姆18810%浸泡于所述纯水的1/10中,静置24小时,搅拌,充分溶解,得泊洛沙姆188溶液,备用;
步骤三、将步骤二得到的泊洛沙姆188溶液缓慢加入步骤一泊洛沙姆407溶液中,搅拌均匀;
步骤四、按质量百分比取III型人源重组蛋白0.2%,LK蛋白0.1%浸泡于10ml纯水中,搅拌,充分溶解,得III型人源重组蛋白和LK蛋白溶液,备用;
步骤五、按质量百分比取WS-23 0.2%浸泡于纯水10ml中,搅拌,充分溶解,得WS-23溶液,备用;
步骤六、将步骤四和步骤五得到溶液,按序缓慢加入步骤三溶液中,最后加入溶菌酶5万活性单位,葡萄球菌酶8单位,搅拌均匀,定容,即医用阴道温敏复合抗HPV凝胶。
实施例4生物相容性评价的依据和方法
1、该评价是抗HPV凝胶的生物敷料进行的医疗器械生物学评价,生物相容性评价研究依据GB/T16886.1-2011医疗器械生物学评价第1部分:风险管理过程中的评价与试验;GB/T16886.5-2017医疗器械生物学评价第5部分:体外细胞毒性试验;GB/T16886.11-2011医疗器械生物学评价第11部分:全身毒性试验。
产品所用材料的描述及与人体接触的性质
表格1产品材料描述
2、实施论证
根据GB/T16886.1-201《医疗器械生物学评价-第1部分:风险管理评价与试验》中附录A表A.1和接触性质,需要考虑的评价要素为细胞毒性、致敏、刺激或皮内反应。
表格2安全性实验结果
3、实验结果
本发明制备得到的抗HPV生物敷料产品属接触人体器械,使用时间为<24h,产品用于临床抗HPV感染,无细胞毒性、无刺激过敏反应。
实施例5抗HPV实验
1、实验材料
S2蛋白为对照品,由南京拉克森生物医药有限公司对β-乳球蛋白(β-lactoglobulin)(β-LG)进行技术研究修饰,成为修饰带负电荷的s2蛋白。
培养基
Grace's Insect Cell Culture Medium,unsupplemented培养基:购自美国Invitrogen
公司(Cat.No.11595-030);DMEM干粉:购自美国Invitrogen公司(Cat.No.12100-046),用于293TT细胞的培养。
DMEM-10培养基:用DMEM干粉配置培养基,往88mlDMEM培养基中加入10ml胎牛血清,1ml NEAA(lOOx),1ml 200mM谷氣酰胺0.05%Trypsin/0.02%EDTA:900ml dcfflbO加入8.0gNaCl,0.4g KCh 0.35gNaHCOs,0.06gKH2P04,0.132gNaaHPCVlSHaO,1.0g Glucose,0.2g EDTA,混勻,调pH 8.0,然后加0.5gTrypsin4℃低速搅拌,定容至1000ml,过滤除菌,-20℃保存。
2、实验方法
2.1LK蛋白、s2蛋白修饰
将3-羟基-邻苯二甲酸酐HP溶于二甲基亚飒DMSO中,得到饱和的HP溶液;将LK蛋白、β-乳球蛋白(β-lactoglobulin)β-LG分别溶于pH10,0.1M磷酸钠溶液中,分别得到LK蛋白、β-LG蛋白终浓度为20mg/mL和20mg/m;再将上述HP溶液分为各五等份,每12min加入蛋白溶液中,震荡混匀,1MNaOH调节pH为8.5,酸酐在反应体系中的终浓度为60mM,在温度为25℃的条件下,放置l小时,pH7.4 PBS透析,再用0.45uM微孔滤膜过滤除菌,4℃保存,即得LK蛋白样品、S2蛋白对照品。
2.2假病毒模型构建
参考http://home.ccr.cancer.gov/lco/pseudovirusproduction.htm.进行假病毒PsV16及PsV18的生产、纯化及滴度测定。
假病毒生产方法简述:
(1)293tt细胞的培养与转化:293tt DMEM-10细胞培养;293tt细胞传代;转染。
(2)收获与成熟:收集细胞;细胞裂解与衣壳成熟;盐萃取。
(3)Optiprep净化:Optiprep梯度的制备;离心;馏分收集;筛选分数(用最简单的方法筛选分数是寻找病毒DNA的核心组分梯度的存在。衣壳是自由渗透到小溶质,包括高灵敏度DNA荧光染色,如数量PicoGreen dsDNA抗体检测试剂)。
3、抑制HPV假病毒(PsV)感染情况的分析方法
