CN115176875B - 碎米荠在制备猪饲料添加剂中的应用及猪饲料 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了碎米荠在制备猪饲料添加剂中的应用及猪饲料，本发明公开的含有碎米荠的猪饲料添加剂及猪饲料可提高猪小肠的绒毛高度、绒毛高度与隐窝深度比、紧密连接蛋白表达、肠道功能细胞标记基因的表达，提高猪肠道干细胞的增殖和分化，修复肠道损伤，实现了增进调控肠道干细胞发育，改善了猪的肠道健康，还可预防、缓解或者治疗猪只腹泻，其易于与饲料混合，功效稳定。
Description
技术领域
本发明涉及饲料添加剂领域，具体涉及碎米荠在制备猪饲料添加剂中的应用及猪饲料。
背景技术
在现代集约化养殖中，猪肠道受损已经成为一种非常普遍的现象，其会给养殖业造成了严重的经济损失。
猪的小肠上皮是典型的隐窝-绒毛结构，主要包括以下几种主要的细胞：吸收细胞、肠内分泌细胞、杯状细胞、潘氏细胞、塔夫细胞以及肠道干细胞等。这些肠上皮细胞每3-5天更新一次。猪的肠黏膜受损会导致小肠上皮结构发生显著的变化，主要表现为绒毛的急性萎缩、各种功能细胞的丢失和隐窝的加深，因此，若能缓解或者治疗猪肠黏膜受损将对保障猪只养殖效益具有十分重要的意义。
肠道干细胞是一类位于隐窝底部的成体干细胞，其在维持肠道自我更新和肠黏膜损伤修复中发挥关键的作用。当小肠黏膜损伤后，肠道会立即启动其快速修复和再生的过程，即位于隐窝底部的肠道干细胞会不断分裂生成新的肠道干细胞或过渡扩增细胞，然后这些过渡扩增细胞通过增殖并分化为各种成熟的肠上皮细胞，如吸收细胞、杯状细胞和潘氏细胞等，从而完成肠上皮的修复过程，因此，调控肠道干细胞发育是缓解或者治疗猪肠黏膜受损的重要调控策略，其对保障猪只肠道健康具有十分重要的意义，所以，非常有必要对可增进猪肠道干细胞发育的饲料添加剂进行开发。
发明内容
本发明的目的在于提供碎米荠在制备猪饲料添加剂中的应用及猪饲料，本发明提供了碎米荠的一种新的应用，拓宽了碎米荠的应用范围，以解决上述背景技术中提出的问题，本发明提供的猪饲料添加剂及猪饲料可提高猪小肠的绒毛高度、绒毛高度与隐窝深度比、紧密连接蛋白表达、肠道功能细胞标记基因的表达，提高猪肠道干细胞的增殖和分化，修复肠道损伤，实现了增进调控肠道干细胞发育，改善了猪的肠道健康，还可预防、缓解或者治疗猪只腹泻，其易于与饲料混合，功效稳定。
为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
碎米荠在制备调控肠道干细胞发育猪饲料添加剂或抗腹泻猪饲料添加剂中的应用。
优选的，所述猪饲料添加剂的饲喂对象为断奶仔猪。
优选的，所述碎米荠为堇叶碎米荠、壶瓶碎米荠、恩施碎米荠中的任意一种。
优选的，所述碎米荠在猪日粮中的添加量为0.05%-0.5%。
例如：向100kg猪日粮（全价日粮）中添加0.05-0.5kg所述碎米荠，两者混合均匀后饲喂猪只。所述猪日粮可以是市售的猪商品配合猪饲料，也可以是根据猪只营养需要自行配制的猪日粮。
又或者所述碎米荠与其它饲料添加剂或饲料原料混合制成预混料、浓缩料形式进行使用。
本发明提供了一种猪饲料添加剂，其含有碎米荠。
优选的，本发明所述猪饲料添加剂中还含有裂壶藻粉、鹿衔草、珍珠菜。
优选的，本发明所述猪饲料添加剂中碎米荠、裂壶藻粉、鹿衔草、珍珠菜的重量份比例为1：（0.1-5）：（0.05-2）：（0.01-1）；将所述碎米荠、裂壶藻粉、鹿衔草、珍珠菜混合均匀后即得。
本发明提供了一种猪饲料，所述猪饲料包含上述技术方案任一项所述的猪饲料添加剂；如，将上述技术方案任一项所述的猪饲料添加剂添加至猪日粮中混合均匀即得所述猪饲料，又或者使用上述技术方案任一项所述的猪饲料添加剂配合其他饲料原料一起制备猪日粮，即制备本发明所述所述猪饲料，即使用者可以根据需要灵活使用，其中，碎米荠在猪日粮中的添加量为0.05%-0.5%，该制得的所述猪饲料即可饲喂猪只。
优选的，本发明中，所述碎米荠、裂壶藻粉、鹿衔草、珍珠菜是经过干燥（干燥后水分含量均≤13%）及粉碎处理（粉碎至50～100目）的粉料。
本发明中，所述碎米荠、裂壶藻粉、鹿衔草、珍珠菜均可从市场上购得，或根据需要通过已知的方法进行制备。
本发明的有益效果是：
（1）本发明提供了碎米荠的一种重要的新应用，拓宽了碎米荠的应用范围，本发明将碎米荠作为一种绿色安全的可积极调控肠道干细胞发育的猪饲料添加剂或抗腹泻猪饲料添加剂，避免了使用兽药带来的不良影响，为无抗养殖业提供了一种健康安全的新途径。
本发明的猪饲料添加剂可提高猪小肠的绒毛高度、绒毛高度与隐窝深度比、紧密连接蛋白表达、肠道功能细胞标记基因的表达，提高猪肠道干细胞的增殖和分化，修复肠道损伤，实现了增进调控肠道干细胞发育，改善了猪的肠道健康，还可预防、缓解或者治疗猪只腹泻。
（2）本发明提供了一种猪饲料，添加了碎米荠的猪饲料是一种绿色安全、可实现无抗养殖的饲料，其可长期持续使用，在发挥积极调控肠道干细胞发育、抗腹泻效果的同时，因其含有大量蛋白质、可溶性糖、氨基酸和纤维素等营养成分，其还可以发挥改善生长性能的营养效果。
（3）本发明碎米荠添加量较少，其可以直接与其它饲料添加剂或饲料原料混合制成预混料、浓缩料形式进行使用，添加处理方便，对处理设备和过程没有特别要求，利于工业化使用。
（4）进一步地，在本发明的含碎米荠、裂壶藻粉、鹿衔草、珍珠菜的猪饲料添加剂或猪饲料中，裂壶藻粉、鹿衔草、珍珠菜可与碎米荠发挥协同功效，其可提高仔猪小肠的绒毛高度、绒毛高度与隐窝深度比、紧密连接蛋白表达、肠道功能细胞标记基因villin、Lyz、Muc2和ChgA的表达，提高小肠干细胞的活性。
（5）在本发明的含碎米荠、裂壶藻粉、鹿衔草、珍珠菜的猪饲料添加剂或猪饲料中，珍珠菜对碎米荠、裂壶藻粉、鹿衔草有释控作用，使之易于与饲料混合，可以形成均匀分散系，使用方便，使得功效更加稳定。
（6）在本发明的含碎米荠、裂壶藻粉、鹿衔草、珍珠菜的猪饲料添加剂或猪饲料中，鹿衔草能促进肠道胃酸的分泌，进而提高动物体内对碎米荠、裂壶藻粉和鹿衔草的吸收效率，使得可以更快发挥功效，显著提高效果。
（7）通过将本发明的猪饲料添加剂或猪饲料饲喂断奶仔猪后，可以显著降低断奶仔猪的腹泻率28-65%。
具体实施方式
以下是本发明的具体实施例，对本发明的技术方案作出进一步描述，但是本发明的保护范围并不限于这些实施例。凡是不背离本发明构思的改变或等同替代均包括在本发明的保护范围之内。
实施例1
选用24头平均体重约为5.8kg的21日龄（杜×长×大）断奶仔猪随机分为2个处理组，分别为：对照组、试验组1，每个处理组12头猪。
以上各个处理组的断奶仔猪饲喂的饲料分别如下：
对照组：常规猪日粮。
试验组1：向常规猪日粮中添加本发明的猪饲料添加剂，所述猪饲料添加剂为堇叶碎米荠，两者混合均匀后制成本发明的猪饲料，将该猪饲料饲喂断奶仔猪，所述堇叶碎米荠在常规猪日粮中的添加量为0.05%。
饲养试验持续21天。
饲喂试验结束后，见表1和表2，试验组1促进了断奶仔猪的肠道发育，表现为小肠绒毛高度、绒毛高度与隐窝深度比值和紧密连接蛋白表达增加（P<0.05）。并且对照组的小肠绒毛高度显著低于试验组1（P<0.05）。表明本发明的猪饲料添加剂能明显促进断奶仔猪的肠道发育。
表1不同试验处理对空肠绒毛高度、隐窝深度和绒毛高度与隐窝深度比值的影响
| 项目 | 对照组 | 试验组1 |
| 绒毛高度（μm） | 223b | 235a |
| 隐窝深度（μm） | 115 | 116 |
| 绒毛高度/隐窝深度 | 1.94b | 2.03a |
表2不同试验处理对小肠紧密连接蛋白关键基因的影响
| 项目 | 对照组 | 试验组1 |
| Caudin-1 | 1.00b | 1.45a |