假病毒感染抑制实验,具体方法如下:首先用DMEM-10分别对样品和假病毒进行稀释,PsV用量确定为可使15%的293TT细胞感染阳性的加入量。然后将假病毒和样品稀释液混匀,取100μl混匀液加入预先接种293TT的96孔板中(3.0×104cells/well),37℃,5%CO2培养72h,收集细胞进行流式检测,分析感染细胞的百分比,计算感染抑制率,抑制率的计算方法参照PLoS ONE,9(5):e95448,2014。实验重复两次。
4、实验结果
4.1、LK蛋白与对照S2均具有很好的抑菌作用
LK和S2均有很好的抑菌作用,在DMEM-10,双抗培养基中,当S2和LK的浓度分别为500ug/ml及250ug/ml时,37℃,5%CO2培养5天后均未见细菌生长。
4.2、LK蛋白较S2的耐受性稍低,但在统计学意义上讲,无显著性差异。
对细胞生长活性影响的分析:使用含样品的DMEM-10培养基,在不同时间(24h,48h,72h)点观察含不同浓度(250μg/ml,400μg/ml,500μg/ml)的S2或LK对293TT的生长活性的影响,发现500μg/ml的S2对293TT生长的影响不明显,而在500μg/ml的LK组则出现细胞成团现象。表明293TT细胞对S2的耐受性较LK的高。另外,由于293TT细胞属增殖极为活跃的细胞,对于人体正常细胞来说,LK蛋白比S2耐受性会更好。
4.3、LK蛋白与对照S2均能有效抑制假病毒感染,但LK蛋白对PsV16/18的感染抑制活性较S2强。
LK和S2均能有效抑制假病毒感染:本实验采用的PsV含GFP报告基因,感染细胞后可表达GFP,通过流式检测荧光阳性细胞的百分比可判定病毒的感染率。抗HPV感染物质与PsV共孵育后再感染细胞,可降低荧光阳性细胞的比率,计算可得出感染抑制率,目前认为感染抑制率≥50%,为有效抑制感染。结果如图所示,LK与S2对PsV16,PsV18的感染抑制作用都是浓度依赖性的,本实验检测到的LK最大感染抑制率已接近100%,比S2对HPV感染抑制率更高。IC50分析显示,S2和LK抑制PsV16感染的IC50分别为141.35μg/ml和49.68μg/ml(图A),抑制PsV18感染的IC50分别为146.73μg/ml和102.70μg/ml(图B)。结果表明,LK和S2均能有效抑制PsV16及PsV18的感染,LK对PsV16/18的感染抑制活性较S2的更强。
上述实施例仅例示性说明本发明的原理及其功效,而非用于限制本发明。任何熟悉此技术的人士皆可在不违背本发明的精神及范畴下,对上述实施例进行修饰或改变。因此,举凡所属技术领域中具有通常知识者在未脱离本发明所揭示的精神与技术思想下所完成的一切等效修饰或改变,仍应由本发明的权利要求所涵盖。
Claims (7)
1.一种阴道温敏复合抗HPV凝胶,其特征在于,它由A组份和B组份组成;
其中A组份由以下重量百分比的原料制成:
泊洛沙姆407 15~20%,泊洛沙姆188 5~12%,III型人源重组蛋白0.1~0.2%,LK蛋白0.01-0.1%,WS-23 0.1~0.5%和余量蒸馏水配置成100%;
B组份包括溶菌酶4-6万活性单位,葡萄球菌酶6-10单位。
2.根据权利要求1所述的一种阴道温敏复合抗HPV凝胶,其特征在于,其中A组份由以下重量百分比的原料制成:
泊洛沙姆407 10%,泊洛沙姆188 8%,III型人源重组蛋白0.1%,LK蛋白0.01%,WS-23 0.1%,和余量蒸馏水配置成100%;
B组份包括溶菌酶4万活性单位,葡萄球菌酶6单位。
3.根据权利要求1所述的一种阴道温敏复合抗HPV凝胶,其特征在于,其中A组份由以下重量百分比的原料制成:
有泊洛沙姆407 15%,泊洛沙姆188 10%,III型人源重组蛋白0.1%,LK蛋白0.01%,WS-23 0.1%和余量蒸馏水配置成100%;
B组份包括溶菌酶4万活性单位,葡萄球菌酶6单位。
4.根据权利要求1所述的一种阴道温敏复合抗HPV凝胶,其特征在于,其中A组份由以下重量百分比的原料制成:
有泊洛沙姆407 15%,泊洛沙姆188 10%,III型人源重组蛋白0.2%,LK蛋白0.1%,WS-23 0.1%和蒸馏水;
B组份包括溶菌酶5万活性单位,葡萄球菌酶8单位。
5.权利要求1所述的阴道温敏复合抗HPV凝胶的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤一、按质量百分比取泊洛沙姆407 15~20%浸泡于纯水中,静置,搅拌,充分溶解,得泊洛沙姆407溶液,备用;