| Occludin | 1.00b | 1.56a |
| ZO-1 | 1.00b | 1.67a |
与对照组相比，见表3，试验组1中小肠各种上皮细胞的数量显著增加，表现为空肠功能细胞标记基因Villin、Lyz、Muc2和ChgA的表达显著提高（P<0.05）。表明本发明的猪饲料添加剂能明显增加断奶仔猪的肠上皮各种功能细胞的数量。
表3不同试验处理对空肠功能细胞关键标记基因的影响
| 项目 | 对照组 | 试验组1 |
| Villin | 1.00b | 1.55a |
| Lyz | 1.00b | 1.75a |
| Muc2 | 1.00b | 1.64a |
| ChgA | 1.00b | 1.72a |
与对照组相比，见表4，试验组1中小肠隐窝干细胞的数量显著增加，表现为小肠干细胞标记基因Lgr5、Ascl2和Olfm4的表达显著提高（P<0.05）。表明本发明的猪饲料添加剂能明显增加断奶仔猪的小肠干细胞的数量。
表4 不同试验处理对空肠干细胞关键标记基因的影响
| 项目 | 对照组 | 试验组1 |
| Lgr5 | 1.00b | 1.59a |
| Ascl2 | 1.00b | 1.87a |
| Olfm4 | 1.00b | 1.83a |
饲喂断奶仔猪本实施例1中的试验组1的饲料后，可以增进仔猪肠道干细胞发育，可显著提高小肠干细胞和各种肠道功能细胞的数量，促进小肠的发育。
与对照组相比，见表5，试验组1中仔猪的腹泻率下降了28%。
表5 不同试验处理对空肠干细胞关键标记基因的影响
| 项目 | 对照组 | 试验组1 |
| 腹泻率（%） | 11.2 | 8.1 |
实施例2
选用24头平均体重约为5.8kg的21日龄（杜×长×大）断奶仔猪随机分为2个处理组，分别为：对照组、试验组2，每个处理组12头猪。
以上各个处理组的断奶仔猪饲喂的饲料分别如下：
对照组：常规猪日粮。
试验组2：向常规猪日粮中添加本发明的猪饲料添加剂，所述猪饲料添加剂由壶瓶碎米荠、裂壶藻粉、鹿衔草、珍珠菜按重量份比例1：0.1：1：0.5混合制成；将本发明的猪饲料添加剂与常规猪日粮混合均匀后制成本发明的猪饲料，将该猪饲料饲喂断奶仔猪，所述壶瓶碎米荠在常规猪日粮中的添加量为0.3%。
饲养试验持续21天。
饲喂试验结束后，见表6和表7，试验组2促进了断奶仔猪的肠道发育，表现为小肠绒毛高度、绒毛高度与隐窝深度比值和紧密连接蛋白表达增加（P<0.05）。并且对照组的小肠绒毛高度显著低于试验组2（P<0.05）。表明本发明的猪饲料添加剂能明显促进断奶仔猪的肠道发育。
表6不同试验处理对空肠绒毛高度、隐窝深度和绒毛高度与隐窝深度比值的影响
| 项目 | 对照组 | 试验组2 |
| 绒毛高度（μm） | 226b | 243a |
| 隐窝深度（μm） | 116b | 117a |
| 绒毛高度/隐窝深度 | 1.95b | 2.08a |
表7不同试验处理对小肠紧密连接蛋白关键基因的影响
| 项目 | 对照组 | 试验组2 |
| Caudin-1 | 1.00b | 1.57a |
| Occludin | 1.00b | 1.69a |
| ZO-1 | 1.00b | 1.83a |
与对照组相比，见表8，试验组2中小肠各种上皮细胞的数量显著增加，表现为空肠功能细胞标记基因Villin、Lyz、Muc2和ChgA的表达显著提高（P<0.05）。表明本发明的猪饲料添加剂能明显增加断奶仔猪的肠上皮各种功能细胞的数量。
表8不同试验处理对空肠功能细胞关键标记基因的影响
| 项目 | 对照组 | 试验组2 |
| Villin | 1.00b | 1.84a |
| Lyz | 1.00b | 2.03a |
| Muc2 | 1.00b | 1.94a |
| ChgA | 1.00b | 2.21a |