步骤二、按质量百分比取泊洛沙姆188 5~12%浸泡于纯水中,静置,搅拌,充分溶解,得泊洛沙姆188溶液,备用;
步骤三、将步骤二得到的泊洛沙姆188溶液缓慢加入步骤一泊洛沙姆407溶液中,搅拌均匀;
步骤四、按质量百分比取III型人源重组蛋白0.1~0.2%,LK蛋白0.01-0.1%,浸泡于纯水中,搅拌,充分溶解,得III型人源重组蛋白和LK蛋白溶液,备用;
步骤五、按质量百分比取WS-23 0.1-0.5%,浸泡于纯水中,搅拌,充分溶解,得WS-23溶液,备用;
步骤六、将步骤四和步骤五得到溶液,按序缓慢加入到步骤三溶液中,最后加入溶菌酶4-6万活性单位,葡萄球菌酶6-10单位,搅拌均匀,定容,即得医用阴道温敏复合抗HPV凝胶。
6.根据权利要求5所述的阴道温敏复合抗HPV凝胶的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤一、按质量百分比取泊洛沙姆407 15~20%浸泡于纯水中,静置24小时,搅拌,充分溶解,得泊洛沙姆407溶液,备用;
步骤二、按质量百分比取泊洛沙姆188 5~12%浸泡于纯水中,静置24小时,搅拌,充分溶解,得泊洛沙姆188溶液,备用;
步骤三、将步骤二得到的泊洛沙姆188溶液缓慢加入步骤一泊洛沙姆407溶液中,搅拌均匀;
步骤四、按质量百分比取III型人源重组蛋白0.1~0.2%,LK蛋白0.01-0.1%,浸泡于纯水10ml中,搅拌,充分溶解,得III型人源重组蛋白和LK蛋白溶液,备用;
步骤五、按质量百分比取WS-23 0.1-0.5%,浸泡于10ml纯水中,搅拌,充分溶解,得WS-23溶液,备用;
步骤六、将步骤四和步骤五得到溶液,按序缓慢加入到步骤三溶液中,最后加入溶菌酶4-6万活性单位,葡萄球菌酶6-10单位,搅拌均匀,定容,即医用阴道温敏复合抗HPV凝胶。
7.权利要求1~4任一项所述的阴道温敏复合抗HPV凝胶在制备抗HPV或修复创面的药物中的应用。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202210818965.6A CN115212298A (zh) | 2022-07-12 | 2022-07-12 | 一种阴道温敏复合抗hpv凝胶及其制备方法与应用 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202210818965.6A CN115212298A (zh) | 2022-07-12 | 2022-07-12 | 一种阴道温敏复合抗hpv凝胶及其制备方法与应用 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN115212298A true CN115212298A (zh) | 2022-10-21 |
Family
ID=83612532
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN202210818965.6A Pending CN115212298A (zh) | 2022-07-12 | 2022-07-12 | 一种阴道温敏复合抗hpv凝胶及其制备方法与应用 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN115212298A (zh) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN116440068A (zh) * | 2023-05-17 | 2023-07-18 | 普迪特(泰州)生物科技有限公司 | 一种防治hpv感染及菌群失调的阴道凝胶及其制备方法 |
-
2022
- 2022-07-12 CN CN202210818965.6A patent/CN115212298A/zh active Pending
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN116440068A (zh) * | 2023-05-17 | 2023-07-18 | 普迪特(泰州)生物科技有限公司 | 一种防治hpv感染及菌群失调的阴道凝胶及其制备方法 |