与对照组相比，见表9，试验组2中小肠隐窝干细胞的数量显著增加，表现为小肠干细胞标记基因Lgr5、Ascl2和Olfm4的表达显著提高（P<0.05）。表明本发明的猪饲料添加剂能明显增加断奶仔猪的小肠干细胞的数量。
表9不同试验处理对空肠干细胞关键标记基因的影响
| 项目 | 对照组 | 试验组2 |
| Lgr5 | 1.00b | 1.88a |
| Ascl2 | 1.00b | 2.51a |
| Olfm4 | 1.00b | 2.43a |
饲喂断奶仔猪本实施例2中的试验组2的饲料后，可以增进仔猪肠道干细胞发育，可显著提高小肠干细胞和各种肠道功能细胞的数量，促进小肠的发育。
与对照组相比，见表10，试验组2中仔猪的腹泻率下降了46%。
表10不同试验处理对空肠干细胞关键标记基因的影响
| 项目 | 对照组 | 试验组2 |
| 腹泻率（%） | 13.6 | 7.3 |
实施例3
选用24头平均体重约为5.8kg的21日龄（杜×长×大）断奶仔猪随机分为2个处理组，分别为：对照组、试验组3，每个处理组12头猪。
以上各个处理组的断奶仔猪饲喂的饲料分别如下：
对照组：常规猪日粮。
试验组3：向常规猪日粮中添加本发明的猪饲料添加剂，所述猪饲料添加剂由恩施碎米荠、裂壶藻粉、鹿衔草、珍珠菜按重量份比例1：5：0.05：0.01混合制成；将本发明的猪饲料添加剂与常规猪日粮混合均匀后制成本发明的猪饲料，将该猪饲料饲喂断奶仔猪，所述恩施碎米荠在常规猪日粮中的添加量为0.1%。
饲养试验持续21天。
饲喂试验结束后，见表11和表12，试验组3促进了断奶仔猪的肠道发育，表现为小肠绒毛高度、绒毛高度与隐窝深度比值和紧密连接蛋白表达增加（P<0.05）。并且对照组的小肠绒毛高度显著低于试验组3（P<0.05）。表明本发明的猪饲料添加剂能明显促进断奶仔猪的肠道发育。
表11不同试验处理对空肠绒毛高度、隐窝深度和绒毛高度与隐窝深度比值的影响
| 项目 | 对照组 | 试验组3 |
| 绒毛高度（μm） | 225b | 239a |
| 隐窝深度（μm） | 117 | 117 |
| 绒毛高度/隐窝深度 | 1.92b | 2.04a |
表12不同试验处理对小肠紧密连接蛋白关键基因的影响
| 项目 | 对照组 | 试验组3 |
| Caudin-1 | 1.00b | 1.54a |
| Occludin | 1.00b | 1.64a |
| ZO-1 | 1.00b | 1.80a |
与对照组相比，见表13，试验组3中小肠各种上皮细胞的数量显著增加，表现为空肠功能细胞标记基因Villin、Lyz、Muc2和ChgA的表达显著提高（P<0.05）。表明本发明的猪饲料添加剂能明显增加断奶仔猪的肠上皮各种功能细胞的数量。
表13不同试验处理对空肠功能细胞关键标记基因的影响
| 项目 | 对照组 | 试验组3 |
| Villin | 1.00b | 1.80a |
| Lyz | 1.00b | 1.99a |
| Muc2 | 1.00b | 1.87a |
| ChgA | 1.00b | 2.03a |
与对照组相比，见表14，试验组3中小肠隐窝干细胞的数量显著增加，表现为小肠干细胞标记基因Lgr5、Ascl2和Olfm4的表达显著提高（P<0.05）。表明本发明的猪饲料添加剂能明显增加断奶仔猪的小肠干细胞的数量。
表14不同试验处理对空肠干细胞关键标记基因的影响
| 项目 | 对照组 | 试验组3 |
| Lgr5 | 1.00b | 1.76a |
| Ascl2 | 1.00b | 2.04a |
| Olfm4 | 1.00b | 2.12a |
饲喂断奶仔猪本实施例3中的试验组3的饲料后，可以增进仔猪肠道干细胞发育，可显著提高小肠干细胞和各种肠道功能细胞的数量，促进小肠的发育。
与对照组相比，见表15，试验组3中仔猪的腹泻率下降了31%。
表15不同试验处理对空肠干细胞关键标记基因的影响
| 项目 | 对照组 | 试验组3 |
| 腹泻率（%） | 12.5 | 8.6 |
实施例4
选用24头平均体重约为5.8kg的21日龄（杜×长×大）断奶仔猪随机分为2个处理组，分别为：对照组、试验组4，每个处理组12头猪。
以上各个处理组的断奶仔猪饲喂的饲料分别如下：
对照组：常规猪日粮。
试验组4：向常规猪日粮中添加本发明的猪饲料添加剂，所述猪饲料添加剂由堇叶碎米荠、裂壶藻粉、鹿衔草、珍珠菜按重量份比例1：1：2：1混合制成；将本发明的猪饲料添加剂与常规猪日粮混合均匀后制成本发明的猪饲料，将该猪饲料饲喂断奶仔猪，所述堇叶碎米荠在常规猪日粮中的添加量为0.5%。
饲养试验持续21天。
饲喂试验结束后，见表16和表17，试验组4促进了断奶仔猪的肠道发育，表现为小肠绒毛高度、绒毛高度与隐窝深度比值和紧密连接蛋白表达增加（P<0.05）。并且对照组的小肠绒毛高度显著低于试验组4（P<0.05）。表明本发明的猪饲料添加剂能明显促进断奶仔猪的肠道发育。
表16不同试验处理对空肠绒毛高度、隐窝深度和绒毛高度与隐窝深度比值的影响
| 项目 | 对照组 | 试验组4 |
| 绒毛高度（μm） | 227b | 255a |
| 隐窝深度（μm） | 117 | 119 |
| 绒毛高度/隐窝深度 | 1.94b | 2.14a |
表17不同试验处理对小肠紧密连接蛋白关键基因的影响
| 项目 | 对照组 | 试验组4 |
| Caudin-1 | 1.00b | 1.78a |
| Occludin | 1.00b | 1.99a |
| ZO-1 | 1.00b | 2.21a |
与对照组相比，见表18，试验组4中小肠各种上皮细胞的数量显著增加，表现为空肠功能细胞标记基因Villin、Lyz、Muc2和ChgA的表达显著提高（P<0.05）。表明本发明的猪饲料添加剂能明显增加断奶仔猪的肠上皮各种功能细胞的数量。
表18不同试验处理对空肠功能细胞关键标记基因的影响
| 项目 | 对照组 | 试验组4 |
| Villin | 1.00b | 1.98a |
| Lyz | 1.00b | 2.45a |
| Muc2 | 1.00b | 2.33a |
| ChgA | 1.00b | 2.72a |
与对照组相比，见表19，试验组4中小肠隐窝干细胞的数量显著增加，表现为小肠干细胞标记基因Lgr5、Ascl2和Olfm4的表达显著提高（P<0.05）。表明本发明的猪饲料添加剂能明显增加断奶仔猪的小肠干细胞的数量。
表19不同试验处理对空肠干细胞关键标记基因的影响
| 项目 | 对照组 | 试验组4 |
| Lgr5 | 1.00b | 2.03a |
| Ascl2 | 1.00b | 2.89a |
| Olfm4 | 1.00b | 3.21a |
饲喂断奶仔猪本实施例4中的试验组4的饲料后，可以增进仔猪肠道干细胞发育，可显著提高小肠干细胞和各种肠道功能细胞的数量，促进小肠的发育。
与对照组相比，见表20，试验组4中仔猪的腹泻率下降了65%。
表20不同试验处理对空肠干细胞关键标记基因的影响
| 项目 | 对照组 | 试验组4 |
| 腹泻率（%） | 13.3 | 4.6 |
Claims (2)
1.一种猪饲料添加剂的应用，其特征在于，所述猪饲料添加剂在制备增进猪肠道干细胞发育调控剂中的应用；
所述猪饲料添加剂含有碎米荠、裂壶藻粉、鹿衔草、珍珠菜。
2.如权利要求1所述的猪饲料添加剂的应用，其特征在于，所述猪饲料添加剂中碎米荠、裂壶藻粉、鹿衔草、珍珠菜的重量份比例为1：（0.1-5）：（0.05-2）：（0.01-1）。
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