CN116440068B (zh) * | 2023-05-17 | 2023-10-17 | 江苏亨瑞生物医药科技有限公司 | 一种防治hpv感染及菌群失调的阴道凝胶及其制备方法 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
WO2019088656A1 (ko) | 안정화된 엑소좀의 필러 조성물 | |
Deng et al. | Biological properties of the chitosan-gelatin sponge wound dressing | |
CN108348555B (zh) | 细胞扩增方法和治疗组合物 | |
Lin et al. | Keratin/chitosan UV-crosslinked composites promote the osteogenic differentiation of human adipose derived stem cells | |
SE451850B (sv) | Sett att framstella ett glykoprotein med kend formaga att stimulera bildning och differentiering av humana granulocyter | |
Murgia et al. | Modelling the bronchial barrier in pulmonary drug delivery: a human bronchial epithelial cell line supplemented with human tracheal mucus | |
JP7217473B2 (ja) | ハイドロゲル粒子およびその製造方法、ハイドロゲル粒子を内包する細胞または細胞構造体、ハイドロゲル粒子を用いた細胞活性の評価方法、並びにハイドロゲル粒子の徐放性製剤としての使用 | |
JP7116501B2 (ja) | 幹細胞材料およびその製造方法 | |
CN110903347A (zh) | 抗菌肽l7及其应用 | |
CN115212298A (zh) | 一种阴道温敏复合抗hpv凝胶及其制备方法与应用 | |
CN111808804A (zh) | 一种脐带间充质干细胞来源的外泌体的制备方法 | |
CN107427535A (zh) | 经修饰的血凝块 | |
CN107349220A (zh) | 一种包含成纤维细胞外泌体的制剂及其用途 | |
CN114561349B (zh) | Il18,il12,il15处理的间质干细胞所产生的外泌体及抗病毒应用 | |
CN115505550A (zh) | 一株副干酪乳杆菌及其应用 | |
CN115125216A (zh) | 一种耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的噬菌体及其应用 | |
Fukushima et al. | Polycationic protamine for water-insoluble complex formation with DNA | |
Lieder | Chitosan and chitosan derivatives in tissue engineering and stem cell biology | |
CN115287257B (zh) | 基于弓形虫外分泌蛋白的成骨诱导分化培养基、制备方法及成骨诱导分化方法 | |
CN117106050B (zh) | 一种非特异性靶向抑制致病菌的抗菌肽及其应用 | |
CN116064330B (zh) | 凝结芽孢杆菌及其应用 | |
CN116445306B (zh) | 粟酒裂殖酵母及其改善皮肤状况的应用 | |
Zvezdova | Applications of chitosan-sulfathiazole as antimicrobial agent | |
CN114903918B (zh) | 女性微生态抑菌修复凝胶及制备方法和应用 | |
CN115120615B (zh) | miR-146a-5p过表达工程干细胞外泌体在制备治疗芥子气致肺损伤药物中的应用 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination |